KR20090036758A - Composition for prevention and treatment of osteoporosis comprising silk peptide as an active ingredient - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 골다공증과 연관이 있는, 그중에서도 파골세포 분화 억제에 매우 유효한 실크 펩타이드를 활성성분으로 함유하는 골다공증 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for preventing and treating osteoporosis, which contains silk peptide as an active ingredient, which is highly effective for inhibiting osteoclast differentiation, which is associated with osteoporosis.
인간의 뼈는 골을 부수는 파골세포와 골을 이루는 조골세포로 주로 구성되어져 있고, 이 둘 성분 중 골을 부수는 파골세포의 힘이 조골세포보다 강할 때 골다공증의 현상이 나타난다. Human bones are mainly composed of osteoclasts that break bone and osteoblasts that make up bone. Among them, osteoporosis occurs when osteoclasts that break bone are stronger than osteoblasts.
이와 같은 골다공증은 인간이 나이를 먹어감에 따라 누구나 걸릴 수 있는 질환이며, 특히 폐경기 이후의 여성은 그 확률이 2배 이상 높아진다고 알려져 있으며, 그 원인으로는 무엇보다도 인체의 골격을 이루고 있는 뼈의 밀도가 낮아지기 때문인 것으로 알려져 있다. 인간의 뼈는 30∼35세를 전후하여, 1년에 약 1% 내외 의 뼈의 밀도(골 밀도)가 감소되는 것으로 보고되어지고 있다. 특히 폐경기 이후의 여성은 2∼3배의 몸속의 칼슘이 빠져 나가는데, 인체의 칼슘의 99%는 뼈 속에 저장되어지고 있고, 부족한 칼슘은 필요할 때마다 뼈속에서 빠져 나오는 구조적 현상을 유지하고 있다. 때문에 나이가 많아짐에 따른 칼슘 부족 현상을 만회하기 위하여 칼슘제제를 복용하거나, 폐경기 이후의 심한 경우는 여성호르몬인 에스트로겐을 주사요법으로 처방을 하여 부족분의 칼슘을 보충하고 있다. 그러나, 이러한 요법은 칼슘의 매우 낮은 흡수율 및 복부팽만감, 변비 등의 부작용을 동반하며, 여성호르몬인 에스트로겐의 주사요법은 부인병 관련 부작용을 동반하는 것으로 보고되어지고 있다.Osteoporosis is a disease that anyone can get as a person ages. Especially, postmenopausal women are known to be more than twice as likely, and most of all, the density of the bones that form the human skeleton. It is known that is lowered. Human bone has been reported to decrease the bone density (bone density) of about 1% per year around 30 to 35 years. In particular, postmenopausal women lose 2-3 times the calcium in the body, 99% of the body's calcium is stored in the bones, and calcium is insufficient to maintain the structural phenomenon of getting out of the bones whenever needed. Therefore, in order to make up for the calcium deficiency with age, or taking calcium preparations, or in severe cases after menopause, estrogen, a female hormone, is prescribed by injection therapy to supplement calcium deficiency. However, these therapies have side effects such as very low absorption rate of calcium, bloating, constipation, and injection therapy of female hormone estrogen has been reported to have gynecological side effects.
따라서, 이러한 칼슘의 무기질은 반드시 단백질 분해물인 펩타이드(Peptide)와 결합하여 킬레이트(Chelate)화 하는 것만이 체내 흡수가 가능하고, 체내에 흡수가 가능한 기능성 칼슘은 모두가 칼슘-펩타이드 형태인 칼모듈린(Calmodulin)구조로 되어 있어야 체내에서 수송, 저장 및 이용이 가능한 것으로 알려져 있다. Therefore, these minerals of calcium must be chelated by binding to peptides, which are protein degradants, so that they can be absorbed in the body, and functional calcium that can be absorbed in the body is all calcium-peptide-type calmodulin It is known to be able to be transported, stored and used in the body only by its structure.
때문에 이러한 문제점 등을 보완하기 위하여 천연물의 활성성분을 이용한 대체요법이 현실적으로 요구되어지고 있으며, 적정한 크기의 실크 펩타이드는 이러한 칼슘-펩타이드 형태를 띄어 체내 칼슘의 흡수를 돕고, 더 나아가 파골세포의 분화 억제에 도움을 줄 수 있을 천연물로서 대안되어질 수 있다.Therefore, in order to supplement these problems, alternative therapies using active ingredients of natural products are required in reality, and the proper size of silk peptide forms the calcium-peptide to help the absorption of calcium in the body and further suppress the differentiation of osteoclasts. Alternatives can be made to natural products that can help.
골다공증 특허와 관련하여, 2003년 7월 22일에 공개된 대한민국 특허출원 10-2003-7009671호 및 대한민국 특허출원 10-1998-0710194호 등 많은 골다공증 관련 특허등이 보고되어지고 있으나, 많은 내용들이 유전자공학적으로 파골세포형성 억제인자를 제조하는 방법 및 유전공학적으로 파골세포 형성억제인자에 결합하는 단백질을 유전자 공학적으로 제조하는 방법을 제공하고 있다. 그러나 이러한 단백질들은 그 효능을 차제하더라도, 유전자 공학이라는 다른 기술을 사용하여야 하는 점 때문에 보편화 되지 못하고 또한 다른 사용상의 제약을 받을 수 있다.With regard to osteoporosis patents, many osteoporosis related patents, such as Korean Patent Application No. 10-2003-7009671 and Korean Patent Application No. 10-1998-0710194, published on July 22, 2003, have been reported. The present invention provides a method for producing an osteoclastogenesis inhibitory factor and a method for genetically engineering a protein that binds to an osteoclastogenesis inhibitory factor genetically. However, even if these proteins are excluded from their efficacy, they may not be universalized due to the use of other techniques such as genetic engineering and may be subject to other usage restrictions.
따라서, 보다 편하고 직접 파골세포 형성을 억제할 수 있는 천연 단백질을 찾는 것이 지속적으로 요구되어지고 있다.Therefore, there is a continuous need to find natural proteins that are more comfortable and can directly inhibit osteoclast formation.
본 발명은 파골세포의 분화 억제에 유효하여, 골다공증의 예방 및 치료에 효과를 가지는 골다공증 예방 및 치료용 조성물을 제공함에 목적이 있다.The present invention is effective to inhibit the differentiation of osteoclasts, and an object of the present invention is to provide a composition for preventing and treating osteoporosis having an effect on the prevention and treatment of osteoporosis.
상기한 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 실크 펩타이드를 활성성분으로 함유하는 골다공증 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.The present invention to achieve the above object provides a composition for preventing and treating osteoporosis containing silk peptide as an active ingredient.
상기 본 발명에 따른 골다공증 예방 및 치료용 조성물은 파골세포의 분화 억제 활성을 가진다.The composition for preventing and treating osteoporosis according to the present invention has an activity for inhibiting the differentiation of osteoclasts.
상기 본 발명의 조성물에서 실크 펩타이드는 실크의 산 또는 효소의 가수분해물이 바람직하다.In the composition of the present invention, the silk peptide is preferably an acid of the silk or a hydrolyzate of the enzyme.
상기 본 발명의 조성물에서 실크 펩타이드는 세리신을 함유하는 누에고치의 분해물을 포함한다.Silk peptides in the composition of the present invention comprises a degradation product of cocoon containing sericin.
상기 본 발명의 조성물에서 실크 펩타이드의 아미노산 조성은 글라이신, 알라닌 및 세린의 총 함량이 80중량% 이상인 것이 바람직하다.In the composition of the present invention, the amino acid composition of the silk peptide is preferably 80% by weight or more of the total content of glycine, alanine and serine.
상기 본 발명의 조성물에서 실크 펩타이드의 아미노산 조성은 글라이신 40∼45 중량%, 알라닌 20∼30중량%, 및 세린 10∼20 중량%인 것이 바람직하다. The amino acid composition of the silk peptide in the composition of the present invention is preferably 40 to 45% by weight glycine, 20 to 30% by weight alanine, and 10 to 20% by weight serine.
상기 본 발명의 조성물에서 실크 펩타이드는 중량평균분자량이 100∼3,500 인 것이 바람직하다.In the composition of the present invention, the silk peptide preferably has a weight average molecular weight of 100 to 3,500.
또한, 본 발명은 실크 펩타이드를 활성성분으로 함유하는 파골세포 분화 억제제를 제공한다.The present invention also provides an osteoclast differentiation inhibitor containing a silk peptide as an active ingredient.
상기 본 발명에 따른 골다공증 예방 및 치료용 조성물은 의료용도의 예방 및 치료제는 물론이거니와 골다공증의 예방 및 치료 기능을 가지는 각종 식품조성물, 예를 들어 건강보조식품과 같은, 을 포함한다.The composition for preventing and treating osteoporosis according to the present invention includes various food compositions, such as health supplements, which have a function of preventing and treating osteoporosis as well as prophylactic and therapeutic agents for medical use.
본 발명에 의한 조성물은 파골세포의 분화 억제에 유효하여, 골다공증의 예방 및 치료에 효과가 있다.The composition according to the present invention is effective in inhibiting the differentiation of osteoclasts, and is effective in the prevention and treatment of osteoporosis.
상기한 바와 같이 본 발명에 따른 골다공증 예방 및 치료용 조성물은 실크 펩타이드를 활성성분으로 하여 인체에 적용시 파골세포 형성을 억제하여 골다공증을 예방 및 치료할 수 있다. As described above, the composition for preventing and treating osteoporosis according to the present invention can prevent and treat osteoporosis by inhibiting osteoclast formation when applied to the human body using silk peptide as an active ingredient.
본 발명에 사용되는 실크 펩타이드는 식용이 가능한 단백질로서 사용되어 오던 종래의 어떠한 단백질 분해물도 포함될 수 있다. 예를 들어, 상기 실크 펩타이드는 누에고치로부터 이용되어질 수 있으며, 누에고치로부터 세리신을 포함하는 상태의 것 또는 섬유화할 수 없는 절각견 등이 이용되어질 수도 있다.Silk peptides used in the present invention may include any conventional protein degradation products that have been used as edible proteins. For example, the silk peptide may be used from the cocoon, and a silkworm containing a sericin or a non-fibrillated dog may be used.
바람직하게는 실크 피브로인 유래의 것이 사용된다. 특별히 한정되지 않는 취지에서 실크 피브로인의 산, 염기 또는 효소 가수분해물, 실크 세리신의 산, 염 기 또는 효소 가수분해물 등을 포함한다. 이들 활성성분의 첨가량은 성분에 따라 차이가 있으며, 예를 들어 성분에 따라 0.001∼100.0 중량％의 범위 내에서 적의 첨가되어질 수도 있으나 반드시 이에 한정되는 것은 아니다.Preferably, those derived from silk fibroin are used. Acid, base or enzymatic hydrolyzate of silk fibroin, acid, base or enzymatic hydrolyzate of silk sericin, and the like, are not particularly limited. Addition amount of these active ingredients is different depending on the component, for example, depending on the component may be appropriately added within the range of 0.001 to 100.0% by weight, but is not necessarily limited thereto.
실크 피브로인 가수분해물의 아미노산 조성으로서는 글라이신이 40∼45 중량%, 바람직하게는 40∼45 중량%, 알라닌이 20∼30중량%, 바람직하게는 25∼27 중량% 및 세린 10∼20 중량%, 바람직하게는 11∼18 중량%를 첨가하는 것이 좋다. 또 이들 3가지의 아미노산 조성의 합은 80중량% 이상이 바람직하다. 또 이들의 중량평균분자량은 특히 제한되지 않는 의미에서 100∼3,500 정도, 바람직하게는 200∼1,500의 범위의 것이 좋다. The amino acid composition of the silk fibroin hydrolyzate is 40 to 45% by weight of glycine, preferably 40 to 45% by weight, 20 to 30% by weight of alanine, preferably 25 to 27% by weight and 10 to 20% by weight of serine, preferably Preferably, 11 to 18% by weight is added. In addition, the sum of these three amino acid compositions is preferably 80% by weight or more. Moreover, these weight average molecular weights are about 100-3,500, Preferably it is the range of 200-1,500 in the meaning which is not restrict | limited.
실크 그 자체는 세린 및 타이로신 등이 함유되어 있어서 그 자체적으로도 피부 재생 효과가 있음이 알려져 있다 (대한민국 특허제 0366390호, 제 0315168호 등 참조). 이와 같은 실크의 피부 재생 효과로부터 약효성분의 생체내 침투증진 효과 이외에도 조골세포의 형성촉진에 대한 부가적 개선효과를 기대할 수 있다. 또한, 적정 크기의 분자량 실크 펩타이드를 이용하므로 복용하였을 경우 체내의 흡수력을 극대화할 수도 있다. Silk itself contains serine, tyrosine, and the like, which is known to have skin regeneration effect on its own (see Korean Patent No. 0366390, 0315168, etc.). From the skin regeneration effect of the silk, in addition to the effect of promoting the penetration of the active ingredient in vivo can be expected to further improve the effect of promoting the formation of osteoblasts. In addition, the molecular weight silk peptide of the appropriate size, so when taken, can also maximize the absorption of the body.
본 발명에 따른 실크 펩타이드는 하기 과정을 통해 얻어질 수 있다. 원료인 섬유화할 수 없는 절각견을 준비하여 수세한 후 산 또는 알칼리 가수분해법, 또는 효소가수분해법이 이용될 수 있으며, 바람직하게는 효소 가수분해법이 사용된다. 가수분해 결과 얻어진 펩타이드들은 대략 중성영역으로 중화되고, 중화액을 여과한 후 감압 농축하는 과정을 거친다. 본 발명에 따른 바람직한 실시 예에서는 상기 얻 어진 농축액을 수용액 그대로 또는 고온감압 분사 혹은 동결 건조하는 방법으로 분말화한 것을 이용할 수 있다.Silk peptides according to the invention can be obtained through the following process. After preparing and washing the raw fibers that cannot be fibrillated as raw materials, an acid or alkali hydrolysis method or an enzyme hydrolysis method may be used, and an enzyme hydrolysis method is preferably used. Peptides obtained as a result of hydrolysis are neutralized to approximately the neutral region, and the neutralized solution is filtered and concentrated under reduced pressure. In a preferred embodiment according to the present invention it can be used to powder the obtained concentrate as an aqueous solution or a method of high pressure reduction injection or freeze drying.
또 상기 본 발명에 따른 실크 펩타이드 조성물을 함유하는 프리용액(pre-solution)을 제조할 수 있으며, 이 프리용액의 형태로서 골다공증의 치료 혹은 예방용 조성물 등에 첨가되어질 수도 있다.In addition, a pre-solution containing the silk peptide composition according to the present invention may be prepared, and may be added to a composition for treating or preventing osteoporosis in the form of the pre-solution.
본 발명에 따른 실크 펩타이드를 함유하는 조성물은 파골세포의 형성을 억제하기 위해 사용되어질 수 있는 어떠한 약효성분을 함유한 일반적인 골다공증 증상 치료제제 및 예방제제 등과도 혼합될 수 있고, 그 제형으로는 액제, 드링크제, 캔디, 시럽, 타블렛, 츄잉검, 그래뉼 형태의 분말 등의 형태일 수 있으며, 이들 제품은 상법에 따라 제조할 수 있다. 이들 약효성분은 골다공증의 효과에 특히, 골다공증과 밀접한 관련이 있는 파골세포 형성억제와 더 나아가서는 조골세포 형성촉진 및 처치를 위한 각종 제제에 첨가될 수 있는 성분들을 포함한다. The composition containing the silk peptide according to the present invention may be mixed with general osteoporosis symptomatic and prophylactic agents containing any active ingredient that may be used to inhibit the formation of osteoclasts, and the formulation may include liquid, It may be in the form of a drink, candy, syrup, tablet, chewing gum, granule-type powder, and the like, and these products may be prepared according to a commercial method. These active ingredients include ingredients that can be added to the effects of osteoporosis, in particular osteoclast formation inhibition closely related to osteoporosis and further to various agents for promoting and treating osteoblast formation.
이하 본 발명의 내용을 실시 예에 의해 보다 상세하게 설명하기로 한다. 다만 이들 실시 예는 본 발명의 내용을 이해하기 위해 제시되는 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 이들 실시 예에 한정되어지는 것으로 해석되어져서는 아니 된다.Hereinafter, the content of the present invention will be described in more detail with reference to Examples. However, these examples are only presented to understand the content of the present invention, and the scope of the present invention should not be construed as being limited to these embodiments.
<실시예 1> 파골세포 억제에 유효한 조성물의 제조Example 1 Preparation of Compositions Effective for Inhibiting Osteoclasts
파골세포 억제에 유효한 실크 펩타이드 조성물의 제조는 실크를 용해하는 과정으로부터 개시된다. 섬유화할 수 없는 절각견 100g을 준비하였다. 이 절각견에 대하여 순수한 증류수 500㎖를 첨가하여 100℃에서 40분간 끓였다. 이 작업을 2번 반복한 후 3회 정도 수세를 할 경우, 세리신이 용해되어져 나간 순수한 실크 피브로인 섬유를 회수하였다. 처음무게에 대한 나중무게의 비로 환산할 경우, 23중량%가 손실되었음을 나타내어 순수한 실크 피브로인임을 확인할 수 있다. 이 순수 피브로인 섬유 100g을 0.1N 염산수용액 240㎖를 첨가하여 초고압 반응기를 이용하여 200℃, 1시간 처리하여 완전하게 가수분해하였다. 가수분해한 실크 수용액에 0.5M NaOH 용액으로 수소이온 농도 pH 7.0 내외로 중화시켰다. 그 후 발생되어진 염(NaCl)을 제거하기 위하여 전기탈염장치를 이용하여 염을 완전히 제거하였다. 이때의 수용액은 옅은 갈색을 띄고 있으며, 글라이신, 알라닌 및 세린이 다량으로 함유되어 있어 중화과정에서 발생할 수 있는 염화나트륨이 약간 가미된 단 맛을 띄게 됨을 확인할 수 있었다. 이것을 정밀 부직포를 이용하여 여과한 후 농축 감압 혹은 동결건조장치를 이용하여 농축 및 분말화 하였다[샘플-1].Preparation of silk peptide compositions effective for osteoclast inhibition begins with the process of dissolving silk. 100 g of the incapacitated dogs which cannot be fibrillated were prepared. 500 ml of pure distilled water was added to this keratin dog, and it boiled at 100 degreeC for 40 minutes. When this operation was repeated twice and washed three times, pure silk fibroin fibers from which sericin was dissolved were recovered. When converted to the ratio of the initial weight to the initial weight, it indicates that 23% by weight was lost, it can be confirmed that the pure silk fibroin. 100 g of this pure fibroin fiber was added to 240 ml of 0.1 N aqueous hydrochloric acid solution, and then subjected to 200 ° C. for 1 hour using an ultrahigh pressure reactor to completely hydrolyze. The hydrolyzed silk aqueous solution was neutralized with a 0.5 M NaOH solution to pH 7.0. In order to remove the salt (NaCl) generated afterwards, the salt was completely removed using an electric desalination apparatus. At this time, the aqueous solution was light brown, and glycine, alanine, and serine were contained in a large amount. Sodium chloride, which may occur during the neutralization process, was found to have a slightly sweet taste. This was filtered using a precision nonwoven fabric and concentrated and powdered using a concentrated reduced pressure or lyophilizer [Sample-1].
같은 샘플인 순수 피브로인 섬유 100g을 증류수 7000㎖에 넣어 단백질 분해효소(프로테아제)를 5 중량% 첨가한 후, 1시간 동안 50℃에서 질소가스 조절을 수행한 후 50∼55℃의, pH 7.0 조건에서 고압진공상태를 유지한 후, 초고압 반응기를 이용하여 50℃, 120시간 처리하여 효소 가수분해하였다. 그 후 정밀부직포 등으로 잔유물을 제거한 후 효소가수분해 수용액을 얻었다. 이 용액을 마찬가지로 농축 감압 혹은 동결건조장치를 이용하여 농축 및 분말화하였다[샘플-2]. 100 g of pure fibroin fiber, which is the same sample, was added to 7000 ml of distilled water, and 5% by weight of protease (protease) was added, followed by nitrogen gas control at 50 ° C. for 1 hour, and then at pH 7.0 at 50 to 55 ° C. After maintaining the high-pressure vacuum state, the enzyme was hydrolyzed by treatment at 50 ° C. for 120 hours using an ultrahigh pressure reactor. Thereafter, the residue was removed with a precision nonwoven fabric or the like to obtain an aqueous solution of enzyme hydrolysis. This solution was likewise concentrated and powdered using a concentrated reduced pressure or lyophilizer [Sample-2].
분자량이 높은 순수 실크피브로인을 얻기 위하여, 누에 중부 실샘으로부터 실크 피브로인을 얻었다. 가잠(B.mori) 5령 6∼7일의 숙잠을 해부한 후 중부 실샘 을 미리 준비한 0℃의 얼음물 채반에 주의 깊게 걸어 둘 경우, 중부 실샘에 모여 있던 많은 양의 초순수 피브로인 액상을 얻을 수 있다. 이 액상의 순수 피브로인 용액은 그대로 희석한 후 동결건조장치를 이용하여 분말을 얻었다[샘플-3].In order to obtain pure silk fibroin with high molecular weight, silk fibroin was obtained from the silkworm central silk gland. Silkworm (B.mori) 5 commands a dissecting sukjam of 6-7 days and then carefully walked two cases the central silsaem wicker tray of ice water prepared in advance 0 ℃, it is possible to obtain a large amount of ultrapure liquid fibroin were gathered in the central silsaem . This liquid pure fibroin solution was diluted as it was and powder was obtained using a lyophilizer [Sample-3].
이들의 각각 얻어진 샘플을 이용하여 조성 아미노산 분석을 전용 자동아미노산 분석기기를 이용하여 전 아미노산 분석을 실시하였다. Using each of these samples, the composition amino acid analysis was carried out using a dedicated automatic amino acid analyzer for all amino acid analysis.
<표 1> 골다공증 예방 및 치료용 실크 펩타이드의 아미노산 조성(중량%)Table 1 Amino Acid Composition (wt%) of Silk Peptides for Osteoporosis Prevention and Treatment
상기 표 1에서 보는 바와 같이 특히 샘플 1 및 샘플-2의 경우, 글라이신이 42∼44 중량% 내외, 알라닌이 26 중량% 내외, 세린이 11∼18 중량% 내외로 3가지의 아미노산 조성물 함량이 공히 80중량%를 넘고 있음을 나타내고 있다. As shown in Table 1, in particular, in the case of
또한 얻어진 시료 3점을 기준으로 젤투과크로마토그래피(Gel Permeation Chromatography, GPC) 장치를 이용하여 중량평균분자량(Mw)을 측정하였다.In addition, the weight average molecular weight (Mw) was measured using a gel permeation chromatography (GPC) apparatus on the basis of the three samples obtained.
도 1에서 보는 바와 같이 샘플-1의 GPC분자량은 Mw 240, 샘플-2는 Mw 1,050, 샘플-3은 Mw 108,100의 분자량 분포를 나타내고 있음을 알 수 있다. 특히 샘플-2의 경우, 적정 분자량이 1,000 부근임을 나타내고 있다.As shown in FIG. 1, the GPC molecular weight of Sample-1 is Mw 240, Sample-2 is Mw 1,050, and Sample-3 is Mw 108,100. Especially in the case of sample-2, it shows that the appropriate molecular weight is around 1,000.
<실시예 2> 파골세포 분화억제 효과Example 2 Osteoclast Differentiation Inhibitory Effect
위의 실시예 1에서 제조한 각각의 샘플 3종을 바탕으로 파골세포의 분화를 억제하는지 여부를 알아보았다. 세포는 Raw 264.7 마우스 마크로파지 셀(파골세포 전구세포)을 온도 37℃, CO2 5% 조건에서 배양한 후, 파골세포로의 분화 유도를 위해 유도체인 RANKL를 30ng/ml농도로 처리하였다. 정상세포는 당연히 파골세포로 분화됨을 나타낼 것이고, 실크 펩타이드를 처리하였을 경우, 파골세포로의 분화가 억제된다면, 분명히 파골세포로 분화되는 것을 막아준다고 할 수 있을 것이다.On the basis of each of the three samples prepared in Example 1 it was examined whether the differentiation of osteoclasts. The cells were incubated with raw 264.7 mouse macrophage cells (osteoblast progenitor cells) at 37 ° C. and 5% CO 2 , and then treated with RANKL, a derivative, at a concentration of 30 ng / ml to induce differentiation into osteoclasts. Normal cells will obviously differentiate into osteoclasts and, if silk peptides are treated, if differentiation into osteoclasts is clearly inhibited, they will be able to prevent differentiation into osteoclasts.
위에서 제조한 분자량 및 아미노산 조성을 달리한 실크 펩타이드를 파골세포에 처리하였을 때의 세포 사진을 도 2에 나타내었다. Figure 2 shows a cell photograph when the silk peptides of different molecular weight and amino acid composition prepared above were treated to osteoclasts.
도 2에서 보는 바와 같이 샘플-1의 중량평균분자량 Mw 240, 특히 샘플-2의 경우는 중량평균분자량 Mw 1,050 대에서 파골세포의 분화 억제에 확실한 효과를 보이는 것을 나타내고 있다.As shown in FIG. 2, the weight average molecular weight Mw 240 of the sample-1, particularly the sample-2, showed a definite effect on the inhibition of osteoclast differentiation at a weight average molecular weight Mw of 1,050.
따라서 본 발명에 의한 파골세포 분화억제에 효과가 있는 특정 분자량 대 및 실크 펩타이드를 확인할 수 있었다. 따라서, 본 발명에 의하면 골다공증의 치료 및 예방에 유효한 조성물을 제조할 수 있음은 물론, 금후 다른 골다공증 제제 등과의 혼합물 등으로 산업화가 가능하다.Therefore, it was possible to identify specific molecular weight bands and silk peptides that are effective in inhibiting osteoclast differentiation according to the present invention. Therefore, according to the present invention, it is possible to prepare a composition effective for the treatment and prevention of osteoporosis, as well as to industrialize the mixture with other osteoporosis agents and the like in the future.
상술한 바와 같이, 본 발명의 바람직한 실시예를 참조하여 설명하였지만 해당 기술 분야의 숙련된 당업자라면 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.As described above, although described with reference to a preferred embodiment of the present invention, those skilled in the art will be variously modified and modified within the scope of the present invention without departing from the spirit and scope of the invention described in the claims below. It will be appreciated that it can be changed.
도 1은 본 발명에 따른 실크 펩타이드의 GPC 분자량을 측정한 결과이다.1 is a result of measuring the GPC molecular weight of the silk peptide according to the present invention.
도 2는 본 발명에 따라 제조된 몇 가지 크기가 다른 실크 펩타이드가 처리된 파골세포의 사진을 나타낸다.Figure 2 shows a picture of the osteoclasts treated with several different sized silk peptides prepared according to the present invention.
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