KR20030005787A - 믹소첼린-에이를 유효성분으로 하는 항산화 및 항암용약학 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 믹소첼린-에이 (myxochelin A) 화합물을 유효성분으로 하는 항산화 및 항암용 약학 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 항산화 활성이 탁월하고 인체 기원의 다양한 암세포주에 대한 성장억제 활성이 우수한 하기화학식 1의 믹소첼린-에이 화합물을 유효성분으로 함유하는 항산화 및 항암용 약학 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 믹소첼린-에이는 미생물의 배양에 의한 보편적인 방법으로 생산할 수 있을 뿐 아니라 추출 및 정제가 용이하여 공업적으로 대량 생산이 가능하며, 항산화 및 항암 활성이 우수하여 생체 내 활성 산소종을 조절하는 항산화제 및 항암제로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

믹소첼린-에이를 유효성분으로 하는 항산화 및 항암용 약학 조성물{ANTIOXIDATIVE AND ANTICANCER COMPOSITIONS CONTAINING MYXOCHELIN A}
본 발명은 믹소첼린-에이 (myxochelin A) 화합물을 유효성분으로 하는 항산화 및 항암용 약학 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 항산화 활성이 탁월하고 인체 기원의 다양한 암세포주에 대한 성장억제 활성이 우수한 하기화학식 1의 믹소첼린-에이 화합물을 유효성분으로 함유하는 항산화 및 항암용 약학 조성물에 관한것이다.
<화학식 1>
산소는 지구상에서 가장 많은 원소로서 건조 대기중의 21%를 차지하고 있으며, 호기성 생물은 모두 산소를 전자수용체로 이용하는 호흡을 통해 에너지를 획득한다. 산소는 이와 같이 생명유지에 절대적으로 필요하지만, 안정한 분자상태인 기저삼중항 산소 (ground state triplet oxygen)가 체내 효소계, 환원 대사, 화학 약품, 공해 물질, 광화학 반응 등의 각종 물리적, 화학적 요인 등에 의하여 수퍼옥사이드 라디칼 (superoxide radical, O2 -), 히드록시 라디칼 (hydroxyl radical, HO·), 과산화수소 (H2O2), 일중항 산소 (singlet oxygen,1O2)와 같이 반응성이 매우 큰 활성 산소종으로 전환되면 생체에 치명적인 독성을 일으키는 양면성을 지니고 있다. 즉, 이들 활성 산소종은 세포구성 성분들인 지질, 단백질, 당, 디옥시리보핵산 (DNA) 등에 대하여 비선택적, 비가역적인 파괴작용을 함으로써 암을 비롯하여 뇌졸중, 파킨슨병 등의 뇌 질환과 심장질환, 허혈, 동맥경화, 피부질환, 소화기질환, 염증, 류마티스, 자가면역질환 등의 각종 질병 및 노화를 일으키는 것으로 알려져 있다. 또한, 이들 활성산소에 의한 체내 지질성분의 과산화 작용으로 생성되는 지질 과산화물은 체내의 다른 과산화물들과 함께 정상세포를 파괴함으로써 각종 기능장애를 야기해 질병의 원인이 되기도 한다 (B. Halliwell,Drugs42:569, 1991; K. Fukuzawa and Y. Takaishi,J. Act. Oxyg. Free Rad. 1:55, 1990; J. Neuzil, and J. M. Gebicki,J. Med. 320:915, 1989).
최근 이러한 활성 산소종을 조절할 수 있는 항산화제의 개발에 관한 연구가 활발히 진행되고 있는데, 수퍼옥사이드 디스뮤타아제 (superoxide dismutase), 퍼옥시다아제 (peroxidase), 카탈라아제 (catalase), 글루타치온 퍼옥시다아제 (glutathione peroxidase) 등의 효소와 토코페롤 (tocopherol), 아스코베이트 (ascorbate), 카로테노이드 (carotenoid), 글루타치온 (glutathione) 등과 같은 천연물 유래의 저분자 물질의 항산화 효과에 대한 연구 (S. S. Changet al., J. Food Sci42:1102, 1977; P. A. Hammerschmidt and D. E. Pratt,J. Food Sci. 43:556, 1977; D. E. Pratt and B. W. Watts,J. Food Sci.29:17, 1964) 등이 그 예이다. 효과가 우수한 항산화제의 개발은 식품과 향장품의 보조제로서 뿐만 아니라 새로운 의약품의 개발로 이어질 수 있다는 점에서 대단히 중요하다.
이에 본 발명자들은 활성이 뛰어난 새로운 항산화제를 개발하기 위해, 점액세균 (Myxobacteria) (G. Hofle and H. Reichenbach,GBF, Scient. Ann. Report5-22, 1990; C. J. Cowden and I. Paterson,Nature387:238, 1997)의 대사산물을 대상으로 항산화 활성을 조사하였다. 점액세균은 최근 생리활성 물질의 새로운 공급원으로서 세계적 관심을 받고 있는데 점액세균으로부터 믹소첼린-에이 및 에포칠론, 암부르티신 등의 물질들이 분리된 바 있다.
이로부터 본 발명자들은 점액세균 안지오코쿠스 디시포르미스 (Angiococcus disciformis)의 배양액에서 탁월한 항산화 활성을 발견하고 이 활성 본체를 분리·정제하여 믹소첼린-에이 (myxochelin A)임을 확인하였으며, 상기 화합물이 인체 기원의 다양한 암 세포주에 대해서도 우수한 성장억제 활성을 나타냄을 밝혀 믹소첼린-에이 화합물을 항산화제 및 항암제로 사용하는 새로운 용도를 제공함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 믹소첼린-에이 화합물을 항산화제 및 항암제로 사용하는 새로운 용도를 제공하는 것이다.
도 1은 믹소첼린-에이 (myxochelin A)의1H 핵자기 공명 스펙트럼을 나타낸 것이고,
도 2는 믹소첼린-에이의13C 핵자기 공명 스펙트럼을 나타낸 것이고,
도 3은 믹소첼린-에이의 적외선 흡수 스펙트럼을 나타낸 것이고,
도 4은 믹소첼린-에이의 자외선 흡수 스펙트럼을 나타낸 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하기화학식 1로 표시되는 믹소첼린-에이 화합물을 유효성분으로 하는 항산화용 약학 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 믹소첼린-에이 화합물을 유효성분으로 하는 항암용 약학 조성물을 제공한다.
<화학식 1>
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
믹소첼린-에이는 토양으로부터 분리되는 점액세균인 안지오코쿠스 디시포르미스 (Angiococcus disciformis), 특히 안지오코쿠스 디시포르미스 JW357 (수탁번호: ATCC 33172) (B. Kunze, N. Bedorf, W. Kohl, G. Hoffle and H. Reichenbach.J. Antibiotics, 42:14, 1989) 균주의 배양액으로부터 분리하여 얻을 수 있다.
안지오코쿠스 디시포르미스 균주의 배양액으로부터 믹소첼린-에이 화합물을 분리·정제하는 방법은, 예를 들어
1) 흡착수지 존재 하에 안지오코쿠스 디시포르미스 균주를 배양한 후 배양액을 원심분리하여 균체와 흡착수지를 분리하는 단계;
2) 분리된 균체와 흡착수지에 유기용매, 바람직하게는 아세톤과 메탄올의 혼합용매를 가하여 활성물질을 추출한 후 여과지로 여과하여 균체와 흡착수지를 제거하는 단계; 및
3) 얻어진 여과액을 감압 농축하여 얻은 액상의 조추출물을 유기용매, 예를들어 에틸아세테이트로 추출하여 액상의 활성분획을 얻은 후; 활성분획을 혼합 용매계, 예를 들어 디클로로메탄/아세톤/메탄올 (90 : 5 : 5) 혼합용매를 이용한 실리카 겔 중압 액체 크로마토그라피 및 저급 알코올 또는 유기용매 (바람직하게는, 에틸아세테이트 또는 디클로르메탄)를 이용한 순환식 분취용 HPLC (Recycling preparative HPLC)를 순차적으로 수행함으로써 최종 정제하여 순수한 단일물질을 얻는 단계를 포함한다.
믹소첼린에이를 생산할 수 있는 점액세균으로는 안지오코쿠스 디시포르미스 이외에도 믹소코쿠스 잔투스 (Myxococcus xanthus), 스티그마텔라 아우란티아카 (Stigmatella aurantiaca) 등이 있다 (W. Trowitzsch-kienast, B. Kunze, H. Irschik, V. Wray, H. Reichenbach and G. Hoffle, The 9thDECHEMA-Jahrestagung der Biotechnologen, Berlin, 1991; B. Silakowski, B. Kunzeet al.Eur. J. Biochem.267:6476, 2000)
믹소첼린-에이 화합물은 상기와 같이 점액세균 배양액으로부터 분리되거나 통상의 방법에 의한 화학합성 또는 반합성에 의해 인공적으로 제조될 수도 있다.
본 발명의 믹소첼린-에이 화합물은 자유 라디칼 (free radical)인 1,1-디페닐-2-피크릴히드라질 (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)을 사용한 항산화 활성 측정법 (M. S. Blois.Nature, 181:1199, 1958)에 의하여 측정하였을 때, 공지의 합성 항산화제 (BHA)와 천연 항산화제 (토코페롤) 보다 약 2 배 내지 4배 높은 항산화력을 나타낸다.
또한, 본 발명의 믹소첼린-에이 화합물은 피부암 (Melanoma) 및 중추신경계(CNS) 암의 암세포주에 대해 우수한 항암 활성을 나타낸다.
상기 결과를 바탕으로, 본 발명은 믹소첼린-에이를 유효성분으로 하는 항산화용 약학 조성물을 제공한다.
상기 약학 조성물은 항산화 활성이 우수한 믹소첼린-에이 화합물을 유효성분으로 함유하여 뇌졸중, 파킨슨병 등의 뇌질환과 심장질환, 허혈, 동맥경화, 피부질환, 소화기질환, 염증, 류마티스, 자가면역질환 등의 각종 질병 및 노화를 예방 및 치료하는 데 유용하게 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 믹소첼린-에이 화합물을 유효성분으로 하는 항암용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 믹소첼린-에이를 포함하는 항산화 및 항암용 약학 조성물은 임상투여시에 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다.
즉, 본 발명의 약학 조성물은 실제 임상투여 시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 믹소첼린-에이에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (Calcium carbonate), 수크로스 (Sucrose) 또는 락토오스 (Lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘, 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제,내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜 (Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용 될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 경구, 경피, 피하, 정맥 또는 근육을 포함한 여러 경로를 통해 투여될 수 있다.
본 발명의 믹소첼린-에이 화합물의 통상적인 1일 투여량은 성인의 경우 10 ∼ 200 ㎎이고 증상에 따라 1회 또는 수회로 나누어 투여하는 것이 바람직하다. 그러나, 활성 성분의 실제 투여량은 투여 경로, 환자의 연령, 성별, 체중 및 환자의 중증도 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되어야 하는 것으로 이해되어야 하며, 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 구체적으로 설명한다.
그러나, 이들 실시예는 단지 본 설명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명이 이들 실시예만으로 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 안지오코쿠스 디시포르미스로부터 믹소첼린-에이 화합물의 분리 및 정제
본 발명자들은 먼저 점액세균을 분리하기 위해 경상북도 경산시 소재의 포도밭에서 채취한 토양을 야마나카 등의 방법 (S. Yamanaka, A. Kawaguchi and K. Komagata,J. Gen. Appl. Microbiol.33:247, 1987)에 따라 처리하여 다양한 종류의 점액세균과 함께, 본 발명의 믹소첼린-에이 화합물을 생산하는 점액세균 균주를 분리하고 이를 JW357로 명명하였다. 상기 균주 JW357의 형태와 각종 배지상의 생육상태 및 생리적 특성 등을 조사한 결과 이 균주는 군쯔 등에 의해 믹소첼린-에이 화합물을 생산하는 균주로 이미 보고 된 안지오코쿠스 디시포르미스 (Angiococcus disciformis) (ATCC 33172)임을 확인하였다 (B. Kunze, N. Bedorf, W. Kohl, G. Hoffle and H. Reichenbach,J. Antibiotics42:14, 1989). 상기 안지오코쿠스 디시포르미스 균주를 군쯔 등이 확립한 방법에 따라 배양하였으며, 다만 본 발명자들은 큰 용량의 발효조 대신에 2 ℓ의 배양 플라스크를 사용하여 5일간 회전 진탕 (150 rpm) 배양하였다.
상기 과정으로 배양하여 얻은 배양액 10 ℓ를 원심분리하여 균체와 흡착수지 (암바라이트 XAD-16 [Amberlite XAD-16], 알드리치케미칼사)를 함께 분리하였다. 상기에서 얻은 균체와 흡착수지에 아세톤 3ℓ와 메탄올 1ℓ를 넣어 3일간 실온에 방치하여 활성물질을 추출한 다음 여과지로 여과하여 균체와 흡착수지를 제거하였다. 이렇게 얻은 여과액을 감압 농축하여 액상의 조추출물을 얻었다. 이어서 조추출물을 물 300 ㎖에 현탁시킨 후 에틸 아세테이트 300 ㎖로 3회에 걸쳐 추출하고그 추출액을 감압 농축한 결과 액상의 활성분획물 571 ㎎을 얻었다. 상기 활성분획을 실리카겔 중압 액체 크로마토그라피 (실리카겔 60, 230 ∼ 400 메쉬, 직경 20 ㎜ × 높이 300 ㎜)를 수행하여 디클로르메탄-아세톤-메탄올 (90 : 5 : 5) 구분에서 100 ㎎의 활성분획을 얻었다. 상기에서 얻은 액상 물질을 메탄올을 용매로 하여 자이겔 지에스-310 칼럼 (GAIGEL GS-310, 직경 25 ㎜ × 높이 500 ㎜)을 장착한 순환식 분취용 HPLC (Recycling preparative HPLC)로 최종 정제하여 30 ㎎의 순수한 단일물질을 얻었다.
<실시예 2> 믹소첼린-에이 화합물의 구조 동정
여러 가지 기기분석 실험결과, 상기 실시예 1에서 순수 정제된 화합물의 이화학적 특성은 다음과 같이 조사되었다.
(1) 물질의 성상 : 갈색 오일상
(2) 분자량 : 404
(3) 분자식 : C20H24N2O7
(4) 질량분석 스펙트럼 (EI-MS,m/z) : 404[M]+
(5) 선광도 : [α]D 25-25.8。(c0.61, MeOH)
(6) 적외선 흡수 스펙트럼 [υmax(film) cm-1] : 3352(br), 2939, 2863, 1638, 1586, 1545, 1262 (도 3)
(7) 자외선 흡수 스펙트럼 [λmax MeOHnm(logε)] : 210(4.97), 249(4.54), 313(4.13) (도 4)
(8) 용해성 : 메탄올, 아세톤, 에틸아세테이트, 디클로로메탄에 용해되고 물, 헵탄에는 용해되지 않는다.
(9) 정색반응 : 바닐린-황산 용액 및 FeCl3용액에는 양성 반응을 보이고 닌히드린 및 드라겐도르프 (Dragendorff) 용액에는 음성이다.
(10) 실리카겔 박층 크로마토그라피 (TLC) : Rf=0.58 (디클로로메탄 : 메탄올 = 9 : 1)
(11)1H 핵자기 공명 스펙트럼 (500MHz, acetone-d 6) :
δ8.18(1H, br t), 7.79(1H, br d), 7.29(1H, d,J=8.5Hz), 7.21(1H, d,J=8.5Hz), 6.95(2H, dd,J=8.5, 2.0Hz), 6.69(2H, t,J=8.5Hz), 4.19(1H, m), 3.66(1H, d,J=5.0Hz), 3.43(1H, m), 1.70(1H, m), 1.69(1H, m), 1.51(1H, m) (도 1)
(12)13C 핵자기 공명 스펙트럼 (125MHz, acetone-d 6) :
171.2(s), 171.1(s), 150.9(s), 150.8(s), 147.4(s), 147.2(s), 118.8(d), 118.7(d), 118.6(d), 118.5(d), 117.6(d), 117.3(d), 115.3(s), 115.2(s), 64.5(t), 52.3(d), 39.7(t), 31.0(t), 29.6(t), 23.9(t) (도 2)
상기의 이화학적 분석 결과와 다음의 실험결과로부터 순수·정제된 본 발명의 화합물이 믹소첼린-에이임을 동정하였다.
먼저 질량분석 스펙트럼 및13C 핵자기 공명 스펙트럼, DEPT (Distortionless Enhancement by Polarization Transfer) 스펙트럼의 결과, 상기 화합물의 분자식은 C20H24N2O7으로 결정되었다.1H-1H COSY (Correlation Spectroscopy) 스펙트럼,1H-13C COSY 스펙트럼 및 HMBC (Heteronuclear Multiple Bond Coherence) 스펙트럼의 해석 결과, 아미드 부분을 제외한 부분구조의 골격이 추정되었고,1H 핵자기 공명 스펙트럼과 IR 스펙트럼으로부터 분자 내에 아미드 결합의 존재가 시사되었다. 이러한 사실과 점액세균이 생산자임을 토대로 문헌조사를 한 결과, 본 발명의 상기 화합물은 H. 레이첸바흐 등에 의해 점액세균으로부터 철 배위 화합물 (iron-chelating compound)로 분리 된 믹소첼린-에이 (B. Kunze, N. Bedorf, W. Kohl, G. Hoffle and H. Reichenbach.,J. Antibiotics, 42:14, 1989)와 동일함이 밝혀졌다.
<실시예 3> 믹소첼린-에이 화합물의 항산화 활성 조사
믹소첼린-에이 화합물이 나타내는 항산화 활성은 자유 라디칼인 DPPH를 사용한 항산화 활성 측정법 (M. S. Blois.,Nature,181:1199, 1958; B. S. Yun.J. Antibiotics, 53:114, 2000)으로 조사하였다.
우선, 디메틸설폭사이드 (DMSO)에 용해시킨 각 농도별 시료 화합물 20 ㎕를980 ㎕의 150 μM DPPH 에탄올 용액에 첨가하였다. 시료는 본 발명의 믹소첼린-에이를 실험군으로, 기존에 항산화제로 알려진 BHA (Butylated hydroxyanisole)와 토코페롤을 대조군으로 사용하였다. 상기 각각의 시료 혼합액을 볼텍스 (vortex)로 혼합하여 상온에서 20분 동안 방치한 후, 517 nm에서 흡광도를 측정하였고 그 결과를 하기표 1에 나타내었다. ED50값은 대조구의 흡광도 값을 50% 감소시키는데 필요한 시료량 (㎍/㎖)을 나타낸다.
화합물 항산화 활성 (ED50,㎍/㎖)
토코페롤 19.2
BHA 9.3
믹소첼린-에이 4.9
상기표 1에 나타난 바와 같이, 본 발명의 믹소첼린-에이 화합물의 항산화 활성은 합성 항산화제인 BHA의 2배, 천연 항산화제로 잘 알려진 토코페롤 보다는 약 4배 높았다. 따라서, 우수한 항산화력을 가진 본 발명의 믹소첼린-에이 화합물은 항산화제로서 유용하다.
<실시예 4> 믹소첼린-에이 화합물의 항암 활성 조사
믹소첼린-에이 화합물의 각종 인체 암세포에 대한 항암 활성을 SRB 검정법 (P. Skehan,et al.,J. Natl. Cancer Insti., 82:1107, 1990)으로 조사하였다. 이때 사용한 암세포는 피부암 (Melanoma) 세포주인 MALME-3M, SK-MEL-2, SK-MEL-28, SK-MEL-5, SNB-19, M14, M19-MEL, LOXIMVI와 중추신경계 암세포주인 U251,SNB-75, SNB-78, XF-498 이었으며, 이들은 모두 미국 국립 암 연구소로부터 분양 받아 사용하였다.
상기 암세포주는 10% 소 태아 혈청이 포함된 RPMI 1640 배지 (라이프사이언스사)를 사용하여 배양하였고, 배양된 세포는 일주일에 한번 또는 두 번 정도 분주하여 유지하였다. 이렇게 배양된 암세포를 일정한 농도로 96-웰 플레이트에 분주하고 하루가 경과한 다음 세포가 나타내는 비교 기준 흡광도를 확인하였다. 이때, 필요한 Tz (Time/Zero) 플레이트로서 시료 처리구와 동일한 세포수를 가진 플레이트를 10% TCA로 고정하였다. Tz 플레이트는 4℃에서 1시간이 경과하면 수돗물로 세척하고, 시료 처리한 플레이트는 48시간이 경과한 다음 10% TCA를 웰 당 100 ㎕씩 처리하여 고정시킨 다음 4℃에서 1시간이 경과하면 수돗물로 세척하였다. 세척한 플레이트를 상온에서 건조시키고 0.4% SRB 용액을 웰 당 100 ㎕씩 가하여 염색한 후 30분이 경과하면 1% 아세트산 용액으로 세척하여 상온에서 건조시켰다. 여기에 트리스마 염기 (pH 10.5)를 웰 당 100 ㎕씩 가하여 다시 용해시킨 다음, ELISA 해독기를 사용하여 520 ㎚에서 흡광도를 측정하였고, 암세포의 성장을 50% 억제하는 화합물의 농도, 즉 IC50(㎍/㎖)을 계산하여 그 결과를 하기표 2에 나타내었다. 이때 비교군으로 시스플라틴 (Cisplatin, 시그마사)과 카르보플라틴 (Carboplatin, 시그마사)을 사용하였다.
암세포에 대한 항암 활성
암세포주 항암 활성 (IC50,㎍/㎖)
믹소첼린-에이 시스플라틴 카르보플라틴
U251 1.53 0.15 4.00
SNB-75 1.84 0.26 4.03
SNB-78 2.36 0.28 4.03
XF-498 1.81 0.22 4.76
MALME-3M 1.20 - -
SK-MEL-2 1.27 0.88 5.27
SK-MEL-28 1.57 0.80 12.01
SK-MEL-5 1.22 0.31 3.44
SNB-19 1.52 0.22 3.88
M14 1.15 0.26 5.12
M19-MEL 1.24 0.33 9.81
LOXIMVI 1.38 - -
상기표 2에 나타난 바와 같이, 본 발명의 믹소첼린-에이 화합물은 12종의 암세포에 대해 그 성장을 억제하는 우수한 항암 활성을 나타내었다.
이상에서 살펴 본 바와 같이, 본 발명의 믹소첼린-에이 화합물은 미생물의 배양에 보편적으로 사용되는 배양방법으로 생산할 수 있으며 추출 및 정제에도 특별한 방법이 요구되지 않으므로 공업적으로 대량 생산이 가능하고, 탁월한 항산화 활성과 함께 다양한 인체 암세포에 대해 우수한 항암 활성을 나타내므로 효과적인 항산화제 및 항암제로 유용하게 사용될 수 있다.

Claims (5)

  1. 화학식 1로 표시되는 믹소첼린-에이 화합물을 유효성분으로 하는 항산화용 약학 조성물.
    <화학식 1>
  2. 제 1항에 있어서,
    약학 조성물은 뇌졸중, 파킨슨병, 심장질환, 허혈, 동맥경화, 피부질환, 소화기질환, 염증, 류마티스, 자가면역질환 또는 노화의 예방 및 치료에 사용되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  3. 상기화학식 1로 표시되는 믹소첼린-에이 화합물을 유효성분으로 하는 항암용 약학 조성물.
  4. 제 1항 내지 제 3항의 어느 한 항에 있어서,
    믹소첼린-에이 화합물은 점액세균으로부터 분리되거나 화학합성 또는 반합성되는것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  5. 제 4항에 있어서,
    1) 흡착수지 존재 하에 점액세균인 안지오코쿠스 디시포르미스 (Angiococcus disciformis) 균주를 배양한 후 배양액을 원심분리하여 균체와 흡착수지를 분리하는 단계;
    2) 분리된 균체와 흡착수지에 유기용매, 바람직하게는 아세톤과 메탄올의 혼합용매를 가하여 활성물질을 추출한 후 여과지로 여과하여 균체와 흡착수지를 제거하는 단계;
    3) 얻어진 여과액을 감압 농축하여 얻은 액상의 조추출물을 유기용매로 추출하여 액상의 활성분획을 얻는 단계;
    4) 활성분획으로부터 혼합 용매계를 이용한 실리카 겔 중압 액체 크로마토그라피 및 저급 알코올 또는 유기용매를 이용한 순환식 분취용 HPLC (Recycling preparative HPLC)를 순차적으로 수행하는 단계에 의해 믹소첼린-에이가 순수하게 분리되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
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