KR20030066902A - 레반을 포함하는 장내유산균 생육촉진 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 레반을 포함하는 장내유산균 생육촉진 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 미생물 유래의 레반을 분말 또는 수용액 상태로 유산균과 혼용하여 장내에서 비피더스균을 포함한 장내유산균의 생육을 촉진시킴으로써 장내 pH를 감소시키고 젖산과 초산의 생성을 촉진시키는 등의 정장효과가 뛰어난 장내유산균 생육촉진 조성물에 관한 것이다.

Description

레반을 포함하는 장내유산균 생육촉진 조성물{Composition including levan as growth stimulator for intestinal lactic acid-producing bacteria}

본 발명은 레반을 포함하는 장내유산균 생육촉진 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 미생물 유래의 레반을 분말 또는 수용액 상태로 유산균과 혼용하여 장내에서 비피더스균을 포함한 장내유산균의 생육을 촉진시킴으로써 장내 pH를 감소시키고 젖산과 초산의 생성을 촉진시키는 등의 정장효과가 뛰어난 장내유산균 생육촉진 조성물에 관한 것이다.

사람의 장내에 서식하는 장내세균은 숙주의 건강을 지켜주는 유용균과 숙주의 건강에 나쁜 영향을 주는 유해균이 있으며 이들 양자의 균형에 의하여 건강상태가 조절되어진다. 장내유용균으로는 비피도박테리아(bifidobacteria)와 락토바실리(lactobacilli) 등이 있으며, 이러한 균들은 사람의 건강에 매우 중요한 역할을 하는 것으로 생각된다. 그러나, 대장균, 식중독균, 포도상구균 등으로 대표되는 유해균은 장내의 부패를 촉진하여 노화가 빨리 일어나게 하고 발암물질을 생산하며 장내 pH에 민감하게 영향을 받는다. 즉, 많은 유해균들은 산성조건에서는 생육이 크게 저하되며, 유산균들은 비교적 산성조건에서도 강한 생존률을 나타낸다. 유산균은 탄수화물을 이용하여 젖산을 많이 생성시키는 박테리아로서 단백질을 분해하지만, 부패시키지 않아 인체에 해로운 물질을 생성하지 않고 유익한 작용을 한다. 유산균에는 비피도박테리움(Bifidobacterium),락토바실루스(Lactobacillus), 스트렙토코쿠스(Streptococcus) 종들이 포함되며, 이러한 유산균의 생리활성은 첫째 유기산을 생산하여 장내의 pH를 저하시킴으로써 유해균의 증식을 억제하여 장내균총의 균형을 유지시켜준다. 둘째, 베타-갈락토시데이즈(β-galactosidase)를 생산하여 유당 소화불량증이 있는 사람에게 유리하게 작용한다. 셋째, 발효산물인 젖산과 초산은 부패균의 성장을 억제하여 N-니트로소(N-nitroso) 화합물, 페놀릭(phenolic) 생산물 등과 같은 발암물질의 생성을 억제하는 항암활성을 나타낸다. 또한, 이외에도 콜레스테롤 합성 억제 효과, 비타민 합성촉진 및 설사 원인균을 억제하는 효과를 나타낸다.

이와 같은 장내 유산균, 특히 비피더스균을 장내우세균으로 유지시키기 위한 방법으로는 두 가지 방법이 시도되고 있다. 첫째는 비피더스균을 경구적으로 투여하는 방법이고, 둘째는 비피더스균에게 선택적으로 이용되는 물질 즉 비피더스인자를 경구 투여하는 방법으로 궁극적으로 유산균의 증식을 선택적으로 유도하게 된다. 기존에 알려진 유산균을 증식시키는 인자의 특성으로는 소장의 소화효소에 의해서 분해되지 않고 대장까지 도달하여 대장에 서식하고 있는 유산균의 생육을 촉진한다.

이러한 유산균 증식인자로는 4-O-갈락토피라노실-N-아세틸-D-글루코사민(4-O-galactopyranosyl-N-acetyl-D-glucosamine), 아미노 슈거(amino sugar), 천연올리고당과 이눌린 타입의 프럭토올리고당[허경택, 올리고당, 유한문화사, (1992)], 감자의 글리코프로테인[신현경, 장내균총 개선을 위한 신소재 탐색, 식품과학과 산업, 25, 83(1994)], 마 첨가물[대한민국 특허공개번호 제 1998-031143호] 등이 있다.

본 연구자들의 선행연구결과에서는, 미생물 유래의 레반이라는 신규 과당 폴리머를 99% 이상의 고순도로 생산하였다[대한민국 특허공고 제 176410호 및 제 145946호].

과당 폴리머인 레반에 관한 일반적인 특성은 다음과 같다. 과당 폴리머로는 레반과 이눌린이 알려져 있으며, 이들은 과당 잔기들의 결합방법에서 다르게 구성되어 있다. 이눌린은 β-2,1결합으로 구성되어 있으며 중합도(degree of polymerization: DP)에 있어서 20 ∼ 60으로 비교적 작은 분자량을 나타내는 저장탄수화물로서 돼지감자, 치커리, 다알리아 등에 다량 함유되어 있다. 이에 반하여, 레반은 Glu-(Fru)n (여기에서, Glu는 포도당 잔기, Fru는 과당 잔기, n은 약 10⁵의 수를 나타낸다)으로 나타내어지는 수용성 과당 폴리머로서 주로 β-2,6결합으로 구성되어 있으며, 레반슈크라제의 과당 전이반응에 의해 설탕으로부터 생산된다. 레반의 물성은 찬물에서 매우 다양한 용해도를 가지는 비결정질로서, 상온에서 거의 녹지 않는(< 0.5%) 이눌린 보다는 훨씬 더 잘 녹는다. 레반은 덱스트란과 물리화학적 특성이 유사하여 혈장대용제나 폴리에틸렌글리콜/레반의 수상이상분계 형성을 이용한 단백질의 분리[대한민국 특허출원 제 1997-74490호] 등 덱스트란을 대신하여 사용될 수 있으며, 유화제, 안정화제, 캡슐화 시약 등 폭넓은 분야에 응용될 수 있다[Lwibovici et al.,Anticancer Res., 5, 553(1985); 및 Stark et al.,Br. J. Exp. Path., 67, 141(1986)). 최근 레반은 산업용 폴리머, 식품(Hatcher et al.,Boprocess, technol., 11, 1(1989)], 화장품, 제약분야에 응용되고 있다[Whiting et al.,J. Inst. Brew.,73, 422(1961); Han,Bioprocess Technol., 12, 1(1990)].

레반슈크라제를 이용하여 레반을 제조하는 방법들은 다수 보고된 바 있는데, 예를 들어, 미국특허 제 4,879,228호 및 국제특허 공개 제 86-4091호에서는 대사과정에서 활동하는 미생물을 이용하여 설탕으로부터 레반을 생산하고자 한 바 있으며, 본 발명자들은 지모모나스 모빌리스(Zymomonas mobilis)와 슈도모나스 오랜티아카(Pseudomonas aurantiacaS-4380)의 레반슈크라제 유전자를 이용하여 형질전환된 대장균에서 대량발현된 재조합 레반슈크라제를 이용하여 레반을 생산한 바 있다[Belghith, H. et al.,Biotechnol. Letts,18, 467(1996); 대한민국 특허공고 제 176410 호 및 제 145946 호; 및 대한민국 특허출원 제 2001-41532호].

장내유산균총은 대장암을 비롯하여, 체내 콜레스테롤 함량, 장으로부터 혈액으로의 미네랄 흡수, 변비 등 다양한 질환 및 대사작용에 영향을 준다. 레반 올리고당에 의한 장내미생물 균총에 관한 연구는 매우 미비한 실정이고, 예외적으로 레반헵파오스(levanheptaose)(DP = 7)를 식이로 이용한 동물실험에서는 비피도박테리아(Bifidobacteria)의 총균수가 10배 이상 증가한다고 보고되었을 뿐[강수경등,J. Korean. Soc. Food. Sci. Nutr.29, 35(2000)], 레반에 의한 유산균 생육촉진에 관련된 연구는 아직 미비하다.

이에, 본 발명자들은 장내유산균의 생육촉진 인자를 개발하기 위하여 예의 연구 노력한 결과, 천연 다당류인 레반으로 이루어진 식이를 단독 또는 유산균과 함께 공급할 경우 장내의 젖산의 생성량이 증가하며 pH가 낮아지고 장내 유산균의 수가 현저히 증가하는 사실을 발견하여 레반을 이용한 유산균 생육촉진 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명은 레반을 포함하는 장내유산균 생육촉진 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.

또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 의약품 및 건강식품을 제공하는데 그 목적이 있다.

본 발명은 레반 단독 또는 유산균을 함께 포함하는 장내유산균 생육촉진 조성물을 그 특징으로 한다.

또한, 상기 조성물을 포함하는 의약품 및 건강식품을 또 다른 특징으로 한다.

이와 같은 본 발명을 더욱 상세하게 설명하면 다음과 같다.

레반은 장내 유산균을 포함한 다양한 식품미생물에 의하여 생산되는 안정적인 생체 폴리머로서 효율적으로 대장에 도달하여 장내미생물에 의하여 에너지원으로 이용된다. 레반은 산가수분해 또는 열처리로 완전하게 분해시에 과당 및 극소량의 포도당만을 생성하므로, 레반을 섭취한 동물에서는 예상되는 부작용은 거의 없다. 또한, 유산균과 혼합하여 투여시에는 유산균의 내산성을 향상시키고 영양원으로 작용하여 균주의 생존률을 향상시킬 수 있다.

나아가, 레반은 동물의 소장에서 일부 분해되어 열량원으로 이용이 되지만, 다량의 레반은 장에 도달하여 장내유산균에 의하여 발효되므로 올리고당과 동일한 중량을 구강으로 섭취시에 흡수되는 열량의 감소를 기대할 수 있다.

본 발명에 사용되는 과당 중합체인 레반(levan)은 고형분 또는 액상으로 사용할 수 있다. 본 발명에 따른 레반을 고형분기준으로 0.1 ∼ 10 중량% 함유하며, 레반을 액상기준으로 0.1 ∼ 7 중량% 함유하는 것이 바람직하다. 이때, 고형분의 경우 레반이 0.1 중량% 미만일 때는 효과의 발생이 낮다는 문제점이 있으며, 10 중량%를 초과하면 비소화성 탄수화물의 섭취로 인해 종종 겪게 되는 임의의 불안감, 예를 들어 연한 변, 설사, 장경련등의 가능성이 있다. 하지만, 이러한 문제점이 관찰된 것은 아니고, 단지 지나치게 높은 농도의 비소화성 탄수화물의 섭취에 따른 일반적인 다른 식이섬유의 부작용을 언급한 것이다. 또한, 액상의 경우에는 레반의 농도가 0.1 중량% 미만이면 효과의 발생이 낮다는 문제점이 있고, 7 중량% 초과하면 물과 레반을 혼합할 때 상대적으로 수분함량이 적어지게 되므로 혼합이 어려워진다. 여기에 기타 통상적인 식이성분 및 정제된 유산균을함유할 수 있는데, 정제된 유산균으로는 스트렙토코쿠스 속(Streptococcus sp.), 페디오코쿠스 속(Pediococcus sp.), 레우코노스톡 속(Leuconostoc sp.), 락토비실루스 속(Lactobicillus sp.), 비피도박테리움 속(Bifidobacterium sp.) 등을 포함하며, 이들 유산균의 제형형태로는 분말상, 메쉬(mesh)상, 펠렛상 및 액상을 비롯한 적절한 형태의 제품으로 가공하거나, 또는 식이에 직접 첨가 및 혼합함으로써 사용할 수 있다. 액상의 레반은 상업적으로 판매되는 미생물(건조된 유산균)과 간단하게 물리적인 방법으로 완전하게 혼합되고, 이 경우에 레반의 침전은 확인되지 않았다. 또한, 건조된 유산균과 레반의 혼합비율(중량비)은 1 : 2 내지 1 : 10, 바람직하게는 1 : 5이다. 만일 혼합비율이 1 : 2 보다 작을 경우에는 레반의 섭취가 줄어든다는 문제가 있으며, 1: 10 보다 클 경우에는 유산균의 첨가 효능이 저하된다는 문제점이 있다.

한편, 레반올리고당은 레반을 열처리, 산가수분해 또는 효소법에 의하여 합성되는 물질로 레반과는 화학적인 구조는 동일하고 다만 크기가 감소된 올리고당으로, 대장에서 선택적으로 이용이 되므로 장내유산균의 생육촉진제로 적합하다.

상기와 같이 제조된 조성물은 동물 장내의 유산균수를 증가시키며, 유산균의 발효에 따른 초산 및 젖산의 생성을 촉진시켜서 장내 pH를 산성화시키는 효과가 있다. 또한, 레반을 단독으로 사용하였을 때에도 유산균의 증식효과가 확인되고, 레반과 유산균의 혼합사용은 유산균의 증식효과를 더욱 상승시키는 효과가 있다. 또한, 액상의 레반/유산균 혼합물은 식이와 함께 섭취시에는 식이에 의한 위액의 일시적 산도의 감소에 따라, 레반의 산 가수분해 억제와 유산균의 생존율이 개선된다.

본 발명에 따른 장내유산균 생육촉진제로서의 레반은 다양한 건강식품 및 의약품 등에 유용하게 사용될 수 있는 바, 의약물 또는 건강식품의 제조방법은 공지방법을 따른다.

의약품으로 제조시에는 레반 또는 레반/유산균 혼합물 외에, 약학적으로 허용되는 담체(carrier), 부형제(forming agent), 희석제(diluent) 등과 혼합하여 분말, 과립, 캡슐 또는 액제 등으로도 제조가 가능하다. 또한, 본 발명에 따른 레반은 그 투여용량에 특별한 제약은 없고, 체내 흡수도, 체중, 환자의 연령, 성별, 건강상태 식이, 투여시간, 투여 방법, 배설율, 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다. 레반은 체중 1 ㎏당 0.1 내지 10 ㎎ 정도를 투여하는 것이 바람직하지만, 보다 높은 중량%의 레반, 레반 올리고당의 혼합물도 역시 발명에 따라 적합하다. 따라서, 본 발명의 유효성분을 포함하는 조성물은 유효량 범위를 고려하여 제조하도록 하며, 이렇게 제형화된 단위투여형 제제는 필요에 따라 약제의 투여를 감시하거나 관찰하는 전문가의 판단과 개인의 요구에 따라 전문화된 투약법을 사용하거나 일정시간 간격으로 수회 투여할 수 있다.

한편, 건강식품으로 제조시에는 음료, 과자류 등의 식품소재로 제조할 수 있다.

이하, 본 발명은 다음 실시예에 의거하여 더욱 상세하게 설명하겠는 바, 본 발명은 이에 한정되는 것은 아니다.

참조예

(1) 시료

레반은 본 발명자들의 연구실에서 지모모나스 모빌리스(Zymomonas mobilis)와 슈도모나스 오랜티아카(Pseudomonas aurantiacaS-4380)를 사용하여 제조되었다. 동물실험에서 액상의 레반과 함께 구강투여된 유산균은 락토바실루스 에시도필루스(Lactobacillus acidophilus), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum), 스트렙토코쿠스 패시움(Streptococcus faecium)이 1 : 1 : 2 중량비로 혼합된 형태로, 생균수 측정 기준으로 1일에 투여한 유산균수는 1.3 ×10⁸였다.

(2) 레반정량법

레반용액을 0.45 m 여과막으로 여과한 다음, 여액 20 ㎕를 HPLC(System Gold)[벡크만사]에 주입하여 레반 함량을 정량하였다. HPLC 분석조건은 50 ℃로 유지시킨 칼럼(Ionpak KS-802)[Shodex사]을 이용하여 증류수를 0.4 ㎖/분의 속도로 유지하며, 굴절율(refractive index)에 의해 검출하였다.

(3) 젖산(lactic acid) 및 pH 측정

쥐의 장내내용물을 원심분리법으로 적절한 조건에서 액체성분을 회수한 다음, 이중 20 ㎕를 HPLC[영인과학사]에 주입하여 젖산과 초산의 양을 분석하였다. HPLC 분석조건은 5 mN 황산수용액을 1 ㎖/분의 속도로 칼럼(PRP-X300, 250 ×4.1mm, 7 m)[Alltech 사]으로 흘려주었고, UV 검출기(detector)를 사용하여 204 nm에서 측정하였다. pH 측정은 pH 미터(pH-meter 220)[코닝사]를 사용하여 측정하였다.

(4) 장내 유산균 정량법

쥐의 장내내용물을 혐기적 조건에서 미수오카(Mitsuoka) 방법[Jap. J. Microbiol. 13, 383 (1969)]으로 장내미생물을 분리한 다음, 이들을 유산균 선택배지에서 배양하였다. 실험에 사용된 2종류의 선택배지의 조성은 다음과 같다. 1 ℓ의 고형선택배지 A에는 펩톤 1 중량%, 젖당 1 중량%, 효모엑기스 1 중량%, 초산나트륨 2.5 중량%, 엘-시스틴 0.02 중량%, 아스코르빈산 0.1 중량%, 침강탄산칼슘 0.5 중량%, 한천 2 중량%, 브롬크레퍼솔 0.006 중량%, 물 91.874 중량%로 구성되었다. 1 ℓ의 고형선택배지 B에는 펩톤 1 중량%, 효모엑기스 1 중량%, 글루코오스 1 중량%, 침강탄산칼슘 1 중량%, 한천 2 중량%, 물 93.994 중량%, 브롬크레퍼솔 0.006 중량%로 구성되었다.

실시예 1 : 지모모나스 모빌리스 유래 레반의 고형식이 투여에 따른 장내 pH, 젖산 생성 및 유산균수의 변화

7주령의 흰쥐를 사용하고 일반 식이로 적응한 후 섭취하던 시료를 다음 표 1의 레반 식이로 대체하면서 식이를 3주간 공급하였다. 각 군당 10 마리씩 총 20마리의 쥐에 대하여 실험을 실시하였다.

식이 조성(g/kg)	대조군	레반군
카제인	360	360
옥수수유	70	70
셀룰로오스	70	70
수크로오스	430	360
레반	0	70
콜린 바이트레이트	6	6
혼합 무기질	50	50
혼합 비타민	14	14

대조군 및 레반군의 체중은 양쪽군 모두 235 g이였다. 쥐의 변을 0.1 M 인산완충용액(phosphate buffer, pH 7.0)으로 희석한 후 세균은 고형 선택배지 A에서 0.1 ㎖ 접종하여 37 ℃에서 혐기적으로 4일간 배양한 후 콜로니(colony)수를 계수하였다. 미생물 수는 CFU(colony forming unit)/㎖의 단위로 나타냈다. 실험결과, 다음 표 2에 나타난 바와 같이 레반군과 대조군에서 성장한 쥐에서 각각 장내유산균 수는 3 ×10⁷, 9 ×10⁸CFU/㎖로 레반군이 대조군에 비하여 균수가 훨씬 증가되어 레반의 장내유산균 촉진효과를 가짐을 확인하였다.

구 분	대조군	레반군
유산균수	3.0 ×107	9.0 ×108
전체 미생물수	3.4 ×109	1.7 ×1010
단위: CFU/분변의 전체량

장내내용물의 pH는 다음 표 3에 나타난 바와 같이 대조군에서는 소장(small intestine), 맹장(cecum), 대장(large intestine)에서 내용물의 pH는 각각 6.9, 7.1, 6.6으로 나타났으며, 레반군에서는 6.7, 5.4, 5.0으로 측정되었다. 따라서, 레반군에서는 대조군에 비하여 맹장내용물과 대장내용물이 산성화되는 효과가 있었다.

구 분	대조군	레반군
소장 내용물의 PH	6.9	6.7
맹장 내용물의 PH	7.1	5.4
대장 내용물의 PH	6.6	5.0

장내내용물에 포함된 젖산 및 초산의 양을 액체 크로마토그라피법으로 정성, 정량분석을 실시하였다. 실험결과, 다음 표 4에 나타난 바와 같이 대조군과 레반군에서 맹장에 존재하는 젖산/초산의 농도비는 각각 0.19와 0.56로 나타났다. 유산균의 탄수화물 발효에서 생성되는 주요 유기산은 초산과 젖산으로, 특히 젖산/초산의 농도비는 장내균총을 보여주는 지표가 된다. 즉, 높은 젖산/초산 비율은 상대적으로 장내에서 유산균이 우세 균총으로 존재한다는 것을 나타낸다. 이에 더하여, 초산과 젖산은 식이로 첨가된 식이를 이용하여 미생물의 발효과정에서 생성되는 저분자량의 유기산으로, 장내 미생물균총의 균형에 영향을 준다. 즉, 일부는 체내에서 흡수되어 대사되고, 흡수가 안된 유기산은 장의 pH를 산성인 환경으로 변화시켜 유해한 미생물이 성장하기 어려운 환경을 제공하여 상대적으로 장내에서 유익한 미생물의 수를 증가시킨다.

구 분	대조군	레반군
맹장에서의 젖산/초산 농도비	0.19	0.56
대장에서의 젖산/초산 농도비	0.40	0.92

실시예 2 : 슈도모나스 오랜티아카 유래 레반의 고형식이 투여에 따른 장내 pH의 변화

상기 실시예 1에서 실시한 조건과 동일한 실험조건, 즉, 동일한 주령의 흰쥐, 동일한 배양조건, 동일한 실험조건에서 지모모나스 모빌리스 유래 레반을 슈도모나스 오랜티아카 유래 레반으로 대체하여 실험을 실시하였다. 장내내용물의 pH는 다음 표 5에 나타난 바와 같이 대조구에서는 소장, 맹장, 대장에서 내용물의 pH는 각각 6.9, 7.1, 6.6으로 나타났으며, 레반식이를 투여한 그룹에서 6.8, 5.0, 5.0으로 측정되었다. 따라서, 본 발명에서 확인된 레반의 장내유산균 생육 촉진 효과는 특정한 미생물유래의 레반에 국한되는 것이 아니라, 레반의 일반적인 특성으로 확인되었다. 즉, 레반은 본 발명자에 의하여 사용된 지모모나스 모빌리리스, 슈도모나스 오랜티아카 종 이외에도 많은 여타 미생물 유래의 레반슈크라제에서 생산된 레반에서도 이러한 장내유산균 촉진효과가 있을 것으로 기대된다.

구 분	대조군	레반군
소장 내용물의 PH	6.9	6.7
맹장 내용물의 PH	7.1	5.4
대장 내용물의 PH	6.6	5.0

실시예 3: 지모모나스 모빌리스 유래 레반과 유산균 혼합물의 구강투여에 따른 흰쥐의 분변에서의 장내 유산균 변화

7주령의 흰쥐를 사용하고 일반 고형식이와 물을 자유로이 공급하면서 구강으로 각기 다른 농도의 액상의 유산균/레반 혼합물을 1일 2회 3 ㎖씩 투여하였다. 투여기간은 3주로 대조군에는 혼합물 대신 물을 동량 구강 투여하였다. 흰쥐를 7군으로 나누어 각각 물, 레반 6 중량%, 유산균 2 중량%, 유산균 2 중량%와 각각 3, 4, 5, 6 중량%의 레반 혼합수용액을 경구투여한 다음 분변 중에 남아있는 장내유산균의 수를 측정하여 다음 표 6에 나타내었다.

그 결과, 혼합물 중의 레반 농도가 증가할수록 대조군에 비하여 장내 유산균수의 증가가 나타났다. 2가지의 선택배지에서 유사한 양상을 나타내었으며, 최고 레반농도(6 중량%)와 유산균 혼합용액군에서 효과가 가장 우수하게 나타나므로, 레반의 농도를 더욱 높이거나 복용기간을 연장한다면 장내유산균수의 증가가 기대된다. 또한, 레반만을 투여하였을 때에도, 대조군에 비하여 장내 유산균수가 증가하는 것으로 나타났다. 따라서, 고농도의 레반을 투여하기 위해서는 레반과 유산균이 혼합된 분말형태 또는 펠렛상을 이용하여 장내유산균 균총을 증가시킬 수 있다.

구 분	고형 선택배지 A	고형 선택배지 B
물	2.2 ×108	3.3 ×108
레반 6 중량%	1.5 ×109	1.2 ×109
유산균 2중량%	8.4 ×108	4.7 ×108
유산균 2중량% + 레반 3중량%	2.5 ×109	1.4 ×109
유산균 2중량% + 레반 4중량%	3.5 ×109	1.5 ×109
유산균 2중량% + 레반 5중량%	4.8 ×109	1.4 ×109
유산균 2중량% + 레반 6중량%	4.9 ×109	3.4 ×109
단위: 미생물수(CFU/분변의 전체량)

실시예 4: 정제(Tablet)의 제조

레반 75.75g

유산균 15.15g

옥수수전분 7.60g

이산화규소 1.00g

스테아린산 마그네슘 0.50g

총 량 100 g

상기에서 나열된 성분들을 잘게 부숴 혼합한 후 직타법(direct tableting method)에 의해 정제(Tablet)를 제조하였다. 각 정제의 총량은 300 ㎎이다.

실시예 5: 분말제의 제조

실시예 4에서 나열한 성분과 동일한 것을 사용하였으며, 상기에 나열된 성분들을 잘게 부숴 혼합하여 분말을 제조하여, 경질 캡슐에 분말 250 ㎎을 넣어 캡슐제를 제조하였다.

실시예 6

7주령의 흰쥐에 레반 농도가 10 중량%(고형분기준)인 레반고형식이를(상기 표 1의 레반군 조성과 일치하며, 단지 레반의 농도가 10 중량%로 증가하며 수크로오스의 농도는 33 중량%로 감소한다) 식이로 공급하여 21일간 관찰한 결과, 설사와 출혈 등의 뚜렷한 부작용이 관찰되지 않았다. 또한, 고형의 레반은 최종 수분함량을 3% 이내로 하여 밀봉된 상태로 보관한 경우, 다른 균이 자랄 수 있는 오염가능성이 없다.

실시예 7: 음료 제품 제조

자이모모나스 모빌리스 유래 레반 2.5g, 유산균 0.5g, glucose 1.25g, maltose 2.5g과 aromatic substance 0.5g 을 물에 희석하여 통상의 방법으로 음료를 제조하되 총 100 ㎖로 맞춘 후 100℃에서 15초간 살균, 냉각하여 드링크 타입의 음료 제품을 제조하였다.

이상에서 설명한 바와 같이, 레반을 단독 또는 유산균과 혼용 섭취시에 동물의 장내 유산균수가 획기적으로 증가되며, 젖산의 생성을 촉진시키고 장내 pH를 현저하게 낮추는 효과를 가진다. 또한, 미생물 유래의 레반을 이용함으로써 내산성이 약한 유산균이 위에서 사멸되는 것을 방지하여 다수의 유산균을 장에 도달하게 하는 효과를 제공한다. 이러한 장내유산균 생육촉진제로서의 레반은 다양한 건강식품 및 의약품 등에 유용하게 사용될 수 있다.

Claims (7)

1. 레반단독 또는 유산균과 함께 포함하는 것을 특징으로 하는 장내유산균 생육촉진 조성물.
2. 제 1 항에 있어서, 상기 유산균과 레반의 혼합비율이 1 : 2 ∼ 1 : 10 (중량비)인 것을 특징으로 하는 장내유산균 생육촉진 조성물.
3. 제 1 항에 있어서, 상기 레반은 고형분 기준으로 0.1 내지 10 중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 장내유산균 생육촉진 조성물.
4. 제 1 항에 있어서, 상기 레반은 액상 기준으로 0.1 내지 7 중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 장내유산균 생육촉진 조성물.
5. 제 1 항에 있어서, 상기 레반이 레반올리고당을 포함하는 것을 특징으로 하는 장내유산균 생육촉진 조성물.
6. 청구항 1의 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는 장내유산균 생육촉진제.
7. 청구항 1의 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는 건강식품.