KR20070087813A - 현초 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지용화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 현초 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 본 발명의 화장료 조성물은 피부에 대한 자극 없이, 섬유아세포의 증식을 촉진하고, 콜라겐 합성을 증진시키며, 그리고 보습 효과, 항산화효과를 나타내기 때문에, 피부의 노화 방지에 매우 유용하다.

피부 노화, 현초, 화장료, 주름, 보습, 콜라겐, 항산화

Description

현초 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물{Cosmetic Compositions for Preventing Skin Aging Comprising Extract from Geranioum nepalense as Active Ingredient}

본 발명은 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부의 1차적 기능은 온도, 습도 및 자외선 등과 같은 외부 자극으로부터 인체를 보호하는 기능을 담당한다. 그러나, 외부로부터 강한 자외선, 스트레스 및 영양결핍 등과 같은 외부 자극을 받게 되면 피부는 주름 생성, 탄력 손실, 각질화 등과 같은 피부의 노화가 발생하게 된다. 피부의 구조 중에서 진피층에 존재하는 교원섬유 (collagen)와 탄력섬유 (elastin)는 주요 단백질로서 피부의 탄력을 주관한다. 교원섬유의 생합성은 피부의 내·외적인 영양을 받는데, 내적으로는 자연노화 (에스트로겐의 감소)로 인해 세포 활성의 감소가 발생하여 교원질 섬유의 감소가 일어난다. 외적인 요인으로는 자외선의 과량 조사 및 스트레스 등으로 인해 생성된 활성 산소 (자유 라디칼)가 단백질의 -SH 기와 반응하여 효소의 활성을 저 해시키거나, 콜라겐, 엘라스틴 등을 분해시키는 효소 (Matrix Metalloproteinases: MMPS)인 콜라겐나아제의 발현을 증가시켜 피부의 주름 및 탄력을 감소시키는 노화 현상을 유발한다. 특히, 자외선의 과량 조사는 연령이 높아짐에 따라 피부 조직이 점차 변화하면서 발생하는 주름살, 피부의 두꺼워짐, 피부의 처짐, 피부 탄력의 상실, 피부의 거칠어짐, 피부의 건조함 및 피부 얼룩 등을 가속화시키는 것으로 알려져 있다.

현재, 이러한 피부 노화를 억제하거나 진행 속도를 완화시키기 위하여, 레티놀, 레티노이드, 비타민 C, 플라보노이드 및 토코페롤 등의 여러 가지 피부 보호 성분이 함유된 화장료 또는 피부 보호제가 개발되고 있으나, 이와 같은 화장료 또는 피부 보호제는 최종적인 제형에 있어서 역가가 떨어져 그 효능이 경미하고, 피부 자극이 심한 문제점을 지니고 있다.

한편, 대한민국 특허출원 제1997-60849호는 레티놀, 알파하이드록시산, 비타민류 특히 베타 하이드록시산의 세린을 함유한 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 개시하고 있고, 대한민국 특허출원 제1998-18636호는 폴리아미노 중합체를 유효 성분으로 포함하는 노화 방지용 화장료 조성물을 개시하고 있다. 또한, 대한민국 특허출원 제1994-7002880호는 은행추출물 및 최소한 하나의 폴리페놀 유도체를 함유하는 항산화제로서의 상승작용을 하는 화장료 조성물을 개시하고 있으며, 대한민국 특허출원 제1996-69236호는 L-2-옥소티아졸리딘-4-카르복실산 유도체를 포함하는 피부 노화 방지용 조성물을 개시하고 있다.

본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 특허 문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 특허의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.

본 발명자들은 부작용이 없는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 개발하고자 예의 연구 노력한 결과, 현초 추출물을 사용하는 경우에는 상술한 부작용, 특히 피부 자극성이 거의 없이 우수한 피부 노화 방지 효과를 나타냄을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 현초 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 실시예 및 청구범위에 의해 보다 명확하게 된다.

본 발명은 현초 (Geranioum nepalense) 추출물을 유효 성분으로 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명자들은 피부에 대하여 부작용을 나타내는 종래의 피부 노화 방지용 화장료 조성물의 문제점을 개선하고자, 자생하는 생약에 대한 연구를 수행하였고, 그 결과 현초 추출물이 피부에 탄력을 부여하는 성분인 콜라겐 합성을 촉진시키고, 콜라겐 합성이 주로 이루어지는 섬유 아세포의 증식을 촉진하며, 더불어 피부의 보습력을 증강시키며 항산화력에 의해 피부 노화를 억제함을 확인하였다. 또한 기존의 문제점인 피부자극 부작용이 거의 없다는 것을 확인하였다.

본 발명의 조성물에서 유효 성분으로 함유되는 현초(玄草)는 쥐손이풀목 쥐손이풀과의 식물로 높이 30-50cm 정도 자라는 여러해살이 풀이다. 현초의 다른 이름으로는 노학초(老鶴草), 서장초, 광지풀, 공등, 관근 및 이질풀 등으로 불리어진다.

현초는 주로 황해도, 강원도 이남의 들이나 산기슭에서 자라며 일본, 만주, 아무르 지방에도 분포한다. 속명 제라니움(geranium)은 희랍어 제라노스(geranos)에서 비롯하며, 종속명 네팔렌스(nepalense)는 ‘네팔의’란 뜻이다. 이질, 설사,복통 등에 효과가 좋다고 하여 이질풀이라는 이름이 붙었고, 잎의 모양이 쥐의 손과 비슷하다고 해서 서장초라고도 불린다. 햇볕이 잘 드는 노지에서 월동 가능하다. 잡초처럼 풀밭이나 평지의 길가 등 주변에서 흔히 볼 수 있으며, 씨뿌리기와 포기나누기로 번식한다. 비슷한 종류로는 쥐손이풀, 둥근이질풀 및 선이질풀 등이 있다. 일반적으로 약용하나, 정원에 심어 관상용으로도 이용한다.

이질풀을 달여 마시면 어떠한 설사병도 말끔히 낫기 때문에 일본에서는 이를5대 민간 영약으로 부른다. 꽃이 필 무렵 풀 전체를 채취해서 말린 것을 현초라고 하는데, 성분으로는 탄닌(tannin) 및 푸로신(furosin) 등이 들어 있다. 지사제, 정장제, 항진균성 효능이 있어 위장복통, 변비, 종기, 감기, 피부병 등을 치료하는 효과가 있다. 민간에서는 종기와 피부병 등에 외용한다.

본 명세서에서 용어 ‘현초 추출물’은 현초의 다양한 기관 (예: 잎, 꽃, 줄기 및 뿌리 등)으로부터 추출하여 얻은 것을 의미하며, 바람직하게는 현초의 전초로부터 추출하여 얻은 것이다.

본 발명에서의 현초 추출물은 당업계에 공지된 다양한 방법을 통해 얻어질 수 있고, 바람직하게는 (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (예: 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), (c) 아세톤, (d) 에틸 아세테이트, (e) 클로로포름 또는 (f) 1,3-부틸렌글리콜을 추출 용매로 하여 현초로부터 얻은 것이다. 바람직한 추출 용매는 알코올이고, 더욱 바람직하게는 에탄올이며, 가장 바람직하게는 70% 에탄올이다. 상기 추출 용매의 적합한 양은 현초 건조 중량의 50 내지 100배이고, 바람직하게는 60 내지 80배이며, 가장 바람직하게는 75배이다.

한편, 본 발명의 추출물은 상기한 추출용매 뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 현초 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.

본 발명의 현초 추출물은 다음의 단계를 포함하는 과정에 의해 제조된다: (a) 현초에 50-100배의 물, 탄소수 1-4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트 및 1,3 부틸렌 글리콜로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 첨가하는 단계; (b) 단계 (a)의 용매 첨가된 현초를 환류시켜 2-6시간 동안 가열 추출하는 단계; (c) 상기 추출 단계 (b)를 1회 더 수행하는 단계; 및 (d) 추출한 성분을 여과 및 건조하는 단계.

본 발명의 구체적인 일 실시예에 따르면, 상술한 추출 과정은 다음과 같이 실시된다: 우선, 원료가 되는 현초를 세척, 건조 및 작은 조각으로 파쇄한 다음 70% 에틸 알코올을 현초 건조중량의 75배 부피비로 첨가하여 냉각 콘덴서가 장치된 환류 추출기에 넣는다. 이를 여과한 뒤 추출 단계를 1회 더 수행한 후 여과하고 감압증발기로 건조하여 현초 추출물을 얻는다.

또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출법에 의한 추출물 뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 현초 추출물에 포함되는 것이다.

본 발명의 현초 추출물은 감압 증류, 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.

본 발명의 바람직한 구현 예에서, 현초 추출물의 함량은 전체 화장료 조성물에 대하여 0.0001 내지 10.0 중량%이고, 보다 바람직하게는 0.0005 내지 10.0 중량%이며, 가장 바람직하게는 0.005 내지 5.0 중량%이다. 현초 추출물의 함량이 0.0001 중량% 미만일 경우에는 뚜렷한 피부 노화 방지 효과, 특히 주름 개선 효과를 기대할 수 없고, 현초 추출물의 함량이 10.0 중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않는다.

본 발명의 화장품 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 현초 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 피부 자극완화용 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해 화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 노화 방지의 용도를 갖는다. 본 명세서에서 용어 ‘피부 노화 방지’는 피부 노화 예방 및 치료를 포괄적으로 포함하는 의미를 갖는다. 본 발명의 화장료 조성물은 섬유아세포의 증식 촉진과 콜라겐 합성의 촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선, 라디칼에 대한 피부보호 및 보습력 향상을 통하여 피부 노화를 방지하며, 이와 같은 사실은 하기의 실시예에 명시되어 있다. 따라서, 본 발명의 용도인 피부 노화 방지는 주름 개선, 보습력 개선, 항산화 효과에 의한 피부보호 및 피부 탄력 개선 용도를 포함하는 것으로 해석된다.

이하, 실시 예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시 예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시 예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

제조예 1: 각종 추출 용매를 이용한 현초 추출물의 수득

제조예 1-a

현초(현초의 전초)를 정제수로 세척하고 건조시켜서, 분말화한 현초 가루 20 g을 70% 에탄올 용액 1.5ℓ에 첨가하고, 냉각 콘덴서가 장착된 환류 추출기에서 4시간 동안 가열 추출하였다. 그런 다음, 수득한 추출액을 300 메쉬 여과포로 여과하고, 잔사를 동일한 방법으로 1회 더 추출한 후, 각각의 추출액을 합하여 와트만 5번 여과지로 다시 여과하고, 감압 농축기를 이용하여 용매를 제거하고, 동결 건조하여 건조 중량 3.74 g의 현초 추출물을 수득하였다.

제조예 1-b

현초를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 현초 가루 20 g을 1,3-부틸렌글리콜 용액 1.5ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 2.89 g의 현초 추출물을 수득하였다.

제조예 1-c

현초를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 현초 가루 20 g을 아세톤 1.5ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 3.03 g의 현초 추출물을 수득하였다.

제조예 1-d

현초를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 현초 가루 20 g을 정제수 1.5ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 1.72 g의 현초 추출물을 수득하였다.

제조예 1-e

현초를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 현초 가루 20 g을 70% 메탄올 1.5ℓ에 첨가하고, 상기 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 3.21 g의 현초 추출물을 수득하였다.

제조예 1-f

현초를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 현초 가루 20 g을 에틸아세테이트 용액 1.5ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 2.65 g의 현초 추출물을 수득하였다.

제조예 1-g

현초를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 현초가루 20 g을 클로로포름 용액 1.5ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 2.09 g의 현초 추출물을 수득하였다.

제조예 1-h

현초를 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 현초 가루 20 g을 노말 부탄올 용액 1.5ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 3.45 g의 현초 추출물을 수득하였다.

실험예 1: 섬유아세포 증식 효과

인체 정상 섬유아세포 (한국 세포주은행)를 96-웰 마이크로 플레이트(96-well microplate)의 각 웰에 1 x 10⁴ 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지 (sigma사 구입)에서 24시간 동안 37℃에서 배양하였다. 이어, 상기 실시예 1-a 내지 1-h에서 제조한 각각의 현초 추출물이 최종 농도 100 ㎍/㎖로 포함된 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 실험군 및 현초 추출물이 포함되지 않고 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 대조군을 24시간 동안 추가로 배양하였다. 그런 다음, MTT 용액 (3-(4,5-디메틸티아졸-2-일) 2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드: 5 mg/㎖)을 각웰에 10 ㎕씩 첨가하고, 4시간 동안 배양한 후, 배지를 제거하고, 각 웰 당 100 ㎕의 디메틸 설폭시드 용액을 가하여 20분 동안 진탕시키고, 마이크로 플레이트 판독기 (microplate reader, Molecular Devices, 미합중국)를 이용하여 570 nm에서 상층액의 흡광도를 측정하였다. 측정값을 하기의 수학식 1에 대입하여 세포 증식 효과를 산출하고, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

추출물	흡광도(570nm)	세포증식효과(%)
대조군	0.432	-
제조예 1-a	0.545	26.2
제조예 1-b	0.513	18.8
제조예 1-c	0.522	20.8
제조예 1-d	0.531	22.9
제조예 1-e	0.493	14.1
제조예 1-f	0.513	18.8
제조예 1-g	0.509	17.8
제조예 1-h	0.520	20.4

상기 표 1에서 알 수 있듯이, 현초 추출물을 처리하지 않은 대조군은 세포증식효과가 전혀 없었으나, 현초 추출물을 100 ㎍/㎖ 농도로 처리한 실험군에서는 약 14.1-26.2%의 섬유아세포 증식 효과를 나타내었다. 현초 추출물 중에서는 70% 에탄올을 추출용매로 사용하여 추출한 제조예 1-a의 현초 추출물이 가장 우수한 섬유아세포 증식 효과를 나타내었다.

실험예 2: 현초 추출물의 농도에 따른 세포증식 효과

상기 실험예 1에서 섬유아세포 증식 효과가 가장 우수한 것으로 확인된 상기 제조예 1-a에서 제조된 현초 추출물을 50, 100 또는 200 ㎍/㎖ 농도로 사용한 것을 제외하고는, 실험예 1과 동일한 방법으로 세포 증식 효과를 측정하였고, 그 결과는 하기 표 2에 나타나 있다.

농도 (㎍/㎖)	흡광도 (570 nm)	세포 증식 효과 (%)
대조군	0.333	-
50	0.400	20.1
100	0.424	27.3
200	0.460	38.1

상기 표 2에서 볼 수 있듯이, 현초 추출물은 농도-의존적으로 섬유아세포의 증식을 촉진시킴을 알 수 있고, 더불어 상기 실험예 1에서의 결과가 유의함을 확인할 수 있었다.

실험예 3: 콜라겐 합성 증진 효과

인체 정상 섬유아세포 (한국 세포주은행)를 96-웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 2 x 10⁴ 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지에서 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이어, 상기 제조예 1-a에서 제조한 현초 추출물을 최종 농도 50, 100 및 200 ㎍/㎖로 각각 포함하고 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 실험군과 현초 추출물이 포함되지 않은 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 대조군을 24시간 동안 추가로 배양하고, 아스코르브산 (50 g/㎖)을 첨가하여 콜라겐 합성을 촉진시킨 다음, 다시 24시간 동안 추가로 배양하였다. 그런 다음, 각 웰을 세척하고 혈청이 함유되지 않은 DMEM 배지로 교체한 후 24시간 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 프로콜라겐 (procollagen) 타입 I C-펩타이드 (PICP) 양을 키트 (Takara, 일본국)를 이용하여 새로 합성된 콜라겐 양을 측정하였다. PICP 양은 ng/2x10⁴ 세포로 환산하였으며, 그 결과는 하기 표 3에 나타나 있다.

농도 (㎍/㎖)	콜라겐 합성량 (ng/2 x 104)
대조군	137
50	178
100	199
200	227

상기 표 3에서 볼 수 있듯이, 현초 추출물은 농도-의존적으로 콜라겐의 합성을 증가시킬 수 있었으며, 이에 현초 추출물이 탁월한 콜라겐 합성 증진 효과를 나타냄을 알 수 있었다.

실시예 및 비교 실시예

하기 표 4의 조성비를 가지는 유연 화장수 화장료 조성물에 제조예 1-a에서 제조한 현초 추출물 0.6 중량%가 포함된 실시예 및 현초 추출물이 포함되지 않은 비교 실시예를 제조하고, 하기 실험예 4에 이용하였다.

성분	함량(중량%)
글리세린	5.1
프로필렌글리콜	4.2
토코페릴아세테이트	3.0
유동파라핀	4.6
트리에탄올아민	1.0
스쿠알란	3.1
마카다미아너트오일	2.5
폴리솔베이트60	1.6
솔비탄세스퀴롤레이트	1.6
프로필파라벤	0.6
카르복실비닐폴리머	1.5
향	미량
방부제	미량
정제수	잔량
계	100

실험예 4: 보습 효과

상기 실시예 및 비교 실시예에서 제조된 각 화장료의 보습력을 평가하기 위하여, 각 화장료가 도포된 피부를 대상으로 하여 수분 보유능 및 수분 증발량을 다음과 같이 측정하였다.

실험예 4-1: 수분 보유능의 측정

22℃ 및 상대습도 45%의 항온 항습실에서 상기 실시예 및 비교 실시예에서 제조된 각 화장료를 30명의 피시험자 하박 안쪽에 일정량 (0.03 g/16 ㎠)을 도포하고, 도포전, 도포 1시간 후 및 도포 2시간 후의 피부의 수분 함량을 측정하였으며, 아무런 처리를 하지 않은 정상 피부를 대조군으로 사용하였다. 측정 기기는 피부의 수분 함량에 따른 피부의 전기 용량을 측정하여 보습력을 측정하는 수분 함량측정기 (corneometer CM820, Conrage + Khazaka사, 독일연방국)를 사용하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타나 있다.

구 분	실시예	비교 실시예	대조군
도포전 피부 전기전도도	50.1	52.3	51.7
도포 1시간후 피부 전기전도도	75.9	64.8	52.3
도포 2시간후 피부 전기전도도	70.5	55.8	51.6

실험예 4-2: 수분 증발량의 측정

팔의 상박 부위에 테입 스트리핑 (tape stripping)을 실시하여 피부의 방어막을 약화시킨 후, 실험예 4-1과 동일한 방법으로 피실험자에게 각 화장료를 도포한 후, 수분증발량기 (TEWA meter, koln, 독일연방국)를 이용하여 12시간 마다 1분 간격으로 5회씩 수분 증발량을 측정하여 평균값을 구하였다. 그 결과는 하기 표 6과 같다.

구 분	실시예	비교 실시예	대조군
0시간 후 수분증발량	5.1%	5.3%	4.9%
12시간 후 수분증발량	-9.1%	-3.5%	-0.3%
24시간 후 수분증발량	-7.6%	-1.9%	-0.1%
36시간 후 수분증발량	-3.9%	1.9%	0.1%
48시간 후 수분증발량	-2.1%	2.9%	-0.2%

상기 실험예 4-1 및 4-2의 결과에서 보듯이, 본 발명의 현초 추출물을 함유하는 실시예의 화장료는 현초 추출물을 함유하지 않는 비교 실시예의 화장료에 비하여 피부의 전기 전도도가 높고, 적은 수분 증발량을 나타낸다. 따라서, 본 발명의 화장료가 우수한 보습 효과를 나타냄을 알 수 있다.

실험예 5: 피부 자극성 시험

상기 제조예에서 따라 제조된 각 현초 추출물의 피부 자극성을 알아보기 위하여, 건강한 성인 남·여 30명을 대상으로 양팔 하박부에 5×20 ㎝ 부위에 실시예, 비교 실시예의 화장료 일정량 (약 0.1 g)을 24시간 동안 첩포한 후, 제거하고 1시간 및 24시간이 경과한 다음, 하기의 판정 기준에 의하여 육안으로 피부 상태 변화를 판독하였고, 자극율은 다음 수학식 2에 따라 계산하였다. 실험 결과는 하기의 표 7에 나타나 있다.

판정기준

- : 홍반이나 특이한 현상 없음

+- : 주위보다 약간 붉어짐

+ : 주위보다 현저히 붉어짐

++ : 주위보다 심하게 붉어지고 부풀음

제조예	판정결과				자극율 (%)
	++	+	+-	-
실시예	-	-	1	29	1.1
비교실시예	-	-	1	29	1.1

상기 표 7의 피부 자극성 실험 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 현초 추출물은 화장료에 첨가하더라도 피부 자극을 나타내지 않음을 알 수 있다.

실험예 6: 항산화효과 시험

6-1. DPPH 활성 억제 효과

60M 농도의 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical) 용액을 준비하였다. 그런 다음 제조예 1-a의 현초 추출물을 농도별로 조정하고(25, 50, 100, 200 및 400 ㎍/㎖) 여기에 DPPH 용액을 1:1 비율로 석은 다음 볼텍싱하였다. 30분 동안 상온에서 반응시킨 후 520 nm에서 흡광도를 측정하여 하기 수학식 3에 따라 자유 라디칼 소거 효과 (free radical scavenging activity, SC)를 구하여 그 결과를 표 8에 나타내었다. 대조군은 시료대신 에탄올을 사용하였다.

농도(㎍/㎖)	자유 라디칼 소거 효과
대조군	-0.05%
25	30.49%
50	45.47%
100	65.36%
200	65.54%
400	75.20%

6-2. 지질 과산화 억제 효과

지질과산화 억제 효과는 쥐의 간으로부터 분리한 마이크로좀(1㎎ 단백질/㎖) 250 ㎕와 세로토닌 성분 10 ppm에 2 mM 아스코르브산(ascorbic acid) 50 ㎕, 0.2 mM FeSO₄ㆍ7H₂O를 첨가한 것과 17 mM ADP 50 ㎕, 4 mM NADPH 50 ㎕ 및 1 mM FeCl₃ 50 ㎕를 첨가한 것을 37℃에서 30분간 반응한 후 TBA 방법을 이용하여 530 nm에서 흡광도를 측정하였다. 하기 수학식 4에 따라 지질 과산화 억제 효과를 계산하여 표 9에 그 결과를 나타내었다.

농도(㎍/㎖)	지질과산화 억제 효과
50	12.47%
100	25.36%
200	55.80%
400	63.74%

상기 표 8 및 표 9에서 보는 바와 같이, 본 발명의 현초 추출물은 농도-의존적으로 자유 라디칼 소거 활성을 증가시키고 지질과산화 억제 활성을 증가시키므로 우수한 항산화력을 나타냄을 알 수 있었다.

상기 실험예를 근거로 피부 노화 방지 효과가 우수한 현초 추출물을 함유하는 여러 가용화제형과 유화제형의 화장료 조성을 제시한다. 아래와 같은 제형예에서 이를 상세히 설명하지만 본 발명의 조성물이 하기 예에만 한정되는 것은 아니다.

제형예 1: 유연화장수 (스킨로션)

하기 표 10의 조성으로 제조예 1-a의 현초 추출물을 함유하는 유연화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
현초 추출물	2.5
글리세린	5.0
1,3-부틸렌글리콜	3.0
PEG 1500	1.0
알란토인	0.1
DL-판테놀	0.3
EDTA-2Na	0.02
벤조페논-9	0.04
소듐 히아루로네이트	5.0
에탄올	10.0
옥틱도데세스-16	0.2
폴리솔베이트 20	0.2
향	0.02
유니사이드-유 13	0.01
그린 #13	0.001
증류수	잔량
합계	100

제형예 2: 수렴화장수

하기 표 11의 조성으로 제조예 1-a의 현초 추출물을 함유하는 수렴화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
현초 추출물	2.5
글리세린	2.0
1,3-부틸렌글리콜	2.0
알란토인	0.2
DL-판테놀	0.2
EDTA-2Na	0.02
벤조페논-9	0.04
소듐 히아루로네이트	3.0
에탄올	15.0
폴리솔베이트 20	0.3
위치하겔 추출물	2.0
구연산	미량
향	0.02
유니사이드-유 13	0.01
그린 #13	0.001
증류수	잔량
합계	100

제형예 3: 영양화장수

하기 표 12의 조성으로 제조예 1-a의 현초 추출물을 함유하는 영양화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
현초 추출물	2.5
글리세릴 스테아레이트 SE	1.5
세테아릴알콜	1.5
라놀린	1.5
폴리솔베이트 60	1.3
솔비탄스테아레이트	0.5
경화식물유	1.0
광물유	5.0
스쿠알란	3.0
트리옥타노인	2.0
디메치콘	0.8
초산 토코페롤	0.5
카르복시비닐 폴리머	0.12
글리세린	5.0
1,3-부틸렌글리콜	3.0
소듐히아루로네이트	5.0
트리에탄올아민	0.12
향	0.01
유니사이드-유 13	0.02
그린 #3	0.003
증류수	잔량
합계	100

제형예 4: 영양크림

하기 표 13의 조성으로 제조예 1-a의 현초 추출물을 함유하는 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
현초 추출물	6.0
친유형 모노스테아린산글리세린	2.0
세테아릴알콜	2.2
스테아린산	1.5
밀납	1.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄스테아레이트	0.6
경화식물유	1.0
스쿠알란	3.0
광물유	5.0
트리옥타노인	5.0
디메치콘	1.0
소듐마그네슘실리케이트	0.1
글리세린	5.0
베타인	3.0
트리에탄올아민	1.0
소듐히아루로네이트	4.0
향	0.01
유니사이드-유13	0.02
그린 #3	0.003
증류수	잔량
합계	100

제형예 5: 맛사지 크림

하기 표 14의 조성으로 제조예 1-a의 현초 추출물을 함유하는 맛사지 크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
현초 추출물	5.0
친유형 모노스테아린산 글리세린	1.5
세테아릴알콜	1.5
스테아린산	1.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄스테아레이트	0.6
이소스테아릴 이소스테레이트	5.0
스쿠알란	5.0
광물유	35.0
디메치콘	0.5
히드록시에틸셀룰로오스	0.12
글리세린	6.0
트리에탄올아민	0.7
향	0.01
유니사이드-유13	0.02
그린 #3	0.003
증류수	잔량
합계	100

제형예 6: 에센스

하기의 표 15의 조성으로 제조예 1-a의 현초 추출물을 함유하는 에센스를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
현초 추출물	5.0
글리세린	10.0
베타인	5.0
PEG 1500	2.0
알란토인	0.1
DL-판테놀	0.3
EDTA-2Na	0.02
벤조페논-9	0.04
히드록시에틸 셀룰로오스	0.1
소듐 히아루로네이트	8.0
카르복시비닐폴리머	0.2
트리에탄올아민	0.18
옥틸도데칸올	0.3
옥틸도데세스-16	0.4
에탄올	6.0
향	0.02
유니사이드-유 13	0.01
그린 #3	0.001
증류수	잔량
합계	100

제형예 7: 팩

하기 표 16의 조성으로 제조예 1-a의 현초 추출물을 함유하는 팩을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량 (중량%)
현초 추출물	2.5
폴리비닐알콜	15.0
셀룰로오스 검	0.15
글리세린	3.0
PEG 1500	2.0
시이크데스트린	0.15
DL-판테놀	0.4
알란토인	0.1
글리시리진산 모노암모늄	0.3
니코틴아미드	0.5
에탄올	6.0
PEG 40 경화피마자유	0.3
향	미량
유니사이드-유13	0.02
그린 #3	0.003
증류수	잔량
합계	100

이상에서 상세히 설명하였듯이, 본 발명은 현초 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 현초 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료는 섬유아세포의 증식 및 콜라겐 합성을 촉진시키고, 피부의 보습력을 개선하며, 라디칼을 제거함으로써 피부 노화에 아주 효과적이다. 또한 기존의 피부 노화제가 갖고 있던 피부에 대한 자극성을 해결하여 부작용이 없는 피부 노화 방지를 위한 화장료 조성물을 제공할 수 있었다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (5)

1. 현초 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
2. 제 1 항에 있어서, 상기 현초 추출물은 (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, (c) 아세톤, (d) 에틸 아세테이트, (e) 클로로포름 또는 (f) 1,3-부틸렌글리콜을 추출 용매로 하여 수득한 것임을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
3. 제 2 항에 있어서, 상기 추출 용매는 에탄올인 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
4. 제 1 항에 있어서, 상기 현초 추출물의 양은 전체 화장료 조성물에 대하여 0.0001-10.0 중량%인 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
5. 제 1 항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.