KR20030040681A - Method of cultivation of the mushroom mycelium at a culture medium made of edible by-products - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: Provided is a method of cultivation of the mushroom mycelium in a solid culture medium containing edible byproducts generated from food processing, thereby involving no separation of cultured mycelia and providing it as a raw ingredient of health foods. CONSTITUTION: A method of cultivation of the mushroom mycelium in a solid culture medium containing edible byproducts comprises the steps of: inoculating cultured mushroom mycelia to a solid medium and obtaining mushroom mycelia adapted to the solid medium; and inoculating the cultured mycelia to the same medium as the solid medium in the previous step, followed by cultivation thereof.

Description

식용부산물을 이용하여 제조된 배지에서의 버섯 균사체 배양방법{Method of cultivation of the mushroom mycelium at a culture medium made of edible by-products}Method of cultivation of the mushroom mycelium at a culture medium made of edible by-products}

본 발명은 버섯 균사체의 배양방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 식품 가공 중 얻을 수 있는 식용 가능한 부산물을 이용하여 제조된 고형배지를 사용하는 것을 특징으로 하는 버섯 균사체 배양방법에 관한 것이다. 일반적으로 식용버섯은 탄수화물, 단백질, 지방과 같은 3대 영양소가 골고루 함유되어 있고 이외에도 비타민, 미네랄까지 풍부하게 포함되어 있는 영양식품이기도 하다. 또한 맛과 향이 좋아서 식품소재로서의 버섯의 중요성은 날로 높아지고 있는 실정이다. 특히 최근에는 버섯의 생체내의 면역기능을 활성화 시켜주는 면역조절효과에 관한 각종 생화학적인 실험 결과가 많이 보고되고 있어 버섯에 대한 관심이 더욱 증가하고 있다.The present invention relates to a method for culturing mushroom mycelium, and more particularly, to a method for culturing mushroom mycelium, characterized by using a solid medium prepared using edible by-products obtained during food processing. In general, edible mushrooms contain three major nutrients, such as carbohydrates, proteins, and fats, and are also nutritious foods rich in vitamins and minerals. In addition, the taste and aroma of the mushrooms as a food material importance is increasing day by day. In particular, recently, many biochemical experiments on the immunomodulatory effect of activating the immune function of mushrooms have been reported, and interest in mushrooms is increasing.

동양의 신농본초경(神農本草經)에서는 버섯은 "눈을 밝게한다.", "신경을 안정 시킨다", "심기를 늘린다", "속을 보한다", "천식을 다스린다", "근골이 굳어진다"라고 했으며, 명의별록에는 "월경불순, 설사, 복통, 금창을 다스린다"라고 기술하고 있으며 그외 수많은 고대 의약서는 버섯은 건강장수의 식물이라고 쓰고 있다.In Oriental Nongbyeonchocho, the mushroom "brightens the eyes", "stabilizes the nerves", "extends the planting", "increases the inner", "controls asthma", "muscles" It hardens, "and in the separate name of the book" Improve menstrual irregularities, diarrhea, abdominal pain, gold spear, "and many other ancient medicine documents that mushrooms are healthy plants.

중국의 진시황도 버섯을 즐겼으며, 로마의 폭군 네로황제도 버섯을 즐겨서 버섯을 따오는 사람에게 그 무게만큼의 황금을 주어서 버섯황제라는 별명까지 얻게 되었다는 일화가 있으며, 하루 서너시간의 짧은 수면으로도 충분한 건강을 유지하며 군사를 호령하던 프랑스의 황제 나폴레옹도 버섯요리가 식탁에 오르지 않으면 짜증을 내곤 했다고 한다.China's Qin Shi Huang enjoyed mushrooms, and the tyrant of the Roman Emperor Nero enjoyed mushrooms and gave them the same amount of gold as a mushroom emperor, gaining the nickname Mushroom Emperor. The French emperor Napoleon, who had commanded his army to maintain good health, would be annoyed if he didn't get to the table.

이처럼 버섯은 그 향기로운 풍미와 풍부한 영양소, 저칼로리 스테미너식품으로 널리 식생활에 애용되어 왔으며 동맥경화나 심장병 환자의 다이어트에 이용되기도 한다. 그러나 버섯에는 먹어서 해가 되며, 생명을 빼앗기도 하는 독버섯이 있는가 하면, 약이 되는 약용버섯이 있고, 환각작용을 하는 환각버섯이 있고, 먹으면 계속 웃음이 터져나와서 멈추지 않는 버섯도 있으며, 파리나 곤충을 잡아먹는 파리버섯, 건드리면 연막을 피우는 안개버섯, 특이하게도 꽃을 피우는 관상버섯도 있다. 이처럼 그 종류나 그 성분별 유형은 2000종이 넘어 가이 신비할만하다고 할 수있는 버섯은 담자균류(擔子菌類)에 속한 고등균류의 총칭이다.As such, the mushroom has been widely used in the diet for its aromatic flavor, rich nutrients, and low-calorie stamina food, and it is also used for diet of arteriosclerosis and heart disease patients. However, there are poisonous mushrooms that are harmed by eating and taking life. Other mushrooms are medicinal mushrooms that are used as medicine, hallucinogenic mushrooms that act as hallucinations, and mushrooms that do not stop when they eat. Fly mushrooms are eaten, mist mushrooms are smoked when touched, and ornamental mushrooms are unusually flowering. Like this, more than 2000 kinds and types of ingredients are mushrooms, which can be said to be mysterious, is a general term of higher fungi belonging to basidiomycete.

우리가 식용으로 이용하고 버섯이라고 부르는 것은 버섯의 자실체에 해당하며, 자실체란 버섯의 균사체가 주변의 낙엽이나 나뭇가지의 영양소를 분해 흡수하여 자라다가 기후 조건 등이 맞으면 일시에 자라 올라와 형성하는 것을 말한다. 균사체는 여름철 우거진 숲속에 쌓여있는 낙엽을 들춰보면 흔히 볼 수 있는 솜털 또는 실처럼 보이는 버섯의 몸체를 말한다.What we use for food and called mushrooms is the fruiting body of the mushroom, and the fruiting body is a mushroom mycelium that breaks down and absorbs the nutrients of the surrounding leaves and twigs, and grows and forms when the weather conditions are right. . Mycelium is the body of a mushroom that looks like a fluffy or filament commonly seen in fallen leaves stacked in a dense forest in summer.

균사체와 자실체는 기능이나, 구조 등에서 현저한 차이점이 있다. 자실체 즉 "버섯"은 일반적으로 최소한 며칠동안 (상황 버섯 등의 다년생 버섯은 십 수년간) 그 형태를 유지하고 포자를 퍼뜨려야 하기 때문에 균사가 매우 치밀하게 얽힌 강한 구조를 이루고 있다. 반면에 균사체는 주변의 영양분을 흡수하며 계속 뻗어 나가야 하기 때문에 대개의 경우 비교적 자유롭게 퍼져 자라고 있다.Mycelia and fruiting bodies differ markedly in function and structure. Fruiting bodies, or "mushrooms," usually have a strong structure in which the mycelium is very tightly entangled because they must maintain their form and spread spores for at least several days (perennial mushrooms, such as situation mushrooms). On the other hand, mycelium absorbs the nutrients of its surroundings and needs to continue to grow, so it is usually spreading relatively freely.

상기와 같은 구조적인 차이점 때문에 균사체는 그 유효 성분의 추출이 용이하다. 면역기능을 증강시키고 항암효과를 발휘하는 것으로 잘 알려진 단백다당체 성분을 예로 들어보면, 영지버섯 등 대다수의 버섯(자실체)은 펄펄 끓는 물에 2시간씩 2번을 끓여 내어도 그로부터 얻어지는 단백다당체 양은 버섯량의 1-2% 정도 밖에 되지 않는다. 반면에 균사체를 액체 배지에 배양하면 균사체가 액체 배지 속에 풀어져서 자라면서 단백다당체 성분이 배지 중에 많이 녹아 나와 있으므로 끓이지 않고도 다량의 단백다당체 성분을 얻을 수가 있다. 이를 전문 용어로는 "엑소폴리싸카라이드 (exopolysaccharide)"라고 칭하기도 한다. 따라서 면역 기능을 강화시켜주는 단백다당체 성분의 생산에는 균사체를 액체 배지에 인공 배양하는 방법이널리 연구되고 있으며 여타 다른 성분도 균사체로부터 추출하는 것이 한결 용이하다는 장점이 있다.Due to such structural differences, the mycelium is easy to extract the active ingredient. For example, a protein polysaccharide component known to enhance immune function and exert an anticancer effect, for example, the majority of mushrooms, including Ganoderma lucidum mushrooms boil two times in boiling water for 2 hours, the amount of protein polysaccharide obtained from the mushroom Only 1-2% of the amount. On the other hand, when the mycelium is cultured in a liquid medium, the mycelium is released in the liquid medium, and as the protein polysaccharide component is dissolved in the medium, a large amount of protein polysaccharide component can be obtained without boiling. This term is sometimes referred to as "exopolysaccharide" (exopolysaccharide). Therefore, a method of artificially culturing mycelium in a liquid medium has been studied for the production of a protein polysaccharide component that enhances immune function, and other components can be easily extracted from the mycelium.

또한, 농산물은 같은 품종이라도 재배지의 토양이나 기후 등에 따라 품질이 상이해 질 수밖에 없고 같은 지역에서 재배하더라도 해마다 품질이 달라질 수 있다. 그러나 균사체의 경우에는 선발된 균주를 표준화된 최적 조건 하에서 대량 배양함으로써 약효가 뛰어난 균사체를 항상 일정하게 생산해 낼 수가 있다. 상기의 특성과 더불어 균사체의 이러한 두 가지 특성은 버섯류의 우수한 면역 증강 성분을 의약품으로 개발할 수 있게 한 가장 중요한 특성이라고 볼 수 있다.In addition, even if the same varieties of agricultural products are different in quality depending on the soil, climate, etc. of the cultivated area, even if grown in the same region, the quality may vary from year to year. However, in the case of mycelia, the selected strains can be cultivated in a large amount under standardized optimal conditions to always produce constant mycelia with excellent efficacy. In addition to the above properties, these two properties of the mycelium can be seen as the most important properties that enable the development of excellent immune enhancing components of mushrooms to medicines.

예전에는 주로 이러한 버섯을 자연에서 채취하여 부식으로 섭취해 왔으나 최근에는 인공재배기술이 발달하면서 계절과 기후에 상관없이 우리의 식탁에 오를 수 있을 정도로 풍부하게 공급되고 있다. 이와 같이 인공재배 기술에 의하여 공급되고 있는 대부분의 버섯들은 우리가 잘 알고 있는 몇 가지의 식용버섯들로서, 학계에서 보고된 약 3,000종의 버섯 중에 극히 일부에 해당된다.In the past, these mushrooms were mainly taken from nature and consumed by corrosion, but recently, with the development of artificial cultivation technology, they are supplied abundantly to our table regardless of season and climate. Most of the mushrooms supplied by artificial cultivation techniques are some of the edible mushrooms we are familiar with, and represent only a fraction of the 3,000 mushrooms reported in the academic community.

또한 최근에는 생리적 조절 및 면역증강 효과가 뛰어난 버섯종이 점차 소개되어 지고 있다. 그러나, 이러한 생리적 약리 효과를 가진 버섯들은 그 효과가 우수함에도 불구하고 인공배양이 어려워서 상당히 고가로 소비자에게 공급되고 있으며 공급되는 버섯의 진위의 판별에 있어서도 상식적인 수준의 지식을 갖고 있는 소비자의 기준에서는 판단이 어려워 소비자가 진정으로 필요한 버섯의 원활한 수매가 용이하지 않다고 할 수 있다.Recently, mushroom species with excellent physiological control and immune enhancing effects have been gradually introduced. However, the mushrooms with these physiological pharmacological effects, despite their excellent effect, are difficult to artificially culture and are supplied to the consumers at a very high price, and according to the standards of the consumer who have a common knowledge level in determining the authenticity of the supplied mushrooms. It is difficult to judge that it is not easy to purchase mushrooms that consumers really need.

따라서 탁월한 맛과 향을 주는 기호적 특성을 갖는 버섯 이외에도 우수한 생체 면역기능 조절능력을 갖는 버섯을 소비자에게 신뢰할 수 있고 저렴하게 공급할 수 있는 방법을 제공하는 일이야말로 국민 건강에 이바지 할 수 있는 의미 있는 일이라 할 수 있겠다.Therefore, in addition to mushrooms with taste characteristics that provide excellent taste and aroma, providing a way to provide consumers with a reliable and inexpensive supply of mushrooms with excellent biological immunomodulatory ability is meaningful to contribute to national health. This can be called.

버섯 균사체의 생산에 관한 종래기술을 살펴보면, 비닐포트에 고형배지를 넣어 상황버섯의 액체 종균을 접종하여 배양하는 방법(특허 10-179725)과 이와 유사한 것으로 상황버섯 자실체의 비닐포트 통나무 재배법(공개 10-1998-065335)이 보고되고 있다. 그러나 이러한 방법들은 그 목적이 균사체의 배양에 있다기보다는 자실체의 재배에 있다.Looking at the prior art for the production of mushroom mycelium, the method of inoculating the culture medium by inoculating the liquid spawn of the situation mushroom in a solid medium in the plastic pot (Patent 10-179725) and similar to the method of cultivating the vinyl port log of the fruiting body of the situation mushroom (published 10 1998-065335). However, these methods are for the cultivation of fruiting bodies rather than for the mycelial growth.

이외에는 주로 액체배양법에 관한 것으로서 구름버섯 균사체를 PDA배지에서 배양하는 방법 (특허 10-077840), 잡색구름버섯 균사체를 CVT배지에서 배양하는 방법 (공고 10-1990-005859), 영지버섯의 액체배양 방법 (특허 10-156986) 등이 보고되고 있는 실정이다. 그러나 이러한 방법은 액체배양 후 균사체를 배지로부터 분리정제하여야 하는 단점이 있다.In addition, the method of culturing the cloud mushroom mycelium in PDA medium (Patent 10-077840), the method of culturing variegated cloud mushroom mycelium in CVT medium (G10 10-1990-005859), liquid culture method of Ganoderma lucidum mushroom (Patent 10-156986) and the like have been reported. However, this method has a disadvantage in that the mycelium is separated and purified from the medium after the liquid culture.

버섯의 균사체에는 식용부분인 자실체에 대등하거나 그 이상의 각종 영양성분과 약용성분이 함유되어 있으므로 버섯 균사체의 경제적인 대량 배양 공정의 개발을 통하여 버섯이 가지고 있는 각종 건강 지향적인 특성을 그대로 지닌 균사체를 공급할 수 있다. 그리고 균사체에는 상기에서 살펴본 바와 같이, 자실체에 비해 여러 가지 장점을 갖는다.Mushroom mycelium contains various nutrients and medicinal ingredients that are comparable to or higher than fruiting body, which is an edible part. Therefore, it is possible to supply mycelium with various health-oriented characteristics of mushroom through development of economic mass cultivation process of mushroom mycelium. Can be. And as described above, the mycelium has a number of advantages over the fruiting body.

또한, 상기에 인용된 발명에서는 버섯의 자실체의 재배, 혹은 균사체를 배양하여 단지 재배된 그 자실체를 사용하거나, 균사체 분리정제하하여 사용하는데 초점을 두고 있으나, 배지가 식용 가능하여 배양된 균사체를 배지에서 분리 정제할 필요 없이 활용 가능하다면 균사체를 제조하여 활용하기까지 걸리는 공정이 단축될 수 있어 경제적이고 또한 함께 섭취되는 배지에 함유된 영양성분이 추가적으로 보충되어 보다 양질의 건강식품 등을 만들기 위한 원료가 될 수 있다.In addition, the invention cited above focuses on cultivating the fruiting bodies of mushrooms or cultivating the mycelium, or using the fruiting bodies grown only, or using them under separate purification of the mycelium. If it can be used without the need for separation and purification, the process required to manufacture and use mycelium can be shortened. Can be.

상기와 같이, 버섯의 균사체가 자실체에 비해 동등하거나 혹은 그 이상인 영양성분과 약용성분을 갖으며 또한 여러 장점을 갖는 점과, 식용 가능한 배지를 사용할 때의 경제적, 영양학적인 잇점을 고려하여 본 발명을 완성하기에 이른 것이다.As described above, the mushroom mycelium has the same or more nutrients and medicinal ingredients than fruiting bodies, and also has several advantages, considering the economic and nutritional benefits of using an edible medium, It is finished.

본 발명은 식품가공 중에 얻을 수 있는 식용 가능한 부산물 이용하여 제조된 고형배지에서 버섯 균사체를 대량으로 배양하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.An object of the present invention is to provide a method for culturing a large number of mushroom mycelium in a solid medium prepared using edible by-products obtained during food processing.

또한 본 발명은 식품가공 중에 얻을 수 있는 식용 가능한 부산물을 이용하여 제조된 고형배지에서 배양된 버섯 균사체를 그 고형배지에서 분리, 정제하지 않고 원료로 하여 제조된 식음료 및 건강식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.In another aspect, the present invention is to provide a food and beverage and health food prepared from the mushroom mycelium cultured in a solid medium prepared using edible by-products obtained during food processing as a raw material without separation and purification in the solid medium do.

도 1은 본 발명의 식용부산물을 배지로 이용한 버섯 균사체의 새로운 배양 방법의 공정에 관한 것이다.1 relates to a process of a new culture method of mushroom mycelium using the edible by-product of the present invention as a medium.

도 2는 본 발명의 실시예 1에서 배양한 아가리쿠스 버섯 균사체 배양물에 함유된 균사체의 함량을 배양일수에 따라 나타낸 그래프이다.Figure 2 is a graph showing the content of the mycelia contained in Agaricus mushroom mycelium culture cultured in Example 1 of the present invention according to the number of days of culture.

도 3은 본 발명에서 배양한 아가리쿠스 버섯 균사체에 함유된 조단백다당체의 함량을 배양일수에 따라 나타낸 그래프이다.Figure 3 is a graph showing the content of crude protein polysaccharides contained in Agaricus mushroom mycelium cultured in the present invention according to the days of culture.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 식품 가공 중 얻을 수 있는 식용 가능한 부산물을 이용하여 제조된 고형배지를 사용하는 것을 특징으로 하는 버섯 균사체 배양방법을 제공한다. 식용가능한 부산물을 이용한 고형배지는 식용 가능한 부산물을 수세 후, 세절하고 수분함량을 조절한 후 살균하여 제조한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a method for culturing mushroom mycelium, characterized in that using a solid medium prepared using edible by-products obtained during food processing. Solid media using edible by-products are prepared by washing the edible by-products after washing, slicing, adjusting the moisture content, and then sterilizing them.

상기 고형배지는 한 종류의 식용부산물을 이용하여 제조된 단일형 고형배지를 사용하거나, 2종이상의 식용부산물을 혼합하여 제조된 복합형 고형배지를 사용하여 버섯균사체를 배양할 수 있다.The solid medium may be cultured mushroom mycelium using a single solid medium prepared using one type of edible by-product, or a complex solid medium prepared by mixing two or more edible by-products.

특히, 버섯 균사체의 성장이 원활하지 않을 경우, 탄소공급원 대비 질소공급원의 비율을 고려하여 2종 이상의 식용 부산물을 혼합하여 제조된 복합형 고형배지를 이용하여 버섯 균사체를 배양할 수 있다.In particular, when mushroom mycelium growth is not smooth, mushroom mycelium can be cultured using a complex solid medium prepared by mixing two or more edible byproducts in consideration of the ratio of nitrogen source to carbon source.

본 발명의 버섯 균사체 배양방법은, 식품가공 중 얻을 수 있는 식용 가능한 부산물을 이용하여 제조된 고형배지에 순수하게 분리된 버섯 균사체 배양물을 접종하고 배양하여, 상기 고형배지에 적응된 버섯 균사체를 얻는 제 1차 배양단계와 제 1차 배양단계에서 얻은 버섯 균사체를 제 1차 배양단계에서 사용한 것과 동일한 고형배지에 접종하는 제 2차 배양단계를 포함하는 것이 바람직하다.Mushroom mycelium culturing method of the present invention, inoculating and incubating a purely isolated mushroom mycelium culture in a solid medium prepared using edible by-products obtained during food processing, to obtain a mushroom mycelium adapted to the solid medium It is preferable to include a second culture step of inoculating the mushroom mycelium obtained in the first culture step and the first culture step in the same solid medium used in the first culture step.

상기 배양방법의 개략적인 제조공정은 도 1과 같이 나타낼 수 있고 이를 보다 상세하게 설명하자면 다음과 같다.A schematic manufacturing process of the culture method may be represented as shown in FIG. 1, which will be described in more detail as follows.

균사체를 배양하기 위한 식용 부산물 고형배지를 준비하기 위하여 가공식품의 제조 중 얻어질 수 있는 당근 박 및 표고버섯 박과 같은 식용 가능한 부산물을 수거하여 깨끗하게 수세하고 세절기로 미세하게 세절한 후 수분함량을 80∼90% 정도로 조절한다. 수분함량이 조절된 식용 부산물을 유리병에 넣고 면전 한 후 잔류하고 있는 미생물을 제거하기 위하여 고온가압살균기에서 살균하여 식용부산물을 이용한 단일형 고형배지를 제조한다. 이미 순수하게 분리하여 한천배지에서 생육시킨 버섯 균사체의 배양물을 상기 제조된 식용부산물 단일형 고형배지에 접종하고약 5일 내지 30 일간 1차(전) 배양(배양온도 25~35℃, 상대습도 30~90%)하여 식용부산물 단일형 고형배지에 적응된 버섯 균사체 배양물을 얻는다. 1차 배양에서 접종한 버섯 균사체의 성장이 원활하지 않는 경우 식용 부산물 고형배지의 탄소공급원 대비 질소공급원의 비율을 고려하여 2종 이상의 식용 부산물을 혼합하여 제조한 식용부산물 복합형 고형배지를 사용할 수도 있다. 약 5일 내지 30 일간의 1차 배양에서 균사가 왕성히 성장하는 경우에는 다시 상기 제 1차 배양 시 사용된 바와 동일한 식용 부산물 고형배지에 1차 배양에서 얻은 균사체 배양물을 접종하여 2차(본) 배양을 시작한다. 2차 배양(배양온도 25~35℃, 상대습도 30~90%)은 약 3개월 간 실시하며 배양 중간에 식용 부산물 고형배지에서 성장하고 있는 균사체 배양물을 시료로 채취한 후 버섯 균사체 세포벽의 구성성분인 N-acetyl-D-glucosamine의 함량을 분석하여 균사체의 성장정도를 예측한다. 이때 식용 부산물 고형배지에 함유되어 있는 균사체의 정확한 양은 식용 부산물 고형배지에 접종한 것과 동일한 버섯 균사체를 PDB배지에 접종하여 진탕배양기에서 액체배양하여 생육시킨 후, 배양물을 여과하여 얻어진 균사체로부터 N-acetyl-D-glucosamine의 함량을 분석하고 그 양에 해당하는 균사체의 중량과의 관계식에 의하여 계산하도록 한다. 이상의 방법에 의하여 측정한 식용 부산물 고형배지 중 균사체의 함량이 목표 수준에 도달하게 되면 배양을 정지시키고 배양된 균사체를 고형배지와 함께 살균 후 건조하여 버섯 균사체가 함유된 식음료나 건강식품의 원료로 사용하도록 한다.Edible by-products for cultivating mycelium To prepare a solid medium, edible by-products such as carrot gourd and shiitake gourd gourd, which can be obtained during the manufacture of processed foods, are collected, washed with water, finely chopped with a fine cutting machine, Adjust to 80 to 90%. In order to remove residual microorganisms after putting food-controlled edible by-products into glass bottles, they are sterilized in a high-pressure autoclave to produce a single solid medium using edible by-products. Inoculate the culture of mushroom mycelium that has already been isolated purely and grown in agar medium into the prepared edible byproduct single solid medium and the primary (pre) culture for about 5 days to 30 days (culture temperature 25 ~ 35 ℃, relative humidity 30 ˜90%) to obtain mushroom mycelium cultures adapted to edible byproduct monolithic media. If the growth of mushroom mycelium inoculated in the primary culture is not smooth, an edible byproduct complex solid medium prepared by mixing two or more edible byproducts may be used in consideration of the ratio of the nitrogen source to the carbon source of the edible byproduct solid medium. . If the mycelia grow vigorously in the primary culture for about 5 to 30 days, inoculate the mycelium culture obtained in the primary culture with the same edible byproduct solid medium used in the primary culture. Start incubation. Secondary culture (cultivation temperature 25 ~ 35 ℃, relative humidity 30 ~ 90%) is carried out for about 3 months, and the mycelia culture grown on food by-product solid medium in the middle of the culture was sampled Predict the growth of mycelium by analyzing the content of N-acetyl-D-glucosamine. At this time, the exact amount of the mycelia contained in the edible by-product solid medium was inoculated in the PDB medium with the same mushroom mycelium as inoculated in the edible by-product solid medium, grown in liquid culture in a shaker incubator, and then filtered from the mycelium obtained by filtering the culture. Analyze the acetyl-D-glucosamine content and calculate it by the relation with the weight of the mycelium. When the content of the mycelium in the edible by-product solid medium measured by the above method reaches the target level, the culture is stopped and the cultured mycelium is sterilized with the solid medium and dried to be used as a food and beverage or health food containing mushroom mycelium. Do it.

상기 식용 가능한 부산물로서 당근 및 당근 박, 표고버섯 및 표고버섯 박, 감귤 및 감귤 과피, 대두 및 대두 박, 옥수수, 감자 등이 있다.Carrot and carrot gourd, shiitake mushroom and shiitake gourd, citrus and citrus rind, soybean and soybean gourd, corn, potato and the like are edible by-products.

이하 실시 예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 하며, 이들 실시예는 본 발명의 기술적 범위를 한정하는 것이 아니라, 본 발명의 취지를 일탈하지 않는 범위에서 변경, 실시하는 것은 모두 본 발명의 기술적 범위에 포함된다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples, which are not intended to limit the technical scope of the present invention, and all modifications and implementations are made without departing from the spirit of the present invention. Included in

<실시예><Example>

실시예 1Example 1

당근 박을 이용한 아가리쿠스 버섯 균사체의 배양Culture of Agaricus Mushroom Mycelium with Carrot Gourd

본 발명에서 사용한 아가리쿠스 버섯 균사체는 강원도 춘천 인근에서 재배되는 아가리쿠스 버섯으로부터 채취한 것이며, 이 균사체를 본 발명에서 사용한 식용 부산물 배지인 당근 박 배지에 접종시켜 적응시키고 그 배양물을 다시 식용 부산물 배지인 당근 박 배지에 접종한 후 고수율의 균사체를 얻기 위한 최적 배양조건을 확립하여 본 발명을 완성하게 되었다. 따라서 본 실시예에서 사용된 아가리쿠스 버섯 균사체는 본 발명에 의하여 최초로 한국산 아가리쿠스 버섯으로부터 분리, 개발된 균사체(균주명:Agaricus blazeiHKA 0498)로서 한국미생물보존센터에 2001년 6월 18일자로 (기탁번호 KCCM 10281호)로 기탁하였다.Agaricus mushroom mycelium used in the present invention was taken from Agaricus mushroom cultivated near Chuncheon, Gangwon-do. After the inoculation to gourd medium was completed the present invention by establishing the optimum culture conditions for obtaining a high yield mycelia. Therefore, the agaricus mushroom mycelium used in the present embodiment was firstly isolated and developed from the Korean agaricus mushroom according to the present invention (Agricus blazei HKA 0498) as a June 18, 2001 to the Korea Microorganism Conservation Center KCCM 10281).

아가리쿠스 버섯 종균의 균사배양에 사용할 식용 부산물 고형배지를 제조하기 위하여 당근 박 1Kg을 25℃ 정도의 물로 깨끗이 수세하여 당근 박의 표면에 존재하는 이물질을 제거한 후 이를 세절기로 미세하게 세절하였다. 세절된 당근 박의 수분함량을 80∼90% 정도로 조절한 후 수분함량이 조절된 당근 박을 200g씩 500mL 크기의 유리병에 각각 넣고 면전한 후 당근 박에 잔류하고 있는 미생물을 제거하기 위하여 고온가압살균기에서 121℃로 15분간 살균하였다. 이미 순수하게 분리하여한천배지에서 생육시킨 아가리쿠스 버섯 종균의 배양물을 일부 채취하여 당근 박 배지에 접종하고 30일간 1차 배양(배양온도 27℃, 상대습도 37%)하여 당근박 배지에 적응된 아가리쿠스 버섯 균사체 배양물을 얻었다. 1차 배양 시 접종시킨 아기리쿠스 버섯 균사체의 성장이 원활하지 않는 경우 식용 부산물 고형배지의 탄소공급원 대비 질소공급원의 비율을 고려하여 옥수수나 대두 박과 같은 다른 식용부산물 배지를 혼합하는 복합배지를 사용하여 다시 1차 배양을 하여야 하지만, 1차 배양에서 30일간 균사가 왕성히 성장하였으므로 다시 동일한 방법에 의해 당근박을 이용하여 고형 배지를 제조하고 1차 배양에서 얻은 아가리쿠스 균사체 배양물을 고형배지와 함께 채취하여 다시 제조한 당근 박 배지에 접종하여 2차 배양을 시작하였다. 2차 배양(배양온도 30℃, 상대습도 90%)은 약 3개월간 실시하였으며 배양 중간에 고형배지에서 성장하고 있는 균사체 배양물을 고형 배지과 함께 시료로 채취한 후 N-acetyl-D-glucosamine의 함량을 분석하여 균사체의 성장정도를 측정하였다(도2). 또한 배양된 균사체에서 조단백다당체를 분리하여 균사체 함량을 기준으로 측정하였다(도 3). 측정 결과 배양 3개월의 시점에서 고형배지 중 균사체의 함량이 30% 이상이 되었다.In order to prepare an edible by-product solid medium to be used for mycelial culture of Agaricus mushroom spawn, 1Kg of carrot gourd was washed with water at about 25 ° C. to remove foreign substances present on the surface of the carrot gourd, and then finely chopped with a fine shredder. After adjusting the moisture content of the sliced carrot gourd to about 80 ~ 90%, put 200g of carrot gourd with the moisture content into 500ml glass jar and pressurize it to remove microorganisms remaining in the carrot gourd. The sterilizer was sterilized at 121 ° C. for 15 minutes. Some of the cultures of Agaricus mushroom spawn grown in agar medium, which were already purely separated, were inoculated into carrot gourd medium and inoculated in carrot gourd medium for 30 days. Mushroom mycelia cultures were obtained. If the growth of agaricus mycelium inoculated in the first culture is not good, use a mixed medium that mixes other edible by-product media such as corn or soybean meal in consideration of the ratio of nitrogen source to carbon source of edible by-product solid medium. The primary culture was again performed, but since the mycelia grew vigorously in the primary culture for 30 days, a solid medium was prepared by using the carrot foil and the agaricus mycelium culture obtained in the primary culture was collected with the solid medium. Inoculated into the prepared carrot foil medium to start the secondary culture. Secondary culture (cultivation temperature 30 ℃, relative humidity 90%) was performed for about 3 months, and the content of N-acetyl-D-glucosamine after sampling the mycelium culture grown in solid medium with solid medium in the middle of the culture Analyze the growth of the mycelia was measured (Fig. 2). In addition, crude protein polysaccharide was isolated from the cultured mycelium and measured based on the mycelium content (FIG. 3). As a result of the measurement, the content of mycelium in the solid medium was more than 30% at 3 months of culture.

실시예 2Example 2

당근 박 및 감귤 과피를 이용한 영지버섯 균사체의 배양Cultivation of Ganoderma lucidum Mycelium with Carrot Park and Citrus Peel

영지버섯 종균의 균사배양에 사용할 고형배지를 제조하기 위하여 당근 박 1Kg 및 감귤 과피 1Kg을 25℃ 정도의 물로 깨끗이 수세하여 당근 박 및 감귤 과피의 표면에 존재하는 이물질을 제거한 후 이를 세절기로 미세하게 세절하였다. 세절된 당근 박 및 감귤 과피의 수분함량을 80∼90% 정도로 조절한 후 수분함량이 조절된 당근 박 및 감귤 과피를 9:1의 비율로 혼합하여 200g씩 500mL 크기의 유리병에 각각 넣고 면전한 후 당근 박 및 감귤 과피에 잔류하고 있는 미생물을 제거하기 위하여 고온가압살균기에서 121℃로 15분간 살균하였다. 이미 순수하게 분리하여 한천배지에서 생육시킨 영지 종균의 배양물을 일부 채취하여 당근 박 및 감귤 과피 복합 배지에 접종하고 30일간 1차 배양(배양온도 27℃, 상대습도 37%)하여 당근 박 및 감귤 과피 복합배지에 적응된 영지버섯 균사체 배양물을 얻었다. 1차 배양에서 30일간 균사가 왕성히 성장하였으므로 다시 동일한 방법에 의하여 당근 박 및 감귤 과피를 이용하여 고형배지를 제조하고 1차 배양에서 얻은 영지버섯 균사체 배양물을 배지와 함께 채취하여 다시 제조한 당근 박 및 감귤 과피 복합배지에 접종하여 2차 배양을 시작하였다. 2차 배양(배양온도 30℃, 상대습도 90%)은 약 2개월간 실시하였으며 배양 중간에 고형배지에서 성장하고 있는 균사체 배양물을 시료로 채취한 후 N-acetyl-D-glucosamine의 함량을 분석하여 균사체의 성장정도를 측정하였다. 그 결과, 배양 2개월의 시점에서 고형배지 중 균사체의 함량이 30% 이상이 되었으며, 그리하여 배양을 정지시키고 살균 후 건조하여 과립화 한 후 영지버섯 과립차의 제조원료로 사용하였다.To prepare a solid medium to be used for mycelial culture of Ganoderma lucidum spawn, 1Kg of carrot gourds and 1Kg of citrus peels are washed with water at 25 ° C to remove foreign substances on the surface of carrot gourds and citrus peels. I cut it. Adjust the moisture content of the sliced carrot gourd and citrus peel to 80 ~ 90%, and then mix the carrot gourd and citrus peel with the moisture content in a ratio of 9: 1 and put them in 500ml glass bottles of 200g each. After sterilization for 15 minutes at 121 ℃ in a high-temperature autoclave to remove the microorganisms remaining in the carrot gourd and citrus peel. Some of the cultures of Ganoderma spawn grown in the agar medium, which have already been purely separated, are inoculated into the carrot gourd and citrus peel complex medium, and primary culture (cultivation temperature 27 ℃, relative humidity 37%) for 30 days is carried out. Ganoderma lucidum mycelium culture adapted to the skin complex medium was obtained. Since the mycelia grew vigorously in the primary culture for 30 days, the same method was used to prepare a solid medium using carrot gourd and citrus peel, and to collect the Ganoderma lucidum mycelium culture obtained in the primary culture with the medium and re-produce the carrot gourd. And the second culture was started by inoculating the citrus rind complex medium. Secondary culture (cultivation temperature 30 ℃, relative humidity 90%) was carried out for about 2 months. After taking mycelial culture grown in solid medium in the middle of the culture, the content of N-acetyl-D-glucosamine was analyzed. The growth of mycelium was measured. As a result, the content of mycelium in the solid medium was more than 30% at the time of two months of culture, and thus, the culture was stopped, sterilized, dried, granulated, and used as a raw material for Ganoderma lucidum granular tea.

실시예 3Example 3

대두박을 이용한 운지버섯 균사체의 배양Cultivation of Fingertip Mushroom Mycelia by Soybean Meal

운지 버섯 종균의 균사배양에 사용할 고형배지를 제조하기 위하여 대두 박 1Kg을 25℃ 정도의 물에 1일간 침지시키고 증숙기에서 증숙시킨 후 세절기로 미세하게 세절하였다. 세절된 대두 박의 수분함량을 80∼90% 정도로 조절한 후 수분함량이 조절된 대두 박을 200g씩 500mL 크기의 유리병에 넣고 면전한 후, 대두 박에 잔류하고 있는 미생물을 제거하기 위하여 고온가압살균기에서 121℃로 15분간 살균하였다. 이미 순수하게 분리하여 한천배지에서 생육시킨 운지버섯 종균의 배양물을 일부 채취하여 대두 박 배지에 접종하고 30일간 1차 배양(배양온도 25℃, 상대습도 37%)하여 대두 박 배지에 적응된 운지 버섯 균사체 배양물을 얻고자 하였으나 1차 배양 시 접종시킨 버섯 균사체의 성장이 원활하지 않아 고형배지의 탄소공급원 대비 질소공급원의 비율을 고려하여 옥수수를 5∼100% 혼합한 배지를 제조하여 사용하였다. 1차 재배양(배양온도 27℃, 상대습도 37%)에서 30일간 균사가 왕성히 성장하였으므로 다시 동일한 방법에 의하여 대두 박과 옥수수를 이용하여 고형배지를 제조하고 1차 재배양에서 얻은 버섯 균사체 배양물을 배지와 함께 채취하여 다시 제조한 복합배지에 접종하여 2차 배양을 시작하였다. 2차 배양(배양온도 30℃, 상대습도 90%)은 약 3개월간 실시하였으며 배양 중간에 복합 고형배지에서 성장하고 있는 균사체 배양물을 시료로 채취한 후 N-acetyl-D-glucosamine의 함량을 분석하여 균사체의 성장정도를 측정하였다. 그 결과, 배양 3개월의 시점에서 복합 고형배지 중 균사체의 함량이 30% 이상으로 나타났으며, 그리하여 배양을 정지시키고 살균 후 건강식품의 부재료로 사용하였다.To prepare a solid medium to be used for mycelial culture of cloud finger mushroom spawn, 1Kg of soybean meal was immersed in water at about 25 ° C. for 1 day, steamed in a steamer, and finely chopped with a fine slicer. After adjusting the water content of the shredded soybean meal to about 80 ~ 90%, put the soybean meal with the water content in 200g each into a 500mL glass bottle, and then pressurize it to remove microorganisms remaining in the soybean meal. The sterilizer was sterilized at 121 ° C. for 15 minutes. Some of the cultures of the fingerling mushroom spawn grown in agar medium, which have already been purely separated, are inoculated into soybean meal medium and incubated in soybean meal medium by primary culture (cultivation temperature 25 ℃, relative humidity 37%) for 30 days. The mushroom mycelium culture was obtained to obtain a mushroom mycelia culture, but the mushroom mycelium inoculated during the primary culture did not grow smoothly, and a medium containing 5-100% corn was prepared in consideration of the ratio of the nitrogen source to the carbon source of the solid medium. Mycelial growth in the first cultivation (cultivation temperature 27 ℃, 37% relative humidity) for 30 days, so the solid medium was prepared using soybean meal and corn by the same method again, mushroom mycelium culture obtained in the first cultivation The secondary culture was started by inoculating the mixed medium prepared with the medium again. Secondary culture (cultivation temperature 30 ℃, relative humidity 90%) was conducted for about 3 months, and the content of N-acetyl-D-glucosamine was analyzed after sampling the mycelia culture grown in the complex solid medium in the middle of the culture. The growth of mycelium was measured. As a result, the content of the mycelium in the compound solid medium was more than 30% at the time of 3 months of culture, and thus, the culture was stopped and used as an ingredient of health food after sterilization.

상기에서 살펴 본 바와 같이, 본 발명은 본 발명은 배지로서 식용 가능한 부산물을 사용함으로써 배양된 균사체를 배지에서 분리 정제할 필요 없이 활용 가능하여 균사체를 제조하여 활용하기까지 걸리는 공정을 단축할 수 있고, 또한 함께 섭취되는 배지에 함유된 영양성분이 추가적으로 보충되어, 보다 경제적이고 양질인 건강식품 등을 만들기 위한 원료를 제공할 수 있다.As described above, the present invention can be utilized without the need to separate and purify the cultured mycelium from the medium by using an edible by-product as a medium, it can shorten the process until the production and utilization of the mycelium, In addition, the nutrients contained in the medium to be ingested together may be additionally supplemented, thereby providing a raw material for making more economical and high quality health food.

Claims (6)

식품 가공 중 얻을 수 있는 식용 가능한 부산물을 이용하여 제조된 고형배지를 사용하는 것을 특징으로 하는 버섯 균사체 배양방법.Mushroom mycelia cultivation method characterized in that using a solid medium prepared using edible by-products obtained during food processing. 제 1 항에 있어서, 상기 식용 가능한 부산물을 수세 후, 세절하고 수분함량을 조절한 후 살균하여 고형배지를 제조하는 것을 특징으로 하는 특징으로 하는 버섯 균사체 배양방법.The method of claim 1, wherein the edible by-products after washing, finely chopped, after controlling the water content sterilized mushroom mycelium culture method, characterized in that to produce a solid medium. 제 1 항에 있어서, 식용 가능한 부산물을 이용한 고형배지를 제조하기 위하여 탄소공급원 대비 질소공급원의 비율을 고려하여 2종 이상의 식용 부산물을 혼합하여 제조하는 것을 특징으로 하는 버섯 균사체 배양방법.The method of claim 1, wherein the mushroom mycelium cultivation method characterized in that for producing a solid medium using the edible by-products by mixing two or more edible by-products in consideration of the ratio of the nitrogen source to the carbon source. 제 1 항에 있어서, 상기 고형배지에 버섯균사체 배양물을 접종하고 배양하여, 상기 고형배지에 적응된 버섯 균사체를 얻는 제 1차 배양단계와 제 1차 배양단계에서 얻은 버섯 균사체 배양물을 제 1차 배양단계에서와 동일하게 제조된 고형배지에 접종하는 제 2차 배양단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 버섯 균사체 배양방법.[Claim 2] The mushroom mycelium culture of claim 1, wherein the mushroom medium is inoculated and cultured on the solid medium to obtain mushroom mycelium adapted to the solid medium. Mushroom mycelium culture method comprising a second culture step of inoculating a solid medium prepared in the same manner as the primary culture step. 제 1 항에 있어서, 상기 식품가공 중 얻을 수 있는 식용 가능한 부산물로서 당근 및 당근 박, 표고버섯 및 표고버섯 박, 감귤 및 감귤 과피, 대두 및 대두 박, 옥수수, 감자로 구성된 그룹 중 적어도 어느 하나를 사용하는 것을 특징으로 하는 버섯 균사체 배양방법According to claim 1, wherein at least one of the group consisting of carrot and carrot gourd, shiitake mushroom and shiitake gourd, citrus and citrus peel, soybean and soybean gourd, corn, potato Mushroom mycelium culture method characterized in that the use 제 1 항 내지 5 항 중 어느 하나의 방법으로 생산된 버섯 균사체를 특별한 정제과정 없이 배지와 함께 살균 후 건조 혹은 추출한 것을 원료로 하여 제조된 식음료 또는 건강식품.A food or beverage or health food prepared by using the mushroom mycelium produced by any one of claims 1 to 5 after sterilization and drying or extracting with a medium without a special purification process.
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