KR20070009580A

KR20070009580A - 재조합 수두대상포진 바이러스

Info

Publication number: KR20070009580A
Application number: KR1020067018048A
Authority: KR
Inventors: 카주히로 나가이케; 야수코 모리; 야수유키 고미; 미치아키 타카하시; 코우이치 야마니시
Original assignee: 사이단호진한다이비세이부쯔뵤우겐큐우카이
Priority date: 2004-03-05
Filing date: 2005-03-03
Publication date: 2007-01-18
Also published as: JP2012061005A; JP2014166182A; AU2005219731A1; US20130101620A1; EP2383343A2; US20110189233A1; EP2383343A3; JPWO2005085445A1; CN103074305A; CA2558586A1; CN1950507A; AU2005219731B2; EP1721981A1; EP1721981A4; KR101246740B1; CN103074305B; WO2005085445A1

Abstract

재조합 수두대상포진 바이러스; 이의 제조방법 재조합 수두대상포진 바이러스를 포함한 약제적 조성물; 수두대상포진 바이러스의 게놈 유전자 및 BAC 벡터 서열을 포함한 벡터; 상기 벡터를 포함한 세포; 수두대상포진 바이러스의 게놈으로의 상동적 재조합이 가능한 단편; 및 BAC 벡터 서열을 포함한 핵산 카세트. 이를 위해 BAC 벡터 서열을 이용하는 단계를 포함한 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조방법이 제공된다.

재조합, 수두대상포진 바이러스, 약제적 조성물, BAC 벡터 서열, 핵산

Description

재조합 수두대상포진 바이러스{Recombinant varicella-zoster virus}

본 발명은 재조합 수두대상포진 바이러스, 특히 BAC(E. coli 인공 염색체)를 이용하여 제조된 재조합 수두대상포진 바이러스 및 이러한 바이러스를 포함한 약제적 조성물에 관한 것이다. 또한 본 발명은 수두대상포진 바이러스 게놈 유전자 및 BAC 벡터 서열을 포함한 벡터 및 이러한 벡터를 포함한 세포에 관한 것이다. 또한 본 발명은 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조방법에 관한 것이다. 또한 본 발명은 수두대상포진 바이러스로의 상동적 재조합이 가능한 단편 및 BAC 벡터 서열을 포함한 핵산 카세트에 관한 것이다.

수두대상포진 바이러스(VZV)는 헤르페스바이러스과(Herpesviridae)의 바이러스에 속하는 바이러스이고 2가지 다른 증상을 나타내는 질환(수두 및 대상포진)의 원인이다. 이러한 바이러스으로의 초기 감염은 수두(작은 마마)를 유발한다. 이후 본 바이러스는 잠복하여 신경절을 감염시킨다. 장기간 동안 이러한 바이러 스는 일부 원인에 의해 재활성화된 후 바이러스 입자가 형성되면 나타나는 증후인 대상포진을 나타내고, 바이러스 입자는 신경세포가 존재하는 영역 내에서 신경 셀랜드(celland) 형태 수두를 통해 표피세포에 도달한다.

VZV 게놈은 약 125000개 염기의 이중-나선 DNA이다. 전체 염기 서열은 Davison et al.에 의해 측정되었다. 적어도 72개 유전자가 상기 게놈 내에 존재하는 것으로 알려졌다.

VZV 백신의 개발은 어렵다. VZV 백신의 Oka주는 Takahashi, et al. (Japanese Laid-Open Publication No. 53-41202)에 의해 개발된 전세계적으로 수두 바이러스에 대한 유일한 백신이다. 현존하는 약독화 생균 수두 백신은 씨드로서 사용된 약독화 생균 수두 백신 Oka주 유래의 바이러스를 이용함으로서 제조되었고, 전세계적으로 실용되었다(Requirements for Varicella Vaccine (Live) Adopted 1984; Revised 1993: WHO Technical Report Series, No. 848, pp.22-38, 1994). 이러한 Oka주는 일반적인 수두 증상을 나타내는 감염 유아로부터 분리된 바이러스(Oka 원시주)로부터 34 백분도에서의 인간 배아 폐세포를 이용하여 12 세대 및 기니아-피그 배아세포를 이용한 11 세대에 걸친 계대배양 후 인간 이배체 세포를 이용한 일부 세대 계대배양에 의해 수득된다. Oka 원시주는 높은 병원성이다. 반대로 Oka 백신주(Oka주)는 정상 유아에게 매우 적은 부작용을 지니는 것으로 인식된다. 따라서 Oka주는 매우 적은 병원성을 지닌 백신주로 유용하다.

바이러스 백신은 계대배양을 통해 바이러스의 유전형을 변화시키는 가능성을 지닌다. 또한 많은 계대배양이 Oka주의 제조 과정 중에 수행되기 때문에 Oka주가 유전적 다양체를 지닌다는 가능성도 존재한다. 특히, 그의 안정성 및 유효성을 증명하기 위해 백신 제조 공정 중 계대배양을 통한 바이러스의 유전적 변이를 고려하여 생산되도록 승인된 수두 씨드 바이러스의 계대배양의 수를 제한하는 즉, 씨드의 승인 시간에서 계대배양의 수가 0인 것을 기초로 총 계대배양 수로부터 10 세대 이내의 백신으로서의 바이러스를 이용하는 씨드 로트(seed lot) 시스템이 수립되었다

한편, 수두 백신의 효과의 추적조사 및 판매후 조사(post-marketing Surveillance, PMS)로부터 또는 전염병학의 측면에서 자연적 감염에 의한 수두 환자로부터 분리된 수두 바이러스의 신선한 야생주와 상기-기술된 Oka주 유래의 백신주 사이의 바이러스학적 차이의 분석이 필요하였고, 면역학, 유전공학 등으로부터의 기술을 이용한 다양한 분석이 이미 수행되게 되었다. 예를 들어 수두 바이러스주들 사이의 유전자 구조, DNA 염기 서열 등의 차이와 같은 시험Journal of General Virology, 59, 660-668, 1986; 67, 1759-1816, 1986), 제한효소 Pst I 사이트의 존재(Japanese Journal of Experimental Medicine, 59, 233-237, 1989), PCR(중합효소 연쇄 반응)을 이용한 RFLP(제한 단편 길이 다양성)(Journal of Virology, 66, 1016-1020, 1992) 및 상기 Pst I 사이트의 존재 및 RFLP의 조 합(Journal of Clinical Microbiology, 33, 658-660, 1995)을 기반으로 한 판단이 보고되었다. 이들 시험이 Oka주 유래의 백신주로부터 신선한 야생주를 확인하기 위한 조건을 제안하나 Oka주 자체의 유전적 다양체로 인해 신뢰성이 존재하지 않고 결론적이지 않고, 품질관리 측면에서 여전히 문제점이 존재한다. 또한 수두 바이러스의 14개 유전자 영역을 이용함으로서 수두 바이러스의 Oka주를 확인하는 방법(미국특허 제6,093,535호), 62개 유전자 영역을 이용함으로서 약독화 생균 수두 백신에 대한 바이러스주를 확인하는 방법(국제공개공보 WO 00/50603) 등이 알려져 있다. 이들 기술은 하기 3가지 주 중의 차이점을 확인하는 것을 가능하게 한다: 수두 바이러스의 Oka주(고독성 친주), 이로부터 유래한 백신주(약독화 Oka주) 및 Oka주 이외의 수두 바이러스주. 그러나 품질관리를 위한 약독화 생균 수두 백신의 제조 표준은 충분하지 않다.

현재 씨드 바이러스 및 백신 바이러스의 게놈 DNA에 대한 직접적 또는 양적 유전자 분석과 같은 백신 품질을 평가하고 확인하는 것에 의해 품질관리가 실행되지 않았다. 따라서 생균 백신에 대한 약독화 주의 품질관리 및 품질보증의 정확도가 평가될 수 없고, 따라서 확실하지 않다. 따라서 약독화 생균 수두 백신의 유효성, 안전성 및 동질성을 보장하고 보증하기 위해 품질관리 및 품질보증의 정확도를 증가시키는 것이 매우 중요하다. 그러나 상기 기술된 바와 같이 전술된 방법이 수립되지 않았고 시급히 해결되어야 할 문제점이 여전히 존재한다.

또한 Oka주보다 우수한 변경된 수두대상포진 바이러스 백신을 개발하기 위해 돌연변이유발에 의한 재조합 수두대상포진 바이러스 및 그의 제조 방법이 바람직하였다.

발명의 개시

발명이 해결하고자 하는 과제

본 발명의 목적은 품질관리 및 품질보증의 정확도를 증가시키고 약독화 생균 수두 백신의 유효성, 안전성 및 동질성을 보장하고 보증하는 것이다. 또한 본 발명이 해결하고자 하는 과제는 Oka주보다 우수한 변이 수두대상포진 바이러스 백신을 개발하기 위해 돌연변이유발에 의한 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조방법을 수립하고 이러한 바이러스를 제조하는 것이다.

이를 달성하기 위해 본 발명은 재조합 수두대상포진 바이러스 및 그의 제조방법 즉, BAC(박테리아성 인공 염색체)를 이용한 단일 바이러스주로부터의 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조방법을 제공한다.

발명의 요약

본 발명자들은 본 발명을 완성하기 위해 BAC 벡터 서열을 이용하여 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조방법을 개발하였다.

따라서 본 발명은 하기를 제공한다.

1. 재조합 수두대상포진 바이러스

2. 항목 1에 있어서, BAC 벡터 서열을 포함함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

3. 항목 2에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열의 적어도 일부가 수두대상포진 바이러스 게놈의 비-필수 영역 내로 삽입됨을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

4. 항목 3에 있어서, 상기 비-필수 영역은 하기 영역으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역

5. 항목 4에 있어서, 상기 비-필수 영역은 유전자 11의 ORF 인접 영역 또는 유전자 12의 ORF 인접 영역임을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

6. 항목 2에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열의 적어도 일부가 수두대상포진 바이러스 게놈의 유전자 62의 ORF 내 영역으로 삽입됨을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

7. 항목 2에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 재조합 단백질 의존적 재조합 서열을 포함함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

8. 항목 2에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 선별 마커를 포함함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

9. 항목 8에 있어서, 상기 선별 마커는 약제 선별 마컴임을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

10. 항목 2에 있어서, 상기 선별 마커는 녹색 형광 단백질을 인코드하는 유전자임을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

11. 항목 2에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 야생주로부터 유래함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

12. 항목 2에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 변이주로부터 유래함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

13. 항목 2에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 Oka 백신주로부터 유래함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

14. 항목 2에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 유전자 62 및 유전자 6 내에 돌연변이를 지님을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

15. 항목 14에 있어서, 상기 유전자 62는 적어도 서열번호: 5 내에 하기 (a)-(d)의 염기 치환을 포함하고:

(a) 2110 위치에서 G로 염기 치환;

(b) 3100 위치에서 G로 염기 치환;

(c) 3818 위치에서 C로 염기 치환; 및

(d) 4006 위치에서 G로 염기 치환,

유전자 6은 적어도 서열번호: 8 내에 5745 위치에서 G로 염기 치환을 포함함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

16. 항목 2에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 서열번호: 7에 나타난 서열을 포함함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스

17. 항목 1의 바이러스를 포함한 약제적 조성물

18. 항목 17에 있어서, 상기 조성물은 백신 형태임을 특징으로 하는 약제적 조성물

19. 유전자 62 이외에 수두대상포진 바이러스 필수 유전자 및 BAC 벡터 서열을 포함한 벡터

20. 항목 19에 있어서, 유전자 62를 더욱 포함함을 특징으로 하는 벡터

21. 항목 19에 있어서, 상기 벡터가 포유류 세포 내로 도입시 포유류 세포가 수두대상포진 바이러스를 생성함을 특징으로 하는 벡터

22. 항목 19에 있어서, 수두대상포진 바이러스 게놈 유래의 서열이 BAC 벡터 서열에 결합하는 부분은 수두대상포진 바이러스 게놈의 비-필수 영역 내에 존재함을 특징으로 하는 벡터

23. 항목 22에 있어서, 상기 비-필수 영역은 하기 영역으로 구성된 군으로부 터 선택됨을 특징으로 하는 벡터:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유 전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역

24. 항목 23에 있어서, 상기 결합 부분은 유전자 11의 ORF 인접 영역 및 유전자 12의 ORF 인접 영역임을 특징으로 하는 벡터

25. 항목 19에 있어서, 수두대상포진 바이러스 게놈 유래의 서열이 BAC 벡터 서열에 결합되는 부분은 수두대상포진 바이러스 게놈의 유전자 62의 ORF 내에 존재함을 특징으로 하는 벡터

26. 항목 19에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 재조합 단백질 의존적 재조합 서열을 포함함을 특징으로 하는 벡터

27. 항목 19에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 선별 마커를 포함함을 특징으로 하는 벡터

28. 항목 27에 있어서, 상기 선별 마커는 약제 선별 마커임을 특징으로 하는 벡터

29. 항목 27에 있어서, 상기 선별 마커는 녹색 형광 단백질을 인코드하는 유전자임을 특징으로 하는 벡터

30. 항목 19에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 야생주로부터 유래함을 특징으로 하는 벡터

31. 항목 19에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 변이주로부터 유래함을 특징으로 하는 벡터

32. 항목 19에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 Oka 백신주로부터 유래함을 특징으로 하는 벡터

33. 항목 19에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스는 유전자 62 및 유전자 6 내에 돌연변이를 지님을 특징으로 하는 벡터

34. 항목 33에 있어서, 상기 유전자 62는 적어도 서열번호: 5 내에 하기 (a)-(d)의 염기 치환을 포함하고:

(a) 2110 위치에서 G로 염기 치환;

(b) 3100 위치에서 G로 염기 치환;

(c) 3818 위치에서 C로 염기 치환; 및

(d) 4006 위치에서 G로 염기 치환,

유전자 6은 적어도 서열번호: 8 내에 5745 위치에서 G로 염기 치환을 포함함을 특징으로 하는 벡터

35. 항목 19에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 서열번호: 7에 나타난 서열을 포함함을 특징으로 하는 벡터

36. 항목 19의 벡터를 포함한 세포

37. 항목 36에 있어서, 상기 세포는 박테리아 세포임을 특징으로 하는 세포

38. 항목 37에 있어서, 상기 박테리아 세포는 E. coli임을 특징으로 하는 박테리아 세포

39. 항목 36에 있어서, 상기 세포는 포유류 세포임을 특징으로 하는 세포

40. 항목 39에 있어서, 상기 포유류 세포는 인간으로부터 유래함을 특징으로 하는 포유류 세포

41. 항목 39의 포유류 세포에 의해 생성된 바이러스

42. 항목 41의 바이러스를 포함한 약제적 조성물

43. 항목 42에 있어서, 상기 조성물은 백신 형태임을 특징으로 하는 약제적 조성물

44. 유전자 62 이외의 수두대상포진 바이러스 게놈 필수 유전자 및 BAC 벡터 서열을 포함한 벡터를 포유류 숙주 세포 내로 도입시키는 단계; 및

상기 포유류 숙주 세포를 배양하여 재조합 수두대상포진 바이러스를 제조하는 단계를 포함한 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조방법

45. 항목 44에 있어서, 상기 벡터는 유전자 62를 더욱 포함함을 특징으로 하는 방법

46. 항목 44에 있어서, 상기 포유류 숙주 세포는 인간으로부터 유래함을 특징으로 하는 방법

47. 항목 44에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 적어도 2 이상의 재조합 단백질 의존적 재조합 서열을 포함함을 특징으로 하는 방법

48. 항목 47에 있어서, 2개의 재조합 단백질 의존적 재조합 서열 사이의 재조합 단계를 더욱 포함함을 특징으로 하는 방법

49. 항목 44에 있어서, 수두대상포진 바이러스 게놈 유래의 서열이 BAC 벡터 서열에 결합되는 부분이 수두대상포진 바이러스 게놈의 비-필수 영역 내에 존재함을 특징으로 하는 방법

50. 항목 49에 있어서, 상기 비-필수 영역은 하기 영역으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 방법:

51. 항목 50에 있어서, 상기 결합되는 부분은 유전자 11의 ORF 인접 영역 또는 유전자 12의 ORF 인접 영역임을 특징으로 하는 방법

52. 항목 44에 있어서, 수두대상포진 바이러스 게놈 유래의 서열이 BAC 벡터 서열에 결합되는 부분은 수두대상포진 바이러스 게놈의 유전자 62의 ORF 내에 존재함을 특징으로 하는 방법

53. 항목 44에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 재조합 단백질 의존적 재조합 서열임을 포함함을 특징으로 하는 방법

54. 항목 44에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 선별 마커 포함함을 특징으로 하는 방법

55. 항목 54에 있어서, 상기 선별 마커는 약제 선별 마커임을 특징으로 하는 방법

56. 항목 54에 있어서, 상기 선별 마커는 녹색 형광 단백질을 인코드하는 유전자임을 특징으로 하는 방법

57. 항목 44에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 야생주로부터 유래함을 특징으로 하는 방법

58. 항목 44에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 변이주로부터 유래함을 특징으로 하는 방법

59. 항목 44에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 Oka 백신주로부터 유래함을 특징으로 하는 방법

60. 항목 44에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 유전자 62 및 유전자 6 내에 돌연변이를 지님을 특징으로 하는 방법

61. 항목 60에 있어서, 상기 유전자 62는 적어도 서열번호: 5 내에 하기 (a)-(d)의 염기 치환을 포함하고:

(a) 2110 위치에서 G로 염기 치환;

(b) 3100 위치에서 G로 염기 치환;

(c) 3818 위치에서 C로 염기 치환; 및

(d) 4006 위치에서 G로 염기 치환,

유전자 6은 적어도 서열번호: 8 내에 5745 위치에서 G로 염기 치환을 포함함을 특징으로 하는 방법

62. 항목 44에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 서열번호: 7에 나타난 서열을 포함함을 특징으로 하는 방법

63. 항목 44의 방법에 의해 제조된 바이러스

64. 항목 63의 바이러스를 포함한 약제적 조성물

65. 항목 64에 있어서, 상기 조성물은 백신 형태임을 특징으로 하는 약제적 조성물

66. 벡터를 박테리아 숙주 세포 내로 도입시키는 단계;

적어도 하나 이상의 돌연변이를 지니고 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부로 구성된 단편을 포함한 플라스미드 벡터를 상기 박테리아 숙주 세포 내로 도입시키는 단계;

상기 박테리아 숙주 세포를 배양하는 단계;

상기 배양된 박테리아 숙주 세포로부터 BAC 서열을 지닌 벡터를 분리하는 단계를 포함한 항목 19의 벡터 내로의 돌연변이 도입방법

67. 벡터를 박테리아 숙주 세포 내로 도입시키는 단계;

적어도 하나 이상의 돌연변이를 지니고 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부로 구성된 첫 번째 단편을 포함한 첫 번째 플라스미드 벡터를 상기 박테리아 숙주 세포 내로 도입시키는 단계;

적어도 하나 이상의 돌연변이를 지니고 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부로 구성된, 상기 첫 번째 단편과 다른 두 번째 단편을 포함한 두 번째 플라스미드 벡터를 상기 박테리아 숙주 세포 내로 도입시키는 단계;

상기 박테리아 숙주 세포를 배양하는 단계;

68. 박테리아 세포 내에서 수두대상포진 바이러스 게놈과 재조합될 수 있는 첫 번째 단편, BAC 벡터 서열 및 박테리아 세포 내에서 수두대상포진 바이러스 게놈과 재조합될 수 있는 두 번째 단편을 포함하고, BAC 서열의 양 말단이 각각 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편에 결합된 핵산 카세트

69. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 적어도 1 kb임을 특징으로 하는 핵산 카세트

70. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 적어도 1.5 kb임을 특징으로 하는 핵산 카세트

71. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 적어도 2 kb임을 특징으로 하는 핵산 카세트

72. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 수두대상포진 바이러스 게놈 서열과 적어도 80% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트

73. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 수두대상포진 바이러스 게놈 서열과 적어도 85% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트

74. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 수두대상포진 바이러스 게놈 서열과 적어도 90% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트

75. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 수두대상포진 바이러스 게놈 서열과 적어도 95% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트

76. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편 각각은 하기 수두대상포진 바이러스 게놈의 영역으로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택됨을 특징으로 하는 핵산 카세트:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 62의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 62의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역

77. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편 각각은 하기 수두대상포진 바이러스 게놈의 영역으로 구성된 군으로부터 선택된 군과 독립적으로 적어도 80% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전 자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 62의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 62의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역

78. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편 각각은 하기 수두대상포진 바이러스 게놈의 영역으로 구성된 군으로부터 선택된 군과 독립적으로 적어도 85% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 62의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인 접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 62의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역

79. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편 각각은 하기 수두대상포진 바이러스 게놈의 영역으로 구성된 군으로부터 선택된 군과 독립적으로 적어도 90% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트:

80. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편 각각은 하기 수두대상포진 바이러스 게놈의 영역으로 구성된 군으로부터 선택된 군과 독립적으로 적어도 95% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유 전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 62의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 62의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역

81. 항목 68에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 다른 영역으로부터 유래함을 특징으로 하는 핵산 카세트

82. 항목 72에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편 각각은 독립적으로 유전자 11의 ORF 인접 영역 및 유전자 12의 ORF 인접 영역으로부터 유래함을 특징으로 하는 핵산 카세트

83. 항목 68에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 재조합 단백질 의존적 재조합 서열을 포함함을 특징으로 하는 핵산 카세트

84. 항목 68에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 선별 마커를 포함함을 특징으로 하는 핵산 카세트

85. 항목 84에 있어서, 상기 선별 마커는 약제 선별 마커임을 특징으로 하는 핵산 카세트

86. 항목 68에 있어서, 상기 선별 마커는 녹색 형광 단백질을 인코드하는 유전자임을 특징으로 하는 핵산 카세트

87. 항목 68에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 야생주로부터 유래함을 특징으로 하는 핵산 카세트

88. 항목 68에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 변이주로부터 유래함을 특징으로 하는 핵산 카세트

89. 항목 68에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 Oka 백신주로부터 유래함을 특징으로 하는 핵산 카세트

90. 항목 68에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 서열번호: 7에 나타난 서열을 포함함을 특징으로 하는 핵산 카세트

91. 항목 68에 있어서, 서열번호: 2에 나타난 핵산 서열을 지님을 특징으로 하는 핵산 카세트

본 발명은 재조합 수두대상포진 바이러스 및 그의 제조방법을 제공한다. 예를 들어 본 발명은 BAC(E. coli 인공 염색체)를 이용한 단일 바이러스주로부터의 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조방법 및 본 방법에 의해 제조된 재조합 수두대상포진 바이러스를 제공한다. 또한 본 발명은 재조합 수두대상포진 바이러스를 포함한 약제적 조성물을 제공한다.

또한 본 발명은 수두대상포진 바이러스 게놈 유전자 및 BAC 벡터 서열을 포함한 벡터, 이러한 벡터를 포함한 세포 및 수두대상포진 바이러스 게놈과의 상동적 재조합이 가능한 단편 및 BAC 벡터 서열을 포함한 핵산 카세트를 제공한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다. 본 명세서를 통해 단수형의 표현은 특별히 기술되지 않는 한 복수의 개념을 포함함이 이해되어야 한다. 또한 여기서 사용된 용어는 특별히 기술되지 않는 한 통상적으로 사용되는 정의를 지님이 이해되어야 한다. 따라서 특별히 정의되지 않는 한 모든 과학적 및 기술적 용어는 본 발명에 속하는 분야의 당업자에 의해 일반적으로 사용되는 것과 동일한 의미를 지닌다. 반박이 있는 경우 본 명세서(정의를 포함)가 우선된다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다. 본 명세서를 통해 단수형의 표현은 특별히 기술되지 않는 한 복수의 개념을 포함함이 이해되어야 한다. 따라서 예를 들어 단수 관사(예를 들어 영어로 "a", "an", "the")는 특별히 기술되지 않는 한 복수형 개념을 포함함이 이해되어야 한다. 또한 여기서 사용된 용어는 특별히 기술되지 않는 한 통상적으로 사용되는 정의를 지님이 이해되어야 한다. 따라서 특별히 정의되지 않는 한 모든 과학적 및 기술적 용어는 본 발명에 속하는 분야의 당업자에 의해 일반적으로 사용되는 것과 동일한 의미를 지닌다. 반박이 있는 경우 본 명세서(정의를 포함)가 우선된다.

(용어 정의)

여기서 사용된 용어의 정의는 하기와 같이 기술된다.

여기서 사용된 수두대상포진 바이러스와 관련한 "필수 유전자"라는 용어는 수두대상포진 바이러스의 생장에 필수적인 유전자를 나타낸다. 또한 수두대상포진 바이러스와 관련한 "비-필수 유전자"라는 용어는 수두대상포진 바이러스의 생장에 필수적이지 않은 유전자를 나타내고 이들이 없는 경우 수두대상포진 바이러스가 생장할 수 없다. 인간 수두대상포진 바이러스의 비-필수 유전자의 예는 하기를 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다: 유전자 7, 유전자 8, 유전자 9, 유전자 10, 유전자 11, 유전자 12, 유전자 13, 유전자 14, 유전자 15, 유전자 17, 유전자 18, 유전자 19, 유전자 38, 유전자 39, 유전자 46, 유전자 47, 유전자 48, 유전자 49, 유전자 50, 유전자 56, 유전자 57, 유전자 58, 유전자 59, 유전자 61, 유전자 62, 유전자 63, 유전자 64, 유전자 65, 유전자 66, 유전자 67, 유전자 68, 유전자 69, 유전자 70.

바이러스 게놈 내 유전자가 필수 유전자인 경우 바이러스는 그 유전자의 부재시 생장할 수 없다. 따라서 바이러스 게놈 내 임의의 유전자를 결실시키고 바이러스의 생장을 검출함으로서 그 유전자가 필수 유전자인지 또는 비-필수 유전자인지 여부를 결정하는 것이 가능하다.

여기서 사용된 수두대상포진 바이러스와 관련한 "야생주"라는 용어는 인공적으로 변형되지 않고 자연으로부터 분리된 수두대상포진 바이러스주를 나타낸다. 야생주의 예는 Davison, A.J. and Scott, J. E. (J. Gen. Virol. 67(Pt 9), 1759-1816 (1986)에 의해 확인된 Dumas주를 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다. Dumas주의 핵산 서열은 서열번호: 5에 나타나 있다. Dumas주 내 각각의 ORF 및 그의 사이트 수는 하기에 기술되어 있다:

ORF 명칭 리딩 프레임 방향 게놈 상의 사이트 아미노산 잔기수

ORF1 3→5 방향 589 내지 915 1∼108개 아미노산

ORF2 5→3 방향 1134 내지 1850 1∼238개 아미노산

ORF3 3→5 방향 1908 내지 2447 1∼179개 아미노산

ORF4 3→5 방향 2783 내지 4141 1∼452개 아미노산

ORF5 3→5 방향 4252 내지 5274 1∼340개 아미노산

ORF6 3→5 방향 5326 내지 8577 1∼1083개 아미노산

ORF7 5→3 방향 8607 내지 9386 1∼259개 아미노산

ORF8 3→5 방향 9477 내지 10667 1∼396개 아미노산

ORF9 5→3 방향 11009 내지 11917 1∼302개 아미노산

ORF9A 5→3 방향 10642 내지 10902 1∼87개 아미노산

ORF10 5→3 방향 12160 내지 13392 1∼410개 아미노산

ORF11 5→3 방향 13590 내지 16049 1∼819개 아미노산

ORF12 5→3 방향 16214 내지 18199 1∼661개 아미노산

ORF13 5→3 방향 18441 내지 19346 1∼301개 아미노산

ORF14 3→5 방향 19431 내지 21113 1∼560개 아미노산

ORF15 3→5 방향 21258 내지 22478 1∼406개 아미노산

ORF16 3→5 방향 22568 내지 23794 1∼408개 아미노산

ORF17 5→3 방향 24149 내지 25516 1∼455개 아미노산

ORF18 3→5 방향 25573 내지 26493 1∼306개 아미노산

ORF19 3→5 방향 26518 내지 28845 1∼775개 아미노산

ORF20 3→5 방향 29024 내지 30475 1∼483개 아미노산

ORF21 5→3 방향 30759 내지 33875 1∼1038개 아미노산

ORF22 5→3 방향 34083 내지 42374 1∼2763개 아미노산

ORF23 3→5 방향 42431 내지 43138 1∼235개 아미노산

ORF24 3→5 방향 43212 내지 44021 1∼269개 아미노산

ORF25 3→5 방향 44148 내지 44618 1∼156개 아미노산

ORF26 5→3 방향 44506 내지 46263 1∼585개 아미노산

ORF27 5→3 방향 46127 내지 47128 1∼333개 아미노산

ORF28 3→5 방향 47052 내지 50636 1∼1194개 아미노산

ORF29 5→3 방향 50857 내지 54471 1∼1204개 아미노산

ORF30 5→3 방향 54651 내지 56963 1∼770개 아미노산

ORF31 5→3 방향 57008 내지 59614 1∼868개 아미노산

ORF32 5→3 방향 59766 내지 60197 1∼143개 아미노산

ORF33 3→5 방향 60321 내지 62138 1∼605개 아미노산

ORF33.5 3→5 방향 60321 내지 61229 1∼301개 아미노산

ORF34 3→5 방향 62171 내지 63910 1∼579개 아미노산

ORF35 3→5 방향 63977 내지 64753 1∼258개 아미노산

ORF36 5→3 방향 64807 내지 65832 1∼341개 아미노산

ORF37 5→3 방향 66074 내지 68599 1∼841개 아미노산

ORF38 3→5 방향 68668 내지 70293 1∼541개 아미노산

ORF39 5→3 방향 70633 내지 71355 1∼240개 아미노산

ORF40 5→3 방향 71540 내지 75730 1∼1396개 아미노산

ORF41 5→3 방향 75847 내지 76797 1∼316개 아미노산

ORF42+45 3→5 방향 76851 내지 78038 1∼747개 아미노산

및 81538 내지 82593

ORF43 5→3 방향 78170 내지 80200 1∼676개 아미노산

ORF44 5→3 방향 80360 내지 81451 1∼363개 아미노산

ORF46 5→3 방향 82719 내지 83318 1∼199개 아미노산

ORF47 5→3 방향 83168 내지 84700 1∼510개 아미노산

ORF48 5→3 방향 84667 내지 86322 1∼551개 아미노산

ORF49 5→3 방향 86226 내지 86471 1∼81개 아미노산

ORF50 3→5 방향 86575 내지 87882 1∼435개 아미노산

ORF51 5→3 방향 87881 내지 90388 1∼835개 아미노산

ORF52 5→3 방향 90493 내지 92808 1∼771개 아미노산

ORF53 3→5 방향 92855 내지 93850 1∼331개 아미노산

ORF54 3→5 방향 93675 내지 95984 1∼769개 아미노산

ORF55 5→3 방향 95996 내지 98641 1∼881개 아미노산

ORF56 5→3 방향 98568 내지 99302 1∼244개 아미노산

ORF57 3→5 방향 99411 내지 99626 1∼71개 아미노산

ORF58 3→5 방향 99607 내지 100272 1∼221개 아미노산

ORF59 3→5 방향 100302 내지 101219 1∼305개 아미노산

ORF60 3→5 방향 101170 내지 101649 1∼159개 아미노산

ORF61 3→5 방향 103082 내지 104485 1∼467개 아미노산

ORF62 3→5 방향 105201 내지 109133 1∼1310개 아미노산

ORF63 5→3 방향 110581 내지 111417 1∼278개 아미노산

ORF64 5→3 방향 111565 내지 112107 1∼180개 아미노산

ORF65 3→5 방향 112332 내지 112640 1∼102개 아미노산

ORF66 5→3 방향 113037 내지 114218 1∼393개 아미노산

ORF67 5→3 방향 114496 내지 115560 1∼354개 아미노산

ORF68 5→3 방향 115808 내지 117679 1∼623개 아미노산

ORF69 3→5 방향 117790 내지 118332 1∼180개 아미노산

ORF70 3→5 방향 118480 내지 119316 1∼278개 아미노산

ORF71 5→3 방향 120764 내지 124696 1∼1310개 아미노산

상기-기술된 표에서 "5→3 방향"은 ORF가 서열번호: 5의 핵산 서열과 동일한 방향을 지님을 나타낸다. "3→5 방향"은 ORF가 서열번호: 5의 핵산 서열에 대한 역방향을 지님을 나타낸다. ORF의 핵산 서열 및/또는 아미노산 서열에 대한 서열 상동체를 확인함으로서 당업자는 Dumas주 이외의 주 게놈 내 ORF를 용이하게 확인할 수 있다.

여기서 사용된 "변이주"라는 용어는 돌연변이유발, 다수의 서브클로닝 등으로 인해 돌연변이를 지닌 수두대상포진 바이러스를 나타낸다. 수두대상포진 바이러스주의 돌연변이유발은 무작위 돌연변이유발 또는 사이트-특이적 돌연변이유발이다.

여기서 사용된 "약독화 바이러스"라는 용어는 바이러스 변이주 형태이고 야생주보다 낮은 독성을 지닌 것을 나타낸다. 바이러스 변이주의 독성이 야생주보다 낮은지 여부를 결정하는 방법(즉, 수두대상포진 바이러스의 병원성의 조사방법)은 수립되어 있다.

동물 모델을 이용한 방법으로서 인간 피부가 이식된 중증 합병성 면역결핍(SCID) 마우스를 생성한 후 상기 마우스를 수두대상포진 바이러스로 감염시킴으로서 병원성을 평가하는 방법은 잘 알려져 있다(J. Viro 1. 1998 Feb; 72(2): 965-74).

한편, 시험관 내에서 병원성을 평가하는 방법으로 단층 배양 인간 흑색종이 더 낮은 층으로 삽입되고 수두대상포진 세포 바이러스로 감염된 제대혈 단핵세포(CBMC)가 공동 크기 3 ㎛의 트랜스-웰에 의해 잘 분리된 2개-층의 상위층으로 삽입된 경우 7∼8일간 배앙한 후 흑색종의 CPE(세포병변효과)를 관찰하는 방법이 잘 알려져 있다(J. Virol. 2000 Feb; 74(4): 1864-70).

이는 바이러스의 병원성과 증식 사이의 밀접한 관계가 있음을 나타내는 것으로 이해되는 것으로서 본 발명자의 연구로부터 직접적으로 병원성 평가방법이 아니나(J Virol. 2002 Nov; 76(22): 11447-59) 감염성 중심 분석을 이용한 세포-대-세포의 증식을 조사함으로서 간접적으로 병원성을 평가하는 것도 가능하다.

바이러스를 인공적으로 약독화하는 방법은 잘 알려져 있다. 예를 들어 수두대상포진 바이러스는 서열번호: 5의 유전자 62 내에 적어도 하기 (a)-(d)의 염기 치환을 포함하고:

(a) 2110 위치에서 G로 염기 치환;

(b) 3100 위치에서 G로 염기 치환;

(c) 3818 위치에서 C로 염기 치환; 및

(d) 4006 위치에서 G로 염기 치환,

서열번호: 8의 유전자 6 내에 적어도 5745 위치에서 G로 염기 치환을 포함한다

(a)-(d)의 염기 치환에 추가하여 상기-기술된 수두대상포진 바이러스를 이용하는 대신 하기 (e)-(g)의 적어도 하나 이상의 염기 치환을 포함한 약독화 수두 바이러스가 이용 가능하다:

(e) 1251 위치에서 G로 염기 치환;

(f) 2226 위치에서 G로 염기 치환; 및

(g) 3657 위치에서 G로 염기 치환

(a)-(g)의 하나 이상의 염기 치환에 추가하여 상기-기술된 수두대상포진 바이러스를 이용하는 대신 하기 (h)-(o)의 적어도 하나 이상의 염기 치환을 포함한 약독화 수두 바이러스가 이용 가능하다:

(h) 162 위치에서 C로 염기 치환;

(i) 225 위치에서 C로 염기 치환;

(j) 523 위치에서 C로 염기 치환

(k) 1565 위치에서 C로 염기 치환;

(l) 1763 위치에서 C로 염기 치환;

(m) 2652 위치에서 C로 염기 치환

(n) 4052 위치에서 C로 염기 치환; 및

(o) 4193 위치에서 C로 염기 치환

대안으로, "약독화 바이러스"로서 유전자 62 내 하기 군으로부터 선택된 적어도 하나 이상의 염기 치환을 포함한 바이러스가 이용될 수 있다:

(a) 2110 위치에서 G로 염기 치환;

(b) 3100 위치에서 G로 염기 치환;

(c) 3818 위치에서 C로 염기 치환;

(d) 4006 위치에서 G로 염기 치환;

(e) 1251 위치에서 G로 염기 치환;

(f) 2226 위치에서 G로 염기 치환;

(g) 3657 위치에서 G로 염기 치환;

(h) 162 위치에서 C로 염기 치환;

(i) 225 위치에서 C로 염기 치환;

(j) 523 위치에서 C로 염기 치환;

(k) 1565 위치에서 C로 염기 치환;

(l) 1763 위치에서 C로 염기 치환;

(m) 2652 위치에서 C로 염기 치환;

(n) 4052 위치에서 C로 염기 치환; 및

(o) 4193 위치에서 C로 염기 치환

여기서 사용된 "단백질", "폴리펩타이드", "올리고펩타이드"라는 용어는 동일한 의미를 지니고 어떠한 길이를 지닌 아미노 폴리머를 나타낸다.

여기서 사용된 "폴리뉴클레오타이드", "올리고뉴클레오타이드" 및 "핵산"이라는 용어는 동일한 의미를 나타내고 어떠한 길이를 지닌 뉴클레오타이드 폴리머이다. 나타내지 않는 한 특정 핵산 서열은 명백히 나타낸 서열뿐만 아니라 그의 통상으로-변형된 변이체(즉, 축퇴성 코돈 치환) 및 상보 서열을 함축적으로 포함한다. 상세하게는, 축퇴성 코돈 치환은 하나 이상의 선택된(또는 전부) 코돈의 세 번째 위치가 혼합된-염기 및/또는 디옥시이노신(deoxyinosine) 잔기로 치환된 서열을 생성함으로서 제조된다(Batzer et al., Nucleic Acid Res. 19:5081(1991); Ohtsuka et al., J. Biol. Chem. 260:2605-2608 (1985); Rossolini et al., Mol. Cell. Probes 8:91-98(1994)).

여기서 사용된 "유전자"라는 용어는 유전 형질을 한정하는 요소를 나타낸다. 유전자는 일반적으로 염새체 상의 제공된 서열 내에 배열된다. 단백질의 1차 구조를 한정하는 유전자는 구조 유전자로 명명된다. 구조 유전자의 발현을 조절하는 유전자는 조절 유전자로 명명된다. 여기서 사용된 "유전자"는 "폴리뉴클레오타이드", "올리고뉴클레오타이드", "핵산" 및 "핵산 분자" 및/또는 "단백질", "폴리펩타이드", "올리고펩타이드" 및 "펩타이드"를 나타낸다. 여기서 사용된 유전자와 관련한 "오픈 리딩 프레임" 또는 "ORF"라는 용어는 3개 염기의 간격에서 유전자의 염기 서열을 절단함으로서 수득된 3개 프레임 중 하나인 리딩 프레임을 나타내고, 시작 코돈 및 도중에 종결 코돈을 나타내지 않는 특정 길이를 지니고, 실제로 단백질을 코딩하는 가능성을 지닌다. 수두대상포진 바이러스 게놈의 전체 염기 서열이 측정되었고 적어도 71개 유전자로 확인되었다. 유전자 각각은 오픈 리딩 프레임(ORF)를 지니는 것으로 알려졌다.

여기서 사용된 수두대상포진 바이러스 게놈 내 유전자와 관련한 "ORF 내 영역"이라는 용어는 수두대상포진 바이러스 게놈의 유전자 내 ORF를 구성하는 염기가 존재하는 영역을 나타낸다.

여기서 사용된 수두대상포진 바이러스 게놈 내 유전자와 관련한 "ORF 인접 영역"은 수두대상포진 바이러스 게놈의 유전자 내 ORF 부근에 존재하는 염기가 존재하고 유전자 또는 다른 유전자의 ORF 내 영역에 상응하지 않는 영역을 나타낸다.

여기서 사용된 유전자의 "상동성"이라는 용어는 2 이상의 유전자 서열 사이의 동일성 비율을 나타낸다. 따라서 제공된 2 유전자 사이의 상동성이 클수록 그들 서열 사이의 동일성 또는 유사성이 커진다. 2 유전자가 상동성을 지닌지 여부는 서열을 직접 비교하거나 스트린전트 조건 하에 하이브리디제이션 방법에 의해 측정된다. 2 유전자 서열이 서로 직접 비교되는 경우 이들 유전자 상동성은 유전자가 DNA 서열인 경우 대표적으로 서로에 대해 적어도 50% 이상의 동일성, 바람직하게는 적어도 70% 이상의 동일성, 더욱 바람직하게는 적어도 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 이상의 동일성을 지닌다.

여기서 염기 서열의 유사성 비교 및 상동성 계산은 디폴트 파라미터로 BLAST(서열 분석 기구)를 이용하여 수행된다.

여기서 사용된 유전자, 폴리뉴클레오타이드, 폴리펩타이드 등의 "발현"이라는 용어는 유전자 등이 또다른 형태로 변화되는 생체 내에서 미리 결정된 작용에 의해 영향 받음을 나타낸다. 바람직하게는 "발현"이라는 용어는 유전자, 폴리뉴클레오타이드 등이 전사되고 폴리펩타이드로 번역되는 것을 나타낸다. 본 발명의 하나의 실시태양에서 유전자는 mRNA로 전사된다. 더욱 바람직하게는 이들 폴리펩타이드는 후-번역 처리 변형을 지닌다.

여기서 아미노산은 통상적으로 알려진 3 문자 기호에 의해 또는 IUPAC-IUB Biochemical Numenclature Commission에 의해 추천된 1 문자 기호에 의해 표기된다. 유사하게는 뉴클레오타이드는 통상적으로 수용된 단일-문자 코드로 표기된다.

여기서 사용된 "단편"이라는 용어는 참고 폴리펩타이드 또는 폴리뉴클레오타이드(n 길이의)의 전체 길이에 대한 1∼n-1 범위의 서열 길이를 지닌 폴리펩타이드 또는 폴리뉴클레오타이드를 나타낸다. 단편의 길이는 목적에 따라 적당히 변화될 수 있다. 예를 들어 폴리펩타이드의 경우 단편 길이의 하한선은 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50 이상의 뉴클레오타이드를 포함한다. 여기에 기술되지 않은 정수로 표기된 길이(즉, 11 등)은 하한선으로 적당하다. 예를 들어 폴리뉴클레오타이드의 경우 단편 길이의 하한선은 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 75, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 600, 700, 800, 900, 1000 이상의 뉴클레오타이드를 나타낸다. 여기에 기술되지 않은 정수로 표기된 길이(즉, 11 등)은 하한선으로 적당하다.

BAC 벡터 내 유전자에 의해 인코드된 폴리펩타이드는 그의 상응하는 자연 발생적 폴리펩타이드와 실직적으로 동일한 기능을 지니는 한 적어도 하나 이상(즉, 하나 또는 수개)의 아미노산 치환, 첨가 및/또는 결실을 지닌다.

여기서 사용된 "당 사슬"이라는 용어는 적어도 하나 이상의 당 단위(모노사카라이드 및/또는 그의 유도체)의 시리즈로 구성된 화합물을 나타낸다. 2 이상의 당 단위가 결합되면 당 단위는 글리코시드 결합으로로 인한 탈수응축(dehydrocondensation)에 의해 결합된다. 이러한 당 사슬의 예는 생물체 내에 포함된 폴리사카라이드(글루코스, 갈락토스, 만노스, 푸코스, 자일로스, N-아세틸글루코사민, N-아세틸갈락토사민, 시알산 및 그의 복합체 및 유도체) 및 분해된 폴리사카라이드, 복합 생물 분자로부터 분해되거나 유도된 당 사슬(즉, 당단백질, 프로테오글리칸, 글리코사미노글리칸, 당지질 등) 등을 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다. 따라서 "당 사슬"이라는 용어는 여기서 "폴리사카라이드", "탄수화물" 및 "탄화수소"와 상호 교환 가능하게 사용된다. 상술하지 않는 한 여기서 사용된 "당 사슬"이라는 용어는 당 사슬 및 당 사슬-함유 물질 모두를 포함한다.

제공된 아미노산이 유사한 소수성 지수를 지닌 또다른 아미노산으로 치환되는 경우 수득된 단백질은 그의 기원 단백질과 유사한 생물학적 기능을 여전히 지님(즉, 단백질이 동등한 효소 활성을 지님)이 잘 알려져 있다. 이러한 아미노산 치환에 있어서 소수성 지수는 바람직하게는 ±2 이내, 더욱 바람직하게는 ±1 이내 및 더욱 더 바람직하게는 ±0.5 이내이다. 이러한 소수성에 기반한 아미노산 치환이 효과적임은 당분야에서 이해된다. 친수성 지수도 본 발명의 아미노산 서열의 변형에 유용하다. 미국특허 제4,554,101호에 기술된 바와 같이 아미노산 잔기는 하기 친수성 지수를 제공한다: 아르기닌 (+3.0); 라이신 (+3.0); 아스파르트산 (+3.01); 글루탐산 (+3.01); 세린 (+0.3); 아스파라긴 (+0.2); 글루타민 (+0.2); 글리신 (0); 트레오닌 (-0.4); 프롤린 (-0.51); 알라닌 (-0.5); 히스티딘 (-0.5); 시스테인 (-1.0); 메티오닌 (-1.3); 발린 (-1.5); 류신 (-1.8); 이소류신 (-1.8); 티로신 (-2.3); 페닐알라닌 (-2.5); 및 트립토판 (-3.4). 아미노산이 유사한 친수성 지수를 지닌 또다른 아미노산으로 치환되고 생물학적 등가를 여전히 제공할 수 있음이 이해된다. 이러한 아미노산 치환에 있어서 친수성 지수는 바람직하게는 ±2 이내, 더욱 바람직하게는 ±1 이내 및 더욱 더 바람직하게는 ±0.5 이내이다.

여기서 사용된 "보존성 치환"이라는 용어는 치환되는 아미노산 및 치환시키는 아미노산이 유사한 친수성 지수 및/또는 소수성 지수를 지닌 아미노산 치환을 나타낸다. 예를 들어 보존성 치환은 ±2 이내, 바람직하게는 ±1 이내, 더욱 바람직하게는 ±0.5 이내의 친수성 또는 소수성 지수를 지닌 아미노산 사이에서 수행된다. 보존성 치환의 예는 당분야에 잘 알려진 하기 잔기쌍 각각에서의 치환을 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다: 아르기닌 및 라이신; 글루탐산 및 아스파르트산; 세린 및 트레오닌; 글루타민 및 아스파라긴; 및 발린, 류산 및 이소류신.

여기서 사용된 "변이체"라는 용어는 기원 물질과 일부 다른 폴리펩타이드, 폴리뉴클레오타이드 등과 같은 물질을 나타낸다. 이러한 변이체의 예는 치환 변이체, 첨가 변이체, 결실 변이체, 절단 변이체, 대립유전성 변이체 등을 포함한다. 이러한 변이체의 예는 하나 또는 수개 치환, 첨가 및/또는 결실을 지닌 뉴클레오타이드 또는 폴리펩타이드 또는 적어도 하나 이상의 치환, 첨가 및/또는 결실을 지닌 뉴클레오타이드 또는 폴리펩타이드를 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다. 여기서 사용된 "대립유전자"라는 용어는 두 유전자가 서로 식별되는 상응하는 유전자에 대해 동일한 좌위에 위치한 유전적 변이체를 나타낸다. 따라서 여기서 사용된 "대립유전성 변이체"라는 용어는 제공된 유전자와 대립유전성 관계를 지닌 변이체를 나타낸다. 이러한 대립유전성 변이체는 일반적으로 상응하는 대립유전자와 동일하거나 매우 유사한 서열을 지니고, 다른 생물학적 활성을 거의 지니지 않고 일반적으로 거의 동일한 활성을 지닌다. 여기서 사용된 "종 상동체" 또는 "상동체"라는 용어는 제공된 종의 제공된 유전자와 아미노산 또는 뉴클레오타이드 상동성(바람직하게는 적어도 60% 이상, 더욱 바람직하게는 적어도 80% 이상, 적어도 85% 이상, 적어도 90% 이상, 적어도 95% 이상의 상동성)을 지닌 것을 나타낸다. 이러한 종 상동체를 수득하는 방법은 본 명세서의 기술로부터 명백히 이해된다. "오르쏠로그(ortholog)"(또한 오르쏠로거스(orthologous) 유전자로도 명명됨)라는 용어는 동일 조상 유래의 다른 종 내의 유전자(종분화에 기인)를 나타낸다. 예를 들어 다유전자 구조를 지닌 헤모글로빈 유전자 패밀리의 경우 인간 및 마우스 α-헤모글로빈 유전자는 오르쏠로그인 반면 인간 α-헤모글로빈 유전자와 인간 β-헤모글로빈 유전자는 파랄로그(유전자 중복으로부터 유발된 유전자)이다. 오르쏠로그는 분자 계통발생도의 평가에 유용하다. 일반적으로 다른 종 내의 오르쏠로그는 그의 기원 종과 유사한 기능을 지닌다. 따라서 본 발명의 오르쏠로그는 본 발명에 유용하다.

여기서 사용된 "보존성(또는 보존적으로 변형된) 변이체"라는 용어는 아미노산과 핵산 서열 모두에 적용된다. 특정 핵산 서열에 대해 보존적으로 변형된 변이체는 동일하거나 본질적으로 동일한 아미노산 서열을 인코드하는 핵산을 나타낸다. 유전자 코드의 축퇴로 인해 많은 기능적으로 동일한 핵산은 어떠한 제공된 단백질을 인코드한다. 예를 들어 코돈 GCA, GCC, GCG 및 GCU는 모두 아미노산 알라닌을 인코드한다. 따라서 알라닌이 코돈에 의해 지정된 모든 위치에서 코돈은 인코드되는 폴리펩타이드를 변화시키지 않고 상응하는 어떠한 코돈으로도 변경될 수 있다. 이러한 핵산 변이는 보존적으로 변형된 변이의 하나의 종을 나타내는 "침묵 변이"이다. 여기서 폴리펩타이드를 인코드하는 모든 핵산 서열은 핵산의 모든 간으한 침묵 변이도 나타낸다. 당업자는 핵산 내 각각의 코돈(일반적으로 메티오닌만을 위한 코돈인 AUG 및 일반적으로 트립토판만을 위한 코돈인 TGG를 제외하고)은 기능적으로 동일한 분자를 산출하도록 변형될 수 있다. 따라서 폴리펩타이드를 인코드하는 핵산의 각각의 침묵 변이는 각각 나타내는 서열에 포함된다. 바람직하게는 이러한 변형은 폴리펩타이드의 고급 구조에 크게 영향을 미치는 것이 가능한 아미노산인 시스테인의 치환을 방지하면서 수행된다.

기능적으로 동등한 폴리펩타이드를 인코드하는 유전자를 포함한 BAC 벡터를 제조하기 위해 아미노산 첨가, 결실 또는 변형이 아미노산 치환에 추가하여 수행될 수 있다. 아미노산 치환(들)은 1∼10개 아미노산, 바람직하게는 1∼5개 아미노산, 더욱 바람직하게는 1∼3개 아미노산의 다른 아미노산으로의 대치와 같은 원시 펩타이드의 적어도 하나 이상의 아미노산의 다른 아미노산으로의 대치를 나타낸다. 아미노산 첨가(들)는 원시 펩타이드 사슬 내로의 1∼10개 아미노산, 바람직하게는 1∼5개 아미노산, 더욱 바람직하게는 1∼3개 아미노산의 첨가와 같은 원시 펩타이드 사슬 내로의 적어도 하나 이상의 아미노산의 첨가를 나타낸다. 아미노산 결실(들)은 1∼10개 아미노산, 바람직하게는 1∼5개 아미노산, 더욱 바람직하게는 1∼3개 아미노산의 결실과 같은 적어도 하나 이상의 아미노산의 결실을 나타낸다. 아미노산 변형은 아미드화, 카르복실화, 황산화, 할로겐화, 절단, 지질화, 알킬화, 당화, 인산화, 수산화, 아실화(즉, 아세틸화) 등을 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다. 치환되거나 첨가되는 아미노산은 자연 발생적 또는 비자연 발생적 아미노산 또는 아미노산 아날로그이다. 자연 발생적 아미노산이 바람직하다.

여기서 사용된 폴리펩타이드의 핵산 형태는 폴리펩타이드의 단백질 형태를 발현하는 것이 가능한 핵산 분자를 나타낸다. 이러한 핵산 분자는 발현되는 폴리펩타이드가 자연 발생적 폴리펩타이드와 실질적으로 동일한 활성을 지니는 한 결실되거나 또다른 염기로 치환된 부분 또는 대안으로 또다른 핵산 서열 내로 삽입되는 부분의 핵산 서열을 지닌다. 대안으로, 또다른 핵산은 핵산 분자의 5' 말단 및/또는 3' 말단에 결합된다. 핵산 분자는 스트린전트 조건 하에서 폴리펩타이드를 인코드하는 유전자에 하이브리다이즈 가능하고 폴리펩타이드와 실질적으로 동일한 기능을 지닌 폴리펩타이드를 인코드하는 핵산 분자이다. 이러한 유전자는 당분야에 알려져 있고 본 발명에서 이용 가능하다.

이러한 핵산은 잘 알려진 PCR 기술에 의해 수득될 수 있고, 대안으로 화학적으로 합성될 수 있다. 이들 방법은 예를 들어 사이트-특이적 돌연변이유발, 하이브리디제이션 등과 결합된다.

여기서 사용된 폴리펩타이드 또는 폴리뉴클레오타이드에 대한 "치환, 첨가 또는 결실"이라는 용어는 원시 폴리펩타이드 또는 폴리뉴클레오타이드에 대한 아미노산 또는 그의 치환체 또는 뉴클레오타이드 또는 그의 치환체의 치환, 첨가 또는 결실을 나타낸다. 이는 사이트-특이적 돌연변이유발 기술 등을 포함한 당분야에 잘 알려진 기술에 의해 달성된다. 폴리펩타이드 또는 폴리뉴클레오타이드는 어떠한 수(>0)의 치환, 첨가 또는 결실도 지닌다.

그 수는 변이체가 의도된 기능을 유지시키는 치환, 첨가 또는 결실의 수를 지닌 변이체 만큼 클 수 있다. 예를 들어 이러한 수는 하나 또는 수개 또는 전체 길이의 20% 또는 10% 이내 또는 100개 이하, 50개 이하 또는 25개 이하이다.

폴리머의 구조(즉, 폴리펩타이드 구조)는 다양한 수준에서 기술된다. 이러한 구조는 일반적으로 예를 들어 Alberts et al., Molecular Biology of the Cell (3rd Ed., 1994) 및 Cantor and Schimmel, Biophysical Chemistry Part I: The Conformation of Biological Macromolecules (1980)에서 기술되어 있다. 본 발명에서 이용 가능한 일반적인 분자생물학 기술은 Ausubel F. A. et al. eds. (1988), Current Protocols in Molecular Biology, Wiley, New York, NY; Sambrook J. et al., (1987) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY 등을 참고하여 당업자에 의해 용이하게 수행될 수 있다.

본 명세서 내에 유전자 기술시 "벡터"는 목적 폴리뉴클레오타이드 서열을 표적 세포로 전달할 수 있는 작용제를 나타낸다. 이러한 벡터의 예는 자가 복제가 가능하거나 숙주 세포(즉, 원핵세포, 효모, 동물세포, 식물세포, 곤충세포, 전체 동물 및 전체 식물)의 염색체 내로 도입되는 것이 가능한 벡터를 포함하고 본 발명의 폴리뉴클레오타이드의 전사에 적당한 자리에서 프로모터를 포함한다.

"BAC 벡터"라는 용어는 E. coli의 F 플라스미드를 이용하여 제조된 플라스미드 및 E. coli와 같은 박테리아에서 약 300 kb 이상의 큰 크기의 DNA 단편을 안정하게 유지시키고 생장할 수 있는 벡터를 나타낸다. BAC 벡터는 적어도 BAC 벡터의 복제를 위해 필수적인 영역을 포함한다. 이러한 영역의 예는 F 플라스미드의 복제 기점(oriS) 및 그의 변이체를 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다.

여기서 사용된 "BAC 벡터 서열"이라는 용어는 BAC 벡터의 기능에 필수적인 서열을 포함한 서열을 나타낸다. 선택적으로는 BAC 벡터 서열은 "재조합 단백질-의존적 재조합 서열" 및/또는 "선별 마커"를 더욱 포함한다.

여기서 사용된 핵산과 관련한 "재조합"이라는 용어는 "상동적 재조합"과 상호 교환 가능하게 사용되고, 2개의 다른 상동성 핵산 분자가 서로 대립하고 교차가 발생하고 핵산의 새로운 조합이 생성됨을 나타낸다. 여기서 사용된 상동적 재조합은 "재조합 단백질-의존적 재조합" 및 "재조합 단백질-독립적 재조합" 모두를 포함한다. "재조합 단백질-의존적 재조합"라는 용어는 재조합 단백질의 존재시에는 발생하나 재조합 단백질의 부재시에는 발생하지 않는 상동적 재조합을 나타낸다. "재조합 단백질-독립적 재조합"라는 용어는 재조합 단백질의 존재 또는 부재에 관계없이 발생하는 상동적 재조합을 나타낸다. 여기서 사용된 "재조합 단백질-의존적 재조합 서열"라는 용어는 재조합 단백질-의존적 재조합을 유발하는 서열을 나타낸다. 여기서 사용된 "재조합 단백질-독립적 재조합 서열"라는 용어는 재조합 단백질-독립적 재조합을 유발하는 서열을 나타낸다. 재조합 단백질-의존적 재조합 서열은 재조합 단백질의 존재시에는 재조합을 유발하나 재조합 단백질의 부재시에는 재조합을 유발하지 않는다. 재조합 단백질은 바람직하게는 재조합 단백질-의존적 재조합 서열 상에 특이적으로 작용하고, 재조합 단백질-의존적 재조합 서열 이외의 서열 상에서는 작용하지 않는다.

재조합 단백질-의존적 재조합 서열 및 재조합 단백질-독립적 재조합 서열의 대표적 쌍의 예는 하기를 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다: 박테리오파지 P1-유래 loxP(P1의 교차 좌위) 서열과 Cre(고리화 재조합) 단백질의 결합, Flp 단백질과 FRT 사이트의 결합, φC31과 attB 또는 attP의 결합(Thorpe, Helena M.; Wilson, Stuart E.; Smith, Margaret C.M., Control of directionality in the site-specific recombination system of the Streptomyces phage φC31., Molecular Microbiology (2000), 38(2), 232-241), 레솔바제(resolvase)와 res 사이트의 결합(Sadowski P., Site-specific recombinases: changing partners and doing the twist, J. Bacteriol., February 1986; 165(2) 341-7) (일반적으로, Sauer B., Site-specific recombination: developments and applications., Curr. Opin. Biotechnol., 1994 Oct; 5(5): 521-7).

여기서 사용된 "선별 마커"라는 용어는 BAC 벡터를 포함한 숙주 세포의 선택을 위한 지료포서 기능하는 유전자를 나타낸다. 선별 마커의 예는 형광 마커, 발광 마커 및 약제 선별 마커를 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다. "형광 마커"의 예는 녹색 형광 단백질(GFP)와 같은 형광 단백질을 인코드하는 유전자이나 이에 한정적인 것은 아니다. "발광 마커"의 예는 루시페라제와 같은 발광 단백질을 인코드하는 유전자이나 이에 한정적인 것은 아니다. "약제 선별 마커"의 예는 하기로 구성된 군으로부터 선택된 단백질을 인코드하는 유전자이나 이에 한정적인 것은 아니다: 이수소폴산 환원효소 유전자, 메탈로티오네인(MT), 아데노신 디아미나제(ADA), 아데노신 디아미나제(AMPD1, 2), 크산틴-구아닌-포스포리보실전이효소, UMP 신타제, P-당단백질, 아스파라긴 신타제 및 오르니틴 디카르복실라제. 약제 선별 마커와 약제의 결합의 예는 하기를 포함한다: 이수소폴산 환원효소 유전자(DHFR)과 메토트렉세이트(MTX)의 결합, 글루타민 신타제(GS) 유전자와 메티오닌 술폭시민(Msx)의 결합, 아스파르트산 아미노전이효소(CAD) 유전자와 N-포스폰아세틸-L-아스파테이트(PALA)의 결합, MT 유전자와 카드뮴(Cd2+)의 결합, 아데노신 디아미나제(ADA) 유전자와 아데노신, 알라노신 또는 2'-디옥시코포르마이신의 결합, 아데노신 디아미나제(AMPD1, 2) 유전자와 아데닌, 아자세린 또는 코포르마이신의 결합, 크산틴-구아닌-포스포리보실전이효소 유전자와 마이코페놀산의 결합, UMP 신타제 유전자와 6-아자우릴신 또는 피라조푸란의 결합, P-당단백질(P-gp, MDR) 유전자와 다수 약제와의 결합, 아스파라긴 신타제(AS) 유전자와 β-아스파르틸 하이드록삼산 또는 알비지인(albizziinn)의 결합 및 오르니틴 디카르복실라제(ODC) 유전자와 α-다이플루오로메틸-오르니틴(DFMO)의 결합.

여기서 사용된 "발현 벡터"라는 용어는 구조 유전자 및 그의 발현을 조절하는 프로모터 및 이에 추가로 숙주 세포 내에서 이들을 작동하게 하는 상태의 다양한 조절 요소를 포함한 핵산 서열을 나타낸다. 조절 요소는 바람직하게는 터미네이터, 약제-저항성 유전자(즉, 카나마이신 저항성 유전자, 하이그로마이신 저항성 유전자 등)와 같은 선별 마커 및 인핸서를 포함한다. 생물체(즉, 식물) 발현 벡터의 형태 및 조절 요소의 형태는 숙주 세포에 따라 달라짐은 당업자에게 잘 알려져 있다. 식물의 경우 본 발명에 사용되는 식물 발현 벡터는 T-DNA 영역을 더욱 포함한다. T-DNA 영역은 특히 식물이 아그로박테리움으로 형질전환되는 경우에 유전자 전이의 효율을 증진시킨다.

여기서 사용된 "재조합 벡터"라는 용어는 목적 폴리뉴클레오타이드 서열을 표적 세포로 전이시킬 수 있는 벡터를 나타낸다. 이러한 벡터의 예는 자가 복제가 가능하거나 숙주 세포(즉, 원핵세포, 효모, 동물세포, 식물세포, 곤충세포, 전체 동물 및 전체 식물)의 염색체 내로 도입되는 것이 가능한 벡터를 포함하고 본 발명의 폴리뉴클레오타이드의 전이에 적당한 사이트에서 프로모터를 포함한다.

여기서 사용된 "터미네이터"라는 용어는 유전자의 단백질-인코딩 영역의 다운스트림에 위치하고 DNA가 mRNA로 전사시 전사 종결 및 폴리 A 서열의 첨가에 관련된 서열을 나타낸다. 터미네이터는 mRNA의 안정성에 기여하고 유전자 발현량에 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. 터미네이터의 예는 포유류 유래의 터미네이터, CaMV35S 터미네이터, 노팔린 신타제 유전자(Tnos)의 터미네이터, 담배 PR1 유전자의 터미네이터 등을 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다.

여기서 사용된 "프로모터"라는 용어는 유전자 전사의 개시 사이트를 결정하고 전사 빈도를 직접 조절하는 DNA의 ORF 내 영역인 염기 서열을 나타낸다. 전사는 프로모터에 결합하는 RNA 중합효소에 의해 시작된다. 프로모터 영역은 일반적으로 추정 단백질 코딩 영역의 첫 번째 엑손의 약 2 kbp 업스트림 이내에 위치한다. 따라서 DNA 분석 소프트웨어를 이용하여 게놈 염기 서열 내 단백질 코딩 영역을 예측함으로서 프로모터 영역을 추정하는 것이 가능하다. 추정 프로모터 영역은 일반적으로 구조 유전자의 업스트림에 위치하나 구조 유전자에 따라서 추정 프로모터 영역은 구조 유전자의 다운스트림에 위치하기도 한다. 바람직하게는 추정 프로모터 영역은 첫 번째 엑손의 번역 개시 사이트의 약 2 kbp 업스트림 이내에 위치한다.

여기서 사용된 본 발명의 프로모터의 발현에 대한 "구성적"이라는 용어는 프로모터가 생물체의 생장 단계가 소아 단계 또는 성체 단계에 관계없이 생물체의 모든 조직 내 실질적으로 일정한 양으로 발현되는 프로모터 특성을 나타낸다. 상세하게는 노던 블럿팅 분석이 본 명세서의 실시예에서 기술된 바와 동일하게 수행될 때 예를 들어 발현이 실질적으로 동일한 발현량이 어떠한 시간(즉, 2 이상의 시간 시점(즉, 5일 및 15일)에 동일하거나 이에 상응하는 사이트에서 관찰되는 경우 본 발명의 정의에 따라 구성적인 것으로 간주된다. 구성적 프로모터는 정상 생장 환경에서 생물체의 항상성을 유지하는데 중요한 역할을 하는 것으로 간주된다. 이들 특성은 생물체의 어떤 부분으로부터 RNA를 추출하고 노던 블럿팅에 의해 RNA의 발현량을 분석하거나 웨스턴 블럿팅에 의해 발현된 단백질을 정량화함으로서 측정될 수 있다.

"인핸서"는 목적 유전자의 발현 효율을 증가시키기 위해 사용된다. 동물에 사용시 SV40 프로모터 내 업스트림 서열을 포함한 인핸서 영역이 바람직하다. 하나 이상의 인핸서가 사용되거나 어떠한 인핸서도 사용되지 않기도 한다.

여기서 사용된 "작동 가능하게 결합된"이라는 용어는 원하는 서열이 그의 발현(작동)이 전사 및 번역 조절 서열(즉, 프로모터, 인핸서 등) 또는 번역 조절 서열의 제어 하에 존재하도록 위치함을 나타낸다. 프로모터가 유전자에 작동 가능하게 결합되기 위해서 일반적으로 프로모터는 유전자의 바로 업스트림에 위치한다. 프로모터는 구조 유전자에 항상 인접할 필요는 없다.

여기서 사용된 "형질전환", "형질도입" 및 "트랜스펙션"이라는 용어는 기술되지 않는 한 상호 교환 가능하게 사용되고 핵산의 숙주 세포 내로의 도입을 나타낸다. 형질전환 방법으로는 예를 들어 일렉트로포레이션법, 입자총법(유전자총), 인산칼슘법 등을 포함한 DNA를 숙주 세포 내로 도입시키는 어떠한 기술도 사용될 수 있다.

여기서 사용된 "형질전환체"라는 용어는 형질전환에 의해 생성된 세포와 같은 생물체의 전부 또는 일부를 나타낸다. 형질전환체의 예는 원핵세포, 효모, 동물세포, 식물세포, 곤충세포 등을 포함한다. 형질전환체는 피험체에 따라 다르게 형질전환 세포, 형질전환 조직, 형질전환 숙주 등을 나타낸다. 여기서 사용된 바와 같이 모든 형태가 포함되나 특정 형태는 특정한 상황에서 상술된다.

원핵세포의 예는 에스케리키아속(Escherichia), 세라티아속(Serratia), 바실러스속(Bacillus), 브레비박테리움속(Brevibacterium), 코리네박테리움속(Corynebacterium), 미크로박테리움속(Microbacterium), 슈도모나스속(Pseudomonas) 등 즉, Escherichia coli XL1-Blue, Escherichia coli XL2-Blue, Escherichia coli DH1, Escherichia coli MC1000, Escherichia coli KY3276, Escherichia coli W1485, Escherichia coli JM109, Escherichia coli HB101, Escherichia coli No.49, Escherichia coli W3110, Escherichia coli NY49, Escherichia coli BL21(DE3), Escherichia coli BL21(DE3)pLysS, Escherichia coli HMS174(DE3), Escherichia coli HMS174(DE3)pLysS, Serratia ficaria, Serratia fonticola, Serratia liquefaciens, Serratia marcescens, Bacillus subtilis, Bacillus amyloliquefaciens, Brevibacterium ammmoniagenes, Brevibacterium immariophilum ATCC14068, Brevibacterium saccharolyticum ATCC14066, Corynebacterium glutamicum ATCC13032, Corynebacterium glutamicum ATCC14067, Corynebacterium glutamicum ATCC13869, Corynebacterium acetoacidophilum ATCC13870, Microbacterium ammoniaphilum ATCC15354, Pseudomonas sp.D-0110 등의 원핵세포를 포함한다.

동물세포의 예는 인간 MRC-5 세포, 인간 HEL 세포, 인간 WI-38 세포, 마우스 골수종 세포, 래트 골수종 세포, 인간 골수종 세포, 마우스 하이브리도마 세포, 중국 햄스터 유래의 CHO 세포, BHK 세포, 아프리카 녹색 원숭이 신장세포, 인간 백혈병 세포, HBT5637(일본공개공보 제63-299호), 인간 결장암 세포주를 포함한다. 마우스 골수종 세포는 ps20, NSO 등을 포함한다. 래트 골수종 세포는 YB2/0 등을 포함한다. 인간 태아 신장세포는 HEK293(ATCC: CRL-1573) 등을 포함한다. 인간 백혈병 세포는 BALL-1 등을 포함한다. 아프리카 녹색 원숭이 신장세포는 COS-1, COS-7, 베로(vero) 세포 등을 포함한다. 인간 결장암 세포주는 HCT-15 등을 포함한다.

"동물"이라는 용어는 그의 가장 광범위한 의미로 사용되고 척추동물 및 무척추동물(즉, 절지동물)을 나타낸다. 동물의 예는 포유강, 조강, 파충강, 양서강, 어강, 곤충강, 연형강 등을 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다.

여기서 사용된 생물체와 관련한 "조직"이라는 용어는 실질적으로 동일한 기능을 지닌 세포 집단을 나타낸다. 따라서 조직은 기관의 일부이다. 일반적으로 기관은 동일한 기능을 지닌 세포를 지니고, 다소 다른 기능을 지닌 공존 세포를 지닌다. 따라서 여기서 사용된 조직은 특정 성질이 세포에 의해 공유되는 한 다양한 종류의 세포를 지닌다.

여기서 사용된 "기관"이라는 용어는 단일 독립적 형태를 지니고 하나 이상의 조직이 함께 결합되어 특정 기능을 수행하게 되는 구조를 나타낸다. 식물에서 기관의 예는 캘러스, 뿌리, 잎자루, 줄기, 잎, 꽃, 종자, 배아싹, 배아, 열매 등을 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다. 동물에 있어서 기관의 예는 위, 간, 창자, 췌장, 폐, 기도, 코, 심장, 동맥, 정맥, 임파절(림프계), 흉선, 난소, 눈, 귀, 혀, 피부 등을 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다.

여기서 사용된 "트랜스제닉"이라는 용어는 생물체(즉, 식물 또는 동물(마우스 등) 내로 특정 유전자의 도입 또는 도입된 유전자를 지닌 생물체를 나타낸다.

본 발명의 생물체가 동물인 경우 트랜스제닉 생물체는 마이크로인젝션법(미량주입법), 바이러스 벡터법, 배아줄기(ES)세포법, 정자 벡터법, 염색체 단편 도입법(트랜스소믹법), 에피솜법 등에 의해 제조될 수 있다. 이들 트랜스제닉 동물 제조 기술은 당분야에 잘 알려져 있다.

여기서 사용된 "선별"이라는 용어는 특정한 실시/평가 방법을 이용하여 많은 후보로부터 제공된 목적 특성을 지닌 물질, 숙주 세포, 바이러스 등의 선택을 나타낸다. 본 발명은 선별에 의해 수득된 원하는 활성을 지닌 바이러스를 포함함이 이해될 것이다.

여기서 사용된 "칩" 또는 "마이크로칩"이라는 용어는 다목적 기능을 지니고 시스템의 일부를 구성하는 마이크로 집적회로를 나타내는데 상호 교환 가능하게 사용된다. 칩의 예는 DNA 칩, 단백질 칩 등을 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다.

여기서 사용된 "어레이"라는 용어는 배열된 적어도 하나 이상(즉, 100 이상 등)의 표적 물질(즉, DNA, 단백질, 세포 등)을 포함한 조성물 형태를 지닌 물질(즉, 칩 등)을 나타낸다. 특히 어레이 중 작은 크기(즉, 10×10 mm 등)를 지닌 패턴화된 물질은 마이크로어레이로 표기된다. "마이크로어레이" 및 "어레이"라는 용어는 상호 교환 가능하게 사용된다. 따라서 상기 기술된 것보다 더 큰 크기를 지닌 패턴화된 물질은 마이크로어레이로 표기되기도 한다. 예를 들어 어레이는 고형상 표면 또는 그의 필름에 고정된 원하는 트랜스펙션 혼합물을 포함한다. 바람직하게는 어레이는 적어도 10²개 이상, 더욱 바람직하게는 10³개 이상, 더욱 더 바람직하게는 10⁴개, 더욱 더 바람직하게는 10⁵개 이상의 동일하거나 다른 형태의 항체를 포함한다. 이들 항체는 125×80 mm, 더욱 바람직하게는 10×10 mm까지 표면 상에 놓인다. 어레이는 96-웰 미량 역가판, 384-웰 미량 역가판, 유리 슬라이드의 크기의 미량 역가판 등을 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다. 고정되는 조성물은 하나 또는 다수 형태의 표적 물질을 포함한다. 이러한 표적 물질 형태의 수는 제한 없이 1부터 약 10종류, 약 100종류, 약 500종류 및 약 1,000종류를 포함한 많은 스팟의 범위이다.

상기 기술된 바와 같이 일반적으로 물질 당 10⁸개 이하, 또다른 실시태양의 경우 10⁷개 이하, 10⁶개 이하, 10⁵개 이하, 10⁴개 이하, 10³개 이하, 10²개 이하의 생물 분자를 포함한 어떠한 수의 표적 물질(즉, 세포와 같은 생체분자)도 고형상 표면 또는 필름 상에 제공된다. 10⁸개 이하의 생물 분자 표적 물질을 포함한 조성물은 기재 상에 제공된다. 이러한 경우 기재의 크기는 바람직하게는 작은 것이다. 특히 표적 물질(즉, 세포와 같은) 조성물을 포함한 조성물의 스팟 크기는 단일 생물 분자의 크기만큼 작은 것이다(즉, 1∼2 nm 등급). 일부의 경우 기재의 최소 면적은 기재 상의 생물 분자의 수에 기반하여 결정된다.

생물 분자의 "스팟"은 어레이 상에 제공된다. 여기서 사용된 "스팟"이라는 용어는 표적 물질의 포함한 조성물의 특정 세트를 나타낸다. 여기서 사용된 "스팟팅"이라는 용어는 기재 또는 플레이트 상에 표적 물질을 포함한 조성물 스팟의 제조 실행을 나타낸다. 스팟팅은 예를 들어 피펫팅 또는 대안으로 자동장치를 이용한 어떠한 방법으로도 수행된다. 이들 방법은 당분야에 잘 알려져 있다.

여기서 사용된 "어드레스"라는 용어는 다른 특정 위치와 구분되는 기재 상의 특정 위치를 나타낸다. 어드레스는 스팟과 적당히 결합된다. 어드레스는 각각의 어드레스의 물질이 다른 어드레스의 물질과 구분되는 어떠한 구분 가능한 형태도 지닐 수 있다(즉, 광학적). 어드레스를 한정하는 형태는 제한 없이 예를 들어 환형, 타원형, 정사각형, 직사각형 또는 불규칙한 형태이다. 따라서 "어드레스"라는 용어는 추상적 개념을 나타내는데 사용되는 반면 "스팟"이라는 용어는 구체적 개념을 나타내는데 사용된다. 서로 구분할 필요가 없는 한 "어드레스" 및 "스팟"이라는 용어는 여기서 상호 교환 가능하게 사용된다.

특히 각각의 어드레스의 크기는 기재의 크기, 기재 상의 어드레스 수, 표적 물질 및/또는 이용 가능한 반응제를 포함한 조성물의 양, 미량 역가판의 크기 및 어레이에 사용되는 어떠한 방법에 요구되는 분석 수준에 따라 달라진다. 각각의 어드레스의 크기는 예를 들어 어드레스가 어레이에 적합한 어떠한 크기도 가능하나 1∼2 nm부터 수 센티미터의 범위가 된다.

어드레스를 한정하는 공간 배열 및 형태는 마이크로어레이가 특정 적용에 적합하도록 고안된다. 어드레스는 조밀하게 배열되거나 희박하게 분포되거나 분석되는 물질의 특정 형태에 적당한 원하는 패턴으로 하위 분류된다.

여기서 사용된 "지지체"라는 용어는 세포, 박테리아, 바이러스, 폴리뉴클레오타이드 또는 폴리펩타이드를 전달할 수 있는 물질을 나타낸다. 이러한 지지체는 공유결합 또는 비공유결합을 통해 여기서 사용된 생물 분자에 결합하는 것이 가능하거나 이러한 능력을 지니도록 유도된 고형 물질로 이루어진다.

지지체에 사용되는 물질의 예는 제한 없이 유리, 규산염, 실리콘, 세라믹, 이산화규소, 플라스틱, 금속(합금 포함), 자연 발생적 및 합성 폴리머(즉, 폴리스티렌, 셀룰로스, 키토산, 덱스트란 및 나일론) 등과 같은 고형 표면을 형성하는 것이 가능한 어떠한 물질도 포함한다. 바람직하게는 지지체는 소수성 결합을 생성하는 부분을 포함한다. 예를 들어 지지체는 유리, 석영 유리, 알루미나, 사파이너, 고토감람석, 탄화규소, 산화규소, 질화규소 등과 같은 무기 절연 물질로 제조된다. 지지체는 폴리에틸렌, 에틸렌, 폴리프로필렌, 폴리이소부틸렌, 폴리에틸렌 테르에프탈레이트, 불포화폴리에스테르, 불소-함유 수지, 염화폴리비닐, 염화폴리비닐리덴, 아세트산폴리비닐, 폴리비닐알코올, 폴리비닐아세탈 수지, 폴리아크릴로니트릴, 폴리스티렌, 아세탈 수지, 폴리카보네이트, 폴리아미드, 페놀 수지, 요소 수지, 에폭시 수지, 멜라민 수지, 스티렌-아크릴로니트릴 코폴리머, 아크릴로니트릴-부타디엔-스티렌 코폴리머, 실리콘 수지, 산화폴리페닐렌, 폴리술폰 등과 같은 유기 물질로 제조된다. 대안으로 블럿팅에 사용되는 니트로셀룰로스 필름, 나일론 필름, PVDF 필름 등이 지지체 재료로 사용된다.

본 발명의 수두대상포진 바이러스는 감염성 질환의 치료, 예방 및/또는 요법용 약제적 조성물의 성분으로 사용될 수 있다.

여기서 사용된 약제와 관련한 "유효량"이라는 용어는 약제가 의도된 유효성을 나타내게 하는 양을 나타낸다. 여기서 사용된 최소 농도에 상응하는 유효량은 최소 유효량을 나타낸다. 이러한 최소 유효량은 당분야에 잘 알려져 있다. 일반적으로 약제의 최소 유효량은 당업자에 의해 적당하게 측정되었거나 측정될 수 있다. 이러한 유효량의 측정은 실질적인 투여, 동물 모델의 이용 등에 의해 달성될 수 있다. 또한 본 발명은 이러한 유효량의 측정에 유용하다.

여기서 사용된 "약제적으로 수용가능한 캐리어(carrier)"라는 용어는 약학용 약제 또는 농업용 화학제(즉, 동물 약제)의 제조에 사용되고, 유효 성분 상에 역효과를 지니지 않는 물질을 나타낸다. 이러한 약제적으로 수용가능한 캐리어의 예는 항산화제, 보존제, 착색제, 향미제, 희석제, 유화제, 현탁제, 용매, 필러(filler), 충전제, 완충액, 전달 매개체, 부형제 및 농업용 또는 약학용 애주번트(adjuvant)를 포함하나 이에 한정적인 것은 아니다.

본 발명의 치료방법에 사용되는 약학용 약제의 형태 및 양은 사용 목적, 표적 질환(형태, 경중도 등), 피험자의 연령, 크기, 성별 및 병력, 피험자의 투여 사이트의 형태 등의 견지에서 본 발명의 방법에 의해 수득된 정보(즉, 질환 관련 정보)에 기반하여 당업자에 의해 용이하게 측정될 수 있다. 또한 피험자(환자)에게 본 발명의 모니터 방법을 수행하는 빈도는 사용 목적, 피험자의 연령, 크기, 성별 및 병력, 치료의 진전에 따라 당업자에 의해 용이하게 측정된다. 질환 상태 모니터의 빈도는 수개월 당 1회(즉, 주 당 1회 내지 월 당 1회)를 포함한다. 바람직하게는 모니터링은 진전을 참고로 주 당 1회 내지 월 당 1회로 수행된다.

여기서 사용된 "지시서"라는 용어는 의사, 환자와 같은 투여를 수행하는 사람에 대한 본 발명의 방법의 처방을 나타낸다. 지지서는 방사선 치료 직후 또는 직전(즉, 24시간 이내)과 같이 본 발명의 약물을 언제 투여하는지를 설명한다. 지지서는 본 발명이 실시되는 국가의 감독관청(즉, 일본의 후생노동성, 미국의 식품의약국 등)에 의해 정의된 포맷에 따라 준비되고 지지서가 감독관청에 의해 승인됨을 명백히 기술한다. 지지서는 소위 약제사용설명서(package insert)이며 일반적으로 종이 매체로 제공된다. 지시서는 제한적인 것은 아니고 전자 매체(즉, 인터넷 상에 제공되는 웹사이트, 전자우편 등)의 형태로 제공된다.

본 발명의 치료시 필요에 따라 2 이상의 약제가 사용된다. 2 이상의 약제가 사용되는 경우 이들 약제는 유사한 특성을 지니거나 유사한 기원으로부터 유래하고, 또는 대안으로 다른 특성을 지니거나 다른 기원으로부터 유래한다. 본 발명의 방법은 2 이상의 약제를 투여하는 방법의 약물 저항성 수준에 대한 정보를 수득하는데 사용될 수 있다.

본 발명에서 특정 당 사슬 구조의 분석 결과가 유사한 형태의 생물체, 배양 세포, 조직, 동물(즉, 인간용 마우스) 등에 대한 질환 수준과 상호 관련되면 상응하는 당 사슬 구조는 질환 수준과 상호 관련될 수 있음은 당업자에 의해 인식될 것이다. 이러한 문제는 예를 들어 참고문헌에 포함된 Doubutsu Baiyosaibo Manual (Animal Culture Cell Manual), Seno et al. eds., Kyoritsu shuppan, 1993에 기술되어 있다.

사용된 일반 기술

여기서 사용된 기술은 상술되지 않는 한 본 본 발명의 기술적 범위 내에 존재한다. 이들 기술은 당 사슬 과학, 유체공학, 미세기계가공, 유기화학, 생화학, 유전공학, 분자생물학, 미생물학, 유전학 분야 및 관련 분야에 일반적으로 사용된다. 기술은 하기 기술된 문헌 및 여기서 언급된 문헌 내에 상세히 기술되어 있다.

미세기계가공은 예를 들어 Campbell, S.A. (1996), The Science and Engineering of Microelectronic Fabrication, Oxford University Press; Zaut, P.V. (1996), Micromicroarray Fabrication: a Practical Guide to Semiconductor Processing, Semiconductor Services; Madou, M.J. (1997), Fundamentals of Microfabrication, CRC1 5 Press; Rai-Choudhury, P. (1997), Handbook of Microlithography, Micromachining & Microfabrication: Microlithography; 및 참곰누헌에 포함된 관련 부분에 기술되어 있다.

여기서 사용된 분자생물학 기술, 생화학 기술 및 미생물학 기술은 잘 알려져 있고 당분아에서 일반적으로 사용되며 예를 들어 Maniatis, T. et al. (1989), Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor and its 3rd Ed. (2001); Ausubel, F.M. et al. eds, Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons Inc., NY, 10158 (2000); Innis, M.A. (1990), PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications, Academic Press; Innis, M.A. et al. (1995), PCR Strategies, Academic Press; Sninsky, J.J. et al. (1999), PCR Applications: Protocols for Functional Genomics, Academic Press; Gait, M.J. (1985), Oligonucleotide Synthesis: A Practical Approach, IRL Press; Gait, M.J. (1990), Oligonucleotide Synthesis: A Practical Approach, IRL Press; Eckstein, F. (1991), Oligonucleotides and Analogues: A Practical Approach, IRL Press; Adams, R.L. et al. (1992), The Biochemistry of the Nucleic Acids, Chapman & Hall; Shabarova, Z. et al. (1994), Advanced Organic Chemistry of Nucleic Acids, Weinheim; Blackburn, G.M. et al. (1996), Nucleic Acids in Chemistry and Biology, Oxford University Press; Hermanson, G.T. (1996), Bioconjugate Techniques, Academic Press; Method in Enzymology 230, 242, 247, Academic Press, 1994; Special issue, Jikken Igaku (Experimental Medicine) "Idenshi Donyu & Hatsugenkaiseki Jikkenho (Experimental Method for Gene introduction & Expression Analysis"), Yodo-sha, 1997 등에 기술되어 있다.

(바람직한 실시태양의 설명)

이하 바람직한 실시태양의 설명을 기재한다. 이 실시태양은 본 발명을 예시하는 것이고 본 발명의 범위는 이와 같은 바람직한 실시태양의 한정되지 않는 것으로 이해할 수 있다. 당업자는 또한 다음과 같은 바람직한 실시예를 참고하여 본 발명의 범위 내에서 적당한 변화, 변경 등을 행하는 것도 가능하다.

첫째 측면에 있어서 본 발명은 재조합된 수두대상포진 바이러스를 제공한다. 바람직하게는 이 수두대상포진 바이러스는 그 게놈 서열 중에 BAC 벡터 서열을 포함한다. BAC 벡터 서열을 포함하는 수두대상포진 바이러스를 구축하는 것에 의해 BAC 분자로써 세균에 있어서 수두대상포진 바이러스를 취급하는 것이 가능하다. 사용된 BAC 벡터 서열은 바람직하게는 F 플라스미드 유래의 리플리케이션 개시점을 포함하고, F 플라스미드 유래의 리플리케이션 개시점 이외의 서열을 지녀도 좋고 300 kb 이상의 서열을 세균 인공 염색체로써 세균 세포 내에 있어서 포함하고 증식 가능한 것이면 특별히 한정하지 않는다. 임의의 리플리케이션 개시점을 이용하는 것도 가능하다. 본 발명의 BAC 벡터는 세균 숙주세포, 바람직하게는 대장균 세포에 함유되고 또한 증식하는 것이 가능하다. 바람직하게는 이 BAC 벡터의 일부는 수두대상포진 바이러스의 비 필수영역내의 삽입되어 수두대상포진 바이러스 게놈을 포함하는 BAC로써 조작하는 것이 가능하다. 이 수두대상포진 바이러스를 포함하는 BAC는 포유동물 세포에 도입하는 경우 재조합된 수두대상포진 바이러스를 생성 증식하는 것이 가능하다. 재조합된 수두대상포진 바이러스의 숙주세포로는 야생형 수두대상포진 바이러스주가 증식할 수 있는 임의의 포유동물 세포를 사용할 수 있다. 바람직하게는 이러한 숙주세포는 인간 유래의 것이고 예를 들면, 인간 MRC-5 세포, 인간 HEL 세포, 인간 WI-38 세포 등이나 이에 한정하는 것은 아니다.

(수두대상포진 바이러스 게놈을 포함하는 BAC 벡터의 제조방법)

수두대상포진 바이러스 게놈과 BAC 벡터를 사용하여 수두대상포진 바이러스 게놈을 포함하는 BAC 벡터를 제작하기 위해서는 상동적 재조합을 사용하는 방법 등 여러 종의 공지된 방법을 사용할 수 있다.

상동적 재조합을 이용한 방법으로서는 수두대상포진 바이러스 게놈과 동일한 서열을 연결시킨 환상 BAC 벡터 서열을 지니는 핵산을 사용하는 방법을 들 수 있다.

수두대상포진 바이러스 게놈과 동일한 서열을 연결시킨 환상 BAC 벡터 서열을 지니는 핵산을 사용하는 수두대상포진 바이러스 게놈을 포함하는 BAC 벡터의 대표적인 제조 방법은 다음과 같은 공정을 포함한다. (1) 이 핵산을 수두대상포진 바이러스 게놈과 함께 숙주 내(예를 들면, 인간 세포주 세포 내)에 도입시키는 공정. (2) 환상 BAC 벡터 서열에 연결된 상동적 서열과 수두대상포진 바이러스 게놈 서열과의 사이에서 재조합시켜 숙주 세포를 배양하는 공정. (3) 이 상동적 재조합에 의해 생성된 BAC 벡터 서열을 조립시킨 수두대상포진 바이러스 게놈 서열을 포함하는 숙주 세포를 선별하는 공정. (4) 이 숙주세포를 배양하고 환상 바이러스 DNA를 추출하는 공정 등을 포함한다.

한편 수두대상포진 바이러스 게놈과 BAC 서열을 사용하여 수두대상포진 바이러스 게놈을 포함하는 BAC를 제조하기 위해서는 상동적 재조합을 사용하지 않고 핵산의 제한효소 단편을 사용하는 등 각종의 공지된 방법을 사용하는 것이 가능하다.

수두대상포진 바이러스 게놈 내에 있어서 BAC 벡터 서열을 도입하기 위한 비 필수 영역은 다음의 영역으로 구성된 군에서 선택된다. 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역,유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역,유전자 64의 ORF 인접 영역,유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역,유전자 68의 ORF 인접 영역,유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역 등에서 선택된다.

바람직하게는 이 비 필수 영역은 유전자 11의 ORF 인접 영역 또는 유전자 12의 ORF 인접 영역이다. 그 이유는 유전자 11과 유전자 12는 수두대상포진 바이러스 게놈상의 연속하는 비 필수 유전자이기 때문에 상동적 재조합을 위한 핵산을 설계하는 것이 용이하기 때문이다. 선택적으로 BAC 벡터 서열의 일부는 수두대상포진 바이러스 게놈의 유전자 62의 ORF 내 영역에 삽입하는 것도 바람직하다.

본 발명에 있어서 사용되는 BAC 벡터 서열은 바람직하게는 재조합 단백질 의존성 재조합 서열 및/또는 선별 마커를 포함한다. 바람직하게는 선별 마커 서열은 약제 선별 마커 및/또는 녹색 형광 단백질을 코딩하는 유전자이다. 그 이유는 간편하게 목적 유전자의 존재를 확인할 수 있기 때문이다.

본 발명에 있어서 출발 물질로써 사용되는 수두대상포진 바이러스는 야생주 유래의 것, 변이주 유래의 것 모두 가능하다. 바람직하게는 출발 물질로써 수두대상포진 바이러스는 약독화된 바이러스, 예를 들면, Oka 백신 스트레인 또는 유전자 62에 변이된 수두대상포진 바이러스를 사용한다. 약독화된 수두대상포진 바이러스로써는 유전자 62가 다음의 군에서 선택된 하나 또는 둘 이상으로 변이된 변이 재조합된 바이러스를 사용할 수 있다.

(a) 2110번 염기가 G로 변이; (b) 3100번 염기가 G로 변이; (c) 3818번 염기가 C로 변이; (d) 4006번 염기가 G로 변이; (e) 1251번 염기가 G로 변이; (f) 2226번 염기가 G로 변이; (g) 3657번 염기가 G로 변이; (h) 162번 염기가 C로 변이; (i) 225번 염기가 C로 변이; (j) 523번 염기가 C로 변이; (k) 1565번 염기가 C로 변이; (l) 1763번 염기가 C로 변이; (m) 2652번 염기가 C로 변이; (n) 4052번 염기가 C로 변이; 및 (o) 4193번 염기가 C로 변이에서 선택된 변이이다.

본 발명의 또 다른 측면에 있어서, 상기 바이러스를 제조하기 위해 사용되는 벡터 및 상기 바이러스의 제조 방법을 제공한다. 본 발명의 또 다른 측면에 있어서, 상기 바이러스를 포함하는 약학적 조성물 및 바이러스 형태를 지닌 약학적 조성물을 제공한다.

본 명세서의 재조합 수두대상포진 바이러스는 백신으로 사용할 수 있다. 그 이유는 야생형 바이러스와 동일한 구조를 지닌 단백질을 다수 포함하기 때문이다.

본 발명의 또 다른 측면에 있어서 본 발명의 백신을 생산하기 위해 벡터에 변이를 도입하는 방법을 제공한다. 이 방법은 상기 단백질을 세균 숙주세포에 도입하는 공정; 수두대상포진 바이러스 게놈 일부인 단편(상기 단편은 적어도 하나의 변이를 포함)를 포함하는 플라스미드를 세균 숙주세포에 도입하는 공정; 상기 세균 숙주세포를 배양하는 공정; 상기 배양된 세균 숙주세포로부터 BAC 벡터 서열을 지닌 벡터를 분리하는 공정을 포함하는 것이다. 상기 방법은 세균 숙주세포 내에서 본 발명의 백신을 생산하기 위해 벡터와 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부인 단편을 포함하는 플라스미드 벡터간에 상동적 재조합이 발생한다. 그 결과, 본 발명의 백신을 생산하기 위한 벡터는 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부인 단편의 변이를 포함하는 것이다.

상기한 방법에 있어서 벡터를 세균 숙주세포에 도입하는 공정으로는 일렉트로포레이션 방법 등의 각종의 공지된 방법을 사용하는 것이 가능하다. 이와 동일한 방법으로 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부인 단편을 포함하는 플라스미드 벡터를 세균 숙주세포에 도입할 수 있다. 또한 이 단편에 변이를 도입하는 방법으로써는 PCR을 이용한 변이 도입 방법이 알려져 있고, 예를 들면 프루프리딩(proofreading) 기능을 지니지 않은 내열성 중합효소를 사용하여 4개의 뉴클레오타이드 중 1개가 낮은 용량에서 무작위로 변이를 도입하는 것이 가능하다. 또한 변이 염기 서열을 지닌 프라이머를 사용하여 PCR을 수행하는 것에 의해 목적위치에 목적 변이를 도입하는 것도 가능하다. 이 세균 세포를 배양할 때, 본 발명의 백신을 생산하기 위한 벡터와 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부인 단편을 포함하는 플라스미드 벡터간에 상동적 재조합이 발생한다. 그 결과 본 발명의 백신을 생산하기 위한 벡터는 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부인 단편상의 변이를 지니게 된다. 세균 숙주세포로부터 BAC 벡터 서열을 제조하기 위해서 알칼라인법과 같은 각종의 공지된 방법 및 시판되고 있는 키트를 사용하는 것도 가능하다.

본 발명의 또 다른 측면에 있어서 본 발명의 백신을 생산하기 위해 벡터에 변이를 도입하는 또 다른 방법이 제공된다. 이 방법은 상기 벡터를 세균 숙주세포에 도입하는 공정; 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부인 첫 번째 단편을 포함하는 첫 번째 플라스미드 벡터(이 때 첫 번째 플라스미드 벡터는 적어도 하나의 변이를 포함한다)를 상기 세균 숙주세포에 도입하는 공정; 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부인 두 번째 단편을 포함하는 두 번째 플라스미드 벡터(이 때 두 번째 플라스미드 벡터는 적어도 하나의 변이를 포함한다)를 상기 세균 숙주세포에 도입하는 공정, 물론 상기 두 번째 단편은 상기 첫 번째 단편와는 상이한 것이다.; 상기 세균 숙주세포를 배양하는 공정; 상기 배양된 세균 숙주세포로부터 BAC 벡터 서열을 지닌 벡터를 분리하는 공정을 포함하는 것이다.

본 발명의 하나의 측면에 있어서 본 발명의 백신을 제조하기 위해 사용되는 핵산카세트를 제공하는 것이다. 이 핵산카세트는 바람직하게는 세균 숙주세포 내에 있어서 수두대상포진 바이러스 게놈과 상동적 재조합을 통해 얻어진 첫 번째 단편, BAC 벡터 서열, 및 세균 숙주세포 내에 있어서 수두대상포진 바이러스 게놈과 상동적 재조합을 통해 얻어진 두 번째 단편을 포함하는 것이다. 이 때, 상기 BAC 벡터 서열의 양쪽 말단은 첫 번째 단편과 두 번째 단편로 각각 연결되어 있다. 이 경우 첫 번째 단편과 두 번째 단편은 바람직하게는 적어도 1 kb 이상, 더욱 바람직하게는 적어도 1.5 kb 이상, 가장 바람직하게는 적어도 2 kb 이상의 염기 길이를 지닌다. 이 첫 번째 단편과 두 번째 단편은 바람직하게는 수두대상포진 바이러스 게놈 서열과 비교하여 적어도 80% 이상의 상동성을 지니고 바람직하게는 적어도 85% 이상의 상동성, 더욱 바람직하게는 적어도 90% 이상의 상동성, 가장 바람직하게는 적어도 95% 이상의 상동성을 지닌다.

바람직하게는 첫 번째와 두 번째 단편은 서로 독립적으로 수두대상포진 바이러스 게놈의 다음 영역으로부터 선택되어 유래된 것이며, 다음의 기재된 영역과 최소한 80%, 85%, 90%, 95% 이상의 상동성을 지닌다. 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역,유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 62의 ORF 내 영역유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 62의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역,유전자 64의 ORF 인접 영역,유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역,유전자 68의 ORF 인접 영역,유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역이다.

바람직하게는 이 첫 번째 및 두 번째 단편은 수두대상포진 바이러스 게놈과 상이한 영역으로부터 유래하는 것이다. 이 첫 번째 및 두 번째 단편은 서로 독립적으로 유전자 11의 ORF 인접 영역 또는 유전자 12의 ORF 인접 영역에서 유래되는 것이 바람직하다. 더욱 바람직하게는 상동적 재조합을 제어하여 목적 유전자를 간편하게 검출하기 위하여 BAC 벡터 서열은 재조합된 단백질 의존성을 지닌 재조합 서열 및/또는 선별 마커를 포함한다. 이 선별 마커는 약제 선별 마커, 녹색 형광 단백질과 같은 형광 단백질을 코딩하는 유전자 선별 마커 일 수 있다. 대표적인 예로는 이 BAC 벡터 서열은 서열번호 2의 핵산 서열을 지니고 핵산카세트는 서열번호 2에 기재된 핵산 서열을 지니는 경우이다.

(변이형 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조)

본 발명의 방법을 이용하여 변이를 도입한 수두대상포진 바이러스 게놈을 함유하는 변이형 수두대상포진 바이러스를 간편하게 제조하는 것이 가능하다.

이러한 변이 도입은 예를 들면 하기의 방법을 이용하여 행해질 수 있다:

E. coli 내로 (a) VZV-BAC-DBA 플라스미드 및 (b) 변이 핵산으로써 임의의 변이를 함유하는 수두대상포진 바이러스 게놈의 부분서열을 갖는 셔틀 벡터 또는 PCR 산물을 도입한다. VZV-BAC-DNA 플라스미드와 그 변이핵산 사이에서 재조합을 일으키는 것에 의해 VZV-BAC-DNA 플라스미드에 변이를 도입하는 것이 가능하다. 또한 트랜스포손을 이용하는 것에 의해서도 임의로 변이를 도입하는 것이 가능하다. 따라서 변이가 도입된 VZV-BAC-DNA 플라스미드는 E. coli에서 용이하게 선택 및 증폭시키는 것이 가능하다. 따라서 변이를 갖는 VZV-BAC-DNA에서 바이러스를 생산시키는 것에 의해 재조합 수두대상포진 바이러스를 얻는 것이 가능하다(Markus Wagner, TRENDS in Microbilogy, Vol. 10, No. 7, July 2002). 그 구체적인 예는 다음과 같다:

(1) 변이 핵산으로써 변이 수두대상포진 바이러스 유전자를 포함하는 온도 민감성 셔틀 벡터를 이용하는 경우;

첫 번째로 셔틀 벡터와 VZV-BAC-DNA 플라스미드를 첫 번째 상동 영역을 통해 재조합시키고 셔틀 벡터와 VZV-BAC-DNA 플라스미드가 결합하여 코인테그레이션(cointegration)을 생성한다. 다음으로 셔틀 벡터의 복제 원인이 온도 민감성이기 때문에 셔틀 플라스미드가 제거된다. 두 번째 재조합에 있어서 코인테그레이션된 부분이 제거되었다. 두 번째 재조합이 첫 번째 상동 영역을 통해 생성된 경우 재조합에 사용한 VZV-BAC-DNA와 동일한 서열을 갖는 플라스미드가 생성된다. 이에 반해 두 번째 재조합이 첫 번째 상동 영역과는 상이한 두 번째 상동 영역을 통해 생성된 경우 셔틀 벡터 상의 변이를 갖는 변이형 VZV-BAC-DNA 플라스미드가 얻어진다. 첫 번째 상동 영역과 두 번째 상동 영역이 거의 동일한 길이인 경우 두 번째 재조합이 두 번째 상동 영역에서 일어나는 확륙은 두 번째 재조합이 첫 번째 상동 영역에서 일어날 확률과 거의 같다. 이 때문에 얻어진 VZV-BAC-DNA 플라스미드의 약 1/2이 재조합에 이용된 서열과 동일한 서열을 갖는 플라스미드이고 약 1/2이 셔틀 벡터에 도입된 변이를 갖는 플라스미드이다.

(2) 선형 DNA 단편을 이용하는 경우;

이 방법에서는 예를 들면 프로파지 Rac 유래의 rec ET 재조합 기능을 이용하던지 또는 박테리아파지 λ유래의 red αβ의 재조합 기능을 이용하여 선형 DNA 단편을 이용해 환형 VZV-BAC-DNA 분자에 변이를 도입한다. 구체적으로는 목적서열에 인접하는 선택 마커 및 상동 서열을 포함하는 선형 DNA 단편을 VZV-BAC-DNA와 함께 상동 재조합을 일으킬 수 있는 E. coli에 도입한다. E. coli 내의 선형 DNA의 분해를 피하기 위해 엑손 뉴클레아제가 없는 E. coli을 사용하던지 또는 박테리아파지 유래의 엑손 뉴클레아제 저해제인 redγ(gam)을 발현시키는 것이 바람직하다. 선형 DNA는 그 양 끝에 VZV-BAC-DNA 플라스미드와 상동인 영역을 지닌다. 그 상동인 영역을 통해 상동 재조합을 일으키는 것에 의해 선형 DNA 단편 내의 원하는 서열을 VZV-BAC-DNA 내에 도입하는 것이 가능하다. recET 또는 redαβ 재조합 기능을 사용하는 경우 이들의 재조합 기능은 25∼50 뉴클레오타이드 정도의 길이의 상동 서열에 의해 상동 재조합을 일으키기 때문에 recA 매개 상동 재조합에 의해서도 간편하게 사용하는 것이 가능하다.

(3) 트랜스포손을 이용하는 경우;

트랜스포손 성분이 E. coli 내의 핵산에 임의로 삽입하는 기능을 이용한다. 예를 들면 트랜스포손 성분과 VZV-BAC-DNA를 E. coli 내로 도입하고 VZV-BAC-DNA내에 임의로 트랜스포손 성분을 삽입하는 것에 의해 삽입 변이를 일으킨다.

또한 예를 들면 VZV-BAC-DNA와 같은 재조합 수두대상포진 바이러스를 갖는 숙주세포 자체를 변이제(예를 들면 나이트로소구아니딘(nitrosoguanidine))에 의해 처리를 하는 것으로 재조합 수두대상포진 바이러스 게놈 내에 임의의 변이를 도입하는 것도 가능하다.

(처방)

본 발명은 또한 유효량의 치료제·예방제의 피험체에의 투여·접종에 의해 질환 또는 장애(예를 들면 감염증)의 치료 및/또는 예방법을 제공한다. 치료제·예방제는 약학적으로 수용 가능한 캐리어형(예를 들면 멸균 캐리어)과 조합한 본 발명의 조성물을 의미한다.

치료제·예방제를 각각의 환자의 임상상태(특히 치료제·예방제 단독 치료시의 부작용), 송달부위, 투여방법, 투여계획 및 당업자에게 공지의 다른 인자를 고려하고 의료실시기준(GMP = good medical practice)을 준수하는 방식으로 처방 및 투약한다. 따라서 본 명세서에서 목적하는 "유효량"은 이와 같은 고려를 행하여 결정된다.

일반적인 제안으로써 용량 당, 비경구적으로 투여된 치료제·예방제의 합계 약학적 유효량은 환자체중의 약 1 ㎍/㎏/일∼10 ㎎/㎏/일의 범위이지만 상기와 같이 이들의 치료적 재량에 맡길 수 있다. 더욱 바람직하게는 본 발명의 세포생리활성물질에 대해 이 용량은 적어도 0.0 1㎎/㎏/일, 가장 바람직하게는 인간에 대해서 약 0.01 ㎎/㎏/일과 약 1㎎/㎏/일의 사이이다. 연속투여의 경우 대표적으로는 치료제·예방제를 약 1 ㎍/㎏/시간∼약 50 ㎍/㎏/시간의 투약속도로 하루에 1∼4회의 주사 또는 연속피하주입(예를 들면 미니펌프를 이용하여)의 어느 것에 의해 투여한다. 정맥 내에 사용하는 백(bag) 용액도 또한 사용할 수 있다. 변화를 관찰하기 위해 필요한 처리기간 및 응답이 일어나는 처리 후의 간격은 원하는 효과에 응답하여 변화하는 것 같다.

치료제·예방제를 경구적, 직장내, 비경구적, 수조내, 질내, 복강내, 국소적(가루, 연고, 겔, 점적(drops) 또는 경피 패치 등에 의해) 구강내 또는 경구 또는 비강 스프레이로써 투여될 수 있다. "약제적으로 수용 가능한 캐리어"라 함은 비독성 고체, 반고체 또는 액체의 충진제, 희석제, 캡슐제 또는 임의의 형태의 처방 보조제를 말한다. 본 명세서에서 사용하는 용어 "비경구적"이라 함은 정맥내, 근육내, 복강내, 흉골내, 피하 및 관절내의 주사 및 주입을 포함하는 투여 형식을 말한다.

비경구 투여를 위한 하나의 실시태양에 있어서 일반적으로 치료제·예방제는 이를 원하는 정도의 순도로 약학적으로 수용 가능한 캐리어 즉 사용하는 투약량 및 농도로 레시피언트(recipient)에 대해서 독성이 없고 또한 처방물질의 외의 성분과 적합한 것과 단위 투약량의 주사 가능한 형태(용액, 현탁액 또는 부유액)로 혼합하는 것으로 처방된다. 예를 들면 이 처방물질은 바람직하게는 산화 및 치료제·예방제에 대해서 유해한 것이 알려지지 않은 다른 화합물을 포함하지 않는다.

일반적으로 치료제·예방제를 액체 캐리어 또는 미세분해고체 캐리어 또는 이 모두와 균일하게 및 긴밀하게 접촉시켜 처방물질을 조제한다. 다음으로 필요하다면 성분물질을 원하는 처방물질로 성형한다. 바람직하게는 캐리어는 비경구적 캐리어, 보다 바람직하게는 레시피언트 혈액과 등장인 용액이다. 이와 같은 캐리어 운반기구의 예로서는 물, 생리식염수, 링거 용액 및 덱스트로스 용액을 들 수 있다. 불휘발성유 및 올레인산에틸과 같은 비수성 운반기구도 또한 리포솜과 같은 형태로 본 명세서에 있어서 유용하다.

캐리어는 등장성 및 화학안정성을 높이는 물질과 같은 미량의 첨가제를 적절하게 함유한다. 이와 같은 물질은 사용하는 투약량 및 농도에서 레시피언트에 대해 독성이 없고 이와 같은 물질로써는 인산, 구연산, 숙신산, 아세트산 및 다른 유기산 또는 그의 염과 같은 완충제; 아스코르빈산과 같은 항산화제; 저분자량(약 10 잔기 보다 적은) 폴리펩타이드(예를 들면 폴리아르기닌 또는 트리펩타이드); 혈장알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린과 같은 단백질; 폴리비닐피롤리돈과 같은 친수성 폴리머; 글리신, 글루타민산, 아스파라긴산 또는 아르기닌과 같은 아미노산; 셀롤로오스 또는 그 유도체, 글루코스, 만노스 또는 덱스트린을 함유한 단량류, 이당류 및 다른 탄수화물; EDTA와 같은 킬레이트제; 만니톨 또는 솔비톨과 같은 당알코올; 나트륨과 같은 카운터이온; 및/또는 폴리솔베이트(polysorbates), 폴록산머(poloxamer) 또는 PEG와 같은 비이온성 계면활성체를 들 수 있다.

치료적 투여에 사용되어야만 하는 임의의 약제는 유효성분으로써 바이러스 이외의 생물·바이러스를 함유하지 않은 상태, 즉 무균상태에서 얻을 수 있다. 멸균 여과막(예를 들면 0.2 마이크론 멤브레인)에서 여과하는 것에 의해 무균상태는 용이하게 달성된다. 일반적으로 치료제·예방제는 무균 억세스 포트(access port)를 지닌 용기, 예를 들면 피하용 주사침으로 뚫을 수 있는 스토퍼(stopper)를 갖는 정맥 내에 사용하는 용액 백 또는 바이알에 넣어진다.

치료제·예방제는 보통 단위 용량 또는 수회 용량 용기 예를 들면 밀봉 앰플 또는 바이알에 수용액 또는 재구성하기 위해 동결건조 처방물질로써 저장된다. 동결건조 처방물질의 예로써는 10 ml의 바이알 멸균 여과한 1%(w/v) 치료제·예방제 수용액 5 ml를 충진하고 얻어진 혼합물질을 동결건조한다. 동결건조한 치료제·예방제를 주사용 정균수를 사용하여 재구성하여 주입용액을 제조한다.

본 발명은 또한 본 발명의 치료제·예방제의 하나 이상의 성분을 만족하는 하나 이상의 용기를 준비하는 약학적 팩 또는 키트를 제공한다. 의약품 또는 생물학적 제품의 제조, 사용 또는 판매를 규제하는 정부기관이 정한 형식의 통지가 이와 같은 용기에 부속될 수 있고 이 통지는 인간에의 투여에 대해 제조, 사용 또는 판매에 관한 정부기관에 의한 승인을 나타낸다. 또한 치료제·예방제를 다른 치료용 화합물과 혼합하여 사용할 수 있다.

본 발명의 치료제·예방제는 단독 또는 다른 치료제·에방제와 조합하여 투여될 수 있다. 본 발명의 치료제·예방제와 조합하여 투여될 수 있는 치료제·예방제로써는 화학요법제, 항생물질, 스테로이드 및 비스테로이드의 항염증제, 종래의 면역 치료제·예방제, 다른 사이토카인 및/또는 증식인자를 들 수 있지만 이들로 한정되는 것은 아니다. 조합은 예를 들면 혼합물질로써 동시에; 동시에 또는 병행이지만 별도로; 또는 차례로 어느 쪽이든 투여될 수 있다. 이는 조합된 약제가 치료용 혼합물로써 동시에 투여되는 것을 제시하고 또한 조합된 약제가 따로따로 그러나 동시에 예를 들면 같은 개체로 별도의 정맥라인을 통해 투여되는 순서를 포함한다. "조합시킨" 투여는 첫 번째로 연속적이고 두 번째로 전해진 화합물 또는 약제의 하나 각각의 투여를 더욱 포함한다.

특정한 실시태양에 있어서 본 발명의 치료제·예방제는 항레트로바이러스 약제, 뉴클레오시드 역전사효소 저해제, 비뉴클레오시드 역전사효소 저해제 및/또는 프로테아제 저해제의 조합으로 투여된다.

또한 실시태양에 있어서 본 발명의 치료제·예방제는 항생물질과 조합하여 투여된다. 사용될 수 있는 항생물질로써는 아미노글리코시드계 항생물질, 폴리엔계 항생물질, 페니실린계 항생물질, 세펨(cephem)계 항생물질, 펩타이드계 항생물질, 마크로라이드계 항생물질, 테트라사이클린계 항생물질을 들 수 있지만 이들로 제한되는 것은 아니다.

또한 실시태양에 있어서 본 발명의 치료제·예방제는 단독 또는 항염증제와 조합하여 투여된다. 본 발명의 투여제·예방제와 동시에 투여될 수 있는 항염증제로써는 글루코코르티코이드 및 비스테로이드 항염증제, 아미노아릴카르본산 유도체, 아릴아세트산 유도체, 아릴부틸산 유도체, 아크릴카르복실산, 아릴프로피오닉산(arylpropionic acid) 유도체, 파이라졸(pyrazoles), 파이라졸론(pyrazolones), 살리실산 유도체, 티아진카르복스아미드(thiazinecarboxamides), e-아세타미도카프론산(e-acetamidocaproic acid), S-아데노실메티오닌(S-adenosylmethionine), 3-아미노-4-하이드록시부틸산, 아미스엑트린(amixetrine), 벤다작(bendazac), 벤지드아민(benzydamine), 부콜롬(bucolome), 디펜필아미드(difenpiramide), 디타졸(ditazol), 에몰파존(emorfazone), 구아이아줄렌(guaiazulene), 나부메톤(nabumetone), 니메설라이드(nimesulide), 오르고테인(orgotein), 옥사세프롤(oxaceprol), 파라닐린(paranyline), 페리속살(perisoxal), 피폭심(pifoxime), 프로쿠아존(proquazone), 프록사졸(proxazole) 및 테니댑(tenidap)을 들 수 있지만 이들로 제한되지는 않는다.

또한 실시태양에 있어서 본 발명의 치료제·예방제는 다른 치료법 또는 예방법(예를 들면 방사선 치료)과 조합하여 투여된다.

도 1은 수두대상포진 바이러스의 Oka주 게놈 및 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조를 나타내는 개략도이다.

도 2는 수두대상포진 바이러스(친주)의 Oka주 게놈과 재조합 수두대상포진 바이러스(rV02) 사이의 시험관 내 증식 비교를 나타낸 것이다.

이하 실시예 등에 의해 본 발명을 상세히 설명하지만 본 발명은 이들로만 한정되는 것은 아니다.

(실시예 1)

(재조합 수두대상포진 바이러스의 제조)

(1: BAC 플라스미드의 제조)

플라스미드 PHA-2는 Wagner 및 Ulrich H. Koszinowski(Adler et al., (2000), J. Virol. 74: 6964-74)에 의해 제공된 것을 사용하였다. 재조합 바이러스를 제조하기 위해 BAC 벡터의 삽입 위치로써 수두대상포진 바이러스 게놈의 유전자 11 ORF와 유전자 12 ORF의 사이의 영역을 선택하였다. 그 이유는 이와 같은 비필수 영역에의 외래 핵산의 삽입은 수두대상포진 바이러스의 증식에 악영향을 주지 않는다고 예상되었기 때문이다.

수두대상포진 바이러스 Oka주 유전자 11 ORF와 유전자 12 ORF의 단편을 수두대상포진 바이러스 Oka 유래주 게놈 DNA를 주형으로 각각 프라이머 VZ11F(서열번호: 1) 및 VZ11R(서열번호: 2)와 프라이머 VZ12F(서열번호: 3) 및 VZ12R(서열번호: 4)를 이용하여 증폭하였다.

(2: 재조합 플라스미드의 제조를 위해 사용된 플라이머의 제조)

상기 표에서 올리고뉴클레오타이드 서열 중의 제한효소부위에 밑줄로 표시해놓았고 한편 이탤릭채의 서열은 VZV 서열 내에 존재하지 않은 염기를 더욱 나타낸다.

PCR 산물인 유전자 11ORF와 유전자 12 ORF의 단편을 각각 SoeI/SexAI 및 NotI/SexAI를 이용하여 다이제스트하였다. 두 개의 PCR 단편을 SpeI 및 NotI에서 다이제스트되어 있는 pBluescript SK-(Stratagene)에 클로닝하였다. 얻어진 플라스미드를 SK/VZ11-12로 하였다.

플라스미드 pHA-2를 PacI에서 다이제스트하고 이 부위를 T4DNA 폴리머라제로 처리하는 것으로 블런트-엔드(blunt-end)되었다. 이 플라스미드를 SK/VZ11-12의 블런트-엔드된 SexAI 부위에 클로닝하고 얻어진 플라스미드를 pHA-2/VZ11-12로 하였다(도 1C).

도 1에 나타난 바와 같이 VZV 게놈(A)은 약 125 kbp 길이이고 말단반복(TR) DNA 도메인, 특히 긴(UR) DNA 도메인, 내부반복(IR) DNA 도메인 및 특히 짧은(US) DNA 도메인으로부터 된다. 재조합 플라스미드 PHA-2/VZV11-12(C)를 구성하기 위해 상기와 같이 VZV 게놈의 ORF 11 플라스미드 및 ORF 12 플라스미드를 적당한 프라이머를 이용하여 PCR 증폭에 의해 제조하였다. 이 재조합 플라스미드 pHA-2/VZ11-12는 loxP 부위(L)와 인접하고 약 2.0 kbp의 인접 상동서열 및 BAC 벡터를 포함한다.

(3: 상동 재조합에 의한 재조합 바이러스의 제조)

제조한 플라스미드 pHA-2/VZ11-12는 선택 마커로써 구아포스포리보실트랜스퍼라제(pgt) 유전자를 포함하고 있다. 또한 두 개의 loxP 서열 사이에 넣어진 BAC 벡터 서열을 포함하고 있어 Cre 재조합효소를 작용시키는 것에 의해 loxP 서열 사이에 넣어진 BAC 벡터 서열을 효율적으로 제거하는 것이 가능하다. 또한 녹색 형광 단백질(GFP)의 형광에 의해 BAC 벡터 서열을 포함하는 플라스미드가 도입된 세포를 용이하게 확인하는 것이 가능하다.

이 플리스미드를 NotI 다이제스트에 의해 선형화하였다. 0.2 ㎍의 선형화된 pHA-2/VZ11-12를 Nucleofection unit(Amaxa)를 이용하여 75 ㎠ 플라스틱 플라스크 내에서 융합될 때까지 배양된 HEL 세포 내에 전기영동에 의해 트랜스팩션하였다. 트랜스팩션 1일 후 트랜스팩션한 세포에 수두대상포진 바이러스 Oka주를 감염시켰다.

50μM의 마이코페놀산 및 200μM의 크산틴을 이용하여 pgt 유전자에 의한 재조합 바이러스 선택을 행하였다. HEL 세포에 수두대상포진 바이러스에 의한 전형적인 세포 변이효과(CPR)를 볼 수 있었고 그 상이 몇 개는 형광 현미경으로 GFP 발현을 확인할 수 있었다. 이 결과는 수두대상포진 바이러스 게놈에 BAC 벡터가 삽입되어 따라서 BAC 벡터에 포함된 GFP 유전자가 발현되어 있는 것을 나타낸다.

(4: 재조합 바이러스 대량화와 E. coli에의 도입)

재조합 바이러스를 gpt 유전자에 의해 마이코페놀산 및 크산틴에 의한 약제 선택과 96웰 플레이트에 의한 한계희석법을 이용하는 것에 의해 대량화하였다. 감염세포로부터 Hirt 법(Hirt, (1967)J. M. Biol 26:368-9)에 의해 환형 바이러스 DNA를 추출하였다. 추출한 DNA를 유전자 펄서(pulse)(Bio-Rad사)를 이용하여 전기영동법(0.2 ㎝ 큐베트, 2.5 kV)에 의해 E. coli DH10B에 도입하여 형질전환하였다. 이를 17 ㎍/㎖의 클로람페니콜(chloramphenicol)을 함유하는 한천 위에서 선택하여 VZV-BAC-DNA를 함유한 E. coli를 수득하였다.

(5: E. Coli 내 VZV-BAC-DNA 플라스미드의 안정성)

수두대상포진 바이러스 게놈을 함유한 BAC 벡터(VZV-BAC-DNA)를 함유한 E. coli를 LB 배지에서 22∼24시간 배양하고 이 배양방법으로 3회 계대배양한 후 마지막으로 클로람페니콜을 함유하는 아가 플레이트 위에서 선택하였다. 계대배양된 것에서 5 클론을 꺼내어 그 각각을 LB 배지에서 동일한 방법으로 대량으로 배양하여 DNA를 추출하였다. 키트 첨부 프로토콜에 따라 균체보다 NucleoBond PC 100 키트(Macherey-Nagel사)를 이용하여 VZV-BAC-DNA를 추출하였다. 수득된 5개의 클론과 원래의 VZV-BAC-DNA를 각각 제어효소 패턴을 확인하였다(결과는 나타내지 않음). 5개의 모든 클론을 원래의 VZV BAC 플라스미드와 비교하였다. 그 결과 아가로스겔 위에서 동일한 제어효소 패턴이 나타났다. 이는 E. coli 내의 VZV 플라스미드의 높은 안정성을 나타내었다.

이 도면에는 원래의 VZV-BAC-DNA와 3회 계대배양한 VZV-BAC-DNA는 동일한 영동 패턴을 나타내었다. 이것은 E. coli 내에서 VZV-BAC-DNA 플라스미드가 안정하다는 것을 나타낸다.

(6: VZV-BAC-DNA로부터 바이러스의 생산)

BAC 클론화 VZV rV01(도 1D)를 재조합 플라스미드 PHA-2/VZV11-12 및 VZV 바이러스의 상동 재조합에 의해 HEL 세포 내에서 제조하였다. 구체적으로는 75 ㎠ 플라스틱 플라스크 내에서 융합될 때까지 배양한 HEL 세포에 대해 1 ㎍의 VZV-BAC-DAN를 Nucleofection unit(Amaxa)를 이용하여 트랜스팩션하였다. 이로부터 2일 후 75 ㎠ 플라스틱 플라스크 내에서 융합될 때까지 배양한 HEL 세포를 패시지하였다. 2∼3일 후에 수두대상포진 바이러스에 의해 전형적인 CPE가 관찰되었다. 또한 CPD가 관찰된 세포에서는 형광현미경으로 GFP 유전자의 발견이 확인되었다. 이에 의해 VZV-BAC-DNA를 이용하여 재조합 수두대상포진 바이러스를 산출할 수 있다는 것이 확인되었다. 산출된 재조합 수두대상포진 바이러스를 rV01(도 1D)로 하였다. 환형 BAC 클론화 게놈을 E. coli에 도입하는 것으로 VZV BAC 플라스미드를 제조하였다.

(7: BAC 벡터 서열의 절단)

나고야대학의 카와구치 야스시에 의해 Cre 재조합 효소를 발현하는 재조합 아데노바이러스(AxCANCre)가 제공되었다(Kanegae et al., (1995) Nucleic Acids Res 23:3816-21). 이 재조합 아데노바이러스를 이용하여 BAC 클론화 VZV rV01 및 재조합 아데노바이러스(AxCANCre)의 중복 감염에 의해 VZV rV02(도 1E;(L))은 loxP 부위를 나타냄)를 제조하였다. 구체적으로는 재조합 아데노바이러스를 HEL 세포에 MOI(감염 다중도) 100에서 감염시켰다. 바이러스를 2시간 흡착시킨 후 PBS(-)에서 세포를 세척한 후 5% FCS를 함유하는 DME 배지에서 배양하였다. 재조합 수두바이러스 rV01를 재조합 아데노신바이러스 감염 24시간 후에 HEL 세포에 다시 감염시켰다. 대조군을 이용한 실험으로 재조합 아데노신 바이러스에 의해 Cre 재조합 효소가 발현되었고 rV01의 게놈 보다 BAC 벡터서열이 좋은 효율로 절단되는 것이 확인되었다. 수득된 수두 바이러스를 rV02(도1, E)로 하였다. DNA 시퀀스의 결과 rV02는 rV01에서 BAC 벡터서열이 절단된 것이 아니라는 것을 확인하였다.

수두대상포진 바이러스 Oka주의 감염세포로부터 추출한 DNA와 E. Coli 유래의 VZV-BAC-DNA를 제어효소 BamHI에서 분해하였다. 재조합 수두대상포진 바이러스 rV02 DNA에서 유래하는 단편은 남은 단편의 loxP 서열에 의해 수두대상포진 바이러스 Oka주 DNA와 비교하여 커져 있었다.

VZV-BAC-DNA의 영동 패턴은 BAC 벡터 서열의 삽입에 의한 유래주와 비교하여 약 8.1kbp의 BamHI 단편을 잃었고 약 7.8kbp와 8.2kbp BamHI 단편이 추가되어 있었다. 또한 재조합 수두 바이러스 rV02 감염세포로부터 추출한 DNA의 약 8.2kbp BamHI 단편은 BAC 벡터 서열이 절단된 때 남은 단편의 loxP 서열 때문에 수두 바이러스 유래주의 약 8.1kbp BamHI 단편과 비교하여 그 크기가 조금 커져 있었다.

(실시예 2)

(재조합 수두대상포진 바이러스의 특징)

(1: 재조합 바이러스 증식성의 비교)

수두대상포진 바이러스 OkA주와 얻어진 재조합 수두대상포진 바이러스 rV02의 HEL세포에서의 증식성의 비교를 infectious center assay method을 이용하여 행하였다(Gomi et al., (2002) J. Virol 76 :11447-59). 35 mm 디쉬의 HEL 세포를 0.01 PFU/세포 다중도에서 감염시켜 이어서 감염세포를 세정하였다. HEL 세포에 감염시킨 수두대상포진 바이러스 Oka주 rV02주를 감염 후 0일에서 5일까지 배양하고 트립신으로 채취한 후 새로운 HEL세포에 감염시켜 증식성에 대해서 비교하였다. 감염세포의 수는 초기 바이러스 타이터/디쉬로 규격화하고; 배수증가는 0일째에 1개의 감염세포로부터 전해져 온 감염세포의 수를 나타낸다. 그 결과는 표 2에 나타낸다. 도 2에 나타난 바와 같이 얻어진 재조합 수두 바이러스 rVO 2는 시험내에서 수두 바이러스 Oka주(유래주)와 동등한 증식능을 나타내었다.

(실시예 3)

(병원성이 약한 변이형 재조합 수두대상포진 바이러스주의 제조)

본 발명에 따라 아래의 방법을 이용하는 것으로 변이형 재조합 수두대상포진 바이러스를 제조하고 변이 바이러스 내에서 병원성이 약한 변이 수두대상포진 바이러스주를 얻는 것이 가능하다.

(1: 변이형 재조합 수두대상바이러스의 제조)

변이형 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조방법으로써는 예를 들면 변이 유전자를 포함하는 핵산과 VZV-BAC-DNA 플라스미드 사이에서 상동 재조합을 일으키는 것에 의해 변이형 재조합 수두대상포진 바이러스를 제조하는 방법을 들 수 있다. VZV-BAC-DNA 플라스미드와 상동 재조합을 일으키기 위해 이용되는 변이 유전자는 임의의 변이를 갖는 것도 좋고 배위 특이적인 변이를 갖는 것도 좋다. 이들 각각을 이용하는 것에 의해 임의의 변이를 갖는 변이형 재조합 수두대상포진 바이러스의 집단 및 배위 특이적인 변이를 갖는 변이형 재조합 수두대상포진 바이러스를 수득하는 것이 가능하다. 이하 그 각각에 대해 보다 상세히 설명한다.

(1.1: 임의의 변이를 갖는 변이형 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조)

수두대상포진 바이러스 게놈의 유전자 62에 변이를 갖는 바이러스 몇 개가 약한 독성을 지닌 바이러스라는 것은 공지되어 있다. 그 때문에 본 실시예에서는 PCR를 이용하여 임의로 변이를 도입한 유전자 62를 제조하였다. PCR를 이용하는 변이 도입방법은 주지되어 있고 예를 들면 교정 기능을 갖지 않은 내열성 폴리머라제를 4개의 뉴클레오티드의 1개가 작다는 조건하에 이용하는 것으로 임의로 변이를 도입하는 것이 가능하다. 필요에 따라 변이형 62 유전자에 약제내성 유전자와 같은 마커 유전자를 연결시켜도 좋다.

이와 같이 제조된 변이형 유전자 62를 실시예 1(4: 재조합 바이러스의 대량화 및 E. coil에의 도입)에 따라 VZV-BAC-DNA 플라스미드와 같이 E. coil에 도입하였다. 따라서 변이형 서열 62를 VZV-BAC-DNA에 대해 상동 재조합을 일으켰다. 그 후 실시예 1에 기재된 방법에 따라 상동 재조합을 일으키는 수두대상포진 바이러스의 DNA를 단리시키고 E. coil에 도입하여 상동 재조합을 일으킨 VZV-BAC-DNA를 포함하는 E. coil를 수득한다.

얻어진 여러 개의 E. coil는 각각 다른 변이를 갖는 유전자 62를 포함하는 VZV-BAC-DNA를 갖는다. 여기서 각 E. coil에 포함된 변이형 VZV-BAC-DNA에 의해 생성된 수두대상포진 바이러스의 병원성의 정도를 하기(2: 수두대상포진 바이러스의 병원성의 시험방법)를 이용하여 선별한다.

(1.2: 부위 특이적 변이를 갖는 변이형 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조)

원하는 부위 특이적 변이를 도입하는 방법도 해당 분야에 주지되어 있다. 예를 들면 원하는 변이를 갖는 프라이머를 이용하여 PCR를 행하고 그 원하는 변이를 갖는 유전자 단편을 제조하여 그 후 그 변이 유전자 단편을 이용하여 PCR를 행하는 것으로 또는 제한효소 등의 효소처리를 행하는 것에 의해 원하는 변이를 갖는 유전자 전체 길이를 제조한다.

이와 같이 하여 제조된 변이 유전자에 대해서 상기(1.1.)의 순서를 이용하여 부위 특이적 변이를 갖는 변이형 재조합 수두대상포진 바이러스를 제조한다.

(2: 수두대상포진 바이러스의 병원성의 시험방법)

수두대상포진 바이러스의 병원성을 시험하는 방법에 대해서 2개의 방법이 확립되어 있다.

동물 모델을 이용하는 방법으로써 인간의 피부를 이식한 중증복합면역부전(SCID) 마우스를 제조하였고 이에 수두대상포진 바이러스를 감염시키는 것에 의해 병원성에 대해서 평가를 하는 방법이 주지되어 있다(J. Viro 1. 1998 Feb; 72(2): 965-74,).

이에 반해 시험관내에 병원성의 평가를 행하는 방법으로써는 공동 크기가 3 μm의 트랜스웰에서 분리된 2개 층의 웰의 아래쪽에 단층 배양의 인간 흑색종 세포를 넣고 위쪽에는 수두대상포진 바이러스를 감염시킨 코드-혈액 단핵구(CBMC)을 각각 넣어 7∼8일 배양한 후 흑색종 세포의 CPE(세포변성효과) 정도를 관찰하는 방법도 또한 주지되어 있다(J. Virol. 2000 Feb; 74(4): 1864-70).

또한 변원성을 직접 확인하는 방법은 아니지만 본 발명자들의 지금까지의 결과(J. Virol. 2002 Nov; 76(22): 11447-59)로부터 바이러스 병원성과 증식성에는 밀접한 연관이 있다는 것이 이해되고 있기 때문에 감염성 중심 분석(infectious center assay)에 의해 세포-대-세포의 증식성을 조사하는 것에 의해서도 간접적으로 병원성에 대해서 평가를 행하는 것이 가능하다.

(실시예 4)

(백신의 제조)

배양면적 210 ㎠의 룩스 보틀(Roux bottle) 20개의 MRC-5 세포 배양에 실시예 1에서 얻은 재조합 수두대상포진 바이러스를 접종 후 배양한다. 배양 종료 후 배양액을 버리고 각 룩스 보틀 내의 감염세포를 200 ml의 PBS(-)에서 2회 제정한다. 이어서 20 ml의 0.03%(w/v) EDTA-3Na를 각 룩스 보틀 내의 감염세포에 덧바르고 세포를 룩스 보틀내 벽면에서 분리하여 부유시킨다. 각 룩스 보틀 내의 감염 세포 부유액을 고이게 하고 2,000 rpm에서 10분간 4℃에서 원심분리한 후 감염세포의 펠렛을 채취한다. 이를 100 ml의 PBS(-)에 재부유한 후 동결해동을 1회 행한다. 다음으로 얼음물에서 초음파처리(20 KHz, 150 mA, 0.3 ch/㎖) 후 3,000 rpm에서 20분간 4℃에서 원심분리하고 세포에서 나온 바이러스를 함유한 상청액을 채취하여 이를 가공되지 않은 백신 원액으로 한다. 이 원액으로부터 테스트용으로 30 ml를 샘플링하여 남은 원액 70 ml에 PBS(-)에 용해한 사카로스 및 젤라틴 가수분해물을 백신 안정화제로써 최종농도가 5%(w/v) 및 2.5%(w/v)가 되도록 첨가 혼합하고 140 ml의 가공되지 않은 백신 최종 벌크를 제조한다. 이 최종 벌크로부터 테스트용으로 30 ml 샘플링 후 남은 벌크를 3 ml 부피 바이알에 0.5 ml씩 투여하고 동결 건조 후 질산가스를 충진한 고무 캡으로 봉하고 바이알 내부를 밀봉 밀폐한다. 이 가공되지 않은 백신 알리퀀트는 4℃에서 보존하고 사용 직전에 주사용 증류수 0.5 ml를 첨가하여 전조내용물을 완전하게 용해하여 사용한다. 한편 샘플링한 상기 백신 원액과 최종 벌크 및 알리퀀트 20개로 에세이 테스트를 행하였다. 이 테스트는 안전성, 유효성 및 균질성을 확인하고 가공되지 않은 백신으로써 적합성을 확정하기 위해 후생성고시 제195호에 규정 생물학적 제제기준(1989년) "건조 약한 독성 수두 백신"에 준거하여 또한 동일하게 규정 기존"재조합 침전 B형 간염 백신(효모유래)"를 고려하여 실시한다. 이 실험의 결과 상기 알리퀀트는 그 바이러스 함량이 2 x 10⁴PFU(전염병 형성 단위)/0.5 ml이고 또한 상기 기준에 규정의 각종 시험에 합격한 경우 적합한 가공되지 않은 백신으로써 실질적으로 사용된다.

(실시예 5)

(재조합 수두대상포진 바이러스 백신의 면역원성의 판정)

실시예4에서 제조한 재조합 수두대상포진 바이러스 백신주의 면역원성을 기니아 피그를 이용하여 측정한다. 비교대조로써 Oka주 가공되지 않은 백신을 이용한다. 이들의 각 백신의 3주령의 평균체중 250 g의 기니아 피그 3마리에 각각 피하 접종한다. 백신 접종은 접종량이 재조합주 및 Oka주 가공되지 않은 백신에서는 3,000 PFU 또는 2,000 PFU/기니아 피그가 되도록 각 백신을 PBS(-)로 희석하였다. 백신 접종 후 4, 6 및 8주째에 각 피접종 기니아 피그의 대퇴부 정맥에서 부분 채열하여 그 혈중 항체가를 측정한다. 항체가의 측정에는 중화시험법(Journal of General Virology, 61, 255-269, 1982)을 이용한다. 재조합 수두대상포진 바이러스 백신이 Oka주와 같은 정도로 VZV 항체를 유도하는 것을 확인한다. 이 결과로부터 면역원성이 양호한 재조합 수두대상포진 바이러스 백신을 선택한다.

이상과 같이 본 발명의 바람직한 실시태양을 이용하여 본 발명을 나타냈지만 본 발명은 특허청구범위에 의해서만 그 범위가 해석되는 것으로 이해된다. 본 명세서에 인용된 특허, 특허출원 및 문헌은 그 내용 자체가 구체적으로 본 명세서에 기재되어 있는 것과 동일한 형식으로 그 내용이 본 명세서에 대해 참고로써 이용되어야 하는 것으로 이해된다.

본 발명에 의해 예를 들면 BAC(대장균 인공염색체)를 이용하여 단일 바이러스주로부터 재조합 수두대상포진 바이러스를 제조하는 방법 및 그 방법에 의해 제조된 재조합 수두대상포진 바이러스가 제공된다. 또한 본 발명에 의해 재조합 수두대상포진 바이러스를 포함한 약학적 조성물이 제공된다.

한편 본 발명에 의해 수두대상포진 바이러스 게놈 유전자와 BAC 벡터 서열을 포함하는 벡터 및 그와 같은 벡터를 포함한 세포와 수두대상포진 바이러스 게놈과 상동 재조합 가능한 단편 및 BAC 벡터 서열을 포함한 핵산 카세트가 제공된다.

(서열목록)

서열번호 1: VZ11F 프라이머

서열번호 2: VZ11R 프라이머

서열번호 3: VZ12F 프라이머

서열번호 4: VZ12R 프라이머

서열번호 5: 유전자 62의 서열

서열번호 6: 유전자 62의 서열

서열번호 7: 플라스미드 PHA-2의 서열

서열번호 8: 수두대상포진 바이러스 뒤마 주

서열번호 9: 서열 번호 8의 1134 위치~ 1850 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 2)

서열번호 10: 서열 번호 8의 8607 위치~ 9386 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 7)

서열번호 11: 서열 번호 8의 10642 위치~ 10902 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 9A)

서열번호 12: 서열 번호 8의 11009 위치~ 11917 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 9)

서열번호 13: 서열 번호 8의 12160위치~ 13392 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 10)

서열번호 14: 서열 번호 8의 13590 위치~ 16049 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 11)

서열번호 15: 서열 번호 8의 16214 위치~ 18199 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 12)

서열번호 16: 서열 번호 8의 18441 위치~ 19346 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 13)

서열번호 17: 서열 번호 8의 24149 위치~ 25516 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 17)

서열번호 18: 서열 번호 8의 30759 위치~ 33875 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 21)

서열번호 19: 서열 번호 8의 34083 위치~ 42374 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 22)

서열번호 20: 서열 번호 8의 44506 위치~ 46263 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 26)

서열번호 21: 서열 번호 8의 50857 위치~ 54471 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 29)

서열번호 22: 서열 번호 8의 54651 위치~ 56963 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 30)

서열번호 23: 서열 번호 8의 57008 위치~ 59614 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 31)

서열번호 24: 서열 번호 8의 59766 위치~ 60197 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 32)

서열번호 25: 서열 번호 8의 64807 위치~ 65832 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 36)

서열번호 26: 서열 번호 8의 66074 위치~ 68599 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 37)

서열번호 27: 서열 번호 8의 70633 위치~ 71355 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 39)

서열번호 28: 서열 번호 8의 71540 위치~ 75730 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 40)

서열번호 29: 서열 번호 8의 75847 위치~ 76797 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 41)

서열번호 30: 서열 번호 8의 78170 위치~ 80200 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 43)

서열번호 31: 서열 번호 8의 80360 위치~ 81451 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 44)

서열번호 32: 서열 번호 8의 82719 위치~ 83318 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 46)

서열번호 33: 서열 번호 8의 84667 위치~ 86322 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 48)

서열번호 34: 서열 번호 8의 87881 위치~ 90388 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 51)

서열번호 35: 서열 번호 8의 90493 위치~ 92808 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 52)

서열번호 36: 서열 번호 8의 95996 위치~ 98641 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 55)

서열번호 37: 서열 번호 8의 110581 위치~ 111417 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 63)

서열번호 38: 서열 번호 8의 111565 위치~ 112107 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 64)

서열번호 39: 서열 번호 8의 113037 위치~ 114218 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 66)

서열번호 40: 서열 번호 8의 114496 위치~ 115560 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 67)

서열번호 41: 서열 번호 8의 115808 위치~ 117679 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 68)

서열번호 42: 서열 번호 8의 120764 위치~ 124696 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 71)

서열번호 43: 서열 번호 8의 부분서열(유전자 27)

서열번호 44: 서열 번호 43의 1 위치~ 999 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 27)

서열번호 45: 서열 번호 8의 부분서열(유전자 47)

서열번호 46: 서열 번호 45의 1 위치~ 1530 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미 노산 서열(유전자 47)

서열번호 47: 서열 번호 8의 부분서열

서열번호 48: 서열 번호 47의 1 위치~ 243 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 49)

서열번호 49: 서열 번호 8의 부분서열

서열번호 50: 서열 번호 49의 1 위치~ 732 위치에 5'→3'으로 코딩된 아미노산 서열(유전자 56)

서열번호 51: 서열 번호 8의 부분서열

서열번호 52: 서열 번호 8의 118480 위치~ 119316 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 5569 위치~ 6405위치에 대응한다)(유전자 70)

서열번호 53: 서열 번호 8의 117790 위치~ 118332 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 6553 위치~ 7095 위치에 대응한다)(유전자 69)

서열번호 54: 서열 번호 8의 112332 위치~ 112640 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 12245 위치~ 12553위치에 대응한다)(유전자 65)

서열번호 55: 서열 번호 8의 105201 위치~ 109133 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 15752 위치~ 19684 위치에 대응한다)(유전자 62)

서열번호 56: 서열 번호 8의 103082 위치~ 104485 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 20400 위치~ 21803 위치에 대응한다)(유전자 61)

서열번호 57: 서열 번호 8의 100302 위치~ 101219 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 23666 위치~ 24583 위치에 대응한다)(유전자 59)

서열번호 58: 서열 번호 8의 99411 위치~ 99626 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 25259 위치~ 25474 위치에 대응한다)(유전자 57)

서열번호 59: 서열 번호 8의 92855 위치~ 93850 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 31035 위치~ 32030위치에 대응한다)(유전자 53)

서열번호 60: 서열 번호 8의 68668 위치~ 70293 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 54592 위치~ 56217 위치에 대응한다)(유전자 38)

서열번호 61: 서열 번호 8의 63977 위치~ 64753 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 60132 위치~ 60908 위치에 대응한다)(유전자 35)

서열번호 62: 서열 번호 8의 62171 위치~ 63910 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 60975 위치~ 62714 위치에 대응한다)(유전자 34)

서열번호 63: 서열 번호 8의 60321 위치~ 62138 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 62747 위치~ 64564위치에 대응한다)(유전자 33)

서열번호 64: 서열 번호 8의 47052 위치~ 50636 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 74249 위치~ 77833 위치에 대응한다)(유전자 28)

서열번호 65: 서열 번호 8의 44148 위치~ 44618 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 80267 위치~ 80737 위치에 대응한다)(유전자 25)

서열번호 66: 서열 번호 8의 43212 위치~ 44021 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 80864 위치~ 81673 위치에 대응한다)(유전자 24)

서열번호 67: 서열 번호 8의 42431 위치~ 43138 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 81747 위치~ 82454 위치에 대응한다)(유전자 23)

서열번호 68: 서열 번호 8의 29024 위치~ 30475 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 94410 위치~ 95861 위치에 대응한다)(유전자 20)

서열번호 69: 서열 번호 8의 26518 위치~ 28845 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 96040 위치~ 98367 위치에 대응한다)(유전자 19)

서열번호 70: 서열 번호 8의 25573 위치~ 26493 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 98392 위치~ 99312 위치에 대응한다)(유전자 18)

서열번호 71: 서열 번호 8의 22568 위치~ 23794 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 101091 위치~ 102317 위치에 대응한다)(유전자 16)

서열번호 72: 서열 번호 8의 21258 위치~ 22478 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 102407 위치~ 103627 위치에 대응한다)(유전자 15)

서열번호 73: 서열 번호 8의 19431 위치~ 21113 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 103772 위치~ 105454 위치에 대응한다)(유전자 14)

서열번호 74: 서열 번호 8의 9477 위치~ 10667 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 114218 위치~ 115408 위치에 대응한다)(유전자 8)

서열번호 75: 서열 번호 8의 5326 위치~ 8577 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 116308 위치~ 119559 위치에 대응한다)(유전자 6)

서열번호 76: 서열 번호 8의 4252 위치~ 5274 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 119611 위치~ 120633 위치에 대응한다)(유전자 5)

서열번호 77: 서열 번호 8의 2783 위치~ 4141 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 120744 위치~ 122102 위치에 대응한다)(유전자 4)

서열번호 78: 서열 번호 8의 1908 위치~ 2447 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 122438 위치~ 122977 위치에 대응한다)(유전자 3)

서열번호 79: 서열 번호 8의 589 위치~ 915 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 123970 위치~ 124296 위치에 대응한다)(유전자 1)

서열번호 80: 서열 번호 51의 부분서열

서열번호 81: 서열 번호 80의 1 위치~ 1056 위치 및 4556 위치~ 5740 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 46847 위치~ 48034 위치 및 42292위치~43347 위치에 대응한다)(유전자 42 및 유전자 45)

서열번호 82: 서열 번호51의 부분서열

서열번호 83: 서열 번호 82의 1 위치~ 1305 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 123580 위치~ 124884 위치에 대응한다)(유전자 50)

서열번호 84: 서열 번호 51의 부분서열

서열번호 85: 서열 번호 84의 1 위치~ 2307 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 122578 위치~ 124884 위치에 대응한다)(유전자 54)

서열번호 86: 서열 번호 51의 부분서열

서열번호 87: 서열 번호 86의 1 위치~ 663 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 124222 위치~ 124884 위치에 대응한다)(유전자 58)

서열번호 88: 서열 번호 51의 부분서열

서열번호 89: 서열 번호 88의 1 위치~ 427 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 124458 위치~ 124884 위치에 대응한다)(유전자 60)

서열번호 90: 서열 번호 51의 부분서열

서열번호 91: 서열 번호 90의 1 위치~ 903 위치에 3'→5'으로 코딩된 아미노산 서열(서열번호 51의 60321 위치~ 61229 위치에 대응한다)(유전자 33.5)

SEQUENCE LISTING <110> The Research Foundation for Microbial Diseases of Osaka University <120> Recombinant varicella-zoster virus <130> F5-05PCT032 OBK004PCT <140> PCT/JP2005/003652 <141> 2005-03-05 <150> JP 2004-063277 <151> 2004-03-05 <160> 91 <170> PatentIn version 3.2 <210> 1 <211> 35 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> primer <400> 1 tataactagt gcggccgctt acgaaaacgt gcatg 35 <210> 2 <211> 34 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> primer <400> 2 cgcgacctgg tttattttac aaactccttt gtgg 34 <210> 3 <211> 34 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> primer <400> 3 gcgcaccagg tctctgttta gaccttaaaa tttg 34 <210> 4 <211> 34 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> primer <400> 4 tatagcggcc gcttttaatc tggttgtgga aatg 34 <210> 5 <211> 4226 <212> DNA <213> Varicella zoster <220> <221> CDS <222> (229)..(4158) <400> 5 atactatggt ccatgaactt cccgcctcga gtctcgtcca atcactacat cgtcttatca 60 ttaagaatat ttacacggtg acgacacggg gaggaaatat gcggtcgagg ggggggcaca 120 acacgtttta agtactgttg gaactccctc accaaccgca aycgcaatcc tttgaaggct 180 gcgagagcgt ttggaaaact cgggtacgtc taaattcacc ccagygcg atg gat acg 237 Met Asp Thr 1 ccg ccg atg cag cgc tct aca ccc caa cgc gcg ggg tcg cct gat act 285 Pro Pro Met Gln Arg Ser Thr Pro Gln Arg Ala Gly Ser Pro Asp Thr 5 10 15 ttg gag tta atg gac ctg ttg gac gcg gcc gcc gcg gcc gcc gaa cac 333 Leu Glu Leu Met Asp Leu Leu Asp Ala Ala Ala Ala Ala Ala Glu His 20 25 30 35 agg gcc cgg gtg gtc acc tcg agt cag cct gac gat cta cta ttt gga 381 Arg Ala Arg Val Val Thr Ser Ser Gln Pro Asp Asp Leu Leu Phe Gly 40 45 50 gag aac ggg gtc atg gtg gga cgg gaa cat gag atc gtt tca att ccc 429 Glu Asn Gly Val Met Val Gly Arg Glu His Glu Ile Val Ser Ile Pro 55 60 65 tcc gta tcg gga ctt caa cca gaa ccc aga acg gaa gat gtt ggc gaa 477 Ser Val Ser Gly Leu Gln Pro Glu Pro Arg Thr Glu Asp Val Gly Glu 70 75 80 gag cta aca caa gac gac tac gta tgc gag gac ggt cag gat cta ayg 525 Glu Leu Thr Gln Asp Asp Tyr Val Cys Glu Asp Gly Gln Asp Leu Xaa 85 90 95 ggc tcg cct gta atc ccg ctg gcc gag gtc ttc cac acc cga ttc tcg 573 Gly Ser Pro Val Ile Pro Leu Ala Glu Val Phe His Thr Arg Phe Ser 100 105 110 115 gag gcc ggc gcg cga gaa cca aca gga gcc gat cgc tcc ctc gag aca 621 Glu Ala Gly Ala Arg Glu Pro Thr Gly Ala Asp Arg Ser Leu Glu Thr 120 125 130 gtc tct ctc gga acg aag ctt gct agg tct cca aaa cca ccg atg aac 669 Val Ser Leu Gly Thr Lys Leu Ala Arg Ser Pro Lys Pro Pro Met Asn 135 140 145 gat ggg gaa acg ggc aga ggt acg acc cct ccg ttc ccg cag gcc ttc 717 Asp Gly Glu Thr Gly Arg Gly Thr Thr Pro Pro Phe Pro Gln Ala Phe 150 155 160 tcc cct gta tcc ccc gcg tct cct gtt gga gac gcc gcc ggg aac gat 765 Ser Pro Val Ser Pro Ala Ser Pro Val Gly Asp Ala Ala Gly Asn Asp 165 170 175 caa cgg gaa gac cag cgg tct ata ccc cga caa acg acg aga gga aat 813 Gln Arg Glu Asp Gln Arg Ser Ile Pro Arg Gln Thr Thr Arg Gly Asn 180 185 190 195 tca cca ggt ttg ccg tcg gtg gtc cat cga gac aga caa act cag tcc 861 Ser Pro Gly Leu Pro Ser Val Val His Arg Asp Arg Gln Thr Gln Ser 200 205 210 atc tcg ggt aaa aag ccg ggc gat gag caa gcg ggt cat gcg cat gca 909 Ile Ser Gly Lys Lys Pro Gly Asp Glu Gln Ala Gly His Ala His Ala 215 220 225 tcg ggg gac gga gta gtt ctc cag aaa act caa cgg ccc gct cag gga 957 Ser Gly Asp Gly Val Val Leu Gln Lys Thr Gln Arg Pro Ala Gln Gly 230 235 240 aag agc ccg aag aaa aag act ttg aag gtt aag gtc cca ctc ccg gcg 1005 Lys Ser Pro Lys Lys Lys Thr Leu Lys Val Lys Val Pro Leu Pro Ala 245 250 255 cgg aaa ccc ggt gga cct gta ccc ggc ccg gtt gag caa ttg tac cac 1053 Arg Lys Pro Gly Gly Pro Val Pro Gly Pro Val Glu Gln Leu Tyr His 260 265 270 275 gtc ctt tcg gac agc gtt ccc gct aag ggg gca aag gcg gac ctg ccg 1101 Val Leu Ser Asp Ser Val Pro Ala Lys Gly Ala Lys Ala Asp Leu Pro 280 285 290 ttt gag acc gat gat acc cgc cca agg aaa cat gat gcc cgg ggt ata 1149 Phe Glu Thr Asp Asp Thr Arg Pro Arg Lys His Asp Ala Arg Gly Ile 295 300 305 aca cct cgc gtc cct gga cgt tcg tcg ggg ggc aaa cct aga gcg ttt 1197 Thr Pro Arg Val Pro Gly Arg Ser Ser Gly Gly Lys Pro Arg Ala Phe 310 315 320 ttg gcc ctg ccg gga aga tcc cac gca cca gac ccg att gag gat gac 1245 Leu Ala Leu Pro Gly Arg Ser His Ala Pro Asp Pro Ile Glu Asp Asp 325 330 335 agc ccg gtg gag aaa aag cca aag agt cgt gag ttt gtt tcg tct tca 1293 Ser Pro Val Glu Lys Lys Pro Lys Ser Arg Glu Phe Val Ser Ser Ser 340 345 350 355 tcc tct tcc tcg tcg tgg gga tcg tca tcg gag gat gaa gac gat gaa 1341 Ser Ser Ser Ser Ser Trp Gly Ser Ser Ser Glu Asp Glu Asp Asp Glu 360 365 370 ccc cgg cgc gtt tcg gtg gga agt gaa act aca ggc agc agg tcc gga 1389 Pro Arg Arg Val Ser Val Gly Ser Glu Thr Thr Gly Ser Arg Ser Gly 375 380 385 cgc gaa cac gcc cct tcc ccg tca aat tcg gat gat tcg gac tca aat 1437 Arg Glu His Ala Pro Ser Pro Ser Asn Ser Asp Asp Ser Asp Ser Asn 390 395 400 gat ggt ggg tcg acg aaa caa aat atc caa ccg gga tat cga tcc atc 1485 Asp Gly Gly Ser Thr Lys Gln Asn Ile Gln Pro Gly Tyr Arg Ser Ile 405 410 415 agc ggt ccc gat ccg agg att cgt aag acc aaa cgt ctt gcg ggg gaa 1533 Ser Gly Pro Asp Pro Arg Ile Arg Lys Thr Lys Arg Leu Ala Gly Glu 420 425 430 435 ccg ggg cgc cag aga cag aaa tca ttt tcc ctg ccg cga tcc aga acc 1581 Pro Gly Arg Gln Arg Gln Lys Ser Phe Ser Leu Pro Arg Ser Arg Thr 440 445 450 ccg ata att ccc ccg gtg tcg ggg ccg ctc atg atg ccc gac gga agc 1629 Pro Ile Ile Pro Pro Val Ser Gly Pro Leu Met Met Pro Asp Gly Ser 455 460 465 cct tgg ccc gga tcg gcg ccc ctc cca tcc aac agg gtg cgg ttt gga 1677 Pro Trp Pro Gly Ser Ala Pro Leu Pro Ser Asn Arg Val Arg Phe Gly 470 475 480 ccg tcc ggg gag acc aga gag ggt cac tgg gag gat gag gct gtg aga 1725 Pro Ser Gly Glu Thr Arg Glu Gly His Trp Glu Asp Glu Ala Val Arg 485 490 495 gcg gcg cgg gct cgt tac gag gcc tca act gaa ccc gyg ccg ctt tac 1773 Ala Ala Arg Ala Arg Tyr Glu Ala Ser Thr Glu Pro Xaa Pro Leu Tyr 500 505 510 515 gtg ccg gag ttg gga gat ccg gct aga cag tac cgc gcg ctg att aac 1821 Val Pro Glu Leu Gly Asp Pro Ala Arg Gln Tyr Arg Ala Leu Ile Asn 520 525 530 ctg atc tac tgt cca gac aga gac cct ata gca tgg ctc cag aac ccc 1869 Leu Ile Tyr Cys Pro Asp Arg Asp Pro Ile Ala Trp Leu Gln Asn Pro 535 540 545 aag ctg acc ggt gtc aac tcg gcc ctg aac cag ttc tac caa aag ctg 1917 Lys Leu Thr Gly Val Asn Ser Ala Leu Asn Gln Phe Tyr Gln Lys Leu 550 555 560 ttg cca ccg gga cgg gcg ggt acc gcc gtt acg ggg agc gta gcg tct 1965 Leu Pro Pro Gly Arg Ala Gly Thr Ala Val Thr Gly Ser Val Ala Ser 565 570 575 ccc gtt ccg cat gta ggc gaa gcc atg gcc acg ggg gag gcc ctc tgg 2013 Pro Val Pro His Val Gly Glu Ala Met Ala Thr Gly Glu Ala Leu Trp 580 585 590 595 gct ctc ccc cac gcg gcc gcg gcc gtg gct atg agc cgt cgg tac gac 2061 Ala Leu Pro His Ala Ala Ala Ala Val Ala Met Ser Arg Arg Tyr Asp 600 605 610 cgg gcc caa aaa cac ttt atc cta cag agt ctc cgc aga gcc ttt gcc 2109 Arg Ala Gln Lys His Phe Ile Leu Gln Ser Leu Arg Arg Ala Phe Ala 615 620 625 ggc atg gca tac ccc gag gca acg ggc tcc agt ccg gcg gcg cgg atc 2157 Gly Met Ala Tyr Pro Glu Ala Thr Gly Ser Ser Pro Ala Ala Arg Ile 630 635 640 tcc cgc ggt cac cct tct cca aca acc ccg gcc aca cag act ccc gac 2205 Ser Arg Gly His Pro Ser Pro Thr Thr Pro Ala Thr Gln Thr Pro Asp 645 650 655 cct cag ccg tcg gcc gcc gcg cgc tct ctt tct gtg tgt cca ccg gat 2253 Pro Gln Pro Ser Ala Ala Ala Arg Ser Leu Ser Val Cys Pro Pro Asp 660 665 670 675 gat cgt tta cga act ccg cgc aag cgc aag tcc cag cca gtc gag agc 2301 Asp Arg Leu Arg Thr Pro Arg Lys Arg Lys Ser Gln Pro Val Glu Ser 680 685 690 aga agc ctc ctc gac aag att agg gag aca ccc gtc gcg gac gcc cgg 2349 Arg Ser Leu Leu Asp Lys Ile Arg Glu Thr Pro Val Ala Asp Ala Arg 695 700 705 gtt gca gac gat cat gtg gtt tcc aag gcc aag agg cgg gta tcc gag 2397 Val Ala Asp Asp His Val Val Ser Lys Ala Lys Arg Arg Val Ser Glu 710 715 720 ccc gtg acc atc acc tcg ggc cct gtg gtg gat ccc ccc gcc gta ata 2445 Pro Val Thr Ile Thr Ser Gly Pro Val Val Asp Pro Pro Ala Val Ile 725 730 735 acg atg cca ctt gac gga ccg gcc cca aac ggg gga ttt cgg cgt att 2493 Thr Met Pro Leu Asp Gly Pro Ala Pro Asn Gly Gly Phe Arg Arg Ile 740 745 750 755 ccc cgg ggg gcc ctg cat acc ccg gtc ccg tcg gac cag gct cgc aag 2541 Pro Arg Gly Ala Leu His Thr Pro Val Pro Ser Asp Gln Ala Arg Lys 760 765 770 gcg tac tgt acc ccc gaa acc atc gcc cgt ctg gtc gac gac cca ttg 2589 Ala Tyr Cys Thr Pro Glu Thr Ile Ala Arg Leu Val Asp Asp Pro Leu 775 780 785 ttt ccc acg gcc tgg cgc cct gcg cta agc ttt gat ccc ggc gcc ttg 2637 Phe Pro Thr Ala Trp Arg Pro Ala Leu Ser Phe Asp Pro Gly Ala Leu 790 795 800 gcg gaa atc gcc gct cgg cgt ccg ggc gga gga gac cga cgg ttt ggt 2685 Ala Glu Ile Ala Ala Arg Arg Pro Gly Gly Gly Asp Arg Arg Phe Gly 805 810 815 cca ccc agc gga gtg gag gcg ctg cga cgg agg tgc gcc tgg atg cgg 2733 Pro Pro Ser Gly Val Glu Ala Leu Arg Arg Arg Cys Ala Trp Met Arg 820 825 830 835 cag atc cca gac ccg gag gat gtg agg ctt ctg atc atc tac gat ccg 2781 Gln Ile Pro Asp Pro Glu Asp Val Arg Leu Leu Ile Ile Tyr Asp Pro 840 845 850 ttg ccc gga gag gac atc aac ggc ccc ctc gag agc acc ctc gcg aca 2829 Leu Pro Gly Glu Asp Ile Asn Gly Pro Leu Glu Ser Thr Leu Ala Thr 855 860 865 gat ccg gga ccg tca tgg agt cca tcc cga ggg gga ctg tct gtg gtc 2877 Asp Pro Gly Pro Ser Trp Ser Pro Ser Arg Gly Gly Leu Ser Val Val 870 875 880 ctg gca gcc ctg agt aac cgg ttg tgc ctg ccg agc act cat gcc tgg 2925 Leu Ala Ala Leu Ser Asn Arg Leu Cys Leu Pro Ser Thr His Ala Trp 885 890 895 gcc ggg aac tgg acc ggc ccg ccg gac gtg tcc gct ttg aac gcc cgg 2973 Ala Gly Asn Trp Thr Gly Pro Pro Asp Val Ser Ala Leu Asn Ala Arg 900 905 910 915 ggc gtt tta tta ctg tcg acc cga gac ctg gcc ttt gcc ggg gcc gtc 3021 Gly Val Leu Leu Leu Ser Thr Arg Asp Leu Ala Phe Ala Gly Ala Val 920 925 930 gag tat cta ggc tcg cgg ttg gcc tct gcc cgg cgc cgg ttg ctg gtg 3069 Glu Tyr Leu Gly Ser Arg Leu Ala Ser Ala Arg Arg Arg Leu Leu Val 935 940 945 ttg gac gcg gtg gcc ctc gag agg tgg ccc ggg gat gga ccc gct ttg 3117 Leu Asp Ala Val Ala Leu Glu Arg Trp Pro Gly Asp Gly Pro Ala Leu 950 955 960 tct cag tat cac gtg tac gtc cgg gcc ccg gcg cga ccg gac gcc cag 3165 Ser Gln Tyr His Val Tyr Val Arg Ala Pro Ala Arg Pro Asp Ala Gln 965 970 975 gcc gtc gtc cga tgg cca gac tcg gcg gtc aca gaa gga ctc gcc cgg 3213 Ala Val Val Arg Trp Pro Asp Ser Ala Val Thr Glu Gly Leu Ala Arg 980 985 990 995 gcc gtg ttt gca tcg tcg cgc acc ttt ggg cca gcg agt ttt gct 3258 Ala Val Phe Ala Ser Ser Arg Thr Phe Gly Pro Ala Ser Phe Ala 1000 1005 1010 cgt atc gag act gcg ttt gcc aac ctg tac ccg ggc gaa caa ccc 3303 Arg Ile Glu Thr Ala Phe Ala Asn Leu Tyr Pro Gly Glu Gln Pro 1015 1020 1025 ctg tgt ttg tgc cgc ggt ggg aac gtc gca tac acc gtg tgt acc 3348 Leu Cys Leu Cys Arg Gly Gly Asn Val Ala Tyr Thr Val Cys Thr 1030 1035 1040 cgc gcg ggc ccc aag acc cgc gtc ccc ctg tcg ccc cgt gaa tac 3393 Arg Ala Gly Pro Lys Thr Arg Val Pro Leu Ser Pro Arg Glu Tyr 1045 1050 1055 cgg cag tac gtg ctg ccg ggt ttt gac ggt tgc aag gac ctc gcg 3438 Arg Gln Tyr Val Leu Pro Gly Phe Asp Gly Cys Lys Asp Leu Ala 1060 1065 1070 cga cag tct cgg ggt ctg ggg ctc ggg gca gcc gac ttt gtg gac 3483 Arg Gln Ser Arg Gly Leu Gly Leu Gly Ala Ala Asp Phe Val Asp 1075 1080 1085 gag gcg gca cat agc cac cgc gca gca aac cga tgg ggc ctg ggt 3528 Glu Ala Ala His Ser His Arg Ala Ala Asn Arg Trp Gly Leu Gly 1090 1095 1100 gcc gcg ctt cga ccc gtc ttc ctt ccc gag gga cgg aga ccg ggg 3573 Ala Ala Leu Arg Pro Val Phe Leu Pro Glu Gly Arg Arg Pro Gly 1105 1110 1115 gcc gcc ggg ccg gag gcc ggc gac gta ccc acc tgg gcg agg gtg 3618 Ala Ala Gly Pro Glu Ala Gly Asp Val Pro Thr Trp Ala Arg Val 1120 1125 1130 ttt tgc cgc cac gcc ctg ctg gaa ccc gac cct gcc gcg gaa cca 3663 Phe Cys Arg His Ala Leu Leu Glu Pro Asp Pro Ala Ala Glu Pro 1135 1140 1145 ctc gtg ctt cca ccc gtg gcc ggt cgg tcg gtg gcg ctg tat gcg 3708 Leu Val Leu Pro Pro Val Ala Gly Arg Ser Val Ala Leu Tyr Ala 1150 1155 1160 tcg gcg gac gag gct cgg aat gcc ctc ccc ccg att ccc aga gta 3753 Ser Ala Asp Glu Ala Arg Asn Ala Leu Pro Pro Ile Pro Arg Val 1165 1170 1175 atg tgg ccg ccc ggt ttt ggg gcc gcg gag acg gtg ttg gag ggg 3798 Met Trp Pro Pro Gly Phe Gly Ala Ala Glu Thr Val Leu Glu Gly 1180 1185 1190 agc gac gga aca cgg ttc gcg ttc gga cac cac ggg ggc tcg gaa 3843 Ser Asp Gly Thr Arg Phe Ala Phe Gly His His Gly Gly Ser Glu 1195 1200 1205 cgg ccg gca gaa acc cag gcg ggg cga cag cgg cgc acc gca gac 3888 Arg Pro Ala Glu Thr Gln Ala Gly Arg Gln Arg Arg Thr Ala Asp 1210 1215 1220 gac aga gaa cac gct ttg gag ccg gac gat tgg gag gtg ggg tgt 3933 Asp Arg Glu His Ala Leu Glu Pro Asp Asp Trp Glu Val Gly Cys 1225 1230 1235 gaa gac gcg tgg gac agc gag gag ggg ggc ggg gac gac ggg gac 3978 Glu Asp Ala Trp Asp Ser Glu Glu Gly Gly Gly Asp Asp Gly Asp 1240 1245 1250 gca ccg ggg tca tcc ttt ggg gtg agc gtc gtg tcg gtg gcc ccg 4023 Ala Pro Gly Ser Ser Phe Gly Val Ser Val Val Ser Val Ala Pro 1255 1260 1265 ggt gtg ctg cga gac cgc cgg gtg ggc tyg cgc ccg gcg gtc aag 4068 Gly Val Leu Arg Asp Arg Arg Val Gly Xaa Arg Pro Ala Val Lys 1270 1275 1280 gtg gag ctg ttg tcc tcg tcc tcg tcc tcc gag gac gag gac gat 4113 Val Glu Leu Leu Ser Ser Ser Ser Ser Ser Glu Asp Glu Asp Asp 1285 1290 1295 gtg tgg gga ggg cgc ggg ggg agg agc ccc ccg cag agt cgg ggg 4158 Val Trp Gly Gly Arg Gly Gly Arg Ser Pro Pro Gln Ser Arg Gly 1300 1305 1310 tgacggagtc ccctcctttt ctcgtgagcg ccacyggcgc gcggactgtt tgttgtttgt 4218 taataaaa 4226 <210> 6 <211> 1310 <212> PRT <213> Varicella zoster <220> <221> misc_feature <222> (99)..(99) <223> The 'Xaa' at location 99 stands for Thr, or Met. <220> <221> misc_feature <222> (512)..(512) <223> The 'Xaa' at location 512 stands for Ala, or Val. <220> <221> misc_feature <222> (1275)..(1275) <223> The 'Xaa' at location 1275 stands for Ser, Leu, or Xaa. <400> 6 Met Asp Thr Pro Pro Met Gln Arg Ser Thr Pro Gln Arg Ala Gly Ser 1 5 10 15 Pro Asp Thr Leu Glu Leu Met Asp Leu Leu Asp Ala Ala Ala Ala Ala 20 25 30 Ala Glu His Arg Ala Arg Val Val Thr Ser Ser Gln Pro Asp Asp Leu 35 40 45 Leu Phe Gly Glu Asn Gly Val Met Val Gly Arg Glu His Glu Ile Val 50 55 60 Ser Ile Pro Ser Val Ser Gly Leu Gln Pro Glu Pro Arg Thr Glu Asp 65 70 75 80 Val Gly Glu Glu Leu Thr Gln Asp Asp Tyr Val Cys Glu Asp Gly Gln 85 90 95 Asp Leu Xaa Gly Ser Pro Val Ile Pro Leu Ala Glu Val Phe His Thr 100 105 110 Arg Phe Ser Glu Ala Gly Ala Arg Glu Pro Thr Gly Ala Asp Arg Ser 115 120 125 Leu Glu Thr Val Ser Leu Gly Thr Lys Leu Ala Arg Ser Pro Lys Pro 130 135 140 Pro Met Asn Asp Gly Glu Thr Gly Arg Gly Thr Thr Pro Pro Phe Pro 145 150 155 160 Gln Ala Phe Ser Pro Val Ser Pro Ala Ser Pro Val Gly Asp Ala Ala 165 170 175 Gly Asn Asp Gln Arg Glu Asp Gln Arg Ser Ile Pro Arg Gln Thr Thr 180 185 190 Arg Gly Asn Ser Pro Gly Leu Pro Ser Val Val His Arg Asp Arg Gln 195 200 205 Thr Gln Ser Ile Ser Gly Lys Lys Pro Gly Asp Glu Gln Ala Gly His 210 215 220 Ala His Ala Ser Gly Asp Gly Val Val Leu Gln Lys Thr Gln Arg Pro 225 230 235 240 Ala Gln Gly Lys Ser Pro Lys Lys Lys Thr Leu Lys Val Lys Val Pro 245 250 255 Leu Pro Ala Arg Lys Pro Gly Gly Pro Val Pro Gly Pro Val Glu Gln 260 265 270 Leu Tyr His Val Leu Ser Asp Ser Val Pro Ala Lys Gly Ala Lys Ala 275 280 285 Asp Leu Pro Phe Glu Thr Asp Asp Thr Arg Pro Arg Lys His Asp Ala 290 295 300 Arg Gly Ile Thr Pro Arg Val Pro Gly Arg Ser Ser Gly Gly Lys Pro 305 310 315 320 Arg Ala Phe Leu Ala Leu Pro Gly Arg Ser His Ala Pro Asp Pro Ile 325 330 335 Glu Asp Asp Ser Pro Val Glu Lys Lys Pro Lys Ser Arg Glu Phe Val 340 345 350 Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Trp Gly Ser Ser Ser Glu Asp Glu 355 360 365 Asp Asp Glu Pro Arg Arg Val Ser Val Gly Ser Glu Thr Thr Gly Ser 370 375 380 Arg Ser Gly Arg Glu His Ala Pro Ser Pro Ser Asn Ser Asp Asp Ser 385 390 395 400 Asp Ser Asn Asp Gly Gly Ser Thr Lys Gln Asn Ile Gln Pro Gly Tyr 405 410 415 Arg Ser Ile Ser Gly Pro Asp Pro Arg Ile Arg Lys Thr Lys Arg Leu 420 425 430 Ala Gly Glu Pro Gly Arg Gln Arg Gln Lys Ser Phe Ser Leu Pro Arg 435 440 445 Ser Arg Thr Pro Ile Ile Pro Pro Val Ser Gly Pro Leu Met Met Pro 450 455 460 Asp Gly Ser Pro Trp Pro Gly Ser Ala Pro Leu Pro Ser Asn Arg Val 465 470 475 480 Arg Phe Gly Pro Ser Gly Glu Thr Arg Glu Gly His Trp Glu Asp Glu 485 490 495 Ala Val Arg Ala Ala Arg Ala Arg Tyr Glu Ala Ser Thr Glu Pro Xaa 500 505 510 Pro Leu Tyr Val Pro Glu Leu Gly Asp Pro Ala Arg Gln Tyr Arg Ala 515 520 525 Leu Ile Asn Leu Ile Tyr Cys Pro Asp Arg Asp Pro Ile Ala Trp Leu 530 535 540 Gln Asn Pro Lys Leu Thr Gly Val Asn Ser Ala Leu Asn Gln Phe Tyr 545 550 555 560 Gln Lys Leu Leu Pro Pro Gly Arg Ala Gly Thr Ala Val Thr Gly Ser 565 570 575 Val Ala Ser Pro Val Pro His Val Gly Glu Ala Met Ala Thr Gly Glu 580 585 590 Ala Leu Trp Ala Leu Pro His Ala Ala Ala Ala Val Ala Met Ser Arg 595 600 605 Arg Tyr Asp Arg Ala Gln Lys His Phe Ile Leu Gln Ser Leu Arg Arg 610 615 620 Ala Phe Ala Gly Met Ala Tyr Pro Glu Ala Thr Gly Ser Ser Pro Ala 625 630 635 640 Ala Arg Ile Ser Arg Gly His Pro Ser Pro Thr Thr Pro Ala Thr Gln 645 650 655 Thr Pro Asp Pro Gln Pro Ser Ala Ala Ala Arg Ser Leu Ser Val Cys 660 665 670 Pro Pro Asp Asp Arg Leu Arg Thr Pro Arg Lys Arg Lys Ser Gln Pro 675 680 685 Val Glu Ser Arg Ser Leu Leu Asp Lys Ile Arg Glu Thr Pro Val Ala 690 695 700 Asp Ala Arg Val Ala Asp Asp His Val Val Ser Lys Ala Lys Arg Arg 705 710 715 720 Val Ser Glu Pro Val Thr Ile Thr Ser Gly Pro Val Val Asp Pro Pro 725 730 735 Ala Val Ile Thr Met Pro Leu Asp Gly Pro Ala Pro Asn Gly Gly Phe 740 745 750 Arg Arg Ile Pro Arg Gly Ala Leu His Thr Pro Val Pro Ser Asp Gln 755 760 765 Ala Arg Lys Ala Tyr Cys Thr Pro Glu Thr Ile Ala Arg Leu Val Asp 770 775 780 Asp Pro Leu Phe Pro Thr Ala Trp Arg Pro Ala Leu Ser Phe Asp Pro 785 790 795 800 Gly Ala Leu Ala Glu Ile Ala Ala Arg Arg Pro Gly Gly Gly Asp Arg 805 810 815 Arg Phe Gly Pro Pro Ser Gly Val Glu Ala Leu Arg Arg Arg Cys Ala 820 825 830 Trp Met Arg Gln Ile Pro Asp Pro Glu Asp Val Arg Leu Leu Ile Ile 835 840 845 Tyr Asp Pro Leu Pro Gly Glu Asp Ile Asn Gly Pro Leu Glu Ser Thr 850 855 860 Leu Ala Thr Asp Pro Gly Pro Ser Trp Ser Pro Ser Arg Gly Gly Leu 865 870 875 880 Ser Val Val Leu Ala Ala Leu Ser Asn Arg Leu Cys Leu Pro Ser Thr 885 890 895 His Ala Trp Ala Gly Asn Trp Thr Gly Pro Pro Asp Val Ser Ala Leu 900 905 910 Asn Ala Arg Gly Val Leu Leu Leu Ser Thr Arg Asp Leu Ala Phe Ala 915 920 925 Gly Ala Val Glu Tyr Leu Gly Ser Arg Leu Ala Ser Ala Arg Arg Arg 930 935 940 Leu Leu Val Leu Asp Ala Val Ala Leu Glu Arg Trp Pro Gly Asp Gly 945 950 955 960 Pro Ala Leu Ser Gln Tyr His Val Tyr Val Arg Ala Pro Ala Arg Pro 965 970 975 Asp Ala Gln Ala Val Val Arg Trp Pro Asp Ser Ala Val Thr Glu Gly 980 985 990 Leu Ala Arg Ala Val Phe Ala Ser Ser Arg Thr Phe Gly Pro Ala Ser 995 1000 1005 Phe Ala Arg Ile Glu Thr Ala Phe Ala Asn Leu Tyr Pro Gly Glu 1010 1015 1020 Gln Pro Leu Cys Leu Cys Arg Gly Gly Asn Val Ala Tyr Thr Val 1025 1030 1035 Cys Thr Arg Ala Gly Pro Lys Thr Arg Val Pro Leu Ser Pro Arg 1040 1045 1050 Glu Tyr Arg Gln Tyr Val Leu Pro Gly Phe Asp Gly Cys Lys Asp 1055 1060 1065 Leu Ala Arg Gln Ser Arg Gly Leu Gly Leu Gly Ala Ala Asp Phe 1070 1075 1080 Val Asp Glu Ala Ala His Ser His Arg Ala Ala Asn Arg Trp Gly 1085 1090 1095 Leu Gly Ala Ala Leu Arg Pro Val Phe Leu Pro Glu Gly Arg Arg 1100 1105 1110 Pro Gly Ala Ala Gly Pro Glu Ala Gly Asp Val Pro Thr Trp Ala 1115 1120 1125 Arg Val Phe Cys Arg His Ala Leu Leu Glu Pro Asp Pro Ala 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Cys Phe Arg Leu Phe Thr Arg Ser 565 570 575 gta tta cgc agc acg tgg taaacccgtt tgcctataaa aggggcaggc 10932 Val Leu Arg Ser Thr Trp 580 gtgtataaga gggcccctgt ttaatacgcg gtctgccgtg tttggatatt tcacgaccct 10992 atcgtttatt tacgta atg gca tct tcc gac ggt gac aga ctt tgt cgc tct 11044 Met Ala Ser Ser Asp Gly Asp Arg Leu Cys Arg Ser 585 590 595 aat gca gtg cgt cgt aaa aca acg cct agt tat tcc gga caa tat cga 11092 Asn Ala Val Arg Arg Lys Thr Thr Pro Ser Tyr Ser Gly Gln Tyr Arg 600 605 610 acc gcg cgg cga agt gtg gtc gta gga ccc ccc gat gat tca gac gac 11140 Thr Ala Arg Arg Ser Val Val Val Gly Pro Pro Asp Asp Ser Asp Asp 615 620 625 tcg ttg ggt tac att acc aca gtt ggg gcc gat tct cct tct cca gtg 11188 Ser Leu Gly Tyr Ile Thr Thr Val Gly Ala Asp Ser Pro Ser Pro Val 630 635 640 tac gcg gat ctt tat ttt gaa cat aaa aat acg acc cct cgc gta cat 11236 Tyr Ala Asp Leu Tyr Phe Glu His Lys Asn Thr Thr Pro Arg Val His 645 650 655 660 caa cca aac gac tcc agc gga tcg gaa gat gac ttt gaa gac atc gat 11284 Gln Pro Asn Asp Ser Ser Gly Ser Glu Asp Asp Phe Glu Asp Ile Asp 665 670 675 gaa gta gtg gcc gcc ttt cgg gag gcc cgt ttg aga cat gaa ctg gtt 11332 Glu Val Val Ala Ala Phe Arg Glu Ala Arg Leu Arg His Glu Leu Val 680 685 690 gaa gat gct gta tat gaa aac ccg cta agt gta gaa aaa cca tct aga 11380 Glu Asp Ala Val Tyr Glu Asn Pro Leu Ser Val Glu Lys Pro Ser Arg 695 700 705 tct ttt act aaa aat gcg gcg gtt aaa cct aaa tta gag gat tca ccg 11428 Ser Phe Thr Lys Asn Ala Ala Val Lys Pro Lys Leu Glu Asp Ser Pro 710 715 720 aag cga gct ccc ccg gga gca ggc gca att gcc agc ggg aga cca att 11476 Lys Arg Ala Pro Pro Gly Ala Gly Ala Ile Ala Ser Gly Arg Pro Ile 725 730 735 740 tcc ttc agc act gca cca aaa acc gca aca agc tcg tgg tgc ggt cct 11524 Ser Phe Ser Thr Ala Pro Lys Thr Ala Thr Ser Ser Trp Cys Gly Pro 745 750 755 acg cca tca tat aac aaa cgc gtc ttt tgt gaa gcg gtc cgg cgc gta 11572 Thr Pro Ser Tyr Asn Lys Arg Val Phe Cys Glu Ala Val Arg Arg Val 760 765 770 gcc gcc atg cag gca caa aag gct gcc gaa gcg gct tgg aat agt aat 11620 Ala Ala Met Gln Ala Gln Lys Ala Ala Glu Ala Ala Trp Asn Ser Asn 775 780 785 ccc cca agg aat aac gcc gaa tta gac cgt ttg tta acc gga gcc gtt 11668 Pro Pro Arg Asn Asn Ala Glu Leu Asp Arg Leu Leu Thr Gly Ala Val 790 795 800 att cgt att acg gtg cat gag ggt tta aat tta ata caa gcc gct aat 11716 Ile Arg Ile Thr Val His Glu Gly Leu Asn Leu Ile Gln Ala Ala Asn 805 810 815 820 gaa gca gac cta ggt gaa gga gca tcg gta tcc aaa cgt gga cat aat 11764 Glu Ala Asp Leu Gly Glu Gly Ala Ser Val Ser Lys Arg Gly His Asn 825 830 835 cga aaa act gga gat tta cag ggg ggc atg ggt aat gaa cct atg tac 11812 Arg Lys Thr Gly Asp Leu Gln Gly Gly Met Gly Asn Glu Pro Met Tyr 840 845 850 gca caa gtt cgt aag cca aaa agt cga acg gat aca caa acg act ggg 11860 Ala Gln Val Arg Lys Pro Lys Ser Arg Thr Asp Thr Gln Thr Thr Gly 855 860 865 cgt ata act aat cga agt agg gcc cgt tct gca tca aga act gat acg 11908 Arg Ile Thr Asn Arg Ser Arg Ala Arg Ser Ala Ser Arg Thr Asp Thr 870 875 880 cga aaa tag ggatataatt acgcagtaac ggtttacccg gtattatgta 11957 Arg Lys 885 taataaataa acgtataaaa gacagtcgtg gtttgtgttt attataaatg tgtattatat 12017 gtcacatatt ataaactgtt taaatagtac cacgtggtat tatgaacagt ttataatcag 12077 ttgctaccaa acaaacccca ttagacggcg ggttttgata aagggaatcg cttatttaaa 12137 ctaaagattt tactctataa gt atg gag tgt aat tta gga acc gaa cat cct 12189 Met Glu Cys Asn Leu Gly Thr Glu His Pro 890 895 agt aca gat acg tgg aat cgt agt aaa acg gaa caa gcg gtt gtg gac 12237 Ser Thr Asp Thr Trp Asn Arg Ser Lys Thr Glu Gln Ala Val Val Asp 900 905 910 gca ttt gat gaa tcg ttg ttt ggt gat gta gca tcg gat att gga ttt 12285 Ala Phe Asp Glu Ser Leu Phe Gly Asp Val Ala Ser Asp Ile Gly Phe 915 920 925 gaa acg tcg tta tat tca cat gca gtt aaa act gct ccg tct ccg cct 12333 Glu Thr Ser Leu Tyr Ser His Ala Val Lys Thr Ala Pro Ser Pro Pro 930 935 940 tgg gta gct agc cct aaa att tta tat caa cag tta ata cgg gat ctt 12381 Trp Val Ala Ser Pro Lys Ile Leu Tyr Gln Gln Leu Ile Arg Asp Leu 945 950 955 960 gat ttt tca gaa ggg ccg cgt tta cta tca tgt ctt gaa acc tgg aac 12429 Asp Phe Ser Glu Gly Pro Arg Leu Leu Ser Cys Leu Glu Thr Trp Asn 965 970 975 gag gat tta ttc tca tgt ttt cct att aat gag gac cta tat tcc gat 12477 Glu Asp Leu Phe Ser Cys Phe Pro Ile Asn Glu Asp Leu Tyr Ser Asp 980 985 990 atg atg gtt tta tcc ccg gat cca gat gac gtt atc tca acc gtt tca 12525 Met Met Val Leu Ser Pro Asp Pro Asp Asp Val Ile Ser Thr Val Ser 995 1000 1005 acc aaa gac cat gtt gaa atg ttt aat tta aca acc cgg ggt tcc 12570 Thr Lys Asp His Val Glu Met Phe Asn Leu Thr Thr Arg Gly Ser 1010 1015 1020 gtt cga ttg cct agt cca cca aag caa ccg acg ggg ctt cca gct 12615 Val Arg Leu Pro Ser Pro Pro Lys Gln Pro Thr Gly Leu Pro Ala 1025 1030 1035 tac gtt cag gag gtc cag gat tcg ttt acc gta gaa cta cgc gcc 12660 Tyr Val Gln Glu Val Gln Asp Ser Phe Thr Val Glu Leu Arg Ala 1040 1045 1050 cgg gaa gaa gca tac aca aaa cta cta gtt act tat tgt aaa tcg 12705 Arg Glu Glu Ala Tyr Thr Lys Leu Leu Val Thr Tyr Cys Lys Ser 1055 1060 1065 att ata cgt tat ctc caa gga acg gcg aaa agg acg aca ata ggt 12750 Ile Ile Arg Tyr Leu Gln Gly Thr Ala Lys Arg Thr Thr Ile Gly 1070 1075 1080 ctt aat ata caa aac cct gac cag aaa gct tac acg caa ctc agg 12795 Leu Asn Ile Gln Asn Pro Asp Gln Lys Ala Tyr Thr Gln Leu Arg 1085 1090 1095 caa agt att cta ctt aga tat tat cgt gag gtg gca agt ttg gcg 12840 Gln Ser Ile Leu Leu Arg Tyr Tyr Arg Glu Val Ala Ser Leu Ala 1100 1105 1110 cgt ctt ctg tac cta cat tta tat tta acc gta acg cgt gaa ttt 12885 Arg Leu Leu Tyr Leu His Leu Tyr Leu Thr Val Thr Arg Glu Phe 1115 1120 1125 tcc tgg cgt ttg tac gcc agt caa tct gca cac ccg gac gtg ttt 12930 Ser Trp Arg Leu Tyr Ala Ser Gln Ser Ala His Pro Asp Val Phe 1130 1135 1140 gcg gct tta aaa ttc acc tgg acc gaa cgt cga cag ttc acg tgt 12975 Ala Ala Leu Lys Phe Thr Trp Thr Glu Arg Arg Gln Phe Thr Cys 1145 1150 1155 gcg ttt cat cct gta tta tgc aac cac ggc att gtg tta tta gaa 13020 Ala Phe His Pro Val Leu Cys Asn His Gly Ile Val Leu Leu Glu 1160 1165 1170 ggg aaa cca cta aca gcg tct gcc ttg agg gaa ata aat tac cgc 13065 Gly Lys Pro Leu Thr Ala Ser Ala Leu Arg Glu Ile Asn Tyr Arg 1175 1180 1185 cgc cga gaa ctg gga ctg cct cta gtt aga tgt ggt ctt gtt gaa 13110 Arg Arg Glu Leu Gly Leu Pro Leu Val Arg Cys Gly Leu Val Glu 1190 1195 1200 gaa aac aaa tct ccg ttg gtt caa caa ccc tca ttt tcg gtt cat 13155 Glu Asn Lys Ser Pro Leu Val Gln Gln Pro Ser Phe Ser Val His 1205 1210 1215 tta cca cgg tcg gtg ggt ttt ctt acc cac cac att aag cgt aag 13200 Leu Pro Arg Ser Val Gly Phe Leu Thr His His Ile Lys Arg Lys 1220 1225 1230 tta gac gca tat gcg gtc aaa cat cct caa gaa ccg aga cat gta 13245 Leu Asp Ala Tyr Ala Val Lys His Pro Gln Glu Pro Arg His Val 1235 1240 1245 cga gcg gat cat cct tac gca aaa gtt gtt gaa aat aga aac tac 13290 Arg Ala Asp His Pro Tyr Ala Lys Val Val Glu Asn Arg Asn Tyr 1250 1255 1260 ggt agt agc atc gaa gct atg att tta gca cct ccg tcc cca tcc 13335 Gly Ser Ser Ile Glu Ala Met Ile Leu Ala Pro Pro Ser Pro Ser 1265 1270 1275 gag atc ctg ccg ggg gac cca cca cgc cca ccc acg tgt ggg ttt 13380 Glu Ile Leu Pro Gly Asp Pro Pro Arg Pro Pro Thr Cys Gly Phe 1280 1285 1290 tta acg cgt taa acgtcattgg ggtagagggt gtaaataaat tacgaaaacg 13432 Leu Thr Arg 1295 tgcatgcgtt ttttattttt acaatgcgcc gtatatggta tgtctgtcat gtgctctaaa 13492 gtcccatata taaaagaagc cccaacgagt gtatgcgtat tgcgtaccgc gaccctggga 13552 tgttttacag gcgcgtttgt ttgtctcggt tataagt atg cag tcg ggt cat tat 13607 Met Gln Ser Gly His Tyr 1300 aac cgg agg caa tcc cgc cga cag cgg ata tcg tct aat acc aca 13652 Asn Arg Arg Gln Ser Arg Arg Gln Arg Ile Ser Ser Asn Thr Thr 1305 1310 1315 gac tcc ccc cgt cac aca cac gga aca cgt tat cgg tca acc aat 13697 Asp Ser Pro Arg His Thr His Gly Thr Arg Tyr Arg Ser Thr Asn 1320 1325 1330 tgg tat aca cac cca ccc cag ata ttg tcc aat tca gaa aca tta 13742 Trp Tyr Thr His Pro Pro Gln Ile Leu Ser Asn Ser Glu Thr Leu 1335 1340 1345 gtt gcg gtt caa gaa cta ctg aac tcc gag atg gat cag gac agc 13787 Val Ala Val Gln Glu Leu Leu Asn Ser Glu Met Asp Gln Asp Ser 1350 1355 1360 agt tct gac gca tcg gat gat ttt ccg gga tac gcc tta cat cat 13832 Ser Ser Asp Ala Ser Asp Asp Phe Pro Gly Tyr Ala Leu His His 1365 1370 1375 tct aca tat aat gga tcc gaa caa aat aca tca act tcc aga cat 13877 Ser Thr Tyr Asn Gly Ser Glu Gln Asn Thr Ser Thr Ser Arg His 1380 1385 1390 gaa aat cgc ata ttt aaa tta acg gag agg gaa gct aat gag gaa 13922 Glu Asn Arg Ile Phe Lys Leu Thr Glu Arg Glu Ala Asn Glu Glu 1395 1400 1405 atc aac atc aat acg gac gcg atc gac gac gag gga gag gcg gag 13967 Ile Asn Ile Asn Thr Asp Ala Ile Asp Asp Glu Gly Glu Ala Glu 1410 1415 1420 gag gga gag gcg gag gag gac gcg atc gac gac gag gga gag gcg 14012 Glu Gly Glu Ala Glu Glu Asp Ala Ile Asp Asp Glu Gly Glu Ala 1425 1430 1435 gag gag gga gag gcg gag gag gac gcg att gac gac gag gga gag 14057 Glu Glu Gly Glu Ala Glu Glu Asp Ala Ile Asp Asp Glu Gly Glu 1440 1445 1450 gcg gag gag gga gag gcg gag gag gac gcg att gac gac gag gga 14102 Ala Glu Glu Gly Glu Ala Glu Glu Asp Ala Ile Asp Asp Glu Gly 1455 1460 1465 gag gcg gag gag gga gag gcg gag gag gga gag gcg gag gag gga 14147 Glu Ala Glu Glu Gly Glu Ala Glu Glu Gly Glu Ala Glu Glu Gly 1470 1475 1480 gag gcg gag gag gac gcg atc gac gac gag gga gag gcg gag gag 14192 Glu Ala Glu Glu Asp Ala Ile Asp Asp Glu Gly Glu Ala Glu Glu 1485 1490 1495 gac gcg gcg gag gag gac gcg atc gac gac gag gga gag gcg gag 14237 Asp Ala Ala Glu Glu Asp Ala Ile Asp Asp Glu Gly Glu Ala Glu 1500 1505 1510 gag gat tat ttt tct gta agt caa gtt tgc agt cga gac gcg gat 14282 Glu Asp Tyr Phe Ser Val Ser Gln Val Cys Ser Arg Asp Ala Asp 1515 1520 1525 gag gtt tat ttt acg tta gac ccg gaa ata agt tac agt acc gat 14327 Glu Val Tyr Phe Thr Leu Asp Pro Glu Ile Ser Tyr Ser Thr Asp 1530 1535 1540 ctt cgc att gca aag gtt atg gag cct gcg gta tca aag gaa ctt 14372 Leu Arg Ile Ala Lys Val Met Glu Pro Ala Val Ser Lys Glu Leu 1545 1550 1555 aat gta tca aaa cgt tgt gtt gaa cct gtt acc cta aca ggc tct 14417 Asn Val Ser Lys Arg Cys Val Glu Pro Val Thr Leu Thr Gly Ser 1560 1565 1570 atg tta gcg cat aat ggg ttt gat gag tcc tgg ttt gct atg cgc 14462 Met Leu Ala His Asn Gly Phe Asp Glu Ser Trp Phe Ala Met Arg 1575 1580 1585 gaa tgt acc cgt cgc gaa tat att acg gtc caa gga tta tac gac 14507 Glu Cys Thr Arg Arg Glu Tyr Ile Thr Val Gln Gly Leu Tyr Asp 1590 1595 1600 cca att cat tta cgg tat cag ttt gat act tcc cgg atg aca ccc 14552 Pro Ile His Leu Arg Tyr Gln Phe Asp Thr Ser Arg Met Thr Pro 1605 1610 1615 cca cag att ttg aga act ata cca gcc ctt cct aac atg aca ctt 14597 Pro Gln Ile Leu Arg Thr Ile Pro Ala Leu Pro Asn Met Thr Leu 1620 1625 1630 ggt gaa ctt tta ttg att ttt cct att gaa ttt atg gcc cag cca 14642 Gly Glu Leu Leu Leu Ile Phe Pro Ile Glu Phe Met Ala Gln Pro 1635 1640 1645 att tct ata gaa cgt att tta gtt gaa gat gta ttt tta gat agg 14687 Ile Ser Ile Glu Arg Ile Leu Val Glu Asp Val Phe Leu Asp Arg 1650 1655 1660 cgg gct tcc agt aaa aca cat aaa tac ggc ccg cgt tgg aat tcc 14732 Arg Ala Ser Ser Lys Thr His Lys Tyr Gly Pro Arg Trp Asn Ser 1665 1670 1675 gtc tac gca ctt cca tat aat gcg ggt aaa atg tat gta caa cac 14777 Val Tyr Ala Leu Pro Tyr Asn Ala Gly Lys Met Tyr Val Gln His 1680 1685 1690 att cct ggg ttt tat gac gtg tcc tta cgt gct gtg ggc caa gga 14822 Ile Pro Gly Phe Tyr Asp Val Ser Leu Arg Ala Val Gly Gln Gly 1695 1700 1705 acg gcc att tgg cat cac atg ata tta tcc aca gca gca tgc gct 14867 Thr Ala Ile Trp His His Met Ile Leu Ser Thr Ala Ala Cys Ala 1710 1715 1720 att tct aat cgc att tca cat gga gat gga tta gga ttt ttg tta 14912 Ile Ser Asn Arg Ile Ser His Gly Asp Gly Leu Gly Phe Leu Leu 1725 1730 1735 gac gcg gca att cgt att agc gca aac tgt att ttt ttg gga cgt 14957 Asp Ala Ala Ile Arg Ile Ser Ala Asn Cys Ile Phe Leu Gly Arg 1740 1745 1750 aac gat aat ttt ggc gtg ggg gat cca tgt tgg tta gaa gac cat 15002 Asn Asp Asn Phe Gly Val Gly Asp Pro Cys Trp Leu Glu Asp His 1755 1760 1765 ctt gcc gga tta cca cga gaa gcc gta ccc gac gta ctc caa gtg 15047 Leu Ala Gly Leu Pro Arg Glu Ala Val Pro Asp Val Leu Gln Val 1770 1775 1780 aca cag ttg gtt ttg cca aat cgg ggt cca acg gtt gcc att atg 15092 Thr Gln Leu Val Leu Pro Asn Arg Gly Pro Thr Val Ala Ile Met 1785 1790 1795 cgt ggt ttt ttt ggg gcg ttg gca tat tgg ccc gaa cta aga att 15137 Arg Gly Phe Phe Gly Ala Leu Ala Tyr Trp Pro Glu Leu Arg Ile 1800 1805 1810 gct ata agt gaa cca tct aca tct ttg gtg cga tat gct acc ggt 15182 Ala Ile Ser Glu Pro Ser Thr Ser Leu Val Arg Tyr Ala Thr Gly 1815 1820 1825 cac atg gaa ctt gcc gaa tgg ttt tta ttt tca cgt aca cat agt 15227 His Met Glu Leu Ala Glu Trp Phe Leu Phe Ser Arg Thr His Ser 1830 1835 1840 tta aag cca caa ttt acc cca acg gaa cgg gaa atg tta gcg tca 15272 Leu Lys Pro Gln Phe Thr Pro Thr Glu Arg Glu Met Leu Ala Ser 1845 1850 1855 ttt ttt acg ttg tat gtt act ctt ggt gga gga atg ttg aac tgg 15317 Phe Phe Thr Leu Tyr Val Thr Leu Gly Gly Gly Met Leu Asn Trp 1860 1865 1870 atc tgt aga gca act gca atg tat tta gct gct cct tac cat tcc 15362 Ile Cys Arg Ala Thr Ala Met Tyr Leu Ala Ala Pro Tyr His Ser 1875 1880 1885 cgt tcg gct tac atc gcg gtc tgt gaa tct ctg ccc tat tac tat 15407 Arg Ser Ala Tyr Ile Ala Val Cys Glu Ser Leu Pro Tyr Tyr Tyr 1890 1895 1900 atc ccg gtt aat agt gac ctg tta tgt gat tta gag gta tta ctg 15452 Ile Pro Val Asn Ser Asp Leu Leu Cys Asp Leu Glu Val Leu Leu 1905 1910 1915 tta ggc gag gtc gac ctc cca act gtt tgt gaa tcc tac gca act 15497 Leu Gly Glu Val Asp Leu Pro Thr Val Cys Glu Ser Tyr Ala Thr 1920 1925 1930 att gca cac gaa tta acc gga tat gag gct gtt cgc aca gca gcc 15542 Ile Ala His Glu Leu Thr Gly Tyr Glu Ala Val Arg Thr Ala Ala 1935 1940 1945 aca aat ttt atg ata gag ttt gcc gat tgt tat aag gaa agt gag 15587 Thr Asn Phe Met Ile Glu Phe Ala Asp Cys Tyr Lys Glu Ser Glu 1950 1955 1960 acc gat tta atg gta agc gcg tac ctg ggg gcc gtt tta ttg tta 15632 Thr Asp Leu Met Val Ser Ala Tyr Leu Gly Ala Val Leu Leu Leu 1965 1970 1975 caa cgg gtg ttg ggt cat gca aat ctt ctt ttg ttg ctt ctc tcc 15677 Gln Arg Val Leu Gly His Ala Asn Leu Leu Leu Leu Leu Leu Ser 1980 1985 1990 ggt gct gcg ttg tac gga gga tgt tca att tac atc ccc cga ggt 15722 Gly Ala Ala Leu Tyr Gly Gly Cys Ser Ile Tyr Ile Pro Arg Gly 1995 2000 2005 att tta gat gca tat aat act tta atg ttg gca gca agt cct ctt 15767 Ile Leu Asp Ala Tyr Asn Thr Leu Met Leu Ala Ala Ser Pro Leu 2010 2015 2020 tac gct cac caa act tta aca tcc ttt tgg aaa gac cgc gat gat 15812 Tyr Ala His Gln Thr Leu Thr Ser Phe Trp Lys Asp Arg Asp Asp 2025 2030 2035 gca atg caa act ttg ggg att cga ccg aca acg gac gtt tta ccc 15857 Ala Met Gln Thr Leu Gly Ile Arg Pro Thr Thr Asp Val Leu Pro 2040 2045 2050 aaa gag caa gac agg ata gtt cag gca tca cct ata gag atg aac 15902 Lys Glu Gln Asp Arg Ile Val Gln Ala Ser Pro Ile Glu Met Asn 2055 2060 2065 ttc cgt ttt gtg gga ttg gag acc atc tat ccc cga gaa cag ccc 15947 Phe Arg Phe Val Gly Leu Glu Thr Ile Tyr Pro Arg Glu Gln Pro 2070 2075 2080 att ccc tcc gtg gac cta gcc gaa aat ctt atg caa tac agg aat 15992 Ile Pro Ser Val Asp Leu Ala Glu Asn Leu Met Gln Tyr Arg Asn 2085 2090 2095 gaa att ctg ggt ttg gat tgg aaa agc gta gcc atg cat tta cta 16037 Glu Ile Leu Gly Leu Asp Trp Lys Ser Val Ala Met His Leu Leu 2100 2105 2110 cga aaa tat taa gggttgtgat ttttttcatt aggatgaaaa gaacgtttcc 16089 Arg Lys Tyr 2115 tagccacacc cacaaaggag tttgtaaaat aaaatctctg tttagacctt aaaatttgtt 16149 gtgtgtgttg tgtggggggt ccgtgaggat cgacctttac aagatataat ttgtccatat 16209 cgca atg ttt tct cgg ttt gcg cgt tcc ttt tcc agc gat gat aga 16255 Met Phe Ser Arg Phe Ala Arg Ser Phe Ser Ser Asp Asp Arg 2120 2125 acg cgt aaa tct tat gat ggt agt tac caa agt ttt aat gcc ggc 16300 Thr Arg Lys Ser Tyr Asp Gly Ser Tyr Gln Ser Phe Asn Ala Gly 2130 2135 2140 gaa cgt gat ttg ccc aca cct acc cgg gac tgg tgt tct att tcc 16345 Glu Arg Asp Leu Pro Thr Pro Thr Arg Asp Trp Cys Ser Ile Ser 2145 2150 2155 caa cgc ata acc agc gag cgc gtg agg gat gga tgt ctt att cca 16390 Gln Arg Ile Thr Ser Glu Arg Val Arg Asp Gly Cys Leu Ile Pro 2160 2165 2170 acg ccc ggc gag gct ttg gag acg gcg gta aag gct tta tct gaa 16435 Thr Pro Gly Glu Ala Leu Glu Thr Ala Val Lys Ala Leu Ser Glu 2175 2180 2185 aag acc gac agc cta aca tcg ccg gtt tta caa agt acc gaa aga 16480 Lys Thr Asp Ser Leu Thr Ser Pro Val Leu Gln Ser Thr Glu Arg 2190 2195 2200 cac agt gtt ctg ctt gga tta cac cat aat aat gtt cct gaa tcg 16525 His Ser Val Leu Leu Gly Leu His His Asn Asn Val Pro Glu Ser 2205 2210 2215 ttg gtg gtc tcg tgt atg tct aac gat gtt cat gac ggg ttt atg 16570 Leu Val Val Ser Cys Met Ser Asn Asp Val His Asp Gly Phe Met 2220 2225 2230 cag cgt tat atg gaa aca att caa aga tgt ttg gat gac ctg aaa 16615 Gln Arg Tyr Met Glu Thr Ile Gln Arg Cys Leu Asp Asp Leu Lys 2235 2240 2245 ctt tct ggg gat gga ctt tgg tgg gtt tat gaa aat aca tat tgg 16660 Leu Ser Gly Asp Gly Leu Trp Trp Val Tyr Glu Asn Thr Tyr Trp 2250 2255 2260 cag tat ctc aaa tac acc aca gga gcc gag gta ccg gtg act tca 16705 Gln Tyr Leu Lys Tyr Thr Thr Gly Ala Glu Val Pro Val Thr Ser 2265 2270 2275 gag aag gta aat aaa aag tct aaa tcc acg gtt ttg ttg ttt tca 16750 Glu Lys Val Asn Lys Lys Ser Lys Ser Thr Val Leu Leu Phe Ser 2280 2285 2290 tcc gta gtt gcc aat aaa cca ata tcc aga cat cct ttt aaa tct 16795 Ser Val Val Ala Asn Lys Pro Ile Ser Arg His Pro Phe Lys Ser 2295 2300 2305 aaa gtt ata aat tcg gat tac cgg gga ata tgt cag gag cta cgt 16840 Lys Val Ile Asn Ser Asp Tyr Arg Gly Ile Cys Gln Glu Leu Arg 2310 2315 2320 gag gcg tta gga gct gtg caa aag tat atg tat ttt atg cgt cca 16885 Glu Ala Leu Gly Ala Val Gln Lys Tyr Met Tyr Phe Met Arg Pro 2325 2330 2335 gat gat cct aca aac ccc agc ccg gat aca aga ata cgt gta caa 16930 Asp Asp Pro Thr Asn Pro Ser Pro Asp Thr Arg Ile Arg Val Gln 2340 2345 2350 gaa att gcg gct tac acg gct act ggc tac ggg tgg atg tta tgg 16975 Glu Ile Ala Ala Tyr Thr Ala Thr Gly Tyr Gly Trp Met Leu Trp 2355 2360 2365 ttc ttg gac gtt gtg gac gcc agg gta tgt cgc cat ctc aaa ctt 17020 Phe Leu Asp Val Val Asp Ala Arg Val Cys Arg His Leu Lys Leu 2370 2375 2380 caa ttt cga cgg att cga ggg ccg cgc gcg tct gtt att cca gat 17065 Gln Phe Arg Arg Ile Arg Gly Pro Arg Ala Ser Val Ile Pro Asp 2385 2390 2395 gat ttg ctt aga cga cat tta aaa acg ggt cct gcg gtc tca 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Tyr Phe Ala Gly Gln Leu Val Arg Thr Met Ser Thr His Ser 2505 2510 2515 tgg gtt gtg tta gag acc agc acc cat atg tgg ttt tcc cgg gcc 17470 Trp Val Val Leu Glu Thr Ser Thr His Met Trp Phe Ser Arg Ala 2520 2525 2530 gtg gcg cag agt att tta gca cat ggg ggt aaa ccc aca aag tat 17515 Val Ala Gln Ser Ile Leu Ala His Gly Gly Lys Pro Thr Lys Tyr 2535 2540 2545 tat gct cag gtt ctt gcc gcc agt aaa cgg tat act ccg tta cat 17560 Tyr Ala Gln Val Leu Ala Ala Ser Lys Arg Tyr Thr Pro Leu His 2550 2555 2560 tta aga cgt ata tcc gaa cca tcg agt gtg tct gat cag ccg tat 17605 Leu Arg Arg Ile Ser Glu Pro Ser Ser Val Ser Asp Gln Pro Tyr 2565 2570 2575 att cgt ttt aat cga ctg gga tct cca ata ggg aca ggt ata ggg 17650 Ile Arg Phe Asn Arg Leu Gly Ser Pro Ile Gly Thr Gly Ile Gly 2580 2585 2590 aat ttg gaa tgt gtc tgt tta acg gga aat tat tta tct gac gac 17695 Asn Leu Glu Cys Val Cys Leu Thr Gly Asn Tyr Leu Ser Asp Asp 2595 2600 2605 gta aat gca agt tcg cat gta att aat aca gaa gca ccg tta aac 17740 Val Asn Ala Ser Ser His Val Ile Asn Thr Glu Ala Pro Leu Asn 2610 2615 2620 agt ata gca ccc gat aca aat aga cag cgg act tct cgc gtt tta 17785 Ser Ile Ala Pro Asp Thr Asn Arg Gln Arg Thr Ser Arg Val Leu 2625 2630 2635 gtt cgt cca gac acg ggt ttg gat gta act gtc cga aaa aac cac 17830 Val Arg Pro Asp Thr Gly Leu Asp Val Thr Val Arg Lys Asn His 2640 2645 2650 tgt ctg gac ata ggc cat acg gac ggt agt cca gtt gac cca acg 17875 Cys Leu Asp Ile Gly His Thr Asp Gly Ser Pro Val Asp Pro Thr 2655 2660 2665 tat cct gat cat tac acc cgg ata aag gcg gaa tat gaa ggt ccg 17920 Tyr Pro Asp His Tyr Thr Arg Ile Lys Ala Glu Tyr Glu Gly Pro 2670 2675 2680 gtt cgg gat gaa tca aac aca atg ttt gac caa aga tcg gat tta 17965 Val Arg Asp Glu Ser Asn Thr Met Phe Asp Gln Arg Ser Asp Leu 2685 2690 2695 cgt cac ata gaa acc caa gca tct tta aat gat cac gta tat gaa 18010 Arg His Ile Glu Thr Gln Ala Ser Leu Asn Asp His Val Tyr Glu 2700 2705 2710 aat ata cca ccc aag gaa gtg ggt ttt aac tca tct tca gac ctg 18055 Asn Ile Pro Pro Lys Glu Val Gly Phe Asn Ser Ser Ser Asp Leu 2715 2720 2725 gat gtg gat agc ctt aac ggg tac acc tcc gga gac atg cat aca 18100 Asp Val Asp Ser Leu Asn Gly Tyr Thr Ser Gly Asp Met His Thr 2730 2735 2740 gac gat gac tta tca cca gat ttt ata ccc aac gac gtt ccc gtt 18145 Asp Asp Asp Leu Ser Pro Asp Phe Ile Pro Asn Asp Val Pro Val 2745 2750 2755 aga tgt aaa acc acg gtt acg ttt agg aaa aat acg cct aag agt 18190 Arg Cys Lys Thr Thr Val Thr Phe Arg Lys Asn Thr Pro Lys Ser 2760 2765 2770 cat cat taa gtacagcggt taatagatag ttatggacta ggcactttgg 18239 His His 2775 cggtcatttc cacaaccagg ttaaaattgg gggatttggg agaaaatagt ctattgcgta 18299 ttttctgttc aataattgga ctgcgttatt taaaggtctg attggttgat tgggttataa 18359 aaggaattac tcctttaaat tttacttaat gtacccacaa tatcaagtgg tcgtttgtat 18419 ttaacgatta ttaccggtac c atg gga gac ttg tca tgt tgg aca aag gtg 18470 Met Gly Asp Leu Ser Cys Trp Thr Lys Val 2780 2785 ccg ggt ttt acg tta acc ggc gaa ctt cag tac tta aaa caa gtg 18515 Pro Gly Phe Thr Leu Thr Gly Glu Leu Gln Tyr Leu Lys Gln Val 2790 2795 2800 gat gat att tta agg tat gga gtt cgg aaa cgc gat cga aca gga 18560 Asp Asp Ile Leu Arg Tyr Gly Val Arg Lys Arg Asp Arg Thr Gly 2805 2810 2815 atc gga acg tta tct tta ttt gga atg caa gct cga tac aat ttg 18605 Ile Gly Thr Leu Ser Leu Phe Gly Met Gln Ala Arg Tyr Asn Leu 2820 2825 2830 cga aat gaa ttt cct ctt tta act aca aag cgt gtt ttt tgg agg 18650 Arg Asn Glu Phe Pro Leu Leu Thr Thr Lys Arg Val Phe Trp Arg 2835 2840 2845 gcc gtc gtg gaa gag ttg tta tgg ttt atc cgc ggg tca acc gat 18695 Ala Val Val Glu Glu Leu Leu Trp Phe Ile Arg Gly Ser Thr Asp 2850 2855 2860 tcc aaa gaa ctc gcc gct aaa gat ata cac ata tgg gat ata tac 18740 Ser Lys Glu Leu Ala Ala Lys Asp Ile His Ile Trp Asp Ile Tyr 2865 2870 2875 gga tcg agc aaa ttt cta aat agg aat ggc ttc cat aaa aga cac 18785 Gly Ser Ser Lys Phe Leu Asn Arg Asn Gly Phe His Lys Arg His 2880 2885 2890 acg ggg gac ctt ggc ccc att tac ggc ttc cag tgg aga cat ttt 18830 Thr Gly Asp Leu Gly Pro Ile Tyr Gly Phe Gln Trp Arg His Phe 2895 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ctatagaaaa agtaatcata tgtaaacaca cgagtttcgt taatatgttt gtttaacccg 23876 atccggtgac ttaagtacat aaacaggcat gatatttgaa tagtacggcc catgggaggg 23936 aacatttcca cgtgttccaa tacagggggt gttccttaat agggactgtg caataaaata 23996 cgtaagaagt taccagattt gatgtaatgt ttgtcataaa aaatatgtac atcattatat 24056 acgtctgtaa ttaacacaag atcacatcga agaattactg aagccgctgt gaaacctttc 24116 acaagacgat ataaacttgg ttaagtgtat tg atg ggg ctc ttt gga ctg aca 24169 Met Gly Leu Phe Gly Leu Thr 3080 cgc ttt atc cat gaa cat aaa ctg gtt aaa ccc agc atc att tca 24214 Arg Phe Ile His Glu His Lys Leu Val Lys Pro Ser Ile Ile Ser 3085 3090 3095 acg cca ccc gga gtt tta acc ccc gtg gcg gta gac gta tgg aac 24259 Thr Pro Pro Gly Val Leu Thr Pro Val Ala Val Asp Val Trp Asn 3100 3105 3110 gtc atg tac aca ttg ttg gaa cgt tta tac cct gtg ggt aaa cgc 24304 Val Met Tyr Thr Leu Leu Glu Arg Leu Tyr Pro Val Gly Lys Arg 3115 3120 3125 gag aat tta cac gga cca tct gta acg ata cat tgt ctt gga gtc 24349 Glu Asn Leu His Gly Pro Ser Val Thr Ile His Cys Leu Gly Val 3130 3135 3140 tta ttg cgg cta tta aca caa cgg tca tac tat ccg ata ttt gta 24394 Leu Leu Arg Leu Leu Thr Gln Arg Ser Tyr Tyr Pro Ile Phe Val 3145 3150 3155 ttg gaa cgt tgt aca gac ggc cca tta tca cgt gga gcc aag gca 24439 Leu Glu Arg Cys Thr Asp Gly Pro Leu Ser Arg Gly Ala Lys Ala 3160 3165 3170 att atg tca cgg gcc atg aac cac gat gaa agg gga acc tcg gac 24484 Ile Met Ser Arg Ala Met Asn His Asp Glu Arg Gly Thr Ser Asp 3175 3180 3185 tta acc cgt gtt cta cta tca tcc aac aca tca tgt tct atc aag 24529 Leu Thr Arg Val Leu Leu Ser Ser Asn Thr Ser Cys Ser Ile Lys 3190 3195 3200 tat aac aaa aca tcg gaa aca tat gac agt gtg ttt cga aac tct 24574 Tyr Asn Lys Thr Ser Glu Thr Tyr Asp Ser Val Phe Arg Asn Ser 3205 3210 3215 tcc acg agt tgt att cct agc gaa gaa aac aaa tcc cag gat atg 24619 Ser Thr Ser Cys Ile Pro Ser Glu Glu Asn Lys Ser Gln Asp Met 3220 3225 3230 ttt ttg gac ggt tgt cca cga caa act gac aag acg atc tgc ctg 24664 Phe Leu Asp Gly Cys Pro Arg Gln Thr Asp Lys Thr Ile Cys Leu 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acatgccaac 28276 gctgtgaaaa atacccgaca gacatcagtc catgtataac catcatttat tccgggaata 28336 agagttgcga ttttaggcag gtttacgatt tctgttgtca cggtggccgc cagtcttaaa 28396 aagaattggc aaagcgactc taatttacct tcctctaact tagttaaata aaagtcttcg 28456 tactttaaag cagactgtag tccaagggta gctaaagcgg ggtattgatc tttcaaaaac 28516 ggttctaata tagcccgacg aatttcgtcc ctccgccctt caattgcttg gcggactcgg 28576 ggagttaaac agagaattgg ggaagtcaac cacgtttcca tggaaacgga tcgtaggtta 28636 atacggcaat ggataagttc tccacaacat cggtacactc gctcatcttg tcgcgtcacc 28696 gccttaagtt ttgagacgat agtgctaata tactccatta attccaccgg tgtggttgat 28756 tcgggcggaa tgatgtattc cttgtagcca tgttgacata atcggtttat aatgtcatga 28816 accgtattaa aaattctttt gaactccata acggataacg tatttaggct ccggaataaa 28876 cctttaaacc ctaaactcac agctgagtta gttctacaat attgtagact cccttatata 28936 tggttacgta cagcctgccc ctccccagta tataatatca cgcaaaaccc acgctatgtt 28996 aaattcagtt tattttacat acatgcttta ataataacat tcgttccatg tatttgtacc 29056 cccccacaca accccctcta accaaatagt tggcacgtta 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gtg gat tct gga cct cag atg ggc gcg gtt 33665 Arg Gln Gln Phe Ile Val Asp Ser Gly Pro Gln Met Gly Ala Val 4490 4495 4500 tta act tca caa tgt aat ata gga aca tgg gag aat gta aat gca 33710 Leu Thr Ser Gln Cys Asn Ile Gly Thr Trp Glu Asn Val Asn Ala 4505 4510 4515 acg ttt tta cat gat aat gtt aaa ata acg aca acg gtc aga gac 33755 Thr Phe Leu His Asp Asn Val Lys Ile Thr Thr Thr Val Arg Asp 4520 4525 4530 gta att tca gag gct ccg acg ctg ata ata gga caa aga tgg ctt 33800 Val Ile Ser Glu Ala Pro Thr Leu Ile Ile Gly Gln Arg Trp Leu 4535 4540 4545 cgt cca gat gag att tta tct aat gta gat ttg cgt ctt ggc gta 33845 Arg Pro Asp Glu Ile Leu Ser Asn Val Asp Leu Arg Leu Gly Val 4550 4555 4560 ccc ggg aat aca agt ggg agt gac cct taa tataaaacag gcgtgtttat 33895 Pro Gly Asn Thr Ser Gly Ser Asp Pro 4565 4570 gtacattaaa gtatttgtgg tttttattga ctgggcgttt cgtttgtata acgctgttgt 33955 tgctagtatt ttcataacct cctaggtttt tggagctaca cgtgcttatt caacgctctt 34015 tgggatttga atcatcgtaa acgtagcgtc cctaccagtt gagcgcgtaa 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gtt ttg tct aga ata tac ggc gat agc cat ttt ttt acc gtt cca 34439 Val Leu Ser Arg Ile Tyr Gly Asp Ser His Phe Phe Thr Val Pro 4675 4680 4685 gac gag ggt ttt atg tgc aca caa att ccc gct aga gcg ttt ttc 34484 Asp Glu Gly Phe Met Cys Thr Gln Ile Pro Ala Arg Ala Phe Phe 4690 4695 4700 gat gat gtg tgg atg gga cgt gaa gag tcg tat aca att ata act 34529 Asp Asp Val Trp Met Gly Arg Glu Glu Ser Tyr Thr Ile Ile Thr 4705 4710 4715 gta gac tca acg gga atg gcc atc tat cgt cag gga aac ata tct 34574 Val Asp Ser Thr Gly Met Ala Ile Tyr Arg Gln Gly Asn Ile Ser 4720 4725 4730 ttt att ttt gat cca cat ggc cat ggg act ata gga cag gct gta 34619 Phe Ile Phe Asp Pro His Gly His Gly Thr Ile Gly Gln Ala Val 4735 4740 4745 gtt gtt cgg gtg aat acc acg gat gtg tac tct tat atc gca tcg 34664 Val Val Arg Val Asn Thr Thr Asp Val Tyr Ser Tyr Ile Ala Ser 4750 4755 4760 gag tat acc cac cgc ccc gat aac gta gaa tcc caa tgg gcc gct 34709 Glu Tyr Thr His Arg Pro Asp Asn Val Glu Ser Gln Trp Ala Ala 4765 4770 4775 gca tta gtt 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acc tcg act ggg tct ggc gtt ttg gat 35069 His Ala Val Leu Glu Thr Thr Ser Thr Gly Ser Gly Val Leu Asp 4885 4890 4895 tgt cgt cgt aga cgc cgt cct tca tgg act cct cct tca agc gag 35114 Cys Arg Arg Arg Arg Arg Pro Ser Trp Thr Pro Pro Ser Ser Glu 4900 4905 4910 gaa aat tta gct tgt atc gac gat ggc ttg gta aat aat aca cat 35159 Glu Asn Leu Ala Cys Ile Asp Asp Gly Leu Val Asn Asn Thr His 4915 4920 4925 tcc acg gat aat tta cat aaa ccc gct aaa aag gtt ctc aaa ttt 35204 Ser Thr Asp Asn Leu His Lys Pro Ala Lys Lys Val Leu Lys Phe 4930 4935 4940 aaa cca act gta gac gtg ccg gat aaa aca caa gtg gca cat gta 35249 Lys Pro Thr Val Asp Val Pro Asp Lys Thr Gln Val Ala His Val 4945 4950 4955 tta ccc cgc cta cga gaa gtt gct aac acc cca gac gtt gtg tta 35294 Leu Pro Arg Leu Arg Glu Val Ala Asn Thr Pro Asp Val Val Leu 4960 4965 4970 aat gta tcc aat gta gat acg cct gaa tcc agt ccc act ttt tca 35339 Asn Val Ser Asn Val Asp Thr Pro Glu Ser Ser Pro Thr Phe Ser 4975 4980 4985 cgg aac atg aat gta gga agc agt ttg 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Ala Leu Pro Asp Glu Gly Ile Val Glu Glu Thr Thr Leu Ser 6475 6480 6485 gca tta cgc gtg gcc aat gag gtc aat gag cta cgc att gaa tac 39884 Ala Leu Arg Val Ala Asn Glu Val Asn Glu Leu Arg Ile Glu Tyr 6490 6495 6500 gaa tcc gct ata aaa tcc ggg ttt tct gcc ttt tcc acc ttt gtt 39929 Glu Ser Ala Ile Lys Ser Gly Phe Ser Ala Phe Ser Thr Phe Val 6505 6510 6515 agg cat cgc cac gcc gaa tgg ggt aaa acc aac gca cgc aga gcc 39974 Arg His Arg His Ala Glu Trp Gly Lys Thr Asn Ala Arg Arg Ala 6520 6525 6530 att gca gag ata tac gcc ggc ctt ata aca aca aca ttg aca cga 40019 Ile Ala Glu Ile Tyr Ala Gly Leu Ile Thr Thr Thr Leu Thr Arg 6535 6540 6545 caa tac ggg gtt cat tgg gac aag ctt att tat tct ttt gaa aaa 40064 Gln Tyr Gly Val His Trp Asp Lys Leu Ile Tyr Ser Phe Glu Lys 6550 6555 6560 cac cac cta act tct gta atg ggc aat gga cta act aaa cca atc 40109 His His Leu Thr Ser Val Met Gly Asn Gly Leu Thr Lys Pro Ile 6565 6570 6575 cag aga agg ggt gat gta cgc gta tta gag tta acc cta tct gat 40154 Gln Arg Arg Gly 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att atc caa acc ctg gaa acg ccc 54204 Leu Glu Glu Leu His Asp Gln Ile Ile Gln Thr Leu Glu Thr Pro 9020 9025 9030 tgg acc gta gaa ggc gct cta gaa gca gta aag att cta gat gaa 54249 Trp Thr Val Glu Gly Ala Leu Glu Ala Val Lys Ile Leu Asp Glu 9035 9040 9045 aaa acg aca gcg gga gat ggg gaa acc ccc aca aac cta gca ttt 54294 Lys Thr Thr Ala Gly Asp Gly Glu Thr Pro Thr Asn Leu Ala Phe 9050 9055 9060 aat ttt gat tct tgt gaa cca agc cat gac acc aca tct aac gta 54339 Asn Phe Asp Ser Cys Glu Pro Ser His Asp Thr Thr Ser Asn Val 9065 9070 9075 tta aac att tca ggg tca aac att tca ggg tca act gtc cct ggt 54384 Leu Asn Ile Ser Gly Ser Asn Ile Ser Gly Ser Thr Val Pro Gly 9080 9085 9090 ctt aaa cga ccc ccc gaa gat gac gaa ctc ttt gat ctt agt ggt 54429 Leu Lys Arg Pro Pro Glu Asp Asp Glu Leu Phe Asp Leu Ser Gly 9095 9100 9105 att ccc ata aaa cat ggg aac att aca atg gaa atg att taa 54471 Ile Pro Ile Lys His Gly Asn Ile Thr Met Glu Met Ile 9110 9115 9120 cctccctctt tatccaatta aagcccacac gcgggtgagt gtacgtaata aacaagtcaa 54531 tattacatat tctgttgtgt tttctttttt tgtgtgtagt ccttacccat atgacctgta 54591 atatagtgtg tctccaacca ttcagcttac agtccagtgg acagtaacag cccgataac 54650 atg gaa ttg gat att aat cga aca ttg ttg gtt cta ctg ggt caa 54695 Met Glu Leu Asp Ile Asn Arg Thr Leu Leu Val Leu Leu Gly Gln 9125 9130 9135 gtt tat acg tac atc ttt cag gtt gaa ctg cta cgt cga tgt gat 54740 Val Tyr Thr Tyr Ile Phe Gln Val Glu Leu Leu Arg Arg Cys Asp 9140 9145 9150 cca agg gtg gcg tgt cgc ttt tta tat cgg tta gcg gct aac tgt 54785 Pro Arg Val Ala Cys Arg Phe Leu Tyr Arg Leu Ala Ala Asn Cys 9155 9160 9165 ttg aca gtt cgt tat tta tta aag ctg ttt ctc cgg gga ttt aat 54830 Leu Thr Val Arg Tyr Leu Leu Lys Leu Phe Leu Arg Gly Phe Asn 9170 9175 9180 acc cag cta aaa ttt gga aac act ccc acg gtt tgt gca ctg cat 54875 Thr Gln Leu Lys Phe Gly Asn Thr Pro Thr Val Cys Ala Leu His 9185 9190 9195 tgg gca tta tgt tat gta aag gga gaa ggt gag cgt ttg ttt gag 54920 Trp Ala Leu Cys Tyr Val Lys Gly Glu Gly Glu Arg Leu Phe 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cct cgg tgt atg tac gcc atc agc gag ctt aaa ttc tgg 55595 Pro Ala Pro Arg Cys Met Tyr Ala Ile Ser Glu Leu Lys Phe Trp 9425 9430 9435 tta acg tct aat tcc act gaa gga ccc caa cgt act tta gac gtg 55640 Leu Thr Ser Asn Ser Thr Glu Gly Pro Gln Arg Thr Leu Asp Val 9440 9445 9450 ttt gtt gat aat ttg gat gta tta aac gaa cat gaa aaa cac gca 55685 Phe Val Asp Asn Leu Asp Val Leu Asn Glu His Glu Lys His Ala 9455 9460 9465 gaa ctt aca gcc gta acg gtt gag ttg gcg tta ttt gga aaa act 55730 Glu Leu Thr Ala Val Thr Val Glu Leu Ala Leu Phe Gly Lys Thr 9470 9475 9480 ccc ata cac ttt gat agg gcg ttt tct gaa gaa ctc gga tct ctg 55775 Pro Ile His Phe Asp Arg Ala Phe Ser Glu Glu Leu Gly Ser Leu 9485 9490 9495 gat gca att gat agt att ttg gtt ggc aat cgc tca tcc tca cca 55820 Asp Ala Ile Asp Ser Ile Leu Val Gly Asn Arg Ser Ser Ser Pro 9500 9505 9510 gac agt cag ata gaa gca tta att aaa gcc tgt tat gcc cat cat 55865 Asp Ser Gln Ile Glu Ala Leu Ile Lys Ala Cys Tyr Ala His His 9515 9520 9525 cta tcg tcg cct ctc atg cgt cac att tct aac ccg agt cat gat 55910 Leu Ser Ser Pro Leu Met Arg His Ile Ser Asn Pro Ser His Asp 9530 9535 9540 aac gaa gcc gcc tta cgc caa ctt tta gaa aga gtt ggg tgt gag 55955 Asn Glu Ala Ala Leu Arg Gln Leu Leu Glu Arg Val Gly Cys Glu 9545 9550 9555 gat gat tta acc aaa gag gcg agt gac agc gct aca gca tcc gaa 56000 Asp Asp Leu Thr Lys Glu Ala Ser Asp Ser Ala Thr Ala Ser Glu 9560 9565 9570 tgt gat ctg aac gat gat agt agc ata act ttt gct gtt cat gga 56045 Cys Asp Leu Asn Asp Asp Ser Ser Ile Thr Phe Ala Val His Gly 9575 9580 9585 tgg gaa aac ctg tta tcc aaa gca aaa att gac gct gcg gaa aga 56090 Trp Glu Asn Leu Leu Ser Lys Ala Lys Ile Asp Ala Ala Glu Arg 9590 9595 9600 aaa cga gta tat ctt gaa cat ctg tct aag cgc tct cta acc agc 56135 Lys Arg Val Tyr Leu Glu His Leu Ser Lys Arg Ser Leu Thr Ser 9605 9610 9615 ctc ggt aga tgt atc cgc gaa cag cgc caa gag cta gaa aaa aca 56180 Leu Gly Arg Cys Ile Arg Glu Gln Arg Gln Glu Leu Glu Lys Thr 9620 9625 9630 ctc agg gta aac gtt tat gga gag gcc tta ttg cag aca ttt gtt 56225 Leu Arg Val Asn Val Tyr Gly Glu Ala Leu Leu Gln Thr Phe Val 9635 9640 9645 tcg atg caa aat ggg ttt ggg gca cga aac gtg ttt tta gct aag 56270 Ser Met Gln Asn Gly Phe Gly Ala Arg Asn Val Phe Leu Ala Lys 9650 9655 9660 gtt tcc cag gca ggg tgt att atc gac aat cgc att cag gaa gcg 56315 Val Ser Gln Ala Gly Cys Ile Ile Asp Asn Arg Ile Gln Glu Ala 9665 9670 9675 gcc ttt gat gca cat aga ttt ata agg aat acc tta gtt cga cat 56360 Ala Phe Asp Ala His Arg Phe Ile Arg Asn Thr Leu Val Arg His 9680 9685 9690 aca gta gat gcg gct atg tta cct gca ctt aca cat aaa ttt ttt 56405 Thr Val Asp Ala Ala Met Leu Pro Ala Leu Thr His Lys Phe Phe 9695 9700 9705 gag ttg gtc aac ggc cca ttg ttt aat cac gat gaa cac cgt ttt 56450 Glu Leu Val Asn Gly Pro Leu Phe Asn His Asp Glu His Arg Phe 9710 9715 9720 gca caa ccc cct aac acc gcc tta ttt ttt acc gtg gaa aac gtt 56495 Ala Gln Pro Pro Asn Thr Ala Leu Phe Phe Thr Val Glu Asn Val 9725 9730 9735 ggc cta ttt ccg cac tta aaa gag gaa ttg gca 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Thr Asp Thr Pro Ile Glu Glu Ile Gly Asp 10670 10675 10680 tca caa aac act gaa ccg tcg gta aat agc ggg ttt gat ccc gat 59428 Ser Gln Asn Thr Glu Pro Ser Val Asn Ser Gly Phe Asp Pro Asp 10685 10690 10695 aaa ttt cga gaa gcc cag gaa atg att aaa tat atg acg tta gta 59473 Lys Phe Arg Glu Ala Gln Glu Met Ile Lys Tyr Met Thr Leu Val 10700 10705 10710 tct gcg gct gag cgc caa gaa tct aaa gcc cgc aaa aaa aat aag 59518 Ser Ala Ala Glu Arg Gln Glu Ser Lys Ala Arg Lys Lys Asn Lys 10715 10720 10725 act agc gcc ctt tta act tca cgt ctt acc ggc ctt gct tta cga 59563 Thr Ser Ala Leu Leu Thr Ser Arg Leu Thr Gly Leu Ala Leu Arg 10730 10735 10740 aat cgc cga gga tac tcc cgt gtt cgc acc gag aat gta acg ggg 59608 Asn Arg Arg Gly Tyr Ser Arg Val Arg Thr Glu Asn Val Thr Gly 10745 10750 10755 gtg taa atagccaggg ggtttgtttt aatttattaa taaaaatgtg tattacgtta 59664 Val 10760 ctcatgtgtc tccattacgc atcacagggg gtatttatac ccgataatat acaaaacgcg 59724 ttttgtacct ctaccgcacc cgatatctta acggggttat t atg gaa tcg tct 59777 Met Glu Ser Ser aac att aac gcg cta caa caa ccg tcg tct atc gca cat cat ccg 59822 Asn Ile Asn Ala Leu Gln Gln Pro Ser Ser Ile Ala His His Pro 10765 10770 10775 tcc aaa cag tgc gct tca agt ctc aat gaa aca gta aaa gat tct 59867 Ser Lys Gln Cys Ala Ser Ser Leu Asn Glu Thr Val Lys Asp Ser 10780 10785 10790 ccc ccc gcg att tat gaa gat agg tta gaa cac acg ccg gta caa 59912 Pro Pro Ala Ile Tyr Glu Asp Arg Leu Glu His Thr Pro Val Gln 10795 10800 10805 tta ccc cgc gac ggt aca ccc cga gac gta tgt tct gtg gga cag 59957 Leu Pro Arg Asp Gly Thr Pro Arg Asp Val Cys Ser Val Gly Gln 10810 10815 10820 cta acc tgt cga gca tgt gca acg aaa cct ttt cgc ctt aac cgc 60002 Leu Thr Cys Arg Ala Cys Ala Thr Lys Pro Phe Arg Leu Asn Arg 10825 10830 10835 gac agc caa tac gac tac tta aac aca tgt cca ggg ggc cgt cat 60047 Asp Ser Gln Tyr Asp Tyr Leu Asn Thr Cys Pro Gly Gly Arg His 10840 10845 10850 att tca ctg gca ctg gag att ata acg ggt cga tgg gtt tgc atc 60092 Ile Ser Leu Ala Leu Glu Ile Ile Thr Gly Arg Trp Val Cys 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Leu Val Gln 11010 11015 11020 gta aat aag gag ccg tat aaa att atg tta tcc gac cga cac cca 65202 Val Asn Lys Glu Pro Tyr Lys Ile Met Leu Ser Asp Arg His Pro 11025 11030 11035 atc gcc tca act ata tgt ttt ccc ttg tcc aga tac tta gtg gga 65247 Ile Ala Ser Thr Ile Cys Phe Pro Leu Ser Arg Tyr Leu Val Gly 11040 11045 11050 gat atg tcc cca gcg gcg ctt cct ggg tta ttg ttt acg ctt ccc 65292 Asp Met Ser Pro Ala Ala Leu Pro Gly Leu Leu Phe Thr Leu Pro 11055 11060 11065 gct gaa ccc ccc ggg acc aac ttg gta gtt tgt acc gtt tca ctc 65337 Ala Glu Pro Pro Gly Thr Asn Leu Val Val Cys Thr Val Ser Leu 11070 11075 11080 ccc agt cat tta tcc aga gta agc aaa cgg gcc aga ccg gga gaa 65382 Pro Ser His Leu Ser Arg Val Ser Lys Arg Ala Arg Pro Gly Glu 11085 11090 11095 acg gtt aat ctg ccg ttt gtt atg gtt ctg aga aat gta tat ata 65427 Thr Val Asn Leu Pro Phe Val Met Val Leu Arg Asn Val Tyr Ile 11100 11105 11110 atg ctt att aat aca att ata ttt ctt aaa act aac aac tgg cac 65472 Met Leu Ile Asn Thr Ile Ile Phe Leu Lys Thr Asn Asn Trp His 11115 11120 11125 gcg ggc tgg aac aca ctg tca ttt tgt aat gat gta ttt aaa cag 65517 Ala Gly Trp Asn Thr Leu Ser Phe Cys Asn Asp Val Phe Lys Gln 11130 11135 11140 aaa tta caa aaa tcc gag tgt ata aaa cta cgc gaa gta cct ggg 65562 Lys Leu Gln Lys Ser Glu Cys Ile Lys Leu Arg Glu Val Pro Gly 11145 11150 11155 att gaa gac acg tta ttc gcc gtg ctt aaa ctt ccg gag ctt tgc 65607 Ile Glu Asp Thr Leu Phe Ala Val Leu Lys Leu Pro Glu Leu Cys 11160 11165 11170 gga gag ttt gga aat att ctg ccg tta tgg gca tgg gga atg gag 65652 Gly Glu Phe Gly Asn Ile Leu Pro Leu Trp Ala Trp Gly Met Glu 11175 11180 11185 acc ctt tca aac tgc tca cga agc atg tct ccg ttc gta tta tcg 65697 Thr Leu Ser Asn Cys Ser Arg Ser Met Ser Pro Phe Val Leu Ser 11190 11195 11200 tta gaa cag aca ccc cag cat gcg gca caa gaa cta aaa act ctg 65742 Leu Glu Gln Thr Pro Gln His Ala Ala Gln Glu Leu Lys Thr Leu 11205 11210 11215 cta ccc cag atg acc ccg gca aac atg tcc tcc ggt gca tgg aat 65787 Leu Pro Gln Met Thr Pro Ala Asn Met Ser Ser Gly Ala Trp Asn 11220 11225 11230 ata ttg aaa gag ctt gtt aat gcc gtt cag gac aac act tcc taa 65832 Ile Leu Lys Glu Leu Val Asn Ala Val Gln Asp Asn Thr Ser 11235 11240 atatacctag tatttacgta tgtaccagta aaaagatgat acacattgtc atactcgcgt 65892 gtacgtgttt ttctttttta tatatgcgtc atttattacc acatccttta atcccgcctt 65952 tatctcccta aaacggagtg gtaatattaa aagccgccaa gcctgttggt gggtgaggag 66012 gggtaaaggc acgctgtgtg cataacgttg cggtgatatt gtagcgcaag taacagcgac 66072 t atg ttt gcg cta gtt tta gcg gtg gta att ctt cct ctt tgg 66115 Met Phe Ala Leu Val Leu Ala Val Val Ile Leu Pro Leu Trp 11245 11250 11255 acc acg gct aat aaa tct tac gta aca cca acc cct gcg act cgc 66160 Thr Thr Ala Asn Lys Ser Tyr Val Thr Pro Thr Pro Ala Thr Arg 11260 11265 11270 tct atc gga cat atg tct gct ctt cta cga gaa tat tcc gac cgt 66205 Ser Ile Gly His Met Ser Ala Leu Leu Arg Glu Tyr Ser Asp Arg 11275 11280 11285 aat atg tct ctg aaa tta gaa gcc ttt tat cct act ggt ttc gat 66250 Asn Met Ser Leu Lys Leu Glu Ala Phe Tyr 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Ser Leu Ile Ser Leu Ser Ser Gly Pro 11500 11505 11510 ccg ata gaa tta att gtt gta cca cat aca gta aaa ctg aac gcg 66925 Pro Ile Glu Leu Ile Val Val Pro His Thr Val Lys Leu Asn Ala 11515 11520 11525 gtt aca agc gac acc aca tgg ttc cag cta aat cca ccg ggt ccg 66970 Val Thr Ser Asp Thr Thr Trp Phe Gln Leu Asn Pro Pro Gly Pro 11530 11535 11540 gat ccg ggg cca tct tat cga gtt tat tta ctt gga cgt ggg ttg 67015 Asp Pro Gly Pro Ser Tyr Arg Val Tyr Leu Leu Gly Arg Gly Leu 11545 11550 11555 gat atg aat ttt tca aag cat gct acg gtc gat ata tgc gca tat 67060 Asp Met Asn Phe Ser Lys His Ala Thr Val Asp Ile Cys Ala Tyr 11560 11565 11570 ccc gaa gag agt ttg gat tac cgc tat cat tta tcc atg gcc cac 67105 Pro Glu Glu Ser Leu Asp Tyr Arg Tyr His Leu Ser Met Ala His 11575 11580 11585 acg gag gct ctg cgg atg aca acg aag gcg gat caa cat gac ata 67150 Thr Glu Ala Leu Arg Met Thr Thr Lys Ala Asp Gln His Asp Ile 11590 11595 11600 aac gag gaa agc tat tac cat atc gcc gca aga ata gcc aca tca 67195 Asn Glu Glu Ser Tyr Tyr His Ile Ala Ala Arg Ile Ala Thr Ser 11605 11610 11615 att ttt gcg ttg tcg gaa atg ggc cgt acc aca gaa tat ttt ctg 67240 Ile Phe Ala Leu Ser Glu Met Gly Arg Thr Thr Glu Tyr Phe Leu 11620 11625 11630 tta gat gag atc gta gat gtt cag tat caa tta aaa ttc ctt aat 67285 Leu Asp Glu Ile Val Asp Val Gln Tyr Gln Leu Lys Phe Leu Asn 11635 11640 11645 tac att tta atg cgg ata gga gca gga gct cat ccc aac act ata 67330 Tyr Ile Leu Met Arg Ile Gly Ala Gly Ala His Pro Asn Thr Ile 11650 11655 11660 tcc gga acc tcg gat ctg atc ttt gcc gat cca tcg cag ctt cat 67375 Ser Gly Thr Ser Asp Leu Ile Phe Ala Asp Pro Ser Gln Leu His 11665 11670 11675 gac gaa ctt tca ctt ctt ttt ggt cag gta aaa ccc gca aat gtc 67420 Asp Glu Leu Ser Leu Leu Phe Gly Gln Val Lys Pro Ala Asn Val 11680 11685 11690 gat tat ttt att tca tat gat gaa gcc cgt gat caa cta aag acc 67465 Asp Tyr Phe Ile Ser Tyr Asp Glu Ala Arg Asp Gln Leu Lys Thr 11695 11700 11705 gca tac gcg ctt tcc cgt ggt caa gac cat gtg aat gca ctt tct 67510 Ala Tyr Ala Leu Ser Arg Gly Gln Asp His Val Asn Ala Leu Ser 11710 11715 11720 ctc gcc agg cgt gtt ata atg agc ata tac aag ggg ctg ctt gtg 67555 Leu Ala Arg Arg Val Ile Met Ser Ile Tyr Lys Gly Leu Leu Val 11725 11730 11735 aag caa aat tta aat gct aca gag agg cag gct tta ttt ttt gcc 67600 Lys Gln Asn Leu Asn Ala Thr Glu Arg Gln Ala Leu Phe Phe Ala 11740 11745 11750 tca atg att tta tta aat ttc cgc gaa gga cta gaa aat tca tct 67645 Ser Met Ile Leu Leu Asn Phe Arg Glu Gly Leu Glu Asn Ser Ser 11755 11760 11765 cgg gta tta gac ggt cgc aca act ttg ctt tta atg aca tcc atg 67690 Arg Val Leu Asp Gly Arg Thr Thr Leu Leu Leu Met Thr Ser Met 11770 11775 11780 tgt acg gca gct cac gcc acg caa gca gca ctt aac ata caa gaa 67735 Cys Thr Ala Ala His Ala Thr Gln Ala Ala Leu Asn Ile Gln Glu 11785 11790 11795 ggc ctg gca tac tta aat cct tca aaa cac atg ttt aca ata cca 67780 Gly Leu Ala Tyr Leu Asn Pro Ser Lys His Met Phe Thr Ile Pro 11800 11805 11810 aac gta tac agt cct tgt atg ggt tcc ctt cgt aca gac ctc acg 67825 Asn Val Tyr Ser Pro Cys Met Gly Ser Leu Arg Thr Asp Leu Thr 11815 11820 11825 gaa gag att cat gtt atg aat ctc ctg tcg gca ata cca aca cgc 67870 Glu Glu Ile His Val Met Asn Leu Leu Ser Ala Ile Pro Thr Arg 11830 11835 11840 cca gga ctt aac gag gta ttg cat acc caa cta gac gaa tct gaa 67915 Pro Gly Leu Asn Glu Val Leu His Thr Gln Leu Asp Glu Ser Glu 11845 11850 11855 ata ttc gac gcg gca ttt aaa acc atg atg att ttt acc aca tgg 67960 Ile Phe Asp Ala Ala Phe Lys Thr Met Met Ile Phe Thr Thr Trp 11860 11865 11870 act gcc aaa gat ttg cat ata ctc cac acc cat gta cca gaa gta 68005 Thr Ala Lys Asp Leu His Ile Leu His Thr His Val Pro Glu Val 11875 11880 11885 ttt acg tgt caa gat gca gcc gcg cgt aac gga gaa tat gtg ctc 68050 Phe Thr Cys Gln Asp Ala Ala Ala Arg Asn Gly Glu Tyr Val Leu 11890 11895 11900 att ctt cca gct gtc cag gga cac agt tat gtg att aca cga aac 68095 Ile Leu Pro Ala Val Gln Gly His Ser Tyr Val Ile Thr Arg Asn 11905 11910 11915 aaa cct caa agg ggt ttg gta tat tcc ctg gca gat gtg gat 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ttgcaaggcg taaaattcgc acaccttcct 68999 tttttgcaag atgtgacgtt tccttgtaac agggaagctg ggggagtggt aagaacaaca 69059 aagtttcagc caacgtgcca ataaagccca cttccctcaa gaggctgttt gctgtatcca 69119 caatggtccg tattaaatct tgagcaactt gatccgtgtc atcatcactg ggtaacgcgt 69179 taacataact acgcgttaaa tcttcaataa cggcataaca attaaacgct tcccaccgag 69239 acagtatata ttgaacaatc acgaaccgtt gacaggacgt cagatcacgt ccgtaagcat 69299 gcccgaaaaa tggaagttcc ccccgttcgc catataccgc aacaactgca gtatatatcg 69359 tctcacgggc ttcattaagt tcatcttcaa gtccaggcca ttttctggct ttaaatataa 69419 cctcgtccgc aaaaaaaacc gcacatgata acgcgcggat acaatgagta gtggctttat 69479 ggcgaggatc ccaaatgtcc attacccggg ggatggtcct aatctgtaca aagttactta 69539 gtgtaatatg atcggacttc ttacgccgtc taggctgttt ctcagaatac ggttcacccg 69599 aaatcggcac atcatctgct tttacgtctt ccgtaaccac atcagcagcg cgccgactaa 69659 caattatact tgttttttca tcgtcgttac ttccgttaag cgcgtctcgt atctcgggcg 69719 tcccgtcgaa taatccactc actagctcct gcaaactttc tggtaactcc aacatacgca 69779 tatacaccaa tgaaaaactg 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atg aac cca ccc caa gcc cgc gtc tcg gaa cag 70665 Met Asn Pro Pro Gln Ala Arg Val Ser Glu Gln 12090 12095 aca aag gac ttg ctt agc gtt atg gtt aac cag cac ccc gaa gag 70710 Thr Lys Asp Leu Leu Ser Val Met Val Asn Gln His Pro Glu Glu 12100 12105 12110 gac gca aaa gtg tgt aaa tcc agt gat aat tca ccg ctt tat aac 70755 Asp Ala Lys Val Cys Lys Ser Ser Asp Asn Ser Pro Leu Tyr Asn 12115 12120 12125 acc atg gtt atg tta tcg tat ggg ggt gat acg gac tta cta tta 70800 Thr Met Val Met Leu Ser Tyr Gly Gly Asp Thr Asp Leu Leu Leu 12130 12135 12140 agc tct gca tgt acc cgc aca tct acc gta aac agg tcg gcg ttt 70845 Ser Ser Ala Cys Thr Arg Thr Ser Thr Val Asn Arg Ser Ala Phe 12145 12150 12155 acg caa cac tcc gtg ttt tat att ata tcc acg gtg ttg att caa 70890 Thr Gln His Ser Val Phe Tyr Ile Ile Ser Thr Val Leu Ile Gln 12160 12165 12170 cca ata tgt tgt atc ttc ttt ttt ttt tac tat aaa gcg aca cgc 70935 Pro Ile Cys Cys Ile Phe Phe Phe Phe Tyr Tyr Lys Ala Thr Arg 12175 12180 12185 tgt atg ctc tta ttc aca gcc 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Ala Leu Ser Leu Leu Ser Asn Thr Tyr 12470 12475 12480 gtc gat ggg aca gag att gac tca tcg tta cgt ata aga gct atc 72061 Val Asp Gly Thr Glu Ile Asp Ser Ser Leu Arg Ile Arg Ala Ile 12485 12490 12495 caa cag atg gct cgt aat tta cgc acc gtt ttg gac tca ttt gaa 72106 Gln Gln Met Ala Arg Asn Leu Arg Thr Val Leu Asp Ser Phe Glu 12500 12505 12510 cga ggc act gcc gat caa ctt ctt ggt gtt cta ttg gag aaa gcc 72151 Arg Gly Thr Ala Asp Gln Leu Leu Gly Val Leu Leu Glu Lys Ala 12515 12520 12525 cca ccg cta tcg ctg ctt tca cca att aat aaa ttc caa ccc gag 72196 Pro Pro Leu Ser Leu Leu Ser Pro Ile Asn Lys Phe Gln Pro Glu 12530 12535 12540 gga cat cta aat cgt gtt gca cgc gcg gcc cta ctt tcg gac ctc 72241 Gly His Leu Asn Arg Val Ala Arg Ala Ala Leu Leu Ser Asp Leu 12545 12550 12555 aaa cgt aga gtc tgt gcg gat atg ttt ttt atg acc cga cac gcc 72286 Lys Arg Arg Val Cys Ala Asp Met Phe Phe Met Thr Arg His Ala 12560 12565 12570 agg gaa cct agg ctg atc tct gcg tat ctg tcg gat atg gtt tcg 72331 Arg Glu Pro Arg Leu Ile Ser Ala Tyr Leu Ser Asp Met Val Ser 12575 12580 12585 tgc acc caa cca tcg gtg atg gta tca cga ata act cat aca aac 72376 Cys Thr Gln Pro Ser Val Met Val Ser Arg Ile Thr His Thr Asn 12590 12595 12600 act cgc gga cgg cag gtt gac ggt gtg ttg gta aca aca gca acc 72421 Thr Arg Gly Arg Gln Val Asp Gly Val Leu Val Thr Thr Ala Thr 12605 12610 12615 tta aaa cgg caa cta tta cag gga att tta caa att gac gac acc 72466 Leu Lys Arg Gln Leu Leu Gln Gly Ile Leu Gln Ile Asp Asp Thr 12620 12625 12630 gcc gct gac gta cca gta aca tat ggc gaa atg gtt cta cag ggg 72511 Ala Ala Asp Val Pro Val Thr Tyr Gly Glu Met Val Leu Gln Gly 12635 12640 12645 aca aac ttg gta acc gcc ctt gtg atg gga aag gcc gtc cgc gga 72556 Thr Asn Leu Val Thr Ala Leu Val Met Gly Lys Ala Val Arg Gly 12650 12655 12660 atg gat gat gta gcc cgc cat ctc ctt gat ata acc gac cct aac 72601 Met Asp Asp Val Ala Arg His Leu Leu Asp Ile Thr Asp Pro Asn 12665 12670 12675 acg tta aac ata ccg tct ata ccc cca caa tcc aac tcc gat tca 72646 Thr Leu 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cac ttt gtg gat atg 73906 Val Ser Gly Arg Asn Gly Tyr Gln Ala Leu His Phe Val Asp Met 13100 13105 13110 gcc ggg cat aac ttc caa cga cgc gat aat gtg tta atc cac ggg 73951 Ala Gly His Asn Phe Gln Arg Arg Asp Asn Val Leu Ile His Gly 13115 13120 13125 aga ccc gtt cgg gga gac acg ggt cag ggt att ccc att act cca 73996 Arg Pro Val Arg Gly Asp Thr Gly Gln Gly Ile Pro Ile Thr Pro 13130 13135 13140 cac cat gac cgt gaa tgg ggt att ctc tcc aag att tac tac tat 74041 His His Asp Arg Glu Trp Gly Ile Leu Ser Lys Ile Tyr Tyr Tyr 13145 13150 13155 att gtc att cct gca ttt tcc cgc ggt tcc tgt tgt aca atg ggc 74086 Ile Val Ile Pro Ala Phe Ser Arg Gly Ser Cys Cys Thr Met Gly 13160 13165 13170 gtg cgt tat gat cgc cta tac cct gcg tta cag gca gtt atc gtt 74131 Val Arg Tyr Asp Arg Leu Tyr Pro Ala Leu Gln Ala Val Ile Val 13175 13180 13185 ccg gaa att ccc gct gat gaa gaa gcc cca act acc cca gaa gat 74176 Pro Glu Ile Pro Ala Asp Glu Glu Ala Pro Thr Thr Pro Glu Asp 13190 13195 13200 cca aga cac cct ctt cac gca cac caa ctc gtt ccg aac tct ctt 74221 Pro Arg His Pro Leu His Ala His Gln Leu Val Pro Asn Ser Leu 13205 13210 13215 aac gtt tac ttc cat aat gca cac cta acc gtt gat ggt gat gca 74266 Asn Val Tyr Phe His Asn Ala His Leu Thr Val Asp Gly Asp Ala 13220 13225 13230 ttg ctc aca cta caa gag tta atg gga gat atg gct gaa cga acg 74311 Leu Leu Thr Leu Gln Glu Leu Met Gly Asp Met Ala Glu Arg Thr 13235 13240 13245 acg gcc att tta gta tca agc gcc ccc gat gcg gga gcc gcc acg 74356 Thr Ala Ile Leu Val Ser Ser Ala Pro Asp Ala Gly Ala Ala Thr 13250 13255 13260 gca aca acc aga aat atg aga ata tat gac gga gcg ctt tac cat 74401 Ala Thr Thr Arg Asn Met Arg Ile Tyr Asp Gly Ala Leu Tyr His 13265 13270 13275 ggc ctt att atg atg gca tat cag gcg tac gat gaa acc att gca 74446 Gly Leu Ile Met Met Ala Tyr Gln Ala Tyr Asp Glu Thr Ile Ala 13280 13285 13290 acg ggt act ttt ttt tat ccc gtt ccg gtc aac cct ctg ttt gca 74491 Thr Gly Thr Phe Phe Tyr Pro Val Pro Val Asn Pro Leu Phe Ala 13295 13300 13305 tgt ccg gaa cat ttg gca tca ttg cgt gga atg aca aat gct agg 74536 Cys Pro Glu His Leu Ala Ser Leu Arg Gly Met Thr Asn Ala Arg 13310 13315 13320 cgg gtt ttg gca aaa atg gta cca cca atc cct cct ttt ctg gga 74581 Arg Val Leu Ala Lys Met Val Pro Pro Ile Pro Pro Phe Leu Gly 13325 13330 13335 gcc aac cac cac gca act ata cgc caa ccc gtt gcc tac cat gta 74626 Ala Asn His His Ala Thr Ile Arg Gln Pro Val Ala Tyr His Val 13340 13345 13350 acg cat agt aag tcg gat ttt aat act ctt aca tat tct ctt ctt 74671 Thr His Ser Lys Ser Asp Phe Asn Thr Leu Thr Tyr Ser Leu Leu 13355 13360 13365 gga ggg tat ttt aag ttt aca cca ata tct ctt aca cat caa cta 74716 Gly Gly Tyr Phe Lys Phe Thr Pro Ile Ser Leu Thr His Gln Leu 13370 13375 13380 cga acg gga ttt cac ccc ggg att gcc ttt acc gta gtg cgc cag 74761 Arg Thr Gly Phe His Pro Gly Ile Ala Phe Thr Val Val Arg Gln 13385 13390 13395 gat cgc ttt gcc aca gag caa ctt tta tat gcc gag cgt gct tct 74806 Asp Arg Phe Ala Thr Glu Gln Leu Leu Tyr Ala Glu Arg Ala Ser 13400 13405 13410 gaa tcg tac ttt gtc gga caa atc caa gta cac cat cat gat gct 74851 Glu Ser Tyr Phe Val Gly Gln Ile Gln Val His His His Asp Ala 13415 13420 13425 att ggg ggg gta aac ttt acc cta acc caa ccc aga gct cac gtg 74896 Ile Gly Gly Val Asn Phe Thr Leu Thr Gln Pro Arg Ala His Val 13430 13435 13440 gac ctg gga gtc ggg tat aca gct gta tgt gcc aca gca gcc ctg 74941 Asp Leu Gly Val Gly Tyr Thr Ala Val Cys Ala Thr Ala Ala Leu 13445 13450 13455 cga tgc cct ctc acg gat atg ggc aat act gcc caa aat ctt ttt 74986 Arg Cys Pro Leu Thr Asp Met Gly Asn Thr Ala Gln Asn Leu Phe 13460 13465 13470 ttt tca cga gga gga gtg cca atg tta cat gat aac gtt acc gaa 75031 Phe Ser Arg Gly Gly Val Pro Met Leu His Asp Asn Val Thr Glu 13475 13480 13485 tcg ttg cgt cgt ata aca gca tcg ggg ggt cgc tta aat ccc acc 75076 Ser Leu Arg Arg Ile Thr Ala Ser Gly Gly Arg Leu Asn Pro Thr 13490 13495 13500 gaa ccc cta ccc atc ttc ggc gga cta cgt cct gct aca tcg gca 75121 Glu Pro Leu Pro Ile Phe Gly Gly Leu Arg Pro Ala Thr Ser Ala 13505 13510 13515 gga att gca cga ggg caa gcc tct gtg tgt gag ttt gtg gcc atg 75166 Gly Ile Ala Arg Gly Gln Ala Ser Val Cys Glu Phe Val Ala Met 13520 13525 13530 ccg gtg tcc act gac cta caa tat ttt aga act gca tgc aat cct 75211 Pro Val Ser Thr Asp Leu Gln Tyr Phe Arg Thr Ala Cys Asn Pro 13535 13540 13545 aga ggt cga gca tct gga atg tta tat atg ggt gac cgt gac gcc 75256 Arg Gly Arg Ala Ser Gly Met Leu Tyr Met Gly Asp Arg Asp Ala 13550 13555 13560 gac ata gag gct ata atg ttt gat cac aca caa tcg gat gtt gct 75301 Asp Ile Glu Ala Ile Met Phe Asp His Thr Gln Ser Asp Val Ala 13565 13570 13575 tat aca gat cga gca act ctt aac cca tgg gca tca caa aaa cat 75346 Tyr Thr Asp Arg Ala Thr Leu Asn Pro Trp Ala Ser Gln Lys His 13580 13585 13590 tca tac ggt gac agg cta tac aac gga aca tac aac ctt aca ggc 75391 Ser Tyr Gly Asp Arg Leu Tyr Asn Gly Thr Tyr Asn Leu Thr Gly 13595 13600 13605 gct tct cct atc tac agc cca tgc ttt aag ttt ttt aca cca gcg 75436 Ala Ser Pro Ile Tyr Ser Pro Cys Phe Lys Phe Phe Thr Pro Ala 13610 13615 13620 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tggcatctta cttgagattt ggatacgctc 75810 ggccgacttg gtctgtttca cgcttcctta aacaac atg gct atg cca ttt gag 75864 Met Ala Met Pro Phe Glu 13725 ata gag gta ttg tta cca gga gaa cta tcc ccg gcg gaa aca tct 75909 Ile Glu Val Leu Leu Pro Gly Glu Leu Ser Pro Ala Glu Thr Ser 13730 13735 13740 gca tta cag aaa tgt gag gga aaa att att acc ttc tca acc ctg 75954 Ala Leu Gln Lys Cys Glu Gly Lys Ile Ile Thr Phe Ser Thr Leu 13745 13750 13755 cgt cat cga gct tca ctg gtg gat ata gcg ctg tcg tca tat tac 75999 Arg His Arg Ala Ser Leu Val Asp Ile Ala Leu Ser Ser Tyr Tyr 13760 13765 13770 att aac ggt gct cca cca gac acg ctc tcg ctg tta gag gca tac 76044 Ile Asn Gly Ala Pro Pro Asp Thr Leu Ser Leu Leu Glu Ala Tyr 13775 13780 13785 cga atg cga ttc gcg gca gtt ata aca cgg gtc atc ccg gga aag 76089 Arg Met Arg Phe Ala Ala Val Ile Thr Arg Val Ile Pro Gly Lys 13790 13795 13800 ttg ttg gcg cat gcc att ggc gtg ggt act cct aca ccc ggg ttg 76134 Leu Leu Ala His Ala Ile Gly Val Gly Thr Pro Thr Pro Gly Leu 13805 13810 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gcg ggg ctt att gcg 78271 Lys Gly Leu Leu His Val Val Ile Pro Asn Ala Gly Leu Ile Ala 14060 14065 14070 gcc gga ata gat ccc gca tta ctg att tta aag aaa ccc gga caa 78316 Ala Gly Ile Asp Pro Ala Leu Leu Ile Leu Lys Lys Pro Gly Gln 14075 14080 14085 cgc ttc aag gtt gaa gta caa aca aga tat cat gct aca ggt caa 78361 Arg Phe Lys Val Glu Val Gln Thr Arg Tyr His Ala Thr Gly Gln 14090 14095 14100 tgc gaa ccg tgg tgt caa gtt ttc gcc gcg tac att ccc gat aac 78406 Cys Glu Pro Trp Cys Gln Val Phe Ala Ala Tyr Ile Pro Asp Asn 14105 14110 14115 gcc tta aca aat ctc tta ata cca aaa acg gaa cca ttt gtt tca 78451 Ala Leu Thr Asn Leu Leu Ile Pro Lys Thr Glu Pro Phe Val Ser 14120 14125 14130 cac gtt ttt tcg gcc acg cat aat tca ggg gga ttg att tta tca 78496 His Val Phe Ser Ala Thr His Asn Ser Gly Gly Leu Ile Leu Ser 14135 14140 14145 ttg cct gtt tat ctt agc ccc ggt tta ttc ttt gat gca ttt aac 78541 Leu Pro Val Tyr Leu Ser Pro Gly Leu Phe Phe Asp Ala Phe Asn 14150 14155 14160 gtt gta gcg ata cga ata aat act gga aac cgc aag cac cgt gat 78586 Val Val Ala Ile Arg Ile Asn Thr Gly Asn Arg Lys His Arg Asp 14165 14170 14175 att tgt att atg tat gca gaa cta atc cca aac gga acg cgt tat 78631 Ile Cys Ile Met Tyr Ala Glu Leu Ile Pro Asn Gly Thr Arg Tyr 14180 14185 14190 ttt gct gat gga caa cgg gta ctt tta tta tgc aaa cag ctg att 78676 Phe Ala Asp Gly Gln Arg Val Leu Leu Leu Cys Lys Gln Leu Ile 14195 14200 14205 gcg tat atc cga tgc acc cct cgt ctt gca tcg tct ata aaa ata 78721 Ala Tyr Ile Arg Cys Thr Pro Arg Leu Ala Ser Ser Ile Lys Ile 14210 14215 14220 tac gca gag cat atg gtg gca gcc atg ggt gaa tca cac acg tca 78766 Tyr Ala Glu His Met Val Ala Ala Met Gly Glu Ser His Thr Ser 14225 14230 14235 aat ggg gac aat att gga ccc gtt tca tcc ata atc gat ctt gat 78811 Asn Gly Asp Asn Ile Gly Pro Val Ser Ser Ile Ile Asp Leu Asp 14240 14245 14250 cga cag tta act tct gga ggt att gat gac tcc cct gct gaa aca 78856 Arg Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ile Asp Asp Ser Pro Ala Glu Thr 14255 14260 14265 cgc ata cag gaa aat aat cgg gac gtc ctt gag cta ata aaa cgg 78901 Arg Ile Gln Glu Asn Asn Arg Asp Val Leu Glu Leu Ile Lys Arg 14270 14275 14280 gcc gta aac att gtt aac tcc agg cac ccc gtc cga cct tct agt 78946 Ala Val Asn Ile Val Asn Ser Arg His Pro Val Arg Pro Ser Ser 14285 14290 14295 tcc cgc gtt gca tct ggg ttg ctt caa agt gca aag ggc cac gga 78991 Ser Arg Val Ala Ser Gly Leu Leu Gln Ser Ala Lys Gly His Gly 14300 14305 14310 gcg caa act tcc aac aca gat ccg atc aat aac ggt tcc ttt gat 79036 Ala Gln Thr Ser Asn Thr Asp Pro Ile Asn Asn Gly Ser Phe Asp 14315 14320 14325 ggc gtc ctt gag ccg cct gga caa ggg cga ttt acg gga aag aaa 79081 Gly Val Leu Glu Pro Pro Gly Gln Gly Arg Phe Thr Gly Lys Lys 14330 14335 14340 aac aat tcg tcc gcc agc atc cca cct tta caa gac gtt cta ttg 79126 Asn Asn Ser Ser Ala Ser Ile Pro Pro Leu Gln Asp Val Leu Leu 14345 14350 14355 ttt acc cca gct tcg aca gaa ccc caa agt ctt atg gaa tgg ttc 79171 Phe Thr Pro Ala Ser Thr Glu Pro Gln Ser Leu Met Glu Trp Phe 14360 14365 14370 gac atc tgt tat 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cgt tct ctt aga cag gac aat gac 89419 Asn Ala Val Ala Ser Cys Met Arg Ser Leu Arg Gln Asp Asn Asp 16325 16330 16335 agc tgc ttg acc gat ttt ggc cct tcc gga ttt atg gcc gat aac 89464 Ser Cys Leu Thr Asp Phe Gly Pro Ser Gly Phe Met Ala Asp Asn 16340 16345 16350 att acc gcg ttt atg gaa aag tat ctt atg gag tca att aat acc 89509 Ile Thr Ala Phe Met Glu Lys Tyr Leu Met Glu Ser Ile Asn Thr 16355 16360 16365 gaa gaa caa att aaa gta ttt aaa gcc ctt gca tgt cca ata gaa 89554 Glu Glu Gln Ile Lys Val Phe Lys Ala Leu Ala Cys Pro Ile Glu 16370 16375 16380 cag cct aga cta gtc aat acg gca ata ttg ggg gcg tgt ata cga 89599 Gln Pro Arg Leu Val Asn Thr Ala Ile Leu Gly Ala Cys Ile Arg 16385 16390 16395 ata cct gaa gcg ttg gaa gca ttt gac gta ttt caa aaa ata tac 89644 Ile Pro Glu Ala Leu Glu Ala Phe Asp Val Phe Gln Lys Ile Tyr 16400 16405 16410 acg cac tac gct tcc ggt tgg ttt ccc gtc ctg gac aaa acc ggg 89689 Thr His Tyr Ala Ser Gly Trp Phe Pro Val Leu Asp Lys Thr Gly 16415 16420 16425 gaa ttt agc atc gcg 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ggg ggg agt gtt tct gcg gca acg ttt gcg tct atc tgc 90741 Arg His Gly Gly Ser Val Ser Ala Ala Thr Phe Ala Ser Ile Cys 16730 16735 16740 agg gcg gcg tcc tcg gct gcg tta gac gcc tgg ccc ctt gaa cca 90786 Arg Ala Ala Ser Ser Ala Ala Leu Asp Ala Trp Pro Leu Glu Pro 16745 16750 16755 ctg ggt aac gca gac acc tgg cgt tgt ctc cat ggc act gcc ctg 90831 Leu Gly Asn Ala Asp Thr Trp Arg Cys Leu His Gly Thr Ala Leu 16760 16765 16770 gcc act tta cgg cgc gta tta ggg ttt aaa tcg ttt tat tcg cca 90876 Ala Thr Leu Arg Arg Val Leu Gly Phe Lys Ser Phe Tyr Ser Pro 16775 16780 16785 gta aca ttc gag act gat acg aat aca ggt ctt ctg tta aaa aca 90921 Val Thr Phe Glu Thr Asp Thr Asn Thr Gly Leu Leu Leu Lys Thr 16790 16795 16800 atc ccc gat gaa cac gcg ttg aat aat gac aac acg cca tct acc 90966 Ile Pro Asp Glu His Ala Leu Asn Asn Asp Asn Thr Pro Ser Thr 16805 16810 16815 gga gta ttg agg gct aat ttt ccc gtg gcc att gat gtt tca gca 91011 Gly Val Leu Arg Ala Asn Phe Pro Val Ala Ile Asp Val Ser Ala 16820 16825 16830 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Leu Cys Val 17135 17140 17145 gaa caa acg gcc ttg gaa cag ggc ttt gct ata tgt act tat ata 92001 Glu Gln Thr Ala Leu Glu Gln Gly Phe Ala Ile Cys Thr Tyr Ile 17150 17155 17160 aaa gat gga ttt tgg gga atc ttc acc gat tta cat acg cgc aat 92046 Lys Asp Gly Phe Trp Gly Ile Phe Thr Asp Leu His Thr Arg Asn 17165 17170 17175 gta tgt tca gat cag gca cgt tgt tcg gcc tta aat tta gcg gcc 92091 Val Cys Ser Asp Gln Ala Arg Cys Ser Ala Leu Asn Leu Ala Ala 17180 17185 17190 acc tgc gaa aga gca gtc acg ggc tta tta cga att caa cta ggt 92136 Thr Cys Glu Arg Ala Val Thr Gly Leu Leu Arg Ile Gln Leu Gly 17195 17200 17205 ctt aac ttt aca ccc gcc atg gaa ccg gta ctc cgg gtc gag ggt 92181 Leu Asn Phe Thr Pro Ala Met Glu Pro Val Leu Arg Val Glu Gly 17210 17215 17220 gtg tac act cac gca ttt acc tgg tgt acc acg gga agc tgg ctg 92226 Val Tyr Thr His Ala Phe Thr Trp Cys Thr Thr Gly Ser Trp Leu 17225 17230 17235 tgg aat tta caa aca aac acg cct ccg gat tta gtt ggc gtg cca 92271 Trp Asn Leu Gln Thr Asn Thr Pro Pro Asp Leu Val Gly Val Pro 17240 17245 17250 tgg cga agt cag gcg gcg cga gat tta aag gag cgt ctt tca gga 92316 Trp Arg Ser Gln Ala Ala Arg Asp Leu Lys Glu Arg Leu Ser Gly 17255 17260 17265 ctc cta tgt acc gca aca aaa att cga gaa cgg ata cag gaa aat 92361 Leu Leu Cys Thr Ala Thr Lys Ile Arg Glu Arg Ile Gln Glu Asn 17270 17275 17280 tgc ata tgg gac cat gtc cta tac gac ata tgg gcc gga caa gtt 92406 Cys Ile Trp Asp His Val Leu Tyr Asp Ile Trp Ala Gly Gln Val 17285 17290 17295 gtg gag gct gcc aga aaa aca tac gtc gat ttt ttt gaa cat gtt 92451 Val Glu Ala Ala Arg Lys Thr Tyr Val Asp Phe Phe Glu His Val 17300 17305 17310 ttt gat cgc cgt tat act ccg gta tac tgg agt ctt cag gag caa 92496 Phe Asp Arg Arg Tyr Thr Pro Val Tyr Trp Ser Leu Gln Glu Gln 17315 17320 17325 aat tcg gaa aca aaa gca ata ccg gca tct tat ctg aca tac gga 92541 Asn Ser Glu Thr Lys Ala Ile Pro Ala Ser Tyr Leu Thr Tyr Gly 17330 17335 17340 cac atg caa gat aag gat tat aaa cca aga cag ata att atg gtt 92586 His Met Gln Asp Lys Asp Tyr Lys Pro Arg Gln Ile Ile Met Val 17345 17350 17355 cgt aat ccc aac cca cat gga cct cct act gtt gtt tac tgg gaa 92631 Arg Asn Pro Asn Pro His Gly Pro Pro Thr Val Val Tyr Trp Glu 17360 17365 17370 ttg cta cca tcg tgt gcc tgt att ccc ccc ata gac tgc gct gct 92676 Leu Leu Pro Ser Cys Ala Cys Ile Pro Pro Ile Asp Cys Ala Ala 17375 17380 17385 cat ctc aag ccc ctt ata cac acg ttt gtc act att att aac cat 92721 His Leu Lys Pro Leu Ile His Thr Phe Val Thr Ile Ile Asn His 17390 17395 17400 ctt cta gat gct cat aat gat ttt tca agt cca tca ttg aaa ttt 92766 Leu Leu Asp Ala His Asn Asp Phe Ser Ser Pro Ser Leu Lys Phe 17405 17410 17415 act gac gat ccc ctt gct tca tat aac ttc ttg ttt tta tga 92808 Thr Asp Asp Pro Leu Ala Ser Tyr Asn Phe Leu Phe Leu 17420 17425 17430 caaaaaaaca cgccgcaaca acccatcctt aaaataaaag gtttatttac tttacaaccc 92868 gtggtgaatt tttatacgtt tcaaataact gaacattttt cggtgttacc atggtgcgat 92928 ttaaccacca aaaatatacg ctcttctgat attccgaatc tcgtaaaggt ccatttaaca 92988 atcccggggg tacttgcacc acaccatctg gacagggggg ggttccgtgg ggcaggtcaa 93048 aacgctgacc caccccacat gaatatatag cctttataat attgggggcc gttccaggct 93108 gagggttcag taacttaaca aacatataat gcggcaatac gcgggttttt gtaaaggggt 93168 tgttatcaac gacatacatt agagtgttta acaaccataa aactccctca tataaaaacc 93228 gacgcatttt ttccaaaggt cctatttgac actcaacgcg tctaagatat acagacaatt 93288 gtacaaacag cgatggagat gccccggagg gcccaatgcc ttccagatac attaaaataa 93348 cacataaggt aaaatctagg acattatccg ggcggaatag agtcatccga tagattaaca 93408 ggcgcggagg cacccccacc gtatacaccc tatcttcaac cgcagttaat acggaaaaaa 93468 taaatccgcg gaacgctggt tgagtaacac actccatgta gtaacgatca caggacacct 93528 cacttgaatc accattcaac actactaaaa cggtctcttg gtgttccggt tttacgcgca 93588 gtgatacaac agagtttgcc aaaaagcgtg gcttcaaacc ggttacctcc cgcgcctcgc 93648 atacgaatct tggtattgct tgtattctaa gatcttcgat cacgtcgctc acatccaacc 93708 cctcttcggc tcgtgttagt aagttgtcga tcgttacgct gcaacctaaa atgctgggta 93768 tatttattcc ggacatccca tcggccatcc ccgcgcctcc ggtttgctcg aattttatcc 93828 agtaaggtcg aatccgctgc atttaccttg tgtacccgta acctctcagg ggggtgtcct 93888 ttcataaaat gggataggtt tttatatcca acatgcatgt attggttatt tattttattg 93948 ggttccggga ttctttcgtc atcttctgta gggtcaggca aaccccagga aggacttggt 94008 gttctccgtg ggccccgttt tattacctct gcgcgaacct gcatttcata taatattcgg 94068 atttgggata aataggactc tgttctcgcc tttttaaaaa tagcctggca taactcttcc 94128 tctgacctat gtacctcgct ttgagttacc aagaatccta atcgggtggc ccgtaatatg 94188 aatgaaaaat acggcgcaac tagtaatgag attgacgcat ttgaatatga tacagaaatt 94248 tcctggcctt gattattgtt tacccggtga agcttaaaac agcgaacaag ttcctgtttc 94308 catagctcag acaaacgttt tatatcatct ccataagggg ggatataacg agattgaaaa 94368 ctattggcaa tatatgcatc atcccctatt atgccggtaa gatctataac ctcgtgattt 94428 aaatcggcaa tacgtgtttc ttctgccatt gtaatatgtg accctttaga tggctttatt 94488 tttaccctct cttcccgtaa ccgtttcagc tctccttctt tgaactggag cctttcggtc 94548 agatcgctgt tcacatcctt gagaccctca atggttttga ataaattatt cacataaccc 94608 tcgagcatgc cgttgatact gttaaccacc gaagttttaa acgcactttg aacgtttgtt 94668 gttccggaca ttgccccccc gttaaaggat tggttggcct tgccaaaccc cggttgtgat 94728 gtgtccaccg atccacttcc ttccagaatg tgattgcccg tttcttctag ataggaacgt 94788 acggtttcgg taatatctcc aacatgtctc atgtttttta agttaactat tagctttaca 94848 agtctagacg cggccgatcc agcccgtgtt gtatcgttct cgcccattat acgatcaacc 94908 gcacgtgtgc tgtgagatct atcatcttca ttccggcgac ctattaacac gcgcaaaggg 94968 gctgtattta aaacttggca gacgcgagca tgttcacgta atgcataaca ggccaacacc 95028 tccccagaaa gccgctgtaa gggtgagtca aatactacac cctccccaca tacaacgggc 95088 ggccacacga ccaaacactc tcccttcatg cccgttacat catcctttgc cataattaat 95148 cttcggttat aattataata aagacgcgtc ctatcataat ccataatagc aacattttgc 95208 atacactcaa ctaggcttgt gacaaccgcc gctcctctgg ccaacgttgc atcggcaact 95268 tttaacatct gggacagttc tgccgcttga cccatatacg tatttaatgg tgcaggggtt 95328 ccattctgtt ctgatcgtac ctttcttaca acgggcacaa tacctacaca ggctatccag 95388 tccacgtatt tggcaaaacc gacccttcca tttaaaccac tggtatagag acaaccggtt 95448 attccacgca gaaactcaag taacgatgac tgtaatgttt gacgccaggt 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His Asn Tyr Ser Gln Ser Arg Asp 17885 17890 17895 cat gac atg gga aca gtt aaa tac gaa aca cat tca aat cgc gac 97429 His Asp Met Gly Thr Val Lys Tyr Glu Thr His Ser Asn Arg Asp 17900 17905 17910 tta att gta gcc cgt aca gac atc act tac gtg cta aat agt ctc 97474 Leu Ile Val Ala Arg Thr Asp Ile Thr Tyr Val Leu Asn Ser Leu 17915 17920 17925 gta gtt gta acc aca aga cta cgt aag tta gtt att gga ttc agt 97519 Val Val Val Thr Thr Arg Leu Arg Lys Leu Val Ile Gly Phe Ser 17930 17935 17940 ggt aca ttt caa tcg ttt gca aag gtt tta cgt gac gac tcc ttt 97564 Gly Thr Phe Gln Ser Phe Ala Lys Val Leu Arg Asp Asp Ser Phe 17945 17950 17955 gtg aag gct cga gga gag aca tcc atc gaa tat gct tac cgg ttt 97609 Val Lys Ala Arg Gly Glu Thr Ser Ile Glu Tyr Ala Tyr Arg Phe 17960 17965 17970 ctg tca aac cta atc ttt gga ggc ttg att aac ttt tac aat ttt 97654 Leu Ser Asn Leu Ile Phe Gly Gly Leu Ile Asn Phe Tyr Asn Phe 17975 17980 17985 ttg tta aat aaa aac cta cat ccc gat aag gta tcg tta gca tac 97699 Leu Leu Asn Lys Asn Leu His Pro Asp Lys Val Ser Leu Ala Tyr 17990 17995 18000 aaa cgg tta gct gcc tta acc ctg gag tta ttg tct gga aca aac 97744 Lys Arg Leu Ala Ala Leu Thr Leu Glu Leu Leu Ser Gly Thr Asn 18005 18010 18015 aaa gcc ccc tta cac gaa gca gcg gtt aat ggg gcg ggt gcc ggg 97789 Lys Ala Pro Leu His Glu Ala Ala Val Asn Gly Ala Gly Ala Gly 18020 18025 18030 att gac tgt gat ggt gca gct act tct gcc gat aaa gcc ttc tgc 97834 Ile Asp Cys Asp Gly Ala Ala Thr Ser Ala Asp Lys Ala Phe Cys 18035 18040 18045 ttt acc aaa gcc ccc gag tcc aaa gta acg gcc tcc ata ccc gaa 97879 Phe Thr Lys Ala Pro Glu Ser Lys Val Thr Ala Ser Ile Pro Glu 18050 18055 18060 gac ccg gat gat gta att ttt acg gca ctt aac gac gag gtt att 97924 Asp Pro Asp Asp Val Ile Phe Thr Ala Leu Asn Asp Glu Val Ile 18065 18070 18075 gac ttg gta tac tgc cag tac gaa ttt tcc tat ccc aaa tca tcc 97969 Asp Leu Val Tyr Cys Gln Tyr Glu Phe Ser Tyr Pro Lys Ser Ser 18080 18085 18090 aat gag gtc cat gct cag ttt ctg tta atg aaa gct att tac gat 98014 Asn Glu Val His Ala Gln Phe Leu Leu Met Lys Ala Ile Tyr Asp 18095 18100 18105 ggt cga tat gcc ata tta gca gag ctt ttc gaa agc agc ttt aca 98059 Gly Arg Tyr Ala Ile Leu Ala Glu Leu Phe Glu Ser Ser Phe Thr 18110 18115 18120 acc gcc ccc ttt agc gcg tat gtc gat aat gtt aat ttc aac gga 98104 Thr Ala Pro Phe Ser Ala Tyr Val Asp Asn Val Asn Phe Asn Gly 18125 18130 18135 agc gag ctt ttg atc ggc aat gtg cgg ggg ggg ctg tta tct ttg 98149 Ser Glu Leu Leu Ile Gly Asn Val Arg Gly Gly Leu Leu Ser Leu 18140 18145 18150 gca tta caa aca gat acg tat acc ctt ttg ggg tat act ttt gca 98194 Ala Leu Gln Thr Asp Thr Tyr Thr Leu Leu Gly Tyr Thr Phe Ala 18155 18160 18165 ccc gtg cca gtc ttt gta gag gaa ctg acc cga aaa aag ctg tac 98239 Pro Val Pro Val Phe Val Glu Glu Leu Thr Arg Lys Lys Leu Tyr 18170 18175 18180 cgc gaa act acc gaa atg tta tat gct cta cac gta cct ctt atg 98284 Arg Glu Thr Thr Glu Met Leu Tyr Ala Leu His Val Pro Leu Met 18185 18190 18195 gtc tta cag gat caa cat ggg ttt gtg tcc atc gta aac gct aac 98329 Val Leu Gln Asp Gln His Gly Phe Val Ser Ile Val Asn Ala Asn 18200 18205 18210 gta tgt gaa ttt acc gag tct ata gag gat gca gaa ttg gca atg 98374 Val Cys Glu Phe Thr Glu Ser Ile Glu Asp Ala Glu Leu Ala Met 18215 18220 18225 gcc acc acg gtg gac tat ggc ctt agt tct aaa cta gcc atg aca 98419 Ala Thr Thr Val Asp Tyr Gly Leu Ser Ser Lys Leu Ala Met Thr 18230 18235 18240 att gca cgc tca cag ggt ctg agt tta gag aag gta gct atc tgt 98464 Ile Ala Arg Ser Gln Gly Leu Ser Leu Glu Lys Val Ala Ile Cys 18245 18250 18255 ttt acg gcg gat aaa ctg cgc cta aat agt gtg tat gtt gcc atg 98509 Phe Thr Ala Asp Lys Leu Arg Leu Asn Ser Val Tyr Val Ala Met 18260 18265 18270 tcg cgt acg gtc tcc tct agg ttc tta aaa atg aat cta aac cct 98554 Ser Arg Thr Val Ser Ser Arg Phe Leu Lys Met Asn Leu Asn Pro 18275 18280 18285 cta cgg gaa cga tat gaa aaa tcc gca gaa att agc gat cac att 98599 Leu Arg Glu Arg Tyr Glu Lys Ser Ala Glu Ile Ser Asp His Ile 18290 18295 18300 ctt gcc gct cta cgt gat ccc aac gta cac gtt gtg tat taa 98641 Leu Ala Ala Leu Arg Asp Pro Asn Val His Val Val Tyr 18305 18310 agcattgtat aaaaacacgc atgcgggctt gctgttctca tttctaggtt ttgtcttaaa 98701 tacacccgcc atgagcatct ctggaccccc aacgacgttt attttatata ggttacatgg 98761 ggttaggcgg gttcttcact ggactttacc ggatcatgaa caaacactct acgcatttac 98821 gggtgggtca agatcaatgg cggtgaagac ggacgctcga tgtgatacaa tgagcggtgg 98881 tatgatcgtc cttcaacaca cccatacagt gaccctgcta accatagact gttctactga 98941 cttttcatca tacgcattta cgcaccggga tttccactta caggacaaac cccacgcaac 99001 atttgcgatg ccgtttatgt cctgggtcgg ttctgaccca acatctcagc tgtacagtaa 99061 tgtggggggg gtactatccg taataacgga agatgaccta tccatgtgta tctcaattgt 99121 tatatacggt ttacgggtaa acagacctga cgatcagacc acaccaacac caaccccgca 99181 ccagtataca tcgcaaaggc ggcagcctga aaccaactgt ccttcttcac cacaaccggc 99241 ctttttcaca tcagacgacg acgttctttc gttaatatta cgggacgccg caaacgcgta 99301 aagacagatt caagactaac atttatccca actgattaca tttcatacgc gaataaacga 99361 cacaaaaaat ttatatttaa cggcttttaa tttgaagaca cctatcctct taacgttgat 99421 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Gly Gly Ile Cys His Arg Leu Phe Asp 18740 18745 18750 gcg tac ctg ggc tgc ggg tcc ctt gga gtc cca aga acc tac gag 112098 Ala Tyr Leu Gly Cys Gly Ser Leu Gly Val Pro Arg Thr Tyr Glu 18755 18760 18765 aga tcc tga caccccatcc ctttatatag aaaaaaaaaa taaatttaaa 112147 Arg Ser 18770 acatacaccg gataaaagcg tactgttttt tatttaaatt tacacgctcg gcgttgcccc 112207 ggttcggtga tcaccgggtc ttatctatat acaccgtgta actcgaaccc ccgtgactcc 112267 ctccaatcgc gttaccaaac tcttcttccg tatccgtaga ttccgagtcc tcgaaatcgt 112327 ccacttatcc aacaaattgt gacgttatat atcccaaggc aaaggccgct cccgtcatag 112387 caaatacaaa gacaattatt agcgtaatat aacagaattt tttacgatga tatattttat 112447 gttgatattt tccaattcga cgcaaaaatt catctgccgt ttcattttcg ctatcactat 112507 aataacactt ttcagccgaa cggctcggtt gtatggctgt tatcgttgta ttatttggtt 112567 gcgctcgcgg ggttaccacc gcttccatca gtaaggccac ggcctcaccc tccatggtgt 112627 tttgtccggc catagaaatc cagattgtaa ggccagcagg ctagtttaaa agtgtttaat 112687 accacacctt ttgatattta tatacatgca agattctaga ttattcatca ataggtcgtt 112747 taaagcgcgt tttcataaac gttgtcagct ataccgacat tctcacaaag aggtaaagtt 112807 accttacgtt attattaaat aaaacatgta gacattatta ataatcctag gaacaatcaa 112867 atccatattt gtaagttatg tttaacccct cccctttttg tcattatctc cgccctctta 112927 taatcggatc actttataag tgtgtcggtg agtatatttt gtacagttgt tggacaacag 112987 gtttttggtt cattaacact atcaacataa gtcggggtat acaagtata atg aac gac 113045 Met Asn Asp gtt gat gca aca gac acc ttt gtt gga caa gga aag ttc cgt ggc 113090 Val Asp Ala Thr Asp Thr Phe Val Gly Gln Gly Lys Phe Arg Gly 18775 18780 18785 gcc atc tca aca tca ccg tca cat att atg caa aca tgt ggg ttt 113135 Ala Ile Ser Thr Ser Pro Ser His Ile Met Gln Thr Cys Gly Phe 18790 18795 18800 ata caa cag atg ttt cca gtt gaa atg tcg ccc ggc ata gaa tct 113180 Ile Gln Gln Met Phe Pro Val Glu Met Ser Pro Gly Ile Glu Ser 18805 18810 18815 gag gat gat ccc aat tat gac gtt aac atg gat ata cag tct ttt 113225 Glu Asp Asp Pro Asn Tyr Asp Val Asn Met Asp Ile Gln Ser Phe 18820 18825 18830 aat ata ttt gat ggt gta cac gaa act gaa gcc gaa gcc tct gtg 113270 Asn Ile Phe Asp Gly Val His Glu Thr Glu Ala Glu Ala Ser Val 18835 18840 18845 gca ttg tgc gca gaa gca cgc gtt gga att aat aaa gcg gga ttt 113315 Ala Leu Cys Ala Glu Ala Arg Val Gly Ile Asn Lys Ala Gly Phe 18850 18855 18860 gta ata tta aaa acg ttt aca cca ggg gcg gaa ggt ttt gcg ttt 113360 Val Ile Leu Lys Thr Phe Thr Pro Gly Ala Glu Gly Phe Ala Phe 18865 18870 18875 gcg tgt atg gac agt aaa aca tgt gaa cat gtg gtc att aaa gcg 113405 Ala Cys Met Asp Ser Lys Thr Cys Glu His Val Val Ile Lys Ala 18880 18885 18890 ggt caa cgt caa gga acg gcc acc gag gca acc gtg tta aga gcg 113450 Gly Gln Arg Gln Gly Thr Ala Thr Glu Ala Thr Val Leu Arg Ala 18895 18900 18905 tta acc cac cca tcc gtt gta cag ctt aaa gga acg ttt acg tat 113495 Leu Thr His Pro Ser Val Val Gln Leu Lys Gly Thr Phe Thr Tyr 18910 18915 18920 aac aaa atg aca tgt ctt ata tta cca cgt tac cga aca gat tta 113540 Asn Lys Met Thr Cys Leu Ile Leu Pro Arg Tyr Arg Thr Asp Leu 18925 18930 18935 tac tgc tat cta gct gca aag cgc aac ctc ccc ata tgt gac att 113585 Tyr Cys Tyr Leu Ala Ala Lys Arg Asn Leu Pro Ile Cys Asp Ile 18940 18945 18950 tta gca att cag cga tct gta tta cgc gcg tta cag tat ctt cat 113630 Leu Ala Ile Gln Arg Ser Val Leu Arg Ala Leu Gln Tyr Leu His 18955 18960 18965 aat aac agt att att cac cgt gat ata aaa tct gaa aat ata ttt 113675 Asn Asn Ser Ile Ile His Arg Asp Ile Lys Ser Glu Asn Ile Phe 18970 18975 18980 att aac cac cca ggt gat gtt tgt gtg gga gac ttt gga gca gcg 113720 Ile Asn His Pro Gly Asp Val Cys Val Gly Asp Phe Gly Ala Ala 18985 18990 18995 tgt ttc ccc gtg gat att aat gcc aac agg tat tat ggc tgg gct 113765 Cys Phe Pro Val Asp Ile Asn Ala Asn Arg Tyr Tyr Gly Trp Ala 19000 19005 19010 gga aca atc gcc aca aac tct cct gag tta ttg gct aga gat cca 113810 Gly Thr Ile Ala Thr Asn Ser Pro Glu Leu Leu Ala Arg Asp Pro 19015 19020 19025 tat gga cct gcc gtg gac ata tgg agt gcc ggg att gta tta ttt 113855 Tyr Gly Pro Ala Val Asp Ile Trp Ser Ala Gly Ile Val Leu Phe 19030 19035 19040 gaa 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ttt att gga gag caa cta cct 114684 Thr Glu Ile Lys Gly Gln Leu Val Phe Ile Gly Glu Gln Leu Pro 19215 19220 19225 acc ggg aca aac tat agc gga aca ctg gaa ctg tta tac gcg gat 114729 Thr Gly Thr Asn Tyr Ser Gly Thr Leu Glu Leu Leu Tyr Ala Asp 19230 19235 19240 acg gtg gcg ttt tgt ttc cgg tca gta caa gta ata aga tac gac 114774 Thr Val Ala Phe Cys Phe Arg Ser Val Gln Val Ile Arg Tyr Asp 19245 19250 19255 gga tgt ccc cgg att aga acg agc gct ttt att tcg tgt agg tac 114819 Gly Cys Pro Arg Ile Arg Thr Ser Ala Phe Ile Ser Cys Arg Tyr 19260 19265 19270 aaa cat tcg tgg cat tat ggt aac tca acg gat cgg ata tca aca 114864 Lys His Ser Trp His Tyr Gly Asn Ser Thr Asp Arg Ile Ser Thr 19275 19280 19285 gag ccg gat gct ggt gta atg ttg aaa att acc aaa ccg gga ata 114909 Glu Pro Asp Ala Gly Val Met Leu Lys Ile Thr Lys Pro Gly Ile 19290 19295 19300 aat gat gct ggt gtg tat gta ctt ctt gtt cgg tta gac cat agc 114954 Asn Asp Ala Gly Val Tyr Val Leu Leu Val Arg Leu Asp His Ser 19305 19310 19315 aga tcc acc gat 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tcc acg tta ccc gaa aag tcc ctt aat gat cct cca gaa aat cta 115314 Ser Thr Leu Pro Glu Lys Ser Leu Asn Asp Pro Pro Glu Asn Leu 19425 19430 19435 ctt ata att att cct ata gta gcg tct gtc atg atc ctc acc gcc 115359 Leu Ile Ile Ile Pro Ile Val Ala Ser Val Met Ile Leu Thr Ala 19440 19445 19450 atg gtt att gtt att gta ata agc gtt aag cga cgt aga att aaa 115404 Met Val Ile Val Ile Val Ile Ser Val Lys Arg Arg Arg Ile Lys 19455 19460 19465 aaa cat cca att tat cgc cca aat aca aaa aca aga agg ggc ata 115449 Lys His Pro Ile Tyr Arg Pro Asn Thr Lys Thr Arg Arg Gly Ile 19470 19475 19480 caa aat gcg aca cca gaa tcc gat gtg atg ttg gag gcc gcc att 115494 Gln Asn Ala Thr Pro Glu Ser Asp Val Met Leu Glu Ala Ala Ile 19485 19490 19495 gca caa cta gca acg att cgc gaa gaa tcc ccc cca cat tcc gtt 115539 Ala Gln Leu Ala Thr Ile Arg Glu Glu Ser Pro Pro His Ser Val 19500 19505 19510 gta aac ccg ttt gtt aaa tag aactaattat cccggatttt atattaaata 115590 Val Asn Pro Phe Val Lys 19515 aactatatgc gttttattta gcgttttgat tacgcgttgt gatatgaggg gaaggattaa 115650 gaatctccta actataagtt aacacgccca catttgggcg gggatgtttt atgaagcctt 115710 aaaggccgag ctggtataca cgagagcagt ccatggtttt agacctcggg cgaattgcgt 115770 ggttttaagt gactatattc cgagggtcgc ctgtaat atg ggg aca gtt aat 115822 Met Gly Thr Val Asn 19520 aaa cct gtg gtg ggg gta ttg atg ggg ttc gga att atc acg gga 115867 Lys Pro Val Val Gly Val Leu Met Gly Phe Gly Ile Ile Thr Gly 19525 19530 19535 acg ttg cgt ata acg aat ccg gtc aga gca tcc gtc ttg cga tac 115912 Thr Leu Arg Ile Thr Asn Pro Val Arg Ala Ser Val Leu Arg Tyr 19540 19545 19550 gat gat ttt cac acc gat gaa gac aaa ctg gat aca aac tcc gta 115957 Asp Asp Phe His Thr Asp Glu Asp Lys Leu Asp Thr Asn Ser Val 19555 19560 19565 tat gag cct tac tac cat tca gat cat gcg gag tct tca tgg gta 116002 Tyr Glu Pro Tyr Tyr His Ser Asp His Ala Glu Ser Ser Trp Val 19570 19575 19580 aat cgg gga gag tct tcg cga aaa gcg tac gat cat aac tca cct 116047 Asn Arg Gly Glu Ser Ser Arg Lys Ala Tyr Asp His Asn Ser Pro 19585 19590 19595 tat ata tgg cca cgt aat gat tat gat gga ttt tta gag aac gca 116092 Tyr Ile Trp Pro Arg Asn Asp Tyr Asp Gly Phe Leu Glu Asn Ala 19600 19605 19610 cac gaa cac cat ggg gtg tat aat cag ggc cgt ggt atc gat agc 116137 His Glu His His Gly Val Tyr Asn Gln Gly Arg Gly Ile Asp Ser 19615 19620 19625 ggg gaa cgg tta atg caa ccc aca caa atg tct gca cag gag gat 116182 Gly Glu Arg Leu Met Gln Pro Thr Gln Met Ser Ala Gln Glu Asp 19630 19635 19640 ctt ggg gac gat acg ggc atc cac gtt atc cct acg tta aac ggc 116227 Leu Gly Asp Asp Thr Gly Ile His Val Ile Pro Thr Leu Asn Gly 19645 19650 19655 gat gac aga cat aaa att gta aat gtg gac caa cgt caa tac ggt 116272 Asp Asp Arg His Lys Ile Val Asn Val Asp Gln Arg Gln Tyr Gly 19660 19665 19670 gac gtg ttt aaa gga gat ctt aat cca aaa ccc caa ggc caa aga 116317 Asp Val Phe Lys Gly Asp Leu Asn Pro Lys Pro Gln Gly Gln Arg 19675 19680 19685 ctc att gag gtg tca gtg gaa gaa aat cac ccg ttt act tta cgc 116362 Leu Ile Glu Val Ser Val Glu Glu Asn His Pro Phe Thr Leu 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Ala Val Ala Tyr Thr Val Val Ser Thr Val Asp His Phe 20005 20010 20015 gta aac gca att gaa gag cgt gga ttt ccg cca acg gcc ggt cag 117352 Val Asn Ala Ile Glu Glu Arg Gly Phe Pro Pro Thr Ala Gly Gln 20020 20025 20030 cca ccg gcg act act aaa ccc aag gaa att acc ccc gta aac ccc 117397 Pro Pro Ala Thr Thr Lys Pro Lys Glu Ile Thr Pro Val Asn Pro 20035 20040 20045 gga acg tca cca ctt cta cga tat gcc gca tgg acc gga ggg ctt 117442 Gly Thr Ser Pro Leu Leu Arg Tyr Ala Ala Trp Thr Gly Gly Leu 20050 20055 20060 gca gca gta gta ctt tta tgt ctc gta ata ttt tta atc tgt acg 117487 Ala Ala Val Val Leu Leu Cys Leu Val Ile Phe Leu Ile Cys Thr 20065 20070 20075 gct aaa cga atg agg gtt aaa gcc tat agg gta gac aag tcc ccg 117532 Ala Lys Arg Met Arg Val Lys Ala Tyr Arg Val Asp Lys Ser Pro 20080 20085 20090 tat aac caa agc atg tat tac gct ggc ctt cca gtg gac gat ttc 117577 Tyr Asn Gln Ser Met Tyr Tyr Ala Gly Leu Pro Val Asp Asp Phe 20095 20100 20105 gag gac tcg gaa tct acg gat acg gaa gaa gag ttt ggt aac gcg 117622 Glu Asp Ser Glu Ser Thr Asp Thr Glu Glu Glu Phe Gly Asn Ala 20110 20115 20120 att gga ggg agt cac ggg ggt tcg agt tac acg gtg tat ata gat 117667 Ile Gly Gly Ser His Gly Gly Ser Ser Tyr Thr Val Tyr Ile Asp 20125 20130 20135 aag acc cgg tga tcaccgaacc ggggcaacgc cgagcgtgta aatttaaata 117719 Lys Thr Arg 20140 aaaaacagta cgcttttatc cggtgtatgt tttaaattta tttttttttt ctatataaag 117779 ggatggggtg tcaggatctc tcgtaggttc ttgggactcc aagggacccg cagcccaggt 117839 acgcgtcaaa aagcctgtga caaattcccc cggggcggtc atataattcg gcgcggatgc 117899 atttattatc gggcgacaat ccaatagtcg gaagtccggc gtgtcccaaa cagcaccaat 117959 atgccatcaa tatcagccgc tcgctgagct ccagatgcga ttgtggatcc ggcatgcatt 118019 gctcgcgtaa taacgataac accgctctgc ggatcggcgg aaccgagggt ggacgttgtc 118079 tatccgctgc gagctccccg cacatccgtc cgaaggcgtc ctttgccctc ccccacaaac 118139 tcgcgcacgg tctctcggag gggctgtgta taaaagcctc gtaggcctcg gtagatatgg 118199 cgcatagcgc ggcggcgaag taccgttcgg cgtcgttcat gagagcctgg tgcgcggggg 118259 tatcgtgtcg tgtgcagtaa agtccggcat attcaccgcc cgggtgctca ccgcgggatc 118319 cgcagagatt cataccacac ggcccgtgtg gggaccccgt gggttaatgg agacgttcaa 118379 accagcaccc tctaccctct aatatccaca acaccccact cccccacaga cagacatcaa 118439 aaaaagacac gagccaaacc attgtattta tttataaaga ctacacgcca tgggggggcg 118499 gtatatcatg ccggcgcggg gcttcgtgtc gacgtcgctt ccaatctaca cccccctcgc 118559 ccaacgcggt gagcgctttc gcggctgtat attccgcggt ttctgcaccc gcgtatcgct 118619 cgatggcacg ctggggtctc tttggggacg gggtgttgca cccatccccg tctcgataac 118679 aatcgccggg taccccgtct ggttcacaag aatcggtgct ctcctctgat tcttcttcca 118739 ctataaagtc ttccccgtcc gatgattccg cgtcggaatc ccgaaattca attacatccg 118799 atggcgtaga cccatcatcg tcgctatcgt cttcaccacc atcatcagat acgtcacatt 118859 ccagtgcgct cctatgcaaa ggaacattcg gcgcctcaat gaacccgtct tccccccgag 118919 ggggtcgatg ggacacttcc attaaagtag cgcgtaagca ctgcgtctgg gtgggttgaa 118979 gctgtaacaa ttcctcccag cacgctaacg tgggacgctg tctggtgcga cccattagat 119039 aaaagtcgag gcatatgcgc cgcaatcttc gtgaatctcg cgtgacgcgt cccgacgact 119099 gtgcaataca taaaaaaaca cggttgatgt cctcaacgag cctggccggg tggatctccc 119159 aacccggagt acaaaacgcg ccggggcccc gcgacgtatc ccggccgttc aggggtcctg 119219 gtgcagatcc atattccatc tttccgttaa catcaaccga tgccccgggt tttgactcgg 119279 acgagtcgcc ccgcgtagcc ggtgaggtgc aaaacatgtc cttggggccg tagtaacctt 119339 ttcccttaaa accgactcga cgctgtcgcg ttatgaatcg gacgaaccct gcacaacaaa 119399 acacacaccc aaacgtttac atctatgaat aaggctactt gggtaaaatg gcaatggggg 119459 attccggggc gggagacctt cgattgggtt gcctttataa caccaaaaaa aggggggggc 119519 cccgtgtgtt tttttttatc acgtcaaatc gattttaaaa agcctgccgc tccatttgga 119579 atatatatat tctgtgaaaa gcccgcccac accccataaa accgcgacat cgcgggaaca 119639 cgcgcgaaca agaaactctc tctctttctc tatatatata tatatatata tatatatata 119699 tagaaagaaa gtgcgaacgg tggttggaca catgccaaaa catgaaaacc catacagtga 119759 aaaaacggga agtgcgaatg cagatcaaaa gagtgtatcc gattggcgta caccacagac 119819 atgcggacgc ccaatttaac cccccccctt tttcaccccc ccaccccacc ccattccacc 119879 ccaggaagtg cgaacgggtt tacatgcctc agatatgaag ttcttcgact tgtttttgaa 119939 taaatttttt tgtgattttc tacaacggtt tagagaatta tggttataaa catcggcggg 119999 gtaccgcgcc ccctccccat cggcggggta ccgcgccccc tccccatcgg cggggtaccg 120059 cgccccctcc ccatcggcgg ggtaccgcgc cccctcccca tcggcggggt accgcgcccc 120119 ctccccatcg gcggggggtt acgtgaacac cacaaccccg tgtgtatttt atgggttatc 120179 gcgggcttcg tgccgcctga cataatcgtt gggaggggtg gtggtgtata cgcttgttga 120239 ttgcgcgaac gtaatgacga cggagaggga cccaaacaca ccgtcgacgt gcatttgatt 120299 aactagatgc cggatgggtg gaaacaaccc gtgttatata agatgttttg catgtgagac 120359 aaccccaatt gtgtttatgt atattatata tcgtctgtag acacacgatg attggttgtt 120419 atttaaacat atgtaaatga aattcacatg tctggtatcc cttgttatga tgttgtaagg 120479 tatgcggaaa tagacaccgg gcgtacatcg ccaaccagcg gtctctcctt aaacgcatac 120539 tatggtccat gaacttcccg cctcgagtct cgtccaatca ctacatcgtc ttatcattaa 120599 gaatatttac acggtgacga cacggggagg aaatatgcgg tcgagggggg ggcacaacac 120659 gttttaagta ctgttggaac tccctcacca accgcaatcg caatcctttg aaggctgcga 120719 gagcgtttgg aaaactcggg tacgtctaaa ttcaccccag tgcg atg gat acg 120772 Met Asp Thr ccg ccg atg cag cgc tct aca ccc caa cgc gcg ggg tcg cct gat 120817 Pro Pro Met Gln Arg Ser Thr Pro Gln Arg Ala Gly Ser Pro Asp 20145 20150 20155 act ttg gag tta atg gac ctg ttg gac gcg gcc gcg gcg gcc gcc 120862 Thr Leu Glu Leu Met Asp Leu Leu Asp Ala Ala Ala Ala Ala Ala 20160 20165 20170 gaa cac agg gcc cgg gtg gtc acc tcg agt cag cct gac gat cta 120907 Glu His Arg Ala Arg Val Val Thr Ser Ser Gln Pro Asp Asp Leu 20175 20180 20185 cta ttt gga gag aac ggg gtc atg gtg gga cgg gaa cac gag atc 120952 Leu Phe Gly Glu Asn Gly Val Met Val Gly Arg Glu His Glu Ile 20190 20195 20200 gtt tca att ccc tcc gta tcg gga ctt caa cca gaa ccc aga acg 120997 Val Ser Ile Pro Ser Val Ser Gly Leu Gln Pro Glu Pro Arg Thr 20205 20210 20215 gaa gat gtt ggc gaa gag cta aca caa gac gac tac gta tgc gag 121042 Glu Asp Val Gly Glu Glu Leu Thr Gln Asp Asp Tyr Val Cys Glu 20220 20225 20230 gac ggt cag gat cta atg ggc tcg cct gta atc ccg ctg gcc gag 121087 Asp Gly Gln Asp Leu Met Gly Ser Pro Val Ile Pro Leu Ala Glu 20235 20240 20245 gtc ttc cac acc cga ttc tcg gag gcc ggc gcg cga gaa cca aca 121132 Val Phe His Thr Arg Phe Ser Glu Ala Gly Ala Arg Glu Pro Thr 20250 20255 20260 gga gcc gat cgc tcc ctt gag aca gtc tct ctc gga acg aag ctt 121177 Gly Ala Asp Arg Ser Leu Glu Thr Val Ser Leu Gly Thr Lys Leu 20265 20270 20275 gct agg tct cca aaa cca ccg atg aac gat ggg gaa acg ggc aga 121222 Ala Arg Ser Pro Lys Pro Pro Met Asn Asp Gly Glu Thr Gly Arg 20280 20285 20290 ggt acg acc cct ccg ttc ccg cag gcc ttc tcc cct gta tcc ccc 121267 Gly Thr Thr Pro Pro Phe Pro Gln Ala Phe Ser Pro Val Ser Pro 20295 20300 20305 gcg tct cct gtt gga gac gcc gcc ggg aac gat caa cgg gaa gac 121312 Ala Ser Pro Val Gly Asp Ala Ala Gly Asn Asp Gln Arg Glu Asp 20310 20315 20320 cag cgg tct ata ccc cga caa acg acg aga gga aat tca cca ggt 121357 Gln Arg Ser Ile Pro Arg Gln Thr Thr Arg Gly Asn Ser Pro Gly 20325 20330 20335 ttg ccg tcg gtg gtc cat cga gac aga caa act cag tcc atc 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cgt tcg tcg ggg ggc 121717 Ala Arg Gly Ile Thr Pro Arg Val Pro Gly Arg Ser Ser Gly Gly 20445 20450 20455 aaa cct aga gcg ttt ttg gcc ctg ccg gga aga tcc cac gca cca 121762 Lys Pro Arg Ala Phe Leu Ala Leu Pro Gly Arg Ser His Ala Pro 20460 20465 20470 gac ccg att gag gat gac agc cca gtg gag aaa aag cca aag agt 121807 Asp Pro Ile Glu Asp Asp Ser Pro Val Glu Lys Lys Pro Lys Ser 20475 20480 20485 cgt gag ttt gtt tcg tct tca tcc tct tcc tcg tcg tgg gga tcg 121852 Arg Glu Phe Val Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Trp Gly Ser 20490 20495 20500 tca tcg gag gat gaa gac gat gaa ccc cgg cgc gtt tcg gtg gga 121897 Ser Ser Glu Asp Glu Asp Asp Glu Pro Arg Arg Val Ser Val Gly 20505 20510 20515 agt gaa act aca ggc agc agg tcc gga cgc gaa cac gcc cct tcc 121942 Ser Glu Thr Thr Gly Ser Arg Ser Gly Arg Glu His Ala Pro Ser 20520 20525 20530 ccg tca aat tcg gat gat tcg gac tca aat gat ggt ggg tcg acg 121987 Pro Ser Asn Ser Asp Asp Ser Asp Ser Asn Asp Gly Gly Ser Thr 20535 20540 20545 aaa caa aat atc caa ccg gga tat cga tcc atc agc ggt ccc gat 122032 Lys Gln Asn Ile Gln Pro Gly Tyr Arg Ser Ile Ser Gly Pro Asp 20550 20555 20560 ccg agg att cgt aag acc aaa cgt ctt gcg ggg gaa ccg ggg cgc 122077 Pro Arg Ile Arg Lys Thr Lys Arg Leu Ala Gly Glu Pro Gly Arg 20565 20570 20575 cag aga cag aaa tca ttt tcc ctg ccg cga tcc aga acc ccg ata 122122 Gln Arg Gln Lys Ser Phe Ser Leu Pro Arg Ser Arg Thr Pro Ile 20580 20585 20590 att ccc ccg gtg tcg ggg ccg ctc atg atg ccc gac gga agc cct 122167 Ile Pro Pro Val Ser Gly Pro Leu Met Met Pro Asp Gly Ser Pro 20595 20600 20605 tgg ccc gga tcg gca ccc ctc cca tcc aac agg gtg cgg ttt gga 122212 Trp Pro Gly Ser Ala Pro Leu Pro Ser Asn Arg Val Arg Phe Gly 20610 20615 20620 ccg tcc ggg gag acc aga gag ggt cac tgg gag gat gag gct gtg 122257 Pro Ser Gly Glu Thr Arg Glu Gly His Trp Glu Asp Glu Ala Val 20625 20630 20635 aga gcg gcg cgg gct cgt tac gag gcc tca acg gaa ccc gtg ccg 122302 Arg Ala Ala Arg Ala Arg Tyr Glu Ala Ser Thr Glu Pro Val Pro 20640 20645 20650 ctt tac gtg ccg gag ttg gga gat ccg gct aga cag tac cgc gcg 122347 Leu Tyr Val Pro Glu Leu Gly Asp Pro Ala Arg Gln Tyr Arg Ala 20655 20660 20665 ctg att aac ctg atc tac tgt cca gac aga gac cct ata gca tgg 122392 Leu Ile Asn Leu Ile Tyr Cys Pro Asp Arg Asp Pro Ile Ala Trp 20670 20675 20680 ctc cag aac ccc aag ctg acc ggt gtc aac tcg gcc ctg aac cag 122437 Leu Gln Asn Pro Lys Leu Thr Gly Val Asn Ser Ala Leu Asn Gln 20685 20690 20695 ttc tac caa aag ctg ttg cca ccg gga cgg gcg ggt acc gcc gtt 122482 Phe Tyr Gln Lys Leu Leu Pro Pro Gly Arg Ala Gly Thr Ala Val 20700 20705 20710 acg ggg agc gta gcg tct ccc gtt ccg cat gta ggc gaa gcc atg 122527 Thr Gly Ser Val Ala Ser Pro Val Pro His Val Gly Glu Ala Met 20715 20720 20725 gcc acg ggg gag gcc ctc tgg gct ctc ccc cac gcg gcc gcg gcc 122572 Ala Thr Gly Glu Ala Leu Trp Ala Leu Pro His Ala Ala Ala Ala 20730 20735 20740 gtg gct atg agc cgt cga tac gac cgg gcc caa aaa cac ttt atc 122617 Val Ala Met Ser Arg Arg Tyr Asp Arg Ala Gln Lys His Phe Ile 20745 20750 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(1)..(1002) <400> 43 atg cat tta aag cct acc aga ttt ttc cac gca aac caa ccg cca atg 48 Met His Leu Lys Pro Thr Arg Phe Phe His Ala Asn Gln Pro Pro Met 1 5 10 15 ccg cat tca tac gag atg gag gac tta tgc ttc gac gac atg caa tat 96 Pro His Ser Tyr Glu Met Glu Asp Leu Cys Phe Asp Asp Met Gln Tyr 20 25 30 cgc tgg tct ccc tcg aac aca ccc tat cga agt atg tct agg cga tat 144 Arg Trp Ser Pro Ser Asn Thr Pro Tyr Arg Ser Met Ser Arg Arg Tyr 35 40 45 aaa tcc gta tct cgg agc ggg cct tcg atg cgt gta cgc tcc aga acg 192 Lys Ser Val Ser Arg Ser Gly Pro Ser Met Arg Val Arg Ser Arg Thr 50 55 60 cca tgc cgc cgt caa acc att cga gga aaa ctt atg tca aag gag cgg 240 Pro Cys Arg Arg Gln Thr Ile Arg Gly Lys Leu Met Ser Lys Glu Arg 65 70 75 80 tct gtg tac cgc cat tat ttt aat tac atc gca agg tcc ccc cca gaa 288 Ser Val Tyr Arg His Tyr Phe Asn Tyr Ile Ala Arg Ser Pro Pro Glu 85 90 95 gaa cta gct acc gtt aga ggc tta atc gtg cca att att aag acg acc 336 Glu Leu Ala Thr Val Arg Gly Leu Ile Val Pro Ile Ile Lys Thr Thr 100 105 110 cct gtc acc ctt ccg ttt aac ttg ggt cag aca gtg gcg gat aac tgc 384 Pro Val Thr Leu Pro Phe Asn Leu Gly Gln Thr Val Ala Asp Asn Cys 115 120 125 ctg tcg tta tcc gga atg ggt tat cat tta ggt ctc gga ggt tat tgt 432 Leu Ser Leu Ser Gly Met Gly Tyr His Leu Gly Leu Gly Gly Tyr Cys 130 135 140 ccg aca tgc act gca tct gga gaa ccg cgt cta tgt cga acc gat cgg 480 Pro Thr Cys Thr Ala Ser Gly Glu Pro Arg Leu Cys Arg Thr Asp Arg 145 150 155 160 gcg gct ctg ata cta gca tat gtt cag cag ctt aac aac ata tac gaa 528 Ala Ala Leu Ile Leu Ala Tyr Val Gln Gln Leu Asn Asn Ile Tyr Glu 165 170 175 tat cgt gtg ttt ctt gca tcc att ttg gcg cta tca gac cga gcc aac 576 Tyr Arg Val Phe Leu Ala Ser Ile Leu Ala Leu Ser Asp Arg Ala Asn 180 185 190 atg caa gca gcg tcc gct gaa ccc cta ttg tcg agc gta ttg gca caa 624 Met Gln Ala Ala Ser Ala Glu Pro Leu Leu Ser Ser Val Leu Ala Gln 195 200 205 ccg gaa tta ttt ttt atg tat cat att atg agg gag ggg ggc atg cga 672 Pro Glu Leu Phe Phe Met Tyr His Ile Met Arg Glu Gly Gly Met Arg 210 215 220 gat ata cgc gta ctt ttt tat cgt gat gga gat gcc gga ggg ttt atg 720 Asp Ile Arg Val Leu Phe Tyr Arg Asp Gly Asp Ala Gly Gly Phe Met 225 230 235 240 atg tat gtt ata ttt ccg ggg aaa tct gtt cac ctc cat tac aga cta 768 Met Tyr Val Ile Phe Pro Gly Lys Ser Val His Leu His Tyr Arg Leu 245 250 255 atc gat cat ata cag gcc gcg tgt cgg ggg tat aaa ata gtc gca cac 816 Ile Asp His Ile Gln Ala Ala Cys Arg Gly Tyr Lys Ile Val Ala His 260 265 270 gtt tgg cag aca aca ttt tta ctg tcg gta tgt cgc aac cca gaa caa 864 Val Trp Gln Thr Thr Phe Leu Leu Ser Val Cys Arg Asn Pro Glu Gln 275 280 285 caa aca gag act gtg gtg cca tcc att gga aca tcg gac gtt tac tgt 912 Gln Thr Glu Thr Val Val Pro Ser Ile Gly Thr Ser Asp Val Tyr Cys 290 295 300 aaa atg tgt gac ctt aac ttt gat gga gaa ttg ctt ttg gaa tac aaa 960 Lys Met Cys Asp Leu Asn Phe Asp Gly Glu Leu Leu Leu Glu Tyr Lys 305 310 315 320 aga ctc tac gca tta ttt gat gac ttt gtt cct cct cgg tga 1002 Arg Leu Tyr Ala Leu Phe Asp Asp Phe Val Pro 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Ala Glu Pro Leu Leu Ser Ser Val Leu Ala Gln 195 200 205 Pro Glu Leu Phe Phe Met Tyr His Ile Met Arg Glu Gly Gly Met Arg 210 215 220 Asp Ile Arg Val Leu Phe Tyr Arg Asp Gly Asp Ala Gly Gly Phe Met 225 230 235 240 Met Tyr Val Ile Phe Pro Gly Lys Ser Val His Leu His Tyr Arg Leu 245 250 255 Ile Asp His Ile Gln Ala Ala Cys Arg Gly Tyr Lys Ile Val Ala His 260 265 270 Val Trp Gln Thr Thr Phe Leu Leu Ser Val Cys Arg Asn Pro Glu Gln 275 280 285 Gln Thr Glu Thr Val Val Pro Ser Ile Gly Thr Ser Asp Val Tyr Cys 290 295 300 Lys Met Cys Asp Leu Asn Phe Asp Gly Glu Leu Leu Leu Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Arg Leu Tyr Ala Leu Phe Asp Asp Phe Val Pro Pro Arg 325 330 <210> 45 <211> 1533 <212> DNA <213> Varicella zoster <220> <221> CDS <222> (1)..(1533) <400> 45 atg gat gct gac gac aca ccc ccc aac ctc caa ata tct cca act gca 48 Met Asp Ala Asp Asp Thr Pro Pro Asn Leu Gln Ile Ser Pro Thr Ala 1 5 10 15 gga cct ttg cgt tcc cac cac aat acc gac gga cat gaa cca aat gca 96 Gly Pro Leu Arg Ser His His Asn Thr Asp Gly His Glu Pro Asn Ala 20 25 30 acc gca gcc gat cag caa gaa cga gaa tcc acc aac ccc aca cac gga 144 Thr Ala Ala Asp Gln Gln Glu Arg Glu Ser Thr Asn Pro Thr His Gly 35 40 45 tgt gta aat cat cca tgg gcc aat ccg tca act gca aca tgc atg gaa 192 Cys Val Asn His Pro Trp Ala Asn Pro Ser Thr Ala Thr Cys Met Glu 50 55 60 tca cca gaa cga tca caa cag aca agc tta ttt tta tta aag cac ggc 240 Ser Pro Glu Arg Ser Gln Gln Thr Ser Leu Phe Leu Leu Lys His Gly 65 70 75 80 tta acg aga gat cca ata cat caa cgc gaa agg gtg gac gtt ttt cca 288 Leu Thr Arg Asp Pro Ile His Gln Arg Glu Arg Val Asp Val Phe Pro 85 90 95 caa ttt aac aaa ccc cca tgg gtt ttt aga att tcc aaa tta tcc cgt 336 Gln Phe Asn Lys Pro Pro Trp Val Phe Arg Ile Ser Lys Leu Ser Arg 100 105 110 tta att gta ccc atc ttc acg ctc aat gaa cag tta tgt ttt tct aaa 384 Leu Ile Val Pro Ile Phe Thr Leu Asn Glu Gln Leu Cys Phe Ser Lys 115 120 125 tta cag att cga gat aga ccc agg ttt gcg gga cgg gga acg tat ggg 432 Leu Gln Ile Arg Asp Arg Pro Arg Phe Ala Gly Arg Gly Thr Tyr Gly 130 135 140 cgt gtt cat ata tac cca tcg tca aaa ata gct gta aaa acc atg gac 480 Arg Val His Ile Tyr Pro Ser Ser Lys Ile Ala Val Lys Thr Met Asp 145 150 155 160 agt cgt gtt ttt aat aga gag tta att aac gcg att tta gcg agt gag 528 Ser Arg Val Phe Asn Arg Glu Leu Ile Asn Ala Ile Leu Ala Ser Glu 165 170 175 ggt tct ata cga gca ggg gaa agg cta ggt att tct agc ata gtt tgc 576 Gly Ser Ile Arg Ala Gly Glu Arg Leu Gly Ile Ser Ser Ile Val Cys 180 185 190 ctt tta ggt ttt tcg tta caa acc aaa cag cta ctg ttt ccg gca tac 624 Leu Leu Gly Phe Ser Leu Gln Thr Lys Gln Leu Leu Phe Pro Ala Tyr 195 200 205 gac atg gat atg gat gaa tac att gtt cgc ctg tcc aga cgg ttg aca 672 Asp Met Asp Met Asp Glu Tyr Ile Val Arg Leu Ser Arg Arg Leu Thr 210 215 220 ata cct gat cac ata gac aga aaa att gcc cat gta ttt tta gat ttg 720 Ile Pro Asp His Ile Asp Arg Lys Ile Ala His Val Phe Leu Asp Leu 225 230 235 240 gct caa gcg ttg acg ttt tta aat cga acg tgc ggc ctg acc cac cta 768 Ala Gln Ala Leu Thr Phe Leu Asn Arg Thr Cys Gly Leu Thr His Leu 245 250 255 gat gtg aaa tgt ggc aat att ttt ctt aac gtc gac aac ttt gcc tcg 816 Asp Val Lys Cys Gly Asn Ile Phe Leu Asn Val Asp Asn Phe Ala Ser 260 265 270 ttg gaa ata acc aca gca gta atc gga gac tat agc cta gta aca tta 864 Leu Glu Ile Thr Thr Ala Val Ile Gly Asp Tyr Ser Leu Val Thr Leu 275 280 285 aat acg tat tcc ctt tgt act cga gcg ata ttt gaa gtt gga aat cca 912 Asn Thr Tyr Ser Leu Cys Thr Arg Ala Ile Phe Glu Val Gly Asn Pro 290 295 300 tcc cac ccg gag cac gta cta cgc gta ccc cgg gat gca tcg cag atg 960 Ser His Pro Glu His Val Leu Arg Val Pro Arg Asp Ala Ser Gln Met 305 310 315 320 tca ttt cgt ttg gtg ttg agt cat gga aca aac caa ccc cct gaa atc 1008 Ser Phe Arg Leu Val Leu Ser His Gly Thr Asn Gln Pro Pro Glu Ile 325 330 335 ttg ctt gat tat att aat gga acg ggc ctt act aaa tat act gga acc 1056 Leu Leu Asp Tyr Ile Asn Gly Thr Gly Leu Thr Lys Tyr Thr Gly Thr 340 345 350 ttg ccc caa aga gtt gga ctt gcg att gat ctt tat gca ttg ggc caa 1104 Leu Pro Gln Arg Val Gly Leu Ala Ile Asp Leu Tyr Ala Leu Gly Gln 355 360 365 gca ctc tta gaa gtt atc ctg cta gga cgt ctt ccc gga caa ctg ccc 1152 Ala Leu Leu Glu Val Ile Leu Leu Gly Arg Leu Pro Gly Gln Leu Pro 370 375 380 att tca gta cat cgg acc ccg cat tat cac tac tac ggt cat aag tta 1200 Ile Ser Val His Arg Thr Pro His Tyr His Tyr Tyr Gly His Lys Leu 385 390 395 400 tca cca gat ttg gcg ctt gat acg ctg gca tat cga tgt gtc ctg gcg 1248 Ser Pro Asp Leu Ala Leu Asp Thr Leu Ala Tyr Arg Cys Val Leu Ala 405 410 415 cca tat ata ctc cca tct gac atc ccc ggg gac tta aat tat aat ccc 1296 Pro Tyr Ile Leu Pro Ser Asp Ile Pro Gly Asp Leu Asn Tyr Asn Pro 420 425 430 ttt ata cac gcc gga gag ctg aac acc cgt att tcc cgg aat tct tta 1344 Phe Ile His Ala Gly Glu Leu Asn Thr Arg Ile Ser Arg Asn Ser Leu 435 440 445 cgc cgg ata ttc cag tgt cac gca gtg cgt tac ggc gta acg cac tca 1392 Arg Arg Ile Phe Gln Cys His Ala Val Arg Tyr Gly Val Thr His Ser 450 455 460 aag ctt ttc gaa ggc ata cgc att ccg gcc tca tta tac cca gcc 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Phe Ser Lys 115 120 125 Leu Gln Ile Arg Asp Arg Pro Arg Phe Ala Gly Arg Gly Thr Tyr Gly 130 135 140 Arg Val His Ile Tyr Pro Ser Ser Lys Ile Ala Val Lys Thr Met Asp 145 150 155 160 Ser Arg Val Phe Asn Arg Glu Leu Ile Asn Ala Ile Leu Ala Ser Glu 165 170 175 Gly Ser Ile Arg Ala Gly Glu Arg Leu Gly Ile Ser Ser Ile Val Cys 180 185 190 Leu Leu Gly Phe Ser Leu Gln Thr Lys Gln Leu Leu Phe Pro Ala Tyr 195 200 205 Asp Met Asp Met Asp Glu Tyr Ile Val Arg Leu Ser Arg Arg Leu Thr 210 215 220 Ile Pro Asp His Ile Asp Arg Lys Ile Ala His Val Phe Leu Asp Leu 225 230 235 240 Ala Gln Ala Leu Thr Phe Leu Asn Arg Thr Cys Gly Leu Thr His Leu 245 250 255 Asp Val Lys Cys Gly Asn Ile Phe Leu Asn Val Asp Asn Phe Ala Ser 260 265 270 Leu Glu Ile Thr Thr Ala Val Ile Gly Asp Tyr Ser Leu Val Thr Leu 275 280 285 Asn Thr Tyr Ser Leu Cys Thr Arg Ala Ile Phe Glu Val Gly Asn Pro 290 295 300 Ser His Pro Glu His Val Leu Arg Val Pro Arg Asp Ala Ser Gln Met 305 310 315 320 Ser Phe Arg Leu Val Leu Ser His Gly Thr Asn Gln Pro Pro Glu Ile 325 330 335 Leu Leu Asp Tyr Ile Asn Gly Thr Gly Leu Thr Lys Tyr Thr Gly Thr 340 345 350 Leu Pro Gln Arg Val Gly Leu Ala Ile Asp Leu Tyr Ala Leu Gly Gln 355 360 365 Ala Leu Leu Glu Val Ile Leu Leu Gly Arg Leu Pro Gly Gln Leu Pro 370 375 380 Ile Ser Val His Arg Thr Pro His Tyr His Tyr Tyr Gly His Lys Leu 385 390 395 400 Ser Pro Asp Leu Ala Leu Asp Thr Leu Ala Tyr Arg Cys Val Leu Ala 405 410 415 Pro Tyr Ile Leu Pro Ser Asp Ile Pro Gly Asp Leu Asn Tyr Asn Pro 420 425 430 Phe Ile His Ala Gly Glu Leu Asn Thr Arg Ile Ser Arg Asn Ser Leu 435 440 445 Arg Arg Ile Phe Gln Cys His Ala Val Arg Tyr Gly Val Thr His Ser 450 455 460 Lys Leu Phe Glu Gly Ile Arg Ile Pro Ala Ser Leu Tyr Pro Ala Thr 465 470 475 480 Val Val Thr Ser Leu Leu Cys His Asp Asn Ser Glu Ile Arg Ser Asp 485 490 495 His Pro Leu Leu Trp His Asp Arg Asp Trp Ile Gly Ser Thr 500 505 510 <210> 47 <211> 246 <212> DNA <213> Varicella zoster <220> <221> CDS <222> (1)..(246) <400> 47 atg gga caa tct tca tcc agc ggt cga gga gga atc tgt gga ttg tgc 48 Met Gly Gln Ser Ser Ser Ser Gly Arg Gly Gly Ile Cys Gly Leu Cys 1 5 10 15 aaa cgg tac aac gag ctt gtt acg tgc aac gga gaa acc gtt gct ttg 96 Lys Arg Tyr Asn Glu Leu Val Thr Cys Asn Gly Glu Thr Val Ala Leu 20 25 30 aac tca gag ttc ttt gaa gac ttt gac ttt gat gag aat gta aca gag 144 Asn Ser Glu Phe Phe Glu Asp Phe Asp Phe Asp Glu Asn Val Thr Glu 35 40 45 gac gcc gat aaa tcc aca caa cgc cgc cca cga gtg atc gat gta aca 192 Asp Ala Asp Lys Ser Thr Gln Arg Arg Pro Arg Val Ile Asp Val Thr 50 55 60 cca aaa cga aaa cct tcg gga aag agc tcc cat tcc aaa tgc gca aaa 240 Pro Lys Arg Lys Pro Ser Gly Lys Ser Ser His Ser Lys Cys Ala Lys 65 70 75 80 tgt taa 246 Cys <210> 48 <211> 81 <212> PRT <213> Varicella zoster <400> 48 Met Gly Gln Ser Ser Ser Ser Gly Arg Gly Gly Ile Cys Gly Leu Cys 1 5 10 15 Lys Arg Tyr Asn Glu Leu Val Thr Cys Asn Gly Glu Thr Val Ala Leu 20 25 30 Asn Ser Glu Phe Phe Glu Asp Phe Asp Phe Asp Glu Asn Val Thr Glu 35 40 45 Asp Ala Asp Lys Ser Thr Gln Arg Arg Pro Arg Val Ile Asp Val Thr 50 55 60 Pro Lys Arg Lys Pro Ser Gly Lys Ser Ser His Ser Lys Cys Ala Lys 65 70 75 80 Cys <210> 49 <211> 735 <212> DNA <213> Varicella zoster <220> <221> CDS <222> (1)..(735) <400> 49 atg aaa aat ccg cag aaa tta gcg atc aca ttc ttg ccg ctc tac gtg 48 Met Lys Asn Pro Gln Lys Leu Ala Ile Thr Phe Leu Pro Leu Tyr Val 1 5 10 15 atc cca acg tac acg ttg tgt att aaa gca ttg tat aaa aac acg cat 96 Ile Pro Thr Tyr Thr Leu Cys Ile Lys Ala Leu Tyr Lys Asn Thr His 20 25 30 gcg ggc ttg ctg ttc tca ttt cta ggt ttt gtc tta aat aca ccc gcc 144 Ala Gly Leu Leu Phe Ser Phe Leu Gly Phe Val Leu Asn Thr Pro Ala 35 40 45 atg agc atc tct gga ccc cca acg acg ttt att tta tat agg tta cat 192 Met Ser Ile Ser Gly Pro Pro Thr Thr Phe Ile Leu Tyr Arg Leu His 50 55 60 ggg gtt agg cgg gtt ctt cac tgg act tta ccg gat cat gaa caa aca 240 Gly Val Arg Arg Val Leu His Trp Thr Leu Pro Asp His Glu Gln Thr 65 70 75 80 ctc tac gca ttt acg ggt ggg tca aga tca atg gcg gtg aag acg gac 288 Leu Tyr Ala Phe Thr Gly Gly Ser Arg Ser Met Ala Val Lys Thr Asp 85 90 95 gct cga tgt gat aca atg agc ggt ggt atg atc gtc ctt caa cac acc 336 Ala Arg Cys Asp Thr Met Ser Gly Gly Met Ile Val Leu Gln His Thr 100 105 110 cat aca gtg acc ctg cta acc ata gac tgt tct act gac ttt tca tca 384 His Thr Val Thr Leu Leu Thr Ile Asp Cys Ser Thr Asp Phe Ser Ser 115 120 125 tac gca ttt acg cac cgg gat ttc cac tta cag gac aaa ccc cac gca 432 Tyr Ala Phe Thr His Arg Asp Phe His Leu Gln Asp Lys Pro His Ala 130 135 140 aca ttt gcg atg ccg ttt atg tcc tgg gtc ggt tct gac cca aca tct 480 Thr Phe Ala Met Pro Phe Met Ser Trp Val Gly Ser Asp Pro Thr Ser 145 150 155 160 cag ctg tac agt aat gtg ggg ggg gta cta tcc gta ata acg gaa gat 528 Gln Leu Tyr Ser Asn Val Gly Gly Val Leu Ser Val Ile Thr Glu Asp 165 170 175 gac cta tcc atg tgt atc tca att gtt ata tac ggt tta cgg gta aac 576 Asp Leu Ser Met Cys Ile Ser Ile Val Ile Tyr Gly Leu Arg Val Asn 180 185 190 aga cct gac gat cag acc aca cca aca cca acc ccg cac cag tat aca 624 Arg Pro Asp Asp Gln Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro His Gln Tyr Thr 195 200 205 tcg caa agg cgg cag cct gaa acc aac tgt cct tct tca cca caa ccg 672 Ser Gln Arg Arg Gln Pro Glu Thr Asn Cys Pro Ser Ser Pro Gln Pro 210 215 220 gcc ttt ttc aca tca gac gac gac gtt ctt tcg tta ata tta cgg gac 720 Ala Phe Phe Thr Ser Asp Asp Asp Val Leu Ser Leu Ile Leu Arg Asp 225 230 235 240 gcc gca aac gcg taa 735 Ala Ala Asn Ala <210> 50 <211> 244 <212> PRT <213> Varicella zoster <400> 50 Met Lys Asn Pro Gln Lys Leu Ala Ile Thr Phe Leu Pro Leu Tyr Val 1 5 10 15 Ile Pro Thr Tyr Thr Leu Cys Ile Lys Ala Leu Tyr Lys Asn Thr His 20 25 30 Ala Gly Leu Leu Phe Ser Phe Leu Gly Phe Val Leu Asn Thr Pro Ala 35 40 45 Met Ser Ile Ser Gly Pro Pro Thr Thr Phe Ile Leu Tyr Arg Leu His 50 55 60 Gly Val Arg Arg Val Leu His Trp Thr Leu Pro Asp His Glu Gln Thr 65 70 75 80 Leu Tyr Ala Phe Thr Gly Gly Ser Arg Ser Met Ala Val Lys Thr Asp 85 90 95 Ala Arg Cys Asp Thr Met Ser Gly Gly Met Ile Val Leu Gln His Thr 100 105 110 His Thr Val Thr Leu Leu Thr Ile Asp Cys Ser Thr Asp Phe Ser Ser 115 120 125 Tyr Ala Phe Thr His Arg Asp Phe His Leu Gln Asp Lys Pro His Ala 130 135 140 Thr Phe Ala Met Pro Phe Met Ser Trp Val Gly Ser Asp Pro Thr Ser 145 150 155 160 Gln Leu Tyr Ser Asn Val Gly Gly Val Leu Ser Val Ile Thr Glu Asp 165 170 175 Asp Leu Ser Met Cys Ile Ser Ile Val Ile Tyr Gly Leu Arg Val Asn 180 185 190 Arg Pro Asp Asp Gln Thr Thr Pro Thr Pro Thr Pro His Gln Tyr Thr 195 200 205 Ser Gln Arg Arg Gln Pro Glu Thr Asn Cys Pro Ser Ser Pro Gln Pro 210 215 220 Ala Phe Phe Thr Ser Asp Asp Asp Val Leu Ser Leu Ile Leu Arg Asp 225 230 235 240 Ala Ala Asn Ala <210> 51 <211> 124884 <212> DNA <213> Varicella zoster <220> <221> CDS <222> (5569)..(6405) <220> <221> CDS <222> (6553)..(7095) <220> <221> CDS <222> (12245)..(12553) <220> <221> CDS <222> (15752)..(19684) <220> <221> CDS <222> (20400)..(21803) <220> <221> CDS <222> (23666)..(24583) <220> <221> CDS <222> (25259)..(25474) <220> <221> CDS <222> (31035)..(32030) <220> <221> CDS <222> 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ggactccgtc acccccgact ctgcgggggg ctcctccccc cgcgccctcc ccacacatcg 240 tcctcgtcct cggaggacga ggacgaggac aacagctcca ccttgaccgc cgggcgcaaa 300 cccacccggc ggtctcgcag cacacccggg gccaccgaca cgatgctcac cccaaaggat 360 gaccccggtg cgtccccgtc gtccccgccc ccctcctcgc tgtcccacgc gtcttcacac 420 cccacctccc aatcgtccag ctccaaagcg tgttctctgt cgtctgcggt gcgccgctgt 480 cgccccgcct gggtttctga cggccgttcc gagcccccgt ggtgtccgaa cacgaaccgt 540 gttccgtcgc tcccctccaa caccgtctcc gcggccccaa aaccgggcgg ccacattact 600 ctgggaatcg gggggagggc attccgagcc tcgtccgccg acgcatacag cgccaccgac 660 cgaccggcca cgggtggaag cacgagtggt tctgcggcag ggtcgggttc cagcagggcg 720 tggcggcaaa acaccctcgc ccaggtgggt acgtcgccgg cctccggccc ggcggccccc 780 ggtctccgtc cctcgggaag gaagacgggt cgaagcgcgg cacccaggcc ccatcggttt 840 gctgcgcggt ggctatgtgc cgcctcgtcc acaaagtcgg ctgccccgag ccccagaccc 900 cgagactgtc gcgcgaggtc cttgcaaccg tcaaaacccg gcagcacgta ctgccggtat 960 tcacggggcg acagggggac gcgggtcttg gggcccgcgc gggtacacac ggtgtatgcg 1020 acgttcccac cgcggcacaa acacaggggt tgttcgcccg ggtacaggtt ggcaaacgca 1080 gtctcgatac gagcaaaact cgctggccca aaggtgcgcg acgatgcaaa cacggcccgg 1140 gcgagtcctt ctgtgaccgc cgagtctggc catcggacga cggcctgggc gtccggtcgc 1200 gccggggccc ggacgtacac gtgatactga gacaaagcgg gtccatccct gggccacctc 1260 tcgagggcca ccgcgtccaa caccagcaac cggcgccggg cagaggccaa ccgcgagcct 1320 agatactcga cggccccggc aaaggccagg tctcgggtcg acagtaataa aacgccccgg 1380 gcgttcaaag cggacacgtc cggcgggccg gtccagttcc cggcccaggc atgagtgctc 1440 ggcaggcaca accggttact cagggctgcc aggaccacag acagtccccc tcgggatgga 1500 ctccatgacg gtcccggatc tgtcgcgagg gtgctctcga gggggccgtt gatgtcctct 1560 ccgggcaacg gatcgtagat gatcagaagc ctcacatcct ccgggtctgg gatctgccgc 1620 atccaggcgc acctccgtcg cagcgcctcc actccgctgg gtggaccaaa ccgtcggtct 1680 cctccgcccg gacgccgagc ggcgatttcc gccaaggcgc cgggatcaaa gcttagcgca 1740 gggcgccagg ccgtgggaaa caatgggtcg tcgaccagac gggcgatggt ttcgggggta 1800 cagtacgcct tgcgagcctg gtccgacggg accggggtat gcagggcccc ccggggaata 1860 cgccgaaatc ccccgtttgg ggccggtccg tcaagtggca tcgttattac ggcgggggga 1920 tccaccacag ggcccgaggt gatggtcacg ggctcggata cccgcctctt ggccttggaa 1980 accacatgat cgtctgcaac ccgggcgtcc gcgacgggtg tctccctaat cttgtcgagg 2040 aggcttctgc tctcgactgg ctgggacttg cgcttgcgcg gagttcgtaa acgatcatcc 2100 ggtggacaca cagaaagaga gcgtgcggcg gccgacggct gagggtcggg agcctgtgtg 2160 gccggggttg ttggagaagg gtgaccgcgg gagatccgcg ccgccggact ggagcccgtt 2220 gcctcggggt atgccatgct ggcaaaggct ctgcggagac tctgtaggat aaagtgtttt 2280 tgggcccggt cgtatcgacg gctcatagcc acggccgcgg ccgcgtgggg gagagcccag 2340 agggcctccc ccgtggccat ggcttcgcct acatgcggaa cgggagacgc tacgctcccc 2400 gtaacggcgg tacccgcccg tcccggtggc aacagctttt ggtagaactg gttcagggcc 2460 gagttgacac cggtcagctt ggggttctgg agccatgcta tagggtctct gtctggacag 2520 tagatcaggt taatcagcgc gcggtactgt ctagccggat ctcccaactc cggcacgtaa 2580 agcggcacgg gttccgttga ggcctcgtaa cgagcccgcg ccgctctcac agcctcatcc 2640 tcccagtgac cctctctggt ctccccggac ggtccaaacc gcaccctgtt ggatgggagg 2700 ggtgccgatc 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Ser Pro Lys Lys Lys Thr Leu Lys Val Lys Val Pro Leu Pro Ala 805 810 815 cgg aaa ccc ggt gga cct gta ccc ggc ccg gtt gag caa ttg tac cac 16576 Arg Lys Pro Gly Gly Pro Val Pro Gly Pro Val Glu Gln Leu Tyr His 820 825 830 835 gtc ctt tcg gac agc gtt ccc gct aag ggg gca aag gcg gac ctg ccg 16624 Val Leu Ser Asp Ser Val Pro Ala Lys Gly Ala Lys Ala Asp Leu Pro 840 845 850 ttt gag acc gat gat acc cgc cca agg aaa cat gat gcc cgg ggt ata 16672 Phe Glu Thr Asp Asp Thr Arg Pro Arg Lys His Asp Ala Arg Gly Ile 855 860 865 aca cct cgc gtc cct gga cgt tcg tcg ggg ggc aaa cct aga gcg ttt 16720 Thr Pro Arg Val Pro Gly Arg Ser Ser Gly Gly Lys Pro Arg Ala Phe 870 875 880 ttg gcc ctg ccg gga aga tcc cac gca cca gac ccg att gag gat gac 16768 Leu Ala Leu Pro Gly Arg Ser His Ala Pro Asp Pro Ile Glu Asp Asp 885 890 895 agc cca gtg gag aaa aag cca aag agt cgt gag ttt gtt tcg tct tca 16816 Ser Pro Val Glu Lys Lys Pro Lys Ser Arg Glu Phe Val Ser Ser Ser 900 905 910 915 tcc tct tcc tcg tcg tgg gga tcg tca tcg gag 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gtatgccagg ccttcttgta 57157 tgttaagtgc tgcttgcgtg gcgtgagctg ccgtacacat ggatgtcatt aaaagcaaag 57217 ttgtgcgacc gtctaatacc cgagatgaat tttctagtcc ttcgcggaaa tttaataaaa 57277 tcattgaggc aaaaaataaa gcctgcctct ctgtagcatt taaattttgc ttcacaagca 57337 gccccttgta tatgctcatt ataacacgcc tggcgagaga aagtgcattc acatggtctt 57397 gaccacggga aagcgcgtat gcggtcttta gttgatcacg ggcttcatca tatgaaataa 57457 aataatcgac atttgcgggt tttacctgac caaaaagaag tgaaagttcg tcatgaagct 57517 gcgatggatc ggcaaagatc agatccgagg ttccggatat agtgttggga tgagctcctg 57577 ctcctatccg cattaaaatg taattaagga attttaattg atactgaaca tctacgatct 57637 catctaacag aaaatattct gtggtacggc ccatttccga caacgcaaaa attgatgtgg 57697 ctattcttgc ggcgatatgg taatagcttt cctcgtttat gtcatgttga tccgccttcg 57757 ttgtcatccg cagagcctcc gtgtgggcca tggataaatg atagcggtaa tccaaactct 57817 cttcgggata tgcgcatata tcgaccgtag catgctttga aaaattcata tccaacccac 57877 gtccaagtaa ataaactcga taagatggcc ccggatccgg acccggtgga tttagctgga 57937 accatgtggt gtcgcttgta accgcgttca 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Glu Ala Thr Gly Thr Pro Thr Asn Asn Val Ile Leu Arg Gly 4250 4255 4260 gcg acg ggg ttt gat ggg aag ttt aaa agc ggt aat aat aac ttt 62282 Ala Thr Gly Phe Asp Gly Lys Phe Lys Ser Gly Asn Asn Asn Phe 4265 4270 4275 caa ttt tta tgt gaa cga tat ata gca cca ctg tat acg tta aat 62327 Gln Phe Leu Cys Glu Arg Tyr Ile Ala Pro Leu Tyr Thr Leu Asn 4280 4285 4290 cgg acc aca gag ctg act gaa atg ttt cct gga tta gtt gct ctt 62372 Arg Thr Thr Glu Leu Thr Glu Met Phe Pro Gly Leu Val Ala Leu 4295 4300 4305 tgt tta gac gcg cat acc cag ctt agt cgt gga agt tta gga aga 62417 Cys Leu Asp Ala His Thr Gln Leu Ser Arg Gly Ser Leu Gly Arg 4310 4315 4320 acc gta ata gat att tct tct gga cag tac caa gat cgg ctc ata 62462 Thr Val Ile Asp Ile Ser Ser Gly Gln Tyr Gln Asp Arg Leu Ile 4325 4330 4335 agc tta att gca ttg gaa tta gaa cac cgc cga caa aat gtt aca 62507 Ser Leu Ile Ala Leu Glu Leu Glu His Arg Arg Gln Asn Val Thr 4340 4345 4350 tcc cta ccc ata gcc gcc gtg gta tca ata cat gac agt gtt atg 62552 Ser Leu Pro Ile Ala Ala Val Val Ser Ile His Asp Ser Val Met 4355 4360 4365 ttg caa tat gaa cgg gga ctt gga atg tta atg cac caa ccg cgt 62597 Leu Gln Tyr Glu Arg Gly Leu Gly Met Leu Met His Gln Pro Arg 4370 4375 4380 gta agg gcg gca ttg gaa gaa agt cgc cgc ctt gcg cag ttc aac 62642 Val Arg Ala Ala Leu Glu Glu Ser Arg Arg Leu Ala Gln Phe Asn 4385 4390 4395 gtt aac agt gac tat gat ctt cta tat ttt gtc tgt ttg ggt gtc 62687 Val Asn Ser Asp Tyr Asp Leu Leu Tyr Phe Val Cys Leu Gly Val 4400 4405 4410 att cct cag ttt gcc tcc aca ccg tga gtattcacta tccggtccgt 62734 Ile Pro Gln Phe Ala Ser Thr Pro 4415 4420 ggggtgttta ta atg gct gct gaa gct gac gaa gag aac tgt gaa gcg 62782 Met Ala Ala Glu Ala Asp Glu Glu Asn Cys Glu Ala 4425 4430 tta tac gtg gct ggg tat tta gcc tta tat tca aag gac gaa ggg 62827 Leu Tyr Val Ala Gly Tyr Leu Ala Leu Tyr Ser Lys Asp Glu Gly 4435 4440 4445 gaa tta aat att acc cca gag att gtg cgg tcc gct ttg ccg cct 62872 Glu Leu Asn Ile Thr Pro Glu Ile Val Arg Ser Ala Leu Pro Pro 4450 4455 4460 act agt aaa ata cca ata aac atc gat cat cga aaa gac tgt gtc 62917 Thr Ser Lys Ile Pro Ile Asn Ile Asp His Arg Lys Asp Cys Val 4465 4470 4475 gtg ggt gaa gta atc gca atc att gag gac ata cgc gga cct ttt 62962 Val Gly Glu Val Ile Ala Ile Ile Glu Asp Ile Arg Gly Pro Phe 4480 4485 4490 ttt ttg ggt atc gtt aga tgc cct caa cta cat gcg gtg ctg ttt 63007 Phe Leu Gly Ile Val Arg Cys Pro Gln Leu His Ala Val Leu Phe 4495 4500 4505 gaa gcg gcc cat tcg aat ttt ttt gga aat aga gat tct gta tta 63052 Glu Ala Ala His Ser Asn Phe Phe Gly Asn Arg Asp Ser Val Leu 4510 4515 4520 tct ccg cta gaa cgt gcg tta tac ttg gtc aca aat tac tta ccc 63097 Ser Pro Leu Glu Arg Ala Leu Tyr Leu Val Thr Asn Tyr Leu Pro 4525 4530 4535 tcc gta tcc ctg tct tca aaa cga ttg tcc ccg aat gag ata cca 63142 Ser Val Ser Leu Ser Ser Lys Arg Leu Ser Pro Asn Glu Ile Pro 4540 4545 4550 gac ggt aat ttt ttt acc cat gtt gcg tta tgt gtt gtt gga aga 63187 Asp Gly Asn Phe Phe Thr His Val Ala Leu Cys Val Val Gly Arg 4555 4560 4565 cgc gtt gga aca gtg gtc aat tat gac tgt acc ccg gaa tct tca 63232 Arg Val Gly Thr Val Val Asn Tyr Asp Cys Thr Pro Glu Ser Ser 4570 4575 4580 att gaa cca ttc cgg gtt tta tcg atg gaa agt aaa gcg cgg tta 63277 Ile Glu Pro Phe Arg Val Leu Ser Met Glu Ser Lys Ala Arg Leu 4585 4590 4595 ttg tcg ctg gtt aaa gac tac gcg ggt tta aat aaa gta tgg aag 63322 Leu Ser Leu Val Lys Asp Tyr Ala Gly Leu Asn Lys Val Trp Lys 4600 4605 4610 gtt agc gaa gat aaa ctc gcc aag gtg tta tta tcc aca gcc gtg 63367 Val Ser Glu Asp Lys Leu Ala Lys Val Leu Leu Ser Thr Ala Val 4615 4620 4625 aac aat atg ctt tta aga gat aga tgg gac gtg gtt gca aaa cgt 63412 Asn Asn Met Leu Leu Arg Asp Arg Trp Asp Val Val Ala Lys Arg 4630 4635 4640 aga cgc gaa gcc gga att atg ggt cac gtt tat ctt cag gct agc 63457 Arg Arg Glu Ala Gly Ile Met Gly His Val Tyr Leu Gln Ala Ser 4645 4650 4655 acc gga tat gga ctt gct cgg ata acc aac gtt aat ggg gtg gag 63502 Thr Gly Tyr Gly Leu Ala Arg Ile Thr Asn Val Asn Gly Val Glu 4660 4665 4670 tct aaa tta ccc aac gcg ggt gtt ata aac gcc aca ttc cac ccc 63547 Ser Lys Leu Pro Asn Ala Gly Val Ile Asn Ala Thr Phe His Pro 4675 4680 4685 ggc ggg ccc ata tac gat ctc gcg ttg ggt gtt ggg gaa tca aat 63592 Gly Gly Pro Ile Tyr Asp Leu Ala Leu Gly Val Gly Glu Ser Asn 4690 4695 4700 gaa gat tgt gaa aag act gtt ccg cat tta aag gtt acg cag ttg 63637 Glu Asp Cys Glu Lys Thr Val Pro His Leu Lys Val Thr Gln Leu 4705 4710 4715 tgt agg aac gac agc gat atg gct tct gta gca ggt aac gct agt 63682 Cys Arg Asn Asp Ser Asp Met Ala Ser Val Ala Gly Asn Ala Ser 4720 4725 4730 aat atc tca cca cag ccc ccg tcg ggc gtt cca acc gga ggg gaa 63727 Asn Ile Ser Pro Gln Pro Pro Ser Gly Val Pro Thr Gly Gly Glu 4735 4740 4745 ttt gta ctg ata cct acc gcg tat tat tca cag ctg tta acc ggg 63772 Phe Val Leu Ile Pro Thr Ala Tyr Tyr Ser Gln Leu Leu Thr Gly 4750 4755 4760 cag act aaa aat ccg cag gta tca att gga gct cca aat aac gga 63817 Gln Thr Lys Asn Pro Gln Val Ser Ile Gly Ala Pro Asn Asn Gly 4765 4770 4775 cag tat atc gtc ggg cca tat gga tct cca 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Thr Val Gly Gln Asp Val Asn Ala Val Glu Ala Ser Ser Lys Ala 4990 4995 5000 cct tta ata cag ggg tcc acg gca gac gac gcc gat atg ttt gca 64537 Pro Leu Ile Gln Gly Ser Thr Ala Asp Asp Ala Asp Met Phe Ala 5005 5010 5015 aat cag atg atg gtg ggg cgg tgt taa ccaacaaata aaagtattac 64584 Asn Gln Met Met Val Gly Arg Cys 5020 5025 attcataaaa ggcgtgtttg gttttttttt ttttgttaag cggtgtcgtg ttaaacaaac 64644 agaaggcgtt tttatgggtg gtaaggtttt atttaagtta aatttaatcg gtgtcagaat 64704 cttcatcccc tgatgatggt tgttctcggt ctggaataat atatggcgcc atccattttt 64764 cctctggggt atccggaaac acacgcggga tgcaaaccca tcgacccgtt ataatctcca 64824 gtgccagtga aatatgacgg ccccctggac atgtgtttaa gtagtcgtat tggctgtcgc 64884 ggttaaggcg aaaaggtttc gttgcacatg ctcgacaggt tagctgtccc acagaacata 64944 cgtctcgggg tgtaccgtcg cggggtaatt gtaccggcgt gtgttctaac ctatcttcat 65004 aaatcgcggg gggagaatct tttactgttt cattgagact tgaagcgcac tgtttggacg 65064 gatgatgtgc gatagacgac ggttgttgta gcgcgttaat gttagacgat tccataataa 65124 ccccgttaag atatcgggtg 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Ile Arg Leu Val Val Pro Ser Ala Leu 6395 6400 6405 caa tgt tgc gat ggg gat ctt cca ata ttt gat cca caa cgc ccc 81001 Gln Cys Cys Asp Gly Asp Leu Pro Ile Phe Asp Pro Gln Arg Pro 6410 6415 6420 ccc gcc cgt tgt gtt ttt cag ttt aac ggc gaa gac aac gta tcc 81046 Pro Ala Arg Cys Val Phe Gln Phe Asn Gly Glu Asp Asn Val Ser 6425 6430 6435 gaa gcc ttt ccg gta gag tat att atg cgt tta atg gcg aat tgg 81091 Glu Ala Phe Pro Val Glu Tyr Ile Met Arg Leu Met Ala Asn Trp 6440 6445 6450 gcg caa gta gat tgt gac cct tac ata aaa att caa aat acg ggg 81136 Ala Gln Val Asp Cys Asp Pro Tyr Ile Lys Ile Gln Asn Thr Gly 6455 6460 6465 gtg tct gtg cta ttt caa ggt ttt ttt ttt cgt ccg act aac gca 81181 Val Ser Val Leu Phe Gln Gly Phe Phe Phe Arg Pro Thr Asn Ala 6470 6475 6480 cca gtg gct gaa gtg tcc att gac agt aat aac gtg att ctt agt 81226 Pro Val Ala Glu Val Ser Ile Asp Ser Asn Asn Val Ile Leu Ser 6485 6490 6495 tca acg tta agt acc ggt atc aac cta tct gct ttg gaa tca att 81271 Ser Thr Leu Ser Thr Gly Ile Asn Leu 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Gly Leu Ala Pro Phe Lys Gly Phe Thr Glu Ser Lys 7915 7920 7925 tat gct aag gga tgg tta cac caa gat ggg ttt tct acg ata agt 97773 Tyr Ala Lys Gly Trp Leu His Gln Asp Gly Phe Ser Thr Ile Ser 7930 7935 7940 tat tta gat tta cca tgg tgt acc ctg cga gat gat att tgc gct 97818 Tyr Leu Asp Leu Pro Trp Cys Thr Leu Arg Asp Asp Ile Cys Ala 7945 7950 7955 tat ggg tta tac aac tcg cag ttc tta gcg tta atg ccc aca gtt 97863 Tyr Gly Leu Tyr Asn Ser Gln Phe Leu Ala Leu Met Pro Thr Val 7960 7965 7970 tca tct gca cag gta acg gag tgc agt gag ggt ttc tct cca att 97908 Ser Ser Ala Gln Val Thr Glu Cys Ser Glu Gly Phe Ser Pro Ile 7975 7980 7985 tat aat aat atg ttt agt aag gtc acc acc tcg ggt gag tta ctt 97953 Tyr Asn Asn Met Phe Ser Lys Val Thr Thr Ser Gly Glu Leu Leu 7990 7995 8000 aga ccc aac tta gac ctt atg gac gaa cta aga gat atg tat tca 97998 Arg Pro Asn Leu Asp Leu Met Asp Glu Leu Arg Asp Met Tyr Ser 8005 8010 8015 tgt gaa gaa aaa cga ctg gaa gtt ata aac ata ctt gag aaa aac 98043 Cys Glu Glu Lys Arg Leu Glu Val Ile Asn Ile Leu Glu Lys Asn 8020 8025 8030 caa tgg tca gta ata cgt tcg ttt ggc tgt tta tct aat agt cac 98088 Gln Trp Ser Val Ile Arg Ser Phe Gly Cys Leu Ser Asn Ser His 8035 8040 8045 cca ctc tta aaa tat aaa aca gcg ttt gaa tat gag caa gag gat 98133 Pro Leu Leu Lys Tyr Lys Thr Ala Phe Glu Tyr Glu Gln Glu Asp 8050 8055 8060 ctc gtt gat atg tgt gca gaa agg gcg cca ttt att gac caa agt 98178 Leu Val Asp Met Cys Ala Glu Arg Ala Pro Phe Ile Asp Gln Ser 8065 8070 8075 caa tca atg act tta ttt att gag gaa cgc cca gac ggg aca att 98223 Gln Ser Met Thr Leu Phe Ile Glu Glu Arg Pro Asp Gly Thr Ile 8080 8085 8090 ccc gcc tcc aaa ata atg aat ttg ctt ata cgt gcc tat aaa gcc 98268 Pro Ala Ser Lys Ile Met Asn Leu Leu Ile Arg Ala Tyr Lys Ala 8095 8100 8105 ggc ctt aaa acg ggt atg tac tac tgt aaa att cgt aaa gct acg 98313 Gly Leu Lys Thr Gly Met Tyr Tyr Cys Lys Ile Arg Lys Ala Thr 8110 8115 8120 aac agc gga ctg ttt gcg gga ggc gaa tta acc tgt acc agt tgt 98358 Asn Ser Gly Leu Phe Ala Gly Gly Glu 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Glu Leu Leu Val Lys Ser Ala Pro 9900 9905 9910 ccc aat gaa tac gca ctg ttg tta att caa tgc aaa gat act gcc 114544 Pro Asn Glu Tyr Ala Leu Leu Leu Ile Gln Cys Lys Asp Thr Ala 9915 9920 9925 ctt gct gat gaa gac aat ttt ttt gtc gcc aac gga gtt att gat 114589 Leu Ala Asp Glu Asp Asn Phe Phe Val Ala Asn Gly Val Ile Asp 9930 9935 9940 gcg ggt tac aga gga gta att tca gcc ctt ttg tat tac cgg cca 114634 Ala Gly Tyr Arg Gly Val Ile Ser Ala Leu Leu Tyr Tyr Arg Pro 9945 9950 9955 gga gta acc gtt att tta ccc gga cat tta aca atc tac ttg ttc 114679 Gly Val Thr Val Ile Leu Pro Gly His Leu Thr Ile Tyr Leu Phe 9960 9965 9970 ccg gta aaa tta aga caa agt cgc ctt ctc cca aaa aac gtt ctt 114724 Pro Val Lys Leu Arg Gln Ser Arg Leu Leu Pro Lys Asn Val Leu 9975 9980 9985 aaa cat ctg gat cca att ttt aaa tcg ata caa gtt caa ccc tta 114769 Lys His Leu Asp Pro Ile Phe Lys Ser Ile Gln Val Gln Pro Leu 9990 9995 10000 tca aac tcg ccg tca aat tat gaa aaa ccc gtt ata cct gaa ttt 114814 Ser Asn Ser Pro Ser Asn Tyr Glu Lys Pro Val Ile Pro Glu Phe 10005 10010 10015 gct gat att tcc acg gta cag cag ggg caa cct tta cat agg gat 114859 Ala Asp Ile Ser Thr Val Gln Gln Gly Gln Pro Leu His Arg Asp 10020 10025 10030 tct gca gaa tac cat atc gat gtt ccc tta acc tac aaa cat atc 114904 Ser Ala Glu Tyr His Ile Asp Val Pro Leu Thr Tyr Lys His Ile 10035 10040 10045 atc aat cca aaa cgc caa gaa gac gcg gga tat gat att tgt gta 114949 Ile Asn Pro Lys Arg Gln Glu Asp Ala Gly Tyr Asp Ile Cys Val 10050 10055 10060 cca tat aac cta tat tta aaa agg aat gaa ttt ata aaa att gtc 114994 Pro Tyr Asn Leu Tyr Leu Lys Arg Asn Glu Phe Ile Lys Ile Val 10065 10070 10075 tta ccg att ata aga gac tgg gac tta caa cat ccg agt ata aac 115039 Leu Pro Ile Ile Arg Asp Trp Asp Leu Gln His Pro Ser Ile Asn 10080 10085 10090 gct tat att ttt gga aga tca tcg aaa agc cga tca ggc att atc 115084 Ala Tyr Ile Phe Gly Arg Ser Ser Lys Ser Arg Ser Gly Ile Ile 10095 10100 10105 gtg tgt cca acg gca tgg cct gca gga gaa cac tgt aaa ttc tac 115129 Val Cys Pro Thr Ala Trp Pro Ala Gly Glu His Cys Lys Phe Tyr 10110 10115 10120 gta tat aat ctc acg ggt gat gac ata cgt ata aaa acg gga gat 115174 Val Tyr Asn Leu Thr Gly Asp Asp Ile Arg Ile Lys Thr Gly Asp 10125 10130 10135 cgt ctt gca cag gtc ctg tta ata gat cac aac acc caa ata cac 115219 Arg Leu Ala Gln Val Leu Leu Ile Asp His Asn Thr Gln Ile His 10140 10145 10150 tta aaa cac aac gtt tta agt aat att gca ttt cct tat gct atc 115264 Leu Lys His Asn Val Leu Ser Asn Ile Ala Phe Pro Tyr Ala Ile 10155 10160 10165 cgc ggt aaa tgt ggc ata ccg ggt gta caa tgg tat ttt act aaa 115309 Arg Gly Lys Cys Gly Ile Pro Gly Val Gln Trp Tyr Phe Thr Lys 10170 10175 10180 acg tta gat cta ata gcc aca ccc agc gaa cgg gga acg cgt gga 115354 Thr Leu Asp Leu Ile Ala Thr Pro Ser Glu Arg Gly Thr Arg Gly 10185 10190 10195 ttt ggt tca act gat aaa gaa aca aac gat gtc gat ttt cta cta 115399 Phe Gly Ser Thr Asp Lys Glu Thr Asn Asp Val Asp Phe Leu Leu 10200 10205 10210 aaa cat taa atgtaataac cacgccagcc agcaatgttt taattttata 115448 Lys 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Ser Leu Tyr Ala His Tyr Glu 10410 10415 10420 cgt caa gta ttg gct gca tat cga cga ctc tac tgg ggg tat gga 116967 Arg Gln Val Leu Ala Ala Tyr Arg Arg Leu Tyr Trp Gly Tyr Gly 10425 10430 10435 tgc tcg ccg ttt tgg tat att gtt cga ttt gga ccc tct gaa aaa 117012 Cys Ser Pro Phe Trp Tyr Ile Val Arg Phe Gly Pro Ser Glu Lys 10440 10445 10450 acg cta gtg ttg gct aca cgc tat tac ttg tta caa acg gac aca 117057 Thr Leu Val Leu Ala Thr Arg Tyr Tyr Leu Leu Gln Thr Asp Thr 10455 10460 10465 agt tac aat acg ttg gaa acc ccc tta tat gac tta cag gca att 117102 Ser Tyr Asn Thr Leu Glu Thr Pro Leu Tyr Asp Leu Gln Ala Ile 10470 10475 10480 aaa gat ttg ttt tta act tac caa gtc ccg gca tta cct aat tgt 117147 Lys Asp Leu Phe Leu Thr Tyr Gln Val Pro Ala Leu Pro Asn Cys 10485 10490 10495 agt ggg tac aat att tcg gac ttg ttg tct ttt gat aaa ctt tcc 117192 Ser Gly Tyr Asn Ile Ser Asp Leu Leu Ser Phe Asp Lys Leu Ser 10500 10505 10510 atg ttt tgt tgt tcc tca aca tat aca cga ggt ttg aca gcc aaa 117237 Met Phe Cys Cys Ser Ser Thr Tyr Thr Arg Gly Leu Thr Ala Lys 10515 10520 10525 aat gct cta tcg tac att tta cag cga ata cat aca gac aca acg 117282 Asn Ala Leu Ser Tyr Ile Leu Gln Arg Ile His Thr Asp Thr Thr 10530 10535 10540 gaa ata cac gca gta tcg gag tat att acc aac gat aga aaa ggc 117327 Glu Ile His Ala Val Ser Glu Tyr Ile Thr Asn Asp Arg Lys Gly 10545 10550 10555 ctt aaa gtt cca gac cgt gaa ttt gtt gat tat att tat ctg gca 117372 Leu Lys Val Pro Asp Arg Glu Phe Val Asp Tyr Ile Tyr Leu Ala 10560 10565 10570 cat ttt gaa tgt ttc aat cgg aaa cag atc gca gac cac cta caa 117417 His Phe Glu Cys Phe Asn Arg Lys Gln Ile Ala Asp His Leu Gln 10575 10580 10585 gcg gtt aca tac tca gat ttt gtg aat aaa ccg gtc ctc tta aaa 117462 Ala Val Thr Tyr Ser Asp Phe Val Asn Lys Pro Val Leu Leu Lys 10590 10595 10600 tca tcc aac ctg gga aaa aga gct act gct aat ttt ttt aat cat 117507 Ser Ser Asn Leu Gly Lys Arg Ala Thr Ala Asn Phe Phe Asn His 10605 10610 10615 gta cgt tct cgt ctc aac atg cgt gac tat ata aaa aag aac gta 117552 Val Arg Ser Arg Leu Asn Met Arg Asp Tyr Ile Lys Lys Asn Val 10620 10625 10630 att tgt gat gtc act gaa ctt gga cct gag att gga cat aaa tat 117597 Ile Cys Asp Val Thr Glu Leu Gly Pro Glu Ile Gly His Lys Tyr 10635 10640 10645 aca att act aaa aca tat act tta agt ctt acg tat gcc gca aaa 117642 Thr Ile Thr Lys Thr Tyr Thr Leu Ser Leu Thr Tyr Ala Ala Lys 10650 10655 10660 cct agc aag ttt ata ggc gta tgt gac cta gct aca acg cta act 117687 Pro Ser Lys Phe Ile Gly Val Cys Asp Leu Ala Thr Thr Leu Thr 10665 10670 10675 cgt cgt gtg gaa aac att gaa aaa caa ttt agt cca tat gga tgg 117732 Arg Arg Val Glu Asn Ile Glu Lys Gln Phe Ser Pro Tyr Gly Trp 10680 10685 10690 tcc tcc act att ccc tca aat cca ccc ggt ttt gac gaa ttg tct 117777 Ser Ser Thr Ile Pro Ser Asn Pro Pro Gly Phe Asp Glu Leu Ser 10695 10700 10705 aat ttt gag gat tcg ggt gtt tcc gcg gag gcg tta cga gca gcc 117822 Asn Phe Glu Asp Ser Gly Val Ser Ala Glu Ala Leu Arg Ala Ala 10710 10715 10720 aac ttt gca aac gat aca cct aac caa agt ggt cgt act 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tcc tgt gag tta ata tcc ccc 120078 Arg Met Phe Gly Pro Phe Arg Ser Ser Cys Glu Leu Ile Ser Pro 11440 11445 11450 aca tca tat tca ctg aat tac gta aca cgg gtt att tcg aac att 120123 Thr Ser Tyr Ser Leu Asn Tyr Val Thr Arg Val Ile Ser Asn Ile 11455 11460 11465 ctt ctt ggt tac cca tat aca aag ttg gca agg ttg tta tgt gat 120168 Leu Leu Gly Tyr Pro Tyr Thr Lys Leu Ala Arg Leu Leu Cys Asp 11470 11475 11480 gtt tcc atg cga cgg gat ggt atg agt aaa gta ttt aat gct gac 120213 Val Ser Met Arg Arg Asp Gly Met Ser Lys Val Phe Asn Ala Asp 11485 11490 11495 cct ata agt ttt tta tat atg cat aaa ggt gtt acg tta ttg atg 120258 Pro Ile Ser Phe Leu Tyr Met His Lys Gly Val Thr Leu Leu Met 11500 11505 11510 ctt ttg gag gtt atc gct cat ata tca tct gga tgt att gtg ctt 120303 Leu Leu Glu Val Ile Ala His Ile Ser Ser Gly Cys Ile Val Leu 11515 11520 11525 tta acg ctt ggc gtt gca tat aca cca tgc gcg tta tta tac ccc 120348 Leu Thr Leu Gly Val Ala Tyr Thr Pro Cys Ala Leu Leu Tyr Pro 11530 11535 11540 aca tac att cgg att ctg gcc tgg gtt gtt gta tgc acg ctc gct 120393 Thr Tyr Ile Arg Ile Leu Ala Trp Val Val Val Cys Thr Leu Ala 11545 11550 11555 ata gta gag ctt ata tct tat gtt aga cca aaa cca acc aag gat 120438 Ile Val Glu Leu Ile Ser Tyr Val Arg Pro Lys Pro Thr Lys Asp 11560 11565 11570 aat cat tta aat cat atc aat acg ggg gga ata cgt ggt ata tgc 120483 Asn His Leu Asn His Ile Asn Thr Gly Gly Ile Arg Gly Ile Cys 11575 11580 11585 aca aca tgt tgc gct aca gta atg tcc ggc ctt gct ata aaa tgt 120528 Thr Thr Cys Cys Ala Thr Val Met Ser Gly Leu Ala Ile Lys Cys 11590 11595 11600 ttt tat atc gtc ata ttt gct ata gca gtg gtt att ttt atg cat 120573 Phe Tyr Ile Val Ile Phe Ala Ile Ala Val Val Ile Phe Met His 11605 11610 11615 tac gaa caa agg gtg cag gta agc ttg ttt ggg gaa agt gaa aac 120618 Tyr Glu Gln Arg Val Gln Val Ser Leu Phe Gly Glu Ser Glu Asn 11620 11625 11630 tcc cag aag cat taa tcatgtgact aaacacgccc attgcggggt tgggtgagcc 120673 Ser Gln Lys His 11635 tataaattct acaacattgg cggaagatac aggcaactgc aaacacgcaa ttgtcagata 120733 ttttgcagcc atg gcc tct gct tca att cca acc gac cca gac gtg 120779 Met Ala Ser Ala Ser Ile Pro Thr Asp Pro Asp Val 11640 11645 11650 tct act att tgt gaa gac ttt atg aat ttg cta cca gac gaa cct 120824 Ser Thr Ile Cys Glu Asp Phe Met Asn Leu Leu Pro Asp Glu Pro 11655 11660 11665 tcg gat gac ttt gca ttg gaa gtc acc gat tgg gca aat gat gaa 120869 Ser Asp Asp Phe Ala Leu Glu Val Thr Asp Trp Ala Asn Asp Glu 11670 11675 11680 gct att ggc tcc act cca ggc gag gac tcc aca acg tct aga act 120914 Ala Ile Gly Ser Thr Pro Gly Glu Asp Ser Thr Thr Ser Arg Thr 11685 11690 11695 gtg tat gtg gag cgt act gca gat aca gca tat aat cca cgg tat 120959 Val Tyr Val Glu Arg Thr Ala Asp Thr Ala Tyr Asn Pro Arg Tyr 11700 11705 11710 tcc aaa cga agg cac gga agg cgt gaa agc tac cac cac aat cgc 121004 Ser Lys Arg Arg His Gly Arg Arg Glu Ser Tyr His His Asn Arg 11715 11720 11725 ccg aaa act ttg gtt gtt gta tta ccc gat tca aac cat cat gga 121049 Pro Lys Thr Leu Val Val Val Leu Pro Asp Ser Asn 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Gly Ala Ser Val Thr Ile Asp 11835 11840 11845 tcg gta cgc cat tta gat gaa aca att gaa aaa ctg gta gtc cga 121409 Ser Val Arg His Leu Asp Glu Thr Ile Glu Lys Leu Val Val Arg 11850 11855 11860 tat gcc aca ata caa gag ggt gat tca tgg gct tcc ggt gga tgt 121454 Tyr Ala Thr Ile Gln Glu Gly Asp Ser Trp Ala Ser Gly Gly Cys 11865 11870 11875 ttt ccg ggg ata aaa caa aac aca tct tgg ccg gag ttg atg ttg 121499 Phe Pro Gly Ile Lys Gln Asn Thr Ser Trp Pro Glu Leu Met Leu 11880 11885 11890 tac gga cat gaa ctt tat cgt acc ttt gag tca tat aaa atg gac 121544 Tyr Gly His Glu Leu Tyr Arg Thr Phe Glu Ser Tyr Lys Met Asp 11895 11900 11905 tca cgt att gcc cgc gcg ttg cgt gag aga gtc ata cgt gga gaa 121589 Ser Arg Ile Ala Arg Ala Leu Arg Glu Arg Val Ile Arg Gly Glu 11910 11915 11920 tct ttg att gaa gcg ttg gag tct gcg gat gaa ctg tta acg tgg 121634 Ser Leu Ile Glu Ala Leu Glu Ser Ala Asp Glu Leu Leu Thr Trp 11925 11930 11935 att aaa atg tta gcg gca aaa aac ttg ccc atc tac aca aat aat 121679 Ile Lys Met Leu Ala Ala Lys Asn Leu Pro Ile Tyr Thr Asn Asn 11940 11945 11950 ccc att gtt gca acc tcg aag tca ctt ttg gag aat tta aag tta 121724 Pro Ile Val Ala Thr Ser Lys Ser Leu Leu Glu Asn Leu Lys Leu 11955 11960 11965 aag ctg ggg cct ttt gta aga tgt ctt ctt cta aac agg gac aac 121769 Lys Leu Gly Pro Phe Val Arg Cys Leu Leu Leu Asn Arg Asp Asn 11970 11975 11980 gat ttg ggg tct cgt act ctc ccc gaa ctg ttg cgc cag caa cgt 121814 Asp Leu Gly Ser Arg Thr Leu Pro Glu Leu Leu Arg Gln Gln Arg 11985 11990 11995 ttt agt gat atc acg tgt att act act tat atg ttt gtt atg att 121859 Phe Ser Asp Ile Thr Cys Ile Thr Thr Tyr Met Phe Val Met Ile 12000 12005 12010 gcc cgc att gct aat ata gtt gtc cgt ggc tct aaa ttt gtg gaa 121904 Ala Arg Ile Ala Asn Ile Val Val Arg Gly Ser Lys Phe Val Glu 12015 12020 12025 tat gat gat atc agt tgt aac gtt caa gtg tta caa gaa tat aca 121949 Tyr Asp Asp Ile Ser Cys Asn Val Gln Val Leu Gln Glu Tyr Thr 12030 12035 12040 ccc ggg tca tgt ctg gcc ggt gtt tta gag gcc cta atc acc cac 121994 Pro Gly Ser Cys Leu Ala Gly Val Leu Glu Ala Leu Ile Thr His 12045 12050 12055 caa cgc gag tgt ggt cgt gtt gaa tgt acc ctc tca act tgg gcc 122039 Gln Arg Glu Cys Gly Arg Val Glu Cys Thr Leu Ser Thr Trp Ala 12060 12065 12070 ggg cat ctt tct gac gcc cgt cca tac ggt aaa tat ttt aag tgt 122084 Gly His Leu Ser Asp Ala Arg Pro Tyr Gly Lys Tyr Phe Lys Cys 12075 12080 12085 agt acc ttt aac tgc taa aataaaaaat acctttttca tgcttgtcaa 122132 Ser Thr Phe Asn Cys 12090 aacatactaa tttgtatttt taatcattaa gcatatttac ctgttagaat agtaaatacc 122192 tatttcatgc ttgtaaaaca tatcaattta tatttttaat cattatacac caccccttga 122252 ttttatcaat tgtttatgtg attctatatt aataaaagac taataaaaat gtaatattgt 122312 gggagttttt aaggcgacgt tggggatata tgggcgggat tacattgctt tcaaaccaat 122372 atctttgcaa ttccgtctct gattcgggta aaacacacac cagacgtgta ccgaacgttt 122432 aatta atg gat aca acg gga gct tcc gaa agc agt caa ccc atc cga 122479 Met Asp Thr Thr Gly Ala Ser Glu Ser Ser Gln Pro Ile Arg 12095 12100 gtg aat ctt aaa cct gac ccg ttg gcg tcg ttt aca caa gtt ata 122524 Val Asn Leu Lys Pro Asp Pro Leu Ala Ser Phe Thr Gln Val Ile 12105 12110 12115 ccg cca ctg gcg ttg gaa aca acg tgg aca tgc cct gcc aac tca 122569 Pro Pro Leu Ala Leu Glu Thr Thr Trp Thr Cys Pro Ala Asn Ser 12120 12125 12130 cat gca ccg acg cca tcc cct ctg tac ggt gtt aag agg tta tgt 122614 His Ala Pro Thr Pro Ser Pro Leu Tyr Gly Val Lys Arg Leu Cys 12135 12140 12145 gct ctt cga gca aca tgc ggc cgg gct gat gat tta cac gct ttt 122659 Ala Leu Arg Ala Thr Cys Gly Arg Ala Asp Asp Leu His Ala Phe 12150 12155 12160 ttg att gga ctt gga cgt cga gat aaa cca tct gaa tcc cca atg 122704 Leu Ile Gly Leu Gly Arg Arg Asp Lys Pro Ser Glu Ser Pro Met 12165 12170 12175 tat gtt gac cta cag ccg ttt tgc agc ctc cta aat tcc caa cga 122749 Tyr Val Asp Leu Gln Pro Phe Cys Ser Leu Leu Asn Ser Gln Arg 12180 12185 12190 ctg tta ccg gaa atg gct aat tat aac acc cta tgc gat gca ccc 122794 Leu Leu Pro Glu Met Ala Asn Tyr Asn Thr Leu Cys Asp Ala Pro 12195 12200 12205 ttc agc gcc gca act cag 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tctgttactt aaaccgtgtg tgcggagaaa tgtacccata gatggagcca 123387 gtaaatgcaa gcccgtacca cattcatacc caagcgttgt ggatcgcttt tccttcatcg 123447 ccaaaataat aaatgtcctt gcacctccag gcgtcattgc acgccctatt agacgggcaa 123507 ggctaagacg ttcgccgggt ttgctatatt tgccaataat tacataggtt ttggtacagg 123567 taatgtgtaa cgttcctccg cctggcaggt ctacagttct ccccgcaagc actcgtaata 123627 aacatcgcgt ttctgacgcg ggattttcct cggcggtggc gtttaaactg ggacgcacca 123687 gagtggagcc cataataaat gcgggaacat gcccatatgc aagtgtctca gaaattacat 123747 gcattttatg attttacggg ggtgggttac gataatagct attaaacaaa cacccaataa 123807 agcatttttt gtagaacctt tattgggtaa cacagtcttt tcacgtgaca ggcaatgtat 123867 aaataacgta cggatgcact taagatgtat cgcacataaa tttatataag ctgtagcaaa 123927 gtataagcaa atcctgttaa tattatattt ttgggatccg ca atg tcc agg gta 123981 Met Ser Arg Val 12270 tcg gag tat ggg gta ccg gaa ggt gtt cgg gaa tct gat agc gat 124026 Ser Glu Tyr Gly Val Pro Glu Gly Val Arg Glu Ser Asp Ser Asp 12275 12280 12285 aca gac tct gtg ttt atg tat cag cat aca gag ctt atg cag aac 124071 Thr Asp Ser Val Phe Met Tyr Gln His Thr Glu Leu Met Gln Asn 12290 12295 12300 aac gcg tcg cca ctc gtc gtt caa aca aga cca ccg gcg gtt ctt 124116 Asn Ala Ser Pro Leu Val Val Gln Thr Arg Pro Pro Ala Val Leu 12305 12310 12315 att cca ctg gtt gat gtc cca agg cca cga tcc cgg aga aag gcg 124161 Ile Pro Leu Val Asp Val Pro Arg Pro Arg Ser Arg Arg Lys Ala 12320 12325 12330 tcc gcg caa ctg aaa atg caa atg gac agg tta tgc aac gta ctg 124206 Ser Ala Gln Leu Lys Met Gln Met Asp Arg Leu Cys Asn Val Leu 12335 12340 12345 ggt gta gta ctc cag atg gcg acg ttg gct ttg gtg aca tat ata 124251 Gly Val Val Leu Gln Met Ala Thr Leu Ala Leu Val Thr Tyr Ile 12350 12355 12360 gct ttt gtt gtg cat aca cgc gcg aca agc tgc aag cga gaa taa 124296 Ala Phe Val Val His Thr Arg Ala Thr Ser Cys Lys Arg Glu 12365 12370 12375 ataccttccc cttccggaca gtagtttcat gtagttgagt tgggaggttc ctcgggaaaa 124356 acggcaacaa tggcgaccac gacagcagta agggtgagaa taccaaaaag aattaaaaaa 124416 gccggtacac agcatttgcg aattcttaga 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Pro Leu Val Asp Val Pro Arg Pro Arg Ser Arg Arg Lys Ala 50 55 60 Ser Ala Gln Leu Lys Met Gln Met Asp Arg Leu Cys Asn Val Leu Gly 65 70 75 80 Val Val Leu Gln Met Ala Thr Leu Ala Leu Val Thr Tyr Ile Ala Phe 85 90 95 Val Val His Thr Arg Ala Thr Ser Cys Lys Arg Glu 100 105 <210> 80 <211> 5743 <212> DNA <213> Varicella zoster <220> <221> CDS <222> (1)..(1056) <220> <221> CDS <222> (4556)..(5740) <400> 80 atg tca ttg ata atg ttt ggt cgt acg ctt ggt gaa gaa tct gta aga 48 Met Ser Leu Ile Met Phe Gly Arg Thr Leu Gly Glu Glu Ser Val Arg 1 5 10 15 tat ttt gaa cgt cta aag cgt cgt agg gat gaa cgc ttt ggg acg ttg 96 Tyr Phe Glu Arg Leu Lys Arg Arg Arg Asp Glu Arg Phe Gly Thr Leu 20 25 30 gag tcc cct acc ccg tgt tcc acg cgg caa ggg tct ctg gga aac gca 144 Glu Ser Pro Thr Pro Cys Ser Thr Arg Gln Gly Ser Leu Gly Asn Ala 35 40 45 acc caa atc ccg ttt ctg aat ttt gct ata gat gta acc cga cgt cat 192 Thr Gln Ile Pro Phe Leu Asn Phe Ala Ile Asp Val Thr Arg Arg His 50 55 60 cag gcc gtt att ccc gga att gga acg ctt cac aac tgt tgt gaa tat 240 Gln Ala Val Ile Pro Gly Ile Gly Thr Leu His Asn Cys Cys Glu Tyr 65 70 75 80 att cca ctg ttc tcg gct act gct cga cgg gca atg ttt ggc gcg ttt 288 Ile Pro Leu Phe Ser Ala Thr Ala Arg Arg Ala Met Phe Gly Ala Phe 85 90 95 cta tcg tca aca ggg tac aac tgt acc ccc aat gta gtt ttg aaa cca 336 Leu Ser Ser Thr Gly Tyr Asn Cys Thr Pro Asn Val Val Leu Lys Pro 100 105 110 tgg cga tat tcg gta aat gca aac gta agc cct gaa tta aaa aag gct 384 Trp Arg Tyr Ser Val Asn Ala Asn Val Ser Pro Glu Leu Lys Lys Ala 115 120 125 gtc agt agt gta cag ttt tat gaa tat tca ccg gaa gaa gca gca cct 432 Val Ser Ser Val Gln Phe Tyr Glu Tyr Ser Pro Glu Glu Ala Ala Pro 130 135 140 cat cga aat gcg tat agc ggt gtt atg aac aca ttt cgc gcg ttt tct 480 His Arg Asn Ala Tyr Ser Gly Val Met Asn Thr Phe Arg Ala Phe Ser 145 150 155 160 ctg tcg gat agt ttc tgt cag ttg tct acc ttt aca caa cgg ttt tcg 528 Leu Ser Asp Ser Phe Cys Gln Leu Ser Thr Phe Thr Gln Arg Phe Ser 165 170 175 tac ctt gtg gaa aca tct ttt gag agt att gaa gag tgt gga agt cat 576 Tyr Leu Val Glu Thr Ser Phe Glu Ser Ile Glu Glu Cys Gly Ser His 180 185 190 ggc aaa cgc gca aag gtt gac gtt cca atc tat ggc aga tat aag ggg 624 Gly Lys Arg Ala Lys Val Asp Val Pro Ile Tyr Gly Arg Tyr Lys Gly 195 200 205 acg ttg gaa ctg ttt caa aaa atg atc ctc atg cac acc acg cat ttt 672 Thr Leu Glu Leu Phe Gln Lys Met Ile Leu Met His Thr Thr His Phe 210 215 220 att tca tcg gtg cta ttg ggc gat cat gcc gac aga gtt gac tgc ttt 720 Ile Ser Ser Val Leu Leu Gly Asp His Ala Asp Arg Val Asp Cys Phe 225 230 235 240 ctg cgt aca gtg ttt aac acg cca agt gtt tct gac agt gtt tta gaa 768 Leu Arg Thr Val Phe Asn Thr Pro Ser Val Ser Asp Ser Val Leu Glu 245 250 255 cac ttc aaa caa aaa tca act gtg ttt ttg gta cca cgt aga cat ggg 816 His Phe Lys Gln Lys Ser Thr Val Phe Leu Val Pro Arg Arg His Gly 260 265 270 aaa aca tgg ttt ctt gta cca tta ata gct tta gta atg gcc acg ttt 864 Lys Thr Trp Phe Leu Val Pro Leu Ile Ala Leu Val Met Ala Thr Phe 275 280 285 aga gga att aaa gtg ggt tat acg gct cat ata cgc aaa gca acg gaa 912 Arg Gly Ile Lys Val Gly Tyr Thr Ala His Ile Arg Lys Ala Thr Glu 290 295 300 ccc gtg ttt gag ggt atc aag tct cgc ctg gaa cag tgg ttt ggg gca 960 Pro Val Phe Glu Gly Ile Lys Ser Arg Leu Glu Gln Trp Phe Gly Ala 305 310 315 320 aat tac gtg gat cat gta aaa ggc gaa tct att acg ttt tca ttt acc 1008 Asn Tyr Val Asp His Val Lys Gly Glu Ser Ile Thr Phe Ser Phe Thr 325 330 335 gac ggg tct tac agc aca gcg gtg ttc gcg tca agt cac aac aca aac 1056 Asp Gly Ser Tyr Ser Thr Ala Val Phe Ala Ser Ser His Asn Thr Asn 340 345 350 gtgagtgttt tataaattta acctttaata tattactgta aatgttgaca tatacctttc 1116 cacaacggcg gttgagttaa ggtatactag gtggttgtag gttccggttc acccgataat 1176 ctttgtgtct cggggaagca aattcgctga agcagaccac agccgttaat aatagcccgg 1236 cttaatgttt ctccaaacat ataaagctgc cacccagatg aatttactgg tacagagaga 1296 ccactggcgt tggttcccgc tataacgtcg ccaagatttg cggtaatgcg aggattttta 1356 gtactcgtaa ttcgaatgca ggtggtgaca tctacaaaaa gaacctgcgt ggcgccaatg 1416 tctacctcca cttttaattc ccgctgaccg gcctttctcc acatacacgg agcccaacac 1476 acacaacctt ccgcatgatt tgtgacatgg ggtaacgcat acagtgcccc cacgtgaact 1536 ctatgattac attcatcaca tccgtccgca tggctgagga gtcgatttaa tacagagcca 1596 agtatccgag catgccatcc ggcgggacat agccctatta aattaggttc catagccagt 1656 acatataaac gccttcgttc gtctgaccac cacactcccg gagaaataac tttacatgcg 1716 tatggatttt tcggaagccg cgggggttgt aagtagttgc ttaagtttgg cgttggtgta 1776 agatctgcgg gggtgggatc tgctcgagga tccggaatag atgttggaag ggggtacgcg 1836 atcgggttct taaacgttgc tccaaaaaca tggtctatgt tttcaaccgg ataaattctt 1896 aaagtcgccg tcattgcgta cgagacctcg taattaaaat ttacaattac atgaaaagtc 1956 ttcggaggta agttcatctg acgtgggcgc gtgatgtaaa ttgtggctac aacaacggca 2016 atattagtag tatccgtttg aagggggata aacggagcga tccttaaagt tataaaagca 2076 gttgatcgca ttattttcac ccggggatcg gtcaggatgg acttccataa tcccatatcc 2136 agcgttaatg catcgcagag tctctgaact gcctcggggg ttaatttgcg cgctgcaccc 2196 gtagcggtgt acagcggaaa tatgcgttgt aattccatga gcagaaaaac agtctagcgg 2256 attgccgccc gggtacttgt gggtttaatg ccacccaccc ggttatttta tattttaaga 2316 gggggtggaa acgggagaaa tgacgtaaaa ttacatatga agagattctg gtgttatgtt 2376 tttatagtga cactaattta tttatggggg ttgggaatag agaagcagaa tctgtctaga 2436 ataggtccga ttaacgatgc aggtagtgct gcctgtaggg tatcggtaat acaaaaacat 2496 gccgcaaatc cccccggtaa aactaaaatg gattgtaatt gctggttaaa tcctagacaa 2556 atgtacgcgt aacattgacc gggtaaatac ttagaacaaa ttccaatatc aacaatatcc 2616 gcgctgcgta taaatttacc cctcagttgt gtggaattac caataccaac cttttctaag 2676 gctacgggaa cggggacctt ggaaagctta agtatttccc ctcctgaatt ataatagtca 2736 aataaatata tagaacgatt acctaaccag catgggaagg aagcgtgaag gtagggtata 2796 taccccccac cttgtggtcg tgtatataca gatgacagat acgccaaaac cgcatacatc 2856 aaggagctgt tataaaacgc atccattgac atttccgtta acaccgaaac tatagtctga 2916 atcaggtctg gtgtgcgggc tacaatttca tcaataaccg tttgggaaga atctgcaata 2976 tcatattcca tgagttgttg tagagtcggg ttcgtttgta actccgttat aagaccttgg 3036 gttagcgatg tcacacacgc ttgtttaaat acctggttta aaaacatttc ggcgcctggt 3096 ttaaaggcgg gtaagggggt ttgattattt aggacgttag ccaaaaacgg taaacgcgcg 3156 actagctctt ggcgagctgt cacatgtagg ctttggggat tgtcaacccg ggcatttata 3216 cacgcagcat caataatagc ctgtgcagag tgatataaaa ttggacttcc ggtaatacgt 3276 cctccccagg cagaggatcc gttgtaagat actacaatca acggactggg ggattctgcg 3336 taatgtcgcg gtacaattga taggggacgc cgtttccaga aatctgctgg agtgtccccg 3396 ctaactaatt gggcataaca gatgtcgaac cattccataa gactttgggg ttctgtcgaa 3456 gctggggtaa acaatagaac gtcttgtaaa ggtgggatgc tggcggacga attgtttttc 3516 tttcccgtaa atcgcccttg tccaggcggc tcaaggacgc catcaaagga accgttattg 3576 atcggatctg tgttggaagt ttgcgctccg tggccctttg cactttgaag caacccagat 3636 gcaacgcggg aactagaagg tcggacgggg tgcctggagt taacaatgtt tacggcccgt 3696 tttattagct caaggacgtc ccgattattt tcctgtatgc gtgtttcagc aggggagtca 3756 tcaatacctc cagaagttaa ctgtcgatca agatcgatta tggatgaaac gggtccaata 3816 ttgtccccat ttgacgtgtg tgattcaccc atggctgcca ccatatgctc tgcgtatatt 3876 tttatagacg atgcaagacg aggggtgcat cggatatacg caatcagctg tttgcataat 3936 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aat tgt aaa att att ttt gtt tca tca aca 4684 Gly Phe Leu Asn Gln Thr Asn Cys Lys Ile Ile Phe Val Ser Ser Thr 380 385 390 395 aat acc gga aaa gca agt aca agt ttt ttg tat aac tta cgt gga tcg 4732 Asn Thr Gly Lys Ala Ser Thr Ser Phe Leu Tyr Asn Leu Arg Gly Ser 400 405 410 tcg gat cag ttg tta aac gtt gtt aca tat gta tgc gac gat cac atg 4780 Ser Asp Gln Leu Leu Asn Val Val Thr Tyr Val Cys Asp Asp His Met 415 420 425 ccg cgt gtt tta gca cat agc gat gtc aca gct tgt tcg tgt tat gta 4828 Pro Arg Val Leu Ala His Ser Asp Val Thr Ala Cys Ser Cys Tyr Val 430 435 440 tta aat aag ccg gtt ttc atc aca atg gat gga gcc atg cgg cgc act 4876 Leu Asn Lys Pro Val Phe Ile Thr Met Asp Gly Ala Met Arg Arg Thr 445 450 455 gca gat tta ttt atg gcc gac tcc ttc gtg cag gaa att gta ggt ggg 4924 Ala Asp Leu Phe Met Ala Asp Ser Phe Val Gln Glu Ile Val Gly Gly 460 465 470 475 cgt aaa cag aat tct ggg ggt gtg ggg ttt gac cgg cca tta ttt aca 4972 Arg Lys Gln Asn Ser Gly Gly Val Gly Phe Asp Arg Pro Leu Phe Thr 480 485 490 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Val Ala 590 595 600 ata tcg ttg gct ata gca caa cag ttt gct gtc ctc gaa aag gga aac 5356 Ile Ser Leu Ala Ile Ala Gln Gln Phe Ala Val Leu Glu Lys Gly Asn 605 610 615 gtg cta tct tcc gct cca gtg tta ctg ttt tat cat tcc ata cct ccc 5404 Val Leu Ser Ser Ala Pro Val Leu Leu Phe Tyr His Ser Ile Pro Pro 620 625 630 635 gga tgt agc gtg gcg tac cct ttt ttt tta tta caa aaa caa aaa acg 5452 Gly Cys Ser Val Ala Tyr Pro Phe Phe Leu Leu Gln Lys Gln Lys Thr 640 645 650 ccg gcc gta gac tat ttt gtt aaa cga ttt aac tcc gga aat ata ata 5500 Pro Ala Val Asp Tyr Phe Val Lys Arg Phe Asn Ser Gly Asn Ile Ile 655 660 665 gcc tca cag gag ctt gta tcc cta aca gta aag tta ggt gta gac ccc 5548 Ala Ser Gln Glu Leu Val Ser Leu Thr Val Lys Leu Gly Val Asp Pro 670 675 680 gtg gag tat cta tgt aaa cag ttg gat aac ctg aca gag gta att aaa 5596 Val Glu Tyr Leu Cys Lys Gln Leu Asp Asn Leu Thr Glu Val Ile Lys 685 690 695 ggc ggt atg ggt aat cta gac aca aaa act tac acg ggt aaa ggt acc 5644 Gly Gly Met Gly Asn Leu Asp Thr Lys 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Val Ser Ser Val Gln Phe Tyr Glu Tyr Ser Pro Glu Glu Ala Ala Pro 130 135 140 His Arg Asn Ala Tyr Ser Gly Val Met Asn Thr Phe Arg Ala Phe Ser 145 150 155 160 Leu Ser Asp Ser Phe Cys Gln Leu Ser Thr Phe Thr Gln Arg Phe Ser 165 170 175 Tyr Leu Val Glu Thr Ser Phe Glu Ser Ile Glu Glu Cys Gly Ser His 180 185 190 Gly Lys Arg Ala Lys Val Asp Val Pro Ile Tyr Gly Arg Tyr Lys Gly 195 200 205 Thr Leu Glu Leu Phe Gln Lys Met Ile Leu Met His Thr Thr His Phe 210 215 220 Ile Ser Ser Val Leu Leu Gly Asp His Ala Asp Arg Val Asp Cys Phe 225 230 235 240 Leu Arg Thr Val Phe Asn Thr Pro Ser Val Ser Asp Ser Val Leu Glu 245 250 255 His Phe Lys Gln Lys Ser Thr Val Phe Leu Val Pro Arg Arg His Gly 260 265 270 Lys Thr Trp Phe Leu Val Pro Leu Ile Ala Leu Val Met Ala Thr Phe 275 280 285 Arg Gly Ile Lys Val Gly Tyr Thr Ala His Ile Arg Lys Ala Thr Glu 290 295 300 Pro Val Phe Glu Gly Ile Lys Ser Arg Leu Glu Gln Trp Phe Gly Ala 305 310 315 320 Asn Tyr Val Asp His Val Lys Gly Glu Ser Ile Thr Phe Ser Phe Thr 325 330 335 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Ile Ile Phe Gly Leu Glu His Phe Phe Leu Arg Ala Leu Thr Gly 545 550 555 560 Thr Ser Ser Ser Glu Ile Gly Arg Cys Val Thr Gln Cys Leu Gly His 565 570 575 Ile Leu Ala Leu His Pro Asn Thr Phe Thr Asn Val His Val Ser Ile 580 585 590 Glu Gly Asn Ser Ser Gln Asp Ser Ala Val Ala Ile Ser Leu Ala Ile 595 600 605 Ala Gln Gln Phe Ala Val Leu Glu Lys Gly Asn Val Leu Ser Ser Ala 610 615 620 Pro Val Leu Leu Phe Tyr His Ser Ile Pro Pro Gly Cys Ser Val Ala 625 630 635 640 Tyr Pro Phe Phe Leu Leu Gln Lys Gln Lys Thr Pro Ala Val Asp Tyr 645 650 655 Phe Val Lys Arg Phe Asn Ser Gly Asn Ile Ile Ala Ser Gln Glu Leu 660 665 670 Val Ser Leu Thr Val Lys Leu Gly Val Asp Pro Val Glu Tyr Leu Cys 675 680 685 Lys Gln Leu Asp Asn Leu Thr Glu Val Ile Lys Gly Gly Met Gly Asn 690 695 700 Leu Asp Thr Lys Thr Tyr Thr Gly Lys Gly Thr Thr Gly Thr Met Ser 705 710 715 720 Asp Asp Leu Met Val Ala Leu Ile Met Ser Val Tyr Ile Gly Ser Ser 725 730 735 Cys Ile Pro Asp Ser Val Phe Met Pro Ile Lys 740 745 <210> 82 <211> 1308 <212> 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Leu Phe Leu Glu Pro His Ser Val Val Ala Phe Thr Tyr 100 105 110 tac acg gct tta acg gca atg gcc atg gcg gta tat aca ctg atc acg 384 Tyr Thr Ala Leu Thr Ala Met Ala Met Ala Val Tyr Thr Leu Ile Thr 115 120 125 gcc gcg att ata cac cga gaa acg aaa aat caa cgt gtc cgg caa agc 432 Ala Ala Ile Ile His Arg Glu Thr Lys Asn Gln Arg Val Arg Gln Ser 130 135 140 tcc ggt gtt gca tgg tta gtt gta gat ccc aca aca ctt ttt tgg ggt 480 Ser Gly Val Ala Trp Leu Val Val Asp Pro Thr Thr Leu Phe Trp Gly 145 150 155 160 ctt ttg tca ttg tgg tta tta aac gcc gtt gtg tta tta tta gct tac 528 Leu Leu Ser Leu Trp Leu Leu Asn Ala Val Val Leu Leu Leu Ala Tyr 165 170 175 aag caa atc ggc gtg gct gct aca tta tat ctt gga cat ttt gcg aca 576 Lys Gln Ile Gly Val Ala Ala Thr Leu Tyr Leu Gly His Phe Ala Thr 180 185 190 agt gta ata ttt aca acg tat ttt tgt gga cgc gga aaa ttg gac gaa 624 Ser Val Ile Phe Thr Thr Tyr Phe Cys Gly Arg Gly Lys Leu Asp Glu 195 200 205 acg aac ata aaa gcg gtc gca aat tta cga cag cag agc gtc ttt tta 672 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Leu Leu His Lys Glu Asn Thr Leu Thr Asp Gln Pro 195 200 205 Ile Asn Thr Glu Asn Ser Gly His Gly Arg Thr Arg Thr 210 215 220 <210> 88 <211> 480 <212> DNA <213> Varicella zoster <220> <221> CDS <222> (1)..(480) <400> 88 atg gca tca cat aaa tgg tta ctg cag ata gtt ttt tta aaa act atc 48 Met Ala Ser His Lys Trp Leu Leu Gln Ile Val Phe Leu Lys Thr Ile 1 5 10 15 aca atc gcg tat tgt ctt cat ctc caa gac gac act ccg ttg ttt ttt 96 Thr Ile Ala Tyr Cys Leu His Leu Gln Asp Asp Thr Pro Leu Phe Phe 20 25 30 gga gcc aaa ccg cta tcg gat gtg agt ttg att ata acg gaa ccg tgc 144 Gly Ala Lys Pro Leu Ser Asp Val Ser Leu Ile Ile Thr Glu Pro Cys 35 40 45 gtg tca tcg gta tat gag gcg tgg gac tat gcg gca ccc ccg gta tca 192 Val Ser Ser Val Tyr Glu Ala Trp Asp Tyr Ala Ala Pro Pro Val Ser 50 55 60 aac ctc agc gag gcg cta tcg gga atc gtg gtt aag aca aaa tgt cca 240 Asn Leu Ser Glu Ala Leu Ser Gly Ile Val Val Lys Thr Lys Cys Pro 65 70 75 80 gta ccg gaa gtt ata ctt tgg ttt aaa gac aaa caa atg gcg tac tgg 288 Val Pro Glu Val Ile Leu Trp Phe Lys Asp Lys Gln Met Ala Tyr Trp 85 90 95 aca aat cca tac gtc acc tta aag ggg ctg gca caa tct gtt ggt gaa 336 Thr Asn Pro Tyr Val Thr Leu Lys Gly Leu Ala Gln Ser Val Gly Glu 100 105 110 gaa cat aaa agc ggg gac ata cgc gat gct ttg ttg gat gcc ctt tcc 384 Glu His Lys Ser Gly Asp Ile Arg Asp Ala Leu Leu Asp Ala Leu Ser 115 120 125 ggt gta tgg gta gac tct act cca tct tcc aca aat atc ccg gaa aat 432 Gly Val Trp Val Asp Ser Thr Pro Ser Ser Thr Asn Ile Pro Glu Asn 130 135 140 gga tgt gtc tgg gga gcc gac cgt ttg ttc caa cgc gta tgc caa tga 480 Gly Cys Val Trp Gly Ala Asp Arg Leu Phe Gln Arg Val Cys Gln 145 150 155 <210> 89 <211> 159 <212> PRT <213> Varicella zoster <400> 89 Met Ala Ser His Lys Trp Leu Leu Gln Ile Val Phe Leu Lys Thr Ile 1 5 10 15 Thr Ile Ala Tyr Cys Leu His Leu Gln Asp Asp Thr Pro Leu Phe Phe 20 25 30 Gly Ala Lys Pro Leu Ser Asp Val Ser Leu Ile Ile Thr Glu Pro Cys 35 40 45 Val Ser Ser Val Tyr Glu Ala Trp Asp Tyr Ala Ala Pro Pro Val Ser 50 55 60 Asn Leu Ser Glu Ala Leu Ser Gly Ile Val Val Lys Thr Lys Cys Pro 65 70 75 80 Val Pro Glu Val Ile Leu Trp Phe Lys Asp Lys Gln Met Ala Tyr Trp 85 90 95 Thr Asn Pro Tyr Val Thr Leu Lys Gly Leu Ala Gln Ser Val Gly Glu 100 105 110 Glu His Lys Ser Gly Asp Ile Arg Asp Ala Leu Leu Asp Ala Leu Ser 115 120 125 Gly Val Trp Val Asp Ser Thr Pro Ser Ser Thr Asn Ile Pro Glu Asn 130 135 140 Gly Cys Val Trp Gly Ala Asp Arg Leu Phe Gln Arg Val Cys Gln 145 150 155 <210> 90 <211> 909 <212> DNA <213> Varicella zoster <220> <221> CDS <222> (1)..(909) <400> 90 atg gct tct gta gca ggt aac gct agt aat atc tca cca cag ccc ccg 48 Met Ala Ser Val Ala Gly Asn Ala Ser Asn Ile Ser Pro Gln Pro Pro 1 5 10 15 tcg ggc gtt cca acc gga ggg gaa ttt gta ctg ata cct acc gcg tat 96 Ser Gly Val Pro Thr Gly Gly Glu Phe Val Leu Ile Pro Thr Ala Tyr 20 25 30 tat tca cag ctg tta acc ggg cag act aaa aat ccg cag gta tca att 144 Tyr Ser Gln Leu Leu Thr Gly Gln Thr Lys Asn Pro Gln Val Ser Ile 35 40 45 gga gct cca aat aac gga cag tat atc gtc ggg cca tat gga tct cca 192 Gly Ala Pro Asn Asn Gly Gln Tyr Ile Val Gly Pro Tyr Gly Ser Pro 50 55 60 cac ccg cct gcc ttc cca cct aat aca ggg ggt tat ggt tgc cct ccg 240 His Pro Pro Ala Phe Pro Pro Asn Thr Gly Gly Tyr Gly Cys Pro Pro 65 70 75 80 gga cac ttc ggg gga ccg tac ggg ttt ccg gga tat cca cca ccc aat 288 Gly His Phe Gly Gly Pro Tyr Gly Phe Pro Gly Tyr Pro Pro Pro Asn 85 90 95 cgt ttg gaa atg caa atg tcc gca ttt atg aac gca ttg gcc gcc gaa 336 Arg Leu Glu Met Gln Met Ser Ala Phe Met Asn Ala Leu Ala Ala Glu 100 105 110 cgg ggt att gac ttg cag acc ccg tgt gta aat ttt cca gac aaa acc 384 Arg Gly Ile Asp Leu Gln Thr Pro Cys Val Asn Phe Pro Asp Lys Thr 115 120 125 gat gtc cgt cgt cca gga aaa cgg gat ttc aag agc atg gat caa agg 432 Asp Val Arg Arg Pro Gly Lys Arg Asp Phe Lys Ser Met Asp Gln Arg 130 135 140 gaa ttg gat tct ttt tat agt ggg gag tct caa atg gac gga gag ttt 480 Glu Leu Asp Ser Phe Tyr Ser Gly Glu Ser Gln Met Asp Gly Glu Phe 145 150 155 160 ccc tca aat ata tat ttt ccc ggt gaa cca acg tat ata acg cat cgg 528 Pro Ser Asn Ile Tyr Phe Pro Gly Glu Pro Thr Tyr Ile Thr His Arg 165 170 175 aga cgt cga gtt tct cca tca tat tgg cag agg aga cac aga gtt tct 576 Arg Arg Arg Val Ser Pro Ser Tyr Trp Gln Arg Arg His Arg Val Ser 180 185 190 aat ggt cag cac gaa gag ctt gct ggg gtt gtg gca aaa ctg caa cag 624 Asn Gly Gln His Glu Glu Leu Ala Gly Val Val Ala Lys Leu Gln Gln 195 200 205 gag gtt aca gag cta aaa tca caa aat ggg aca caa atg cct ttg tcg 672 Glu Val Thr Glu Leu Lys Ser Gln Asn Gly Thr Gln Met Pro Leu Ser 210 215 220 cac cat aca aat ata cca gag ggg aca cgg gat cct cga ata tcg att 720 His His Thr Asn Ile Pro Glu Gly Thr Arg Asp Pro Arg Ile Ser Ile 225 230 235 240 tta tta aaa cag ctt caa agc gtt tcg ggt cta tgc tca tcc caa aat 768 Leu Leu Lys Gln Leu Gln Ser Val Ser Gly Leu Cys Ser Ser Gln Asn 245 250 255 aca aca agc acc cca cat aca gat aca gtt gga caa gat gta aat gca 816 Thr Thr Ser Thr Pro His Thr Asp Thr Val Gly Gln Asp Val Asn Ala 260 265 270 gtg gag gcg agt tcc aag gcc cct tta ata cag ggg tcc acg gca gac 864 Val Glu Ala Ser Ser Lys Ala Pro Leu Ile Gln Gly Ser Thr Ala Asp 275 280 285 gac gcc gat atg ttt gca aat cag atg atg gtg ggg cgg tgt taa 909 Asp Ala Asp Met Phe Ala Asn Gln Met Met Val Gly Arg Cys 290 295 300 <210> 91 <211> 302 <212> PRT <213> Varicella zoster <400> 91 Met Ala Ser Val Ala Gly Asn Ala Ser Asn Ile Ser Pro Gln Pro Pro 1 5 10 15 Ser Gly Val Pro Thr Gly Gly Glu Phe Val Leu Ile Pro Thr Ala Tyr 20 25 30 Tyr Ser Gln Leu Leu Thr Gly Gln Thr Lys Asn Pro Gln Val Ser Ile 35 40 45 Gly Ala Pro Asn Asn Gly Gln Tyr Ile Val Gly Pro Tyr Gly Ser Pro 50 55 60 His Pro Pro Ala Phe Pro Pro Asn Thr Gly Gly Tyr Gly Cys Pro Pro 65 70 75 80 Gly His Phe Gly Gly Pro Tyr Gly Phe Pro Gly Tyr Pro Pro Pro Asn 85 90 95 Arg Leu Glu Met Gln Met Ser Ala Phe Met Asn Ala Leu Ala Ala Glu 100 105 110 Arg Gly Ile Asp Leu Gln Thr Pro Cys Val Asn Phe Pro Asp Lys Thr 115 120 125 Asp Val Arg Arg Pro Gly Lys Arg Asp Phe Lys Ser Met Asp Gln Arg 130 135 140 Glu Leu Asp Ser Phe Tyr Ser Gly Glu Ser Gln Met Asp Gly Glu Phe 145 150 155 160 Pro Ser Asn Ile Tyr Phe Pro Gly Glu Pro Thr Tyr Ile Thr His Arg 165 170 175 Arg Arg Arg Val Ser Pro Ser Tyr Trp Gln Arg Arg His Arg Val Ser 180 185 190 Asn Gly Gln His Glu Glu Leu Ala Gly Val Val Ala Lys Leu Gln Gln 195 200 205 Glu Val Thr Glu Leu Lys Ser Gln Asn Gly Thr Gln Met Pro Leu Ser 210 215 220 His His Thr Asn Ile Pro Glu Gly Thr Arg Asp Pro Arg Ile Ser Ile 225 230 235 240 Leu Leu Lys Gln Leu Gln Ser Val Ser Gly Leu Cys Ser Ser Gln Asn 245 250 255 Thr Thr Ser Thr Pro His Thr Asp Thr Val Gly Gln Asp Val Asn Ala 260 265 270 Val Glu Ala Ser Ser Lys Ala Pro Leu Ile Gln Gly Ser Thr Ala Asp 275 280 285 Asp Ala Asp Met Phe Ala Asn Gln Met Met Val Gly Arg Cys 290 295 300

Claims

재조합 수두대상포진 바이러스
제 1항에 있어서, BAC 벡터 서열을 포함함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 2항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열의 적어도 일부가 수두대상포진 바이러스 게놈의 비-필수 영역 내로 삽입됨을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 3항에 있어서, 상기 비-필수 영역은 하기 영역으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역
제 4항에 있어서, 상기 비-필수 영역은 유전자 11의 ORF 인접 영역 또는 유전자 12의 ORF 인접 영역임을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 2항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열의 적어도 일부가 수두대상포진 바이러스 게놈의 유전자 62의 ORF 내 영역으로 삽입됨을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 2항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 재조합 단백질 의존적 재조합 서열을 포함함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 2항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 선별 마커를 포함함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 8항에 있어서, 상기 선별 마커는 약제 선별 마컴임을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 2항에 있어서, 상기 선별 마커는 녹색 형광 단백질을 인코드하는 유전자임을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 2항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 야생주로부터 유래함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 2항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 변이주로부터 유래함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 2항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 Oka 백신주로부터 유래함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 2항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 유전자 62 및 유전자 6 내에 돌연변이를 지님을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 14항에 있어서, 상기 유전자 62는 적어도 서열번호: 5 내에 하기 (a)-(d)의 염기 치환을 포함하고:

(a) 2110 위치에서 G로 염기 치환;

(b) 3100 위치에서 G로 염기 치환;

(c) 3818 위치에서 C로 염기 치환; 및

(d) 4006 위치에서 G로 염기 치환

유전자 6은 적어도 서열번호: 8 내에 5745 위치에서 G로 염기 치환을 포함함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 2항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 서열번호: 7에 나타난 서열을 포함함을 특징으로 하는 재조합 수두대상포진 바이러스
제 1항의 바이러스를 포함한 약제적 조성물
제 17항에 있어서, 상기 조성물은 백신 형태임을 특징으로 하는 약제적 조성물
유전자 62 이외에 수두대상포진 바이러스 필수 유전자 및 BAC 벡터 서열을 포함한 벡터
제 19항에 있어서, 유전자 62를 더욱 포함함을 특징으로 하는 벡터
제 19항에 있어서, 상기 벡터가 포유류 세포 내로 도입시 포유류 세포가 수두대상포진 바이러스를 생성함을 특징으로 하는 벡터
제 19항에 있어서, 수두대상포진 바이러스 게놈 유래의 서열이 BAC 벡터 서열에 결합하는 부분은 수두대상포진 바이러스 게놈의 비-필수 영역 내에 존재함을 특징으로 하는 벡터
제 22항에 있어서, 상기 비-필수 영역은 하기 영역으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 벡터:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영 역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역
제 23항에 있어서, 상기 결합 부분은 유전자 11의 ORF 인접 영역 및 유전자 12의 ORF 인접 영역임을 특징으로 하는 벡터
제 19항에 있어서, 수두대상포진 바이러스 게놈 유래의 서열이 BAC 벡터 서열에 결합되는 부분은 수두대상포진 바이러스 게놈의 유전자 62의 ORF 내에 존재함을 특징으로 하는 벡터
제 19항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 재조합 단백질 의존적 재조합 서열을 포함함을 특징으로 하는 벡터
제 19항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 선별 마커를 포함함을 특징으로 하는 벡터
제 27항에 있어서, 상기 선별 마커는 약제 선별 마커임을 특징으로 하는 벡터
제 27항에 있어서, 상기 선별 마커는 녹색 형광 단백질을 인코드하는 유전자임을 특징으로 하는 벡터
제 19항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 야생주로부터 유래함을 특징으로 하는 벡터
제 19항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 변이주로부터 유래함을 특징으로 하는 벡터
제 19항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 Oka 백신주로부터 유래함을 특징으로 하는 벡터
제 19항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스는 유전자 62 및 유전자 6 내에 돌연변이를 지님을 특징으로 하는 벡터
제 33항에 있어서, 상기 유전자 62는 적어도 서열번호: 5 내에 하기 (a)-(d)의 염기 치환을 포함하고:

(a) 2110 위치에서 G로 염기 치환;

(b) 3100 위치에서 G로 염기 치환;

(c) 3818 위치에서 C로 염기 치환; 및

(d) 4006 위치에서 G로 염기 치환,

유전자 6은 적어도 서열번호: 8 내에 5745 위치에서 G로 염기 치환을 포함함을 특징으로 하는 벡터
제 19항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 서열번호: 7에 나타난 서열을 포함함을 특징으로 하는 벡터
재 19항의 벡터를 포함한 세포
제 36항에 있어서, 상기 세포는 박테리아 세포임을 특징으로 하는 세포
제 37항에 있어서, 상기 박테리아 세포는 E. coli임을 특징으로 하는 박테리아 세포
제 36항에 있어서, 상기 세포는 포유류 세포임을 특징으로 하는 세포
제 39항에 있어서, 상기 포유류 세포는 인간으로부터 유래함을 특징으로 하는 포유류 세포
제 39항의 포유류 세포에 의해 생성된 바이러스
제 41항의 바이러스를 포함한 약제적 조성물
제 42항에 있어서, 상기 조성물은 백신 형태임을 특징으로 하는 약제적 조성물
유전자 62 이외의 수두대상포진 바이러스 게놈 필수 유전자 및 BAC 벡터 서열을 포함한 벡터를 포유류 숙주 세포 내로 도입시키는 단계; 및

상기 포유류 숙주 세포를 배양하여 재조합 수두대상포진 바이러스를 제조하는 단계를 포함한 재조합 수두대상포진 바이러스의 제조방법
제 44항에 있어서, 상기 벡터는 유전자 62를 더욱 포함함을 특징으로 하는 방법
제 44항에 있어서, 상기 포유류 숙주 세포는 인간으로부터 유래함을 특징으로 하는 방법
제 44항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 적어도 2 이상의 재조합 단백질 의존적 재조합 서열을 포함함을 특징으로 하는 방법
제 47항에 있어서, 2개의 재조합 단백질 의존적 재조합 서열 사이의 재조합 단계를 더욱 포함함을 특징으로 하는 방법
제 44항에 있어서, 수두대상포진 바이러스 게놈 유래의 서열이 BAC 벡터 서열에 결합되는 부분이 수두대상포진 바이러스 게놈의 비-필수 영역 내에 존재함을 특징으로 하는 방법
제 49항에 있어서, 상기 비-필수 영역은 하기 영역으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 방법:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47 의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역
제 50항에 있어서, 상기 결합되는 부분은 유전자 11의 ORF 인접 영역 또는 유전자 12의 ORF 인접 영역임을 특징으로 하는 방법
제 44항에 있어서, 수두대상포진 바이러스 게놈 유래의 서열이 BAC 벡터 서열에 결합되는 부분은 수두대상포진 바이러스 게놈의 유전자 62의 ORF 내에 존재함을 특징으로 하는 방법
제 44항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 재조합 단백질 의존적 재조합 서열임을 포함함을 특징으로 하는 방법
제 44항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 선별 마커 포함함을 특징으로 하는 방법
제 54항에 있어서, 상기 선별 마커는 약제 선별 마커임을 특징으로 하는 방법
제 54항에 있어서, 상기 선별 마커는 녹색 형광 단백질을 인코드하는 유전자임을 특징으로 하는 방법
제 44항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 야생주로부터 유래함을 특징으로 하는 방법
제 44항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 변이주로부터 유래함을 특징으로 하는 방법
제 44항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 Oka 백신주로부터 유래함을 특징으로 하는 방법
제 44항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 유전자 62 및 유전자 6 내에 돌연변이를 지님을 특징으로 하는 방법
제 60항에 있어서, 상기 유전자 62는 적어도 서열번호: 5 내에 하기 (a)-(d)의 염기 치환을 포함하고:

(a) 2110 위치에서 G로 염기 치환;

(b) 3100 위치에서 G로 염기 치환;

(c) 3818 위치에서 C로 염기 치환; 및

(d) 4006 위치에서 G로 염기 치환,

유전자 6은 적어도 서열번호: 8 내에 5745 위치에서 G로 염기 치환을 포함함을 특징으로 하는 방법
제 44항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 서열번호: 7에 나타난 서열을 포함함을 특징으로 하는 방법
제 44항의 방법에 의해 제조된 바이러스
제 63항의 바이러스를 포함한 약제적 조성물
제 64항에 있어서, 상기 조성물은 백신 형태임을 특징으로 하는 약제적 조성물
벡터를 박테리아 숙주 세포 내로 도입시키는 단계;

적어도 하나 이상의 돌연변이를 지니고 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부로 구성된 단편을 포함한 플라스미드 벡터를 상기 박테리아 숙주 세포 내로 도입시키는 단계;

상기 박테리아 숙주 세포를 배양하는 단계;

상기 배양된 박테리아 숙주 세포로부터 BAC 서열을 지닌 벡터를 분리하는 단계를 포함한 제 19항의 벡터 내로의 돌연변이 도입방법
벡터를 박테리아 숙주 세포 내로 도입시키는 단계;

적어도 하나 이상의 돌연변이를 지니고 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부로 구성된 첫 번째 단편을 포함한 첫 번째 플라스미드 벡터를 상기 박테리아 숙주 세포 내로 도입시키는 단계;

적어도 하나 이상의 돌연변이를 지니고 수두대상포진 바이러스 게놈의 일부로 구성된, 상기 첫 번째 단편과 다른 두 번째 단편을 포함한 두 번째 플라스미드 벡터를 상기 박테리아 숙주 세포 내로 도입시키는 단계;

상기 박테리아 숙주 세포를 배양하는 단계;

상기 배양된 박테리아 숙주 세포로부터 BAC 서열을 지닌 벡터를 분리하는 단계를 포함한 제 19항의 벡터 내로의 돌연변이 도입방법
박테리아 세포 내에서 수두대상포진 바이러스 게놈과 재조합될 수 있는 첫 번째 단편, BAC 벡터 서열 및 박테리아 세포 내에서 수두대상포진 바이러스 게놈과 재조합될 수 있는 두 번째 단편을 포함하고, BAC 서열의 양 말단이 각각 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편에 결합된 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 적어도 1 kb임을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 적어도 1.5 kb임을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 적어도 2 kb임을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 수두대상포진 바이러스 게놈 서열과 적어도 80% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 수두대상포진 바이러스 게놈 서열과 적어도 85% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 수두대상포진 바이러스 게놈 서열과 적어도 90% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 수두대상포진 바이러스 게놈 서열과 적어도 95% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편 각각은 하기 수두대 상포진 바이러스 게놈의 영역으로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택됨을 특징으로 하는 핵산 카세트:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 62의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 62의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편 각각은 하기 수두대상포진 바이러스 게놈의 영역으로 구성된 군으로부터 선택된 군과 독립적으로 적어도 80% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 62의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 62의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편 각각은 하기 수두대상포진 바이러스 게놈의 영역으로 구성된 군으로부터 선택된 군과 독립적으로 적어도 85% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유 전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 62의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 62의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편 각각은 하기 수두대상포진 바이러스 게놈의 영역으로 구성된 군으로부터 선택된 군과 독립적으로 적어도 90% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 62의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유 전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 62의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편 각각은 하기 수두대상포진 바이러스 게놈의 영역으로 구성된 군으로부터 선택된 군과 독립적으로 적어도 95% 이상 동일함을 특징으로 하는 핵산 카세트:

유전자 7의 ORF 내 영역, 유전자 8의 ORF 내 영역, 유전자 9의 ORF 내 영역, 유전자 10의 ORF 내 영역, 유전자 11의 ORF 내 영역, 유전자 12의 ORF 내 영역, 유전자 13의 ORF 내 영역, 유전자 14의 ORF 내 영역, 유전자 15의 ORF 내 영역, 유전자 17의 ORF 내 영역, 유전자 18의 ORF 내 영역, 유전자 19의 ORF 내 영역, 유전자 38의 ORF 내 영역, 유전자 39의 ORF 내 영역, 유전자 46의 ORF 내 영역, 유전자 47의 ORF 내 영역, 유전자 48의 ORF 내 영역, 유전자 49의 ORF 내 영역, 유전자 50의 ORF 내 영역, 유전자 56의 ORF 내 영역, 유전자 57의 ORF 내 영역, 유전자 58의 ORF 내 영역, 유전자 59의 ORF 내 영역, 유전자 61의 ORF 내 영역, 유전자 62의 ORF 내 영역, 유전자 63의 ORF 내 영역, 유전자 64의 ORF 내 영역, 유전자 65의 ORF 내 영역, 유전자 66의 ORF 내 영역, 유전자 67의 ORF 내 영역, 유전자 68의 ORF 내 영역, 유전자 69의 ORF 내 영역, 유전자 70의 ORF 내 영역, 유전자 7의 ORF 인접 영역, 유전자 8의 ORF 인접 영역, 유전자 9의 ORF 인접 영역, 유전자 10의 ORF 인접 영역, 유전자 11의 ORF 인접 영역, 유전자 12의 ORF 인접 영역, 유전자 13의 ORF 인접 영역, 유전자 14의 ORF 인접 영역, 유전자 15의 ORF 인접 영역, 유전자 17의 ORF 인접 영역, 유전자 18의 ORF 인접 영역, 유전자 19의 ORF 인접 영역, 유전자 38의 ORF 인접 영역, 유전자 39의 ORF 인접 영역, 유전자 46의 ORF 인접 영역, 유전자 47의 ORF 인접 영역, 유전자 48의 ORF 인접 영역, 유전자 49의 ORF 인접 영역, 유전자 50의 ORF 인접 영역, 유전자 56의 ORF 인접 영역, 유전자 57의 ORF 인접 영역, 유전자 58의 ORF 인접 영역, 유전자 59의 ORF 인접 영역, 유전자 61의 ORF 인접 영역, 유전자 62의 ORF 인접 영역, 유전자 63의 ORF 인접 영역, 유전자 64의 ORF 인접 영역, 유전자 65의 ORF 인접 영역, 유전자 66의 ORF 인접 영역, 유전자 67의 ORF 인접 영역, 유전자 68의 ORF 인접 영역, 유전자 69의 ORF 인접 영역, 유전자 70의 ORF 인접 영역
제 68항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편은 다른 영역으로부터 유래함을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 72항에 있어서, 상기 첫 번째 단편 및 두 번째 단편 각각은 독립적으로 유전자 11의 ORF 인접 영역 및 유전자 12의 ORF 인접 영역으로부터 유래함을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 재조합 단백질 의존적 재조합 서열을 포함함을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 선별 마커를 포함함을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 84항에 있어서, 상기 선별 마커는 약제 선별 마커임을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 선별 마커는 녹색 형광 단백질을 인코드하는 유전자임을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 야생주로부터 유래함을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 변이주로부터 유래함을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 수두대상포진 바이러스 게놈은 Oka 백신주로부터 유래함을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 상기 BAC 벡터 서열은 서열번호: 7에 나타난 서열을 포함함을 특징으로 하는 핵산 카세트
제 68항에 있어서, 서열번호: 2에 나타난 핵산 서열을 지님을 특징으로 하는 핵산 카세트