KR20080092385A

KR20080092385A - 신규한 피리딘 유도체

Info

Publication number: KR20080092385A
Application number: KR1020087018084A
Authority: KR
Inventors: 마틴 볼리; 데이비드 레흐만; 보리스 매티스; 클라우스 무엘레르; 올리버 네이레르; 비트 스테이네르; 조르그 벨케르
Original assignee: 액테리온 파마슈티칼 리미티드
Priority date: 2006-01-24
Filing date: 2007-01-23
Publication date: 2008-10-15
Also published as: ATE447568T1; CN101370805A; RU2008134423A; WO2007086001A2; PL1979345T3; IL192948A0; EP1979345A2; US20120195930A1; DE602007003074D1; WO2007086001A3; US20090005421A1; US8178562B2; ZA200807274B; US8697732B2; ES2335242T3; JP2009524603A; EP1979345B1; BRPI0706725A2; JP5063615B2; NO20083630L

Abstract

본 발명은 신규한 피리딘 유도체, 이들의 제조 및 제약학적 활성 화합물로서 이들의 용도에 관계한다. 상기 화합물은 특히, 면역억제제(immunosuppressive agent)로서 기능한다.

피리딘 유도체

Description

신규한 피리딘 유도체{NOVEL PYRIDINE DERIVATIVES}

본 발명은 화학식(formula) (I)의 S1P1/EDG1 수용체 작동제 및 제약학적 조성물의 제조에서 활성 성분으로서 이들의 용도에 관계한다. 본 발명은 또한, 이들 화합물의 제조 방법; 화학식 (I)의 화합물을 함유하는 제약학적 조성물; 단독으로 또는 다른 활성 화합물이나 치료제와 공동으로, 혈관 기능을 개선하는 화합물과 면역조절제로서 이들의 용도를 비롯한 관련 측면에 관계한다.

인간 면역계는 감염이나 질병을 유발하는 외래 미생물과 물질로부터 신체를 보호하도록 설계된다. 복합적 조절 기전은 면역 반응이 숙주 자체가 아닌 침입 물질이나 생물체를 표적하도록 담보한다. 일부 사례에서, 이들 조절 기전은 통제되지 않으면 자가면역 반응이 발생할 수 있다. 통제되지 않은 염증 반응의 결과는 심각한 장기, 세포, 조직 또는 관절 손상이다. 현재의 치료에서는 통상적으로 전체 면역계가 억제되고, 감염에 대한 신체의 반응 능력 역시 심각하게 약화된다. 이런 분류의 전형적인 약제는 아자티오프린(azathioprine), 클로람부실(chlorambucil), 사이클로포스파마이드(cyclophosphamide), 사이클로스포린(cyclosporin), 또는 메토트렉세이트(methotrexate)이다. 염증을 감소시키고 면역반응을 억제하는 코르티코스테로이드(corticosteroid)는 치료에 장기간 사용되는 경우에 심각한 부작용을 유 발할 수 있다. 비스테로이드성 소염제(NSAID)는 통증과 염증을 감소시킬 수 있긴 하지만 상당한 부작용을 나타낸다. 대체 치료제는 사이토킨 신호전달을 활성화시키거나 차단하는 약제이다.

면역 반응을 약화시키지 않고 부작용이 적으면서 면역조절 특성을 보유하는 경구 활성 화합물은 통제되지 않은 염증 질환의 현재 치료제를 현저하게 개선할 것이다.

장기 이식 분야에서, 숙주 면역 반응은 장기 거부반응을 예방하기 위하여 억제되어야 한다. 이식 장기 수용자는 면역억제제를 복용함에도 일부 거부반응을 경험할 수 있다. 거부반응은 이식후 첫 수주일 이내에 가장 빈번하게 나타나지만, 이식후 수개월 또는 수년이 지난 시점에도 나타날 수 있다. 부작용을 최소화하면서 거부반응으로부터 최대 보호를 제공하기 위하여 최대 3가지 내지 4가지 약제의 조합이 통상적으로 사용된다. 이식된 장기의 거부반응을 치료하기 위하여 현재 사용되고 있는 표준 약제는 T-형이나 B-형 백혈구 세포의 활성화에서 별개의 세포내 경로를 간섭한다. 이들 약제의 실례는 사이토킨 방출이나 신호전달을 간섭하는 사이클로스포린(cyclosporin), 다실리주맙(daclizumab), 바실릭시맙(basiliximab), 에베로리무스(everolimus), 또는 FK506; 뉴클레오티드 합성을 저해하는 아자티오프린(azathioprine) 또는 레플루노마이드(leflunomide); 또는 백혈구 분화의 저해물질인 15-디옥시스페르구알린(15-deoxyspergualin)이다.

이들 치료제의 유익한 효과는 이들의 폭넓은 면역억제 효과에 기인한다; 하지만, 이들 약제가 유도하는 전체적인 면역억제는 감염과 악성 종양에 대한 면역계 의 방어를 약화시킨다. 더 나아가, 표준 면역억제제는 대부분 높은 용량으로 사용되기 때문에, 장기 손상을 유발하거나 가속화시킬 수 있다.

본 발명은 G 단백질-결합된 수용체 S1P1/EDG1에 대한 작동제로서 기능하고, 순환하고 침윤하는 T-와 B-림프구의 성숙, 기억 또는 확장에 영향을 주지 않으면서 이들의 숫자를 감소시킴으로써 달성되는 강력하고 장기적인 면역억제 효과를 보유하는 신규한 화학식 (I) 화합물을 제시한다. S1P1/EDG1 활성화와 연관된 개선된 내피세포층 기능의 관찰과 공동으로, S1P1/EDG1 작동효과(agonism)의 결과로서 순환 T-/B-림프구의 감소로 인하여, 이들 화합물은 통제되지 않은 염증 질환을 치료하고 혈관 기능성을 개선하는데 유효하다.

본 발명의 화합물은 단독으로, 또는 T-세포 활성화를 저해하는 표준 약제와 공동으로 사용되어, 표준 면역억제제에 비하여 감염에 대하여 감소된 경향을 나타내는 새로운 면역억제제를 제공할 수 있다. 더 나아가, 본 발명의 화합물은 감소된 용량의 전통적인 면역억제제와 병용되어, 높은 용량의 표준 면역억제제와 연관된 최종 장기 손상을 감소시키면서 효과적인 면역억제 활성을 제공할 수 있다. S1P1/EDG1 활성화와 연관된 개선된 내피세포층 기능의 관찰은 혈관 기능을 개선하는 이들 화합물의 추가적인 이점을 제공한다.

인간 S1P1/EDG1 수용체에 대한 뉴클레오티드 서열과 아미노산 서열은 당분야에 공지되어 있고 예로써, Hla, T., and Maciag, T. J. Biol Chem. 265(1990), 9308-9313; WO91/15583(1991년 10월 17일 공개); WO99/46277(1999년 9월 16일 공개)에서 보고되었다. 화학식 (I) 화합물의 잠재력과 효능은 각각, EC₅₀ 수치를 결정하는 GTPγS 검사를 이용하고, 경구 투여후 쥐에서 순환 림프구를 측정함으로써 평가된다(실시예 참조).

본 명세서에 이용된 일반적인 용어는 달리 명시하지 않는 경우에, 가급적 아래의 의미를 갖는다.

화합물, 염, 제약학적 조성물, 질환 등에 복수 형태가 이용되는 경우에, 이는 단일 화합물, 염 등을 또한 의미하도록 의도된다.

본 명세서에서 화학식 (I) 화합물에 대한 언급은 편의적으로, 화학식 (I) 화합물의 염(특히, 제약학적으로 허용되는 염) 역시 언급하는 것으로 간주된다.

염-형성 기(salt-forming group)는 염기성 또는 산성 특성을 갖는 기(group) 또는 라디칼(radical)이다. 적어도 하나의 염기성 기 또는 적어도 하나의 염기성 라디칼, 예를 들면, 아미노, 펩티드 단일결합을 형성하지 않는 이차 아미노 기 또는 피리딜 라디칼을 보유하는 화합물은 예로써, 무기산과 산 부가염(acid addition salt)을 형성한다. 여러 개의 염기성 기가 존재하면, 모노- 또는 폴리-산 부가염이 형성된다.

산성 기, 예를 들면, 카르복시 기 또는 페놀성 하이드록시 기를 보유하는 화합물은 금속 염 또는 암모늄 염, 예를 들면, 나트륨, 칼륨, 마그네슘 또는 칼슘 염과 같은 알칼리 금속(alkali metal) 염 또는 알칼리 토류 금속 염(alkaline earth metal salt); 또는 암모니아 또는 적절한 유기 아민, 예를 들면, TEA(트리에틸아민) 또는 트리-(2-하이드록시에틸)-아민과 같은 3가 모노아민, 또는 N-에틸-피페리딘 또는 N,N'-디메틸피페라진과 같은 헤테로환 염기와의 암모늄 염을 형성한다. 염의 혼합물 역시 가능하다.

산성 기와 염기성 기를 모두 보유하는 화합물은 내부 염(internal salt)을 형성할 수 있다.

중간물질로서 더욱 사용되는 화합물을 비롯한 본 발명의 화합물의 분리 또는 정제를 위하여, 제약학적으로 허용되지 않는 염, 예를 들면, 피크르산염(picrate)이 사용될 수도 있다. 하지만, 치료 목적에는 제약학적으로 허용되는 비-독성 염만이 사용되고, 따라서 이들 염이 선호된다.

제약학적으로 허용되는 염에는 살아있는 생명체에 무해한 염화수소산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산, 설파민산, 인산, 질산, 아인산, 아질산, 시트르산, 포름산, 아세트산, 옥살산, 말레산, 락트산, 타르타르산, 푸마르산, 벤조산, 만델산, 신나민산, 파모익산, 스테아르산, 글루탐산, 아스파르트산, 메탄설폰산, 에탄디설폰산, p-톨루엔설폰산, 살리실산, 숙신산, TFA(트리플루오로아세트산) 등과 같은 무기산 또는 유기산과의 염, 또는 화학식 (I) 화합물이 본질적으로 산성인 경우에, 알칼리 또는 알칼리 토금속 염기, 예를 들면, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화칼슘 등과 같은 무기성 염기와의 염을 포함한다. 제약학적으로 허용되는 염의 다른 실례는 "Salt selection for basic drugs", Int. J. Pharm. (1986), 33, 201-217을 참고할 수 있다.

화학식 (I) 화합물의 비대칭 탄소 원자는 (R) 또는 (S) 형태로 존재할 수 있다. 이중결합 또는 고리에 위치하는 치환체는 시스-(= Z-) 또는 트랜스-(= E-) 형태로 존재할 수 있다. 따라서 화학식 (I) 화합물은 이성체의 혼합물, 또는 바람직하게는 순수한 이성체로 존재할 수 있다. 이성체 혼합물은 공지된 방법, 예를 들면 칼럼 크로마토그래피, 박막 크로마토그래피, 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 또는 결정화에 의해 분리될 수 있다.

i) 본 발명은 화학식 (I)의 신규한 피리딘 화합물 또는 이런 화합물의 염에 관계한다:

A는 *-CO-CH=CH-, *-CO-CH₂CH₂-,

이고,

여기서, 별표는 화학식 (I)의 B 기에 연결된 결합을 지시하고;

B는

또는

이고;

R ¹ 은 수소, 메틸, 에틸 또는 염소이고;

R ² 는 메틸, 에틸, n-프로필 또는 염소이고;

R ³ 과 R ⁴ 는 메틸이고; 또는

R ³ 과 R ⁴ 는 에틸이고; 또는

R ³ 과 R ⁴ 는 그들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 사이클로펜틸 고리를 형성하고;

R ⁵ 는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 또는 트리플루오르메틸이고;

R ⁶ 은 메틸 또는 에틸이다.

ii) 본 발명의 특정 구체예는 A가 *-CO-CH₂-CH₂-이고, 여기서 별표가 화학식 (I)의 B 기에 연결된 결합을 지시하는 구체예 i)에 따른 피리딘 유도체에 관계한다.

iii) 본 발명의 다른 특정 구체예는 A가 *-CO-CH=CH-이고, 여기서 별표가 화학식 (I)의 B 기에 연결된 결합을 지시하는 구체예 i)에 따른 피리딘 유도체에 관계한다.

iv) 본 발명의 다른 특정 구체예는 A가

이고, 여기서 별표가 화학식 (I)의 B 기에 연결된 결합을 지시하는 구체예 i)에 따른 피리딘 유도체에 관계한다.

v) 본 발명의 바람직한 구체예는 A가

인 구체예 i)에 따른 피리딘 유도체에 관계한다.

vi) 본 발명의 바람직한 구체예는 A가

vii) 본 발명의 다른 바람직한 구체예는 R ¹ 과 R ² 가 메틸 기인 구체예 i) 내지 vi)중 어느 하나에 따른 피리딘 유도체에 관계한다.

viii) 본 발명의 다른 바람직한 구체예는 R ¹ 이 메틸 기이고 R ² 가 에틸 기인 구체예 i) 내지 vi)중 어느 하나에 따른 피리딘 유도체에 관계한다.

ix) 본 발명의 다른 특정 구체예는 B가

이고, 여기서 R ³ , R ⁴ 와 R ⁵ 가 구체예 i)의 화학식 (I)에서 정의된 바와 동일한 구체예 i) 내지 viii)중 어느 하나에 따른 피리딘 유도체에 관계한다.

x) 본 발명의 다른 바람직한 구체예는 B가

이고, 여기서 R ³ 과 R ⁴ 가 메틸이고, R ⁵ 가 메틸 또는 에틸인 구체예 i) 내지 viii)중 어느 하나에 따른 피리딘 유도체에 관계한다.

xi) 본 발명의 다른 특정 구체예는 B가

이고, 여기서 R ⁶ 이 구체예 i)의 화학식 (I)에서 정의된 바와 동일한 구체예 i) 내지 viii)중 어느 하나에 따른 피리딘 유도체에 관계한다.

xii) 본 발명의 다른 바람직한 구체예는 B가

이고, 여기서 R ⁶ 이 메틸인 구체예 i) 내지 viii)중 어느 하나에 따른 피리딘 유도체에 관계한다.

xiii) 본 발명의 특히 바람직한 구체예는 A가 *-CO-CH=CH-, *-CO-CH₂CH₂-,

또는

이고, 여기서 별표가 화학식 (I)의 B 기에 연결된 결합을 지시하고;

R ¹ 은 메틸, 에틸 또는 염소이고;

R ² 는 메틸 또는 에틸이고;

R ³ 과 R ⁴ 는 메틸이고; 또는

R ³ 과 R ⁴ 는 에틸이고;

R ⁵ 와 R ⁶ 은 메틸 또는 에틸인 구체예 i)에 따른 피리딘 유도체에 관계한다.

xiv) 본 발명의 다른 특히 바람직한 구체예는 A가 *-CO-CH=CH-, *-CO-CH₂CH₂-,

, 또는

R ¹ 은 메틸, 에틸 또는 염소이고;

R ² 는 메틸 또는 에틸이고;

R ³ 과 R ⁴ 는 메틸이고; 또는

R ³ 과 R ⁴ 는 에틸이고;

xv) 화학식 (I)에 따른 특히 바람직한 피리딘 유도체는 아래에서 선택된다:

3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-1-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-프로페논,

1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-프로페논,

3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-1-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-프로판-1-원,

1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-프로판-1-원,

2-에틸-6-메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘,

2,6-디에틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘,

2-클로로-6-메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘,

2,6-디메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘,

2-에틸-4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-6-메틸-피리딘,

4-[5-(5,5-디에틸-3-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)- [1,3,4]옥사디아졸-2-일]-2-에틸-6-메틸-피리딘,

4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-2,6-디메틸-피리딘,

2,6-디메틸-4-[5-(3,5,5-트리에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘,

2-클로로-4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-6-메틸-피리딘, 또는

이들 화합물의 염.

xvi) 화학식 (I)에 따른 다른 특히 바람직한 피리딘 유도체는 아래에서 선택된다:

2-에틸-6-메틸-4-[5-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,2,4]옥사디아졸-3-일]-피리딘,

2-에틸-4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,2,4]옥사디아졸-3-일]-6-메틸-피리딘, 또는

이들 화합물의 염.

화학식 (I) 화합물 및 이들의 제약학적으로 허용되는 염은 예로써, 위관(enteral), 비경구(parental) 또는 국소(topical) 투여를 위한 제약학적 조성물 형태의 약물로 사용될 수 있다. 가령, 이들은 경구, 예를 들면, 정제, 코팅된 정제, 당의정, 경성과 연성 젤라틴 캡슐, 용액, 에멀젼 또는 현탁액의 형태; 직장, 예를 들면, 좌약의 형태; 비경구, 예를 들면, 주사 용액 또는 주입 용액의 형태; 또는 국소, 예를 들면, 연고, 크림 또는 오일의 형태로 투여될 수 있다.

이런 제약학적 조성물의 생산은 다른 치료 물질과 선택적으로 조합되는 상기한 화학식 (I) 화합물과 이들의 제약학적으로 허용되는 염을 적절한 비-독성 불활성 치료적합성 고형 또는 액상 담체 물질 및 원하는 경우 통상적인 제약학적 어쥬번트와 함께 생약 투약 형태로 통합함으로써 당업자에게 익숙한 방식으로 달성될 수 있다(참조: Mark Gibson, Editor, Pharmaceutical Preformulation and Formulation, IHS Health Group, Englewood, CO, USA, 2001; Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, Philadelphia College of Pharmacy and Science).

화학식 (I) 화합물을 함유하는 제약학적 조성물은 활성화된 면역계와 연관된 질환이나 질병의 예방 및/또는 치료에 유용하다.

이들 질병이나 질환은 이식된 장기, 조직 또는 세포의 거부반응; 이식에 의해 유발된 이식편-숙주 질환; 류머티스 관절염, 전신성 홍반성 낭창, 항인지질항체 증후군(antiphspholipid syndrome), 하시모토 갑상선염, 림프구성 갑상선염, 다발성 경화증, 중증근무력증, I형 당뇨병, 포도막염, 상공막염, 공막염, 카와사키병, 포도막-망막염(uveo-retinitis), 후포도막염, 베체트병과 연관된 포도막염, 포도막수막염 증후군, 알레르기성 뇌척수염, 만성 동종이식편 혈관병증을 비롯한 자가면역 증후군; 류머티스성 열병과 감염후 사구체신염을 비롯한 감염후 자가면역 질환; 염증성과 과다증식성 피부 질환; 건선; 건선성 관절염; 아토피성 피부염; 근질환; 근염; 골수염; 접촉 피부염; 습진성 피부염; 지루성 피부염; 편평 태선; 천포창; 수포성 유천포창; 수포성 표피박리증; 두드러기; 맥관부종; 맥관염; 홍반; 피부 호산구 증가증; 여드름; 공피증; 원형 탈모증; 각결막염; 봄철 결막염; 각막염; 헤르페스성 각막염; 각막 상피 변성; 각막백반(corneal leukoma); 안구 천포창; 무렌 궤양; 궤양성 각막염; 공막염; 그레이브스 안병증(Graves' ophthalmopathy); 보그트-고야나기-하라다(Vogt-Koyanagi-Harada) 증후군; 유육종증; 화분 알레르기; 가역성 폐쇄 기도 질환; 기관지성 천식; 알레르기성 천식; 내재성 천식; 외인성 천식; 먼지 천식; 만성이나 고질적 천식; 후기 천식과 기도 과다반응증; 급성 세기관지염; 기관지염; 자궁내막증; 고환염; 위궤양; 허혈성 장 질환; 염증성 장 질환; 괴사성 소장결장염; 열화상(thermal burn)과 연관된 장 병소; 소아 지방병증 질환; 직장염; 호산구성 위장염; 비반세포증; 크론병; 궤양성 대장염; 허혈성 질환과 혈전증에 의해 유발된 혈관 손상; 죽상경화증; 지방성 심장; 심근염; 심근 경색; 대동맥염 증후군; 바이러스 질환에 기인한 악액질; 혈관 혈전증; 편두통; 비염; 습진; 장 신염; IgA-유도된 신증; 굿파스튜어 증후군; 용혈-요독증 증후군; 당뇨성 신증; 사구체경화증; 사구체신염; 뇨세관사이질콩팥염; 간질성 방광염; 다발성 근염; 길랑 바레 증후군; 메니에르병; 다발성신경염; 복수신경염; 척수염; 단발성신경염; 신경근증; 갑상선기능항진증; 바세도우병; 갑상선 중독증; 적혈구계 무형성증(pure red cell aplasia); 재생불량성 빈혈증; 형성부전성 빈혈증; 특발성 혈소판감소성 자반증; 자가면역 용혈 빈혈증; 자가면역성 혈소판감소증; 무과립구증; 악성 빈혈증; 거대적모구성 빈혈증; 적혈구무형성증; 골다공증; 폐섬유증; 특발성 장 폐렴; 피부근염; 심상성 백반(leukoderma vulgaris); 심상성 어린선(ichthyosis vulgaris); 광알레르기성 과민증; 피부 T 세포 림프종; 결절성 다발동맥염; 헌팅턴무도병; 시덴함 무도병; 심근 장애; 심근증; 경피증; 웨그너 육아종; 쇼그렌 증후군; 비만; 호산구성 근막염(eosinophilic fascitis); 잇몸, 치주 조직, 치조골, 치아 골질의 병소; 남성형 탈모증 또는 노인성 탈모증; 근 위축증; 농피증; 세자리 증후군; 뇌하수체염; 만성 부신피질 기능부전; 애디슨병; 보관직후에 발생하는 장기의 허혈-재관류 손상; 내독소 쇽; 위막성 장염; 약물이나 방사선에 의해 유발된 장염; 허혈성 급성 신부전; 만성 신부전; 폐암; 임파계 기원의 악성 종양; 급성이나 만성 림프구성 백혈병; 림프종; 건선; 폐 기종; 백내장; 철침착증; 망막색소상피 변성증; 노인성 황반변성; 유리체 상처; 각막 알칼리 화상(corneal alkali burn); 피부염 홍반; 수포성 피부염; 시멘트 피부염; 치은염; 치주염; 패혈증; 췌장염; 말초 동맥 질환; 발암; 고형암 종양; 암의 전이; 고산병; 자가면역 간염; 원발성 담즙성 경변증; 경화성 담도염; 부분 간 절제; 급성 간괴사; 경변증; 알코올성 경변증; 간부전; 전격성 간부전; 후기-발병 간부전; "만성의 급성화" 간부전으로 구성되는 군에서 선택된다.

적절하게는, 화학식 (I) 화합물로 치료 또는 예방되는 질환은 이식된 장기, 예를 들면, 신장, 간, 심장, 폐, 췌장, 각막, 피부의 거부반응; 줄기 세포 이식에 의해 유발된 이식편-대-숙주 질환; 류머티스 관절염, 다발성 경화증, 건선, 건선성 관절염을 비롯한 자가면역 증후군; 크론병과 궤양성 대장염을 비롯한 염증성 장 질환; 하시토모 갑상선염, 포도막-망막염과 같은 갑상선염; 비염, 결막염, 피부염과 같은 아토피성 질환; 천식; I형 당뇨병; 류머티스성 열병과 감염후 사구체신염을 비롯한 감염후 자가면역 질환; 고형 암과 종양 전이로 구성되는 군에서 선택된다.

특히 적절하게는, 화학식 (I) 화합물로 치료 및/또는 예방되는 질환이나 질병은 신장, 간, 심장과 폐에서 선택되는 이식된 장기의 거부반응(rejection); 줄기 세포 이식(stem cell transplantation)에 의해 유발된 이식편-대-숙주 질환(graft-versus-host disease); 류머티스성 관절염(rheumatoid arthritis), 다발성 경화증(multiple sclerosis), 건선(psoriasis), 건선성 관절염(psoriatic arthritis), 크론병(Crohn's disease), 하시모토 갑상선염(Hashimoto's thyroiditis)에서 선택되는 자가면역 증후군(autoimmune syndrome); 아토피성 피부염(atopic dermatitis)으로 구성되는 군에서 선택된다.

본 발명은 또한, 본 명세서에 언급된 질환이나 질병의 예방 또는 치료를 위한 방법에 관계하는데, 상기 방법은 화학식 (I) 화합물의 제약학적 유효량을 개체에 투여하는 단계를 포함한다.

더 나아가, 화학식 (I) 화합물은 또한, 본 명세서에 언급된 질환과 질병의 예방 및/또는 치료를 위한 한가지이상의 면역조절제(immunomodulating agent)와 조합으로 유용하다. 본 발명의 바람직한 구체예에 따라, 상기 작용제는 면역억제제, 코르티코스테로이드, NSAID, 세포독성제(cytotoxic drug), 부착 분자(adhesion molecule) 저해물질, 사이토킨, 사이토킨 저해물질, 사이토킨 수용체 길항물질과 재조합 사이토킨 수용체로 구성되는 군에서 선택된다.

본 발명은 또한, 본 명세서에 언급된 질환과 질병의 예방 및/또는 치료를 위하여, 선택적으로, 한가지이상의 면역조절제와의 조합으로, 제약학적 조성물의 제 조를 위한 화학식 (I) 화합물의 용도에 관계한다.

본 발명은 또한, 생체내에서 이와 같은 화학식 (I) 화합물로 전환되는, 화학식 (I) 화합물의 프로-드러그(pro-drug)에 관계한다. 이런 이유로, 화학식 (I)에 대한 언급은 편의적으로, 화학식 (I) 화합물의 상응하는 프로드러그 역시 언급하는 것으로 간주된다.

화학식 (I) 화합물은 아래에 기재된 방법, 실시예에 기재된 방법, 또는 유사한 방법으로 제조될 수 있다. 최적 반응 조건은 사용된 특정 반응물 또는 용매에 따라 달라지지만, 이들 조건은 통상적인 최적화 절차로 당업자에 의해 결정될 수 있다.

본 발명의 화학식 (I) 화합물은 아래에 개설된 전반적인 반응 순서에 따라 제조될 수 있다. 화학식 (I) 화합물을 결과하는 가능한 합성 방법 중에서 일부만 기술된다. 일반 기 A와 B의 일부 사례는 반응식 1 내지 7에 예시된 집합에 적합하지 않고, 따라서 보호기(protecting group, PG)의 이용을 필요로 한다. 적절한 보호기는 당업자에게 공지되어 있는데, 여기에는 예로써, 알코올을 보호하는 벤질 또는 트리알킬실릴 기, 디올(diol)을 보호하는 케탈(ketal) 등이 포함된다. 이들 보호기는 표준 방법에 따라 이용될 수 있다(가령, T. W. Greene, P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd Edition, Wiley New York, 1991; P. J. Kocienski, Protecting Groups, Thieme Stuttgart, 1994). 이러한 논의의 목적으로, 이들 보호기는 필요한 경우에 존재하는 것으로 추정될 것이다.

A가 -CO-CH=CH-인 경우에, 화학식 (I) 화합물은 하기 반응식 1에 도시된 바와 같이, KOtBu, NaOMe, NaOEt, NaOH, KOH, NaHMDS, LDA 또는 LiHMDS와 같은 염기의 존재에서 구조식(structure) 2의 화합물을 구조식 3의 화합물과 반응시킴으로써 제조된다. A가 -CO-CH₂-CH₂-인 화학식 (I) 화합물은 EtOH, MeOH, THF 등과 같은 용매 내에서 Pd/C, Pt/C, PtO₂등과 같은 촉매의 존재에서, A가 -CO-CH=CH-인 화학식 (I) 화합물을 수소와 반응시킴으로써 제조된다. 구조식 2의 화합물은 -20℃ 내지 50℃의 온도에서 Et₂O, THF, 디옥산과 같은 용매 내에서 구조식 1의 화합물을 MeLi로 처리함으로써 제조된다.

반응식 1: A가 CO-CH=CH- 또는 -CO-CH₂-CH₂-인 화학식 (I) 화합물의 합성

([1,3,4]옥사디아졸-2-일)-피리딘 유도체인 화학식 (I) 화합물은 하기 반응식 2에 도시된 바와 같이, 산(가령, TFA, 아세트산, HCl 등), 염기(가령, NaH, NaOAc, Na₂CO₃, K₂CO₃, DBU, TEA 등), 테트라알킬암모늄(tetraalkylammonium) 염, 또는 수분 제거제(water removing agent)(가령, 버제스 시약, SOCl₂, POCl₃, PCl₅, P₄O₁₀, 분자체, BF₃ 등)와 같은 보조제의 존재 또는 부재에서, 실온에서, 상승된 온도에서 또는 마이크로파 조사(microwave irradiation)를 이용하여 THF, 디옥산, 자일렌, 톨루엔, 벤젠, 피리딘, DMF, 디클로로메탄 등과 같은 용매 내에서 구조식 4의 화합물을 반응시킴으로써 제조된다(참고문헌: 가령, C.T. Brain, J.M. Paul, Y Loong, P.J. Oakley, Tetrahedron Lett. 40 (1999) 3275-3278; F. Bentiss, M. Lagrenㅹe, D. Barbry, Synthetic Comm. 31 (2001) 935-938; V.K. Tandon, R.B. Chhor, Synthetic Comm. 31 (2001) 1727-1732). 구조식 4의 화합물은 TBTU, DCC, EDC/HOBt, HBTU, CDI, PyBOP 등과 같은 하나이상의 결합제(coupling agent)의 존재 또는 부재에서 및 TEA, DIPEA, NaH, K₂CO₃등과 같은 염기의 존재 또는 부재에서, DMF, THF, DCM 등과 같은 용매 내에서 구조식 1의 화합물을 구조식 5의 화합물과 반응시킴으로써 제조된다(참고문헌: 가령, A. Hamze, J.-F. Hernandez, P. Fulcrand, J. Martinez, J. Org. Chem. 68 (2003) 7316-7321). 대안으로, 구조식 4의 화합물은 앞서 기술된 방법을 이용하여, 구조식 6의 화합물을 구조식 7의 화합물과 반응시킴으로써 제조된다.

반응식 2: ([1,3,4]옥사디아졸-2-일)-피리딘 유도체인 화학식 (I) 화합물의 합성

([1,2,4]옥사디아졸릴)-피리딘 유도체인 화학식 (I) 화합물은 반응식 3에 도시된 바와 같이, 각각, 산(가령, TFA, 아세트산, HCl 등), 염기(가령, NaH, NaOAc, Na₂CO₃, K₂CO₃, DBU, TEA 등), 테트라알킬암모늄(tetraalkylammonium) 염, 또는 수분 제거제(water removing agent)(가령, 염화옥살릴, 카르복실산 무수물, POCl₃, PCl₅, P₄O₁₀, 분자체 등)와 같은 보조제의 존재 또는 부재에서, 실온에서, 상승된 온도에서 또는 마이크로파 조사(microwave irradiation)를 이용하여 자일렌, 톨루엔, 벤젠, 피리딘, DMF, DCM 등과 같은 용매 내에서 구조식 8 또는 구조식 9의 화합물을 반응시킴으로써 제조된다(참고문헌: 가령, A. R. Gangloff, J. Litvak, E. J. Shelton, D. Sperandio, V. R. Wang, K. D. Rice, Tetrahedron Lett. 42 (2001), 1441-1443; T. Suzuki, K. Iwaoka, N. Imanishi, Y. Nagakura, K. Miyta, H. Nakahara, M. Ohta, T. Mase, Chem. Pharm. Bull. 47 (1999), 120-122; R. F. Poulain, A. L. Tartar, B. P. Dㅹprez, Tetrahedron Lett. 42 (2001), 1495-1498; R. M. Srivastava, F. J. S. Oliveira, D. S. Machado, R. M. Souto-Maior, Synthetic Commun. 29 (1999), 1437-1450; E. O. John, J. M. Shreeve, Inorganic Chemistry 27 (1988), 3100-3104; B. Kaboudin,K. Navaee, Heterocycles 60 (2003), 2287-2292). 구조식 8의 화합물은 앞서 기술된 바와 같이 TBTU와 같은 결합제를 이용하여 구조식 1의 화합물을 구조식 10의 화합물과 반응시킴으로써 제조된다. 구조식 9의 화합물은 앞서 기술된 바와 같이 TBTU와 같은 결합제를 이용하여 구조식 11의 화합물을 구조식 7의 화합물과 반응시킴으로써 제조된다.

반응식 3: ([1,2,4]옥사디아졸릴)-피리딘 유도체인 화학식 (I) 화합물의 합성

상기 반응식 1-3에 이용된 티오펜 중간물질은 하기 반응식 4에 도시된 바와 같이 합성된다. 구조식 6의 화합물은 EDC/HOBt, TBTU, SOCl₂ 등과 같은 산 활성화제(acid activating agent) 및 하이드라진으로 처리함으로써 구조식 1의 티오펜 카르복실산으로부터 제조된다. 하이드라진은 하이드라진카르복실산 tert.-부틸 에스터 또는 하이드라진카르복실산 벤질 에스터의 형태로 보호될 수 있는 것으로 가정되는데, 이러한 보호기는 두 번째 단계에서 당분야에 널리 공지된 방법으로 제거된다. 구조식 11의 화합물은 Na₂CO₃, K₂CO₃, TEA 등과 같은 염기의 존재 또는 부재에서, MeOH, EtOH, 피리딘 등과 같은 용매 내에서 구조식 12의 시아노티오펜을 하이드록실아민 또는 이의 한 가지 염과 반응시킴으로써 제조된다(참고문헌: 가령, T. Suzuki, K. Iwaoka, N. Imanishi, Y. Nagakura, K. Miyta, H. Nakahara, M. Ohta, T. Mase, Chem. Pharm. Bull. 47 (1999), 120-122; J. Cui, D. Crich, D. Wink, M. Lam, A. L. Rheingold, D. A. Case, W. T. Fu, Y. Zhou, M. Rao, A. J. Olson, M. E. Johnson, Bioorg. Med. Chem. 11 (2003), 3379-3392; R. Miller, F. Lang, Z. J. Song, D. Zewge, WO 2004/035538 (Merck & Co., Inc., USA); B. Kaboudin, K. Navaee, Heterocycles 60 (2003), 2287-2292). 구조식 12의 시아노티오펜은 구조식 1의 티오펜 카르복실산으로부터 3-단계 순서로 제조될 수 있다. 첫 번째 단계에서, EDC/HOBt, TBTU, SOCl₂ 등과 같은 산 활성화제 및 암모니아로 구조식 1의 티오펜 카르복실산을 순차적으로 처리함으로써 티오펜 카르보사이클릭 산(carbocylic acid) 아마이드가 획득된다. 구조식 12의 시아노티오펜은 DCM과 같은 용매 내에서, TFA 무수물과 피리딘과 같은 작용제를 이용한 탈수(dehydration)로 티오펜 카르보사이클릭산 아마이드로부터 제조될 수 있다.

반응식 4: 티오펜 중간물질의 합성

구조식 1의 티오펜 카르복실산은 하기 반응식 5에 도시된 바와 같이 합성된다. 구조식 1의 화합물은 물, EtOH, MeOH, THF 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 내에서, aq. NaOH, aq. LiOH, aq. KOH 등과 같은 수성 염기, 또는 aq. HCl, TFA 등과 같은 산으로 구조식 13의 화합물을 반응시킴으로써 제조된다. 구조식 13의 화합물은 실온에서 또는 바람직하게는, 상승된 온도에서, MeOH, EtOH, THF, DMF 등 또는 이들의 혼합물과 같은 용매 내에서 NaOMe, NaOEt, KOtBu, DBU 등과 같은 비-수성 염기로 구조식 14의 화합물 또는 구조식 15의 화합물을 처리함으로써 제조된다. 구조식 14의 화합물은 THF, 디옥산, DMF, EtOH, MeOH 등 또는 이들의 혼합물 내에서 NaH, NaOEt, NaOMe, KOtBu 등과 같은 염기의 존재에서 2-메르캅토아세트산 에스터로 구조식 16의 화합물을 처리함으로써 제조된다. 유사하게, 구조식 15의 화합물은 앞서 기술된 바와 같이, 2-메르캅토아세트산 에스터로 구조식 19의 화합물을 처 리함으로써 제조된다. 이에 더하여, 구조식 1의 화합물은 또한, 상기 반응 순서에 따라, 구조식 16의 화합물 또는 구조식 19의 화합물을 출발 물질로 하여 원-팟(one-pot) 3단계 절차에서 제조될 수도 있다. 구조식 12의 니트릴은 S-아세틸메르캅토아세토니트릴로부터 in situ 제조된 2-메르캅토아세토니트릴로 2-메르캅토아세트산 에스터를 치환함으로써 구조식 16의 화합물 또는 구조식 19의 화합물로부터 유사한 방법으로 제조된다(참고문헌: 가령, W.-Y. Ren, K.V.B. Rao, R.S.Klein, J. Heterocyclic Chem. 23 (1986), 1757-1763).

반응식 5: 구조식 1의 화합물의 합성

구조식 16의 화합물은 DCM, CHCl₃, THF 등과 같은 용매 내에서 구조식 17의 화합물을 옥살릴클로라이드(oxalylchloride)와 같은 염소화제(chlorinating agent) 와 반응시킴으로써 제조된다(참고문헌: 가령, R. E. Mewshaw, Richard E. Tetrahedron Lett. 30 (1989), 3753-3756; F. A. Lakhvich, T. S. Khlebnikova, A. A. Akhrem, Zhurnal Organicheskoi Khimii 25 (1989), 2541-2549). 구조식 17의 화합물은 0 내지 60℃의 온도에서 THF, 톨루엔, EtOH 등과 같은 용매 내에서 KOtBu, NaOMe, NaH, LDA 등과 같은 염기의 존재에서 에틸 또는 메틸 포름산염, 메틸 또는 에틸 아세트산염, 메틸 또는 에틸 프로피온산염, 클로로포름산염, 아세틸 염화물 등과 같은 적절한 아실화제(acylating agent)로 구조식 18의 화합물을 아실화시킴으로써 제조된다(참고문헌: 가령, Ch. Kashima, S. Shibata, H. Yokoyama, T. Nishio, Journal of Heterocyclic Chemistry 40 (2003), 773-782; I. Yavari, Issa, M. Bayat, Tetrahedron 59 (2003), 2001-2005; J. P. Konopelski, J. Lin, P. J. Wenzel, H. Deng, G. I. Elliott, B. S. Gerstenberger, Organic Letters 4 (2002) 4121-4124; C. Wiles, P. Watts, S. J. Haswell, E. Pombo-Villar, Tetrahedron Letters 43 (2002), 2945-2948; R. Faure, A. Frideling, J.-P. Galy, I. Alkorta, J. Elguero, Heterocycles 57 (2002) 307-316; via imine: M. Hammadi, D. Villemin, Synthetic Communications 26 (1996) 2901-2904). 구조식 18의 화합물은 상업적으로 가용하거나, 또는 당업자에게 공지된 절차에 따라 제조된다(참고문헌: 가령, M. E. Flaugh, T. A. Crowell, D. S. Farlow, Journal of Organic Chemistry 45 (1980) 5399-5400; A. M. Badger, M. J. Dimartino, C. K. Mirabelli, E. N. Cheeseman, J. W. Dorman, D. H. Picker, D. A. Schwartz, Eur. Pat. Appl. EP 310321 A2 (1989); N. R. Natale, R. O. Hutchins, Organic Preparations and Procedures International 9 (1977), 103-108; L. M. Rice, B. S. Sheth, J. W. Wheeler, Journal of Heterocyclic Chemistry 10 (1973) 731-735).

구조식 19의 화합물은 기존 문헌(W. Cocker, D. H. Grayson, Tetrahedron Lett. 51 (1969), 4451-4452; S. Lochynski, B. Jarosz, M. Walkowicz, K. Piatkowski, J. Prakt. Chem. (Leipzig) 330 (1988), 284-288; M. Walkowicz, H. Kuczynsky, C. Walkowicz, Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum 41 (1967), 927-937; H. Kuczynski, M. Walkowicz, C. Walkowicz, K. Nowak, I. Z. Siemion, Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum, 38 (1964), 1625-1633; A.V. Pol, V. G. Naik, H. R. Sonawane, Ind. J. Chem. Sect. B, 19 (1980) 603-604; S. A. Popov, A. Yu. Denisov, Yu. V. Gatilov, I. Yu. Bagryanskaya and A. V. Tkachev, Tetrahedron Asymmetry 5 (1994), 479-489; S. A. Popov, A. V. Tkachev, Synthetic Commun. 31 (2001), 233-243)에 제시된 절차에 따라 (+)-3-카렌(carene)을 출발 물질로 하여 제조된다.

구조식 1의 화합물은 기존 문헌(가령, S. A. Popov, A. Yu. Denisov, Yu. V. Gatilov, I. Yu. Bagryanskaya and A. V. Tkachev, Tetrahedron Asymmetry 5 (1994), 479-489; S. A. Popov, A. V. Tkachev, Synthetic Commun. 31 (2001), 233-243)에 제시된 절차에 따라, 상업적으로 가용한 (+)-3-카렌을 출발 물질로 하여 제조된 구조식 19의 순수한 (1S, 5R)-입체이성체(2-[1-클로로-에틸리덴]-6,6-디메틸-비사이클로[3.1.0]헥산-3-원의 (1S,5R)-이성체)를 출발 물질로 함으로써 제조 된다.

반응식 6: R⁵가 메틸, 에틸, 프로필, 또는 이소프로필 기인 구조식 1의 화합물의 합성

R⁵가 메틸, 에틸, 프로필, 또는 이소프로필 기인 구조식 1의 화합물은 또한, 반응식 6에 따라, R⁵가 수소인 구조식 1의 화합물을 THF, Et₂O 등과 같은 용매 내에서 n-BuLi, tert.-BuLi, LDA와 같은 과량의 강염기(strong base) 및 적절한 알킬화제(alkylating agent)(가령, 메틸-, 에틸-, 프로필 요오드)와 순차적으로 반응시킴으로써 제조될 수도 있다(참고문헌: 가령, W.-D. Liu, C.-C. Chi, I.-F. Pai, A.-T. Wu, W.-S. Chung, Journal of Organic Chemistry, 67 (2002) 9267-9275; D. W. Knight, A. P. Nott, Tetrahedron Letters 21 (1980) 5051-5054; R. Raap, Canadian Journal of Chemistry 49 (1971) 2155-2157).

상기 반응식 1-3에 이용되는 피리딘 중간물질은 하기 반응식 7에 도시된 바 와 같이 합성된다. 구조식 7의 이소니코틴산은 상업적으로 가용하거나, 또는 당분야에 널리 공지된 방법으로 제조된다. 구조식 7의 산은 DCM 또는 THF와 같은 비양성자성(aprotic) 용매 내에서 낮은 온도에서 산을 DIBAlH와 같은 환원제(reducing agent)와 반응시키는 것과 같은 당분야에 널리 공지된 방법으로 구조식 3의 피리딘-4-카브알데하이드로 환원될 수 있다. 대안으로, 구조식 3의 피리딘-4-카브알데하이드는 널리 공지된 반응물, 예를 들면, THF에서 BH₃, 또는 DCM 또는 THF와 같은 비양성자성 용매에서 LiAlH₄에 의한 구조식 7의 산의 4-하이드록시메틸-피리딘으로의 환원에 의해 2-단계 순서로 획득될 수 있다. 4-하이드록시메틸-피리딘은 DCM 또는 CHCl₃과 같은 용매 내에서 MnO₂로 처리, 스원 산화(Swern oxidation) 또는 데스-마틴 산화(Dess-Martin oxidation)와 같은 당분야에 널리 공지된 방법에 의해 구조식 3의 피리딘-4-카브알데하이드로 산화될 수 있다.

반응식 7: 피리딘 중간물질의 합성

구조식 5의 이소니코틴산 하이드라지드는 상기 반응식 4에서 기술된 바와 유사한 방법에 의한 하이드라진 처리에 의해 구조식 3의 이소니코틴산으로부터 제조된다. 하이드라진은 하이드라진카르복실산 tert.-부틸 에스터 또는 하이드라진카르복실산 벤질 에스터의 형태로 보호될 수 있는 것으로 가정되는데, 이러한 보호기는 두 번째 단계에서 당분야에 널리 공지된 방법으로 제거된다. 구조식 9의 하이드록시아미딘은 상기 반응식 4에 기술된 바와 유사한 방법에 따라, 구조식 20의 이소니코티노니트릴(isonicotinonitrile)을 하이드록실아민 또는 이의 한 가지 염과 반응시킴으로써 제조된다. 구조식 20의 이소니코티노니트릴은 상업적으로 가용하거나, 또는 당분야에 널리 공지되어 있다. 이들은 DCM과 같은 용매 내에서 TFA 무수물과 피리딘과 같은 작용제를 이용한 이소니코틴산 아마이드의 탈수와 같은 당분야에 널리 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 이소니코틴산 아마이드는 구조식 7의 이소니코틴산을 EDC/HOBt, TBTU, SOCl₂ 등과 같은 산 활성화제로 처리하고, 이후 암모니아로 처리함으로써 획득된다.

아래의 실시예는 본 발명을 예시하지만, 이의 범위를 한정하지 않는다.

모든 온도는 ℃로 표시된다. 화합물은 ¹H-NMR(300 MHz) 또는 ¹³C-NMR(75 MHz)(Varian Oxford; 화학적 변화(chemical shift)는 사용된 용매와 관련하여 ppm 으로 표시된다; 다중도: s=단일선, d=이중선, t=삼중선, p=오중선, hex=육중선, hept=칠중선, m=복수선, br=넓음(broad), 결합 상수는 Hz로 표시된다); LC-MS(HP 1100 Binary Pump와 DAD가 구비된 Finnigan Navigator, 칼럼: 4.6x50 ㎜, Zorbax SB-AQ, 5 ㎛, 120Å; 농도구배: 물에서 5-95% 아세토니트릴, 1분, 0.04% 트리플루오르아세트산 포함, 유속: 4.5 ㎖/min), t_R은 분(min.)으로 표시된다); TLC(Merck로부터 TLC(Thin Layer Chromatography)-플레이트, 실리카겔 60 F₂₅₄); 또는 융점으로 특성화된다. 화합물은 예비 HPLC(칼럼: X-terra RP18, 50x19 ㎜, 5㎛, 농도구배: 0.5 % 포름산을 함유하는 물에서 10-95% 아세토니트릴), 또는 MPLC(Labomatic MD-80-100 펌프, 선형 UVIS-201 검출기, 칼럼: 350x18 ㎜, Labogel-RP-18-5s-100, 농도구배: 물에서 10% 메탄올 내지 100% 메탄올)로 정제된다.

약어

abs. 절대

aq. 수성

atm 대기

Bp 끓는점

BSA 소 혈청 알부민

BuLi 부틸리튬

Burgess reagent (메톡시카르보닐설파모일)트리에틸암모늄 수산화물

CC 칼럼 크로마토그래피

CDI 1,1'-카르보닐디이미다졸

CHO 중국 햄스터 난소

d 일자

DBU 1,8-디아자비사이클로[5.4.0]운덱-7-엔

DCC 디사이클로헥실 카르보디이미드

DCM 디클로로메탄

DIBAlH 디이소부틸알루미늄수소화물

DIPEA 디이소프로필-에틸아민

DMF 디메틸포름아마이드

DMSO 디메틸설폭시드

EA 에틸 아세트산염

EDC N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸-카르보디이미드

eq. 당량

Et 에틸

Et₂O 디에틸 에테르

EtOH 에탄올

FC 플래시 크로마토그래피

Fe(acac)₃ 철(III)-아세틸아세토네이트

GDP 구아노신 이인산염

GTP 구아노신 삼인산염

h 시간

HBTU 2-(1H-벤조트리아졸-1-일)-1,2,3,3-테트라메틸-우라늄-헥사플루오로인산염

HEPES N-(2-하이드록시에틸)-피페라진-N'-2-에탄설폰산

HOBt 1-하이드록시벤조트리아졸

HPLC 고성능 액체 크로마토그래피

HV 높은 진공 조건

KOtBu 칼륨-tert.-부톡시드

LC-MS 액체 크로마토그래피 - 질량 분석법

LDA 리튬디이소프로필아마이드

LiHMDS 리튬헥사메틸디실라지드

Me 메틸

MeLi 메틸리튬

MeOH 메탄올

min 분

MPLC 중간 압력 액체 크로마토그래피

NaHMDS 나트륨헥사메틸디실라지드

NaOAc 나트륨 아세트산염

NaOEt 나트륨 에탄올레이트

NaOMe 나트륨 메탄올레이트

NMP N-메틸-2-피롤리돈

Pd/C 활성화된 탄소 상에서 팔라듐

Pt/C 활성화된 탄소 상에서 백금

PyBOP 벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스-피롤리디노-포스포늄-헥사플루오로인산염

RP 역상

rt 실온

sat. 포화된

S1P 스핑고신 1-인산염

TBTU 2-(1H-벤조트리아졸e-1-일)-1,2,3,3-테트라메틸우라늄테트라플루오로붕산염

TEA 트리에틸아민

TFA 트리플루오르아세트산

THF 테트라하이드로푸란

TLC 박막 크로마토그래피

t_R 머무름 시간

UV 자외선

중간물질의 제조

실시예 A

(1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르복실산

a) NaH(7.0 g, 광유(mineral oil)에서 60% 분산, 175 mmol)는 펜탄(100 ㎖)으로 세척하고, 이후 THF(400 ㎖)에서 현탁시켰다. 현탁액은 0℃에서 냉각하고, THF(50 ㎖)에 녹인 에틸 2-메르캅토아세트산염(12.62 g, 105 mmol) 용액을 20분간 추가한다. 반응물의 온도는 5-10℃에 유지한다. 추가의 완결 직후에, 냉각을 중단하고 30분간 교반한다. THF(50 ㎖)에 녹인 (1S,5R)-2-(1-클로로-(E)-에틸리덴)-6,6-디메틸-비사이클로[3.1.0]헥산-3-원(S. A. Popov, A. Yu. Denisov, Yu. V. Gatilov, I. Yu. Bagryanskaya and A. V. Tkachev, tetrahedron Asymmetry 5 (1994), 479-489; S. A. Popov, A. V. Tkachev; Synthetic Commun. 31 (2001), 233-243)(12.93 g, 70 mmol) 용액을 현탁액에 추가하고, 생성 혼합물은 실온에서 1.5 시간동안 교반한다. 혼합물은 여과하고, 여과액은 대략 100 ㎖로 농축하고 1 M aq. NaOH(100 ㎖)로 희석하고 DCM(150 ㎖)으로 2회 추출한다. 추출물은 Na₂SO₄에서 건조시키고 증발시켜 갈색 오일로서 {1-[(1S,5R)-6,6-디메틸-3-옥소-비사이클로[3.1.0]헥실리덴]-에틸설파닐}-아세트산 에틸 에스터(18.2 g)의 정제되지 않은 E/Z 혼합물을 제공한다. LC-MS: t_R = 1.00 min, [M+1]⁺ = 269.13. ¹H NMR (CDCl₃): δ 4.22 (q, J = 7.0 Hz, 2H 양쪽 이성체), 3.67 (d, J = 15.8 Hz, 1H 주요 이성체), 3.63 (d, J = 15.8 Hz, 1H 소수 이성체), 3.58 (d, J = 15.8 Hz, 1H 주요 이 성체), 3.54 (d, J = 15.8 Hz, 1H, 소수 이성체), 2.67 (dd, J = 6.4, 19.4 Hz, 1 H 소수 이성체), 2.60 (dd, J = 7.0, 19.4 Hz, 1H 주요 이성체), 2.58 (s, 3H 소수 이성체), 2.52 (s, 3H 주요 이성체), 2.36-2.32 (m, 1H 주요 이성체), 2.30-2.26 (m, 1H 주요 이성체, 1H 소수 이성체), 2.18 (d, J = 7.0 Hz, 1H 소수 이성체), 2.00 (d, J = 7.0 Hz, 1H 주요 이성체), 1.95 (d, J = 7.6 Hz, 1H 소수 이성체), 1.30 (t, J = 7.0 Hz, 3H 주요 이성체), 1.28 (t, J = 7.0 Hz, 3H 소수 이성체), 1.18 (s, 3H 주요 이성체), 1.15 (s, 3H 소수 이성체), 0.89 (s, 3H 소수 이성체), 0.85 (s, 3H 주요 이성체).

b) abs. EtOH(75 ㎖)에 녹인 Na(1.70 g, 74.8 mmol) 용액은 60℃에서 가열하고, 이후 abs. EtOH(200 ㎖)에 녹인 정제되지 않은 {1-[(1S,5R)-6,6-디메틸-3-옥소-비사이클로[3.1.0]헥스-(2Z)-일리덴]-에틸설파닐}-아세트산 에틸 에스터(18.2 g, 68.0 mmol) 용액으로 처리한다. 혼합물은 75℃에서 20분간 교반하고, 이후 실온으로 냉각하고 0.5 M aq. NaOH(500 ㎖)로 희석하고 DCM(450 + 200 ㎖)으로 추출한다. 모아진 추출물은 Na₂SO₄에서 건조시키고 여과하며, 상기 용매는 진공에서 제거한다. 이는 87% 순도(LC-MS, UV 280 nm)의 황색 오일로서 정제되지 않은 (1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르복실산 에틸 에스터(10.5 g)를 산출한다. LC-MS: t_R = 1.11 min, [M+1]⁺ = 251.14; ¹H NMR (CDCl₃): δ 4.26 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.95 (dp, J_d = 18.8 Hz, J_p = 3.5 Hz, 1H), 2.79 (d, J = 19.3, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.89-1.84 (m, 2H), 1.34 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.12 (s, 3H), 0.72 (s, 3H).

c) EtOH(200 ㎖)에 녹인 정제되지 않은 (1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르복실산 에틸 에스터(10.3 g, 41.2 mmol) 용액에, 2N aq. LiOH(300 ㎖) 용액을 추가한다. 생성된 혼합물은 70℃에서 1시간동안 교반하고 실온으로 냉각하고 물(250 ㎖)로 희석하였다. 수용액은 DCM(125 ㎖)으로 3회 추출하고, 이후 구연산(citric acid)을 추가함으로써 pH 3으로 산성화시켰다. 산성화된 용액은 DCM(2x250 ㎖)으로 2회 추출하고, 이들 두 번째 추출물은 모으고 Na₂SO₄에서 건조시키고 여과하고 증발시켜 황색 고체로서 (1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르복실산(7.0 g)을 제공한다. LC-MS: t_R = 0.95 min, [M+1]⁺ = 223.00. ¹H NMR (CDCl₃): δ 3.04-2.92 (m, 1H), 2.83 (d, J = 19.3 Hz, 1H), 2.39 (s, 3H), 1.91-1.87 (m, 2H), 1.13 (s, 3H), 0.73 (s, 3H).

실시예 B

5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산

a) EA(230 ㎖)에 녹인 4,4-디메틸-사이클로헥스-2-에논(50 g, 403 mmol) 용액에, EA에 녹인 Pd/C(2.5 g, 10% Pd) 현탁액을 추가한다. 현탁액은 1 bar H₂하에 실온에서 2시간동안 교반한다. 촉매는 여과하여 제거하고, 여과액의 용매는 조심스 럽게 증발시켜 무색 오일로서 4,4-디메틸-사이클로헥사논(50 g)을 제공하는데, 이는 서서히 결정화된다; ¹H NMR (CDCl₃): δ 2.34 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 1.66 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 1.09 (s, 6H).

b) THF(700 ㎖)에 녹인 KOtBu(24.5 g, 109 mmol, tert.-부탄올에서 50% 용액)의 차가운 용액에, 에틸포름산염(120 ㎖, 123 mmol)을 천천히 추가한다. 혼합물은 실온에서 30분간 교반하고, 이후 에틸포름산염(50 ㎖)과 THF(70 ㎖)에 녹인 4,4-디메틸-사이클로헥사논(50 g, 396 mmol) 용액을 20분간 추가한다. 추가의 완결후, 15-20℃에서 30분간 교반한다. 오렌지색 현탁액은 10% aq. 구연산 용액(200 ㎖)과 염수(200 ㎖)에 부어넣고 EA(2x200 ㎖)로 추출한다. 유기 추출물은 0.2 N aq. NaOH와 염수로 세척하고 Na₂SO₄에서 건조시키고 증발 건조시켜 황색 오일로서 5,5-디메틸-2-옥소-사이클로헥산카브알데하이드(52 g)를 제공한다; LC-MS: t_R = 0.89 min, [M+1+CH₃CN]⁺ = 196.15.

c) 클로로포름(250 ㎖)에 녹인 5,5-디메틸-2-옥소-사이클로헥산카브알데하이드(51 g, 331 mmol) 용액에, 염화옥살릴(40 ㎖, 465 mmol)을 신속하게 추가한다. 3-4분간 교반후, 얼음과 2 N aq. NaOH(100 ㎖)를 순차적으로 추가한다. 유기상은 분리하고, 수상은 클로로포름으로 다시 추출한다. 모아진 유기 추출물은 물로 세척하고 Na₂SO₄에서 건조시킨다. 상기 용매는 진공에서 제거하여 갈색 오일로서 2-클로 로메틸렌-4,4-디메틸-사이클로헥사논(50 g)을 제공한다; LC-MS: t_R = 0.96 min.

d) EtOH(500 ㎖)에 녹인 나트륨(21 g, 875 mmol)의 새로 제조된 용액의 일부(300 ㎖)에, 메르캅토아세트산 에틸 에스터(50 ㎖)를 추가한다. 생성된 용액은 THF(170 ㎖)에 녹인 2-클로로메틸렌-4,4-디메틸-사이클로헥사논(50 g, 290 mmol) 용액에 10분간 추가한다. 혼합물은 데워진다(50℃). 추가의 완결후, EtOH(200 ㎖)에 녹인 나트륨의 새로 제조된 용액의 나머지 부분을 반응 혼합물에 추가한다. 혼합물은 실온에서 15분간 교반하고, 이후 1 N aq. LiOH 용액(300 ㎖)을 추가한다. 용액은 3시간동안 환류시키고, 이후 실온에서 16시간동안 교반하였다. THF와 EtOH는 감압하에 제거하고, 남아있는 짙은 용액은 헵탄/EA 3:1(2x200 ㎖)로 추출한다. 수상은 구연산(30 g)과 2 N aq. HCl(200 ㎖)을 추가함으로써 산성화시키고, 이후 EA로 3회 추출한다. 모아진 유기 추출물은 sat. aq. NaHCO₃ 용액으로 3회 세척하고 Na₂SO₄에서 건조시키고 증발시킨다. 생성된 짙은 갈색 오일은 60℃에서 아세토니트릴에 용해시키고 5℃에서 결정화시킨다. 결정은 집합시키고 아세토니트릴로 세척하고 건조시켜 약간 회색 분말로서 5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(31 g)을 제공한다; LC-MS: t_R = 0.95 min, [M+1+CH₃CN]⁺ = 252.18; ¹H NMR (CDCl₃): δ 7.15 (s, 1H), 3.05 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.47 (s, 2H), 1.58 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 0.97 (s, 6H).

실시예 C

3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산

THF(19 ㎖)에 녹인 5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(960 ㎎, 4.57 mmol)의 냉각된 용액(-78℃)에, tert.-BuLi(8 ㎖, 펜탄에서 1.5 M 용액)를 추가한다. 혼합물은 -78℃에서 10분간 교반하고, 이후 에틸요오드(3.80 g, 24.37 mmol)를 추가한다. 반응 혼합물은 -78℃에서 3시간동안 교반한다. 물/MeOH 1:1(8 ㎖)과 10% aq. 구연산 용액을 순차적으로 추가하고, 혼합물은 EA로 추출한다. 모아진 유기 추출물은 염수로 세척하고 Na₂SO₄에서 건조시키고 증발시킨다. 남아있는 고체는 아세토니트릴(6 ㎖)에 현탁시키고 60℃로 가열하고 실온으로 냉각하고 여과하고 건조시켜 약간 베이지색 고체로서 3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(640 ㎎)을 제공한다; LC-MS: t_R = 1.01 min, [M+1+CH₃CN] = 280.10.

실시예 D

5,5-디에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산

a) 2-에틸부틸알데하이드(12.3 ㎖, 100 mmol), 메틸비닐케톤(5.6 ㎖, 67.3 mmol)과 H₂SO₄(0.07 ㎖)의 혼합물은 40℃에서 하룻밤동안 교반한다. 메틸비닐케톤(5.6 ㎖, 67.3 mmol)과 H₂SO₄의 다른 분량을 추가하고 40℃에서 2일 동안 교반을 지속한다. 황색 용액은 클로로포름으로 희석하고, 상기 용매는 감압하에 다시 제거한다. 정제되지 않은 산물은 진공 증류(vacuum distillation)로 정제하여 무색 오 일로서 4,4-디에틸-사이클로헥스-2-에논(10.7 g)을 제공한다; Bp_{11 mbar} = 88℃; ¹H NMR (CDCl₃): δ 6.71 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.92 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.42 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.84 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.57-1.40 (m, 4H), 0.87 (t, J = 7.6 Hz, 6H).

b) EA(400 ㎖)에 녹인 4,4-디에틸-사이클로헥스-2-에논(10.7 g, 70.5 mmol) 용액은 Pd/C(1.0 g, 10% Pd)로 처리한다. 현탁액은 1 bar의 H₂하에 실온에서 24시간동안 교반한다. 혼합물은 여과하고, 여과액은 증발시켜 무색 고체로서 4,4-디에틸-사이클로헥사논(11.7 g)을 제공한다; ¹H NMR (CD₃OD): δ 2.32 (t, J = 7.0 Hz, 4H), 1.66 (t, J = 7.0 Hz, 4H), 1.48 (q, J = 7.6 Hz, 4H), 0.88 (t, J = 7.6 Hz, 6H).

c) THF(250 ㎖)에 녹인 KOtBu(9.19 g, 81.9 mmol)의 현탁액에, 에틸포름산염(24.8 ㎖, 260 mmol)을 천천히 첨가한다. 약간 흐린 혼합물에, 에틸 포름산염(14 ㎖, 150 mmol)에 녹인 4,4-디에틸-사이클로헥사논(11.5 g, 74.4 mmol) 용액을 추가한다. 혼합물은 데워지고 냉욕조(ice-bath)로 냉각한다. 흑적색(dark-red) 내지 갈색 현탁액은 실온에서 18시간동안 교반하고, 이후 10% aq. 구연산을 추가한다. 혼합물은 DCM으로 추출하고, 유기 추출물은 Na₂SO₄에서 건조시키고 증발시킨다. 갈색 오일은 클로로포름(150 ㎖)에서 용해시키고 옥사실클로라이드(11.3 g, 89.1 mmol)로 처리한다. 가스 발생이 중단된 이후, 혼합물은 실온에서 1시간동안 교반한다. 짙은 용액은 2 N aq. NaOH로 세척하고 Na₂SO₄에서 건조시키고 증발시켜 검은색 오일(11.2 g)이 남도록 한다. THF(60 ㎖)에 녹인 상기 오일의 용액은 EtOH(300 ㎖)에 녹인 NaOEt(11.4 g, 167 mmol)와 메르캅토아세트산 에틸 에스터(10.0 g, 83.6 mmol)의 차가운 용액(3℃)에 추가한다. 반응 혼합물은 실온에서 2시간동안 교반하고, 이후 NaOEt(5.69 g, 83.6 mmol)의 다른 분량을 추가한다. 교반은 실온에서 16시간 및 60℃에서 2시간동안 지속한다. 혼합물은 2 N aq. HCl로 희석하고 DCM으로 2회 추출한다. 모아진 유기 추출물은 Na₂SO₄에서 건조시키고 여과하며, 상기 용매는 진공에서 제거하여 갈색 오일로서 정제되지 않은 5,5-디에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산 에틸 에스터(14.2 g)를 제공한다; LC-MS: t_R = 1.16 min.

d) EtOH(250 ㎖)와 2 N aq. LiOH(250 ㎖)에 녹인 5,5-디에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산 에틸 에스터(14.2 g, 53.38 mmol) 용액은 65℃에서 18시간동안 교반한다. 혼합물은 1 N aq. NaOH로 희석하고 Et₂O로 추출한다. 수상은 2 N aq. HCl로 pH 2로 산성화시키고 DCM으로 추출한다. 모아진 DCM 추출물은 Na₂SO₄에서 건조시키고 여과하며, 상기 용매는 진공에서 제거한다. 정제되지 않은 산물(11.3 g)은 RP-C₁₈ 실리카 겔 상에서 MPLC로 정제하여 갈색 오일로서 5,5-디에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(2.93 g)을 제공한다; LC-MS: t_R = 1.01 min, [M+1+CH₃CN] = 280.19; ¹H NMR (CDCl₃): δ 7.12 (s, 1H), 2.99 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.46 (s, 2H), 1.59 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.40-1.20 (m, 4H), 0.84-0.74 (m, 6H).

실시예 E

5,5-디에틸-3-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산

5,5-디에틸-3-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산은 실시예 C에서와 유사하게 tert.-BuLi와 메틸요오드로 순차적으로 처리함으로써 5,5-디에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산으로부터 제조된다; LC-MS: t_R = 1.03 min, [M+1+CH₃CN] = 294.27.

실시예 F

3,5,5-트리에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산

3,5,5-트리에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산은 실시예 C에서와 유사하게 tert.-BuLi와 에틸요오드를 순차적으로 처리함으로써 5,5-디에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산으로부터 제조된다; LC-MS: t_R = 1.07 min, [M+1+CH₃CN] = 308.14.

실시예 G

(1aS,5aR)-1-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-에타논

Et₂O(10 ㎖)에 녹인 (1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르복실산(220 ㎎, 1.00 mmol) 용액에, 반응 혼합물이 부드럽게 환류되도록 하는 속도로, Et₂O에 녹인 MeLi(1.6 M, 1.4 ㎖, 2.10 mmol) 용액을 추가한다. 추가의 완결후, 실온에서 30분간 교반을 지속한다. 반응물은 sat. aq. NH₄Cl(3 ㎖)을 추가함으로써 급랭시킨다. 유기층은 분리하고 Na₂SO₄에서 건조시키며, 상기 용매는 증발시켜 연한 황색 오일로서 (1aS,5aR)-1-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-에타논(165 ㎎)을 제공한다; LC-MS: t_R = 1.03 min, [M+1]⁺ = 221.20; ¹H NMR (CDCl₃): δ 3.00 (ddd, J = 1.8, 4.7, 18.8 Hz, 1H), 2.80 (d, J = 18.8 Hz, 1H), 2.38 (s, 6H), 1.93-1.90 (m, 2H), 1.14 (s, 3H), 0.74 (s, 3H).

실시예 H

1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-에타논

Et₂O(100 ㎖)에 녹인 3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산(2.10 g, 8.81 mmol) 용액에, 메틸리튬(11 ㎖, Et₂O에서 1.6 M 용액)을 실온에서 추가한다. 연한 황색 용액은 실온에서 15분간 교반하고, 이후 메틸리튬(2 ㎖)의 다른 분량을 추가한다. 15분간 교반을 지속하고 메틸리튬(1 ㎖)의 추가 분량을 추가하며, 혼합물은 실온에서 15분간 다시 교반한다. 반응물은 물로 급 랭시킨다. 유기층은 분리하고 물로 한번 더 세척하고 MgSO₄에서 건조시키고 증발시킨다. 정제되지 않은 산물은 헵탄:EA 7:3으로 용리하는 실리카 겔 상에서 CC로 정제하여 연한 황색 고체로서 1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-에타논(1.65 g)을 제공한다; LC-MS: t_R = 1.00 min, [M+1] = 237.15; ¹H NMR (CDCl₃): δ 3.03 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.73 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.31 (s, 2H), 1.55 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.28 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 0.97 (s, 6H).

실시예 I

1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르복실산 하이드라지드

a) DCM(50 ㎖)에 녹인 (1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르복실산(2.2 g, 9.9 mmol), 하이드라진카르복실산 벤질 에스터(3.38 g, 20.4 mmol)와 DIPEA(2 ㎖)의 용액에 TBTU(3.2 g, 10 mmol)를 추가한다. 혼합물은 실온에서 20시간동안 교반한다. 혼합물은 Et₂O(200 ㎖)로 희석하고 1M aq. NaOH(3 x 50 ㎖)와 1M aq. HCl(2 x 50 ㎖)로 추출한다. 유기상은 건조시키고(Na₂SO₄) 여과하고 증발시켜 정제되지 않은 N'-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르보닐)-하이드라 진카르복실산 벤질 에스터를 제공한다; LC-MS: t_R = 1.01 min, [M+1]⁺ = 371.25.

b) 잔류물은 MeOH(100 ㎖)에 용해시키고 10 % Pd-C(600 ㎎)를 추가한다. 혼합물은 1기압(H₂-풍선)에서 6일 동안 수소화시킨다. 혼합물은 여과하고 증발시키며, 잔류물은 1M aq. HCl(100 ㎖)에 집어넣고 Et₂O(2 x 30 ㎖)로 추출한다. 수상은 염기화시키고(33% aq. KOH) EA(5 x 50 ㎖)로 추출한다. 유기 추출물은 건조시키고(Na₂SO₄) 여과하고 증발시키고 건조시켜 밝은 황갈색 거품으로 1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르복실산 하이드라지드를 제공한다; LC-MS: t_R = 0.76 min, [M+1]⁺ = 237.20; ¹H NMR (CD₃OD): δ 2.93 (dd, J = 18.5, 5.9 Hz, 1 H), 2.80 (s, 2 H), 2.77 (d, J = 18.2 Hz, 1H), 2.33 (s, 3 H), 1.86-1.92 (m, 2 H), 1.10 (s, 3 H), 0.70 (s, 3 H).

실시예 J

2-에틸-6-메틸-이소니코틴산

a) N,N-디메틸포름아마이드-디-tert.-부틸-아세탈(19 ㎖, 80 mmol)은 40분간, 건성 톨루엔(100 ㎖)에 녹인 2-클로로-6-메틸-이소니코틴산(3.40 g, 19.8 mmol)의 뜨거운(65℃, 플라스크 온도(flask temperature)) 현탁액에 추가한다. 투명한 오렌지색 용액은 80℃에서 48시간동안 교반하고 실온으로 냉각하고 톨루엔(100 ㎖)으로 희석한다. 용액은 물(2 x 40 ㎖), sat. aq. NaHCO₃(3 x 30 ㎖)과 sat. aq. NaCl(25 ㎖)로 세척하고 건조시키고 (Na₂SO₄) 여과하고 증발시켰다. 잔류물은 FC(SiO₂, DCM-MeOH)로 정제하여 2-클로로-6-메틸-이소니코틴산 tert-부틸 에스터를 제공한다.

b) Et₂O(10 ㎖)에 녹인 에틸마그네슘브롬화물(에틸브롬화물(392 ㎎, 3.6 mmol)과 마그네슘(83 ㎎, 3.4 mmol)으로부터 새로 제조됨) 용액은 THF(60 ㎖)에 녹인 2-클로로-6-메틸-이소니코틴산 tert-부틸 에스터(0.76 g, 3.34 mmol), Fe(acac)₃(21.2 ㎎, 0.06 mmol)과 NMP(0.6 ㎖)의 냉각되고(-40℃) 기계적으로 교반된 용액에 추가한다. 혼합물은 0.5시간동안 실온으로 데우고 Et₂O(150 ㎖)로 희석하고 aq. KHSO₄(1 M, 40 ㎖)로 급랭시킨다. 상은 분리하고, 수상은 Et₂O(2 x 50 ㎖)로 추출한다. 모아진 유기 추출물은 건조시키고(MgSO₄) 여과하고 증발시킨다. 잔류물은 역상 MPLC로 정제하여 2-에틸-6-메틸-이소니코틴산 tert-부틸 에스터를 제공한다; LC-MS: t_R = 0.67 min, [M+1]⁺ = 222.19; ¹H NMR (CDCl₃): δ 7.44 (s, 2 H), 2.83 (q, J = 7.6 Hz, 2 H), 2.58 (s, 3 H), 1.59 (s, 9 H), 1.30 (t, J = 7.6 Hz, 3 H).

c) DCM(10 ㎖)에 녹인 2-에틸-6-메틸-이소니코틴산 tert-부틸 에스터 용액은 TFA(10 ㎖)로 처리하고, 혼합물은 0.5시간동안 실온에서 교반한다. 혼합물은 증발시키고, 잔류물은 HV 하에 건조시켜 2-에틸-6-메틸-이소니코틴산을 제공한다; LC- MS: t_R = 0.28 min, [M+1]⁺ = 166.25.

실시예 K

2,6-디에틸-이소니코틴산

2,6-디에틸-이소니코틴산은 실시예 J에 따라 2,6-디클로로-이소니코틴산과 에틸마그네슘브롬화물(2 eq.)로부터 합성된다; LC-MS: t_R = 0.42 min, [M+1]⁺ = 180.11.

실시예 L

2-에틸-6-메틸-피리딘-4-카브알데하이드

a) THF(30 ㎖)에 녹인 2-에틸-6-메틸-이소니코틴산(2.73 g, 16.5 mmol) 현탁액은 실온에서 15시간동안, THF(1M, 33.1 ㎖)에 녹인 붕산염으로 처리한다. 혼합물은 sat. aq. Na₂CO₃(100 ㎖)으로 급랭시키고 CHCl₃(5 x 50 ㎖)으로 추출한다. 유기 추출물은 건조시키고(Na₂SO₄) 여과하고 증발시켜(50 mbar, 45℃) 정제되지 않은 (2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-메탄올(2.18 g)을 제공한다; LC-MS: t_R = 0.80 min, [M+1]⁺ = 205.32.

b) DCM(30 ㎖)과 MnO₂(2.6 g, 30 mmol)에 녹인 정제되지 않은 (2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-메탄올(453.6 ㎎, 3 mmol) 용액을 추가한다. 혼합물은 실온에서 15시간동안 교반하고 여과하고 증발시켜(130 mbar, 45℃) 정제되지 않은 2-에틸-6- 메틸-피리딘-4-카브알데하이드(0.48 g)를 제공한다; ¹H NMR (CDCl₃): δ 10.02 (s, 1 H), 7.37 (s, 2 H), 2.89 (q, J = 7.6 Hz, 2 H), 2.64 (s, 3 H), 1.33 (t, J = 7.6 Hz, 3 H).

실시예 M

2-에틸-6-메틸-이소니코틴산 하이드라지드

a) DMF(10 ㎖)에 녹인 2-에틸-6-메틸-이소니코틴산(0.53 g, 3.2 mmol), 하이드라진카르복실산 tert.-부틸 에스터(0.43 g, 3.2 mmol)와 DIPEA(0.85 ㎖)의 용액에 TBTU(1.23 g, 3.8 mmol)를 추가한다. 혼합물은 실온에서 3시간동안 교반한다. 혼합물은 1M aq. NaOH(50 ㎖)로 희석하고 Et₂O-EA(1:1, 3 x 50 ㎖)로 추출한다. 유기 추출물은 건조시키고(Na₂SO₄) 여과하고 증발시켜 정제되지 않은 N'-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-카르보닐)-하이드라진카르복실산 tert-부틸 에스터를 제공한다.

b) 디옥산(10 ㎖)에 녹인 정제되지 않은 N'-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-카르보닐)-하이드라진카르복실산 tert-부틸 에스터 용액은 디옥산(4 ㎖)에 녹인 4M HCl로 6시간동안 처리한다. 혼합물은 증발시키고, 잔류물은 MeOH에 집어넣고, 2-에틸-6-메틸-이소니코틴산 하이드라지드 염산염은 Et₂O로부터 백색 거품으로 침전시킨다; ¹H NMR (CD₃OD): δ 8.16 (s, 1 H), 8.14 (s, 1 H), 3.15 (q, J = 7.6 Hz, 2 H), 2.87 (s, 3 H), 1.46 (t, J = 7.6 Hz, 3 H).

실시예 N

2-에틸-N-하이드록시-6-메틸-이소니코틴아미딘

a) DMF(90 ㎖)에 녹인 2-에틸-6-메틸-이소니코틴산 염산염 (1.85 g, 9.18 mmol, 실시예 J) 용액에 DIPEA(6.3 ㎖, 4.75 g, 36.7 mmol))를 추가한다. 혼합물은 0℃로 냉각시키고, 이후 PyBOP(5.25 g, 10.1 mmol)를 추가한다. 0℃에서 15분간 교반을 지속하고, 이후 NH₃(디옥산에서 64 ㎖의 0.5 M 용액)을 추가한다. 실온에서 2시간동안 교반을 지속하고, 이후 상기 용매를 감압하에 증발시킨다. 잔류물은 DCM(80 ㎖)에 용해시키고, 피리딘(4.5 ㎖, 4.39 g, 55.5 mmol)과 TFA 무수물(6.32 ㎖, 9.39 g, 44.7 mmol)을 0℃에서 순차적으로 추가한다. 혼합물은 실온에서 2시간동안 교반하고, 이후 DCM으로 희석하고 sat. aq. Na₂CO₃으로 세척한다. 유기상은 MgSO₄에서 건조시키고 여과하고 증발시켰다. 정제되지 않은 산물은 헵탄:EA 4:1로 용리하는 실리카 겔 상에서 CC로 정제하여 황색 오일로서 2-에틸-6-메틸-이소니코티노니트릴(isonicotinonitrile)(0.675 g)을 제공한다; ¹H NMR (CDCl₃): δ 1.33 (t, J = 7.5 Hz, 3 H), 2.61 (s, 3 H), 2.86 (q, J = 7.5 Hz, 2 H), 7.21 (s, 2 H).

b) 0℃에서, KOtBu(1.81 g, 16.2 mmol)를 메탄올(25 ㎖)에 조심스럽게 추가한다. 이후, 하이드록실아민 염산염(963 ㎎, 13.9 mmol)을 상기 용액에 추가한다. 현탁액은 30분간 교반하고, 이후 2-에틸-6-메틸-이소니코티노니트릴(675 ㎎, 4.62 mmol)을 추가한다. 혼합물은 1시간동안 환류시키고, 상기 용매를 증발시킨다. 잔류 물은 물에 용해시키고 EA로 3회 추출한다. 유기 추출물은 MgSO₄에서 건조시키고 여과하고 증발시키고 HV 하에 건조시켜 백색 분말로서 2-에틸-N-하이드록시-6-메틸-이소니코틴아미딘(897 ㎎)을 제공한다; LC-MS: t_R = 0.31 min, [M+1]⁺ = 180.32.

최종 산물의 제조

실시예 1

3-(2-에틸-6- 메틸 -피리딘-4-일)-1-((1 aS ,5aR)-1,1,2- 트리메틸 -1,1a,5,5a-테 트 라하이드로-3- 티아 - 사이클로프로파[a]펜탈렌 -4-일)- 프로페논

NaHMDS(THF에서 2M, 1.5 ㎖) 용액은 THF(25 ㎖)로 희석하고 -78℃에서 냉각한다. THF(2 ㎖)에 녹인 (1aS,5aR)-1-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-에타논(328.3 ㎎, 1.5 mmol) 용액을 천천히 추가하고, 혼합물은 0.5시간동안 교반한다. THF(1 ㎖)에 녹인 2-에틸-6-메틸-피리딘-4-카브알데하이드(444.6 ㎎, 3 mmol) 용액을 천천히 추가한다. 혼합물은 -78℃에서 1시간동안 교반하고, 이후 -30℃로 데우고 1시간동안 교반한다. 혼합물은 -78℃에서 냉각하고 1M aq. NaH₂PO₄(10 ㎖)로 급랭시킨다. 혼합물은 DCM(150 ㎖)과 물(100 ㎖)로 희석하고 1M aq. NaOH로 염기화시킨다. 상은 분리하고, 유기상은 건조시키고(Na₂SO₄) 여과하고 증발시킨다. 잔류물은 MPLC(SiO₂, EA-헥산)로 정제하여 무색 오일로서 3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-1-(1aS,5aR)-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-프로페논(48 ㎎) 을 제공한다; LC-MS: t_R = 0.89 min, [M+1]⁺ = 352.36.

부가적으로, 3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-3-하이드록시-1-(1aS,5aR)-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-프로판-1-원(165 ㎎)이 획득된다. 상기 물질은 0℃에서, DCM(13 ㎖)에 녹인 메탄설포닐염화물(1 eq.)과 TEA(2 eq.)로 처리한다. 혼합물은 DCM(50 ㎖)으로 희석하고 sat. aq. Na₂CO₃(30 ㎖)으로 세척한다. 유기상은 건조시키고(Na₂SO₄) 여과하고 증발시킨다. 잔류물은 MPLC(SiO₂, 헥산-EA 구배)로 정제하여 3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-1-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-프로페논(71 ㎎)을 제공한다; LC-MS: t_R = 0.89 min, [M+1]⁺ = 352.36.

실시예 2

1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-프로페논

1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-프로페논은 실시예 1에서와 유사하게, 1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-에타논과 2-에틸-6-메틸-피리딘-4-카브알데하이드로부터 제조되었다; LC-MS: t_R = 0.95 min, [M+1] = 368.33.

실시예 3

3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-1-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테 트 라하이드로-3- 티아 - 사이클로프로파[a]펜탈렌 -4-일)-프로판-1-원

MeOH(30 ㎖)에 녹인 3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-1-(1aS,5aR)-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-프로페논(154 ㎎, 0.44 mmol) 및 목탄 상에서 10% Pd(20 ㎎)의 혼합물은 실온에서 3 bar에서 수소화시킨다. 혼합물은 증발시키고, 잔류물은 TLC(SiO₂, EA)로 정제하여 무색 오일로서 3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-1-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-프로판-1-원(16 ㎎)을 제공한다; LC-MS: t_R = 0.86 min, [M+1] = 354.32.

실시예 4

1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-프로판-1-원

1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-프로판-1-원은 실시예 3에서와 유사하게, 1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-프로페논으로부터 제조된다; LC-MS: t_R = 0.90 min, [M+1] = 370.38; ¹H NMR (CD₃OD): δ 6.97 (s, 2 H), 3.12 (t, J = 7.3 Hz, 2 H), 2.98 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.96 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.74 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 2.70 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 2.33 (s, 2 H), 2.44 (s, 3 H), 1.54 (t, J = 6.7 Hz, 2 H), 1.25 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 1.22 (t, J = 7.6 Hz, 3H), 0.96 (s, 6 H).

실시예 5

2-에틸-6-메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘

a) DCM(5 ㎖)에 녹인 2-에틸-6-메틸-이소니코틴산(87.9 ㎎, 0.53 mmol), 1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르복실산 하이드라지드(141.8 ㎎, 0.6 mmol), HOBt(100 ㎎, 0.74 mmol)와 TEA(0.42 ㎖)의 혼합물에 0℃에서, EDC(200 ㎎, 0.78 mmol)를 추가한다. 혼합물은 15시간동안 교반하는데, 이 기간 동안 혼합물은 0℃에서 실온으로 데워진다. 혼합물은 EA(50 ㎖)로 급랭시키고 1M aq. NaOH(2 x 10 ㎖)로 세척한다. 유기상은 건조시키고(Na₂SO₄) 여과하고 증발시켜 정제되지 않은 2-에틸-6-메틸-이소니코틴산 N'-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르보닐)-하이드라지드(350 ㎎)를 제공한다; LC-MS: t_R = 0.80 min, [M+1] = 384.34.

b) THF(5 ㎖)에 녹인 정제되지 않은 2-에틸-6-메틸-이소니코틴산 N'-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르보닐)-하이드라지드(350 ㎎, ca. 0.5 mmol)와 버제스 시약(Burgess Reagent)(385 ㎎, 1.62 mmol)의 혼합물은 전자오븐 내에서 110℃에서 3분간 가열한다. 혼합물은 EA(10 ㎖)로 희석하고 sat. aq. Na₂CO₃(2 x 5 ㎖)으로 추출한다. 유기상은 건조시키 고(Na₂SO₄) 여과하고 증발시켜 정제되지 않은 산물(50.9 ㎎)을 제공하고, 상기 산물은 HPLC로 정제하여 밝은 황색 분말로서 2-에틸-6-메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘(16 ㎎)을 제공한다; LC-MS: t_R = 0.91 min, [M+1] = 366.21.

실시예 6

2,6-디에틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘

2,6-디에틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘은 실시예 5에서와 유사하게, 1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르복실산 하이드라지드와 2,6-디에틸-이소니코틴산으로부터 합성된다; LC-MS: t_R = 0.96 min, [M+1] = 380.34.

실시예 7

2-클로로-6-메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘

2-클로로-6-메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘은 실시예 5에서와 유사하게, 1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로 파[a]펜탈렌-4-카르복실산 하이드라지드와 2-클로로-6-메틸-이소니코틴산으로부터 합성된다; LC-MS: t_R = 1.17 min, [M+1] = 374.22.

실시예 8

2,6-디메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘

THF(5 ㎖)에 녹인 2-클로로-6-메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘(62.9 ㎎, 0.17 mmol), Fe(acac)₃(6 ㎎)과 NMP(20 ㎎)의 용액에 THF(3M, 0.51 mmol)에 녹인 메틸마그네슘요오드 용액을 추가하고, 혼합물은 실온에서 15시간동안 교반한다. 혼합물은 물(30 ㎖)로 급랭시키고 Et₂O(2 x 50 ㎖)로 추출한다. 유기 추출물은 건조시키고(MgSO₄) 여과하고 증발시킨다. 잔류물은 TLC(SiO₂, EA-헥산)로 정제하여 2,6-디메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘(28 ㎎)을 제공한다; LC-MS: t_R = 0.88 min, [M+1] = 352.54.

실시예 9

2-에틸-4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-6-메틸-피리딘

a) DMF(8 ㎖)에 녹인 3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티 오펜-1-카르복실산(114 ㎎, 0.48 mmol), 2-에틸-6-메틸-이소니코틴산 하이드라지드 염산염(120.5 ㎎, 0.48 mmol)과 DIPEA(0.49 ㎖)의 용액에 TBTU(190 ㎎, 0.59 mmol)를 추가한다. 혼합물은 실온에서 15시간동안 교반한다. 혼합물은 Et₂O(50 ㎖)로 희석하고 1M aq. NaOH(2 x 20 ㎖)로 추출한다. aq. 추출물은 EA(2 x 20 ㎖)로 세척하고, 모아진 유기상은 건조시키고(MgSO₄) 여고하고 증발시켜 정제되지 않은 3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산 N'-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-카르보닐)-하이드라지드를 제공한다; LC-MS: t_R = 0.83 min, [M+1] = 400.31.

b) THF(5 ㎖)에 녹인 정제되지 않은 3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산 N'-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-카르보닐)-하이드라지드(289 ㎎, ca. 0.48 mmol)와 버제스 시약(367 ㎎, 1.6 mmol)의 혼합물은 전자레인지 내에서 110℃에서 3분간 가열한다. 혼합물은 EA(50 ㎖)로 희석하고 1M aq. NaOH(2 x 10 ㎖)로 추출한다. 유기상은 건조시키고(MgSO₄) 여과하고 증발시킨다. 잔류물은 HPLC로 정제하여 2-에틸-4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-6-메틸-피리딘(53 ㎎)을 제공한다; LC-MS: t_R = 0.96 min, [M+1] = 382.26.

실시예 10

4-[5-(5,5-디에틸-3-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)- [1,3,4]옥사디아졸-2-일]-2-에틸-6-메틸-피리딘

4-[5-(5,5-디에틸-3-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-2-에틸-6-메틸-피리딘은 실시예 9에서와 유사하게, 5,5-디에틸-3-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산과 2-에틸-6-메틸-이소니코틴산 하이드라지드 염산염으로부터 합성된다; LC-MS: t_R = 0.98 min, [M+1] = 396.39.

실시예 11

4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-2,6-디메틸-피리딘

4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-2,6-디메틸-피리딘은 실시예 9에서와 유사하게, 3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산과 2,6-디메틸-이소니코틴산 하이드라지드 염산염으로부터 합성된다; LC-MS: t_R = 0.93 min, [M+1] = 368.44;¹H NMR (CD₃OD): δ 7.66 (s, 2 H), 3.09 (t, J = 6.7 Hz, 2 H), 2.80 (q, J = 7.6 Hz, 2 H), 2.60 (s, 6 H), 2.39 (s, 2 H), 1.67 (t, J = 6.7 Hz, 2 H), 1.29 (t, J = 7.6 Hz, 3 H), 1.03 (s, 6 H).

실시예 12

2,6-디메틸-4-[5-(3,5,5-트리에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘

2,6-디메틸-4-[5-(3,5,5-트리에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘은 실시예 9에서와 유사하게, 3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산과 2,6-디메틸-이소니코틴산 하이드라지드 염산염으로부터 합성된다; LC-MS: t_R = 0.99 min, [M+1] = 396.28.

실시예 13

2-클로로-4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-6-메틸-피리딘

2-클로로-4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-6-메틸-피리딘은 실시예 9에서와 유사하게, 3,5,5-트리에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산과 2-클로로-6-메틸-이소니코틴산 하이드라지드로부터 합성된다; LC-MS: t_R = 1.22 min, [M+1] = 388.25.

실시예 14

2-에틸-6-메틸-4-[5-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,2,4]옥사디아졸-3-일]-피리딘

a) DMF(3 ㎖)에 녹인 (1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-카르복실산(64 ㎎, 289 μmol)과 DIPEA(112 ㎎, 868 μmol)의 용액에 0℃에서, TBTU(98 ㎎, 306 μmol)를 추가한다. 혼합물은 0℃에서 15분간 교반하고, 이후 2-에틸-N-하이드록시-6-메틸-이소니코틴아미딘(55 ㎎, 306 μmol)을 추가한다. 0℃에서 1시간동안 교반을 지속한다. 반응물은 물(2 ㎖)로 급랭시키고, 혼합물은 EA에서 희석하고, 이후 sat. aq. NaHCO₃ 용액과 물로 순차적으로 세척한다. 유기 추출물은 MgSO₄에서 건조시키고 여과하고 증발시킨다. 정제되지 않은 산물은 헵탄:EA 3:2를 이용한 prep. TLC로 정제하여 황색 오일로서 상응하는 하이드록시아미딘 에스터(62 ㎎)를 제공한다; LC-MS: t_R = 0.86 min, [M+1] = 384.10.

b) 상기 물질(62 ㎎, 162 μmol)은 디옥산(2 ㎖)에 용해시키고, 용액은 90℃에서 48시간동안 교반한다. 상기 용매는 증발시키고, 정제되지 않은 산물은 헵탄:EA 1:1을 이용하여 prep. TLC 플레이트 상에서 정제하여 무색 오일로서 2-에틸-6-메틸-4-[5-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,2,4]옥사디아졸-3-일]-피리딘(36 ㎎)을 제공한다; LC-MS: t_R = 0.96 min, [M+1] = 366.11; ¹H NMR (CDCl₃): δ 0.78 (s, 3 H), 1.17 (s, 3 H), 1.36 (t, J = 7.8 Hz, 3 H), 1.94-2.03 (m, 2 H), 2.46 (s, 3 H), 2.64 (s, 3 H), 2.90 (q, J = 7.5 Hz, 2 H), 2.97 (d, J = 19.1 Hz, 1H), 3.13 (dd, J = 19.1, 6.5 Hz, 1 H), 7.67 (s, 2 H).

실시예 15

2-에틸-4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,2,4]옥사디아졸-3-일]-6-메틸-피리딘

2-에틸-4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,2,4]옥사디아졸-3-일]-6-메틸-피리딘은 5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-카르복실산과 2-에틸-N-하이드록시-6-메틸-이소니코틴아미딘을 출발 물질로 하여 실시예 14에서와 유사하게 제조된다; LC-MS: t_R = 1.01 min, [M+1] = 382.15; ¹H NMR (CDCl₃): δ 1.04 (s, 6 H), 1.34 (t, J = 7.5 Hz, 3 H), 1.38 (t, J = 7.5 Hz, 3 H), 1.67 (t, J = 6.5 Hz, 2 H), 2.38 (s, 2 H), 2.65 (s, 3 H), 2.81 (q, J = 7.5 Hz, 2 H), 2.91 (q, J = 7.5 Hz, 2 H), 3.17 (t, J = 6.5 Hz, 2 H), 7.70 (s, 2 H).

실시예 16: EC ₅₀ 수치를 결정하는 GTPγS 검사

GTPγS 결합 검사는 재조합 인간 S1P1 수용체를 발현하는 CHO 세포의 막 제조물을 이용하여 96 웰 마이크로역가 평판(Nunc, 442587)에서 200 ㎕의 최종 부피로 수행한다. 검사 조건은 20 mM Hepes(Fluka, 54461), 100 mM NaCl(Fluka, 71378), 5 mM MgCl₂(Fluka, 63064), 0.1% BSA(Calbiochem, 126609), 1 μM GDP(Sigma, G-7127), 2.5% DMSO(Fluka, 41644), 50 pM ³⁵S-GTPγS(Amersham Biosciences, SJ1320)이다. pH는 7.4이다. 검사 화합물은 100% DMSO에 용해시키고 희석하며, ³⁵S-GTPγS의 부재하에 150 ㎕의 상기 검사 완충액 내에 실온에서 30분간 사전-항온처리한다. 50 ㎕의 ³⁵S-GTPγS의 첨가이후, 시금물은 실온에서 1시간동안 배양한다. 상기 검사는 세포 수집기(Packard Biosciences)를 이용한 반응 혼합물의 다중스크린 플레이트(Millipore, MAHFC1H60)로의 이전으로 종결되는데, 이들 플레이트는 차가운 10 mM Na₂HPO₄/NaH₂PO₄(70%/30%)로 세척하고, 건조시키고, 하부에서 밀봉하고, 25 ㎕ MicroScint20(Packard Biosciences, order# 6013621)의 첨가이후 상부에서 밀봉한다. 막-결합된 ³⁵S-GTPγS는 TopCount(Packard Biosciences)로 측정한다.

EC₅₀은 최대 특이적 ³⁵S-GTPγS 결합의 50 %를 유도하는 작동제(agonist)의 농도이다. 특이적인 결합은 최대 결합으로부터 비-특이적 결합을 제외함으로써 결정된다. 최대 결합은 10 μM S1P의 존재하에 다중스크린 플레이트에 결합된 양(cpm)이다. 비-특이적 결합은 상기 검사에서 작동제의 부재하에 결합의 양이다. 표 1에서는 본 발명의 일부 화합물의 EC₅₀ 수치를 보여준다. EC₅₀ 수치는 앞서 기술된 방법에 따라 결정하였다:

실시예 화합물	EC₅₀ [nM]
1	1.3
4	4.6
8	3.4
14	3.7

실시예 17: 생체내 효능의 평가

화학식 I 화합물의 효능은 정상혈압(normotensive) 수컷 Wistar 쥐에 3 내지 30 ㎎/㎏의 화학식 I 화합물의 경구 투여후 순환 림프구를 측정함으로써 평가한다. 이들 동물은 12-시간 명/암 주기의 기후-통제된 조건하에 사육하고, 정상적인 쥐 사료와 음용수에 자유롭게 접근할 수 있도록 한다. 약제 투여이전 및 투여이후 3시, 6시와 24시 시점에 혈액을 수집한다. Advia 혈액계수기(Bayer Diagnostics, Zㆌrich, Switzerland)를 이용하여 전혈에서 혈구 검사(hematology)를 수행한다.

모든 데이터는 평균±SEM으로 표시된다. 통계학적 분석은 다중 비교를 위하여 Statistica(StatSoft)와 Student-Newman-Keuls 절차를 이용한 분산 분석(ANOVA)으로 수행한다. 이러한 귀무 가설(null hypothesis)은 p<0.05일 때 거부된다.

실례로써, 표 2에서는 운반제 단독으로 처리된 동물 군에 비하여 10 ㎎/㎏의 본 발명의 화합물을 정상혈압 수컷 Wistar 쥐에 경구 투여한 이후 6시 시점에 림프구 수치에 대한 효과를 보여준다.

실시예 화합물	림프구 수치
5	-77%

Claims

화학식 (I) 화합물 또는 이런 화합물의 염:

화학식 I

A는 *-CO-CH=CH-, *-CO-CH₂CH₂-,

이고,

여기서, 별표는 화학식 (I)의 B 기에 연결된 결합을 지시하고;

B는

또는
이고;

R ¹ 은 수소, 메틸, 에틸 또는 염소이고;

R ² 는 메틸, 에틸, n-프로필 또는 염소이고;

R ³ 과 R ⁴ 는 메틸이고; 또는

R ³ 과 R ⁴ 는 에틸이고; 또는

R ³ 과 R ⁴ 는 그들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로프로필, 사이클로부틸 또는 사이클로펜틸 고리를 형성하고;

R ⁵ 는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 또는 트리플루오르메틸이고;

R ⁶ 은 메틸 또는 에틸이다.
청구항 1에 있어서, A는 *-CO-CH₂-CH₂-이고, 여기서 별표는 화학식 (I)의 B 기에 연결된 결합을 지시하는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1에 있어서, A는 *-CO-CH=CH-이고, 여기서 별표는 화학식 (I)의 B 기에 연결된 결합을 지시하는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1에 있어서, A는

이고, 여기서 별표는 화학식 (I)의 B 기에 연결된 결합을 지시하는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1에 있어서, A는

인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1에 있어서, A는

이고, 여기서 별표는 화학식 (I)의 B 기에 연결된 결합을 지시하는 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1 내지 6중 어느 한 항에 있어서, R ¹ 과 R ² 는 메틸 기인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1 내지 6중 어느 한 항에 있어서, R ¹ 은 메틸 기이고 R ² 는 에틸 기인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1 내지 8중 어느 한 항에 있어서, B는

이고, 여기서 R ³ , R ⁴ 와 R ⁵ 는 청구항 1의 화학식 (I)에서 정의된 바와 동일한 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1 내지 8중 어느 한 항에 있어서, B는

이고, 여기서 R ³ 과 R ⁴ 는 메틸이고, R ⁵ 는 메틸 또는 에틸인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1 내지 8중 어느 한 항에 있어서, B는

이고, 여기서 R ⁶ 은 청구항 1의 화학식 (I)에서 정의된 바와 동일한 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1에 있어서, A는 *-CO-CH=CH-, *-CO-CH₂CH₂-,

, 또는
이고, 여기서 별표는 화학식 (I)의 B 기에 연결된 결합을 지시하고;

R ¹ 은 메틸, 에틸 또는 염소이고;

R ² 는 메틸 또는 에틸이고;

R ³ 과 R ⁴ 는 메틸이고; 또는

R ³ 과 R ⁴ 는 에틸이고;

R ⁵ 와 R ⁶ 은 메틸 또는 에틸인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이런 화합물의 염.
청구항 1에 있어서, 아래에서 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물:

3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-1-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-프로페논,

1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-프로페논,

3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-1-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-프로판-1-원,

1-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-3-(2-에틸-6-메틸-피리딘-4-일)-프로판-1-원,

2-에틸-6-메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘,

2,6-디에틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘,

2-클로로-6-메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘,

2,6-디메틸-4-[5-((1aS,5aR)-1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티 아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘,

2-에틸-4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-6-메틸-피리딘,

4-[5-(5,5-디에틸-3-메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-2-에틸-6-메틸-피리딘,

4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-2,6-디메틸-피리딘,

2,6-디메틸-4-[5-(3,5,5-트리에틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-피리딘,

2-클로로-4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,3,4]옥사디아졸-2-일]-6-메틸-피리딘, 또는

이들 화합물의 염.
청구항 1에 있어서, 아래에서 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물:

2-에틸-6-메틸-4-[5-(1,1,2-트리메틸-1,1a,5,5a-테트라하이드로-3-티아-사이클로프로파[a]펜탈렌-4-일)-[1,2,4]옥사디아졸-3-일]-피리딘,

2-에틸-4-[5-(3-에틸-5,5-디메틸-4,5,6,7-테트라하이드로-벤조[c]티오펜-1-일)-[1,2,4]옥사디아졸-3-일]-6-메틸-피리딘, 또는

이들 화합물의 염.
청구항 1 내지 14중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염 및 제약학적으로 허용되는 담체를 함유하는 제약학적 조성물.
약제로서 이용되는 청구항 1 내지 14중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염, 또는 청구항 15에 따른 제약학적 조성물.
활성화된 면역계와 연관된 질환이나 질병의 예방 또는 치료를 위한 제약학적 조성물의 제조에서 청구항 1 내지 14중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염의 용도.
청구항 17에 있어서, 질환이나 질병은 신장, 간, 심장과 폐에서 선택되는 이식된 장기의 거부반응(rejection); 줄기 세포 이식(stem cell transplantation)에 의해 유발된 이식편-대-숙주 질환(graft-versus-host disease); 류머티스성 관절염(rheumatoid arthritis), 다발성 경화증(multiple sclerosis), 건선(psoriasis), 건선성 관절염(psoriatic arthritis), 크론병(Crohn's disease), 하시모토 갑상선염(Hashimoto's thyroiditis)에서 선택되는 자가면역 증후군(autoimmune syndrome); 아토피성 피부염(atopic dermatitis)으로 구성되는 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 용도.
활성화된 면역계와 연관된 질환이나 질병의 예방 또는 치료를 위하여, 면역 억제제, 코르티코스테로이드, NSAID, 세포독성제, 부착 분자 저해물질, 사이토킨, 사이토킨 저해물질, 사이토킨 수용체 길항물질과 재조합 사이토킨 수용체로 구성되는 군에서 선택되는 한가지이상의 작용제와 병용되는 제약학적 조성물의 제조를 위한 청구항 1 내지 14중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 제약학적으로 허용되는 염의 용도.