KR20020039335A

KR20020039335A - Ｒａｒ 선택성 레티노이드 작동약

Info

Publication number: KR20020039335A
Application number: KR1020027002458A
Authority: KR
Inventors: 벨로니폴라나네트; 모어피터
Original assignee: 프리돌린 클라우스너, 롤란드 비. 보레르; 에프. 호프만-라 로슈 아게
Priority date: 1999-08-25
Filing date: 2000-08-18
Publication date: 2002-05-25
Also published as: EP1212316A2; JP2003507465A; ZA200200939B; DE60005980T2; ATE252093T1; WO2001014360A2; KR100470500B1; CN1370156A; TR200200473T2; CA2382527A1; EP1212316B1; AR025351A1; DK1212316T3; JP3795394B2; BR0013582A; ES2207548T3; MXPA02001939A; PT1212316E; WO2001014360A3; US6479670B1

Abstract

본 발명은 기호들이 명세서에 정의된 바와 같은 하기 화학식 Ⅰ 의 새로운 RAR 선택성 레티노이드 작동약, 그의 약제학적 허용 가능염, 각각의 이성질체 또는 라세미체 또는 비(非)라세미체 혼합물; 그들을 함유하는 약제학적 조성물, 및 그들을 치료제로서 사용하기 위한 방법에 관한 것이다:

[화학식 Ⅰ]

Description

ＲＡＲ 선택성 레티노이드 작동약{RAR SELECTIVE RETINOID AGONISTS}

만성폐색성폐질환 (COPD) 은 질병 및 사망의 주 원인이며, 유럽 연합 및 북아메리카 각각에서 주요한 사인으로 3, 4 위를 차지한다. COPD 는 최대 호기량 (expiratory flow) 의 감소를 특징으로 하며, 이는 수 개월에 걸쳐 변하지 않고 2 년 이상 계속하여 지속된다. COPD 의 가장 심각한 형태를 갖는 환자는 일반적으로 상당한 정도의 폐기종을 나타낸다. 폐기종은 해부학상 말단 세기관지의 원위부에 있는 공기공간의 영구적 확장으로 정의된다. 이는 FEV1 을 감소시키는, 점진적 폐 반도 (recoil) 의 손실, 폐포 파괴, 감소된 폐포 표면적 및 가스 교환을 특징으로 한다. 상기 2 가지의 특징들, 감손된 가스 교환 및 호기량의 감소는, 폐기종을 갖는 환자가 겪게되는 특징적인 생리적 이상이다. 심각한 폐기종을 갖는 환자의 주증상은 최소한의 신체적 활동 동안의 호흡곤란 (shortness of breath) 이다.

다른 잠재성 환경 독소가 관여할 수도 있지만, 폐기종의 가장 통상적인 원인은 흡연이다. 이들 각종 유해제 (insulting agent) 는 과도한 방어 기전에서의 활성 프로테아제 및 유리 라디칼 산화제의 방출을 포함하는 폐에서의 파괴 과정을 활성화시킨다. 프로테아제/항프로테아제 수준의 불균형은 엘라스틴 매트릭스의 파괴, 탄성 반도의 손실, 조직 손상 및 폐기능의 연속적 쇠퇴를 초래한다. 유해제를 제거하는 것 (즉, 금연) 은 손상 속도를 감속시키지만, 손상된 폐포 구조는 회복되지 않으며 폐 기능은 재생되지 않는다.

레틴산은 세포 행동의 다기능 조절자 (modulator) 이며, 세포외 매트릭스 대사와 정상 상피의 분화를 모두 변경시키는 잠재성을 갖는다. 폐에서, 레틴산은 일시적이고 공간적으로 선택적 발현되는 특이적 레틴산 수용체 (RAR) 와의 상호작용에 의해, 폐 분화의 각종 양상을 조절하는 것으로 나타났다. RARβ및 RARγ의 배위 활성화는 폐의 분지화 및 폐포화/격막구분과 관계가 있다. 폐포 격막구분동안, 폐포벽을 둘러싸는 섬유아세포 간엽조직에서 레틴산 저장 과립이 증가하고, 폐의 RARγ발현이 정점에 도달한다. 상기 레티닐 에스테르 저장의 고갈은 새로운 엘라스틴 매트릭스의 축적 및 격막구분과 평행한다. 상기 개념을 지지하여, Massaro 등은 문헌 [Am. J. Physiol., 1996, 270, L305-L310] 에서, 레틴산의 생후 투여가 래트의 폐포 수를 증가시킨다는 것을 설명했다. 또한, CRBP 와 RARβmRNA 의 발현, 이어서 발달하는 래트 폐의 폐포 격막구분을 예방하는 덱사메타손(dexamethasone) 의 능력이 모두 트랜스인 레틴산에 의해 폐기되었다.

최근 연구는 문헌 [Nature Medicine, 1997, 3, 675] 의 D. Massaro 등의 동물 모델에서, 모두 트랜스인 레틴산이 새로운 폐포를 유도하고, 탄성 반도를 거의 정상으로 회복시킬 수 있음을 예증하였다. 그러나, 이것이 발생하는 기전은 불명확하게 남아있다.

레티노이드는 천연 및 합성 화합물을 포함하는 구조적으로 비타민 A 와 관련된 화합물의 한 계열이다. 몇몇 일련의 레티노이드가 피부학적 및 종양학적 질환의 치료에 임상적으로 유용하다는 것이 판명되었다. 레틴산, 및 그의 자연 발생 레티노이드 유사체 (9-시스 레틴산, 모두 트랜스인 3-4 디데히드로 레틴산, 4-옥소 레틴산 및 레티놀) 는 각종 염증, 면역 및 구조 세포의 구조 및 기능을 조절하는 다형질발현성 조정(regulatory) 화합물이다. 이들은 폐의 상피세포 증식, 분화 및 형태발생의 중요한 조정자(regulator)이다. 레티노이드는 스테로이드/갑상선 수용체 상과(superfamily)에 속하는 리간드 유도가능 전사 인자인 일련의 호르몬 핵 수용체를 통해 그들의 생물학적 효과를 발휘한다. 레티노이드 수용체는 2 개의 과, 레틴산 수용체 (RARs) 및 레티노이드 X 수용체 (RXRs) 로 분류되며, 각각은 3 가지의 별개 하위 유형 (α, β 및 γ) 으로 구성된다. RAR 유전자 과의 각 하위 유형은 2 개의 1 차 RNA 전사의 미분 스플라이싱에서 유래하는 다수의 이성체를 코딩한다. 모두 트랜스인 레틴산은 레틴산 수용체에 대한 생리적 호르몬이고, 3 가지의 RAR 하위 유형 모두에 대해 대략 유사한 친화도로 결합하지만, 9-시스 레틴산이 이의 천연 리간드인 RXR 수용체에 대해서는 결합하지 않는다.

많은 비(非)폐조직에서, 레티노이드는 항염증성 효과를 갖고, 상피 세포 분화의 진행을 변경시키고, 스트로마 세포 매트릭스 생성을 억제한다. 상기 성질들은 건선, 좌창, 비대성 피부 흉터 등의 피부 장애에 대한 국소적 및 전신성 레티노이드 치료법을 개발하도록 했다. 다른 적용은 급성 전골수세포성 백혈병, 섬 - 및편평 세포 암 및 간섬유증의 제어를 포함한다. 암 외부의 레티노이드의 치료적 사용의 한계는 자연 발생 레티노이드, 모두 트랜스인 레틴산 및 9-시스 레틴산에 관찰되는 상대적 유독성에서 유래한다. 상기 천연 리간드는 비선택성이므로 신체를 통해 다형질발현성 효과를 갖으며, 이는 빈번히 유독하다. 최근에는 각종 레티노이드가 RAR 또는 RXR 수용체와, 또는 한 계열 내의 특정 하위 유형 (α, β, γ) 과 선택적으로 또는 특이적으로 상호작용한다고 기술되었다.

따라서 본 발명에 따른 레티노이드는, 또한 상피의 상해를 수반하는 피부 장애, 예를 들어, 좌창 및 건선, 광- 및 노화-손상된 피부의 치료와 예방을 위해; 또한 상처, 예를 들어 수술상의 상처와 같은 절창, 화상에 의한 상처, 및 피부 외상에 기인하는 기타 상처 치유의 촉진을 위해; 그리고 악성 및 전(前)악성의 상피 상해, 및 구강, 혀, 후두, 식도, 방광, 경부 및 결장의 종양 및 전암성 변화의 치료 및 예방을 위해 사용될 수도 있다.

본 발명은 하기 화학식 Ⅰ 의 새로운 RAR 선택성 레티노이드 작동약, 및 화학식 Ⅰ 의 카르복실산의 약제학적 활성염을 제공한다:

[식 중,

R¹은 수소, 저급 알킬이고;

R²는 저급 알킬이고;

R³는 저급 알킬 또는 H 이고;

X 는 산소 또는 황이고;

n 은 1 또는 2 이고;

여기에서 점선 결합은 임의적이다].

화학식 Ⅰ 의 화합물은 라세미체 혼합물, 즉, 5-(RS) 로서, 또는 5-(S) 또는 5-(R) 이성질체와 같은 순수한 거울상이성질체 형태로 존재할 수 있다.

점선 결합이 존재하는 경우는 3 중 결합을 의미하고, 점선 결합이 부재하는 경우는 2 중 결합을 의미한다. "점선 결합" 이 부재하는 경우, 2 중 결합은 "E" 또는 "Z" 입체 배치될 수 있다. 용어 "E" 및 "Z" 는 문헌 [Pure and Applied Chem. 1976,54, 12] 에 정의된 바와 같이 본원에서 사용된다.

용어 "저급 알킬" 은 본원에서 탄소수 1 내지 5 의 직쇄 또는 분지 알킬 잔기, 예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, tert-부틸, 펜틸, 아밀 및 3-펜틸을 의미한다.

R¹이 수소인 화학식 Ⅰ의 화합물은 Na- 및 K-염과 같은 알칼리 염, 및 암모늄 또는 트리메틸암모늄염과 같은 치환된 암모늄염 등의 약제학적으로 허용 가능한 염기와 염을 형성하고, 이들은 본 발명의 범위 내에 있다.

화학식 Ⅰ 의 바람직한 화합물은 화학식 ⅠA 의 화합물 및 화학식 ⅠA 의 카르복실산의 약제학적 활성염이다:

[식 중, X, R¹, R², R³, n 및 점선 결합은 상기 정의된 바와 같다].

화학식 ⅠA 의 특히 바람직한 화합물은 X 가 산소이고 n 이 2 인 화합물이고, 특히는 하기의 화합물이다:

A 4-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로-1-벤조[b]옥세핀-8-일-에티닐)-벤조산

B 4-(5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일에티닐) -벤조산

C 4-(5-메틸-5-프로폭시메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일에티닐)-벤조산

D (E)-4-[2-(5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일)-비닐]-벤조산

E (E)-4-[2-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일)-비닐]-벤조산

F (E)-4-[2-(5-메틸-5-프로폭시메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일)-비닐]-벤조산.

또한, 화학식 ⅠA 의 특히 바람직한 화합물은 X 가 황이고 n 이 2 인 화합물이고, 특히는 하기의 화합물이다:

G 4-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일에티닐)-벤조산

H 4-(5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일에티닐) -벤조산

I (E)-4-[2-(5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일)-비닐]-벤조산

J (E)-4-[2-(5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일)-비닐]-벤조산.

또한, 화합물의 더욱 바람직한 군은 하기 화학식 ⅠB 의 화합물 및 화학식 ⅠB 의 카르복실산의 약제학적 활성염이다:

ⅠB 의 특히 바람직한 화합물은 n 이 1 이고, X 가 산소인 화합물이고, 예로는 하기의 화합물이다:

K 4-(4-메톡시메틸-4-메틸-크로만-6-일에티닐)-벤조산

L (E)-4-[2-(4-메톡시메틸-4-메틸-크로만-6-일)-비닐]-벤조산.

본 발명에 따른 화합물은 당해 기술에서 공지된 방법으로 제조 가능하다. n 이 2 이고 점선 결합이 존재하는, 화학식 ⅠA 의 화합물은 반응식 1 에 묘사된 방법에 따라 제조 가능하다:

[식 중, 기호는 상기에 정의된 바와 같고, Hal 은 요오드, 브롬 또는 염소와 같은 할로겐이다].

반응 단계 1a:

디히드로벤조[b]옥세핀- 또는 디히드로벤조[b]티에핀-온 (1) 을 (메톡시메틸)트리페닐포스포늄 클로라이드와 비티히 (Wittig) 반응시켜, 산 가수분해 후 알데히드 (2) 를 형성시키며, 상기 반응을 테트라히드로푸란 (THF) 과 같은 용매에서 약 -78 ℃ 내지 0 ℃ 의 온도로 수행하는 것이 바람직하다.

반응 단계 1b:

이어서, 카르브알데히드를 극성 용매, 바람직하게는 tert-부탄올 중 칼륨 tert-부틸레이트와 같은 염기의 존재하에, 적당한 알킬할로게나이드, 바람직하게는 알킬요오다이드를 사용하여 (3) 으로 알킬화킨다. O-알킬화된 부생성물의 분리, 및 원한다면 재순환이 가능하다.

반응 단계 1c:

알킬화된 카르브알데히드 (3) 의 환원은 나트륨 수소화붕소를 사용하여 수행하는 것이 바람직하다. 이 환원으로 수득된 1 차 알콜 (4) 를 단계 1 d 로 처리한다.

반응 단계 1d:

이 에스테르화는 극성 용매, 바람직하게는 N,N-디메틸포름아미드 (DMF) 중에서, 수소화나트륨과 같은 강염기를 사용하여 탈양성자화 (deprotonation) 하고, 이어서 알킬할로게나이드, 바람직하게는 알킬요오다이드를 사용하여 알킬화함으로써 수행되는 것이 바람직하다.

반응 단계 1e, 1f 및 1g:

할로겐화된 테트라히드로-옥세핀 또는 -티에핀 (5) 을 피페리딘 또는 트리에틸아민과 같은 염기, 및 촉매량의 CuI, 트리페닐포스핀 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐 (Ⅱ) 클로라이드 또는 테트라키스-(트리페닐포스핀)-팔라듐 (0) 의 존재하에서, 트리메틸실릴-아세틸렌과 커플링시켜 에티닐화된 유도체 (6) 를 형성시킨다 (반응 단계 1e).

화합물 (7) 을 형성하는 메탄올 중에서의 촉매량의 나트륨 메틸레이트를 사용한 탈실릴화 (desilylation) (반응 단계 1f) 후, 알킬-4-요오도-벤조에이트를, 트리에틸아민과 같은 염기 및 촉매량의 구리 요오다이드, 트리페닐포스핀 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐 (Ⅱ) 클로라이드의 존재하에, 제 2 소노가시라 커플링 (Sonogashira-coupling) 에 의해 부착시켜, n 이 2 인 화합물 ⅠA 를 산출했다.

반응 단계 1h:

대안적인 간편한 방법에서는, 할로겐화된 테트라히드로-옥세핀 및 티에핀 (5) 각각을 CuI, 트리페닐포스핀 및 테트라키스-(트리페닐포스핀)-팔라듐 (0) 또는 비스(트리페닐포스핀)팔라듐 (Ⅱ) 클로라이드의 존재하에, 반응 단계 1e 에 기술된 바와 같이 알킬(4-에티닐)벤조에이트와 직접 반응시켜, 화합물 ⅠA 를 수득하는 것이 가능하다. 하지만, Hal 이 Br 이라면, 수율은 황 계열에서만 만족스럽다.

점선 결합이 부재하는 화학식 ⅠA 의 화합물은, 하기 반응식 2 에 묘사된 방법에 따라 제조 가능하다:

[식 중, 기호는 상기 정의된 바와 같다].

반응 단계 2a:

할로겐화된 테트라히드로-옥세핀 또는 -티에핀 (5) 을 -78 ℃ 에서 각각 연속적으로 부틸리튬 및 디메틸 포름아미드와 반응시켜, 암모늄 클로라이드와의 워크업 후, 목적하는 알데히드 (8) 를 산출했다.

반응 단계 2b:

이어서, 알데히드 (8) 를 극성 비양성자성 용매, 바람직하게는 N,N-디메틸포름아미드 또는 디메틸술폭시드 중에서, 수소화나트륨과 같은 강염기의 존재하에, 적당한 벤질릭 포스포네이트와 비티히-오너 (Wittig-Horner) 반응을 통해 더 처리하여, 트랜스 올레핀 (9) 를 수득했다.

n 이 1 또는 2 인 화학식 ⅠB 의 화합물은, 하기 반응식 3 및 4 에 묘사된 방법에 따라 제조 가능하다:

[식 중, 기호는 상기 정의된 바와 같다].

화학식 ⅠA 의 화합물은 시판 m-브로모-페놀 및 m-브로모-티오페놀 각각으로부터 용이하게 수득할 수 있는 메타-할로겐화된 화합물 (1) 을 출발 물질로 하여 제조가 가능한 반면; 화학식 ⅠB 의 화합물은 종래의 할로겐화 방법에 의해 후기에 관능화 (반응 단계 3d 참조) 되는 비(非)할로겐화된 화합물 (10) (각각 페놀 및 티오페놀에서 출발하여 제조됨) 에서 출발하여 제조된다. 만약 화학식 ⅠA 및 ⅠB의 화합물에서 R³= H 라면, 1 차 히드록시 기는 합성 내내, 예를 들어 아세테이트로서 적합하게 보호되어야 한다. 최종적으로, 화학식 ⅠA 및 ⅠB 화합물의 에스테르 기 COOR¹을, 예를 들어 THF/에탄올/아세톤 중 수소화나트륨을 사용하여, 표준 조건에 따라 유리산으로 가수분해할 수 있다.

다른 면에서, 본 발명은 폐기종 및 관련 폐질환의 치료를 위한 수송의 바람직한 모드인 전신 투여의 RAR 선택성 작동약의 사용에 관한 것이다. 따라서 이는 수송의 바람직한 모드인 전신 투여로 RAR 선택성 작동약을 갖는 포유류의 치료에 의한, 폐기종 및 관련 폐질환의 치료 방법에 관한 것이다.

"치료적 효능량" 은, 질환의 치료 또는 예방을 위해 포유류에 투여되는 경우, 그러한 질환을 치료 및 예방하기에 충분히 효과적인 화합물의 양을 의미한다. "치료적 효능량" 은 화합물, 질환 및 그의 심각도, 및 치료될 포유류의 연령, 체중 등에 따라 변할 것이다.

화합물의 RARγ작동약 선택성은, C. Apfel 등의 문헌 [Proc. Nat. Sci. Acad. (USA), 89:7129-7133 (1992)]; M. Teng 등의 문헌 [J. Med. Chem., 40:2445-2451 (1997)]; 및 PCT 공보 96/30009 와 기술된 바와 같이, 당업자에게 공지된 통상의 리간드 결합 분석에 의해 측정 가능하다.

본원에 개시된 RAR 작동약의 사용은, 손상된 폐포 및 새로운 폐포의 격막구분의 회복의 촉진을 위해, 특히는 폐기종의 치료를 위해 사용할 수 있다. RAR 작동약, 특히는 RARγ선택성 작동약을 사용한 치료는 폐포 매트릭스 및 격막구분의회복을 촉진시키는데 유용하다. 상기와 같이, 본원에 개시된 방법은 폐기종 등의 질환을 치료하는데 유용하다.

대체로, 투약량은 1 일당 약 0.01 내지 1.0 mg/kg 체중, 바람직하게는 1 일당 약 0.05 내지 0.5 mg/kg 체중의 범위이다.

특히, 폐기종을 치료하기 위해 필요한 RAR 선택성 작동약의 투약량은 상태의 심각도에 의존할 것이다. 상기 투약량은 가장 효과적인 결과를 얻기 위해 요구되는대로, 단일 투여, 다중 적용에 의해, 또는 제어 방출을 통해, 종래의 약제학적 조성물에서 수송될 수 있다. 의학적으로 지시가 있는 한 투약은 계속될 수 있고, 이는 질환의 심각도에 의존하며 수 주일 내지 수 개월의 범위일 수 있다.

대체로, 약제학적 허용 가능 조성물, 예를 들어, 약제학적 허용가능 담체 또는 희석제 내의 화학식 Ⅰ 의 RAR 작동약의 염이 투여된다. 본 발명의 맥락에서, 약제학적 허용 가능염은 인간 환자에 투여하기에 적용 가능한 것으로서, 레티노이드 작동약의 분야에서 공지된 화학적으로 적합한 임의의 염을 포함한다. 당해 분야에서 공지된 종래의 염의 예는 나트륨 및 칼륨 염 등의 알칼리 금속염, 칼슘 및 마그네슘 염 등의 알칼리 토금속 염, 및 암모늄 및 알킬 암모늄 염을 포함한다.

대표적인 수송안은 경구, 비경구 (피하, 근육내 및 정맥내 수송을 포함함), 직장, 협측 (설하 수송을 포함함), 경피, 폐 및 비강내 수송을 포함한다. 폐 투여의 한 방법은 RAR 작동약 수용액의 분무화 (aerosolization) 가 관여된다. 분무화된 조성물은 역미셀 (reverse micelle) 또는 리포솜내에 패키징된 화합물을 포함할 수 있다. 전형적인 폐 및 호흡 수송 시스템이 미국특허 제 5,607,915 호, 제5,238,683 호, 5,292,499 호 및 5,364,615 호에 기술된다.

또한, 본 발명의 치료 방법은 추가의 활성 성분과의 동시적 또는 순차적 조합으로, RAR 작동약을 전신성 투여하는 것을 포함한다.

RAR 작동약은 대체로 약제학적 허용가능 무독성 담체와의 부가혼합물 내의 약제학적 조성물로서 투여될 것이다. 상기 언급된 바와 같이, 그러한 조성물은 비경구 (피하, 근육내 또는 정맥내) 투여를 위해, 특히 액형 용액 또는 서스펜션의 형태로; 경구 또는 협측 투여를 위해, 특히 정제 또는 캡슐의 형태로; 비강내 투여를 위해, 특히 분말, 점비액 에어로솔의 형태로; 및 직장 또는 경피투여를 위해 제조될 수 있다. 임의의 종래 담체 물질이 사용될 수 있다. 담체 물질은 임의의 유기 또는 무기 담체 물질, 예를 들어, 물, 젤라틴, 아라비아 고무, 락토스, 전분, 마그네슘 스테아레이트, 탈크, 폴리알킬렌 글리콜, 페트롤륨 젤리 (patroleum jelly) 등이 사용 가능하다.

비경구 투여를 위한 액형 제형은 부형제로서 살균수 또는 염수, 프로필렌 글리콜 등의 알킬렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 등의 폴리알킬렌 글리콜, 식물유, 수소화 나프탈렌 등을 함유할 수 있다. 그들은 약 pH 4 내지 약 6 의 범위인 약산성 완충액을 사용할 수 있다. 적당한 완충액은 5 mM 내지 50 mM 범위의 농도로 아세테이트, 아스코르베이트 및 시트레이트를 함유한다. 경구 투여를 위해, 제형은 담즙산 염 또는 아실카르니틴(acylcarnitine)의 첨가로써 강화될 수 있다.

비강 투여를 위한 제형은 고형일 수 있고, 락토스 또는 텍스트란과 같은 부형제를 함유할 수 있거나, 점비액 또는 계량 분무액 (metered spray) 의 형태로 사용되는 수성 또는 유성 용액일 수 있다. 특히 비강 제형은 종래의 건조 분말 흡입제 (DPI's) 용으로 적합한 건조 분말, 네뷸라이저용으로 적합한 액형 용액 또는 서스펜션 및 계량 투약 흡입제 (MDI's) 에 사용하기에 적합한 추진제 제형을 포함한다. 협측 투여를 위해, 전형적 부형제는 당, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 전젤라틴화된 전분 등을 포함한다.

비강 투여를 위해 제형되는 경우, 비 점막을 통한 흡수는 0.2 내지 15 중량 %, 바람직하게는 0.5 내지 4 중량 %, 가장 바람직하게는 약 2 중량 % 범위의 양의 계면활성산, 예를 들어, 글리코콜산, 콜산, 타우로콜산, 에토콜산, 데옥시콜산, 케노데옥시콜산, 데히드로콜산, 글리코데옥시콜산, 시클로덱스트린 등에 의해 강화될 수 있다.

경구 투여용 고형 형태는 정제, 경질 및 연질 젤라틴 캡슐, 환제, 세세 (sachets), 분말, 과립 등을 포함한다. 각 정제, 환제 또는 봉지제는 약 1 내지 약 50 mg, 바람직하게는 5 내지 약 10 mg 의 화학식 Ⅰ 의 RAR 작동약을 함유할 수 있다. 바람직한 고형 경구 투약 형태는 정제, 두 조각 경질 쉘 캡슐 및 연질 탄성 젤라틴 (SEG) 캡슐을 포함한다. SEG 캡슐은 다른 2 형태와는 구별되는 유리한 이점을 제공하기 때문에 특히 흥미롭다 (문헌 [Seager, H., "Soft gelatin capsules: a solution to many tableting problems"; Pharmaceutical Technology, 9, (1985)] 참조). SEG 캡슐을 사용하는 몇가지 이점은: a) 약물이 캡슐내에 정확하게 투약 가능한 액체 내에 용해되거나 분산되기 때문에, 투약 함량 균일성이 SEG 캡슐 내에서 최적화됨 b) SEG 캡슐로서 제형화되는 약물은, 약물이 수성 혼화성 또는 유성액체에 용해, 가용화 또는 분산되어 신체내에서 방출되는 경우, 용액이 용해되거나 유화되어 고 표면적의 약물 분산액을 제공하므로 양호한 생체이용율을 나타냄 c) 장기간의 저장시 산화에 민감한 약물의 분해가 건조 쉘 때문에 방지된다.

연장된 기간에 걸쳐, 예를 들어, 1 주 내지 1 년의 기간 동안, 대상체로 본발명의 화합물의 수송은, 목적하는 기간의 방출을 위해 충분한 활성 성분을 함유하는 제어 방출 시스템의 단일 투여에 의해 성취될 수 있다. 각종 제어 방출 시스템, 예를 들어, 단일체 또는 저장기형 마이크로캡슐, 데포 (depot) 임플란트, 삼투 펌프, 비히클 (vehicle), 미셀, 리포솜, 경피 패치, 전리요법 장치 및 대안적 주사가능 투약 형태가 상기 목적으로 사용될 수 있다. 활성 성분의 수송이 목적되는 부위로의 집중화는 몇몇 제어 방출 장치의 부가적인 특징으로, 이는 특정 장애의 치료에 있어 유익한 것으로 판명됐다.

하기는 엘라스틴 매개 매트릭스 회복 및 폐포 격막구분을 촉진하기 위해, 본원에서 기술된 RAR 선택성 작동약을 사용하기 위한 대표적인 약제학적 제형이다.

하기 제제 및 예는 당업자가 본 발명을 더욱 명확하게 이해하고 실행하는 것을 가능케 한다. 이는 본 발명의 범위를 제한하고자 하는 것은 아니며, 단지 예시적이고 대표적인 것일 뿐이다.

정제 제형

하기 성분들을 균질하게 혼합하고, 단일선(single scored) 정제로 압축했다.

성분 당 분량	정제, mg
화학식 Ⅰ 의 RAR 작동약	10
옥수수전분	50
크로스카멜로스 나트륨	25
락토스	120
마그네슘 스테아레이트	5

캡슐 제형

하기 성분들을 균질하게 혼합하고, 경질 쉘 젤라틴 캡슐에 로딩했다.

성분	캡슐 당 분량, mg
화학식 Ⅰ 의 RAR 작동약	5
락토스, 스프레이 건조	148
마그네슘 스테아레이트	2

서스펜션 제형

하기 성분들을 혼합하여, 경구 투여용 서스펜션을 형성시킨다.

성분	양
화학식 Ⅰ 의 RAR 작동약	1.0 g
푸마르산	0.5 g
염화나트륨	2.0 g
메틸 파라벤	0.15 g
프로필 파라벤	0.05 g
과립 당	25.5 g
소르비톨 (70% 용액)	12.85 g
비검 K (Veegum K; Vanderbilt Co.)	1.0 g
향미료	0.035 ml
착색제	0.5 mg
증류수	총량 100 ml 가 되도록

주사가능 제형

하기 성분들을 혼합하여 주사가능 제형을 형성시킨다.

성분	양
RAR 작동약	0.2 g
나트륨 아세테이트 완충액, 0.4 M	2.0 ml
HCl (1N) 또는 NaOH (1N)	적합한 pH 까지 적당량
물 (증류, 살균됨)	총량 20 ml 가 되도록

비강 제형

하기 성분들을 혼합하여 비강 투여용 서스펜션을 형성시킨다.

성분	양
RAR 작동약	20 mg/ml
시트르산	0.2 mg/ml
나트륨 시트레이트	2.6 mg/ml
벤즈알코늄 클로라이드	0.2 mg/ml
소르비톨	35 mg/ml
나트륨 타우로콜레이트 또는 글리코콜레이트	10 mg/ml

하기 실시예에서 제조되는 화합물은 라세미체 혼합물로서 제조된다. 하지만, 라세미체 혼합물은 잘 구성된 방법에 따라, 예를 들어 2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세피닐-메탄올 또는 2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에피닐-메탄올의 단계에서, 각각의 거울상 이성질체로 용이하게 분별될 수 있다. 상기 방법은 키랄 칼럼 , 예를 들어 키랄 NUCLEOSIL 칼럼 상에서의 HPLC 에 의한 분리; 또는 키랄산, 예를 들어, 모셔 (Mosher) 산을 사용한 유도체화, 종래 기술에 의한 상응하는 부분입체 이성질체의 분리 후 에스테르의 환원적 또는 가수분해적 분해에 의한 분리를 포함한다.

본 발명은 새로운 RAR 선택성 레티노이드 작동약, 상기 레틴산 (retinoic acid) 수용체 작동약, 특히 레틴산 수용체 γ선택성 작동약 (RARγ-선택성)의 폐기종 (emphysema) 의 치료를 위한 용도에 관한 것이다.

실시예 1

1.1. 4-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일에티닐)-벤조산의 제조

a] 8-브로모-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-5-카르브알데히드

(메톡시메틸)트리페닐포스포늄 클로라이드 14.27 g (1.6 당량) 을 무수 THF 50 ml 에 현탁시키고, -10 ℃ 내지 -5 ℃ 의 온도에서 시린지를 통해 1.6 M n-부틸리튬 25.2 ml (헥산 중 1.55 당량) 를 첨가함으로써 탈양성자화시켰다. 생성된 적색 일라이드 용액을 -75 ℃ 로 냉각시키고, 무수 THF 13 ml 에 용해된 8-브로모-3,4-디히드로-2H-벤조[b]옥세핀-5-온 6.20 g (26.0 mmol) 로 처리했다. 이어서, 혼합물을 -78 ℃ 에서 0.2 시간, 실온에서 1 시간 동안 방치시킨 후, 분쇄 얼음상에 붓고, 디에틸에테르로 추출했다. 유기상을 물로 세척하고 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켜 조생성물을 산출했고, 이를 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트=95/5)로 정제하였다. 그로 인해, 8-브로모-5-메톡시메틸렌-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀 5.85 g 을 E/Z 혼합물로서 수득했고, 이를 하기와 같이 가수분해 했다:

에놀에테르 (21.7 mmol) 을 THF 30 ml 에 용해시킨 후, 35 % HClO₄31.5 ml 로 처리했다. 16 시간 교반 후, 생성된 혼합물을 빙-냉수와 디에틸에테르 사이에 분배시켰다. 유기층을 Na₂CO₃(pH 약 10) 및 물로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켜 표제 화합물을 무색 오일로서 4.63 g 수득했다 (GC (가스 크로마토그래피) 에 따라 순도 96 %).

b] 8-브로모-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-5-카르브알데히드

8-브로모-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-5-카르브알데히드 2.59 g (10.2 mmol) 을 무수 tert-부탄올 25 ml 에 용해시켰다. 0 ℃ 에서, 칼륨 tert-부틸레이트 2.28 g (2 당량) 을 첨가한 후, 0.3 시간 후 메틸요오다이드 1.58 ml (2.5 당량) 를 첨가했다. TLC (박층 크로마토그래피) 가 출발 물질의 소실을 나타낼때 까지, 실온에서 교반을 계속했다. 이어서 반응 혼합물을 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출했다. 유기상을 물로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 감압하에 증발시켰다. 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 97/3) 로 표제 화합물을 무색 오일로서 1.85 g 수득했다 (GC 에 따라 순도 98 %).

c] (8-브로모-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-5-일)-메탄올

8-브로모-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-5-카르브알데히드 20.6 g (76.5 mmol) 를 무수 에탄올 100 ml 에 용해시키고, 0 ℃ 로 냉각했다. NaBH₄2.896 g (1 몰 당량) 을 수 부분으로 나누어 첨가하고, 반응을 0 ℃ 에서 0.5 시간, 실온에서 0.5 시간 동안 진행시켰다. 반응 혼합물을 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 추출했다. 유기상을 물로 세척하고, 나트륨 술페이트 상에서 건조시키고, 용매를 증발시켰다. 그로 인해, 표제 화합물을 다음 단계에 사용하기에 충분히 순수한 무색 오일로서 21.5 g 수득했다.

d] 8-브로모-5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀

상기 수득된 1 차 알콜 (~76.5 mmol) 을 무수 DMF 100 ml 에 용해시키고, -10 ℃ 에서 NaH (광유 중 약 50 %, 약 1.3 당량) 로 처리했다. 탈양성자화를 실온에서 진행시켰다. 수소 발생이 중단될 때, 혼합물을 0 ℃ 로 냉각하고, 메틸요오다이드 6.24 ml (1.3 당량) 으로 처리한 후, 0 ℃ 에서 0.2 시간, 실온에서 0.75 시간 동안 방치시킨다 (NaI 의 백색 침전이 형성됨). 냉수로 가수분해하고, 디에틸에테르로 추출하고, NH₄Cl 용액으로 유기상을 세척하고, 나트륨 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 용매를 증발시켜 조생성물을 수득하고, 이를 SiO₂(헥산/에틸아세테이트 95/5) 로 여과 정제하여, 표제 생성물을 무색 오일로서 22.5 g 수득했다 (GC 에 따라 순도 96.5 %).

e] (5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일에티닐)-트리메틸실란

피페리딘 50 ml 중에 용해된 8-브로모-5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀 22.5 g (<76.5 mmol) 에, CuI 291 mg (0.02 당량), 트리페닐포스핀 (Ph₃P) 401 mg (0.02 당량), 및 (Ph₃P)₄Pd 884 mg (0.01 당량) 을 연속적으로 첨가했다. 80 ℃ 로 가열한 후, 피페리딘 25 ml 중 트리메틸실릴아세틸렌 26.5 ml (2.5 당량) 용액을 적가 깔대기를 통해 1 시간 내로 첨가했다. GC 분석이 6 % 의 출발 물질이 아직 잔존한다는 것을 나타냈기 때문에, 부가량의 트리메틸실릴아세틸렌 3 ml 를 2 부분으로 나누어 첨가했다. 냉각 후, 반응 혼합물을 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 추출하고, 유기상을 묽은 HCl 로 세척하고, 나트륨 술페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 증발 건조시켰다. 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 95/5) 로 표제 화합물을, 다음 단계에 사용하기에 충분히 순수한 황색 오일로서 26.3 g 산출했다 (GC 에 따라 순도 91 %).

f] 8-에티닐-5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀

나트륨 소편(小片)을 무수 메탄올 100 ml 에 용해시켰다. 0 ℃ 에서, 나트륨 메틸레이트 용액을 상기 제조된 (5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일에티닐)-트리메틸실란 26.3 g (< 76 mmol) 에 한 부분으로 첨가한 후, 실온에서 0.75 시간 동안 방치했다. 반응 혼합물을 포화 암모늄 클로라이드 수용액에 붓고, 디에틸에테르로 추출하고, 유기상을 분리하고, 나트륨 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 용매를 제거했다. 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 96/4) 로 표제 화합물을 연황색 오일로서 15.60 g 산출했다 (GC 에 따라 순도 96.5 %).

g] 4-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일에티닐)-벤조산 메틸 에스테르

무수 DMF 165 ml 에, 메틸 4-요오도-벤조에이트 20.96 g (1.25 당량), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(Ⅱ) 클로라이드 2.29 g (0.04 당량), CuI 1.86 g (0.12 당량), 트리에틸아민 27.9 ml (2.5 당량) 을 연속적으로 용해시켰다. 무수 DMF 60 ml 중에 용해된 상기 제조된 8-에티닐-5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀 14.67 g (63.7 mmol) 을 적가 깔대기를 통해 0.75 시간 내에 첨가했고, 0.25 시간 후, 반응 혼합물을 분쇄 얼음/HCl 상에 부음으로써 반응을 켄칭 (quenching) 시키고, 디에틸에테르로 추출하였고, 유기상을 물로 세척하고, 나트륨 술페이트 상에서 건조시키고, 여과 및 증발 건조시켰다. 섬광 크로마토그래피(SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 91/9) 로, 동일한 용매 혼합물로부터의 결정화 후, 표제 화합물 19.5 g 을 융점이 111.5-112.5 ℃ 인 백색 결정으로서 생성시켰다.

h] 4-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일에티닐)-벤조산

4-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일에티닐)-벤조산 메틸 에스테르 20.06 g (55.04 mmol) 을 THF/에탄올 (1/1) 100 ml 에 용해시키고, NaOH 8.81 g (4 당량) 으로 처리하고, 물 50 ml 에 용해시켰다. 반응 플라스크를 어둠에 방치시키고, 실온에서 42 시간 동안 계속해서 교반시켰다. 이어서, 혼합물을 분쇄 얼음/25 % HCl 60 ml 상에 붓고, 에틸아세테이트로 2 회 추출하고; 유기상을 소량의 물로 세척하고, 나트륨 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발 건조시켰다. 헥산/에틸아세테이트로부터의 결정화로 표제 화합물 18.90 g 을 융점이 205-206 ℃ 인 연황색 결정으로서 산출했다.

원소 분석: C₂₂H₂₂O₄계산치: C 75.41% H 6.33%

측정치: C 75.31% H 6.17%.

1.2. 4-(5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일에티닐)-벤조산의 제조

단계 d] 에서 메틸요오다이드 대신 에틸요오다이드를 사용하는 것을 제외하고는, 실시예 1.1. 과 유사하게 상기 화합물을 제조했다. 융점이 170-171 ℃ 인 백색 결정을 수득했다.

MS: (M)⁺364, (M-CH₂OC₂H₅)⁺305.

1.3. 4-(5-메틸-프로폭시메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일에티닐)-벤조산의 제조

단계 d] 에서 메틸요오다이드 대신 프로필요오다이드를 사용하는 것을 제외하고는, 실시예 1.1. 과 유사하게 상기 화합물을 제조했다. 융점이 148-149 ℃ 인 오프-백색(off-white) 결정을 수득했다.

MS: (M)⁺378, (M-CH₂OC₃H₇)⁺305.

실시예 2

2.1. 4-[2-(5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일)비닐]-벤조산의 제조

a] 5-알릴-8-브로모-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-5-카르브알데히드

8-브로모-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-5-카르브알데히드 0.55 g (2.18 mmol) (실시예 1, 단계 a] 참조) 을 무수 THF 5 ml 및 무수 tert-부탄올 1 ml 에 용해시켰다. 0 ℃ 에서, 칼륨 tert-부틸레이트 0.490 g (2 당량), 이어서 0.1 시간 후, 알킬브로마이드 0.552 ml (3 당량) 을 첨가했다. TLC (박층 크로마토그래피) 가 출발 물질의 소실을 나타낼 때까지, 동일한 온도에서 교반을 계속했다. 이어서, 반응 혼합물을 분쇄 얼음/NH₄Cl 용액 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고, 유기상을 물로 세척하고, 나트륨 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 용매를 제거했다. 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 95/5) 로 표제 화합물을 무색 오일로서 0.224 g 수득했다 (GC 에 따라 순도 98 %).

b] (5-알릴-8-브로모-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-5-일)-메탄올

5-알릴-8-브로모-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-5-카르브알데히드 0.216 g (0.732 mmol) 을 7 ml 무수 에탄올에 용해시키고 0 ℃ 로 냉각시켰다. NaBH₄0.028 g (1 몰-당량) 을 즉시 첨가하고, 반응을 0 ℃ 에서 0.5 시간 동안 진행시켰다. 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고, 유기상을 물로 세척하고, 나트륨 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 용매를 제거하여, 표제 화합물을 다음 단계에 사용하기에 충분히 순수한 무색 오일로서 0.230 g 수득했다 (GC 에 따라 순도 96 %).

c] (8-브로모-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-5-일)-메탄올

상기 제조된 (5-알릴-8-브로모-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-5-일)-메탄올 0.230 g 을 에틸아세테이트 10 ml 에 용해시키고, 실온 및 1.01×10⁵Pa 의 H²에서, 5 % Pd/C 0.20 g 으로 0.5 시간 동안 수소화시켰다. 브롬의 환원적 제거를 피하기 위해, 반응의 진행이 주의깊게 후속되어야 한다. 셀라이트 패드로 여과 후, 용매를 제거했다. 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트=8/2) 로 표제 화합물을 무색 오일로서 0.191 g 생성시켰다 (GC 에 따라 순도 91 %).

원칙적으로, 또한 상기 중간체는 알킬화를 위해 프로필요오다이드를 사용하여 실시예 1, 단계 b] 에 기술된 바와 같이 제조 가능하다. 하지만, 수율이 현저히 낮다.

d] 8-브로모-5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀

(8-브로모-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-5-일)-메탄올 0.191 g (0.638 mmol) 을 무수 DMF 3 ml 에 용해시키고, 0 ℃ 에서 NaH 0.061 g (광유 중 약 50 %, 약 2 당량)으로 처리했다. 탈양성자화를 실온에서 0.2 시간 동안 진행시켰다. 혼합물을 0 ℃ 로 냉각하고, 메틸요오다이드 0.079 ml (2 당량) 으로 처리한 후, 실온에서 1 시간 동안 방치했다. 냉수로 가수분해하고, NH₄Cl 용액으로 산성화시키고, 디에틸에테르로 추출하고, 나트륨 술페이트 상에서 유기상을 건조시키고, 여과하고 용매를 증발시켜 조생성물을 수득하였고, 이를 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 96/4) 로 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 0.179 g 수득했다 (GC 에 따라 순도 93 %).

e] 5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-카르브알데히드

8-브로모-5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b] 옥세핀 0.179 g (0.571 mmol) 을 무수 THF 5 ml 에 용해시키고, -78 ℃ 로 냉각시켰다. n-부틸리튬 (1.5 M, 헥산) 0.447 ml 를 서서히 첨가하고, 상기 온도를 0.2 시간 동안 유지시켰다. 무수 DMF 0.141 ml (3.2 당량) 을 시린지를 통해 도입하고, 0.25 시간 동안 교반을 계속했다. 실온으로 가온하고, 분쇄 얼음/NH₄Cl 용액 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고, 유기상을 나트륨 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켜 조생성물 0.18 g 을 수득했고, 이를 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 9/1) 로 정제하여, 표제 화합물 0.125 g 을 무색 오일로서 수득했다 (GC 에 따라 순도 98 %).

f] (E)-4-[2-(5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일)비닐]-벤조산 에틸 에스테르

NaH 0.048 g (광유 중 50 %) 를 무수 DMF 3 ml 에 현탁시켰다. 4-(디에톡시포스포릴메틸)-벤조산 에틸 에스테르 0.27 g 을 0 ℃ 에서 첨가했다. H₂-형성이 중단될 때까지, 혼합물을 실온에서 교반했다. -10 ℃ 로 냉각 후, DMF 2 ml 에 용해된 5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-카르브알데히드 0.119 g (0.454 mmol) 을 첨가하고, -10 ℃ 에서 0.2 시간, 실온에서 1 시간 동안 반응 시켰다. 이어서, 혼합물을 분쇄 얼음/NH₄Cl 용액 상에 붓고, 디에틸에테르로 추출하고, 유기상을 물로 세척하고, 나트륨 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 증발 건조시켰다. 섬광 크로마토그래피 (실리카겔, 헥산/에틸아세테이트 9/1) 에 의한 잔류물의 정제로, 최종적으로, 자발적으로 고형화되는 순수한 무색 표제 화합물을 0.088 g 수득했다.

g] 4-[2-(5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일)-비닐]-벤조산

(E)-4-[2-(5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일)-비닐]-벤조산 에틸 에스테르 0.081 g (0.198 mmol) 을 THF/에탄올 (1/1) 1 ml 에 용해시키고, 3 N NaOH (5 당량) 0.33 ml 로 처리했다. 반응 플라스크를 어둠에 방치시키고, 실온에서 20 시간 동안 계속해서 교반시켰다. 이어서, 혼합물을 분쇄 얼음/묽은 HCl 상에 붓고, 에틸아세테이트로 2 회 추출하고, 유기상을 물로 세척하고, 나트륨 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발 건조시켰다. 헥산/에틸아세테이트로부터의 결정화로 표제 생성물 0.46 g 을 융점이 157-159 ℃ 인 백색 결정으로서 산출했다.

MS: (M)⁺380, (M-CH₂OCH₃)⁺335.

2.2. (E)-4-[2-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일)-비닐]-벤조산의 제조

단계 e] 에서 프로필 유사체 대신 8-브로모-5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b] 옥세핀을 사용하는 것을 제외하고는, 실시예 2.1. 과 유사하게 상기 화합물을 제조했다. 융점이 194-96 ℃ 인 무색 결정이 수득되었다.

CI-MS: (M-H)⁺351.

2.3. (E)-4-[2-(5-메틸-5-프로폭시메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일)-비닐]-벤조산의 제조

단계 e] 에서 8-브로모-5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b] 옥세핀 대신 8-브로모-5-메틸-5-프로폭시메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀을 사용하는 것을 제외하고는, 실시예 2.1. 과 유사하게 상기 화합물을 제조했다. 융점이 164-65 ℃ 인 무색 결정이 수득되었다.

MS: (M)⁺380, (M-CH₂OC₃H₇)⁺307.

2.4. (E)-4-[2-(4-메톡시메틸-4-메틸-크로만-6-일)-비닐]-벤조산의 제조

단계 e] 에서 8-브로모-5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b] 옥세핀 대신 6-브로모-4-메톡시메틸-4-메틸-크로만을 사용하는 것을 제외하고는, 실시예 2.1. 과 유사하게 제조됐고, 합성이 실시예 5 d] 에 기술된다. 융점이 209-210 ℃ 인 황색 결정이 수득되었다.

실시예 3

3.1. 4-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일에티닐)-벤조산의 제조

a] 8-브로모-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-5-카르브알데히드

(메톡시메틸)트리페닐포스포늄 클로라이드 16.68 g (1.6 당량) 을 무수 THF 75 ml 에 현탁시키고, -15 ℃ 내지 -5 ℃ 의 온도에서 시린지를 통해 1.6 M n-부틸리튬 29.5 ml (헥산, 1.55 당량) 을 첨가함으로써 탈양성자화시켰다. 생성된 적색 일라이드 용액을 -75 ℃ 로 냉각시키고, 무수 THF 15 ml 에 용해된 8-브로모-3,4-디히드로-2H-벤조[b]티에핀-5-온 7.82 g (30.4 mmol) 로 처리했다. 이어서, 혼합물을 -78 ℃ 에서 0.3 시간, 실온에서 1.25 시간 동안 방치시켰다. 분쇄 얼음상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고. 유기상을 물로 세척하고 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켜 조생성물을 산출했고, 이를 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 95/5)로 정제했고; 그로 인해, 8-브로모-5-메톡시메틸렌-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀 7.39 g 을 E/Z 혼합물로서 수득했고, 이를 하기와 같이 가수분해 했다:

에놀에테르 (25.8 mmol) 를 THF 37 ml 에 용해시킨 후, 35 % HClO₄37 ml 로 처리했다. 실온에서 16 시간 교반 후, 생성된 혼합물을 빙-냉수와 디에틸에테르 사이에 분배시키고, 유기층을 Na₂CO₃(pH 약 10) 및 물로 2 회 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 증발 건조시켰다. 섬광 크로마토그래피 (실리카겔, 헥산/에틸아세테이트 95/5) 에 의한 잔류물의 정제로, 최종적으로 표제 화합물을 무색 오일로서 6.33 g 수득했다 (GC 에 따라 순도 98 %).

MS: (M)⁺270,272, (M-CO)⁺242,244.

b] 8-브로모-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-5-카르브알데히드

8-브로모-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-5-카르브알데히드 1.00 g (3.69 mmol) 을 무수 THF/무수 tert-부탄올 (10/1) 8 ml 에 용해시켰다. 0 ℃ 에서, 칼륨 tert-부틸레이트 0.828 g (2 당량) 을 첨가하고, 0.25 시간 후 메틸요오다이드 0.575 ml (2.5 당량) 을 첨가했다. 실온에서 5 시간 동안 교반을 계속했다. 이어서 반응 혼합물을 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고, 유기상을 염수로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 제거했다. 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 96/4) 로 표제 화합물을 무색 오일로서 0.636 g 수득했다.

c] (8-브로모-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-5-일)-메탄올

8-브로모-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-5-카르브알데히드 636 mg (2.23 mmol) 을 무수 에탄올 15 ml 에 용해시키고, 0 ℃ 로 냉각했다. NaBH₄84.4 mg (1 몰 당량) 을 첨가하고, 반응을 실온에서 2 시간 진행시켰다. 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 추출하고, 유기상을 물로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 용매를 증발시켜, 표제 화합물을 백색 고체로서 628 mg 수득했고, 이는 다음 단계에서 추가의 정제 없이 사용됐다 (GC 에 따라 순도 93.5 %).

d] 8-브로모-5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀

(8-브로모-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-5-일)-메탄올 628 mg (2.19 mmol) 을 무수 DMF 12 ml 에 용해시키고, 0 ℃ 에서 NaH 210 mg (광유 중 약 50 %, 약 2 당량) 으로 처리했다. 탈양성자화를 0 ℃ 에서 1 시간 동안 진행시켰다. 이어서, 상응하는 나트륨 알콕시드의 생성 용액을, 메틸요오다이드 0.204 ml (1.5 당량) 으로 처리하고, 실온에서 2 시간 동안 방치하였다. 냉수로 가수분해하고, 디에틸에테르로 추출하고, 유기상을 물로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 용매를 증발시켜 조생성물을 수득했고, 이를 SiO₂(헥산/에틸 아세테이트 96/4) 로 여과 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 576 mg 수득했다 (GC 에 따라 순도 95 %).

MS: (M)⁺300,302, (M-CH₂OCH₃)⁺255,257.

e] 4-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일에티닐)-벤조산 메틸 에스테르

피페리딘 2.9 ml 에 용해된 8-브로모-5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀 478 mg (1.59 mmol) 에, CuI 4.8 mg (0.02 당량), Ph₃P 7.0 mg(0.02 당량), 및 (Ph₃P)₄Pd 24.1 mg (0.01 당량) 을 연속적으로 첨가했다. 80 ℃ 로 가열한 후, 피페리딘 2.8 ml 중 4-에티닐-벤조산 메틸 에스테르 508 mg (2 당량) 의 용액을 적가 깔대기를 통해 2 시간 내로 첨가하고, 상기 온도에서 추가로 3 시간 동안 방치시켰다. 냉각 후, 반응 혼합물을 분쇄 얼음/묽은 HCl 상에 붓고, 디에틸에테르로 추출하고, 유기상을 물로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 증발 건조시켰다. 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 95/5) 로 표제 화합물을 무색 오일로서 270 mg 수득했다

MS: (M)⁺380, (M-CH₂OCH₃)335.

f] 4-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일에티닐)-벤조산

4-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일에티닐)-벤조산 메틸 에스테르 316 mg (0.83 mmol) 을 THF/EtOH (1/1) 8 ml 에 용해시키고, 3N NaOH (5 당량) 1.38 ml 로 처리했다. 반응 플라스크를 어둠에 방치시키고, 실온에서 18 시간 동안 계속해서 교반시켰다. 이어서, 혼합물을 분쇄 얼음/HCl 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고, 유기상을 염수로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발 건조시켰다. 헥산/에틸아세테이트로부터 잔류물의 결정화로 표제화합물 282 mg 을 융점이 182-183 ℃ 인 백색 결정으로서산출했다.

3.2. 4-(5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일에티닐)-벤조산의 제조

단계 e] 에서 5-메톡시메틸-유도체 대신 8-브로모-5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀을 사용하는 것을 제외하고는, 실시예 3.1. 과 유사하게 상기 화합물을 제조했다. 융점이 154-155 ℃ 인 무색 결정을 수득했다.

MS: (M)⁺380, (M-CH₂OC₂H₅)⁺321.

실시예 4

4.1. (E)-4-[2-(5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일)비닐]-벤조산의 제조

a] 8-브로모-5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀

(8-브로모-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-5-일)-메탄올 ([실시예 3.1. c]) 917 mg (3.19 mmol) 을 무수 DMF 17 ml 에 용해시키고, 0 ℃ 에서 NaH (광유 중 약 50 %, 약 2 당량) 309 mg 으로 처리했다. 탈양성자화를 0 ℃ 에서 0.25 시간 동안 진행시켰다. 이어서, 상응하는 나트륨 알콕시드의 생성된 용액을, 에틸요오다이드 0.389 ml (1.5 당량) 으로 처리하고, 실온에서 1 시간 동안 방치하였다. 냉수로 가수분해하고, 디에틸에테르로 추출하고, 유기상을 물로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 용매를 증발시켜 조생성물을 수득했고, 이를 SiO₂(헥산/에틸 아세테이트 95/5) 로 여과 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 966 mg 수득했다 (GC 에 따라 순도 98 %).

b] 5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-카르브알데히드

8-브로모-5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀 431 mg (1.37 mmol) 을 무수 THF 3.5 ml 에 용해시키고, -78 ℃ 로 냉각시켰다. n-부틸리튬 (1.55 M, 헥산) 0.97 ml 를 서서히 첨가하고, 상기 온도를 0.3 시간 동안 유지시켰다. 무수 DMF 0.316 ml (3 당량) 을 시린지를 통해 도입하고, -78 ℃ 에서 0.1 시간 동안 교반을 계속했다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 이를 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 추출하고, 유기상을 물로 세척하고, 나트륨 술페이트 상에서 건조시켜, 여과 및 용매의 증발 후, 조생성물을 수득했고, 이를 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 95/5) 로 정제하여, 표제 화합물 0.339 g 을 무색 오일로서 수득했다 (GC 에 따라 순도 99 %).

c] (E)-4-[2-(5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일)-비닐]-벤조산 메틸 에스테르

NaH 85 mg (광유 중 50 %, 약 1.4 당량) 를, 0 ℃ 에서 무수 DMF 1.9 ml 중 4-(디에톡시포스포릴메틸)-벤조산 에틸 에스테르 534 mg (1.4 당량) 의 용액에 첨가했다. 혼합물을 0 ℃ 에서 0.5 시간, 실온에서 1.5 시간 동안 교반했다. 0 ℃ 로 냉각 후, DMF 1 ml 중에 용해된 5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5 -테트라히드로벤조[b]티에핀-8-카르브알데히드 336 mg (1.27 mmol) 을 첨가하고, 실온에서 2 시간 동안 반응시켰다. 이어서, 혼합물을 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고, 유기상을 물로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 증발 건조시켰다. 섬광 크로마토그래피 (실리카겔, 헥산/에틸아세테이트 95/5) 에 의한 잔류물의 정제로, 순수한 무색 표제 화합물 409 mg 을 수득했다.

d] (E)-4-[2-(5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일)-비닐]-벤조산

(E)-4-[2-(5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일)-비닐]-벤조산 메틸 에스테르 406 mg (0.99 mmol) 을 THF/에탄올 = 1/1, 4 ml 에 용해시키고, 3 N NaOH 1.32 ml (4 당량) 으로 처리했다. 반응 플라스크를 어둠에 방치시키고, 실온에서 18 시간 동안 계속해서 교반시켰다. 이어서, 혼합물을 분쇄얼음/묽은 HCl 상에 붓고, 에틸아세테이트로 2 회 추출하고, 유기상을 소량의 물로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 헥산/에틸아세테이트 (8/2) 로부터의 잔류물의 결정화로 표제 화합물 337 mg 을 융점이 186-187 ℃ 인 백색 결정으로서 산출했다.

MS: (M)⁺382, (M-CH₂OC₂H₅)⁺323.

4.2. (E)-4-[2-(5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일)비닐]-벤조산의 제조

단계 c] 에서 5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-카르브알데히드 대신 5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-카르브알데히드를 사용하는 것을 제외하고는, 실시예 4.1. 과 유사하게 상기 화합물을 제조하여, 융점이 169-170 °인 백색 결정이 수득되었다. 후자는 전체 반응의 연속을 옥사 유사체 대신 8-브로모-3,4-디히드로-2H-벤조[b]티에핀-5-온을 출발 물질로 하는 것을 제외하고는, 실시예 2.1., a] - d] 와 유사하게 제조되었다.

CI-MS: (M-H)⁺395.

실시예 5

5.1. 4-(4-메톡시메틸-4-메틸-크로만-6-일에티닐)-벤조산의 제조

a] 4-메틸-크로만-4-카르브알데히드

크로만-4-카르브알데히드 5.28 g (32.55 mmol) 을 무수 THF/무수 tert-부탄올 (5/1) 100 ml 에 용해시켰다. -10 ℃ 에서, 칼륨 tert-부틸레이트 7.31 g (2 당량) 을 첨가하고, 이어서 0.25 시간 후 메틸요오다이드 4.05 ml (2.0 당량) 을 첨가했다. 실온에서 밤새 교반을 계속했다. 이어서 반응 혼합물을 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고, 유기상을 염수로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 제거했다. 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 9/1) 로 표제 화합물을 무색 오일로서 4.29 g 수득했다 (GC 에 따라 순도 96.5 %).

MS: (M)⁺176, (M-HCO)⁺147.

b] (4-메틸-크로만-4-일)-메탄올

4-메틸-크로만-4-카르브알데히드 4.29 g (24.3 mmol) 을 무수 에탄올 160 ml 에 용해시키고, 0 ℃ 로 냉각했다. NaBH₄0.921 g (1 몰 당량) 을 수 부분으로 나누어 첨가하고, 반응을 실온에서 16 시간 진행시켰다. 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고, 유기상을 물로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시켜, 여과 및 용매의 증발 후 표제 화합물을, 다음 단계에 사용하기에 충분히 순수한 4.41 g 의 연황색 오일로서 4.41 g 수득했다 (GC:>97 %).

c] 4-메톡시메틸-4-메틸-크로만

(4-메틸-크로만-4-일)-메탄올 2.00 g (11.2 mmol) 을 무수 DMF 60 ml 에 용해시키고, 0 ℃ 에서 NaH (광유 중 약 50 %, 약 2 당량) 로 처리했다. 탈양성자화를 0 ℃ 에서 0.75 시간 동안 진행시켰다. 수소 발생이 중단될 때, 혼합물을 메틸요오다이드 1.05 ml (1.5 당량) 으로 처리한 후, 0 ℃ 에서 0.2 시간, 실온에서 0.5 시간 방치시킨다. 주의깊게 냉수로 가수분해하고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고, 물로 유기상을 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시켜, 여과 및 용매의 증발 후, 조생성물을 수득했고, 이를 SiO₂(헥산/에틸아세테이트 9/1)로 섬광 크로마토그래피 함으로써 정제하여, 표제 화합물을 무색 오일로서 2.01 g 수득했다 (GC 에 따라 순도 97 %).

MS: (M)⁺192, (M-CH₂OCH₃)⁺147.

d] 6-브로모-4-메톡시메틸-4-메틸-크로만

4-메톡시메틸-4-메틸-크로만 2.00 g (10.4 mmol) 을 무수 CH₂Cl₂25 ml 에 용해시키고, 촉매량의 Fe-분말 및 Na₂CO₃로 처리했다. 0 ℃ 로 냉각 후, 브롬 1.21mg (1.1 당량) 을 첨가하고, 혼합물을 상기 온도에서 0.6 시간동안 방치시켰다. 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 추출하고, 물로 유기상을 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 용매를 증발시키고, 이어서 SiO₂(헥산/에틸아세테이트 95/5)로 섬광 크로마토그래피 함으로써 정제하여, 순수한 표제 화합물을 무색 오일로서 1.676 g 산출했다 (GC > 95 %).

MS: (M)⁺270,272, (M-CH₂OCH₃)⁺225,227.

e] (4-메톡시메틸-4-메틸-크로만-6-에티닐)-트리메틸실란

피페리딘 11.5 ml 중에 용해된 6-브로모-4-메톡시메틸-4-메틸-크로만 1.67 g (6.16 mmol) 에, CuI 19 mg (0.02 당량), 트리페닐포스핀 (Ph₃P) 27.5 mg (0.02 당량), 및 (Ph₃P)₄Pd 93 mg (0.01 당량) 을 연속적으로 첨가했다. 80 ℃ 로 가열한 후, 피페리딘 19 ml 중 트리메틸실릴-아세틸렌 4.27 ml (5 당량) 용액을 적가 깔대기를 통해 2.5 시간 내에 첨가했다. 냉각 후, 반응 혼합물을 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 추출하고, 유기상을 물로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 잔류물의 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 95/5) 로 표제 화합물을, 다음 단계에 사용하기에 충분히 순수한 무색 오일로서 1.44 g 수득했다.

f] 6-에티닐-4-메톡시메틸-4-메틸-크로만

촉매량의 나트륨을 무수 메탄올 22 ml 에 용해시켰다. 이어서, 0 ℃ 에서생성된 나트륨 메틸레이트의 용액에, 상기 제조된 소량의 메탄올 중에 용해된 (4-메톡시메틸-4-메틸-크로만-6-일에티닐)-트리메틸실란 (1.44 g, 4.99 mmol) 을 한 부분으로 첨가하고, 실온에서 1 시간 동안 방치했다. 반응 혼합물을 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고, 유기상을 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 용매를 제거했다. 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 96/4) 로 표제 화합물을 연황색 오일로서 0.704 g 산출했다 (GC 에 따라 순도 > 94 %).

MS: (M)⁺216, (M-CH₂OCH₃)⁺171.

g] 4-(4-메톡시메틸-4-메틸-크로만-6-일에티닐)-벤조산 메틸 에스테르

무수 DMF 11 ml 에, 메틸 4-요오도-벤조에이트 1.061 g (1.25 당량), 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(Ⅱ) 클로라이드 114 mg (0.05 당량), CuI 74.1 mg (0.12 당량), 트리에틸아민 1.13 ml (2.5 당량) 을 연속적으로 용해시켰다. 상기 제조된 무수 DMF 2.7 ml 중에 용해된 6-에티닐-4-메톡시메틸-4-메틸-크로만 701 mg (3.24 mmol) 을 적가 깔대기를 통해 1 시간 내에 첨가했다. 0.25 시간 후, 반응 혼합물을 분쇄 얼음/HCl 상에 부음으로써 반응을 퀀칭시켰다. 디에틸에테르로 추출하고, 물로 유기상을 2 회 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 용매를 증발시켜, 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 92/8) 후, 표제 화합물을 황색 오일로서 630 mg 수득했다.

h] 4-(4-메톡시메틸-4-메틸-크로만-6-일에티닐)-벤조산

4-(4-메톡시메틸-4-메틸-크로만-6-일에티닐)-벤조산 메틸 에스테르 625 mg (1.78 mmol) 을 THF/에탄올 (1/1) 9 ml 에 용해시키고, 3N NaOH 2.34 ml (4 당량) 으로 처리했다. 반응 플라스크를 어둠에 방치시키고, 실온에서 18 시간 동안 계속해서 교반시켰다. 이어서, 혼합물을 분쇄 얼음/HCl 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고; 유기상을 물로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. 에틸아세테이트로부터의 결정화로 표제 생성물 545 mg 을 융점이 202-203 ℃ 인 백색 결정으로서 산출했다.

실시예 6

6.1. (E)-4-(4-히드록시메틸-4-메틸-크로만-6-일에티닐)-벤조산의 제조

a] 아세트산 4-메틸-크로만-4-일메틸 에스테르

(4-메틸-크로만-4-일)-메탄올 1.00 g (5.61 mmol) 을 무수 CH₂Cl₂6 ml 에 용해시키고, 0 ℃ 에서 트리에틸아민 1.17 ml (1.5 당량) 및 아세틸클로라이드 0.518 ml (1.3 당량) 으로 처리한 후, 실온에서 0.5 시간동안 방치시켰다. 반응 혼합물을 분쇄 얼음 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고, 물로 유기상을 세척하고, 나트륨 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고 용매를 제거했다. 섬광 크로마토그래피 (SiO₂, 헥산/에틸아세테이트 9/1)로 순수한 표제 화합물을 무색 오일로서 1.082 g 수득했다.

MS: (M)⁺220, (M-CH₂OAc)⁺147.

b] 아세트산 6-브로모-4-메틸-크로만-4-일메틸 에스테르

상기 제조된 아세트산 4-메틸-크로만-4-일메틸 에스테르를 브롬화시켜 실시예 5d] 와 유사하게 제조했다.

MS: (M)⁺298,300 (M-CH₂OAc)⁺225,227.

.

c] 아세트산 4-메틸-6-트리메틸실라닐에티닐-크로만-4-일메틸 에스테르

아세트산 6-브로모-4-메틸-크로만-4-일메틸 에스테르로부터 실시예 5e] 와 유사하게 제조했다.

MS: (M)⁺316 (M-CH₂OAc)⁺243.

d] 아세트산 6-에티닐-4-메틸-크로만-4-일메틸 에스테르

아세트산 4-메틸-6-트리메틸실라닐에티닐-크로만-4-일메틸 에스테르로부터 실시예 5f] 와 유사하게 제조했다.

MS: (M)⁺244 (M-CH₂OAc)⁺171.

e] 4-(4-아세톡시메틸-4-메틸-크로만-6-일에티닐)-벤조산 메틸 에스테르

아세트산 6-에티닐-4-메틸-크로만-4-일메틸 에스테르로부터 실시예 5g] 와 유사하게 제조했다.

MS: (M)⁺378, (M-CH₃0)⁺347,(M-CH₂OAc)⁺305.

f] 4-(4-히드록시메틸-4-메틸-크로만-6-일에티닐)-벤조산

4-(4-아세톡시메틸-4-메틸-크로만-6-일에티닐)-벤조산 메틸 에스테르 498 mg (1.32 mmol) 을 THF/에탄올 (1/1) 7 ml 에 용해시키고, 3N NaOH 1.75 ml (4 당량) 로 처리했다. 반응 플라스크를 어둠에 방치시키고, 실온에서 4 시간 동안 계속해서 교반시켰다. 이어서, 혼합물을 분쇄 얼음/HCl 상에 붓고, 디에틸에테르로 2 회 추출하고, 유기상을 염수로 세척하고, 마그네슘 술페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켰다. -30 ℃ 에서 에틸아세테이트로부터의 결정화로 표제 화합물 334 mg 을 융점이 234-235 ℃ 인 오프-백색 결정으로서 산출했다.

MS: (M)⁺322, (M-CH₂OH)⁺291.

실시예 7

엘라스타제 유도 폐기종에서 폐포의 회복에 대한 RAR 선택성 레티노이드의 효과.

엘라스타제 유도 폐기종의 래트 모델에서의 폐포 회복에 대한 RAR 선택성 작동약의 효과를 평가한다 (Massaro 등, Nature (Medicine, 1997, 3, 675)). 동물들을 대략 8 개의 치료군으로 분할한다. 폐 염증 및 폐포 손상을 췌장 엘라스타제 (돼지에서 유래, Calbiochem) 의 체질량 당 2 U/g 의 단회 적하로써 수컷 Sprague Dawley 래트에 유발시켰다. 상해 3 주 후, 모두 트랜스인 레틴산 또는 RAR 작동약을 디메틸술폭시드 (20 mg/ml) 에 용해시키고, -20 ℃ 로 저장했다. 최종 농도 2 mg/ml 로 PBS 내에 희석시킴으로써 매일 신선한 작용 원액을 제조했다. 모두 트랜스인 레틴산 (0.5 mg/Kg ip) 으로 처리한 동물을, 상해 21 일 후 매일 1 회 복강내 주사로써 투약했다. 대조군을 엘라스타제로 처리하고, 21 일 후 베히클 (DMSO/PBS) 로 14 일 동안 처리했다. 깊은 마취하에 최종 투약 24 시간 후, 출혈로써 동물을 희생시켰다.

일정 속도 (1 ml/g 체질량/분) 로 기관지 적하에 의해 10 % 중성 완충 포르말린으로 폐를 부풀게 하였다. 폐를 절개하고, 처리 전 24 시간 동안 고정하여 함침시켰다. 표준 방법을 사용하여, 5 ㎛ 파라핀 절편을 제조하였다. 절편을 헤마톡실린-에오신 (H&E) 으로 염색하였다. 전산화 형태계측학적 분석을 수행하여, 평균 폐포 크기 및 폐포 수를 측정하였다 (표 1).

투약량 [mg/kg]		% 회복 영역	화합물
0.5	i.p.	58	A
0.1	p.o.	45.2	A
0.3	p.o.	51.3	A

i.p. 복강내 투여

p.o. 경구 투여

본 발명은 명확성과 이해를 위해, 설명 및 실시예에 의해 더욱 상세히 기술되었다. 첨부된 청구항의 범위 내에서 변화 및 변형이 수행될 수 있음은 당업자에게 명백할 것이다. 따라서, 상기 기술은 설명을 위한 것이며, 제한하기 위한 것이 아님이 이해되어야 한다. 따라서, 본 발명의 범위는 청구항의 권리와 동등한 전체 범위와 함께, 하기 첨부된 청구항을 참조로 결정되어야 한다.

본 출원에 인용된 특허, 특허 출원 및 공보는 각각의 특허, 특허 출원 또는 공보가 개별적으로 명시한 것과 동일한 정도의 전체 목적을 위해, 전체 참조로 본원에 포함된다.

Claims

하기 화학식 Ⅰ 의 화합물, 및 화학식 Ⅰ 의 카르복실산의 약제학적 활성염:

[화학식 Ⅰ]

[식 중,

R¹은 수소, 저급 알킬이고;

R²는 저급 알킬이고;

R³는 저급 알킬 또는 H 이고;

X 는 산소 또는 황이고;

n 은 1 또는 2 이고;

여기에서 점선 결합은 임의적임].
제 1 항에 있어서, 화학식 ⅠA 의 화합물, 및 화학식 ⅠA 의 카르복실산의 약제학적 활성염:

[화학식 ⅠA]

[식 중, X, R¹, R², R³및 n 은 제 1 항에 정의된 바와 같음].
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, X 가 산소이고 n 이 2 인 화합물.
제 3 항에 있어서, 하기의 화합물:

4-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로-1-벤조[b]옥세핀-8-일-에티닐)-벤조산

4-(5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일에티닐)-벤조산

4-(5-메틸-5-프로폭시메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일에티닐)-벤조산

(E)-4-[2-(5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일)-비닐]-벤조산

(E)-4-[2-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일)-비닐]-벤조산

(E)-4-[2-(5-메틸-5-프로폭시메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]옥세핀-8-일)-비닐]-벤조산.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, X 가 황이고 n 이 2 인 화합물.
제 5 항에 있어서, 하기의 화합물:

4-(5-메톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일에티닐)-벤조산

4-(5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일에티닐)-벤조산

(E)-4-[2-(5-에톡시메틸-5-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일)-비닐]-벤조산

(E)-4-[2-(5-메톡시메틸-5-프로필-2,3,4,5-테트라히드로벤조[b]티에핀-8-일)-비닐]-벤조산.
제 1 항에 있어서, 하기 화학식 ⅠB 의 화합물, 및 화학식 ⅠB 의 카르복실산의 약제학적 활성염:

[화학식 ⅠB]

[식 중, X, R¹, R², R³및 n 은 제 1 항에 정의된 바와 같음].
제 1 항 또는 제 7 항에 있어서, X 가 산소이고, n 이 1 인 화합물.
제 8 항에 있어서, 하기의 화합물:

4-(4-메톡시메틸-4-메틸-크로만-6-일에티닐)-벤조산

(E)-4-[2-(4-메톡시메틸-4-메틸-크로만-6-일)-비닐]-벤조산.
제 1 항, 제 2 항 또는 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, R¹이 수소인 화학식 Ⅰ 의 화합물의 약제학적 허용 가능염이, 알칼리 또는 암모늄 또는 치환된 암모늄염 등의 약제학적 허용가능 염기로부터 형성되는 염인 화합물.
제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서, 폐기종 및 관련 폐질환의 치료를 위한 약제학적 활성 성분으로서 사용되는 화합물.
하나 이상의 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항의 화합물 및 약제학적 허용가능 부형제를 함유하는 약제.
제 11 항에 있어서, 폐기종 및 관련 폐질환의 치료를 위한 약제.
폐기종 및 관련 폐질환의 치료 또는 상기 질환의 치료에 유용한 약제의 제조를 위한, 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항의 화합물의 용도.