KR20060054190A

KR20060054190A - 코로나 바이러스를 불활성화시키는 제제

Info

Publication number: KR20060054190A
Application number: KR1020057023103A
Authority: KR
Inventors: 유루 세미오노비치 크리보쉐인; 알로리나 페트로브나 루드코
Original assignee: 메가인팜 게엠베하
Priority date: 2003-06-04
Filing date: 2004-06-03
Publication date: 2006-05-22
Also published as: EP1634590A4; CN1798553A; RU2234313C1; CN100350904C; EP1634590A1; WO2004108125A1

Abstract

본 발명은 항진균 및 항균 작용을 나타내고, HIV, 인플루엔자 및 헤르페스 바이러스 감염에 효능이 있는 방부제(antiseptic)로서 이미 알려져 있는 미라미스틴(일명 미리스타미도-프로필-디메틸-벤질-암모늄 클로라이드) 형태의 신규한 코로나 바이러스 불활성화제에 관한 것이다. 본 발명에 의해 상기 용도를 위한 약제의 범위가 확장되며, 코로나 바이러스에 의해 유발되는 호흡기도 질환(사스 포함) 및 위장염의 치료 및 예방이 가능케 된다.

Description

코로나 바이러스를 불활성화시키는 제제{CORONAVIRUS INACTIVATING AGENT}

본 발명은 의약 및 약제 산업에 관한 것으로서, 의료용 및 예방용 약물의 발견, 제조 및 적용에 사용될 수 있다.

유성용매(liposolvent), 계면활성제 및 방부제(antiseptic)는 코로나 바이러스를 불활성시키는 치료제로서 알려져 있다(L. Ya. Zakstel'skaya, A. V. Scheboldov // Human and animal coronaviruses; Medicine, Moscow, 1977, vol. 2, p. 221; General and particular virology, under edition of V.M. Jdanov and S. Ya. Gaidamovich, Medicine, Moscow, 1982, vol. 2, p. 316-339; A. I. Korotyaev, S.A. Babichev // Medicinal microbiology, virology and immunology, Saint-Petersburg: ≪Special literature≫, 1998, p. 273).

본 발명자들은 코로나 바이러스의 불활성화를 위한 미리스타미도프로필디메틸벤질암모늄 클로라이드("미라미스틴(Myramistin)", 발명자 증서 1832496)의 용도를 제안한다. 이미 이 화합물은 매독, 트리코모나시스증(trichomoniasis), 임질과 같은 전통적인 성병의 예방약으로서 그리고 화농염증성 각막 질환용 방부제( R.P. 특허 2164135)(antiseptic)로서 알려져 있다.

청구되는 기술적 해결책에 의해 코로나 바이러스에 의해 야기되는 질환의 예방용 및 치료용 약물의 수가 증가된다.

본 화합물의 불활성화 효과를 아래 제시되는 실시예에 나타내었다(여기서, "미라미스틴"은 설명의 단순화를 위한 화합물명으로서 사용된다).

실시예 1 : 미라미스틴 최소억제농도(MIC)를 사람 태아 신장세포 배양액(시험관내)상에서 코로나 바이러스 시험 배양액(사람 코로나 바이러스 OC43)에 대하여 하기 순서에 따라 측정하였다:

제 1 단계	시험-바이러스＋미라미스틴(상응하는 농도로)
제 2 단계	인큐베이션(2 시간)
제 3 단계	반응 혼합물에 중화제(예를 들어 25% 소 태아 혈청) 첨가 및 10-20 분간 인큐베이션
제 4 단계	감수성 세포 배양액(예를 들어, 사람 태아 신장 세포 배양액)의 감염
제 5 단계	인큐베이션(5-8 일)
제 6 단계	혈구흡착 현상 및 세포변성 활성에 기초한 결과의 등록 -심플라스토포메이션(symplastoformation)

4 개의 화합물 제제에 대해 연속 세 번의 실험을 수행하였다. 수득된 결과에 기초하여 코로나 바이러스에 대한 미라미스틴의 최소억제농도를 산출하였다. 실험데이터를 아래 표 1에 나타내었다.

[표 1] 시험관내 사람 코로나 바이러스 OC43에 대한 미라미스틴 및 다른 방부제의 MIC

방부제	MIC(%)
미라미스틴(Myramistin)	0.01±0.005
데카메톡신(Decamethoxin)	0.1±0.05
클로르헥시딘(Chlorhexidine)	0.05±0.005
에토늄(Etonium)	0.5±0.2
디옥시딘(Dioxydine)	R
록칼(Rockal)	0.1±0.05
노녹시놀-9(Nonoxinol-9)	0.2±0.09
트윈-20(Twin-20)	2.0±0.8

주: R - 코로나 바이러스는 2.5% 이상의 방부제 농도에 대해 내성이 있다.

수득된 결과(표 1)로부터 알 수 있는 바와 같이, 코로나 바이러스 불활성화의 관점에서 보면 미라미스틴은 현재 사용된 모든 공지의 방부제에 비해 더욱 효과적이다.

실시예 2 : 어린 마우스에서의 생체내 사람 코로나 바이러스 OC43에 대한 미라미스틴 MIC를 하기 순서에 따라 측정하였다:

제 1 단계	시험-바이러스＋미라미스틴(상응하는 농도로)
제 2 단계	인큐베이션(30 분)
제 3 단계	뇌 또는 복강으로 어린 마우스의 감염
제 4 단계	감염 2-3일후에 결과의 등록[커버렛(coverlet)의 충혈, 떨림, 근육의 경직, 빨기(sucking) 결여증, 동물의 사망]

상이한 농도를 가진 4 개의 화합물 제제에 대해 연속 세 번의 실험(각각의 제제에 대해 6 마리의 마우스)을 수행하였다. 어린 마우스에 대한 바이러스의 감염 발달(infectious development)을 lgLD₅₀으로 평가하였다. 평균적인 실험값를 표 2에 나타내었다.

[표 2] 사람 코로나 바이러스 OC43의 감염 활성(생체내, 어린 마우스)에 대한 미라미스틴 영향(MIC 농도)의 결과

일련 번호	바이러스의 감염 활성( lgLD₅₀)
	처리전	상응하는 용량으로 처리후(%)
	처리전	0.0001	0.001	0.005	0.01
1.	6.4	3.6	1.0	0	0
2.	6.0	3.2	1.0	0	0
3.	6.3	3.0	1.2	0	0

수득된 결과는 0.0001% 농도의 미라미스틴이 존재하는 경우 바이러스 활성이 거의 반으로 감소되며, 0.005% 이상의 미라미스틴 농도에서는 바이러스 활성이 완전 중화되는 것을 명백히 나타낸다.

실시예 3 : 코로나 바이러스 OC43의 혈구응집 활성에 대한 미라미스틴의 영향을 닭의 적혈구에 의한 혈구응집 반응(HGR)에 기초하여 평가하였다.

1:512 이상의 혈구응집 역가를 가진 코로나 바이러스 OC43을 함유하는 배양액에 0.000001 내지 0.001%의 농도를 가진 미라미스틴 용액을 가했다. 인큐베이션 30분후, 25% 소태아 혈청을 가하여 미라미스틴을 중화시킨 다음, 10-20분후 닭의 적혈구를 사용하여 HGR을 수행하였다. 상이한 농도를 가진 4 개의 화합물 제제에 대해 연속 네 번의 실험(각각의 농도에 대해 3 가지 실시예)을 수행하였다. 평균적인 실험값을 표 3에 나타내었다.

[표 3] 코로나 바이러스 OC43의 혈구응집 활성에 대한 미라미스틴 영향의 실험 결과

일련 번호	혈구응집 활성의 역가
	처리전	상응하는 용량으로 처리후(%)
	처리전	0.000001	0.00001	0.0001	0.001
1.	512	8	4	0	0
2.	2048	16	8	0	0
3.	1024	8	4	0	0
4.	2560	16	8	0	0

상기 실험 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 코로나 바이러스 혈구응집소 대한 미라미스틴의 영향(감수성 세포에 대해 그의 흡착을 제공함)에 은 그의 감염 활성(0.0001%) 보다 낮은 농도(0.000001%)에서 달성된다.

수득된 실험 데이터는, 제안된 기술적 해결책이 코로나 바이러스의 불활성화에 미리스타미도프로필디메틸벤질암모늄 클로라이드(≪미라미스틴≫)의 적용을 가능케 하며, 코로나 바이러스에 의해 유발되는 질병을 치료하기 위한 신규의 예방용 및 치료용 약물을 발견하는데 사용될 수 있음을 명백히 나타낸다.

Claims

코로나 바이러스의 불활성화를 위한 미리스타미도프로필디메틸벤질암모늄 클로라이드(≪미라미스틴≫)의 적용