KR20070076656A - A cosmetic composition containing as available ingredient the extracts of pinus koraiensis - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 유효성분으로 해송자 추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물 및 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명에 의한 화장료 조성물은 유효성분으로 해송자 추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물 및 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유함으로써, 우수한 각질형성세포 성장촉진 효과, 활성산소 소거효과, MMP-1의 생합성 감소를 통한 타입 1 프로콜라겐의 생합성 촉진 효과, 노화방지 효과 및 피부보습 효과를 나타낸다. The present invention relates to a cosmetic composition further comprising at least one selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, quince extract and giant extract as an active ingredient. In more detail, the cosmetic composition according to the present invention further contains one or more selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract and giant extract in the pine cone extract as an active ingredient, excellent keratinocyte growth promoting effect, It shows active oxygen scavenging effect, promoting biosynthesis of type 1 procollagen by reducing biosynthesis of MMP-1, anti-aging effect and skin moisturizing effect.
피부는 인체의 일차 방어막으로서 체내의 제기관을 온도 및 습도 변화와 자외선, 공해물질 등 외부환경의 자극으로부터 보호해주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에 중요한 역할을 하고 있다. 그러나, 자외선, 외부로부터 받는 과도한 물리적, 화학적 자극 및 스트레스, 영양결핍 등은 피부의 정상기능을 저하시키고 탄력손실, 각질화, 주름생성 등의 피부 노화현상을 촉진시키게 된다. Skin is the body's primary protective film that protects organs in the body from temperature and humidity changes, stimuli from the external environment such as UV and pollutants, and plays an important role in maintaining homeostasis such as body temperature control. However, ultraviolet rays, excessive physical and chemical stimuli from the outside, stress, malnutrition, etc., lowers the normal function of the skin and promotes skin aging such as loss of elasticity, keratinization and wrinkle formation.
특히, 각질세포가 차례차례로 계속해서 만들어지고, 최외층의 오래된 각질세포가 때때로 이탈해가므로 표피가 일정한 두께를 유지하게 되는 각화과정이 순조롭지 못하면 비정상적인 각질 세포가 생성되고 피부 표면에 쌓여 각질층이 두꺼워지게 되어 피부가 거칠어지고 칙칙해지며, 미세한 잔주름이 생기게 되고 결국 피부 노화가 진행되는 것이다. 또한, 자외선에 의해 생성되는 활성산소 및 피부기질의 분해에 관련된 자외선에 의한 MMP-1의 생합성을 통한 타입 1 프로콜라겐의 생합성 감소도 피부 노화와 관련이 있다. In particular, keratinocytes are made in turn, and the outermost layers of old keratinocytes sometimes deviate, so if the keratinization process that maintains a constant thickness of the epidermis is not smooth, abnormal keratinocytes are produced and accumulated on the skin surface. The thickened skin becomes rough and dull, fine wrinkles are generated, and eventually the skin ages. In addition, the decrease in biosynthesis of type 1 procollagen through the biosynthesis of MMP-1 by ultraviolet rays related to the decomposition of free radicals and skin substrates produced by ultraviolet rays is also associated with skin aging.
따라서, 이러한 현상을 방지하고 보다 건강하고 탄력 있는 피부를 유지하기 위하여 종래 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻은 생리활성물질들이 강화된 화장품을 사용함으로써, 피부의 고유기능을 유지시키고 피부세포를 활성화시켜 피부노화를 효과적으로 억제하기 위한 노력이 있어 왔다. 그러나, 기존의 화장품 원료들은 대부분 효능이 미진하거나 피부 부작용을 유발하는 등 여러 가지 문제점을 가지고 있다.Therefore, in order to prevent such a phenomenon and maintain a healthier and more elastic skin, by using cosmetics fortified with conventional bioactive substances obtained from various animals, plants, microorganisms, etc., it is possible to maintain the unique function of the skin and activate skin cells. Efforts have been made to effectively suppress skin aging. However, conventional cosmetic raw materials have many problems, such as most of them are ineffective or cause skin side effects.
이에, 본 발명자들은 천연물 중에서 피부 부작용을 유발하지 않으면서 피부보습 효과 및 피부 노화 방지효과를 가지는 원료를 찾기 위해 노력한 결과, 해송자 추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물 및 거승자 추출물로 이루어 진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유하는 조성물이 각질형성세포 성장촉진 효과, 활성산소 소거 효과, MMP-1의 생합성을 감소시켜 타입 1 프로콜라겐의 생합성을 촉진하는 효과, 노화방지 효과 및 피부보습 효과가 있음을 발견하고 본 발명을 완성하였다. Accordingly, the present inventors have tried to find a raw material having a skin moisturizing effect and skin anti-aging effect without causing skin side effects among natural products, the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract and seunggi extract in the sea berry extract The composition further contains at least one selected from keratinocyte growth promoting effect, free radical scavenging effect, reducing the biosynthesis of MMP-1, promoting the biosynthesis of type 1 procollagen, anti-aging and skin moisturizing effect. And the present invention was completed.
따라서, 본 발명의 목적은 유효성분으로 해송자 추출물 추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물 및 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유하여 각질형성세포 성장촉진 효과, 활성산소 소거효과, MMP-1의 생합성 감소를 통한 타입 1 프로콜라겐의 생합성 촉진 효과, 노화방지 효과 및 피부보습 효과를 갖는 화장료 조성물을 제공하는 것이다. Accordingly, an object of the present invention is an active ingredient containing at least one selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract and giant extract as an active ingredient keratinocyte growth promoting effect, free radical scavenging effect, MMP It is to provide a cosmetic composition having a biosynthesis promoting effect, anti-aging effect and skin moisturizing effect of type 1 procollagen through reduction of -1 biosynthesis.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 의한 화장료 조성물은 유효성분으로 해송자 추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물 및 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유하는 것을 특징으로 한다. 상기 본 발명에 의한 화장료 조성물은 상기 유효성분을 함유함으로써 우수한 각질형성세포 성장촉진 효과, 활성산소 소거효과, MMP-1의 생합성 감소를 통한 타입 1 프로콜라겐의 생합성 촉진 효과, 노화방지 효과 및 피부보습 효과를 나타냄을 특징으로 한다. In order to achieve the above object, the cosmetic composition according to the present invention is characterized in that it further contains at least one selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract, and giant extract as an active ingredient. The cosmetic composition according to the present invention, by containing the active ingredient, excellent keratinocyte growth promoting effect, active oxygen scavenging effect, biosynthesis promoting effect of type 1 procollagen through the reduction of biosynthesis of MMP-1, anti-aging effect and skin moisturizing It is characterized by showing the effect.
이하, 본 발명에 의한 화장료 조성물의 각 유효성분을 자세히 설명한다. Hereinafter, each active ingredient of the cosmetic composition according to the present invention will be described in detail.
해송자(Pinus koraiensis)는 소나무과에 속하는 잣나무의 여문 씨를 말린 것으로서, 한방에서 잣을 약재로 이르는 말로 백자(柏子), 송자(松子), 실백(實柏)이라고도 한다. 이는 솔방울처럼 생긴 구과(毬果)에 들어 있으며, 종자는 삼각난상형이다. 옛날부터 해송자는 자양강장제로 많이 사용하였으며, 병후 회복기에 먹으면 좋은 것으로 알려져 있다. 또한, 이는 지방 및 단백질이 풍부한 고열량 식품이며, 특히 비타민 B가 풍부하고 피부를 부드럽게 하며 혈압을 내리는 작용을 한다.Pinus koraiensis is a dried pine seed of a pine tree belonging to the pine family, and it is also known as white porcelain, songza, and white rice. It is contained in a pine cone-like conifer, and the seeds are triangular ovate. Since ancient times, Songsong has been used as a nourishing tonic, and it is known that it is good to eat during the recovery period. In addition, it is a high-calorie food rich in fat and protein, especially rich in vitamin B, softens skin and lowers blood pressure.
매자(Prunus mume)는 장미과에 속한 매화나무의 열매로 주로 매실이라고 불리어 진다. 매자는 중국고서인 신농본초경에서 가장 오래된 과일나무로 약용으로 사용되었다는 기록이 남아있으며, 동의보감 등 각종 의서에서도 한약재로 사용되었다는 기록이 많다. 한방에서는 건위, 지혈, 지사, 거담, 주독, 해독 등에 효과를 나타내는 한약재로 이용하고 있다. 매자는 알카리성 식품으로 피로회복에 좋으며, 체질개선 효과가 있다. 특히, 이는 해독작용이 뛰어나고 피부미용에도 좋으며, 살균효과도 있다. 최근에는 항암식품으로도 많은 연구가 이루어지고 있다.Prunus mume is the fruit of a plum tree belonging to the Rosaceae family and is called mainly plum. The oldest fruit tree is used in Chinese ancient Xinnongcho, which has been used for medicinal purposes. In oriental medicine, it is used as an herbal medicine that has effects on health, hemostasis, branch office, expectoration, poisoning, and detoxification. The barberry is an alkaline food, good for fatigue recovery, and constitution improvement. In particular, it is excellent in detoxification, good for skin care, and also has a bactericidal effect. In recent years, many studies have been made as anti-cancer food.
적소두(Phaseolus angularis)는 콩과의 식물로서, 팥의 생약명으로 소두라고도 한다. 적소두의 원산지는 중국 일대일 것으로 추정되고 있으며, 동양에서 오래전부터 재배한 작물이다. 한방에서는 이수, 산혈, 축기, 행풍, 소종, 제습, 화혈, 해독, 배농, 건비위, 개심규, 견근골, 벽온벽 등에 효과를 나타내는 한약재로 이용하고 있다 Phaeseolus angularis is a legume plant, also known as soybean, in the name of the red bean. The origin of red beans is estimated to be large in China, and has been grown for a long time in the East. In oriental medicine, it is used as a herbal medicine that shows the effects of diuresis, acid blood, phlegm, hygiene, swelling, dehumidification, chemostasis, detoxification, drainage, dry stomach, open heart beef, shoulder blades and wall warming.
모과(Chaenomeles sinensis)는 모과나무의 열매로 중국원산의 재배 식물이며, 참외처럼 생겼지만 나무에 달리는 것이기 때문에 목과라고도 불리운다. 모과의 주요성분으로는 사포닌(saponin), 유기산(organic acid), 플라보노이드(flavonoid), 탄닌(tannin) 등을 함유하고 있다. 한방에서는 서근, 활락, 평간, 화위, 거습, 지통 등에 효과를 나타내는 한약재로 이용하고 있다. Chaenomeles sinensis is the fruit of the Chinese quince, a cultivated plant native to China, which looks like a melon but is also called a tree because it runs on the tree. Main ingredients of Chinese quince include saponin, organic acid, flavonoids and tannins. In oriental medicine, it is used as a herbal medicine that has effects on the root, bow, flat, hwawi, wet, and pain.
거승자(Sesamum indicum)는 만성위장염, 신경염, 고혈압, 변비, 강장, 빈혈 등에 효과가 우수하고, 본초학에 의하면 콜레스테롤을 감소시키고 혈액순환을 원활히 하며 피부와 머리카락을 윤택하게 하는 작용이 있다고 기록되어 있다. 한방에서는 윤오장, 보간신, 오수발, 명이목, 전정수, 장기육, 이대소장에 효과를 나타내는 한약재로 이용하고 있다. 거승자의 단백질은 주로 글로불린(globulin)이고 항산화 작용을 도와주는 감마 토코페롤(γ-tocopherol)이 많이 들어 있어서 항산화 작용에 의해 피부노화를 방지하며 피부 신진대사를 활발하게 하여 부분적으로 검게 변한 색소 침착 현상에도 도움이 된다. Sesamum indicum has excellent effects on chronic gastroenteritis, neuritis, high blood pressure, constipation, tonic, anemia, and according to the herbology, it has been recorded to reduce cholesterol, improve blood circulation, and improve skin and hair. . In oriental medicine, it is used as a herbal medicine that is effective for yun jang, interpolated sinus, soobal, Myeongmok, Jeon Jung-soo, long-term meat, and dae-small intestine. The winner's protein is mainly globulin and contains a lot of gamma-tocopherol, which helps to prevent antioxidant activity. It prevents skin aging by antioxidant activity and activates skin metabolism to partially blacken pigmentation. Also helps.
본 발명에 의한 화장료 조성물에 함유되는 상기 추출물들은 식물체로부터 유효성분을 추출하기 위하여 통상적으로 사용되고 당업자에게 주지된 방법에 의해 제조된 것이다. 예를 들면, 생약재 분쇄물에 물, 탄소수 1∼3의 무수 또는 함수 저급알콜, 아세톤, 에틸아세테이트 또는 디에틸에테르를 분쇄물 건조중량에 대하여 1∼15부피배의 양으로 부가한 다음, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서 50∼100℃ 온도로 5∼24시간동안 가열하여 추출하거나; 상기 분쇄물에 물, 탄소수 1∼3의 무수 또는 함수 저급알콜, 아세톤, 에틸아세테이트 또는 디에틸에테르를 분쇄물 건조중량에 대하여 1∼15부피배의 양으로 부가한 다음, 4∼25℃ 온도로 3∼20일간 침적시 켜 추출물을 얻거나; 무수 또는 함수 에탄올 또는 메탄올 추출물에 적당한 양의 물을 가한 뒤 생기는 침전물을 여과하여 제거하고, 여기에 에틸아세테이트, 부탄올 또는 디에틸에테르를 가하여 잘 섞은 다음 방치하여 층을 분리시킨 뒤 상층을 분리한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서 추출물을 얻는다. 상기한 방법에 의해 추출한 생약재 추출물의 추출여액을 감압농축하고, 건조한 후, 화장료 조성물에 배합한다.The extracts contained in the cosmetic composition according to the present invention are conventionally used to extract the active ingredient from the plant and are prepared by methods well known to those skilled in the art. For example, water, anhydrous or hydrous lower alcohol, acetone, ethyl acetate or diethyl ether having 1 to 3 carbon atoms are added to the medicinal herb powder in an amount of 1 to 15 parts by volume based on the dry weight of the ground product, and then the cooling capacitor Extracted by heating at 50-100 ° C. for 5 to 24 hours in an extractor to which is attached; Water, anhydrous or hydrous lower alcohol, acetone, ethyl acetate or diethyl ether having 1 to 3 carbon atoms are added to the pulverized product in an amount of 1 to 15 parts by volume based on the dry weight of the pulverized product, and then at a temperature of 4 to 25 ° C. Soak for 3 to 20 days to obtain an extract; After adding an appropriate amount of water to anhydrous or hydrous ethanol or methanol extract, the resulting precipitate is filtered off, and then added with ethyl acetate, butanol or diethyl ether, mixed well and left to separate the layers, and then the upper layer is separated. The extract is obtained from an extractor with a cooling capacitor. The extraction filtrate of the herbal medicine extract extracted by the above method is concentrated under reduced pressure, dried, and then blended into the cosmetic composition.
본 발명에 의한 추출물은 각 생약재의 별도의 추출물을 혼합하여 이용할 수도 있고, 생약재를 혼합한 후 한꺼번에 추출하여 제조된 것을 사용할 수도 있다. The extract according to the present invention may be used by mixing separate extracts of each herbal medicine, or may be prepared by mixing the herbal medicines and then extracted at once.
본 발명에 의한 화장료 조성물은 전체 조성물 중 총 유효성분 즉, 해송자 추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물, 및 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유하고, 상기 유효성분은 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 내지 25 중량%의 농도로 함유하는 것이 바람직하다. 이는 유효성분이 0.001 중량% 미만일 경우에는 그 효과가 미미하고, 25 중량%를 초과하는 경우에는 제품의 사용감 및 제형의 안정도에 문제가 발생하기 때문이다. The cosmetic composition according to the present invention further contains at least one selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract, and giant extract in the total active ingredient, that is, the extract of the whole composition, the active ingredient is the total weight of the composition It is preferable to contain at a concentration of 0.0001 to 25% by weight relative to. This is because when the active ingredient is less than 0.001% by weight, the effect is insignificant, and when the active ingredient is more than 25% by weight, there is a problem in the usability of the product and the stability of the formulation.
본 발명에 의한 화장료 조성물은 우수한 각질형성세포 성장촉진 효과, 활성산소 소거효과, MMP-1의 생합성 감소를 통한 타입 1 프로콜라겐의 생합성 촉진 효과, 노화방지 효과 및 피부보습 효과를 나타낸다. The cosmetic composition according to the present invention shows excellent keratinocyte growth promoting effect, active oxygen scavenging effect, biosynthesis promoting effect of type 1 procollagen through reducing biosynthesis of MMP-1, anti-aging effect and skin moisturizing effect.
또한, 본 발명에 의한 화장료 조성물은 상기한 추출물 외에 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유하는 것도 무방하며, 본 발명의 추출물 이 외에 다른 성분들은 기타 화장료의 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다. In addition, the cosmetic composition according to the present invention may contain, in addition to the above-mentioned extracts, other ingredients that can give a synergistic effect to the main effect, preferably within the range of not impairing the main effect of the present invention, In addition to the extract of the present invention, other components may be appropriately selected and blended by those skilled in the art without difficulty according to the formulation or use purpose of other cosmetics.
예컨대, 상기 화장료 조성물은 그 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 물질을 포함할 수 있다. For example, the cosmetic composition may contain a skin absorption promoting substance to increase the effect. In addition, the cosmetic composition of the present invention may include a material selected from the group consisting of water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, polymer peptides, polymer polysaccharides, sphingolipids and seaweed extract.
뿐만 아니라, 본 발명의 화장료 조성물은 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 포함할 수 있고, 이의 예로서 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다. In addition, the cosmetic composition of the present invention may include other ingredients which are usually formulated into cosmetics as necessary in addition to the essential components, and examples thereof include fats and oils, humectants, emollients, surfactants, organic and inorganic pigments. Organic powders, ultraviolet absorbers, preservatives, fungicides, antioxidants, plant extracts, pH adjusters, alcohols, pigments, flavorings, blood circulation accelerators, cooling agents, limiting agents, purified water and the like.
본 발명의 화장료 조성물에 포함될 수 있는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니고, 또한 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 가능하지만, 조성물 총 중량에 대하여 바람직하게는 0.01~10 중량%, 보다 바람직하게는 0.01~5 중량%로 배합된다. The compounding component which may be included in the cosmetic composition of the present invention is not limited thereto, and the compounding amount of the above component is possible within the range not impairing the object and effect of the present invention, but preferably 0.01 to the total weight of the composition. 10 wt%, more preferably 0.01 to 5 wt%.
본 발명에 의한 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않고, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 에센스, 팩, 젤, 파우더, 립스틱, 메이크업 베이스, 파운데이션, 로션, 연고, 겔, 패취, 미용액, 클렌징 폼, 클렌징 크림, 클렌징 워터, 비누 또는 분무제 등과 같은 제형을 들 수 있다. The cosmetic composition according to the present invention is not particularly limited in the formulation, and for example, emulsion, cream, lotion, essence, pack, gel, powder, lipstick, makeup base, foundation, lotion, ointment, gel, patch, essence, Formulations such as cleansing foams, cleansing creams, cleansing water, soaps or sprays and the like.
이하, 실시예 및 시험예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명이 이들 예로만 한정되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Test Examples, but the present invention is not limited only to these examples.
[참고예 1] : 생약재 추출물의 제조Reference Example 1 Preparation of Herbal Medicine Extract
해송자, 매자, 적소두, 모과, 거승자(건화약품㈜) 각 약재를 채취한 후 품질이 우수한 약재만을 선별하고 수세하여 불순물을 제거한 다음 그늘에서 건조하였다. 다음, 해송자, 매자, 적소두, 모과, 거승자 각 100g을 취하여 정제수 2L씩을 첨가한 후 약 95~100℃ 환류장치 하에서 18시간동안 끓이면서 추출하였다. 추출완료 후 계속 증류 농축하여 총 무게 약 500g이 될 때까지 달인 후 상온으로 냉각하였다. 다음, 여과포에 넣고 압착하여 고형분을 분리하고 제거한 후, 여과하여 점성있는 농축액을 얻었다. 농축액을 80℃ 감압 하에서 농축하여 물을 완전히 제거한 다음, 진공 건조하여 분말 고체 상태의 추출물(해송자 5.0g, 매자 10g, 적소두 5.0g, 모과 5.0g, 거승자 5.0g)을 수득하였다. Haesongja, barberry, red soybeans, Chinese quince, Geoseungja (dry chemicals Co., Ltd.), each of the herbs were collected, selected only for high quality herbs, washed with water to remove impurities and dried in the shade. Next, take 100 g of each of the pine cones, barberry, red bean curd, Chinese quince, and queer, add 2 liters of purified water, and boil for 18 hours under a reflux apparatus at about 95-100 ° C. After the extraction was completed, the mixture was continuously concentrated by distillation and then cooled to room temperature until it became a total weight of about 500 g. Next, the mixture was put in a filter cloth and compressed to separate and remove the solids, and then filtered to obtain a viscous concentrate. The concentrate was concentrated under reduced pressure at 80 ° C. to completely remove the water, and then dried in vacuo to give an extract in the form of a powder solid (5.0 g of pine nuts, 10 g of barberry, 5.0 g of red bean curd, 5.0 g of quince, 5.0 g of queer).
[실시예 1~15 및 비교예 1][Examples 1-15 and Comparative Example 1]
상기 참고예 1에서 얻은 각 생약재 물 추출물을 하기 표 1의 조합으로 혼합하여 실시예 1~15 및 비교예 1을 제조하여 실험에 사용하였다. 이때, 각 추출물의 혼합비율은 동량으로 하였다. Each herbal medicine water extract obtained in Reference Example 1 was mixed in the combination of Table 1 to prepare Examples 1 to 15 and Comparative Example 1 was used in the experiment. At this time, the mixing ratio of each extract was the same amount.
[시험예 1] 각질형성세포의 성장촉진(MTT assay) 효과 [Test Example 1] effect of growth promotion (MTT assay) of keratinocytes
상기 실시예 1~15및 비교예 1의 추출물이 각질형성세포의 성장능에 미치는 효과를 MTT 방법으로 측정하였으며, 그 방법을 간략하게 설명하면 하기와 같다. The effects of the extracts of Examples 1 to 15 and Comparative Example 1 on the growth ability of keratinocytes were measured by MTT method, briefly explaining the method as follows.
먼저, 각질형성세포를 96 웰 플레이트(well plate)에 웰 당 200 ㎕ 당 5 × 103 개 농도로 심어서 24시간 배양한 후, 실시예 1~15 및 비교예 1의 추출물을 0.0001, 0.001, 0.01, 0.1 % 농도로 처리하여 48시간 동안 배양한 다음, 배양액을 흡입하여 제거한 후, PBS로 1회 세척하고 MTT(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, Sigma, USA) (0.5 ㎎/㎖)용액을 100 ㎕씩 세포에 첨가하고, 4 시간 동안 37 ℃, 5% CO2에서 배양하였다. 그 후, 배양액을 흡입하여 제거한 다음 DMSO(dimethyl sulfoxide) 용액 200 ㎕를 첨가하고, 쉐이커(shaker)에서 10분간 흔들어 준 후 ELISA 리더(reader)(DIbiotech, Korea)로 540 ㎚에서의 흡광도를 판독하였다. 이 때 대조군으로는 실시예 1~15 및 비교예 1의 추출물의 무처리군을 사용하였다. 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다. First, the keratinocytes were planted in a 96 well plate at a concentration of 5 × 10 3 per 200 μl per well and incubated for 24 hours, and then the extracts of Examples 1 to 15 and Comparative Example 1 were prepared in 0.0001, 0.001, After incubation for 48 hours with 0.01, 0.1% concentration, the culture solution was aspirated and removed, washed once with PBS and 100 μl of MTT (Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, Sigma, USA) (0.5 mg / mL) solution. Cells were added and incubated at 37 ° C., 5% CO 2 for 4 hours. Then, the culture solution was aspirated and removed, and then 200 μl of DMSO (dimethyl sulfoxide) solution was added, shaken for 10 minutes in a shaker, and the absorbance at 540 nm was read with an ELISA reader (DIbiotech, Korea). . At this time, as a control group, an untreated group of extracts of Examples 1 to 15 and Comparative Example 1 was used. The results are shown in Table 2 below.
상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 모든 경우에 있어서 그 효과가 나타남을 알 수 있었고, 대체로 사용한 추출물의 농도가 높을수록 각질형성세포의 성장촉진 효과도 증가하였다. 또한, 해송자 추출물만을 함유하는 비교예 1의 조성물보다 해송자 추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물, 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유하는 실시예 1 내지 15의 조성물이 더 효과적이며, 해송자 추출물에 부가되는 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물, 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 추출물의 종류가 많을수록 각질형성세포의 성장 촉진 효과도 그에 따라 증가함을 알 수 있었다. As shown in Table 2, it was found that the effect appears in all cases, the higher the concentration of the extract generally used, the growth promoting effect of keratinocytes also increased. In addition, the compositions of Examples 1 to 15, which further contain at least one selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, quince extract, and giant extract, are more effective than the composition of Comparative Example 1 containing only the pine cone extract. It was found that the more the type of extract selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract, and giant extract, which is added to the extract of Haesongja, increases the growth promoting effect of keratinocytes accordingly.
[시험예 2] 활성산소 소거 효과 Test Example 2 Active Oxygen Scavenging Effect
상기 실시예 1~15 및 비교예 1의 추출물의 자외선에 의해 생성되는 활성산소 생성 억제 효과 즉, 활성산소 소거 효과를 알아보기 위하여 형광물질을 이용하여 하기와 같은 실험을 수행하였다. In order to determine the active oxygen generation inhibitory effect, that is, the active oxygen scavenging effect of the extracts of the extracts of Examples 1 to 15 and Comparative Example 1, the following experiment was performed using a fluorescent material.
먼저, 실험에 사용한 세포주는 독일 암연구센터의 퓌세니그 박사(Dr. Fusenig)로부터 분양 받은 인간 각질세포 HaCaT 세포주(Human keratinocytes HaCaT cell line)로서 이를 형광측정용 96 웰 블랙 플레이트(well black plate)에 웰당 2.0 ×104개로 분주하고, 페니실린/스트렙토마이신(penicillin/streptomycin) 첨가된 DMEM(Dulbeccos Modification of Eagles Medium, FBS 10%, Gibco, USA) 배지를 사용하여 37 ℃, 5% CO2 조건에서 1 일간 배양한 후, 실시예 1~15 및 비교예 1의 추출물을 0.5, 0.25, 0.125, 0.0625, 0.03125 % 농도로 처리하였다. First, the cell line used in the experiment was a human keratinocytes HaCaT cell line distributed from Dr. Fusenig of the German Cancer Research Center, which is a 96 well black plate for fluorescence measurement. Dispense at 2.0 × 10 4 per well, and use Dulbeccos Modification of Eagles Medium, FBS 10%, Gibco, USA (DMEM) medium supplemented with penicillin / streptomycin at 37 ° C., 5% CO 2 . After culturing for 1 day, the extracts of Examples 1-15 and Comparative Example 1 were 0.5, 0.25, 0.125, 0.0625, 0.03125% The concentration was treated.
다음, 시험시료를 넣고 24 시간 배양한 후 HCSS(HEPES-buffered control salt solution, Gibco, USA)로 세척하여 남아있는 배지를 제거하고, HCSS에 20 μM로 준비된 DCFH-DA(2',7'-dichlorodihydro-fluorescein diacetate, Molecular Probes, USA)를 100 ㎕가하고 37 ℃, 5 % CO2 조건에서 20 분간 배양하고 HCSS로 세척하였다. 이 후 각 시료 농도별로 처리된 HCSS를 100 ㎕ 가한 후 초기에 활성산소로 산화된 DCF(dichlorofluorescein)의 형광도를 형광플레이트 리더(Ex=485 nm, Em=530 nm)로 측정하였다. 이후 UVB(30mJ/cm2)를 조사하고 처리직후(표 3) 및 처리 3시간 후(표 4)의 형광도를 형광플레이트 리더(Ex=485 nm, Em=530nm)로 측정하였다. 이때, 대조군으로는 실시예 1~15 및 비교예 1의 추출물의 무처리군을 사용하였다. Next, the test sample was added and incubated for 24 hours, and then washed with HCSS (HEPES-buffered control salt solution, Gibco, USA) to remove the remaining medium, and DCFH-DA (2 ', 7'-) prepared at 20 μM in HCSS. 100 μl of dichlorodihydro-fluorescein diacetate, Molecular Probes, USA) was incubated at 37 ° C. and 5% CO 2 for 20 minutes and washed with HCSS. Thereafter, 100 μl of the treated HCSS was added to each sample concentration, and then the fluorescence of DCF (dichlorofluorescein) oxidized with active oxygen was measured by a fluorescent plate reader (Ex = 485 nm, Em = 530 nm). After UVB (30mJ / cm 2 ) was irradiated and immediately after treatment (Table 3) and after 3 hours of treatment (Table 4) the fluorescence was measured with a fluorescence plate reader (Ex = 485 nm, Em = 530 nm). At this time, as a control group, an untreated group of extracts of Examples 1 to 15 and Comparative Example 1 was used.
상기 표 3 및 표 4에 나타낸 바와 같이, 모든 시험시료에 있어서 활성산소 생성억제 효과가 나타남을 알 수 있었고, 대체로 사용한 추출물의 농도가 높을수록 활성 산소 생성이 더 억제됨을 알 수 있었다. 또한, 해송자추출물만을 함유하는 비교예 1의 조성물보다 해송자추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물, 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유하는 실시예 1~ 15의 조성물이 더 효과적이며, 해송자 추출물에 부가되는 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물, 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 추출물의 종류가 많을수록 활성산소 생성도 그에 따라 더 억제됨을 알 수 있었다. 또한, 처리직후 보다 처리 3시간 후 그 효과가 더 높음을 알 수 있었다. As shown in Table 3 and Table 4, it was found that the active oxygen production inhibitory effect appeared in all the test samples, it was found that the higher the concentration of the extract used, the more active oxygen production is suppressed. In addition, the composition of Examples 1 to 15 which further contain at least one selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract, and giant extract in the pine cone extract is more effective than the composition of Comparative Example 1 containing only pine cone extract It was found that the more active kinds of extracts selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, quince extract and giant extract, which are added to the extract of Haesongja, are more inhibited accordingly. It was also found that the effect was higher after 3 hours of treatment than immediately after treatment.
[시험예 3] MMP-1 및 프로콜라겐 분석(procollagen assay) Test Example 3 MMP-1 and Procollagen Assay
상기 실시예 1~15및 비교예 1의 추출물의 피부기질의 분해에 관련된 자외선에 의한 MMP-1의 생합성을 감소시켜 타입 1 프로콜라겐의 생합성을 촉진시키는 효과를 알아보기 위하여 MMP-1 및 프로콜라겐 분석(procollagen assay)을 하기와 같은 방법으로 수행하였다. MMP-1 and procollagen in order to investigate the effect of reducing the biosynthesis of MMP-1 by ultraviolet rays related to the decomposition of the skin substrate of the extracts of Examples 1 to 15 and Comparative Example 1 to promote the biosynthesis of type 1 procollagen The procedure (procollagen assay) was performed in the following manner.
먼저, 정상표피의 지방층을 제거하고 잘게 잘라 콜라겐아제(collagenase)로 표피와 진피를 분리한 후, 표피와 진피조직을 각각 0.25 % 트립신(trypsin) 용액에 넣고 37 ℃, 5% CO2 배양기에서 10분간 처리하였다. 이후 보텍스(vortex)를 시행하여 각질형성세포와 섬유아세포를 각각 유리시켰다. 유리된 세포를 모아 세척한 후 각질형성세포는 KGM(keratinocyte growth medium, Clonetics, USA)에 1 ×104 cells/cm2 농도로 배양하였으며, 섬유아세포는 10 % 우태아혈청(FBS)이 첨가된 DMEM 배지에서 배양하였다. 70-80 % 정도 자라면 1:3의 비율로 분주하여 계대 배양하였고, 3-4차 계대배양한 세포를 실험에 이용하였다. First, the fat layer of the normal epidermis is removed and chopped to separate the epidermis and the dermis with collagenase, and then the epidermis and the dermis are put into 0.25% trypsin solution, respectively, and then in a 37 ° C. and 5% CO 2 incubator. Treated for a minute. Since vortex was performed to release the keratinocytes and fibroblasts, respectively. After collecting and washing the free cells, keratinocytes were cultured at 1 × 10 4 cells / cm 2 in KGM (keratinocyte growth medium, Clonetics, USA), and fibroblasts were added with 10% fetal bovine serum (FBS). Cultured in DMEM medium. When grown at about 70-80%, the cells were subcultured at a ratio of 1: 3, and cells subjected to 3-4 passages were used for the experiment.
MMP-1의 양을 측정하는 실험을 위해서 섬유아세포를 48 웰 플레이트(well plate)에 90 % 이상 배양한 후 하루동안 기아(starvation)상태로 하였다. 이후 PBS로 2회 세척한 다음 PBS를 100 ㎕씩 넣어준 상태에서 플레이트(plate)의 뚜껑을 열고 자외선 A(UVA filters가 장치된 Dermlight cube 401, UVAtec, USA)를 15J/cm2로 조사하였다. 조사 직후 다시 PBS로 1회 세척하고, 상기 실시예 1~15 및 비교예 1의 추출물이 각각 0.001, 0.01 % 포함된 우태아 혈청을 포함하지 않은 DMEM을 넣어 37 ℃, 5% CO2 배양기에서 48시간동안 배양한 후, 배지 중에 유리된 MMP-1의 양을 MMP-1 인간 ELISA 시스템(human ELISA system) (RPN2610, Amersham Pharmacia Biothch, UK)을 이용하여 측정하였고, 섬유아세포의 총 단백질 양으로 보정하였다(표 5). 이 때, 대조군으로는 실시예 1~15 및 비교예 1의 추출물의 무처리군을 사용하였다. For experiments to measure the amount of MMP-1, fibroblasts were cultured in at least 90% in 48 well plates and then starved for one day. After washing twice with PBS, the lid of the plate (plate) was opened with 100 μl of PBS, and UV A (Dermlight cube 401 equipped with UVA filters, UVAtec, USA) was irradiated with 15 J / cm 2 . Immediately after irradiation, washed once again with PBS, and added DMEM without fetal calf serum containing 0.001 and 0.01% of the extracts of Examples 1 to 15 and Comparative Example 1, respectively, at 37 ° C. and 5% CO 2 incubator. After incubation for a time, the amount of free MMP-1 in the medium was measured using the MMP-1 human ELISA system (RPN2610, Amersham Pharmacia Biothch, UK) and corrected for the total protein amount of fibroblasts. (Table 5). At this time, as a control group, an untreated group of extracts of Examples 1 to 15 and Comparative Example 1 was used.
한편, 프로콜라겐의 양을 측정하기 위해 상기 MMP-1의 양을 측정하는 방법과 동일한 조건에서 기아(starvation)상태로 자외선 조사 없이 실시예 1~15및 비교예 1의 추출물을 각각 0.001 및 0.01%로 가하고, 24시간 후에 배지 중에 유리된 프로콜라겐의 양을 프로콜라겐 타입-1 C-펩타이드 EIA 키트(procollagen type-1 C-peptide EIA kit) (MK101, Takara, Japan)를 사용하여 측정하였다(표 6). 대조군으로는 실시예 1~15 및 비교예 1의 추출물의 무처리군을 사용하였다. Meanwhile, in order to measure the amount of procollagen, the extracts of Examples 1 to 15 and Comparative Example 1 were 0.001 and 0.01%, respectively, without ultraviolet irradiation under starvation under the same conditions as the method of measuring the amount of MMP-1. After 24 hours, the amount of procollagen released in the medium was measured using the procollagen type-1 C-peptide EIA kit (MK101, Takara, Japan). 6). As a control group, an untreated group of extracts of Examples 1 to 15 and Comparative Example 1 was used.
상기 표 5의 MMP-1 억제 효과를 나타낸 바와 같이, 모든 시험시료에 있어서 MMP-1 억제효과가 나타남을 알 수 있었으며, 대체로 사용한 추출물의 농도가 높을수록 생성된 MMP-1의 양이 감소함을 알 수 있었다. 또한, 해송자 추출물만을 함유하는 비교예 1의 조성물보다 해송자 추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물, 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유하는 실시예 1 ~ 15의 조성물이 더 효과적이며, 해송자 추출물에 부가되는 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물, 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 추출물의 종류가 많을수록 생성된 MMP-1의 양도 그에 따라 감소함을 알 수 있었다. As shown in the MMP-1 inhibitory effect of Table 5, it was found that the MMP-1 inhibitory effect appeared in all the test samples, the higher the concentration of the extract used, the less the amount of MMP-1 produced Could know. In addition, the compositions of Examples 1 to 15 further contain at least one selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract, and giant extract in the pine cone extract than the composition of Comparative Example 1 containing only pine cone extract It was found that the more the type of extracts selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, quince extract, and giant extract added to Haesongja extract, the amount of MMP-1 produced decreased accordingly.
또한, 하기 표 6의 타입 1 프로콜라겐의 생합성 증가 효과를 나타낸 바와 같이, 모든 시험시료에 있어서 타입 1 프로콜라겐의 생합성 증가 효과가 나타남을 알 수 있었으며, 대체로 사용한 추출물의 농도가 높을수록 생성된 프로콜라겐의 양이 증가함을 알 수 있었다. 또한, 해송자 추출물만을 함유하는 비교예 1의 조성물보다 해송자 추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물, 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유하는 실시예 1~15의 조성물이 더 효과적이며, 해송자 추출물에 부가되는 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물, 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 추출물의 종류가 많을수록 생성된 프로콜라겐의 양도 그에 따라 증가함을 알 수 있었다. In addition, as shown in Table 6 to increase the biosynthesis of type 1 procollagen, it was found that the effect of increasing the biosynthesis of type 1 procollagen in all the test samples, the higher the concentration of the extract used in general The amount of collagen was found to increase. In addition, the compositions of Examples 1 to 15 further contain at least one selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract, and giant extract in the pine cone extract than the composition of Comparative Example 1 containing only pine cone extract It was found that the more the type of extract selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract, and giant extract, added to the extract of Haesongja, the amount of procollagen produced increased accordingly.
[제형예 1~15 및 비교제형예 1] 화장료 조성물의 제조 Formulation Examples 1-15 and Comparative Formulation Example 1 Preparation of Cosmetic Composition
상기 실시예 1~15및 비교예 1의 추출물을 함유하는 것으로 하기 표 7의 조성으로 제형예 1~15 및 비교제형예 1의 화장료 조성물을 제조하였다. 하기 표 7의 조성으로 성분 1~7까지의 유상파트와 성분 8~15항까지의 수상파트를 각각 가열하여 용해한 후, 수상을 교반하면서 유상 파트를 수상에 서서히 첨가하여 유화하였다. The cosmetic compositions of Formulation Examples 1 to 15 and Comparative Formulation Example 1 were prepared by containing the extracts of Examples 1 to 15 and Comparative Example 1. The oil phase parts up to components 1 to 7 and the water phase parts up to components 8 to 15 were dissolved by heating in the compositions shown in Table 7 below, and then the oil phase parts were gradually added to the water phase and emulsified while stirring the water phase.
상기 제형예 1~15의 화장료 조성물은 유효성분으로서 해송자 추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물 및 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유하는 조성물인 반면, 비교제형예 1의 화장료 조성물은 오로지 해송자 추출물만을 함유하는 것이다. 상기 조성물은 각각 유상과 수상은 65~75 ℃에서 완전 용해시키고, 7,000 내지 8,000 rpm에서 5분간 유화시켜 크림제형을 제조하였다. The cosmetic composition of Formulation Examples 1 to 15 is a composition further comprising one or more selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract, and giant extract as an active ingredient, while the cosmetic composition of Comparative Formulation Example 1 Only contains extracts of pine nuts. Each of the compositions was dissolved in oil and water phase at 65 ~ 75 ℃ completely, emulsified for 5 minutes at 7,000 to 8,000 rpm to prepare a cream formulation.
[시험예 4] 주름 개선 효과[Test Example 4] Wrinkle improvement effect
상기 제형예 15 및 비교제형예 1의 주름개선효과를 알아보기 위하여 하기와 같은 방법을 수행하였다. In order to determine the wrinkle improvement effect of the Formulation Example 15 and Comparative Formulation Example 1 was carried out as follows.
30대 여성 140명을 각각 20명씩 7조로 나누어 아침 저녁 매일 2회씩 8주간 지정된 눈가 부위에 제형예 15 및 비교제형예 1의 크림을 각각 도포하게 한 후, 실리콘 재질의 모사판(replica)을 제작하여 지정 부위의 주름의 상태를 화상분석기인 비지오미터(visiometer : SV60, Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)로 측정하였다. 대조군으로는 제형예 15 및 비교제형예 1의 크림의 무처리군을 사용하였다. 그 결과를 하기 표 8 에 나타내었으며, 이 결과는 8주 후의 각각의 파라미터(parameter) 값에서 8주 전 파라미터 값을 뺀 것의 평균을 나타낸 것이다. 즉, 이 값이 음수가 나올수록 주름 개선 효과가 높다는 것을 의미한다. 140 women in their 30s were divided into 7 sets of 20 people each morning, twice a day for 8 weeks for twice a day for 8 weeks on the designated eye areas, and the formulations of Formulation Example 15 and Comparative Formulation Example 1 were applied, and then a silicone replica was prepared. The wrinkles at the designated sites were measured with a visometer (SVI60, Courage + Khazaka electronic GmbH, Germany). As a control group, the untreated group of the cream of Formulation Example 15 and Comparative Formulation Example 1 was used. The results are shown in Table 8, which shows the average of each parameter value after 8 weeks minus the parameter value 8 weeks ago. In other words, the negative the value, the higher the wrinkle improvement effect.
상기 표 8 에서 알 수 있는 바와 같이, 해송자 추출물만을 함유하는 비교제형예 1의 조성물에 비하여 해송자 추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물 및 거승자 추출물을 모두 함유한 제형예 15의 조성물의 피부 주름 개선 효과가 크게 증진되었음을 확인할 수 있었다. As can be seen in Table 8, the skin wrinkles of the composition of Formulation Example 15 containing all of the barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract and seunggi extract compared to the composition of Comparative Formulation Example 1 containing only the pine cone extract It was confirmed that the improvement effect was greatly enhanced.
[시험예 5] 각질형성세포 분화 촉진 효과 [Test Example 5] keratinocyte differentiation promoting effect
사람의 각질형성세포를 배양용 플라스크에 넣고 배양하여 약 80% 정도로 성장시킨 후, 하기 표 9의 시료를 각각 5ppm 농도로 첨가하여 4일간 처리하였다. 다음, 요소(urea)나 SDS(sodium dodecyl sulfate)와 같은 변성제 및 β-머캅토에탄올(β-mercaptoethanol)과 같은 환원제를 혼합하여 용해되는 단백질을 제거하였다. 그 후, 남은 각질층을 310㎚에서의 흡광도를 측정하여 펩타이드 농도를 분석하였으며, 음성대조군인 증류수를 기준(0%)으로 각 시료에 의한 증가량을 비교하여 그 결과를 하기 표 9에 나타내었다.Human keratinocytes were placed in a culture flask, cultured, and grown to about 80%, and then the samples of Table 9 were each added at a concentration of 5 ppm and treated for 4 days. Next, a denatured protein such as urea or sodium dodecyl sulfate (SDS) and a reducing agent such as β-mercaptoethanol were mixed to remove the dissolved protein. Then, the peptide concentration was analyzed by measuring the absorbance at 310 nm of the remaining stratum corneum, and compared with the increase amount by each sample based on distilled water as a negative control group (0%) and the results are shown in Table 9 below.
상기 표 9의 결과로부터, 본 발명의 실시예 1~15의 각질형성세포 분화 촉진효과가 매우 우수함을 확인할 수 있었다.From the results in Table 9, it was confirmed that the keratinocyte differentiation promoting effect of Examples 1 to 15 of the present invention is very excellent.
[제형예 16~30 및 비교제형예 2] 피부 보습용 화장료의 제조Formulation Examples 16-30 and Comparative Formulation Example 2 Preparation of Skin Moisturizing Cosmetic
상기 실시예 1~15 및 비교예 1의 추출물을 함유하는 것으로 하기 표 10의 조성으로 제형예 16~30 및 비교제형예 2의 화장료 조성물을 제조하였다. 하기 표 10의 조성으로 성분 1~5까지의 수상파트와 성분 6~9까지의 알코올파트를 각각 실온에서 용해한 후, 수상을 교반하면서 알코올 파트를 수상에 서서히 첨가하여 가용화하였다. 다음, 알코올 파트의 첨가가 완료된 후 3-5분 가량 교반을 계속한 다음, 진공 탈기하여 화장료의 제조를 완성하였다. The cosmetic compositions of Formulation Examples 16 to 30 and Comparative Formulation Example 2 were prepared by containing the extracts of Examples 1 to 15 and Comparative Example 1. After dissolving the water parts up to components 1 to 5 and the alcohol parts up to components 6 to 9 in the compositions shown in Table 10, respectively, at room temperature, alcohol parts were gradually added to the water phase while the water phase was stirred and solubilized. Next, stirring was continued for about 3-5 minutes after the addition of the alcohol parts was completed, followed by vacuum degassing to complete the preparation of the cosmetic.
[시험예 6] 피부 장벽기능 회복 효과 Test Example 6 Skin Barrier Function Restoration Effect
상기 제형예 16~30의 피부 장벽기능 회복효과를 측정하기 위해, 무모생쥐(hairless mouse)의 피부에 아세톤을 반복적으로 도포하여 장벽기능을 손상시킨 후, 표피 수분 손실량(TEWL, transdermal water loss)을 servomed사(스웨덴) evaporimeter EP1으로 측정하여 4.0g/㎡/h에 도달하면, 상기 제형예 16~30의 시료를 5㎠ 면적에 도포한 후, 표피 수분 손실량을 1시간, 2시간, 4시간, 8시간 경과 후에 측정하여 감소되는 정도를 평가함으로써 장벽기능이 회복되는 정도를 평가하였다. 이때, 공지의 지질혼합물(ceramide : cholesterol : fatty acid의 2:1:1 혼합물)을 양성 대조군으로 사용하였다. 결과는 초기 손상된 장벽 상태에서의 표피 수분 손실량을 기준(100%)으로 하여 시간에 따른 변화를 비교하여 하기 표 11에 나타내었다.In order to measure the skin barrier function recovery effect of Formulation Examples 16 to 30, acetone was repeatedly applied to the skin of hairless mice to impair barrier function, and then epidermal water loss (TEWL) was measured. When measured by servomed (Sweden) evaporimeter EP1 and reached 4.0 g / m 2 / h, the samples of Formulation Examples 16 to 30 were applied to an area of 5 cm 2, and the amount of epidermal moisture was lost for 1 hour, 2 hours, 4 hours, The extent of barrier function recovery was assessed by assessing the extent of reduction after 8 hours. At this time, a known lipid mixture (2: 1: 1 mixture of ceramide: cholesterol: fatty acid) was used as a positive control. The results are shown in Table 11 below comparing the change over time based on the amount of epidermal moisture loss in the initial damaged barrier state (100%).
상기 표 11의 결과에서 보는 바와 같이, 해송자추출물만을 함유하는 비교제형예 2의 조성물보다 해송자추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물, 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유하는 제형예 16 ~ 30의 조성물이 더 효과적이며, 해송자 추출물에 부가되는 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물, 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 추출물의 종류가 많을수록 장벽기능 회복 효과가 더 높음을 알 수 있었다.As shown in the results of Table 11, the formulation example further contains at least one selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract, seunggi extract than the composition of Comparative Formulation Example 2 containing only the pine cone extract The composition of the 16 ~ 30 is more effective, the more the type of extract selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract, seunggi extract extract added to the extract of the barrier function was higher.
하기에서 본 발명에 의한 화장료 상기 조성물의 제형예들을 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다. Hereinafter, the formulation examples of the cosmetic composition according to the present invention will be described, but the present invention is not intended to be limited thereto, but is intended to be described in detail.
<비누제형> <Soap type>
<로션제형>Lotion Formulation
< 크림 제형> Cream formulation
<팩 제형> <Pack formulation>
<미용액 제형> <Solutions Formulation>
상기에서 설명한 바와 같이, 본 발명에 의한 화장료 조성물은 유효성분으로 해송자 추출물에 매자 추출물, 적소두 추출물, 모과 추출물 및 거승자 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 더 함유하여 우수한 각질형성세포의 성장촉진 효과, 자외선에 의해 생성되는 활성산소 소거 효과, 피부기질의 분해에 관련된 자외선에 의한 MMP-1의 생합성을 감소시켜 타입 1 프로콜라겐의 생합성을 촉진시키는 효과, 노화방지 효과 및 피부보습 효과가 있으므로, 상기 조성물은 각질형성세포 성장촉진용 조성물, 활성산소 소거용 조성물, MMP-1의 생합성 감소를 통한 타입 1 프로콜라겐의 생합성 촉진용 조성물, 피부노화방지용 조성물 및 피부보습용 조성물로서 화장품에 유용하게 이용할 수 있다. As described above, the cosmetic composition according to the present invention contains an at least one selected from the group consisting of barberry extract, red soybean extract, Chinese quince extract, and giant extract in Haesongja extract as an active ingredient, the growth promoting effect of excellent keratinocytes The active oxygen scavenging effect generated by ultraviolet rays, the effect of reducing the biosynthesis of MMP-1 by ultraviolet rays related to the decomposition of the skin substrate, promoting the biosynthesis of type 1 procollagen, anti-aging effect and skin moisturizing effect, The composition can be usefully used in cosmetics as a composition for promoting growth of keratinocytes, a composition for scavenging free radicals, a composition for promoting biosynthesis of type 1 procollagen by reducing the biosynthesis of MMP-1, a composition for preventing skin aging, and a composition for moisturizing the skin. have.
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