KR20070059139A

KR20070059139A - 조류 난막을 통해 물질을 주입 및 샘플링하기 위한 방법 및장치

Info

Publication number: KR20070059139A
Application number: KR1020077008148A
Authority: KR
Inventors: 스티븐 피. 울프; 필립 엘. 주니어 리바르크직; 숀 엠. 브라이언; 마이크 쉬누퍼; 단 리즈; 제이미 스프렌켈; 에드워드 더블유. 그로스; 브랜틀리 엥겔; 존 에이치. 히브랭크
Original assignee: 엠브렉스, 인코포레이티드
Priority date: 2004-10-13
Filing date: 2005-10-11
Publication date: 2007-06-11
Also published as: KR20090017651A; BRPI0516096A; CA2580878A1; CN101911917B; CN101123876B; WO2006044289A2; BRPI0516096B1; AU2005295961A1; CN101911917A; ES2427148T3; MX2007004395A; CN101123876A; EP1804574A4; EP1804574A2; JP4648949B2; US7617795B2; WO2006044289A3; JP2008516258A; BR122014030379B1; IL181077A0

Abstract

조류 난과 같은 대상으로부터 물질을 주입 및/또는 제거하는 주입 장치는 바디 부분 및 팁(tip)에서 끝나는 뾰족한 부분을 갖는 주입 바늘을 포함한다. 튜브는 실질적으로 동심원 관계로 주입 바늘에 부착되거나 주입 바늘 주위로 연장된다. 상기 튜브는 바늘 팁으로부터 예정된 거리에 위치한 말단 부분을 가진다. 상기 튜브 말단 부분은 바늘 팁이 대상의 막을 통해 난과 같은 대상 내로 삽입될 수 있는 거리를 제한하기 위해 멈추개(멈추개)로서 작용한다. 검출기가 바늘에 부착된 멈추개에 의해 난의 막에 가해진 힘을 측정하기 위해 이용될 수 있다. 바늘 및/또는 바늘 및 상기 바늘에 부착된 멈추개에 의해 막에 가해진 힘은 또한 측정될 수 있다.

Description

조류 난막을 통해 물질을 주입 및 샘플링하기 위한 방법 및 장치{Methods and apparatus for injecting and sampling material through avian egg membranes}

관련 출원

본 출원은 이의 개시가 본원에 전체적으로 원용에 의해 포함된 미국 가특허출원 제60/618,110호(2004년 10월 13일 출원)에 대한 우선권 이익을 주장한다.

발명의 분야

본 발명은 일반적으로, 난(egg), 더욱 구체적으로, 난으로부터 물질을 주입 및/또는 제거하는 장치에 관한 것이다.

가금류 부화장 및 기타 난 가공 시설에서, 난은 다수로 취급 및 가공된다. 용어 "가공"은 배아가 여전히 난에 있는 동안 (즉, 인 오보), 살아 있는 난을 약물, 영양분, 호르몬 및/또는 기타 유익한 물질로 처리하는 것을 포함한다. 조류 난으로 다양한 물질의 인 오보 주입은 부화 후 이환율 및 사망율을 감소시키고, 생성된 조류의 잠재적인 성장 속도 또는 종국적인 크기를 증가시키고, 심지어 배아의 성 결정에 영향을 주기 위해 이용되어 왔다. 살아 있는 난에 백신의 주입은 인 오보 조류를 면역화하기 위해 효과적으로 이용되어 왔다. 외래 핵산 분자를 도입하 기 위해 (즉, 트랜스제닉 조류를 생성하기 위해) 또는 발생하는 배아 내로 외래 세포를 도입하기 위해 (즉, 키메라 조류를 생성하기 위해) 인 오보 배아를 다루는 것은 가금 산업에서 또한 바람직하다.

바이러스의 인 오보 주입은 백신에 제조에 이용하기 위해 특정 바이러스를 증식하기 위해 이용될 수 있다. 특정 적용에 대해, 예를 들면, 미국특허 제6,244,214호 (Hebrank에게 허여)에 기재된 바와 같이, 그로부터 정보를 수집하기 위해 배아를 포함하는 난 내에 감지 장치를 삽입하는 것이 바람직할 수 있다. 또한, 배아 및 배아 밖의 물질을 포함하는 난으로부터 물질 시료를 제거하는 것이 바람직할 수 있다.

인 오보 처리 물질 및 인 오보 주입 방법뿐만 아니라, 복수의 난을 취급하는 장치의 예는 미국특허 제4,458,630호(Sharma 등에게 허여) 및 미국특허 제5,028,421호 (Fredericksen 등에게 허여)에 기재되어 있다.

전술한 인 오보 방법의 많은 것은 난 내의 바늘, 샘플링 장치 또는 감지 장치의 정확한 위치화를 요한다. 그러나, 통상적인 인 오보 장치 및 방법을 이용하여 난의 다양한 구획 내의 바늘, 샘플링 장치, 또는 감지 장치를 정확하고 반복적으로 위치하는 것은 어려울 수 있다. 따라서, 난의 다양한 구획 및 위치 내에 바늘, 감지 장치 및 샘플링 장치를 포함하나, 이에 제한되지 않는 장치를 정확하고 반복적으로 위치하는 개선된 방법에 대해 당업계에 요구가 존재한다.

발명의 요약

상기 논의의 면에서, 조류 난과 같은 대상으로부터 물질을 주입 및/또는 제거하는 주입 장치가 제공되며, 바디 부분 및 팁(tip)에서 끝나는 뾰족한 부분을 갖는 주입 바늘을 포함한다. 튜브가 실질적으로 동심원 관계로 주입 바늘에 부착되거나 주입 바늘 주위로 연장된다. 상기 튜브는 바늘 팁으로부터 예정된 거리에 위치한 말단 부분을 가진다. 상기 튜브 말단 부분은 바늘 팁이 대상의 막을 통해 난과 같은 대상 내로 삽입될 수 있는 거리를 제한하기 위해 멈추개(stop)로서 작용한다. 환상(annular) 공간은 주입 바늘 및 튜브 사이로 정의된다. 봉합 물질과 같은 물질이 환상 공간 내에 배치되어 환상 공간을 통해 물질의 유동을 막는다. 대안적으로, 상기 주입 바늘 및 튜브는 함께 융합되어, 환상 공간을 제거할 수 있다.

본 발명의 다른 구현예에 따라, 물질의 원반 (또는 물질의 다른 모양)이 주입 바늘 팁으로부터 예정된 거리에서 주입 바늘을 둘러쌀 수 있으며, 대상의 막 또는 기타 조직과 접촉될 때 멈추개의 기능을 할 수 있다. 물질의 원반은 다양한 물질로부터 형성될 수 있으며, 실제로 임의의 모양 및 배치를 가질 수 있다. 물질의 전형적인 원반은 상기 주입 바늘에 주위에 적용되는 접착 물질의 비드일 수 있다.

본 발명의 기타 구현예에 따라, 검출기 (예를 들면, 체중계, 하중계 등)가 바늘에 부착된 멈추개에 의해 난의 막에 가해진 힘을 측정하기 위해 이용될 수 있다. 바늘 및/또는 바늘 및 상기 바늘에 부착된 멈추개에 의해 막에 가해진 힘은 또한 측정될 수 있다.

본 발명의 기타 구현예에 따라, 장치는 난의 껍질에 구멍을 형성하기 위해 배치된 관 모양의 펀치를 포함한다. 바늘 (예를 들면, 주입 바늘, 샘플링 바늘 등)은 이동을 위해 펀치 내에 및 펀치에 의해 형성된 난 껍질의 구멍을 통해 위치한다. 멈추개는 상기 바늘에 부착되며, 바늘이 난 내에 삽입되는 거리를 제한하기 위해 바늘이 펀치를 통해 난 내로 움직일 때 펀치와 접촉하도록 배치된다.

본 발명의 기타 구현예에 따라, 장치는 난의 껍질에 구멍을 형성하기 위해 배치된 관 모양의 펀치를 포함한다. 관 모양의 위치화 멤버는 펀치 내에 상호간에(reciprocally) 배치되며, 바늘 (예를 들면, 주입 바늘, 샘플링 바늘 등)은 관 모양의 위치화(locating) 멤버 내에 상호간에 배치된다. 상기 위치화 멤버는 상기 구멍을 통해 난 내로 낮아지도록 배치되며, 난의 막 (또는 기타 내부 난 물질)과 접촉한다. 일단 접촉하면, 위치화 멤버는 이의 하향 운동을 멈추고, 움직일 수 없도록 적당한 위치에 잠긴다. 상기 바늘은 이어서 위치화 멤버에 대한 예정된 양에 의해 난 내로 연장되며, 물질이 난 내로 주입되고/되거나 물질 시료가 난으로부터 취해진다.

본 발명의 구현예에 따라, 막에 위치화 멤버에 의해 가해진 힘은 검출될 수 있다.

본 발명의 기타 구현예에 따라, 바늘은 위치화 멤버로서 작용하도록 배치될 수 있다. 상기 바늘은 막을 위치화하는 단계 동안 막을 파괴할 정도로 충분히 예리하지 않은 무딘 말단을 가진다. 일단 막과 접촉하면, 상기 바늘은 충분한 힘으로 및 물질을 난 내로 주입하고/하거나 상기 난으로부터 물질 시료를 제거하기 위한 예정된 거리에 의해 막을 통해 밀 수 있다.

본 발명의 기타 구현예에 따라, 조류 난으로부터/내로 물질의 샘플링 및/또는 주입 장치는 난의 껍질에 구멍을 형성하도록 배치된 관 모양의 펀치, 상기 펀치 내에 상호간에 배치된 관 모양의 위치화 멤버, 및 상기 위치화 멤버 내에 상호간에 배치된 바늘을 포함한다. 잠금 장치가 상기 펀치에 고정되어 있으며, 난의 막에 대해 위치화 멤버를 적당한 위치에 잠기도록 배치된다. 상기 잠금 장치는 상기 장치 하우징의 말단 부분과 짝지어 맞물리도록 배치된 뾰족한 말단 부분을 갖는 압축가능한 플랜지이다. 상기 플랜지 및 하우징이 짝지어 맞물릴 때, 상기 플랜지는 위치화 멤버 주위에서 압착하며, 펀치에 대해 위치화 멤버의 이동을 막는다. 상기 바늘은 위치화 멤버를 지나 예정된 거리로 난 내로 연장된다.

본 발명의 구현예에 따라, 조류 난을 주입 및/또는 샘플링하는 방법은 난을 예정된 위치에 배향시키는 단계; 난의 껍질 내로 구멍을 도입하는 단계; 난 껍질에서 상기 구멍을 통해 장치를 연장하는 단계; 바늘 팁을 통해 난 내의 막을 찌르는 단계 및 상기 바늘에 부착된 멈추개가 막에 접촉할 때까지 상기 난 내로 상기 바늘을 연장하는 단계를 포함한다. 물질은 상기 바늘을 통해 난으로부터 침착 및/또는 제거될 수 있다. 또한, 난 내로 연장된 장치와 연결된 검출기를 통해 난의 내부로부터 정보를 수득할 수 있다. 상기 장치는 이어서 상기 난으로부터 철수된다.

본 발명의 구현예에 따라, 난으로부터 요막액과 같은 물질을 샘플링하는 방법은 공기 셀을 위로 난을 배향시키고, 난의 껍질에서 구멍을 형성하는 것을 포함한다. 위치화 장치는 막 (예를 들면, 융모영양막 (CAM))과의 접촉이 검출될 때까지 상기 구멍을 통해 연장된다. 샘플링 장치는 예정된 양에 의해 상기 CAM을 통해 상기 위치화 장치로부터 연장되며, 요막액의 시료는 상기 샘플링 장치를 통해 수득된다.

본 발명의 구현예는 난 내의 임의의 위치 (예를 들면, 배하강)에 장치를 위치하기 위해 이용될 수 있다. 상기 장치는 배아 발생의 임의의 단계에서 물질을 전달하고/하거나 물질을 획득하기 위해 이용될 수 있다.

발명의 상세한 설명

본 발명은 지금 본 발명의 구현예를 제시한 첨부된 도면을 참고하여 더욱 상세히 이후에 기재된다. 그러나, 본 발명은 많은 상이한 형태로 구현될 수 있으며, 본원에 설명된 구현예에 제한되는 것으로 해석되어서는 안되며; 오히려, 상기 구현예는 상기 개시가 철저하고 완전하도록 제공되며, 당업자에게 본 발명의 범위를 충분히 전달할 것이다.

동등한 수는 명세서 전체적으로 동등한 구성요소를 언급한다. 도면에서, 특정 선, 층, 성분, 구성요소 또는 특징의 두께는 명확화를 위해 과장될 수 있다. 파선은 다르게 지정되지 않는다면 임의적인 특징 또는 작업을 예시한다. 본원에 언급된 모든 공개공보, 특허출원, 특허, 및 기타 참고문헌은 본원에 전체적으로 원용에 의해 포함된다.

본원에 이용된 용어는 단지 특정 구현예를 기재할 목적이며, 본 발명을 제한할 의도는 아니다. 본원에 이용된, 단수 형태 "a", "an" 및 "the"는 명세서가 명백하게 다르게 지정하지 않는다면, 또한 복수 형태를 포함할 의도이다. 본 명세서에서 이용될 때, 용어 "포함하다" 및/또는 "포함하는"은 언급된 특징, 정수, 단계, 작업, 구성요소, 및/또는 성분의 존재를 특정하나, 하나 이상의 기타 특징, 정수, 단계, 작업, 구성요소, 성분, 및/또는 이의 그룹의 존재 또는 첨가를 제외하지 않는 것으로 이해할 것이다. 본원에 이용된, 용어 "및/또는"은 하나 이상의 관련된 열거된 항목의 임의의 모든 조합을 포함한다. 본원에 이용된, "X 내지 Y" 및 "약 X 내지 Y"와 같은 구문은 X 및 Y를 포함하도록 해석되어야 한다. 본원에 이용된, "약 X 내지 Y"와 같은 구문은 "약 X 내지 약 Y"를 의미한다. 본원에 이용된, "약 X 내지 Y"와 같은 구문은 "약 X 내지 약 Y"를 의미한다.

다르게 정의되지 않는다면, 본원에 이용된 모든 용어 (기술적 및 과학적 용어 포함)는 본 발명이 속하는 당업자에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 흔히 이용되는 사전에서 정의된 것과 같은 용어는 본 명세서 및 관련 기술의 내용에서 이의 의미와 일치하는 의미를 갖는 것으로 해석되어야 하며, 명백하게 본원에서 정의되지 않는다면 이상적이거나 또는 과도하게 형식적인 의미로 해석되어서는 안 된다는 것을 이해할 것이다. 주지의 기능 또는 구성은 간결 및/또는 명료를 위해 상세히 기재되지 않을 수 있다.

구성요소가 또 다른 구성요소 "위에", "에 부착된", "에 연결된", "와 커플링된", "접촉하는" 등으로 언급될 때, 이는 직접 다른 구성요소 위에, 부착되어, 연결되어, 커플링되거나 또는 접촉할 수 있거나 또는 개재하는 구성요소가 또한 존재할 수 있다는 것을 이해할 것이다. 대조적으로, 구성요소가 예를 들면, 또 다른 구성요소 "직접 위에", "직접 부착된", "직접 연결된", "직접 커플링된", "직접 접촉하는" 것으로 언급될 때, 존재하는 개재 구성요소는 없다. 또한, 또 다른 특징에 "인접하여" 배치된 구조 또는 특징에 대한 참고는 인접한 특징에 중첩되거나 또는 기초가 되는 부분을 가질 것이라는 것을 당업자는 인식할 것이다.

"아래(under)", "아래(below)", "더 낮은", "위에", 상단의" 등과 같은 공간적으로 상대적인 용어는 도면에 예시된 바와 같이 하나의 구성요소 또는 특징의 다른 구성요소(들) 또는 특징(들)과의 관계를 기재하기 위해 기재의 용이를 위해 본원에 이용될 수 있다. 공간적으로 상대적인 용어는 이용 중인 장치의 상이한 방향 또는 도면에 도시된 방향 외의 작업을 포함할 의도라는 것을 이해할 것이다. 예를 들면, 도면에서의 장치가 뒤집어진다면, 다른 구성요소 또는 특징의 "아래(under)" 또는 "아래(beneath)"로서 기재된 구성요소는 이어서 다른 구성요소 또는 특징의 "위에" 배향될 수 있다. 그리하여, 전형적인 용어 "아래(under)"는 "위" 및 "아래"의 방향 양자를 포함할 수 있다. 상기 장치는 다른 방법으로 배향될 수 있으며 (90도 또는 다른 방향으로 회전함), 본원에 이용된 공간적으로 상대적인 기재는 따라서 해석된다. 유사하게, 용어 "위쪽으로", "아래쪽으로", "수직의", "수평의" 등은 구체적으로 다르게 나타내지 않는다면 단지 설명의 목적으로 본원에 이용된다.

용어 "제1", "제2" 등이 다양한 구성요소, 성분, 영역, 층 및/또는 섹션을 기재하기 위해 본원에 이용될 수 있지만, 상기 구성요소, 성분, 영역, 층 및/또는 섹션은 상기 용어에 의해 제한되어서는 안되는 것으로 이해될 것이다. 상기 용어는 하나의 구성요소, 성분, 영역, 층 또는 섹션을 또 다른 구성요소, 성분, 영역, 층 또는 섹션으로부터 구별하기 위해 단지 이용된다. 그리하여, 하기 기재된 "제1" 구성요소, 성분, 영역, 층 또는 섹션은 또한 본 발명의 교시로부터 벗어나지 않고 "제2" 구성요소, 성분, 영역, 층 또는 섹션으로 언급될 수 있다. 작업 (또는 단계)의 순서는 구체적으로 다르게 나타내지 않는다면 청구범위 또는 도면에 제시된 순서에 제한되지 않는다.

본원에 이용된 용어 "조류" 및 "조류 대상"은 임의의 조류 종의 수컷 및 암컷을 포함할 의도이나, 주로 난, 육류 또는 애완동물로서 상업적으로 키우는 가금을 포함할 의도이다. 따라서, 용어 "조류" 및 "조류 대상"은 특히 병아리, 칠면조, 오리, 거위, 메추라기, 꿩, 소형 앵무새, 앵무새, 앵무새(cockatoo), 코카틸 앵무새, 타조, 에뮤 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는 다양한 조류를 포함할 의도이다.

본원에 이용된, 용어 "초기 배아"는 산란 시기 (배반엽 단계)에서 원시생식세포 (PGC)가 이동하는 거의 발생 단계까지의 조류 배아를 말한다. 특히 병아리 배아에 대해, "초기 배아"는 일반적으로 거의 배아 단계 20 (H&H) 배아 또는 그 전이다. 병아리 배아의 발생 단계는 당업계에서 잘 이해되며, 예를 들면, [The Atlas of Chick Development, R. Bellairs & M. Osmond, eds., Academic Press, 1998]을 참고하며, 본원에 추가로 논의될 필요는 없다.

본원에 이용된, 용어 "배반엽"은 당업계에 이의 이해된 의미를 가진다. 일반적으로, 배반엽은 산란 시기에서 장배형성의 말기까지의 배아를 포함한다. 상기 배반엽은 종종 당업계에서 대안적인 표시 "배(germinal disc)" 또는 "배아 원반"에 의해 언급된다. 배반엽은 초기 배아에서 절단 동안 형성되는 세포의 평평해진 원반으로서 기재될 수 있으며, 장배형성의 말기까지 지속한다. 산란 시기까지, 배반엽의 2가지 주요 영역인 중앙에 위치한 투명한 영역 및 주변에 위치한 불투명 영역이 보인다 (The Atlas of Chick Development, R. Bellairs & M. Osmond, eds., Academic Press, 1998). 특히 병아리 배아에 대해, 상기 배반엽은 산란의 시기 (즉, 단계 IX 또는 단계 X EG&K)에서 거의 단계 XIII (EG&K) 또는 그 이상까지의 배아로서 전형적으로 특징지어진다.

본원에 이용된, 용어 "주입" 및 "주입하는"은 난 또는 배아 내로 물질을 전달 또는 방출하는 방법, 난 또는 배아로부터 물질 (즉, 시료)를 제거하는 방법, 및/또는 난 또는 배아 내로 검출기 장치를 삽입하는 방법을 포함하는, 난 또는 배아 내로 장치를 삽입하는 방법을 포함한다.

용어 "키메라 조류" 또는 "키메라 배아"는 "공여자"로서 언급되는 또 다른 조류 또는 배아 유래의 세포 (즉, 체세포 및/또는 배우자)를 포함하는 각각 수용자 조류 또는 배아를 말한다.

용어 "트랜스제닉 조류" 및 "트랜스제닉 배아"는 당업계에서 이의 일반적으로 이해되는 의미에 따라 본원에 이용된다. 트랜스제닉 조류 또는 트랜스제닉 배아는 하나 이상의 세포에서 외래 핵산 서열을 포함한다.

본원에 이용된, 용어 "막"은 바늘이 난 내의 원하는 위치를 넘어서 삽입되지 못하도록 하기 위해, 바늘 또는 기타 인 오보 장치에 부착된 멈추개에 관여하는 난 내의 임의의 조직 층을 말한다. 난 내의 전형적인 막은 외부 껍질 막, 내부 껍질 막, 융모막요막, 난황 (VM) 막, 및 양수막 (양막)을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

지금 도 1a를 참고하면, 본 발명의 구현예에 따라, 조류 난과 같은 대상으로부터 물질을 주입 및/또는 제거하는 주입 장치(10)가 예시된다. 상기 예시된 주입 장치(10)는 바디 부분(14) 및 팁(12b)에서 끝나는 뾰족한 부분(12a)를 갖는 주입 바늘(12)을 포함한다. 팁(12b)는 무디거나 또는 바늘 루멘(예시되지 않음)과 소통하는 구멍을 가질 수 있다. 바늘 및 바늘 내의 루멘은 본 발명의 당업자에 의해 잘 이해된다. 팁(12b)가 무디다면, 구멍은 팁에 인접하여 바늘의 측면에 형성되며, 바늘 루멘과 소통한다.

튜브(16)은 실질적으로 동심원 관계로 주입 바늘(12)에 부착되고, 주입 바늘(12) 주위로 연장된다. 상기 튜브(16)은 상기 바늘 팁(12b)로부터 예정된 거리에 위치한 말단 부분(16a)를 가진다. 상기 튜브 말단 부분(16a)는 상기 바늘 팁(12b)이 난과 같은 대상의 막 또는 기타 조직을 통해 삽입될 수 있는 거리를 제한하는 멈추개로서 작용한다.

상기 튜브(16)은 바늘(12) 주위로 완전히 연장될 필요는 없다. 튜브(16)은 본 발명의 구현예에 따라, 바늘(12)를 단지 부분적으로 둘러쌀 수 있다.

도 1b는 본 발명의 다른 구현예에 따라, 조류 난과 같은 대상으로부터 물질을 주입 및/또는 제거하는 주입 장치(10')을 예시한다. 도 1b에서, 상기 주입 바늘(12')은 예시된 바와 같이, 매우 가느다란 바디 부분(14')을 갖는 "당긴 피펫" 바늘이다.

도 1a-1b에 예시된 주입 바늘(12), (12')은 당업자에 의해 이해될 수 있는 바와 같이 다양한 방식으로 튜브(16)에 부착될 수 있다. 예를 들면, 바늘 및 둘러싸는 튜브는 서로 접착성 있게 부착될 수 있거나 또는 임의의 다양한 공지된 방법을 통해 함께 융합될 수 있다. 본 발명의 구현예는 주입 바늘(12), (12') 및 튜브(16)을 부착하는 임의의 특정 방법에 제한되지 않는다.

도 1a-1b에 예시된 주입 바늘(12), (12')은 유리, 금속, 및 중합체성 물질을 포함하나, 이에 제한되지 않는 다양한 물질로부터 형성될 수 있다. 전형적인 주입 바늘은 Humagen, Inc사에서 시판한다. 더욱이, 다양한 모양, 크기 및 배치를 갖는 주입 바늘이 본 발명의 구현예에 따라 이용될 수 있다. 바늘은 또한 난 내로 물질을 주입하거나 또는 난으로부터 물질을 샘플링하기 위한 무딘 팁 및 이의 측면에 형성된 하나 이상의 구멍을 가질 수 있다. 본 발명의 구현예는 예시된 주입 바늘(12), (12')에 제한되지 않는다. 주입 바늘(12), (12')을 둘러싸는 튜브(16)은 또한 유리 및 금속을 포함하나, 이에 제한되지 않는 다양한 물질로부터 형성될 수 있다.

도 1a-1b의 예시된 구현예에서, 환상 공간(20)은 주입 바늘(12), (12') 및 튜브(16) 사이로 정의된다. 봉합 물질(22)은 도 2에 예시된 바와 같이, 환상 공간(20)을 통한 물질의 흐름을 막기 위해 환상 공간(20) 내에 배치된다. 당업자에게 공지된 다양한 유형의 봉합 물질이 제한 없이 이용될 수 있다. 본 발명의 구현예에 따라, 상기 튜브(16) 및 바늘(12), (12')은 환상 공간이 존재하지 않도록 함께 융합될 수 있다.

본 발명의 구현예에 따라, 상기 주입 바늘(12), (12')은 약 1.98mm의 외경 및 약 1.2mm의 내경을 갖는 모세관 튜브(16) 내에 배치된다. 그러나, 본 발명의 기타 구현예에 따라, 튜브(16)는 제한 없이, 다양한 직경, 길이, 및 기타 차원을 가질 수 있다.

도 3은 멈추개로서 작용하며, 난(1) 내의 막(2)와 접촉하는 튜브(16)의 결과, 난(1) 내의 예정된 깊이로 연장된 주입 바늘(12)의 팁(12b)를 갖는 도 1a의 주입 장치(10)을 예시한다. 상기 막(2)는 난 내에 내부적으로 위치한 임의의 수많은 막일 수 있다. 상기 바늘 팁(12b)은 난 내의 임의의 다양한 위치에 위치할 수 있다. 도 3에서 예시된 위치(3)은 배반엽이다.

본 발명의 기타 구현예에 따라, 물질의 원반(30)은 도 4a-4b에 예시된 바와 같이, 주입 바늘 팁(12b)으로부터 예정된 거리에서 주입 바늘(12)를 둘러쌀 수 있으며, 멈추개의 기능을 할 수 있다. 도 4b에 예시된 바와 같이, 난 내로 바늘(12)의 삽입은 물질의 원반(30)이 막(2)와 접촉할 때 멈춘다 (예를 들면, 바늘의 아래쪽으로의 이동은 정지된다). 물질의 원반(30)은 다양한 물질로부터 형성될 수 있으며, 실제로 임의의 모양 및 배치를 가질 수 있다. 더욱이, 물질의 원반은 실제로 바늘(12) 상의 임의의 장소에 위치할 수 있다. 전형적인 물질의 원반은 주입 바늘(12)에 적용된 접착성 물질의 비드일 수 있다 (예를 들면, 주위로 또는 부분적으로 주위로).

본 발명의 기타 구현예에 따라, 힘 검출기(40)는 도 5에 예시된 바와 같이, 멈추개, 바늘, 및/또는 바늘 및 멈추개에 의해 난의 막에 가해진 힘을 측정하기 위해 이용될 수 있다. 예시된 구현예에서, 상기 힘 검출기(40)는 난(1) 아래에 위치한 체중계이다. 멈추개 (예를 들면, 튜브(16))가 난(1)의 막(2)와 접촉할 때, 아래 방향의 힘이 체중계(50) 상에서 측정된다. 전형적인 체중계는 Ohaus Corporation (Pine Brook, NJ)사로부터 시판된다. 또한, 바늘(12)이 막(2)를 통과하는데 필요한 힘은 힘 검출기(40)에 의해 측정될 수 있다. 상기 힘의 측정은 작업자로 하여금 난 내에 삽입된 바늘, 또는 기타 장치의 위치를 검출하게 할 수 있다.

대안적으로, 하중계가 힘 검출기(40)로서 이용될 수 있다. 당업자에 의해 이해될 수 있는 바와 같이, 증폭 및/또는 여과 회로가 하중계와 함께 이용되어 출력을 끌어 올리고, 임의의 원하지 않는 노이즈를 제거할 수 있다. 아날로그/디지탈 변환기 (예를 들면, USB LabJack U12, LabJack Corporation사, Lakewood, CO)가 특정 속도로 힘 신호를 수득하기 위해 이용될 수 있으며, 소프트웨어 프로그램 (예를 들면, LabView 7.0, National Instruments Corporation사, Austin, TX)가 시간에 따른 힘 신호를 도시하기 위해 이용될 수 있었다.

체중계/하중계의 이용은 또한 편평 난에서 난의 존재를 검출하기 위해 이용될 수 있다. 예를 들면, 바늘이 낮아지지만, 어떤 힘도 기록/검출되지 않는다면, 어떤 난도 존재하지 않는다고 알려질 것이다. 그리하여, 물질의 주입은 바늘을 통해 수행되지 않는다.

도 6a-6b를 참고하면, 본 발명의 구현예에 따른 장치는 난(1)의 껍질에 구멍을 형성하도록 배치된 관 모양의 펀치(50)을 포함할 수 있다. 예시된 구현예에서, 관 모양의 위치화 멤버(60)은 펀치(50) 내에서 상호간에 배치되며, 바늘(12)는 상기 위치화 멤버(60) 내에 상호간에 배치된다. 도 6a에서, 상기 펀치는 난(1)의 껍질에서 구멍을 형성한다. 도 6b에서, 상기 펀치는 난(1)로부터 철회되며, 상기 펀치(50) 내에서 상호간에 움직이는 상기 위치화 멤버(60)은 위치화 멤버(60)이 막(2)에 접촉할 때까지 난(1) 내로 아래로 움직인다. 접촉되면, 상기 위치화 멤버(60)은 난으로 이의 아래 방향 이동을 멈춘다. 도 6c에서, 상기 위치화 멤버(60)은 적당한 위치에 잠기고, 상기 바늘(12)은 상기 위치화 멤버(60)을 지나 예정된 거리로 난 내로 연장된다. 상기 위치화 멤버(60)는 임의의 다양한 수많은 방식을 통해 적당한 위치에 잠길 수 있다. 본 발명의 구현예와 함께 이용될 수 있는 전형적인 주입 바늘-펀치 배치는 미국특허 제4,903,635호; 제5,136,979호; 및 RE 35,973에 기재된다.

도 7은 본 발명의 특정 구현예를 예시하는 흐름도이다. 초기에 블록 200을 참고하면, 조류 난은 예정된 위치에 배향된다 (예를 들면, 일반적으로 상향 위치에서 난의 무딘 말단, 또는 옆길에 위치한 난 등). 상기 난은 실제로 임의의 위치로 배향될 수 있다. 예를 들면, 상기 난은 저장 기간 동안 수평 또는 수직 위치 (장축에 대해) 또는 이로부터 각도로 배향될 수 있다. 특정 구현예에서, 상기 난은 주입/샘플링에 대해 이용된 것과 동일한 방향으로 저장될 수 있다. 또한, 상기 난은 상기 난의 장축 주위의 회전 및 측면 대 측면 운동이 제한 또는 방지되는 고정된 위치 (예를 들면, 장치 내에)에 유지될 수 있다.

구멍은 당업자에게 공지된 펀치 또는 기타 장치를 통해 난의 껍질 내로 도입된다 (블록 210). 본 발명의 구현예에 따라, 난의 표면, 적어도 주입 위치 주위는 미생물 (또는 기타) 오염을 감소하기 위해 살균될 수 있다 (예를 들면, 알코올 또는 기타 살균 용액으로). 그러나, 주입 위치를 포함하는 난의 살균은 본 발명의 구현예에 대해 요구되지 않는다.

장치는 난 껍질에서 구멍을 통해 연장된다 (블록 220). 난 내의 막 (또는 기타 조직)은 주입 바늘에 의해 관통되며, 상기 바늘은 바늘에 부착된 멈추개가 난 내로 바늘의 하향 이동을 정지시키는 막과 접촉할 때까지 난 내로 연장된다 (블록 222). 물질이 상기 주입 바늘을 통해 난으로부터 침착 및/또는 제거된다 (블록 230). 정보가 또한 센서를 통해 난의 내부로부터 검출될 수 있다 (블록 240). 상기 장치는 이어서 상기 난으로부터 철수된다 (블록 250).

대안적으로, 위치화 멤버는 위치화 멤버의 하향 이동을 멈추게 하는 난 내의 막에 접촉할 때까지 난에서 구멍을 통해 연장된다 (블록 224). 상기 위치화 멤버는 이어서 적당한 위치에 잠긴다. 바늘, 샘플링 장치 및/또는 센서는 이어서 원하는 위치에서 바늘, 샘플링 장치 및/또는 센서를 정확하게 위치하기 위해 위치화 멤버를 지나 예정된 양에 의해 연장된다. 물질이 상기 난으로부터 침착 및/또는 제거된다 (블록 230). 정보가 또한 센서를 통해 난의 내부로부터 검출될 수 있다 (블록 240). 상기 장치 (위치화 멤버 및 바늘)는 이어서 상기 난으로부터 철수된다 (블록 250).

본원에 기재된 방법은 충분히 수동, 충분히 자동, 또는 반자동일 수 있다. 예를 들면, 난 제조 및 배아 위치화 단계는 수동 절차에 더욱 적합할 수 있다. 난 껍질에 구멍을 도입하고, 주입 장치를 삽입하는 단계는 수동일 수 있으나, 바람직하게는 자동이다.

특정 구현예에서, 복수 위치 주입 또는 샘플링 장치는 예를 들면, 미국특허 제6,032,612호에 기재된 바와 같이 이용될 수 있다. 기타 전형적인 전달 및/또는 샘플링 장치는 미국특허 제5,136,979호; 미국특허 제4,681 ,063호 및 제4,903,635호; 및 미국특허 제4,040,388호, 제4,469,047호 및 제4,593,646호에 기재된 것을 포함한다.

추가의 구현예에서, 미국특허 제6,244,214호에 기재된 검출기를 추가로 포함하는 주입 장치는 (난 또는 배아 내로 물질을 샘플링 및/또는 전달할 목적으로) 난 내로 주입과 동시에 또는 주입 전에 난의 배아 (예를 들면, 배반엽) 또는 기타 부분 또는 구획의 위치에 관한 정보를 수집하기 위해 이용된다.

당업자는 본 발명의 방법이 예를 들면, 시판되는 가금 작업에서 복수의 난에 대해 수행될 수 있다는 것을 인식할 것이다.

도 8a-8b를 참고하면, 본 발명의 구현예에 따른 주입 장치(10")는 난(1)의 껍질에서 구멍을 형성하기 위해 배치된 관 모양의 펀치(50)를 포함한다. 주입 바늘 (또는 샘플링 장치, 검출기 등)(12)은 펀치(50) 내에 위치하며, 상기 펀치(50)에 의해 형성된 난 껍질에서 구멍을 통한 상호 이동을 위해 배치된다. 멈추개(30)은 바늘(12)에 부착되며, 바늘이 난(1) 내에 삽입되는 거리를 제한하기 위해 상기 바늘(12)이 상기 펀치(50)을 통해 난(1) 내로 이동할 때 상기 펀치(50)의 상단 말단(50a)와 접촉하도록 배치된다. 도 8a에서, 상기 펀치(50)는 난(1)의 껍질에서 구멍을 형성한다. 도 8b에서, 상기 펀치(50)은 또한 위치화 멤버로서 이용되며, 펀치의 하향 이동이 멈추자마자 막(2)과 접촉할 때까지 아래로 연장된다. 상기 펀치는 이어서 적당한 위치에 잠길 수 있다. 상기 바늘(12)은 멈추개(30)이 상기 펀치(50)의 상단 말단(50a)에 접촉할 때까지 상기 난(1) 내로 아래로 움직인다. 그리하여, 상기 바늘(12)은 펀치/위치화 멤버에 의해 막(2)과 접촉한 후에 상기 난 내로 예정된 거리로 연장된다.

전형적인 구현예에서, 본 발명은 초기 배아 (예를 들면, 배반엽)를 포함하는 난에 물질을 정확하고 반복적으로 전달하기 위해 또는 초기 배아 자체, 예를 들면 배하강에 물질을 정확하고 반복적으로 전달하기 위해 이용될 수 있다. 세포, 트랜스제닉 세포, 백신, 폴리펩티드, 성장촉진제, 경쟁 배제 배지와 같은 생균 배양물, 항생제, 유전자 전달 벡터를 포함하는 이종 뉴클레오티드 서열, 비타민, 및/또는 염료와 같은 마커 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는 임의의 물질이 본 발명의 구현예에 의해 주입될 수 있다. 상기 물질은 단독으로, 또는 조합하여 (예를 들면, 항생제는 기타 물질의 전달과 함께 포함될 수 있다) 주입될 수 있다. 또 다른 예시 예로서, 염료 또는 기타 마커가 전달이 원하는 위치에 있는지를 결정하기 위한 수단을 제공하기 위해 전달되는 기타 물질과 함께 포함될 수 있다.

본 발명은 또한 유리하게는 발생하는 배아 내로 목적 뉴클레오티드 서열을 도입하기 위해 (바람직하게는, 상기 뉴클레오티드 서열은 배아 세포 내로 안정하게 형질전환된다), 즉, 트랜스제닉 조류 (상기에 정의됨)를 생성하기 위해 이용될 수 있다. 기타 구현예에서, 본 발명은 수용자 배아 내로 외래 또는 "공여자" 세포를 도입하기 위해 (즉, 상기 정의된 키메라 배아, 임의로 키메라 조류를 생성하기 위해) 이용될 수 있다.

도 9를 참고하면, 본 발명의 구현예에 따라, 난으로부터 물질 (예를 들면, 요막액 등)을 샘플링하는 방법이 예시된다. 난은 공기 셀을 위로 하도록 배향되며 (블록 300), 구멍은 이의 껍질 내로 도입된다 (블록 310). 난 조작 및 난의 껍질에서 구멍의 형성은 당업자에게 주지되어 있으며, 본 발명의 구현예에 따라 다양한 방식으로 달성될 수 있다.

위치화 장치는 막 (예를 들면, 융모영양막 (CAM))이 접촉될 때까지 난 껍질에서 구멍을 통해 연장된다 (블록 320). 상기 위치화 장치의 이동은 정지된 후, 바람직하게는 임의의 다양한 공지된 방법을 통해 적당한 위치에 잠긴다. 상기 위치화 장치는 난 껍질 내에 구멍을 형성하기 위해 이용된 펀치 내에 하우징될 수 있다. 그러나, 본 발명의 구현예는 상기 배치에 제한되지 않는다. 상기 위치화 장치는 CAM과 같은 막과 접촉하고, 샘플링/주입/검출 장치가 그로부터 연장되도록 배치되는 한 실제로 임의의 모양 및 배치를 가질 수 있다.

막과의 접촉은 막에 가해진 힘을 통해 검출된다. 도 5에 대해 전술한 바와 같이, 힘 검출기는 상기 위치화 장치에 의해 막에 가해진 힘을 측정하기 위해 이용될 수 있다. 상기 막에 가해진 힘은 저울, 하중계 또는 임의의 기타 힘 또는 압력 감지 장치에 의해 측정될 수 있다. 막에 대한 접촉으로부터의 힘은 막이 약 30 그램 초과의 힘으로 파괴될 수 있으므로, 약 30 그램을 초과해서는 안 된다.

본 발명의 구현예에 따라, 샘플링 장치는 예정된 양에 의해 막을 통해 상기 잠긴 위치화 장치로부터 연장되며 (블록 330), 요막액의 시료가 상기 샘플링 장치를 통해 수득된다 (블록 340). 상기 샘플링 장치는 당업자에 의해 이해될 수 있는 바와 같이, 상기 난으로부터 요막액을 뽑아내기 위해 배치된 바늘일 수 있다. 예를 들면, 상기 바늘은 무딘 팁 및 상기 팁에 인접한 바늘의 부분 내에 형성되는 구멍에서 끝나는 축으로 연장된 루멘을 가질 수 있다. 요막액 (또는 기타) 액체는 루멘에 진공을 걸어서 상기 구멍을 통해 루멘 내로 뽑아낼 수 있다. 상기 무딘 팁은 루멘이 물질로 막히는 것을 막는다.

상기 샘플링 장치가 연장되는 거리는 전형적으로 약 3mm 내지 약 5mm이나; 기타 거리 및 거리의 범위가 가능하다. 본 발명의 구현예에 따라, 상기 샘플링 장치는 전술한 바와 같이, 샘플링 장치가 막을 통해 삽입될 수 있는 거리를 제한하는 멈추개를 포함할 수 있다. 본 발명의 기타 구현예에 따라, 주입 장치 또는 검출 장치는 잠긴 위치화 장치에서 난으로 연장될 수 있다.

본 발명의 구현예는 혈액, 양수액, 및 요막액을 포함하나, 이에 제한되지 않는 조류 난으로부터 임의의 유형의 액체를 수득하는데 유리하다.

본 발명의 구현예는 조류 난으로부터 요막액을 수득하는데 특히 유리하다. 무리, 무리 나이, 저장 시간 및 기타 인자에 변이를 가지고, CAM의 위치 및 무결성은 극도로 가변적일 수 있다. 따라서, 바늘이 설정된 깊이를 움직이는 통상적인 방법을 통해 요막액 시료를 수득하는 것은 종종 불량한 및/또는 가변적인 샘플링 정확성을 초래할 것이다. 본 발명의 구현예는 긍정적으로 CAM을 위치시켜, 요막액뿐만 아니라, 혈액 또는 양수액 등과 같은 기타 유형의 액체 내에 시료 바늘의 정확한 위치를 보증한다.

지금 도 10a-10f를 참고하면, 본 발명의 구현예에 따라, 조류 난으로부터/조류 난에 물질을 샘플링 및/또는 주입하는 장치(100)가 예시된다. 상기 예시된 장치(100)는 난(1)의 껍질에서 구멍을 형성하기 위해 배치된 관 모양의 펀치(50)를 포함한다. 예시된 구현예에서, 관 모양의 위치화 멤버(60)는 펀치(50) 내에서 상호간에 배치되며, 바늘(12)은 상기 위치화 멤버(60) 내에서 상호간에 배치된다. 잠금 장치(102)는 상기 펀치(50)에 고정되며, 난(1)의 막(2)에 대해 적당한 위치에서 상기 위치화 멤버(60)을 잠그도록 배치된다. 상기 예시된 잠금 장치(102)는 상기 장치(100)의 하우징(104)의 뾰족한 말단 부분(104a)와 짝지어 맞물리도록 배치된 뾰족한 말단 부분(102a)을 갖는 압축가능한 플랜지이다. 상기 플랜지(102) 및 하우징(104)이 짝지어 맞물릴 때, 상기 플랜지는 상기 위치화 멤버(60) 주위에 압축되며, 상기 펀치(50)에 대한 상기 위치화 멤버(60)의 이동을 막는다. 본 발명의 구현예는 상기 위치화 멤버(60)을 잠그는 예시된 플랜지(102)에 제한되지 않는다. 다양한 유형의 장치가 제한 없이 상기 위치화 멤버(60)을 잠그는데 이용될 수 있다.

도 10a에서, 상기 장치(100)는 상기 펀치(50)가 난(1)의 껍질에서 구멍 (도 10b)을 형성하도록 아래쪽으로 움직이고 있다. 도 10c에서, 상기 펀치(50) 내에 상호간에 움직일 수 있는 상기 위치화 멤버(60)는 위치화 멤버(60)가 막(2)에 접촉할 때까지 난(1) 내로 아래로 움직인다. 접촉되면, 상기 위치화 멤버(60)는 난 내로 아래쪽으로 이동을 중지하고, 막(2)의 상단에 "자유롭게 떠 있다". 용어 "자유롭게 떠 있는"은 상기 위치화 멤버(60)가 상기 막(2) 상에 쉬고 있으며, 어떤 다른 하중도 상기 위치화 멤버(60)에 적용되지 않는다는 것을 의미한다.

여전히 도 10c를 참고하면, 상기 하우징(104)은 또한 아래쪽으로 움직이며, 상기 플랜지(102) (도 10d)와 맞물려 상기 펀치(50)에 대한 상기 위치화 멤버(60)을 잠근다. 상기 하우징(104)은 이어서 상기 플랜지(102)가 함께 맞물린 채 도 10e에서 예시된 바와 같이 위쪽으로 움직인다. 상기와 같이, 플랜지(102), 펀치(50) 및 위치화 멤버(60)는 단위체로서 위쪽으로 움직인다. 상기 하우징이 도 10f에 예시된 바와 같이 예정된 양으로 올라가면, 상기 위치화 멤버(60)는 상기 막(2)과 더 이상 접촉 관계가 아니다. 상기 바늘(12)은 이어서 상기 위치화 멤버(60)를 지나 예정된 거리로 난 내로 연장된다. 예시된 구현예에서, 멈추개(106)는 상기 위치화 멤버(60)에 부착된다. 상기 바늘(12)은 또한 그것과 함께 연결된 멈추개(108)를 포함한다. 상기 바늘(12)이 난 내로 아래쪽으로 움직일 때, 상기 바늘 멈추개(108)는 상기 바늘(12)의 하향 이동을 막는 상기 위치화 멤버 멈추개(106)과 맞물린다. 상기 멈추개(106), (108)는 상기 바늘(12)이 난 내로 예정된 양으로 삽입되도록 허용하도록 배치된다.

전술한 것은 본 발명의 예시이며, 이를 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 몇 가지 전형적인 구현예가 기재되었지만, 당업자는 많은 변형이 본 발명의 신규 교시 및 이점으로부터 실질적으로 벗어나지 않고 전형적인 구현예에서 가능하다는 것을 용이하게 인식할 것이다. 따라서, 모든 상기 변형은 청구항에 정의된 본 발명의 범위 내에 포함될 의도이다. 본 발명은 본원에 포함될 청구항의 동등물과 함께, 하기 청구항에 의해 정의된다.

도 1a-1b는 본 발명의 구현예에 따른 주입 장치의 측면도이다.

도 2는 라인 2-2를 따라 취해진 도 1a의 주입 장치의 단면도이다.

도 3은 난 내에 삽입된 도 1a의 주입 장치 및 막과 접촉 관계에 있는 멈추개를 갖는 난의 단면도이다.

도 4a는 본 발명의 또 다른 구현예에 따른, 거기에 부착된 멈추개를 갖는 주입 바늘의 투시도이다.

도 4b는 난 내에 삽입된 도 4a의 주입 장치 및 막과 접촉 관계에 있는 멈추개를 갖는 난의 단면도이다.

도 5는 본 발명의 다른 구현예에 따른, 난 내에 삽입된 도 1a의 주입 장치 및 힘 검출기와 접촉 관계에 있는 난을 갖는 난의 단면도이다.

도 6a-6c는 본 발명의 구현예에 따른, 펀치 내에 상호간에 배치된 위치화 멤버 및 상기 위치화 멤버 내에 상호간에 배치된 바늘을 갖는 장치의 측면 단면도이다.

도 7은 본 발명의 특정 구현예를 예시하는 흐름도이다.

도 8a-8b는 멈추개를 갖는 주입 바늘을 갖는 주입 장치의 측면 단면도인데, 상기 바늘은 난의 껍질에서 구멍을 형성하도록 배치된 관 모양의 펀치에 의해 둘러싸이며, 상기 펀치는 도 8a에서 난 껍질에서 구멍을 형성하며, 상기 주입 바늘은 도 8b에서 난 내에 삽입된다.

도 9는 본 발명의 특정 구현예를 예시하는 흐름도이다.

도 10a-10f는 본 발명의 기타 구현예에 따른, 펀치 내에 상호간에 배치된 위 치화 멤버 및 상기 위치화 멤버 내에 상호간에 배치된 바늘을 갖는 장치의 측면 단면도이다.

Claims

하기를 포함하는 장치:

팁(tip)을 포함하는 바늘; 및

상기 바늘 팁으로부터 예정된 거리에 상기 바늘에 부착된 멈추개(stop)로서, 상기 멈추개는 상기 바늘 팁이 대상의 막을 통해 상기 대상 내로 삽입될 수 있는 거리를 제한하는 장치.
제 1 항에 있어서,

상기 멈추개는 상기 바늘을 둘러싸는 튜브를 포함하는 것을 특징으로 하는 장치.
제 2 항에 있어서,

상기 튜브는 바늘과 동심원 관계로 상기 바늘을 둘러싸는 것을 특징으로 하는 장치.
제 1 항에 있어서,

상기 멈추개는 물질의 원반(disk)을 포함하는 것을 특징으로 하는 장치.
제 1 항에 있어서,

상기 멈추개에 의해 대상의 막에 가해진 힘을 측정하기 위해 배치된 검출기를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 장치.
제 1 항에 있어서,

상기 바늘 팁에 의해 대상의 막에 가해진 힘을 측정하기 위해 배치된 검출기를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 장치.
제 1 항에 있어서,

상기 바늘 팁 및 멈추개에 의해 대상의 막에 가해진 힘을 측정하기 위해 배치된 검출기를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 장치.
하기를 포함하는 난(egg) 주입 장치:

팁을 포함하는 주입 바늘; 및

주입 바늘과 실질적으로 동심원 관계로 상기 주입 바늘에 부착되고, 상기 주입 바늘 주위로 연장되는 튜브로서, 상기 튜브는 상기 바늘 팁으로부터 예정된 거리에 위치한 말단 부분을 가지며, 상기 튜브 말단 부분은 상기 바늘 팁이 상기 난의 막을 통해 난 내로 삽입될 수 있는 거리를 제한하는 멈추개로서 작용하는 장치.
제 8 항에 있어서,

환상(annular) 공간은 상기 주입 바늘 및 상기 튜브 사이로 정의되며, 봉합 재가 상기 환상 공간 내에 배치되어 상기 환상 공간을 통한 물질의 흐름을 막는 것을 특징으로 하는 장치.
제 8 항에 있어서,

상기 튜브는 상기 주입 바늘에 접착성 있게 부착되는 것을 특징으로 하는 장치.
제 8 항에 있어서,

상기 튜브는 상기 주입 바늘에 융합되는 것을 특징으로 하는 장치.
제 8 항에 있어서,

상기 튜브 말단 부분에 의해 난막에 가해진 힘을 측정하기 위해 배치된 검출기를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 장치.
제 8 항에 있어서,

상기 바늘 팁에 의해 난막에 가해진 힘을 측정하기 위해 배치된 검출기를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 장치.
제 8 항에 있어서,

상기 바늘 팁 및 튜브 말단 부분에 의해 난막에 가해진 힘을 측정하기 위해 배치된 검출기를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 장치.
제 8 항에 있어서,

난의 껍질에 구멍을 형성하기 위해 배치된 관 모양의(tubular) 펀치를 추가로 포함하며, 상기 주입 바늘은 상기 펀치에 의해 형성된 난 껍질에서 구멍을 통한 및 펀치를 통한 상호(reciprocal) 이동을 위해 상기 펀치 내에 위치하는 것을 특징으로 하는 장치.
하기를 포함하는 장치:

난의 껍질에 구멍을 형성하기 위해 배치된 관 모양의 펀치;

상기 펀치에 의해 형성된 난 껍질에서 구멍을 통한 및 펀치를 통한 상호 이동을 위해 상기 펀치 내에 위치하는 바늘로서, 상기 바늘은 난 내에 삽입되도록 배치된 팁을 포함하며; 및

상기 바늘 팁으로부터 예정된 거리에 상기 바늘에 부착된 멈추개로서, 상기 멈추개는 상기 바늘 팁이 상기 난 내에 삽입되는 거리를 제한하기 위해 난 내로 상기 펀치를 통해 바늘이 움직일 때 상기 펀치와 접촉하도록 배치된 장치.
제 16 항에 있어서,

상기 멈추개는 물질의 원반을 포함하는 것을 특징으로 하는 장치.
하기 단계를 포함하는 난 내에 장치를 삽입하는 방법:

조류 난을 예정된 위치에 배향시키는(orienting) 단계;

상기 난의 껍질 내로 구멍을 도입하는 단계;

상기 난 껍질에서 상기 구멍을 통해 장치를 연장시키는 단계로서, 상기 장치는 팁을 포함하는 바늘; 및 상기 바늘 팁으로부터 예정된 거리에 상기 바늘에 부착된 멈추개를 포함하며, 상기 멈추개는 상기 바늘 팁이 이의 막을 통해 상기 난 내로 삽입될 수 있는 거리를 제한하며; 및

상기 주입 바늘 팁으로 막을 찌르고, 상기 멈추개가 막에 접촉할 때까지 상기 난 내로 상기 바늘 팁을 연장하는 단계.
제 18 항에 있어서,

상기 장치는 전달 장치이며, 상기 방법은 상기 찌르기 단계에 이어, 상기 전달 장치를 통해 물질을 방출하고, 상기 난 내로 상기 물질을 침착하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 18 항에 있어서,

상기 장치는 샘플링 장치이며, 상기 방법은 상기 찌르기 단계에 이어, 상기 난으로부터 물질 시료를 제거하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 18 항에 있어서,

상기 장치는 검출기 장치이며, 상기 방법은 상기 찌르기 단계에 이어, 상기 난의 내부로부터 정보를 상기 검출기 장치를 이용하여 검출하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 18 항에 있어서,

상기 난은 배반엽을 포함하며, 상기 장치는 상기 난 껍질에서 구멍을 통해 상기 배반엽에서 위치로 연장되는 것을 특징으로 하는 방법.
제 18 항에 있어서,

상기 멈추개는 물질의 원반을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 18 항에 있어서,

상기 멈추개는 바늘과 실질적으로 동심원 관계로 상기 바늘에 부착되고, 상기 바늘 주위로 연장되는 튜브를 포함하며, 상기 튜브는 상기 바늘 팁으로부터 예정된 거리에 위치한 말단 부분을 가지며, 상기 튜브 말단 부분은 상기 바늘 팁이 상기 난막을 통해 난 내로 삽입될 수 있는 거리를 제한하는 멈추개로서 작용하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 18 항에 있어서,

난의 껍질 내로 구멍을 도입하는 단계는 관 모양의 펀치를 이용하여 구멍을 형성하는 것을 포함하며, 상기 난 껍질에 구멍을 통해 장치를 연장하는 것은 상기 펀치에 이은, 상기 난의 껍질에 형성된 구멍을 통해 상기 주입 바늘을 움직이는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
하기 단계를 포함하는, 공기 셀을 포함하는 난으로부터 액체를 샘플링하는 방법:

공기 셀을 위로 조류 난을 배향시키는 단계;

상기 난의 껍질에 구멍을 도입하는 단계;

막과의 접촉이 검출될 때까지 상기 난 껍질에 구멍을 통해 위치화(locating) 장치를 연장하는 단계;

상기 막과 접촉 관계에 있는 상기 위치화 장치를 잠그는 단계;

예정된 양에 의해 상기 막을 통해 상기 위치화 장치로부터 샘플링 장치를 연장하는 단계; 및

상기 샘플링 장치를 통해 액체 시료를 수득하는 단계.
제 26 항에 있어서,

상기 막은 융모영양막인 것을 특징으로 하는 방법.
제 26 항에 있어서,

상기 액체는 요막액을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 26 항에 있어서,

상기 액체는 양수액을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 26 항에 있어서,

상기 액체는 혈액을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 26 항에 있어서,

상기 막과의 접촉을 검출하는 것은 상기 위치화 장치에 의해 막에 가해진 힘을 검출하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 26 항에 있어서,

상기 막을 통해 상기 샘플링 장치를 연장하는 것은 약 2mm 내지 약 6mm로 상기 샘플링 장치를 연장하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 26 항에 있어서,

상기 샘플링 장치는 무딘 팁 및 상기 팁에 인접한 바늘의 부분 내에 형성되는 구멍에서 끝나는 축으로 연장된 루멘을 갖는 바늘을 포함하며, 액체를 상기 루멘을 진공 처리시 구멍을 통해 상기 루멘 내로 뽑아내는 것을 특징으로 하는 방법.
제 26 항에 있어서,

상기 샘플링 장치는 상기 샘플링 장치가 상기 막을 통해 삽입될 수 있는 거리를 제한하는 멈추개를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
하기 단계를 포함하는, 난 내로 물질을 주입하는 방법:

상기 난의 껍질에 구멍을 도입하는 단계;

막과의 접촉이 검출될 때까지 상기 난 껍질에 구멍을 통해 위치화(locating) 장치를 연장하는 단계;

상기 막과 접촉 관계에 있는 상기 위치화 장치를 잠그는 단계;

상기 잠긴 위치화 장치에 대해 예정된 양에 의해 상기 막을 통해 주입 장치를 연장하는 단계; 및

상기 주입 장치를 통해 상기 난 내로 물질을 주입하는 단계.
제 35 항에 있어서,

상기 막과의 접촉을 검출하는 것은 상기 위치화 장치에 의해 막에 가해진 힘을 검출하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 35 항에 있어서,

상기 막과의 관계에서 상기 위치화 장치를 잠그는 것은 상기 막과 접촉 관계 에 있는 상기 위치화 장치를 잠그는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
하기 단계를 포함하는, 난으로부터 물질을 샘플링하는 방법:

상기 난의 껍질에 구멍을 도입하는 단계;

막과의 접촉이 검출될 때까지 상기 난 껍질에 구멍을 통해 위치화(locating) 장치를 연장하는 단계;

상기 막과의 관계에서 상기 위치화 장치를 잠그는 단계;

상기 잠긴 위치화 장치에 대해 예정된 양에 의해 상기 막을 통해 샘플링 장치를 연장하는 단계; 및

상기 샘플링 장치를 통해 상기 난으로부터 물질을 샘플링하는 단계.
제 38 항에 있어서,

상기 막과의 접촉을 검출하는 것은 상기 위치화 장치에 의해 막에 가해진 힘을 검출하는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
제 38 항에 있어서,

상기 막과의 관계에서 상기 위치화 장치를 잠그는 것은 상기 막과 접촉 관계에 있는 상기 위치화 장치를 잠그는 것을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
하기를 포함하는 장치:

난의 껍질에 구멍을 형성하기 위해 배치된 관 모양의 펀치;

상기 펀치에 의해 형성된 난 껍질에서 구멍을 통한 및 펀치를 통한 상호 이동을 위해 상기 펀치 내에 위치하는 관 모양의 위치화 장치로서, 상기 위치화 장치는 난 내에 막과 접촉하도록 배치되며;

상기 막과의 관계에서 상기 위치화 장치를 잠그도록 배치된 잠금 장치; 및

위치화 멤버를 통해 상호 이동을 위해 상기 위치화 멤버 내에 위치한 바늘로서, 상기 바늘은 상기 잠긴 위치화 장치에 대해 예정된 양에 의해 난 내에 막을 통해 삽입되도록 배치된 팁을 포함하는 장치.
제 41 항에 있어서,

상기 잠금 장치는 상기 막과 접촉 관계에 있는 상기 위치화 장치를 잠그도록 배치된 것을 특징으로 하는 장치.
제 41 항에 있어서,

상기 잠금 장치는 상기 펀치에 부착된 것을 특징으로 하는 장치.
제 41 항에 있어서,

상기 바늘은 상기 난으로부터 시료를 제거하도록 배치된 것을 특징으로 하는 장치.
제 41 항에 있어서,

상기 바늘은 상기 난 내로 물질을 주입하도록 배치된 것을 특징으로 하는 장치.