KR20060123119A - 생리활성물질함유 유화액, 제조방법 및 그 투여방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은, 발명자의 보고에 의하여 비교적 최근에 알려지게 된 유구흡수작용을 이용하여, 동물에 경구적 약물을 전달하는 기술에 관한 것이다. 본 발명은 일정의 동물의 소화관에서 유구흡수작용을 유효하게 이용하도록 생리활성물질을 함유한 유화액을 제조하는 방법 및 이로부터 제조된 생리활성물질을 함유한 유화액을 제공함으로써, 면역부활물질, 약리활성물질등을 포함한 생리활성물질을 간편하면서도 상당히 높은 효과로 섭취시키는 경구적 약물전달 수단을 제공할 수 있다.

Description

생리활성물질함유 유화액, 제조방법 및 그 투여방법{EMULSIFIED SOLUTION CONTAINING PSYSIOLOGICAL ACTIVATION MATERIAL, A METHOD FOR PREPARING THEREOF, AND A METHOD FOR ADMINISTRATION THEREOF}

본 발명은 발명자의 보고에 의하여 비교적 최근에 알려지게 된 유구흡수작용을 이용하여, 동물에 경구적 약물을 전달하는 기술에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명은 일정 동물의 소화관에서 유구흡수작용을 유효하게 이용하기에 적합하도록 신규 개발된 생리활성물질함유 유화액, 그 제조방법 및 이를 투여하는 방법에 관한 것이다.

예전부터 예를 들면 사람, 토끼, 쥐, 가축등의 포유동물의 특정 질병을 예방하기위해 그 질병에 대한 백신이나 면역부활물질등을 투여하는 방법이 종종 제안되어져왔다. 최근에는 백신과 일정의 약리작용을 나타내는 물질외 각종 생리활성물질을 물에서 양식하는 동물등에 투여하여 질병의 예방/치료등을 추구하는 시험도 늘고 있다.

사람을 제외한 포유동물에 대하여 전통적으로 행하여지고 있는 혈관주사(정맥주사)등의 방법은 이론적으로는 우수한 효과를 기대할 수 있는 약물전달 방법이지만, 생물체에 대하여 일정의 외과적 침습(侵襲)스트레스를 준다는 결점이 있고, 더욱이 그 방법을 어류나 갑각류, 조개류등에 적용시키기는 쉽지 않다.

따라서 어류, 갑각류, 패류 등에 대한 생리활성물질의 투여방법으로서는, 경구투여가 주를 이루게 되었다. 그래서 그 경구투여제를 설계함에 있어서 투여대상으로서 1 혹은 2종이상의 생리활성물질과 그에 병용하는 종별 조제가 각각 다른 친화성(친수성 혹은 친유성)을 가진 점등을 고려하면서 경구투여제의 안정성 등을 함께 고려하여 각종 형태의 에멀션제제를 연구하고 있는 추세이다.

그 예로는 일본 특허 공개 평11-255664호에는 분자량이 10,000이하의 펩티드 글리칸을 경구투여용 면역증강제의 유효성분으로서, 그대로 혹은 사료에 첨가하여 포유동물과 어류, 갑각류(구체적으로는 새우의 일종으로서 블랙타이거)에 투여하는 기술이 개시되어져 있다.

또한, 일본 공개 평8-504811호에는 생리적으로 허용된 약제송출용 에멀션에 의해 플루오르케미칼(구체적으로는 파플루오르데카린등의 파플루오르카본)과 기름이 수중에서 유화된 입자, 계면활성제 및 해당 에멀션에 가용화되어있는 약제를 포함하는 에멸션이 개시되어 있다.

즉, 상기 2가지 특허문헌에서는 요컨대 트리글리세리드와 같은 액상지방유 30중량％이하를 기질로 하여, 플루오로화합물 75중량％이하 및 약제액 20중량％이하를 계면활성제의 작용에 의하여 분산하고 있는 에멀션계를 찾아볼 수 있다.

한편, 일본 특허공개 평7-53404호를 보면, 항원성물질과 한쪽의 아쥬반트가 친유성이고, 다른쪽의 아쥬반트가 친수성인 친유성-친수성 혼합물을 개시하고 있다. 구체적으로는 유중수적형 에멀션에 있어서 기질인 분산매(기름 70중량％)에 유 화제를 함유시키는 것에 의해 분산질(수적(水滴) 30중량％)에 항원성물질 및 아쥬반트를 포함하게 된다.

그러나 생리활성물질을 경구투여하게되면, 투여효과가 충분히 발현하기 어렵다는 일반적 문제가 이전부터 인식 되어져 오고 있다. 예를들면 상기 기재한 일본 특허 공개 평11-255664호 기재내에서 어류에 대해서 생리활성물질의 경구투여가 충분한 효과를 보이기 어렵다고 지적되어 있음을 찾아볼 수 있다 .그 이유는 완전하게 해명되어 있지 않지만, 아마도 혈관 주사와는 달리 경구투여의 경우에는 소화관을 통해서 흡수되기 때문에 생리활성물질이 흡수되기전 소화되거나, 혹은 소화관에서 충분하게 흡수되지 않는 점과 관련되어 있을 것으로 여겨진다. 즉 상식적으로 볼 때 동물의 소화관에서 기름(지방)은 지방산과 글리세린으로 분해된 후 분자레벨에서 흡수되게 되는 것이다.

그러나, 본 발명자는 어류등의 소화관에 있어서 매우 미세한 사이즈의 유구(油球)가 장관상피에서 그대로 체내에 흡수된다는 놀랄만한 유구흡수작용을 발견하고 미야자키등 미에대학 생물자원학부 개요1호, 15-27항(1998)에 [참돔 혹은 흑돔 자치어(仔稚漁)의 난황흡수와 소화관에서의 영양섭취에 관한 조직학연구]라는 명칭으로서 개시한 바 있다. 나아가 일부의 포유동물에 있어서도 같은 형태의 유구흡수작용이 인정되어진다는 신규의 사실들이 추가적으로 밝혀지기 시작하고 있다.

기술적 과제

이에 본 발명자는 이러한 유구흡수작용을 잘 이용하면 백신, 면역부활물질과 약리활성물질을 간단한 방법으로 상당히 높은 효율로 동물에게 섭취시킬수 있는 경구적 약물전달 수단을 구축할 수 있지 않을까라는 착상에 기초하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

한편, 이러한 착상은 가)그 적용대상을 소화관에서의 유구흡수작용이 확인되어있는 동물에 한정하는 것,과 나)대상동물에게 경구투여하는 작고 미세한 유구(油球)가 유구흡수작용의 대상이 되는 일정의 평균입경을 가질 것,의 2가지 사항이 기본적인 사항이다. 상기한 일본 특허문건들을 포함한 종래기술에 있어서 이같은 사항들은 전혀 개시된 바 없을 뿐만 아니라 고려된 적도 없었다.

또한 본 발명자가 보고한 상기 일본 논문자료는 비록 유구흡수작용에 대하여 보고하고는 있지만, 그 작용을 경구적인 약물전달의 수단으로 이용할 수 있는 가능성에 대해서는 전혀 언급하고 있지 않을 뿐만 아니라 구체적인 실시 방법도 전혀 검토되고 있지 않다.

기술적 해결방법

본 발명의 제1견지에 의하면,

동물의 소화관에 있어 유구흡수작용의 대상이 되는 미소유구(微小油球)가 분산된 수중유적형(水中油滴型)의 유화액에 있어서,

상기 미소유구가 분산된 유화액내 유적에 생리활성물질이 함유되며,

상기 생리활성물질은 미소유구중에 존재하는 유용성유화제의 작용에 의해 그대로 혹은 소량의 수분과 함께 매우 미세한 분산상을 형성하여 유상중에 포매(包埋)된 형태로 존재하는 것을 특징으로 하는 생리활성물질함유 유화액이 제공된다.

본 발명의 제2견지에 의하면,

동물의 소화관에 있어 유구흡수작용의 대상이 되는 미소유구(微小油球)가 분산된 수중유적형(水中油滴型)의 유화액에 있어서,

상기 미소유구가 분산된 유화액내 유적에 생리활성물질이 함유되며,

상기 생리활성물질은 미소유구중에 친유성으로서 용해 또는 현탁되어 존재하는 것을 특징으로 하는 생리활성물질함유 유화액이 제공된다.

본 발명의 제3견지에 의하면,

동물의 소화관에 있어 유구흡수작용의 대상이 되는 미소유구(微小油球)가 분산된 수중유적형(水中油滴型)의 유화액에 있어서,

상기 미소유구가 분산된 유화액내 유적에 생리활성물질이 함유되며,

상기 생리활성물질은 지질이중층에 의하여 형성된 미셀 구조를 갖는 미소유구 내부에 봉입(封入)된 형태로 존재하는 것을 특징으로 하는 생리활성물질함유 유화액이 제공된다.

본 발명의 제4견지에 의하면,

(A) 생리활성물질, 그 수용액 혹은 수현탁액(水

濁液)과 유용성 유화제첨가 유액을 혼합하여 유화시킴으로써 유성유화상을 제조하는 제1유화공정, 및

(B) 제1유화공정에서 제조된 유성유화상과 수용성유화제를 첨가한 물을 혼합하여 유화시킴으로써 상기 유성유화상이 동물의 소화관에 있어서 유구흡수작용의 대상이 되는 미소유구로서 수중에 분산된 수중유적형 유화액을 제조하는 제2유화공정, 을 포함하여 이루어지는 생리활성물질함유 유화액을 제조하는 방법이 제공된다.

본 발명의 제5견지에 의하면,

유화액내 유적이 생리활성물질을 함유함과 동시에 동물의 소화관에 있어 유구흡수작용의 대상이 되도록 제조된 미소유구(微小油球)가 분산된 생리활성물질 함유 유화액을 동물에 경구투여하는 생리활성물질함유 유화액을 투여하는 방법이 제공된다.

본 발명의 제6견지에 의하면,

유화액내 유적이 생리활성물질을 함유함과 동시에 동물의 소화관에 있어 유구흡수작용의 대상이 되도록 제조된 미소유구(微小油球)가 분산된 생리활성물질 함유 유화액을 사료 혹은 사료용 펠렛에 섭식 함침시킨 다음 동물에 섭식시키는 생리활성물질함유 유화액을 투여하는 방법이 제공된다.

이하에, 상기 제1 내지 제6견지의 발명을 실시하기 위한 형태를, 그 최적 형태를 포함하여 설명한다.

[생리활성물질함유 유화액]

제1~제3견지의 발명에 관한 생리활성물질함유 유화액에 있어서는 동물의 소화관에 있어서 유-구흡수작용의 대상이 되는 평균입경을 가진 미소유구(微小油球)가 분산된 수중유적형(水中油滴型)의 유화액에 있어서 각 미소유구중에 있어서는 유용성유화제의 작용에 의해 생리활성물질이 그대로 혹은 소량의 수분과 함께 아주 미소한 분산상의 형성한 유상주에 포매(包埋)되어 있다.

상기 미소유구중에는 생리활성물질의(혹은 생리활성물질과 소량의 수분과의) 아주 미소한 분산상이 그 개개의 분산상에 있어서 분산질과의 계면에 유용성유화제를 유지하는 상태로 분산질인 미소유구의 유상중에 안정적으로 분산하고 있다. 그리고 이러한 미소유구가 각 미소유구에 있어서 분산질(물)과의 계면에 수용성유화제를 유지한 상태로 분산질인 수중에 안정적으로 분산하고 있다.

상술한 바와 같은 생리활성물질함유 유화액은 수중유적형 유화액이므로 유적인 미소유구의 분산형태가 안정되며, 그 미소유구는 동물의 소화관에 있어서 유구흡수작용을 대상으로하는 평균입경을 가지기 때문에 대상동물의 소화관에 있어서 양호하게 유구흡수작용을 이용할 수 있고, 높은 효율로 대상동물의 체내에 섭취시키는 것이 가능하다. 게다가 그 미소유구중 유용성유화제의 작용에 의하여 생리활성물질이 그 자체가 혹은 소량의 수분과 함계 아주 미소한 분산상을 형성하여, 유상중에 포매되어져 있다. 따라서 동물의 장관내 리파아제의 작용을 수용할 경우, 미소유구의 표층부의 일부가 소화되었다고 하여도 미소유구의 입자구조는 미셀구조와 같이는 붕괴되지 않고 유지되어, 장관상피에 의해 양호하게 흡수된다. 또한 생리활성물질을 유용성유화제의 작용에 의하여 유중에 분산시키기 때문에 생리활성물질을 그 친화성(친수성 또는 친유성)의 여하를 막론하고, 게다가 아주 미세한 분산상태로 미소유구중에 포매 될 수 있으며, 더 나아가서는 소정의 미소한 평균입경을 가진 유구를 제조하는 것이 용이하게 된다.

보다 구체적으로, 상기 생리활성물질로는 친화성이 수용성, 친수성, 유용성, 친유성이면 모두 가능하며, 바람직하게는 상위개념적인 카테고리로서 백신, 면역부활물질, 영양물질, 약리작용물질, 천연색소 혹은 미네랄로 이루어진 그룹으로부터 1종이상을 선택하는 것이 좋다. 그 예로는, 백신으로서 병원바이러러스나 세균이나 기생충의 분쇄물등 글루칸, 훼코이단, LPS(리포다당류)등의 면역부활제등을 들 수 있다. 또한, 항체등의 생리활성을 가진 폴리펩티드, 비타민류등의 영양물질, 혹은 항생물질, 호르몬, 인터페론등의 약리작용물질도 사용가능하며, 그밖에도 대상동물에 일정한 색채를 부여하기 위한 천연색소나 유기 혹은 무기 칼슘, 철, 마그네슘등의 미네랄도 사용가능하다.

한편, 생리활성물질함유 유화액에 포함된 미소유구의 특징은, 유용성유화제의 작용에 의하여 미소유구(微小油球)중에서 생리활성물질이 아주 미소한 분산상을 형성하고 있다는데(유상중에 포매된다는데) 있다. 그리고 생리활성물질은 그대로 혹은 소량의 수분과 함께 극히 미세분산하고 있기 때문에 미세한 분산상에 있어서 생리활성물질의 농도는 100％까지는 아니더라도 매우 고농도이며 따라서 약물전리 효과가 현저하게 높게 된다.

이것들을 비교하여 (1)의 입자구조는 본 발명자가 제1발명의 효과적 실시를 위하여 창제(創製)한 입자구조로 그 상세한 설명은 제7발명에서 논술하였으나 동물의 장관내 리파아제의 작용에 의해서도 유구구조는 붕괴되지 않고, 게다가 생리활성물질의 친화성의 여하를 막론하고, 이것을 미소유구(微小油球)중에 아주 미소하게 분산시키는 것이 가능하다는 이점을 가지고 있다.

한편, 상기 미소유구(微小油球)에 있어서 유구흡수작용의 대상이 되는 평균입경은 대상동물의 종류에 대응해서 일률적으로는 한정할 수 없으나 예를들어 1~60㎛ 범위내인 것이 바람직하며, 1~20㎛ 범위내인 것이 보다 바람직하다. 미소유구의 입도분포(각 미소유구의 입전 정도)도 특히 한정할 수는 없으나, 상기 평균입경 범위내에서 가능한한 입도분포(度分布)가 좁은 것이 이상적이다.

나아가 미소유구의 구체적인 입자구조는 유구흡수작용의 대상이라면 범위를 한정할 필요는 없지만 다음과 같은 3종류의 입자구조를 이상적으로 예시할 수 있다.

(1)미소유구중 유용성유화제의 작용에 있어서 생리활성물질이 그대로 혹은 소량의 수분과 함께 아주 미소한 분산상을 형성하고 있다.

(2)미소유구중 친유성 생리활성물질이 용해 혹은 혼탁해 있다.

(3)미소유구가 지질이중층에 의하여 형성된 미셀구조를 갖으며, 그 내부에 생리활성물질이 투입되어 있다.

이중에서 (2)번째 구조는 유액에 친유성 생리활성물질을 용해 혹은 미세하게 혼탁시킨 다음 그 유액과 물을 사용하여(바람직하게는 유화제를 재사용하여) 수중유적형의 유화액을 구성하는 것이다.

또한 (3)번째 구조는 수중에서 지질이 중층에 의하여 형성된 미셀구조(그 내부에 생리활성물질의 수용액등이 투입됨)를 구성하는 것이다. 이 (2)번째 및 (3)번째 입자구조의 제조방법, 혹은 이같은 입자구조를 가진 미소유구가 분산된 유화액의 조제방법은 공지 혹은 주지된 방법내에서 적당한 방법을 선택하여 용이하게 실시할 수 있다.

유구흡수작용의 대상이 되는 [유구(油球)]의 종류 혹은 입자구조는 한정되어 있지 않지만, 예를 들면 (1)~(3)의 구조는 유구분산액으로서의 안정성을 기대할 수 있는 것부터 대표적으로 예시한 것으로, 이들을 (1)~(3)의 입자구조를 상대적으로 평가할 때, (3)번째 구조는 일반적으로 [리보솜]으로 통칭되는 소포상의 입자구조이지만, 동물의 장관내 리파아제의 작용으로 경계막(지질2중층)이 붕괴된 경우에는 유구구조를 유지할 수 없고, 유구흡수작용을 이용할 수 없게 된다는 결점이 있다. 한편, (2)번째 입자구조는 요컨대 유구(기름공)이기 때문에 리파아제의 작용에 의해서도 그 유구구조는 쉽게 붕괴되지 않지만, 유용성의 생리활성물질을 유구중에 용해시키는 경우는 제외하고, 일반적으로 생리활성물질을 유구중에 미분산(微分散)시키는 것이 곤란하고 더 나아가서는 소정의 미소한 평균입경을 가진 유구를 조제하는 것 자체도 곤란하기 쉬운 결점이 있다.

이하에서는, 생리활성물질의 이같은 고농도 혹은 미세분산 상태를 가능케하는 생리활성물질함유 유화액중 첫번째 입자구조의 제조방법에 대하여 자세하게 살펴본다.

생리활성물질함유 유화액의 제조방법은 (A)제1유화공정,과 (B)제2유화공정을 필수 공정으로 한다. 단, 이것 공정에 대하여 임의의 전처리공정, 중간공정 혹은 후처리 공정을 부가할 수 있다.

(A)제1유화공정으로는 생리활성물질 또는 그 수용액 또는 수현탁액과 유용성 유화제를 첨가한 유액을 혼합하여 유화시킴으로써 유상중에 포매(包埋)되어 있는 유성유화상을 제조한다. 즉, 이같은 제1유화공정에 의하여 생리활성물질이 그대로 혹은 소량의 수분과 함께 아주 미소한 분산상을 형성하여 유상중에 포매(包埋)되어 있는 유성유화상을 제조하게 되는 것이다.

한편, 상기 제1유화공정에서 생리활성물질로서 그 수용액 혹은 수현탁액을 사용하는 경우, 수분을 가능한한 적게하는 것(즉, 생리활성물질의 고농도 수용액 혹은 고밀도 수현탁액)이 이상적이다.

나아가, 상기 제1유화공정에 있어서 중요한 기술적 포인트는 생리활성물질과 그 수용액등(a相)에 대하여 유용성유화제를 첨가한 유액(b相)을 혼합하여 유화시킨다는데 있다. 여기서 a상相과 b相의 혼합비율은 일률적으로 규정할 수는 없으나, 중량비를 기준으로 할 때,a相:b相=1:99~99:1정도의 범위내에서 임의로 선택가능하다.

여기서 a相과 b相의 중량비가 상기의 범위를 벗어나거나 b相에 유용성유화제를 첨가하지 않으면, 앞서 기술한 바와 같이 생리활성물질포매형(生理活性物質包埋型)의 미소유구(微小油球) 제조는 실패하기 쉽다. 여기서 b相에 대한 유용성유화제의 첨가량은 1~5중량％ 범위내인 것이 바람직하다.

여기서, 유용성유화제란 독성이나 생리적 안전성등에 문제가 없는 한 그 종류를 한정하는 것은 아니나, HLB(친수성-친유성 밸런스)값이 6이하인 것이 바람직하며, 보다 바람직하게는 HLB값이 2이하인 것이 좋다. 또한 유화제 타입은 비이온성 계면활성제 타입인 것이 바람직하다.

이같은 조건에 해당하는 바람직한 유용성유화제로는 리놀렌산헥사글리세린, 폴리옥시에틸렌라우릴에테르, 레시틴, 폴리옥시에틸렌올레일에테르 등을 들 수 있다.

(B)제2유화공정으로는 상기 (A)제1유화공정에서 제조된 유성유화상과 수용성유화제를 첨가한 물을 혼합하여 유화된 것에 의하여 유성유화상이 동물의 소화관에 있어서 유구흡수작용의 대상이 되는 평균입경을 가지고 미소유구로서 수중에 분산한 수중유적형(水中油適型) 유화액을 제조하게 된다.

상기 제2유화공정내 기술적인 포인트는 제1유화공정에서 제조된 유성유화상(c相)에 대하여 수용성 유화제를 첨가한 물(d相)을 혼합하고 유화시킨다는데 있다. 여기서 c相과 d相과의 혼합비율은 특정할 수는 없으나 중량비를 기준으로, 예를 들면 c相:d相=2:1~1:3 범위내에서 임의로 선택된다.

c相과 d相의 중량비가 상기의 범위를 벗어나거나, 혹은 d상에 수용성유화제를 첨가하지 않으면, 본 발명에 관련된 생리활성물질함유유화액의 제조는 실패하기 쉽다. 여기서 d상(相)에 대한 수용성유화제의 첨가량은 0.5~1.3중량％정도인 것이 좋다.

한편, 상기 수용성유화제란 독성과 생리적 안전성등에 문제가 없는 한 그 종류를 한정할 필요는 없지만 HLB값이 10이상인 것이 바람직하며, 그 값이 12이상인 것이 보다 바람직하다. 또한 유화제의 타입으로는 앞서 기술한 바와 같이 비이온성계면활성제가 이상적인데, 이같은 조건에 해당하는 이상적인 수용액유화제로는 디스테아린산데카글리세린, 이소스테아린산글리세르, 모노이소스테아린산데카글리세린, 모노올레인산에틸렌글리콜등을 예로 들 수 있다.

이상의 (A)제1유화공정과 (B)제2유화공정에 있어서 유화조작은, 공지되어 있는 초음파, 호모게나이저, 혹은 믹서등을 이용하여 수행할 수 있다. 이같은 유화조작시 유화수단의 운전조건을 적절히 선택함으로써 생리활성물질함유액에 있어서 미소유구의 입경과 그 미소유구중에 있어서 생리활성물질의 미세한 분산 정도를 조정할 수 있다.

한편, 상술한 바와 같이, 첫번째 생리활성물질 또는 그 수용액등과 유액을 혼합한 다음 그 유액에 유용성 유화제를 첨가함으로써 초음파처리와 호모게나이져이용등의 공지된 유화액형성수단을 이용시에 생리활성물질이 그대로 혹은 소량의 수분과 함계 아주 작은 분산상을 형성하여 유상중에 포매되어있는 유성유화상을 형성하게 된다.

[생리활성물질의 투여방법]

본 발명에 관련된 생리활성 물질의 투여방법에 있어서는 수중유적형의 유화액에 있어서 그 유적이 생리활성물질을 포함함과 동시에 동물의 소화관에 있어서 유구흡수작용의 대상이 되는 평균입경을 가진 미소유구를 조제하고, 그 유화액을 소화관에 유구흡수작용이 인정된 사람을 제외한 동물에 경구투여하게 된다.

여기서 사용되는 각종 재료, 예를 들면 유화액의 유적을 구성하는 유액, 유화액의 형성에 사용되는 계면활성제(앞서 기술한 생리활성물질 함유 유화액 제조시 사용되는 유용성 유화제와 수용성 유화제 포함) 혹은 사료용 펠렛등은 모두 대상동물에 대하여 무독성 또는 생리적 안전성이 인정된 것을 이용하는 것을 전제조건으로 한다. 게다가 영양면등에서 대상동물에 유익한 것을 이용하는 것이 이상적이다.

본발명에 관련된 생리활성물질의 투여방법에 있어서는 수중유적형 유화액의 경구투여 방법을 구체적으로 한정할 필요는 없다. 예를들면 주사기 등을 이용하여 대상동물의 구강내에 주입하는 것도 가능하고 포유동물에 대해서는 액제 그대로 음용시키는 것도 가능하다. 또 그 동물용의 사료에 혼합하여 섭식(攝食)시켜도 된다. 이중에서 동물용 사료펠렛(특히 이상적인 것은 다공질의 사료펠렛)에 함침(含浸)시켜 그대로 혹은 건조하여 섭식시키는 것이 보다 바람직하다. 여기서 사료펠렛으로는 각종의 시판품등을 임의로 이용할 수 있다.

이같은 경구투여법에 의하면, 투여대상에 있어서 사람을 제외한 동물에 대해 혈관주사법에 의한 외과적 침습(侵襲)스트레스를 주지않고 예를 들면 어류나 갑각류, 패류에 적용하기 용이하다.

한편, 앞서 기술한 바와 같이, 그 적용대상을 소화관에의 유구흡수작용이 확인되어진 동물로 한정하고, 대상동물에 경구투여하는 미소유구가 유구흡수작용의 대상이 되는 일정의 평균입경을 가진 것이라는 2가지의 조건을 만족과 동시에 약물전달의 목적물질인 생리활성물질이 수중유적형 유화액의 유적인 미소유구중에 포함됨으로써 경구투여한 대상동물의 소화관에 있어서 생리활성물질을 포함한 미소유구는 원형대로 장관상피에서 그대로 체내에 흡수되게 되며, 결과적으로 종래 경구투여방법에서 보여진 생리활성물질이 흡수전에 소화되거나, 소화관에서 충분하게 흡수되지 않거나 하는 불합리성을 피할 수 있게 되어, 생리활성물질을 간단한 방법에 의해 상당히 높은 효과로 동물체내에 섭취시키는 것이 가능하게 되는 것이다.

한편, 본발명에 관련된 생리활성물질의 투여방법의 대상이 되는 동물은 소화관에 있어서 유구흡수작용이 인정되어져 있는 사람을 제외한 동물, 즉 수처동물 혹은 사람을 제외한 육처포유동물이면 모두 좋다.

보다 구체적으로는 소화관에 있어서 유구흡수작용이 인정된 동물, 예를들어 토끼, 쥐, 개, 고양이, 소, 돼지등의 사람을 제외한 포유동물, 조류, 양서류, 파충류, 양식어나 관상어를 포함한 각종의 어류, 패류, 수처갑각류(새우, 게)등을 들 수 있다.

발명의 실시를 위한 최선의 형태

이하에서는, 본 발명을 실시하기에 최적의 발명을 상세하게 기술하나, 본 발명을 이에 한정하려는 것은 아니다.

(실시예1)

생리활성물질로서 대장균 포르말린사균을 사용하여 그 사균을 고밀도로 함유한 수현탁액(제1액)을 제조하였다. 한편, 오징어간유에 대해서는 유용성유화제로서 리놀렌산헥사글리세린(상품명 [산소푸드#818R], 타이요우화학사제품) 5중량％를 첨가하여 유액(제2액)을 제조하였다.

이어서, 제 1유화처리로서 제1액과 제2액을 90:10 중량비로 혼합한 다음, 초음파발생기에 의해 충분한 유화처리를 하여 대장균의 포르말린사균의 고밀도혼탁액이 아주 미소한 분산상을 형성하는 유상중에 포매(包埋)시킨 유성유화상(제3액)을 형성하였다.

그런 다음 수용성유화제로서 디스테아린산데카글리세린(상품명 [산소푸드 Q-182S], 타이요우카가쿠사제품) 1중량％를 첨가한 물(제4액)을 제조하였다. 그리고 제2유화처리로서 제3액과 제4액을 2:1 중량으로 혼합한 다음 믹서로 충분히 교반하여 상기 유성유화상이 미소유구(微小油球)로서 수중에 분산된 생리활성물질함유 유화액을 조제하였다.

이같이 제조된 생리활성물질함유 유화액내에 포함된 미소유구의 입경을 관찰한 결과 대략 5∼10㎛정도였다. 제조된 생리활성물질함유 유화액을 냉장고에 약 1주간 보관한 다음 미소유구의 입경을 재관찰한 결과, 대략 5~10㎛정도였으며, 이로부터 미소유구의 분산상태 안정성을 확인할 수 있었다.

(실시예2)

본 실시예에서는 넙치의 병원세균인 에드워드시엘라 타라다(Edwardsiella tarada)의 포르말린 사균을 이용하였다. 상기 사균을 107 개체/ml를 포함하는 수현탁액(제1액)을 조제한 다음 실시예 1에 기재한 것과 동일한 방법을 사용하여 생리활성물질함유 유화액을 조제하였다.

그런 다음 제조된 생리활성물질함유유화액을 시판중인 어류사료용 다공질 펠릿에 적량 함침시켰다. 그리고 15마리의 넙치를 대상으로 상기 다공질 펠렛을 어체 100g당 유화액섭취량이 10㎕/일이 되도록, 13일간 연속 섭이시켰다.

섭취기간 종료후 23일째 15마리 넙치중 5마리로부터 동맥 채혈하여 얻어진 혈청중에서 에드워드시엘라 타라다(Edwardsiella tarada) 항체의 항체가(抗體價)를 응집가(凝集價)로서 측정하였다.

그 측정결과를 하기 표1로서 표기하였다. 이하에서 [투여구]는 실시예에 관련된 5마리를 의미하며, [대조구]는 비교예에 관련된 5마리를 의미한다. 또한 [물고기]의 계수는 투여구와 대조구 5마리 넙치의 검체번호이다.

표 1

상기한 응집가 측정과는 별도로, 본 실시 예에 관련된 섭취기간 종료 후 23일째 앞서 기술한 15마리 넙치중 잔류 10마리에 대해서는 에드워드시엘라 타라다 (Edwardssiella tarada) 생균을 근육내에 주사(공격균량으로서 105개체/㎖ 균액을 0.3㎖씩 주사)하여 14일간 사육한 다음고 생존율을 평가하였다. 한편 비교예로서 생리활성물질함유 유화액을 섭이시키지 않은 넙치 10마리에 대하여도 같은 방식으로 에드워드 타라다(Edwardssiella tarada) 생균을 근육내에 주사하고 14일간 사육시킨 다음, 생존율을 평가하였다.

그 평가결과를 하기표 2로서 표시하였다. 이하에서 [경과일수]의 숫자는 생균 주사후의 경과일수를 표기하며, [투여구]는 실시예에 관련된 넙치를, 그리고 [대조구]는 비교예에 관련된 넙치를 표기하고 각 숫자는 그날에 사망한 개체수를 표기하였다.

표 2

상기표에서 확인할 수 있듯이, 투여구, 대조구 모두 경과일수 6일째까지 사망 개체는 없었으나, 대조구의 경우 14일경과시점에서 사망개체수 누계가 5(생존율 50％)에 불과하였다.

이상의 결과로부터, 항체가 측정 및 생균주사후 생존율에서 모두 투여구가 대조구에 비하여 현저하게 우수한 것을 확인할 수 있었다.

(실시예3)

본 실시예에서도 상기 에드워드시엘라 타라다(Edwardssiella tarada)의 포르말린 사균을 이용하였다. 그리고 그 사균을 109개체/㎖ 함유된 수현탁액(제1액)을 조제하는 한편, 실시예 1의 경우와 같이 제2액을 제조하였다.

이어서 상기 제1액과 제2액을 99:1 중량비로 혼합하여 초음파 발생기에 의하여 충분한 유화처리를 시행함으로써 대장균의 포르말린 사균의 고밀도현탁액이 아주 미세한 분산상을 형성하도록한 유상중에 포매(包埋)되어져 있는 유성유화상(그룹1의 제3액)을 형성하였다. 또한 상기 제1액과 제2액을 90:10 중량비로 혼합한 다음 위와같은 유화처리를 실시하고 유성유화상(그룹2의 3액)을 형성하였다.

그런 다음 실시예1과 동일한 방법으로 제4액을 제조하고, 그룹1의 제3액 및 그룹2의 제3액에 대하여 각각 제3액과 제4액을 2:1의 중량비로 혼합하고, 믹서로 충분하게 교반하여 상기의 유성유화상이 미소유구로서 수중에 분산된 생리활성물질함유 유화액([그룹1의 생리활성물질함유유화액]과 [그룹2의 생리활성물질함유유화액])을 조제하였다.

다음으로 그룹1의 생리활성물질 함유유화액과 그룹2의 생리활성물질함유유화액을 각각 시판중인 어류사료용의 다공질 펠렛에 적량 함침시켰다. 여기서 다공질 펠렛은 어체중 100g당 1일의 유화액 섭취량이 0.05㎖되도록 하였다. 각각 10마리의 넙치(평균체중 100g)에 대하여 3일간 자유섭식시켰다. 이하에서는 그룹 1의 생리활성물질함유유화액을 섭이(攝餌)한 넙치를 [그룹A], 그룹2의 생리활성물질함유유화액을 섭이한 넙치를 [그룹B]라 한다.

다음 [그룹A]과 [그룹B]에 관련된 넙치에 관해서는 섭이기간 종료후 23일째에 넙치의 혈청중 에드워드시엘라 타라다(Edwardssiella tarada) 항체의 항체가를 응집가로서 측정하였다. 그 결과를 하기표 3의 [균체포매유구투여구]에 표기하였다. 하기표 3의 [물고기] 숫자는 [그룹A]과 [그룹B]에 관련된 10마리 넙치의 검체번호이다.

한편, 대조구로서, 앞서 상술한 바와 같이 에드워드시엘라 트라다(Edwardssiella trada)의 포르말린사균과 오징어간유와 유용성유화제를 실시예3내 [그룹A]와 같은 량을 사용하여 단순 혼화한 유성액을 조제하였다.

그 유성액은 제2유화처리에 상당하는 프로세스를 거치지 않기 때문에 본 발명에 관련된 생리활성물질함유유화액으로는 포함되지 않는 것이다.

이 유성액을 상술한 바와 같이 다공질 펠렛에 함침시켜 10마리의 넙치에 투여하고 항체 생성 평가를 실시하였다. 그 유성액을 섭이한 넙치를 [그룹D]의 넙치군으로 하고, 그 평가결과를 표 3내 [대상군]중 [그룹D]란에 표기하였다. 더욱이 에드워드시엘라 트라다(Edwardssiella trada)의 포르말린사균과 유화액등을 어떠한 형태로도 투여하지않은, 통상적인 10마리의 넙치를 [그룹 C]의 넙치군으로 하여 이들 넙치에 대하여도 같은 형태의 방법으로 항체생성의 평가를 실시하였다. 그 평가결과 또한 표3의 [대조구]중 [그룹C]란에 표시하였다.

표 3

상기표에서 확인할 수 있듯이, [그룹A]과 [그룹B]의 넙치에서는 전체적으로 고농도의 에드워드 타라다(Edwardssiella tarada) 항체가 생산되어져 있다. 또한, [그룹C]과 [그룹D]간 평가 결과는 거의 차이가 없으며, 이들과 [그룹A] 및 [그룹B]는 현저한 평가결과상의 차이가 존재함을 확인할 수 있었다.

상기한 바에 따르면, 양식용 또는 관상용 각종 어류와 수처갑각류등에 대하여 혹은 유구흡수작용이 확인되는 포유동물등에 대하여 면역부활물질과 약리활성물질, 그밖의 각종 생리활성물질을 간편한 방법으로 상당히 높은 효과로 섭취시킬 수 있다.

Claims (10)

1. 동물의 소화관에 있어 유구흡수작용의 대상이 되는 미소유구(微小油球)가 분산된 수중유적형(水中油滴型)의 유화액에 있어서,

   상기 미소유구가 분산된 유화액내 유적에 생리활성물질이 함유되며,

   상기 생리활성물질은 미소유구중에 존재하는 유용성유화제의 작용에 의해 그대로 혹은 소량의 수분과 함께 매우 미세한 분산상을 형성하여 유상중에 포매(包埋)된 형태로 존재하는 것을 특징으로 하는 생리활성물질함유 유화액.
2. 동물의 소화관에 있어 유구흡수작용의 대상이 되는 미소유구(微小油球)가 분산된 수중유적형(水中油滴型)의 유화액에 있어서,

   상기 미소유구가 분산된 유화액내 유적에 생리활성물질이 함유되며,

   상기 생리활성물질은 미소유구중에 친유성으로서 용해 또는 현탁되어 존재하는 것을 특징으로 하는 생리활성물질함유 유화액.
3. 동물의 소화관에 있어 유구흡수작용의 대상이 되는 미소유구(微小油球)가 분산된 수중유적형(水中油滴型)의 유화액에 있어서,

   상기 미소유구가 분산된 유화액내 유적에 생리활성물질이 함유되며,

   상기 생리활성물질은 지질이중층에 의하여 형성된 미셀 구조를 갖는 미소유구 내부에 봉입(封入)된 형태로 존재하는 것을 특징으로 하는 생리활성물질함유 유 화액.
4. 제1 내지 3항중 어느 한항에 있어서, 상기 미소유구의 평균 입경은 1~60㎛ 범위내인 것을 특징으로 하는 생리활성물질함유 유화액.
5. 제1 내지 3항중 어느 한항에 있어서, 상기 생리활성물질은 백신, 면역부활물질, 영양물질, 약리작용물질, 천연색소 및 미네랄로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 생리활성물질함유 유화액.
6. (A) 생리활성물질, 그 수용액 혹은 수현탁액(水

   

   濁液)과 유용성 유화제첨가 유액을 혼합하여 유화시킴으로써 유성유화상을 제조하는 제1유화공정, 및 (B) 제1유화공정에서 제조된 유성유화상과 수용성유화제를 첨가한 물을 혼합하여 유화시킴으로써 상기 유성유화상이 동물의 소화관에 있어서 유구흡수작용의 대상이 되는 미소유구로서 수중에 분산된 수중유적형 유화액을 제조하는 제2유화공정, 을 포함하여 이루어지는 생리활성물질함유 유화액의 제조방법
7. 유화액내 유적이 생리활성물질을 함유함과 동시에 동물의 소화관에 있어 유구흡수작용의 대상이 되도록 제조된 미소유구(微小油球)가 분산된 생리활성물질 함유 유화액을 동물에 경구투여하는 생리활성물질함유 유화액의 투여방법.
8. 유화액내 유적이 생리활성물질을 함유함과 동시에 동물의 소화관에 있어 유구흡수작용의 대상이 되도록 제조된 미소유구(微小油球)가 분산된 생리활성물질 함유 유화액을 사료 혹은 사료용 펠렛에 섭식 함침시킨 다음 동물에 섭식시키는 생리활성물질함유 유화액의 투여방법.
9. 제7항 또는 제8항에 있어서, 상기 동물은 수중동물 혹은 육지포유동물인 것을 특징으로 하는 생리활성물질함유 유화액의 투여방법.
10. 제7항 또는 제8항에 있어서, 상기 생리활성물질은 백신, 면역부활물질, 영양물질, 약리작용물질, 천연색소 및 미네랄로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 1종이상인 것을 특징으로 하는 생리활성물질함유 유화액의 투여방법.