KR20060026642A - Accessory using plant itself, root or seed thereof - Google Patents
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Abstract
본 발명은 식물체를 이용한 악세사리에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 배양 배지와 조직배양을 통해 왜소화시킨 배양식물체를 포함하는 배양용기 및 상기 배양 용기를 무균 상태로 밀폐하기 위한 밀폐부재를 포함하는 것을 특징으로 하는 식물체를 이용한 악세사리에 관한 것이다. 본 발명의 악세사리는 투명용기에서 조직배양을 통해 왜소화시킨 배양식물체, 배양뿌리 또는 배양종자를 다양한 색상이 표출되는 배지에서 무균적으로 배양함으로써 주기적으로 수분이나 양분을 공급해야 하는 번거로움을 해소하고, 배양용기의 모양, 배지에 첨가되는 색소를 다양화함으로써 시각적 가치를 향상시킬 수 있는 장점이 있다.The present invention relates to an accessory using a plant, and more particularly, comprising a culture vessel including a cultured plant dwarfized by culture medium and tissue culture, and a sealing member for sealing the culture vessel in a sterile state. It relates to an accessory using a plant. The accessory of the present invention eliminates the hassle of supplying water or nutrients periodically by sterilely culturing the cultured plants, culture roots or culture seeds cultivated in a transparent container in a medium in which various colors are expressed, By varying the shape of the culture vessel, the pigment added to the medium has the advantage that can improve the visual value.
조직배양, 식물체, 배지, 악세사리Tissue Culture, Plants, Media, Accessories
Description
도 1은 본 발명의 배양식물체가 배양된 악세사리의 사진1 is a photograph of the accessories cultured culture plants of the present invention
도 2는 본 발명의 배양뿌리가 배양된 악세사리의 사진Figure 2 is a photograph of the accessories cultured culture root of the present invention
도 3은 본 발명의 배양종자가 배양된 악세사리의 사진 Figure 3 is a photograph of the accessories incubated culture culture seed of the present invention
본 발명은 식물체를 이용한 악세사리에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 조직배양을 통해 왜소화시킨 배양식물체, 배양뿌리 또는 배양종자를 이용하여 시각적 및 장식적 가치를 향상시키며, 특별한 관리 없이도 살아있는 식물체, 뿌리 또는 종자를 이용한 악세사리에 관한 것이다.The present invention relates to an accessory using a plant, and more particularly, to improve visual and decorative value by using a cultured plant, a culture root or a culture seed that has been dwarfized through tissue culture, and a living plant, root or seed without special management. It relates to accessories using.
일반적으로 식물체는 화분에서 키움으로써 성장에 필요한 수분 및 양분을 주기적으로 공급해 주어야 하므로 이를 소형화하여 악세사리로 이용한다는 것은 매우 어렵고 불가능에 가까운 일이다. In general, plants need to be periodically supplied with moisture and nutrients necessary for growth by growing them in pots, so miniaturizing them and using them as accessories is very difficult and almost impossible.
최근 들어 식물조직배양기술을 통해 기내 배양된 식물체를 투명용기내 배지에서 키움으로써 주기적으로 식물체에 수분이나 기타 양분을 공급하여야 하는 번거로움이 해소되었으나, 크기 및 시각적인 면에서 악세사리화하기에는 부적절하여 관상용 식물 재배용 팬시에 그치는 정도였다.In recent years, plant tissue culture technology has helped to cultivate in-flight vegetation in a medium in a transparent container, thereby eliminating the need to periodically supply water or other nutrients to the plant, but it is inappropriate for accessory in terms of size and visual aspect. It was just a fancy plant cultivation.
그러나, 최근 들어 식물조직배양기술을 통해 기내 배양된 식물체를 투명용기내 배지에서 키움으로써 식물체를 악세사리화하기 위한 방법이 발표된 바 있다(대한민국 공개특허 제10-2004-0013593호). 구체적으로, 상기 특허에서는 일면에 씨앗이 발아 가능하도록 보관되는 보관부재; 상기 보관부재 일면에 삽입 고정되고, 자체 탄성력이 구비된 밀폐부재; 및 상기 밀폐부재에 밀착되면서 상기 보관부재 일면에 상기 씨앗이 발아되는 발아실이 형성되도록 삽입 고정된 마감부재로 이루어진 것을 특징으로 하는 발아실이 구비된 악세사리를 개시하고 있는데, 이는 내부에 살아있는 씨앗을 발아조건을 충족시켜 발아시키면 전자적으로는 인체의 생체 에너지, 자석부재의 자장, 금재질의 특성이 새싹의 전자유기체에 전자적 반응으로 구성되고, 에너지활성화로 높아진 전위의 생체 에너지는, 다시 낮은 전위를 가진 인체로 전이시키는 회로를 갖게 되는 것을 특징으로 한다. 또한, 투명한 마감부재를 사용하여 새싹의 성장과정을 외부에서 볼 수 있어 다양한 각도에서 신선함을 즐길 수 있고, 새싹이 발아될 때 방사하는 식물성 생체 에너지를 인체에 전이시키는데 인위적인 요소가 전혀 없는 순수한 자연에서 얻게 되는 에너지로, 씨앗이 생명으로 태어나는 근저에서 우러나오는 자연 친화적인 태동의 에너지를 인간 건강 및 젊음을 유지시키는 요법으로 기여하게 되는 효과를 제공한다. 그러나, 상기 특허에서는 주기적으로 식물체에 수분이나 기타 양분을 공급하여야 하는 번거로움은 해소하였으나, 발아실을 별도로 두어야 하는 등 그 구조가 복잡하고 또한 크기 및 시각적인 부분에서 악세사리화 하기에는 부적절하여 관상용 식물 재배용 팬시에 그치는 정도에 불과하였다.Recently, however, a method for accelerating plants has been published by growing in-flight cultured plants in a transparent container medium through plant tissue culture technology (Korean Patent Publication No. 10-2004-0013593). Specifically, in the patent, the storage member is stored so that the seeds can germinate on one surface; A sealing member inserted and fixed to one surface of the storage member and provided with its own elastic force; And close to the sealing member discloses an accessory provided with a germination chamber, characterized in that consisting of a closure member is inserted and fixed to form a germination chamber in which the seeds germinate on one surface of the storage member, which is a living seed therein When germination meets germination conditions, the electronic energy of the human body, the magnetic field of the magnet member, and the gold material are composed electronically with the electronic organic matter of the sprout. It is characterized by having a circuit to transition to the human body. In addition, by using a transparent finishing member, the growth process of sprouts can be seen from the outside, so you can enjoy freshness from various angles, and in pure nature without any artificial elements to transfer the plant bioenergy radiating to the human body when sprouts germinate. The energy gained provides the effect of contributing to the human health and youth therapies the natural, friendly energy of the seed from which the seed is born. However, the patent eliminates the trouble of periodically supplying water or other nutrients to the plant, but the structure is complicated, such as a germination chamber, and it is inappropriate to be accessory in size and visual parts, and thus for cultivating ornamental plants. It was only a fancy.
본 발명은 상기와 같은 종래 식물체를 이용한 악세사리의 문제점을 해결하고 웰빙을 추구하는 현대인의 다양한 요구를 만족시키기 위하여 안출된 것으로서, 조직배양을 통해 왜소화시킨 배양식물체, 배양뿌리 또는 배양종자를 무균상태의 작은 투명용기에 넣어 핸드폰 걸이, 목걸이, 귀걸이 등으로 악세사리화 함으로써, 착용하는 동안 별도의 관리 없이도 식물체 등의 생장과정을 관찰할 수 있는 장점을 가지는 식물체를 포함하는 악세사리를 제공하는 것을 목적으로 한다.
The present invention has been made in order to solve the problems of the accessory using the conventional plants as described above and to satisfy the various needs of modern people pursuing well-being, the sterile culture plants, culture roots or culture seeds through tissue culture in a sterile state It is an object to provide an accessory containing a plant having the advantage of observing the growth process of the plant without any additional management while wearing by putting in a small transparent container and accessories such as a cell phone hanger, necklace, earrings.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 배양 배지와 배양식물체를 포함하는 배양용기 및 상기 배양용기를 무균 상태로 밀폐하기 위한 밀폐부재를 포함하는 것을 특징으로 하는 식물체를 이용한 악세사리를 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides an accessory using a plant comprising a culture vessel comprising a culture medium and a culture plant and a sealing member for sealing the culture vessel in a sterile state.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명은 식물체의 조직을 수크로스(sucrose) 및 겔라이트(gelrite)가 첨가 된 배양 배지를 이용하여 2,000 내지 2,500 룩스(lux)의 조도로 12 내지 16시간의 광주기 조건에서 2 내지 6주간 배양함으로써 신초를 유도한 후, 이를 다시 암배양 조건으로 계대배양하여 형성된 왜소화된 식물체와 이를 포함하고 있는 배양용기 및 상기 배양용기를 무균 상태로 밀폐하기 위한 밀폐부재를 포함하는 것을 특징으로 하는 식물체를 이용한 악세사리를 제공한다.In the present invention, the tissues of plants are cultured for 2 to 6 weeks under photoperiod conditions of 12 to 16 hours at a roughness of 2,000 to 2,500 lux using a culture medium to which sucrose and gelrite are added. By inducing shoots by using the plant characterized in that it comprises a dwarfed plant formed by subcultured under the conditions of cancer culture, a culture vessel containing the same and a sealing member for sealing the culture vessel in a sterile state. Provide accessories.
상기에서, 배양식물체로는 왜소화된 식물체 자체, 배양뿌리 또는 배양종자가 사용될 수 있다. 본 발명에 적합한 왜소화된 식물체는 수분의 공급이 없어도 생육이 가능할 뿐만 아니라, 그 생육속도가 느려 배양용기 본체 내부에서 자랄 수 있어 악세사리로 가능하여야 하며, 이러한 조건을 만족시키는 식물로서는 다육식물이 적합하다. 다육식물은 사막이나 높은 산 등과 같이 장기간동안 수분이 적은 지역에 자생하고 건조에 견딜 수 있도록 지상의 줄기나 잎에 다량의 수분을 저장하는 식물로서, 밸러스, 라우이 등이 있으며, 아프리카 바이올렛도 성장이 느리고 수분 및 양분고갈에 적응력이 큰 식물로써 상기 목적에 적합한 식물체 중의 하나이다. 종자 또한 상기 조건에 적합한 것이어야 하므로, 노지에서 얻은 종자 즉 접합자배 내지는 조직배양을 통해서 얻어진 종자 즉 체세포배를 이용하는 것이 바람직하며, 뿌리의 경우에는 본 발명에서 사용된 배지에서 생육할 수 있는 것으로서, 산삼, 인삼, 일일초, 황기, 지치, 시호 등의 조직배양을 통해 얻어진 모상근 내지는 부정근 등이 적합하다.In the above, as the culture plants, dwarfized plants themselves, culture roots or culture seeds may be used. Dwarfed plants suitable for the present invention are not only capable of growing without supply of water, but also have a slow growth rate so that they can grow inside the main body of the culture vessel, and must be possible as accessories. Succulent plants are suitable as plants that satisfy these conditions. . Succulents are plants that store a large amount of moisture on the stems and leaves of the ground to grow naturally in low moisture areas such as deserts and high mountains and to withstand dryness, such as ballus, laurie, and African violet. Slow and adaptable to moisture and nutrient depletion, it is one of the plants suitable for this purpose. Since the seed should also be suitable for the above conditions, it is preferable to use seeds obtained from the open field, that is, seeds or somatic embryos obtained through culturing or tissue culture, and in the case of roots, the seed can be grown in the medium used in the present invention. Wild ginseng, ginseng, daily herb, Astragalus, jichi, hairy root or irregular root obtained through tissue culture such as Shiho is suitable.
본 발명의 악세사리를 제조함에 있어서, 악세사리에 포함되는 식물체는 왜소화된 식물체인 것을 특징으로 한다. 왜소화되지 않은 보통의 식물체는 생육을 위 하여 수분의 공급이 반드시 필요하고, 또한 일반적으로 생육속도가 너무 빨라 용기내에서 키운지 얼마되지 않아 용기 본체 내부에서 자랄 수 없기 때문에 본 발명에 따른 악세사리로는 사용될 수 없다. 따라서, 본 발명의 악세사리에 사용되기 위해서는 이러한 특징을 본래부터 가지고 있는 다육식물 등의 식물체를 사용하거나, 아니면 보통의 식물체에 왜소화 공정을 거쳐 상기와 같은 특성을 가지는 식물체로 변형시킨 후 사용하여야 하며, 상기와 같은 조건에 부합되는 식물체라면 어떠한 식물체를 사용하여도 무방하다. 본 발명에서는 상기와 같이 왜소화된 식물체를 사용함으로써 종래의 식물체를 이용한 악세사리가 해결할 수 없었던 문제점들을 극복하였다.In manufacturing the accessory of the present invention, the plant included in the accessory is characterized in that the dwarfized plant. The non-dwarfed general plants must be supplied with moisture for growth, and in general, the growth rate is too fast to grow in the container so that it cannot grow inside the container body. Cannot be used. Therefore, in order to be used in the accessories of the present invention, plants such as succulents, which have these characteristics inherently, or they must be used after transforming them into plants having the above characteristics through the process of dwarfization to ordinary plants. Any plant can be used as long as it meets the above conditions. In the present invention, by using the dwarfized plants as described above, the problems that the accessories using the conventional plants could not solve.
본 발명의 식물체를 포함하는 악세사리를 제조함에 있어서, 식물체잎, 배양뿌리 또는 배양종자는 수크로스 및 겔라이트가 첨가된 MS 배양배지를 이용하여 2,000 내지 2,500 룩스로 12 내지 16시간의 광주기 조건에서 2 내지 6주간 배양함으로써 신초를 유도한 후, 이를 다시 암배양 조건으로 계대배양하여 왜소화된 식물체를 형성시킨 후 이를 악세사리의 제조에 사용한다. 이때, 배양 온도는 25℃ 정도가 적당하고, 배지의 pH는 5.8인 것이 바람직하며, 배양뿌리의 배양시에는 2,4-D를 비롯한 옥신를 추가한 배지를 사용하는 것이 바람직하다. 본 발명의 바람직한 실시에서는 3% 수크로스 및 0.5% 겔라이트가 첨가된 MS 배양배지를 이용하였다In preparing the accessory including the plant of the present invention, the plant leaf, the culture root or the culture seed is 2,000 to 2,500 lux in 12 to 16 hours photoperiod condition using MS culture medium to which sucrose and gellite are added. After induction of shoots by incubation for 2 to 6 weeks, it is subcultured to cancer culture conditions again to form dwarfed plants and then used for the preparation of accessories. At this time, the culture temperature is preferably about 25 ℃, the pH of the medium is preferably 5.8, it is preferable to use a medium to which auxin including 2,4-D is added when culturing the culture root. In a preferred embodiment of the present invention, MS culture medium added with 3% sucrose and 0.5% gelite was used.
상기 배양 배지로는 식물 조직 배양시 널리 사용되는 MS (Murashige and skoog) 배지를 사용할 수 있으며, 이외에도 B5, 화이트(WHITE), N6, SH, 앤더슨(Anderson) 등의 배지를 사용할 수 있고, 이들 배지에 여러 가지 식용색소를 첨가 함으로서 식물체 등의 생장에는 해를 주지 않으면서 여러 가지 색상을 표현하여 소비자의 다양한 취향에 부합하도록 할 수 있다. 상기 MS 배지는 담배 캘러스 배양용으로 고안된 총 무기이온 농도가 높은 배지로서 식물 배양시 일반적으로 사용되는 배지이다. 상기 배양 배지는 양분 역할을 하는 수크로스가 배지 중량의 2 내지 4%, 바람직하게는 3%를 포함하고, 지지물인 겔라이트를 배지 중량의 0.2 내지 0.6%, 바람직하게는 0.3% 포함한다. 당으로서 수크로스를 첨가함으로써 추가적인 외부 영양분 공급 없이도 용기본체 내부에서 배양식물체, 배양뿌리 및 배양종자의 성장에 필요한 양분을 자체적으로 공급할 수 있으며, 수크로스 이외에도 포도당, 과당 등과 같은 다른 종류의 당을 양분으로 사용할 수 있다. 겔라이트는 지지물로 사용된다.As the culture medium, MS (Murashige and skoog) medium which is widely used in cultivating plant tissues may be used, and in addition to this, medium such as B5, white, white, N6, SH, and Anderson may be used. By adding various food coloring to the plant, it is possible to express various colors without harming the growth of plants, etc., to meet various tastes of consumers. The MS medium is a medium having a high total inorganic ion concentration designed for tobacco callus culture, and is a medium generally used in plant culture. The culture medium contains 2 to 4%, preferably 3%, of sucrose serving as a nutrient, and contains 0.2 to 0.6%, preferably 0.3%, of the support, gellite. By adding sucrose as a sugar, it is possible to supply nutrients necessary for the growth of cultured plants, roots and culture seeds inside the container body without additional external nutrient supply.In addition to sucrose, other types of sugar such as glucose and fructose Can be used as Gellite is used as a support.
본 발명의 배양용기 본체는 그 내부에 기내 배양된 식물체, 배양뿌리 또는 배양종자를 포함하며, 투명유리, 플라스틱 또는 크리스탈과 같이 투명한 재질로 제작되어 이를 통하여 살아있는 기내 배양식물체 등의 생장과정을 소비자가 직접 관찰할 수 있는 것이 바람직하며, 이를 통하여 변화와 웰빙을 추구하는 소비자의 욕구를 충족시킬 수 있는 장점이 있다. 이때, 용기의 크기는 1-5 ㎝ 인 것이 바람직하지만 반드시 이에 한정되지는 않는다.The culture vessel body of the present invention includes a plant, a culture root or a culture seed cultured in-flight therein, and is made of a transparent material such as transparent glass, plastic, or crystal, thereby allowing the consumer to grow the living plant culture process. It is desirable to be able to directly observe, and through this, there is an advantage that can satisfy the needs of consumers seeking change and well-being. At this time, the size of the container is preferably 1-5 cm, but is not necessarily limited thereto.
상기 밀폐부재는 용기본체 내부로 이물질이나 세균의 침투를 차단함과 동시에 식물체 등의 생장에 필요한 공기의 유입과 생장중에 발생한 유해공기의 배출이 이루어질 수 있는 재질이어야 하며, 코르크 부재가 적당하지만 반드시 이에 한정되는 것은 아니다.The sealing member should be a material capable of blocking the infiltration of foreign substances or bacteria into the container body and at the same time the inflow of air necessary for the growth of plants and the discharge of harmful air generated during growth. It is not limited.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of examples.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.However, the following examples are only for illustrating the present invention, and the content of the present invention is not limited by the following examples.
[실시예 1] 왜소화된 식물체 자체를 포함하는 악세사리의 제조Example 1 Preparation of Accessories Including Dwarfized Plants
<1-1>왜소화된 식물체의 제조<1-1> Preparation of Dwarfized Plant
벨루스의 어린잎을 1% 차아염소산(sodium hypochlorite)과 2 내지 3 방울 트윈(tween20)으로 10분간 소독한 후 멸균수로 3 내지 5회 세척하였다. 표면살균된 잎을 3% 수크로스 및 0.3% 겔라이트가 첨가된 MS 기본배지(Ducefa or Sigma CO. LTD)에 치상하였다. 배지는 겔라이트를 넣기 전에 pH 5.8로 맞추고 121℃에서 15분간 고압멸균하여 준비하였다. 잎을 2,000 내지 2,500 룩스(lux)에서 16시간의 광주기로 25℃에서 4주간 배양하면 많은 양의 신초가 발생하며, 상기 신초를 동일한 조성의 배지에 계대하여 3주간 암배양함으로써 왜소화된 신초를 얻었다.The young leaves of Belarus were sterilized with 1% sodium hypochlorite and 2-3 drops tween20 for 10 minutes and washed 3 to 5 times with sterile water. Surface sterilized leaves were dented on MS basal medium (Ducefa or Sigma CO. LTD.) Added with 3% sucrose and 0.3% gelite. The medium was prepared by adjusting the pH to 5.8 before autoclaving and autoclaving at 121 ° C. for 15 minutes. When leaves were incubated for 4 weeks at 25 ° C. with a photoperiod of 16 hours at 2,000 to 2,500 lux, a large amount of shoots were generated, and the shoots were passaged in medium of the same composition to obtain dwarfed shoots for 3 weeks. .
<1-2>식물체 자체를 포함하는 악세사리의 제조<1-2> Preparation of accessories including the plant itself
상기 실시예 <1-1>에서 준비된 왜소화된 배양식물체를 무균작업대 내에서 색소, 3% 수크로스 및 0.5% 겔라이트가 첨가된 MS 배지가 주입되어 있는 3 ㎝ 크기의 투명 배양 용기내에 치상함으로써 도 1 에 도시된 바와 같은 식물체 자체를 포함하는 악세사리를 제조하였다.The dwarfed cultured plants prepared in Example <1-1> were dentured in a 3 cm-sized transparent culture vessel in which MS medium to which pigments, 3% sucrose and 0.5% gelite were added was injected into a sterile work bench. Accessories including the plant itself as shown in 1 were prepared.
[실시예 2] 배양 뿌리를 포함하는 악세사리의 제조Example 2 Preparation of Accessories Containing Cultured Roots
산지에서 자란 200년된 산삼의 뿌리(구입처:(주)만민식품)를 1 내지 2% 차아염소산과 2 내지 3방울 트윈을 넣고 약 3 내지 7분간 소독한 후 멸균수로 세척하였다. 표면살균된 산삼을 1 ㎜ 두께로 횡단으로 절단하여 1 내지 2 ㎎/ℓ의 2,4-D(Duchfa or sigma CO. LTD), 3% 수크로스 및 0.3% 겔라이트가 첨가된 MS 기본배지에 치상하였다. 배지는 겔라이트를 넣기 전에 pH 5.8로 조정하고 121℃에서 15분간 고압멸균한 것을 사용하였다. 치상한 산삼은 25℃에서 약 4 내지 6주동안 암배양한 후 캘러스(callus)를 유도하였다. 상기 유도된 캘러스를 동일조성의 배지에 계대하여 증식시킨후 1 내지 2 ㎎/ℓ IBA(Indole Butyric acid, Duchefa or Sigma CO. LTD)가 첨가된 MS 기본배지에 계대배양한 후 2 내지 4주 배양하여 부정근을 형성하였다. 형성된 부정근을 2 ㎎/ℓ IBA, 3% 수크로스, 1/2 무기염류가 첨가된 MS 액체배지에 치상하여 공기부양식 생물반응기에서 증식시켰다.The roots of 200 years old wild ginseng (purchased from Manmin Food Co., Ltd.) grown in the mountains were put in 1 to 2% hypochlorous acid and 2-3 drops of twin, sterilized for about 3 to 7 minutes, and washed with sterile water. The surface sterilized wild ginseng was cut 1 mm thick in a transverse MS medium containing 1 to 2 mg / L of 2,4-D (Duchfa or sigma CO. LTD), 3% sucrose and 0.3% gelite. It was healed. The medium was adjusted to pH 5.8 before adding the gellite and autoclaved at 121 ° C. for 15 minutes. Healed wild ginseng induced callus after cancer culture at 25 ° C. for about 4-6 weeks. Subsequently, the induced callus was propagated in a medium of the same composition, followed by subculture on 1 to 2 mg / l IBA (Indole Butyric acid, Duchefa or Sigma CO. LTD) added MS basic medium and cultured for 2 to 4 weeks. Thereby forming a root muscle. The formed root muscle was grown on an MS liquid medium to which 2 mg / L IBA, 3% sucrose, 1/2 inorganic salt was added, and grown in an air-lift bioreactor.
증식된 부정근을 2 내지 3 ㎝ 크기로 절단한 후, 상기 실시예 <1-2>과 동일한 방법으로 도 2 에 도시된 바와 같은 배양 뿌리를 포함하는 악세사리를 제조하였다.After cutting the proliferated adductor into a size of 2-3 cm, an accessory including the culture root as shown in Figure 2 was prepared in the same manner as in Example <1-2>.
[실시예 3] 배양 종자를 포함하는 악세사리의 제조Example 3 Preparation of Accessories Containing Cultured Seeds
당근과 아니스의 종자를 1% 차아염소산 및 2 내지 3 방울 트윈으로 10분간 소독한 후 멸균수로 3 내지 5회 세척하였다. 표면살균된 당근종자는 약 7일간 발 아를 유도하여 얻어진 자엽과 하배축을, 아니스는 해부현미경하에서 종자로부터 직접 적출한 접합자배(zygotic embryo)를 1 ㎎/ℓ 2,4-D, 3% 수크로스 및 0.3% 겔라이트가 첨가된 MS 기본배지에 치상하였다. 배지는 겔라이트를 넣기전에 pH 5.8로 조정하고 121℃에서 15분간 고압멸균한 것을 사용하였다. 치상된 각각의 절편체들은 암배양, 25℃에서 4주간 배양하여 배발생능 캘러스(embryogenic callus)를 유도하였으며, 유도된 배발생능 캘러스를 동일 조성의 액체배지로 계대배양하여 2,000 내지 2,500 룩스에서 16시간의 광주기로 25℃에서 100 rpm으로 약 2주간 진탕배양한 후 200 ㎛ 체(mesh)로 걸러 단세포를 얻었다. 얻어진 단세포를 2,4-D가 제거된 MS 액체배지에서 1 내지 2주간 배양하여 다량의 체세포배(somatic embryo)를 발생시켰으며, 발생된 체세포배를 식물생장억제제인 ABA (abscisic acid, Duchefa or Sigma CO.LTD)가 첨가된 MS 액체배지에서 1 내지 2주간 배양하여 생장을 억제시킴으로써 소형화된 식물체를 제조하였다. 노지에서 얻어진 종자의 경우에는 상기와 동일한 방법으로 종자를 표면 살균한 후, 해부현미경하에서 종자로부터 접합자배를 적출하고 이를 ABA가 첨가된 MS 액체배지에서 1 내지 2주간 배양한 후 사용할 수 있다.Seeds of carrots and anises were sterilized with 1% hypochlorous acid and 2-3 drops of twin for 10 minutes and then washed 3-5 times with sterile water. The surface sterilized carrot seeds were incubated for about 7 days, and cotyledons and hypocotyls were obtained. Anise was 1 mg / l 2,4-D, 3% of the zygotic embryos extracted directly from the seeds under anatomical microscope. MS base medium was added to the cross and 0.3% gelite. The medium was adjusted to pH 5.8 before adding the gellite and autoclaved at 121 ° C. for 15 minutes. Each of the explanted sections were cultured for 4 weeks at 25 ° C. in cancer culture to induce embryogenic callus, and the induced embryogenic callus was subcultured with liquid medium of the same composition at 2,000 to 2,500 lux. After shaking for 2 weeks at 25 rpm at 100 rpm for 16 hours with a photoperiod of 16 hours, a single cell was obtained by filtration with a 200 μm sieve. The obtained single cells were cultured in MS liquid medium without 2,4-D for 1 to 2 weeks to generate a large amount of somatic embryos, and the somatic embryos were generated by ABA (abscisic acid, Duchefa or plant growth inhibitor). Miniaturized plants were prepared by culturing for 1-2 weeks in MS liquid medium to which Sigma CO.LTD) was added to inhibit growth. In the case of the seed obtained in the open field, the surface sterilization of the seed in the same manner as above, after extracting the zygote embryo from the seed under a dissecting microscope, it can be used after incubating for 1 to 2 weeks in MS liquid medium with ABA.
상기 생장이 억제된 체세포배, 접합자배를 상기 실시예 <1-2>과 동일한 방법으로 도 3 에 도시된 바와 같은 배양 종자를 포함하는 악세사리를 제조하였다.An accessory comprising a cultured seed as shown in FIG. 3 was prepared in the same manner as in Example <1-2>, in which the growth-inhibited somatic embryo and conjugate embryo were prepared.
상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 식물체를 이용한 악세사리는 작은 투 명용기에 배지 및 배양식물체 등을 포함시켜 키움으로써, 주기적으로 수분이나 양분을 공급해야 하는 번거로움 없이도 식물체 등을 악세사리화 하는 효과를 가지며, 특히 색소 등을 추가하여 색상의 변화를 줌으로서 그 시각적인 효과가 향상될 수 있으며, 더구나 살아있는 기내 배양식물체 및 뿌리의 생장에 따른 변화를 투명용기를 통해 관찰할 수 있는 장점이 있다.As described above, the accessory using the plant of the present invention includes a medium and a culture plant in a small transparent container, and grows it, thereby providing the effect of accessorying the plant without the hassle of supplying water or nutrients periodically. In particular, the visual effect can be improved by adding a change in color by adding a pigment, etc. Furthermore, there is an advantage of observing the change according to the growth of living in-flight culture plants and roots through transparent containers.
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