KR20070054380A - 안지오제닌에 의해 차별적으로 발현되는 단백질 및 그측정방법 - Google Patents

안지오제닌에 의해 차별적으로 발현되는 단백질 및 그측정방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 안지오제닌에 의해 차별적으로 발현되는 단백질, 안지오제닌에 의한 단백질 발현 변이를 측정하기 위한 항체, 단백질 칩 및 이를 이용한 측정방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 단백질, 이에 대한 항체 또는 이러한 항체가 고정된 단백질 칩을 이용하여 안지오제닌에 의한 단백질 발현 변이를 간단하고 경제적으로 측정할 수 있으며, 이러한 발현 변이를 통하여 안지오제닌의 유무를 용이하게 파악할 수 있다.
안지오제닌, 발현 변이, 항체, 단백질 칩

Description

안지오제닌에 의해 차별적으로 발현되는 단백질 및 그 측정방법{Protein differentially expressed by angiogenin and detecting method thereof}
도 1은 60개의 신호전달 단백질에 대한 항체가 고정된 단백질 칩을 사용하여 인간 제대정맥 내피세포(Human umbilical vein endothelial cell, 이하 "HUVEC")에서 안지오제닌에 의해 발현 변이된 단백질을 분석하는 단계를 개략적으로 보여주는 그림임.
도 2는 본 발명의 항체를 검색하기 위한 실험에 사용된 단백질 칩에서 안지오제닌이 처리된 HUVEC 및 안지오제닌이 처리되지 않은 HUVEC의 단백질 발현 차이를 스캔하여 나타낸 사진임.
도 3은 본 발명의 항체를 검색하기 위한 실험에 사용된 도 2 좌·우측의 단백질 칩에 고정된 각각의 항체를 나타내는 지도임.
도 4는 본 발명의 항체를 검색하기 위한 실험에 사용된 단백질 칩에서 대조군과 실험군의 단백질 발현 차이를 분산도로 나타낸 그래프임.
도 5는 본 발명의 항체를 검색하기 위한 실험에서 얻은 상향 또는 하향 조절된 단백질에 대한 항체의 Cy5/Cy3 비율을 나타낸 그래프임. Cy5/Cy3 비율이 약 1.0인 단백질은 발현 양이 변화되지 않았다는 것을 의미함.
도 6은 본 발명의 항체를 검색하기 위한 실험에 사용된 단백질 칩의 각 스팟 의 Cy5:Cy3 비율을 나타낸 등급화된 이미지임.
도 7은 웨스턴 블랏 실험과 단백질 칩 실험을 통해 얻은 결과를 비교한 도표임.
본 발명은 안지오제닌(angiogenin)에 의해 차별적으로 발현되는 단백질, 이에 대한 항체, 이러한 항체가 고정된 단백질 칩 및 이러한 단백질 칩을 이용하는 측정방법에 관한 것이다.
세포 내 단백질들을 연구하여 유전자 기능을 규명하는 프로테오믹스(Proteomics)는 포스트-게노믹(Post-genomic) 시대의 연구분야로 부상하고 있으며, 기능 프로테오믹스(functional proteomics)는 단백질 발현 패턴분석, 질병 진단을 위한 바이오마커 분석, 새로운 바이오마커, 신약 타깃의 발굴, 신약 후보물질의 탐색 등 신약개발의 핵심적 기술로 널리 응용될 수 있는 연구분야이다. 그러나, 단백질 기능연구의 촉진을 위해서는 새로운 기술적 돌파구를 마련할 수 있는 기술혁신이 이루어져야 하며, 이러한 분야가 고감도 고밀도 단백질 마이크로어레이 칩 (highly sensitive protein microarray chip) 기술이라고 할 수 있다. 단백질 칩 기술은 단백질, 항체, 펩타이드, 리간드 등의 생체분자를 이용하여 소형화 및 집적화된 칩 표면에서의 반응으로 대량 및 동시분석을 위한 기술로서 최근 인간게놈지도의 발표로 단백질의 상호작용 및 기능 분석의 중요성이 대두 되면서 DNA 칩과 더 불어 활발히 개발되고 있다.
한편 항체 마이크로어레이 기술은 세포 또는 조직과 같은 생물학적 샘플에서 단백질 발현 패턴 연구를 가능하게 하는 새로운 도구로, 단백질 발현 분석(expression profiling)에 이용하는 항체 마이크로어레이 기술은 몇몇 문헌에서 공지되었다 (Sreekumar, A. 등, Cancer Res. 2001, 61, 7585-7593; Nielsen, U. 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003, 100, 9330-9335; Haab, B. 등. Genome Biol. 2001, 2, 4-7; 및 Tannapfel, A. 등, J. Pathol. 2003, 201, 238-249 참조).
한편 안지오제닌은 인간 결장 샘암종 세포인 HT-29에서 처음 분리된 분자량이 14kDa인 단백질(Fett, J. W. 등, Biochemistry 1985, 24, 5480-5486 참조)로 포유류의 세포질 및 젖에 존재하며 혈관신생을 유도하는 인자이다 (Shaporo, R. 등. Biochemistry 1987, 26, 5141-5146 및 Bond, M.D., Valle, B.L., Biochemistry 1988, 27, 6282-6287 참조). 안지오제닌은 혈관신생에 필수적인 특이한 리보뉴클레오티드 활성을 갖고 있으며(Shaporo, R. 등, Biochemistry 1986, 25, 3527-3532. 및 St. Clair, D.K. 등, Proc,Natl, Acad, Sci. USA 1987, 84, 8330-8334 참조), 상기 혈관신생 기능(angiogenic function)은 안지오제닌이 내피세포와 결합할 때 자극되는 수많은 세포 활성에 의해 매개된다. 상기 안지오제닌과 결합한 단백질들은 세포밀도에 따라 내피세포의 표면에서 발현되는 α-평활근 형태 액틴 및 170 kDa 잠정(putative) 수용체인 것으로 확인되었다 (Hu, G.F. 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997, 94, 2204-2209 참조). 안지오제닌은 상기 단백질들과 결합하고 세포 증식을 유도하며, 그들의 세포 밀도-의존적 발현은 다른 밀도를 가진 세포가 각 각 다른 역할들을 하는 혈관신생 과정의 각 상에 관련된 안지오제닌의 다른 활성을 반영하는 것으로 예상된다 (Hu, G.F. 등. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997, 94, 2204-2209 참조). 그러나, 이러한 다양한 세포 활성에 대한 세포 내 신호 경로(signaling pathway)는 아직까지 밝혀지지 않았다.
혈관신생은 현존하는 혈관으로부터 새로운 혈관이 형성되는 것을 말하며, 혈관신생은 여러 유도 인자에 의해 일어난다. 배성장, 생식, 발달 및 상처 회복과 같은 정상적인 과정에서는 혈관신생은 잘 조절되면서 일어난다. 그러나, 이러한 혈관신생이 잘 조절되지 않으면 당뇨병성 망막증, 류마치스성 관절염, 카포시육종 등과 같은 질병이 발생할 수도 있다. 특히 종양은 자신이 성장하기 위해서 영양분을 흡수하고 노폐물을 배출하는 통로로서 반드시 새로운 혈관의 형성을 필요로 하며 이를 위해 암세포들은 여러 혈관형성 인자들을 방출하고, 그 중 안지오제닌은 RNase A와 유사한 단백질로서 그 활성을 억제하면 종양의 성장이 억제된다는 사실이 여러 연구에 의해 입증되었다. 따라서, 혈관신생 유도 인자인 안지오제닌의 작용기구를 밝힐 수 있다면, 불필요한 혈관신생에 기인하는 여러 질병을 치료할 수 있는 계기가 될 수도 있다.
따라서 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 안지오제닌의 발생 여부를 간단하고 경제적으로 측정하기 위하여 안지오제닌에 의해 차별적으로 발현되는 단백질, 이에 대한 항체 및 이러한 항체를 이용한 단백질 칩을 제공하는 것이다.
본 발명이 이루고자 하는 다른 기술적 과제는 안지오제닌에 의한 단백질 발 현 변이, 즉 안지오제닌의 발생 여부를 측정할 수 있는 방법을 제공하는 것이다.
전술한 기술적 과제를 달성하기 위하여, 본 발명은 서열번호 1번의 Rb(p110), 서열번호 2의 Rbx1&2, 서열번호 3의 Cdc34, 서열번호 4의 STAT3, 서열번호 5의 Nibrin, 서열번호 6의 Brm, 서열번호 7의 TTK, 서열번호 8의 Cdk4, 서열번호 9의 Cdk1/Cdc2, 서열번호 10의 MAD2, 서열번호 11의 PCNA, 서열번호 12의 BRCA1, 서열번호 13의 P35, 서열번호 14의 IkB-alpha, 서열번호 15의 KAP 및 서열번호 16의 P55cdc로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 안지오네닌에 의해 차별적으로 발현되는 단백질을 제공한다.
본 발명은 또한 상기 단백질을 포함하는 것을 특징으로 하는 안지오제닌에 의한 단백질 발현 변이 측정용 조성물을 제공한다.
본 발명은 상기 단백질 또는 그 단백질의 항체를 포함하는 것을 특징으로 하는 안지오제닌에 의한 단백질 발현 변이 측정용 단백질 칩을 제공한다.
본 발명은 또한 상기 단백질 및/또는 이에 대한 마커를 이용하는 것을 특징으로 하는 안지오제닌에 의한 단백질 발현 변이 측정방법을 제공한다.
이하, 본 발명에 대하여 보다 구체적으로 설명한다.
본 발명자들은 인간 제대정맥 내피세포(HUVEC, Human umbilical vein endothelial cell)를 이용하여 실험한 결과 안지오제닌에 의해 몇몇 단백질의 발현이 변화된다는 놀라운 사실을 발견하였다. 보다 구체적으로 60개의 신호전달 단백질에 대한 항체가 고정된 단백질 칩을 사용하여 안지오제닌에 의한 단백질의 발현 정도를 평가한 결과 몇몇 단백질의 발현이 증가하거나 또는 감소하였다.
또 상기 단백질 칩에 의해 검출된 단백질의 발현 정도를 웨스턴 블럿 분석법으로 검증한 결과 본 발명의 항체가 고정된 단백질 칩은 안지오제닌에 의한 발현 변이를 정확하고 간단하게 측정할 수 있다는 점을 확인하였다.
이러한 사실들로부터 본 발명은 서열번호 1번의 Rb(p110), 서열번호 2의 Rbx1&2, 서열번호 3의 Cdc34, 서열번호 4의 STAT3, 서열번호 5의 Nibrin, 서열번호 6의 Brm, 서열번호 7의 TTK, 서열번호 8의 Cdk4, 서열번호 9의 Cdk1/Cdc2, 서열번호 10의 MAD2, 서열번호 11의 PCNA, 서열번호 12의 BRCA1, 서열번호 13의 P35, 서열번호 14의 IkB-alpha, 서열번호 15의 KAP 및 서열번호 16의 P55cdc로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 안지오제닌에 의해 차별적으로 발현되는 단백질, 이에 대한 항체, 이러한 단백질 및/또는 항체를 포함하는 안지오제닌에 의한 단백질 발현 변이 측정용 조성물 또는 단백질 칩을 제공한다.
본 발명의 안지오제닌에 의한 단백질 발현 변이 측정용 항체는 후술하는 슬라이드 타입의 단백질 칩 이외에 마이크로비드(microbead) 등에도 부착되어 이용될 수도 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
안지오제닌에 의해 발현 정도가 변화하는 단백질을 검출하기 위한 본 발명의 항체를 부착하는데 사용될 수 있는 단백질 칩으로 ProteoChip™(Proteogen, Inc., 서울, 한국)이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다. ProteoChip™은 아민화된(aminated) 글래스 슬라이드에 캘릭스아렌(calixarene) 유도체를 코팅한 것으로 캘릭스아렌 유도체는 이중기능 분자 연결자(bifunctional molecular linker)로서 작 용한다 (Han M.H. 등: ProteoChip, its fabrication method and detection of protein using ProteoChip, 대한민국 특허출원번호 제2002-41770호 및 Lee, Y.S. 등: ProteoChip: a highly sensitive protein microarray proposed by a novel method of protein immobilization for application of protein-protein interaction studies, Proteomics 2003; 3: 2289-2304 참조). ProteoChip™은 고감도 검출이 가능하여 바람직한데, 이는 이중기능 친화성(affinity) 연결자(linker)인 ProLinker™((Proteogen, Inc., 서울, 한국)에 의해 단백질을 고정하는 표면 화학(surface chemistry)이 개선되었기 때문이며, 이러한 방식으로 단일클론 항체는 배좌(conformation)의 변화없이 칩 표면에 고정될 수 있고 결과적으로 결합 활성의 손실 없이 바른 배열을 가진 고밀도 단일층을 형성할 수 있다 (Lee, Y.S. 등, Proteomics 2003, 3, 2289-2304 참고). ProteoChip™은 또한 매우 낮은 검출 한계를 가져 바람직하며, ProteoChip™ 상에 고정된 항체 마이크로어레이는 4℃에서 3개월 이상 활성 감소 없이 안정한 것을 볼 수 있다.
기타 항체를 제조하는 방법, 항체를 기질(substrate) 위에 고정하는 방법 및 항체와 대응 단백질을 반응시키는 방법은 본 발명이 속한 분야에서 잘 알려져 있다.
이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위하여 하기 실시예 등을 들어 설명한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 실시예들에 한정되는 것으로 해석돼서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 본 발명의 구체적 이해를 돕기 위해 예시적으로 제공되는 것이다.
<실험예 1> HUVEC의 배양
HUVEC는 클로네틱(Clonetics)사에서 구입하였으며, 구입한 HUVEC를 성장인자 및 2% 소태아혈청(FBS)을 포함한 EGM-2 성장 배지(Cambrex Bio Science사, 미국)에서 5% CO2 및 37℃습한 대기조건으로 배양하였다.
<실험예 2> 단백질 추출 및 표지(labeling)
실험예 1의 조건으로 배양한 HUVEC에 30분 동안 안지오제닌(250ng/㎖)이 처리된 HUVEC 및 안지오제닌이 처리되지 않은 HUVEC에서 단백질 1 ㎎을 각각 추출하여 제조사의 설명에 따라 형광물질(Cy5 또는 Cy3; Amersham Pharmacia Biotech사, 스웨덴)로 표지하였다 (Sukhanov, S., Delafontaine, P., Proteomics. 2005, 5, 1274-1280 참조).
보다 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 먼저 각 HUVEC을 추출 완충액(pH 7.9 HEPES 20 mM, 20%(v/v) 글리세롤, 1%(v/v) NP-40, MgCl2 1 mM , EDTA 0.5 mM, EGTA 0.1 mM, PMSF 1 mM, DTT 0.1 M 및 프로테아제 억제제의 혼합물)으로 용해하였다. 브래드퍼드 방법(Bio-Rad사, 미국)으로 단백질 농도가 500 ㎍이 되도록 조절한 다음, 암실 실온에서 1시간 동안 각각 형광물질로 표지하였다. 이때, 안지오제닌이 처리된 HUVEC((+)ANG로 표기) 및 처리되지 않은 HUVEC((-)ANG로 표기)의 단백질을 각각 Cy5 또는 Cy3로 표지하였다. (-)ANG-Cy3 0.5 mg과 (-)ANG-Cy5 0.5 mg의 혼합물을 대조군으로, (-)ANG-Cy3 0.5 mg과 (+)ANG-Cy5 0.5 mg의 혼합물을 실험군 정한 다음 표지하는데 사용되지 않은 유리 염료를 컬럼 여과로 제거하였다. 표지된 단백질을 모으고, PD-10 탈염(desalting) 컬럼(Amersham Bioscience사, 스웨덴)을 사용하여 결합하지 않은 유리염료로부터 분리하였다.
<실험예 3> 항체 마이크로어레이 단백질 칩 제조 및 분석
단백질 칩으로는 ProteoChip™(Proteogen, Inc., 서울, 한국)을 사용하였으며, ProteoChip™ 상에 마이크로어레이어(CM-1000; Proteogen, Inc., 서울, 한국)로 HUVEC의 신호전달 단백질 60개에 대한 항체(hypromatrix사, 미국)를 스팟팅하여 항체 마이크로어레이(microarray)를 제조하였다.
구체적으로 설명하면 다음과 같다. 먼저 상기 항체들을 PEG 20%를 함유한 인산완충액을 이용하여 100 ㎍/㎖로 희석시키고, 항체 마이크로스팟(microspots)을 상기 단백질 칩 상에 3시간 동안 37℃로 제조하였다. 상기 제조된 칩을 세척하고, 쉐이커에서 1시간 동안 실온조건으로 블로킹(블로킹 완충액: 3% 소혈청알부민(BSA) 및 0.5% 트윈-20을 함유한 인산완충액)하였다. 블로킹 후에 과잉의 BSA를 제거하기 위해 PBST 용액(0.2% 트윈 20을 함유하는 인산완충액)으로 상기 칩을 세척하고, N2 가스로 건조시켰다(Pavlickova, P. 등, J Proteome Res. 2002, 1(3), 227-231 참조). 형광물질로 표지된 세포 용해물(1 ㎎/㎖)을 항체의 스팟(spots)에 적용한 후 37℃에서 1시간 동안 배양시켰다. 상기 슬라이드를 PBST 용액으로 세 번 세척하였고, N2 가스로 건조시켰다.
각 슬라이드를 형광 마이크로어레이 스캐너(Axon Instruments사, 미국)를 사 용하여 분석하였으며, 각 스팟에 있어서의 Cy3에 대한 Cy5의 비율이 제조자의 소프트웨어 패키지 (Genepix 6.0)을 사용하여 계산되었다. 각 실험은 적어도 세 번 반복되었다.
<실험예 4> 데이터 분석
마이크로어레이 분석은 Genepix 소프트웨어 패키지를 이용하여 수행되었다. 각 슬라이드들은 각 슬라이드에 대한 최적조건으로 스캔되었고, 데이터는 Cy5 강도:Cy3 강도로 플롯팅하였다. 각 슬라이드 내 반복 값들은 신호 강도이며, 마이크로소프트사 엑셀(Excel)을 사용하여 Cy5:Cy3 비율을 계산하였다(Anderson, K. 등, Brain. 2003, 126(Pt 9), 2052-2064 참조). Cy5:Cy3 비율의 그리드 정렬 및 연산은 제품 소프트웨어를 사용하여 수행하였다 (Hudelist, G. 등, Breast Cancer Res Treat. 2004, 86(3), 281-291 참조).
모든 스팟의 평균(median) 비율 값들을 1.0으로 기준화하고, 값이 1.0인 것은 단백질 발현이 변화하지 않았음을 의미한다. 본 명세서에 나타낸 각 데이터는 최소 3번 실험하여 얻어진 평균값이며, 평균값(표준화된(normalized) Cy5/Cy3 비율)들은 발현변화 차이에 따라 분류되었다.
도 2는 대조군과 실험군의 단백질 칩을 스캔한 사진으로, 도 2에 나타나는 바와 같이 대조군과 비교하여 실험군에서 단백질 발현 정도가 크게 변화하였다. 스캔한 슬라이드에서, 붉은색 계통의 스팟은 Cy5로 표지된 단백질이 많이 존재한다는 것으로 안지오제닌으로 처리된 세포에서 단백질이 상대적으로 많이 발현되었다는 것을 의미하고, 초록색 계통의 스팟은 Cy3으로 표지된 단백질이 많이 존재한다는 것으로 안지오제닌이 처리되지 않은 세포에서 단백질이 상대적으로 많이 발현되었다는 것을 의미한다. 이를 바탕으로 항체 단백질 칩 지도(도 3)에서 상향- 및 하향-조절된 단백질 및 그 항체를 찾을 수 있다.
도 4에서는 실험군의 분산도(R2=0.62)가 대조군(R2=0.90)보다 높은 분산도를 나타낸다는 것을 보여주며, 이는 안지오제닌으로 처리된 실험군의 세포들 내에서 단백질 발현 양 변화가 있음을 의미한다.
도 2 및 도 4에 나타나는 바와 같이, 대조군과 실험군의 발현 차이는 안지오제닌으로 처리된 HUVEC에서 신호전달 단백질의 차별적 발현을 의미하는 것이다.
도 5는 Cy5:Cy3 비율의 정규화(normalized) 평균을 각 단백질에 맞게 계산하여 그래프로 나타낸 것이다. 상기 그래프에서 정규화 평균은 각 단백질의 발현 레벨을 나타내기 위해 사용되었고, 각 단백질의 발현은 독립적으로 측정되었다. 따라서, 그래프에서 정규화된 Cy5:Cy3의 비율이 1.0을 초과하는 것은 상향 조절된 단백질을 의미하고, 1.0 미만인 것은 하향 조절된 단백질을 의미하며, 1.0은 단백질의 발현이 변화하지 않았음을 의미한다.
<실험예 5> 웨스턴 블랏 분석(western blot analysis)
상기 실험예 1 내지 4를 통해 확인한 단백질 발현 변이를 검증하기 위하여 웨스턴 블랏 분석을 실시하였다. HUVEC을 1시간 동안 혈청이 없는 배지에서 안지오제닌 1 ㎍/㎖과 함께 배양하고 단백질 추출물을 제조하였다. 그 후, HUVEC 용해물로부터 단백질을 NuPAGE™(Invitrogen사, 미국) 상에서 분리시켰다. 총 단백질을 인산완충액으로 세척하고 용해 완충액(50 mM Tris-Cl (pH7.5), EGTA 3 mM, 0.5% 트리톤 X-100, β-글리세로포스페이트 12 mM, 염화 나트륨 150 mM, 플루오르화 나트륨 50 mM, 나트륨 바나데이트 1 mM, DTT(dithiothreitol) 2 mM, 플루오르화 페닐메틸설포닐 1 mM, 아프로티닌(aprotinin) 0.5 ㎍/㎖, 0.1% β-머캅토에탄올 및 1X 프로테아제 억제제의 혼합물)으로 용해시켰다. 상기 용해질의 단백질 농도를 측정하고 NuPAGE™ 4~12% Bis-Tris 겔 상에서 분리하였다. 그 후, 상기 전기영동된 단백질은 PVDF 막위로 옮겨졌다. PBST 용액으로 1시간 동안 막을 블로킹한 후, 일차 항체로 4℃에서 하룻밤 동안 배양하였다. 상기 막들을 PBST 용액으로 세척하였고, 실온에서 2시간 동안 HRP(horseradish peroxidase)와 결합된 2차 항체(anti-IgG)와 배양하였다.
도 7에 상기 웨스턴 블랏 실험의 결과를 나타내었다. 웨스턴 블랏 결과인 도 7에 나타나는 바와 같이, Cdk4, Cdk1/Cdc2, STAT-3 및 MAD2와 같은 상향 조절된 단백질은 안지오제닌의 처리로 단백질 발현 양이 증가한 반면, IkB-알파 및 PCNA와 같은 하향 조절된 단백질은 안지오제닌의 처리로 단백질 발현 양이 감소하였다. 따라서 본 발명의 단백질 칩을 이용한 발현 변이 측정 결과는 웨스턴 블랏 분석을 이용한 결과와 일치한다.
상기 결과들을 종합하여 볼 때, 본 발명의 항체, 이러한 항체가 고정된 단백질 칩 및 이러한 항체 또는 단백질 칩을 이용하는 측정방법은 안지오제닌에 의한 발현 변이를 측정하는 데 있어 정확하고 유용한 도구 및 방법이라고 할 수 있다.
최종적으로 안지오제닌 처리에 의하여 HUVEC에서 발현이 변화되는 단백질들 을 아래의 표 1에 기재하였다.
단백질 서열번호 Cy5:Cy3 비율
상향 조절된 단백질 Rb(p110) 1 1.54
Rbx1&2 2 1.36
Cdc34 3 1.33
STAT3 4 1.27
Nibrin 5 1.25
Brm 6 1.24
TTK 7 1.23
Cdk4 8 1.22
Cdk1/Cdc2 9 1.18
MAD2 10 1.18
하향 조절된 단백질 PCNA 11 0.82
BRCA1 12 0.78
P35 13 0.77
IkB-alpha 14 0.76
KAP 15 0.76
P55cdc 16 0.75
본 발명은 안지오제닌에 의한 발현 정도가 변화하는 단백질을 밝혀내고 이에 대한 항체 및 이러한 항체가 고정된 단백질 칩을 제공하며, 이러한 단백질, 이에 대한 항체 또는 단백질 칩을 이용하여 안지오제닌의 유무를 간단하고 경제적으로 측정할 수 있다. 또한 이러한 고감도 고밀도 단백질 칩을 이용하는 본 발명의 측정방법은 안지오제닌에 의한 단백질 발현 변이를 초고속 대량 탐색(high-throughput screening)하는 것이 가능하다.
<110> KANG, IN CHEAL <120> Protein differentially expressed by angiogenin and detecting method thereof <130> P05-175 <160> 16 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 928 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Pro Pro Lys Thr Pro Arg Lys Thr Ala Ala Thr Ala Ala Ala Ala 1 5 10 15 Ala Ala Glu Pro Pro Ala Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Glu Glu Asp 20 25 30 Pro Glu Gln Asp Ser Gly Pro Glu Asp Leu Pro Leu Val Arg Leu Glu 35 40 45 Phe Glu Glu Thr Glu Glu Pro Asp Phe Thr Ala Leu Cys Gln Lys Leu 50 55 60 Lys Ile Pro Asp His Val Arg Glu Arg Ala Trp Leu Thr Trp Glu Lys 65 70 75 80 Val Ser Ser Val Asp Gly Val Leu Gly Gly Tyr Ile Gln Lys Lys Lys 85 90 95 Glu Leu Trp Gly Ile Cys Ile Phe Ile Ala Ala Val Asp Leu Asp Glu 100 105 110 Met Ser Phe Thr Phe Thr Glu Leu Gln Lys Asn Ile Glu Ile Ser Val 115 120 125 His Lys Phe Phe Asn Leu Leu Lys Glu Ile Asp Thr Ser Thr Lys Val 130 135 140 Asp Asn Ala Met Ser Arg Leu Leu Lys Lys Tyr Asp Val Leu Phe Ala 145 150 155 160 Leu Phe Ser Lys Leu Glu Arg Thr Cys Glu Leu Ile Tyr Leu Thr Gln 165 170 175 Pro Ser Ser Ser Ile Ser Thr Glu Ile Asn Ser Ala Leu Val Leu Lys 180 185 190 Val Ser Trp Ile Thr Phe Leu Leu Ala Lys Gly Glu Val Leu Gln Met 195 200 205 Glu Asp Asp Leu Val Ile Ser Phe Gln Leu Met Leu Cys Val Leu Asp 210 215 220 Tyr Phe Ile Lys Leu Ser Pro Pro Met Leu Leu Lys Glu Pro Tyr Lys 225 230 235 240 Thr Ala Val Ile Pro Ile Asn Gly Ser Pro Arg Thr Pro Arg Arg Gly 245 250 255 Gln Asn Arg Ser Ala Arg Ile Ala Lys Gln Leu Glu Asn Asp Thr Arg 260 265 270 Ile Ile Glu Val Leu Cys Lys Glu His Glu Cys Asn Ile Asp Glu Val 275 280 285 Lys Asn Val Tyr Phe Lys Asn Phe Ile Pro Phe Met Asn Ser Leu Gly 290 295 300 Leu Val Thr Ser Asn Gly Leu Pro Glu Val Glu Asn Leu Ser Lys Arg 305 310 315 320 Tyr Glu Glu Ile Tyr Leu Lys Asn Lys Asp Leu Asp Ala Arg Leu Phe 325 330 335 Leu Asp His Asp Lys Thr Leu Gln Thr Asp Ser Ile Asp Ser Phe Glu 340 345 350 Thr Gln Arg Thr Pro Arg Lys Ser Asn Leu Asp Glu Glu Val Asn Val 355 360 365 Ile Pro Pro His Thr Pro Val Arg Thr Val Met Asn Thr Ile Gln Gln 370 375 380 Leu Met Met Ile Leu Asn Ser Ala Ser Asp Gln Pro Ser Glu Asn Leu 385 390 395 400 Ile Ser Tyr Phe Asn Asn Cys Thr Val Asn Pro Lys Glu Ser Ile Leu 405 410 415 Lys Arg Val Lys Asp Ile Gly Tyr Ile Phe Lys Glu Lys Phe Ala Lys 420 425 430 Ala Val Gly Gln Gly Cys Val Glu Ile Gly Ser Gln Arg Tyr Lys Leu 435 440 445 Gly Val Arg Leu Tyr Tyr Arg Val Met Glu Ser Met Leu Lys Ser Glu 450 455 460 Glu Glu Arg Leu Ser Ile Gln Asn Phe Ser Lys Leu Leu Asn Asp Asn 465 470 475 480 Ile Phe His Met Ser Leu Leu Ala Cys Ala Leu Glu Val Val Met Ala 485 490 495 Thr Tyr Ser Arg Ser Thr Ser Gln Asn Leu Asp Ser Gly Thr Asp Leu 500 505 510 Ser Phe Pro Trp Ile Leu Asn Val Leu Asn Leu Lys Ala Phe Asp Phe 515 520 525 Tyr Lys Val Ile Glu Ser Phe Ile Lys Ala Glu Gly Asn Leu Thr Arg 530 535 540 Glu Met Ile Lys His Leu Glu Arg Cys Glu His Arg Ile Met Glu Ser 545 550 555 560 Leu Ala Trp Leu Ser Asp Ser Pro Leu Phe Asp Leu Ile Lys Gln Ser 565 570 575 Lys Asp Arg Glu Gly Pro Thr Asp His Leu Glu Ser Ala Cys Pro Leu 580 585 590 Asn Leu Pro Leu Gln Asn Asn His Thr Ala Ala Asp Met Tyr Leu Ser 595 600 605 Pro Val Arg Ser Pro Lys Lys Lys Gly Ser Thr Thr Arg Val Asn Ser 610 615 620 Thr Ala Asn Ala Glu Thr Gln Ala Thr Ser Ala Phe Gln Thr Gln Lys 625 630 635 640 Pro Leu Lys Ser Thr Ser Leu Ser Leu Phe Tyr Lys Lys Val Tyr Arg 645 650 655 Leu Ala Tyr Leu Arg Leu Asn Thr Leu Cys Glu Arg Leu Leu Ser Glu 660 665 670 His Pro Glu Leu Glu His Ile Ile Trp Thr Leu Phe Gln His Thr Leu 675 680 685 Gln Asn Glu Tyr Glu Leu Met Arg Asp Arg His Leu Asp Gln Ile Met 690 695 700 Met Cys Ser Met Tyr Gly Ile Cys Lys Val Lys Asn Ile Asp Leu Lys 705 710 715 720 Phe Lys Ile Ile Val Thr Ala Tyr Lys Asp Leu Pro His Ala Val Gln 725 730 735 Glu Thr Phe Lys Arg Val Leu Ile Lys Glu Glu Glu Tyr Asp Ser Ile 740 745 750 Ile Val Phe Tyr Asn Ser Val Phe Met Gln Arg Leu Lys Thr Asn Ile 755 760 765 Leu Gln Tyr Ala Ser Thr Arg Pro Pro Thr Leu Ser Pro Ile Pro His 770 775 780 Ile Pro Arg Ser Pro Tyr Lys Phe Pro Ser Ser Pro Leu Arg Ile Pro 785 790 795 800 Gly Gly Asn Ile Tyr Ile Ser Pro Leu Lys Ser Pro Tyr Lys Ile Ser 805 810 815 Glu Gly Leu Pro Thr Pro Thr Lys Met Thr Pro Arg Ser Arg Ile Leu 820 825 830 Val Ser Ile Gly Glu Ser Phe Gly Thr Ser Glu Lys Phe Gln Lys Ile 835 840 845 Asn Gln Met Val Cys Asn Ser Asp Arg Val Leu Lys Arg Ser Ala Glu 850 855 860 Gly Ser Asn Pro Pro Lys Pro Leu Lys Lys Leu Arg Phe Asp Ile Glu 865 870 875 880 Gly Ser Asp Glu Ala Asp Gly Ser Lys His Leu Pro Gly Glu Ser Lys 885 890 895 Phe Gln Gln Lys Leu Ala Glu Met Thr Ser Thr Arg Thr Arg Met Gln 900 905 910 Lys Gln Lys Met Asn Asp Ser Met Asp Thr Ser Asn Lys Glu Glu Lys 915 920 925 <210> 2 <211> 108 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Ala Ala Ala Met Asp Val Asp Thr Pro Ser Gly Thr Asn Ser Gly 1 5 10 15 Ala Gly Lys Lys Arg Phe Glu Val Lys Lys Trp Asn Ala Val Ala Leu 20 25 30 Trp Ala Trp Asp Ile Val Val Asp Asn Cys Ala Ile Cys Arg Asn His 35 40 45 Ile Met Asp Leu Cys Ile Glu Cys Gln Ala Asn Gln Ala Ser Ala Thr 50 55 60 Ser Glu Glu Cys Thr Val Ala Trp Gly Val Cys Asn His Ala Phe His 65 70 75 80 Phe His Cys Ile Ser Arg Trp Leu Lys Thr Arg Gln Val Cys Pro Leu 85 90 95 Asp Asn Arg Glu Trp Glu Phe Gln Lys Tyr Gly His 100 105 <210> 3 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3 Met Ala Arg Pro Leu Val Pro Ser Ser Gln Lys Ala Leu Leu Leu Glu 1 5 10 15 Leu Lys Gly Leu Gln Glu Glu Pro Val Glu Gly Phe Arg Val Thr Leu 20 25 30 Val Asp Glu Gly Asp Leu Tyr Asn Trp Glu Val Ala Ile Phe Gly Pro 35 40 45 Pro Asn Thr Tyr Tyr Glu Gly Gly Tyr Phe Lys Ala Arg Leu Lys Phe 50 55 60 Pro Ile Asp Tyr Pro Tyr Ser Pro Pro Ala Phe Arg Phe Leu Thr Lys 65 70 75 80 Met Trp His Pro Asn Ile Tyr Glu Thr Gly Asp Val Cys Ile Ser Ile 85 90 95 Leu His Pro Pro Val Asp Asp Pro Gln Ser Gly Glu Leu Pro Ser Glu 100 105 110 Arg Trp Asn Pro Thr Gln Asn Val Arg Thr Ile Leu Leu Ser Val Ile 115 120 125 Ser Leu Leu Asn Glu Pro Asn Thr Phe Ser Pro Ala Asn Val Asp Ala 130 135 140 Ser Val Met Tyr Arg Lys Trp Lys Glu Ser Lys Gly Lys Asp Arg Glu 145 150 155 160 Tyr Thr Asp Ile Ile Arg Lys Gln Val Leu Gly Thr Lys Val Asp Ala 165 170 175 Glu Arg Asp Gly Val Lys Val Pro Thr Thr Leu Ala Glu Tyr Cys Val 180 185 190 Lys Thr Lys Ala Pro Ala Pro Asp Glu Gly Ser Asp Leu Phe Tyr Asp 195 200 205 Asp Tyr Tyr Glu Asp Gly Glu Val Glu Glu Glu Ala Asp Ser Cys Phe 210 215 220 Gly Asp Asp Glu Asp Asp Ser Gly Thr Glu Glu Ser 225 230 235 <210> 4 <211> 770 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Met Ala Gln Trp Asn Gln Leu Gln Gln Leu Asp Thr Arg Tyr Leu Glu 1 5 10 15 Gln Leu His Gln Leu Tyr Ser Asp Ser Phe Pro Met Glu Leu Arg Gln 20 25 30 Phe Leu Ala Pro Trp Ile Glu Ser Gln Asp Trp Ala Tyr Ala Ala Ser 35 40 45 Lys Glu Ser His Ala Thr Leu Val Phe His Asn Leu Leu Gly Glu Ile 50 55 60 Asp Gln Gln Tyr Ser Arg Phe Leu Gln Glu Ser Asn Val Leu Tyr Gln 65 70 75 80 His Asn Leu Arg Arg Ile Lys Gln Phe Leu Gln Ser Arg Tyr Leu Glu 85 90 95 Lys Pro Met Glu Ile Ala Arg Ile Val Ala Arg Cys Leu Trp Glu Glu 100 105 110 Ser Arg Leu Leu Gln Thr Ala Ala Thr Ala Ala Gln Gln Gly Gly Gln 115 120 125 Ala Asn His Pro Thr Ala Ala Val Val Thr Glu Lys Gln Gln Met Leu 130 135 140 Glu Gln His Leu Gln Asp Val Arg Lys Arg Val Gln Asp Leu Glu Gln 145 150 155 160 Lys Met Lys Val Val Glu Asn Leu Gln Asp Asp Phe Asp Phe Asn Tyr 165 170 175 Lys Thr Leu Lys Ser Gln Gly Asp Met Gln Asp Leu Asn Gly Asn Asn 180 185 190 Gln Ser Val Thr Arg Gln Lys Met Gln Gln Leu Glu Gln Met Leu Thr 195 200 205 Ala Leu Asp Gln Met Arg Arg Ser Ile Val Ser Glu Leu Ala Gly Leu 210 215 220 Leu Ser Ala Met Glu Tyr Val Gln Lys Thr Leu Thr Asp Glu Glu Leu 225 230 235 240 Ala Asp Trp Lys Arg Arg Gln Gln Ile Ala Cys Ile Gly Gly Pro Pro 245 250 255 Asn Ile Cys Leu Asp Arg Leu Glu Asn Trp Ile Thr Ser Leu Ala Glu 260 265 270 Ser Gln Leu Gln Thr Arg Gln Gln Ile Lys Lys Leu Glu Glu Leu Gln 275 280 285 Gln Lys Val Ser Tyr Lys Gly Asp Pro Ile Val Gln His Arg Pro Met 290 295 300 Leu Glu Glu Arg Ile Val Glu Leu Phe Arg Asn Leu Met Lys Ser Ala 305 310 315 320 Phe Val Val Glu Arg Gln Pro Cys Met Pro Met His Pro Asp Arg Pro 325 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Val Glu Ser Lys Lys Gln Pro Pro Gln 180 185 190 Ile Glu Ser Phe Tyr Pro Pro Leu Asp Glu Pro Ser Ile Gly Ser Lys 195 200 205 Asn Val Asp Leu Ser Gly Arg Gln Glu Arg Lys Gln Ile Phe Lys Gly 210 215 220 Lys Thr Phe Ile Phe Leu Asn Ala Lys Gln His Lys Lys Leu Ser Ser 225 230 235 240 Ala Val Val Phe Gly Gly Gly Glu Ala Arg Leu Ile Thr Glu Glu Asn 245 250 255 Glu Glu Glu His Asn Phe Phe Leu Ala Pro Gly Thr Cys Val Val Asp 260 265 270 Thr Gly Ile Thr Asn Ser Gln Thr Leu Ile Pro Asp Cys Gln Lys Lys 275 280 285 Trp Ile Gln Ser Ile Met Asp Met Leu Gln Arg Gln Gly Leu Arg Pro 290 295 300 Ile Pro Glu Ala Glu Ile Gly Leu Ala Val Ile Phe Met Thr Thr Lys 305 310 315 320 Asn Tyr Cys Asp Pro Gln Gly His Pro Ser Thr Gly Leu Lys Thr Thr 325 330 335 Thr Pro Gly Pro Ser Leu Ser Gln Gly Val Ser Val Asp Glu Lys Leu 340 345 350 Met Pro Ser Ala Pro Val Asn Thr Thr Thr Tyr Val Ala Asp Thr Glu 355 360 365 Ser Glu Gln Ala Asp Thr Trp Asp Leu Ser Glu Arg Pro Lys Glu Ile 370 375 380 Lys Val Ser Lys Met Glu Gln Lys 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Gln Ser Pro Ala Ala 1605 1610 1615 Ala His Thr Thr Asp Thr Ala Gly Tyr Asn Ala Met Glu Glu Ser Val 1620 1625 1630 Ser Arg Glu Lys Pro Glu Leu Thr Ala Ser Thr Glu Arg Val Asn Lys 1635 1640 1645 Arg Met Ser Met Val Val Ser Gly Leu Thr Pro Glu Glu Phe Met Leu 1650 1655 1660 Val Tyr Lys Phe Ala Arg Lys His His Ile Thr Leu Thr Asn Leu Ile 1665 1670 1675 1680 Thr Glu Glu Thr Thr His Val Val Met Lys Thr Asp Ala Glu Phe Val 1685 1690 1695 Cys Glu Arg Thr Leu Lys Tyr Phe Leu Gly Ile Ala Gly Gly Lys Trp 1700 1705 1710 Val Val Ser Tyr Phe Trp Val Thr Gln Ser Ile Lys Glu Arg Lys Met 1715 1720 1725 Leu Asn Glu His Asp Phe Glu Val Arg Gly Asp Val Val Asn Gly Arg 1730 1735 1740 Asn His Gln Gly Pro Lys Arg Ala Arg Glu Ser Gln Asp Arg Lys Ile 1745 1750 1755 1760 Phe Arg Gly Leu Glu Ile Cys Cys Tyr Gly Pro Phe Thr Asn Met Pro 1765 1770 1775 Thr Asp Gln Leu Glu Trp Met Val Gln Leu Cys Gly Ala Ser Val Val 1780 1785 1790 Lys Glu Leu Ser Ser Phe Thr Leu Gly Thr Gly Val His Pro Ile Val 1795 1800 1805 Val Val Gln Pro Asp Ala Trp Thr Glu Asp Asn Gly Phe His Ala Ile 1810 1815 1820 Gly Gln Met Cys Glu Ala Pro Val Val Thr Arg Glu Trp Val Leu Asp 1825 1830 1835 1840 Ser Val Ala Leu Tyr Gln Cys Gln Glu Leu Asp Thr Tyr Leu Ile Pro 1845 1850 1855 Gln Ile Pro His Ser His Tyr 1860 <210> 13 <211> 307 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 13 Met Gly Thr Val Leu Ser Leu Ser Pro Ser Tyr Arg Lys Ala Thr Leu 1 5 10 15 Phe Glu Asp Gly Ala Ala Thr Val Gly His Tyr Thr Ala Val Gln Asn 20 25 30 Ser Lys Asn Ala Lys Asp Lys Asn Leu Lys Arg His Ser Ile Ile Ser 35 40 45 Val Leu Pro Trp Lys Arg Ile Val Ala Val Ser Ala Lys Lys Lys Asn 50 55 60 Ser Lys Lys Val Gln Pro Asn Ser Ser Tyr Gln Asn Asn Ile Thr His 65 70 75 80 Leu Asn Asn Glu Asn Leu Lys Lys Ser Leu Ser Cys Ala Asn Leu Ser 85 90 95 Thr Phe Ala Gln Pro Pro Pro Ala Gln Pro Pro Ala Pro Pro Ala Ser 100 105 110 Gln Leu Ser Gly Ser Gln Thr Gly Gly Ser Ser Ser Val Lys Lys Ala 115 120 125 Pro His Pro Ala Val Thr Ser Ala Gly Thr Pro Lys Arg Val Ile Val 130 135 140 Gln Ala Ser Thr Ser Glu Leu Leu Arg Cys Leu Gly Glu Phe Leu Cys 145 150 155 160 Arg Arg Cys Tyr Arg Leu Lys His Leu Ser Pro Thr Asp Pro Val Leu 165 170 175 Trp Leu Arg Ser Val Asp Arg Ser Leu Leu Leu Gln Gly Trp Gln Asp 180 185 190 Gln Gly Phe Ile Thr Pro Ala Asn Val Val Phe Leu Tyr Met Leu Cys 195 200 205 Arg Asp Val Ile Ser Ser Glu Val Gly Ser Asp His Glu Leu Gln Ala 210 215 220 Val Leu Leu Thr Cys Leu Tyr Leu Ser Tyr Ser Tyr Met Gly Asn Glu 225 230 235 240 Ile Ser Tyr Pro Leu Lys Pro Phe Leu Val Glu Ser Cys Lys Glu Ala 245 250 255 Phe Trp Asp Arg Cys Leu Ser Val Ile Asn Leu Met Ser Ser Lys Met 260 265 270 Leu Gln Ile Asn Ala Asp Pro His Tyr Phe Thr Gln Val Phe Ser Asp 275 280 285 Leu Lys Asn Glu Ser Gly Gln Glu Asp Lys Lys Arg Leu Leu Leu Gly 290 295 300 Leu Asp Arg 305 <210> 14 <211> 317 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 14 Met Phe Gln Ala Ala Glu Arg Pro Gln Glu Trp Ala Met Glu Gly Pro 1 5 10 15 Arg Asp Gly Leu Lys Lys Glu Arg Leu Leu Asp Asp Arg His Asp Ser 20 25 30 Gly Leu Asp Ser Met Lys Asp Glu Glu Tyr Glu Gln Met Val Lys Glu 35 40 45 Leu Gln Glu Ile Arg Leu Glu Pro Gln Glu Val Pro Arg Gly Ser Glu 50 55 60 Pro Trp Lys Gln Gln Leu Thr Glu Asp Gly Asp Ser Phe Leu His Leu 65 70 75 80 Ala Ile Ile His Glu Glu Lys Ala Leu Thr Met Glu Val Ile Arg Gln 85 90 95 Val Lys Gly Asp Leu Ala Phe Leu Asn Phe Gln Asn Asn Leu Gln Gln 100 105 110 Thr Pro Leu His Leu Ala Val Ile Thr Asn Gln Pro Glu Ile Ala Glu 115 120 125 Ala Leu Leu Gly Ala Gly Cys Asp Pro Glu Leu Arg Asp Phe Arg Gly 130 135 140 Asn Thr Pro Leu His Leu Ala Cys Glu Gln Gly Cys Leu Ala Ser Val 145 150 155 160 Gly Val Leu Thr Gln Ser Cys Thr Thr Pro His Leu His Ser Ile Leu 165 170 175 Lys Ala Thr Asn Tyr Asn Gly His Thr Cys Leu His Leu Ala Ser Ile 180 185 190 His Gly Tyr Leu Gly Ile Val Glu Leu Leu Val Ser Leu Gly Ala Asp 195 200 205 Val Asn Ala Gln Glu Pro Cys Asn Gly Arg Thr Ala Leu His Leu Ala 210 215 220 Val Asp Leu Gln Asn Pro Asp Leu Val Ser Leu Leu Leu Lys Cys Gly 225 230 235 240 Ala Asp Val Asn Arg Val Thr Tyr Gln Gly Tyr Ser Pro Tyr Gln Leu 245 250 255 Thr Trp Gly Arg Pro Ser Thr Arg Ile Gln Gln Gln Leu Gly Gln Leu 260 265 270 Thr Leu Glu Asn Leu Gln Met Leu Pro Glu Ser Glu Asp Glu Glu Ser 275 280 285 Tyr Asp Thr Glu Ser Glu Phe Thr Glu Phe Thr Glu Asp Glu Leu Pro 290 295 300 Tyr Asp Asp Cys Val Phe Gly Gly Gln Arg Leu Thr Leu 305 310 315 <210> 15 <211> 212 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 15 Met Lys Pro Pro Ser Ser Ile Gln Thr Ser Glu Phe Asp Ser Ser Asp 1 5 10 15 Glu Glu Pro Ile Glu Asp Glu Gln Thr Pro Ile His Ile Ser Trp Leu 20 25 30 Ser Leu Ser Arg Val Asn Cys Ser Gln Phe Leu Gly Leu Cys Ala Leu 35 40 45 Pro Gly Cys Lys Phe Lys Asp Val Arg Arg Asn Val Gln Lys Asp Thr 50 55 60 Glu Glu Leu Lys Ser Cys Gly Ile Gln Asp Ile Phe Val Phe Cys Thr 65 70 75 80 Arg Gly Glu Leu Ser Lys Tyr Arg Val Pro Asn Leu Leu Asp Leu Tyr 85 90 95 Gln Gln Cys Gly Ile Ile Thr His His His Pro Ile Ala Asp Gly Gly 100 105 110 Thr Pro Asp Ile Ala Ser Cys Cys Glu Ile Met Glu Glu Leu Thr Thr 115 120 125 Cys Leu Lys Asn Tyr Arg Lys Thr Leu Ile His Cys Tyr Gly Gly Leu 130 135 140 Gly Arg Ser Cys Leu Val Ala Ala Cys Leu Leu Leu Tyr Leu Ser Asp 145 150 155 160 Thr Ile Ser Pro Glu Gln Ala Ile Asp Ser Leu Arg Asp Leu Arg Gly 165 170 175 Ser Gly Ala Ile Gln Thr Ile Lys Gln Tyr Asn Tyr Leu His Glu Phe 180 185 190 Arg Asp Lys Leu Ala Ala His Leu Ser Ser Arg Asp Ser Gln Ser Arg 195 200 205 Ser Val Ser Arg 210 <210> 16 <211> 499 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 16 Met Ala Gln Phe Ala Phe Glu Ser Asp Leu His Ser Leu Leu Gln Leu 1 5 10 15 Asp Ala Pro Ile Pro Asn Ala Pro Pro Ala Arg Trp Gln Arg Lys Ala 20 25 30 Lys Glu Ala Ala Gly Pro Ala Pro Ser Pro Met Arg Ala Ala Asn Arg 35 40 45 Ser His Ser Ala Gly Arg Thr Pro Gly Arg Thr Pro Gly Lys Ser Ser 50 55 60 Ser Lys Val Gln Thr Thr Pro Ser Lys Pro Gly Gly Asp Arg Tyr Ile 65 70 75 80 Pro His Arg Ser Ala Ala Gln Met Glu Val Ala Ser Phe Leu Leu Ser 85 90 95 Lys Glu Asn Gln Pro Glu Asn Ser Gln Thr Pro Thr Lys Lys Glu His 100 105 110 Gln Lys Ala Trp Ala Leu Asn Leu Asn Gly Phe Asp Val Glu Glu Ala 115 120 125 Lys Ile Leu Arg Leu Ser Gly Lys Pro Gln Asn Ala Pro Glu Gly Tyr 130 135 140 Gln Asn Arg Leu Lys Val Leu Tyr Ser Gln Lys Ala Thr Pro Gly Ser 145 150 155 160 Ser Arg Lys Thr Cys Arg Tyr Ile Pro Ser Leu Pro Asp Arg Ile Leu 165 170 175 Asp Ala Pro Glu Ile Arg Asn Asp Tyr Tyr Leu Asn Leu Val Asp Trp 180 185 190 Ser Ser Gly Asn Val Leu Ala Val Ala Leu Asp Asn Ser Val Tyr Leu 195 200 205 Trp Ser Ala Ser Ser Gly Asp Ile Leu Gln Leu Leu Gln Met Glu Gln 210 215 220 Pro Gly Glu Tyr Ile Ser Ser Val Ala Trp Ile Lys Glu Gly Asn Tyr 225 230 235 240 Leu Ala Val Gly Thr Ser Ser Ala Glu Val Gln Leu Trp Asp Val Gln 245 250 255 Gln Gln Lys Arg Leu Arg Asn Met Thr Ser His Ser Ala Arg Val Gly 260 265 270 Ser Leu Ser Trp Asn Ser Tyr Ile Leu Ser Ser Gly Ser Arg Ser Gly 275 280 285 His Ile His His His Asp Val Arg Val Ala Glu His His Val Ala Thr 290 295 300 Leu Ser Gly His Ser Gln Glu Val Cys Gly Leu Arg Trp Ala Pro Asp 305 310 315 320 Gly Arg His Leu Ala Ser Gly Gly Asn Asp Asn Leu Val Asn Val Trp 325 330 335 Pro Ser Ala Pro Gly Glu Gly Gly Trp Val Pro Leu Gln Thr Phe Thr 340 345 350 Gln His Gln Gly Ala Val Lys Ala Val Ala Trp Cys Pro Trp Gln Ser 355 360 365 Asn Val Leu Ala Thr Gly Gly Gly Thr Ser Asp Arg His Ile Arg Ile 370 375 380 Trp Asn Val Cys Ser Gly Ala Cys Leu Ser Ala Val Asp Ala His Ser 385 390 395 400 Gln Val Cys Ser Ile Leu Trp Ser Pro His Tyr Lys Glu Leu Ile Ser 405 410 415 Gly His Gly Phe Ala Gln Asn Gln Leu Val Ile Trp Lys Tyr Pro Thr 420 425 430 Met Ala Lys Val Ala Glu Leu Lys Gly His Thr Ser Arg Val Leu Ser 435 440 445 Leu Thr Met Ser Pro Asp Gly Ala Thr Val Ala Ser Ala Ala Ala Asp 450 455 460 Glu Thr Leu Arg Leu Trp Arg Cys Phe Glu Leu Asp Pro Ala Arg Arg 465 470 475 480 Arg Glu Arg Glu Lys Ala Ser Ala Ala Lys Ser Ser Leu Ile His Gln 485 490 495 Gly Ile Arg

Claims (4)

  1. 서열번호 1번의 Rb(p110), 서열번호 2의 Rbx1&2, 서열번호 3의 Cdc34, 서열번호 4의 STAT3, 서열번호 5의 Nibrin, 서열번호 6의 Brm, 서열번호 7의 TTK, 서열번호 8의 Cdk4, 서열번호 9의 Cdk1/Cdc2, 서열번호 10의 MAD2, 서열번호 11의 PCNA, 서열번호 12의 BRCA1, 서열번호 13의 P35, 서열번호 14의 IkB-alpha, 서열번호 15의 KAP 및 서열번호 16의 P55cdc로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 안지오제닌에 의해 차별적으로 발현되는 단백질.
  2. 제1항의 단백질을 포함하는 것을 특징으로 하는 안지오제닌에 의한 단백질 발현 변이 측정용 조성물.
  3. 제1항의 단백질 또는 그 단백질의 항체를 포함하는 것을 특징으로 하는 안지오제닌에 의한 단백질 발현 변이 측정용 단백질 칩.
  4. 제1항의 단백질 또는 이에 대한 마커를 이용하는 것을 특징으로 하는 안지오제닌에 의한 단백질 발현 변이 측정방법.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR101327663B1 (ko) * 2011-10-07 2013-11-14 중앙대학교 산학협력단 안지오제닌의 신규 용도

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