KR20020029476A - 한 단계에 의해 유전자를 추출하기 위한 라이시스버퍼시약 - Google Patents

Abstract

본 발명은 한 단계에 의해 유전자를 추출하기 위한 라이시스 버퍼시약에 관한 것이다. 보다 상세하게는 라이시스 버퍼 조성에 따라 간단하게 한 단계에 의해 DNA 유전자를 추출할 수 있는 기술에 관한 것이다.

종래의 기술은 동물의 조직 또는 세포로부터 여러 단계를 거쳐 DNA 유전자를 추출한 후 비로소 PCR법에 의해 원하는 유전자를 검출할 수 있었기 때문에 상당히 많은 시간과 경비가 소비되었다. 또한, 한번에 한 샘플만을 대상으로 실험하여야 하는 단점이 있었다.

이에, 본 발명은 소정의 라이시스 버퍼 시약을 이용하여 한번의 단계를 거쳐 동물의 조직 또는 세포의 일부로부터 유전자를 추출할 수 있도록 함을 특징으로 하는 한 단계에 의해 유전자를 추출하기 위한 라이시스 버퍼시약이 제시된다.

따라서, 본 발명에 따른 라이시스 버퍼 시약을 이용함으로써 라이시스 버퍼의 작용도 원활하게 이루어지도록 함은 물론 실험을 함에 있어서 한 단계에 의해 간단하게 추출된 DNA 유전자를 이용하여 PCR에 의해 직접 이용하는 것이 가능하게 되었다.

또한, 시간을 단축할 수 있을 뿐만 아니라 실험 방법이 좀 더 간단하게 됨으로서 대량으로 실험을 할 수 있는 길이 열리게 되었다.

Description

한 단계에 의해 유전자를 추출하기 위한 라이시스 버퍼시약{LYSIS BUFFER REAGENT FOR GENE EXTRACTION BY ONE STEP}

본 발명은 한 단계에 의해 유전자를 추출하기 위한 라이시스 버퍼시약에 관한 것이다. 보다 상세하게는 라이시스 버퍼 조성에 따라 한 단계에 의해 DNA 유전자를 추출할 수 있는 라이시스 버퍼시약에 관한 것이다.

생명공학에 있어서 유전자 조작 기술은 기본 중의 기본이라 할 수 있다. 그 중에서도 DNA를 추출하는 방법은 가장 기본이 되는 과정이다.

지금까지는 라이시스 버퍼(Lysis buffer)의 조성에 의한 피.씨.알(Polymerase Chain Reaction 이하; PCR)의 장애에 의해 여러 단계를 거쳐서 추출된 DNA만이 PCR을 하는데 있어서 그리 큰 문제없이 원하는 유전자가 증폭이 되었다.

다음은 종래 기술로써 여러 단계에 의해 DNA를 추출하고 이를 PCR법에 의해 유전자를 증폭하는 일련의 과정을 살펴보기로 한다.

<제 1과정>

; 동물의 조직 또는 세포의 일부를 떼어낸다.

<제 2과정>

; 라이시스 버퍼를 이용하여 동물에서 떼어낸 조직 혹은 세포의 일부를 잘게 부수어 DNA를 비롯한 RNA, 단백질 등의 유전자가 버퍼 용액에 녹여 나오도록 한다.

<제 3과정>

; 버퍼 용액에 녹여나온 각종 유전자를 페놀-클로로포름(Phenol-Chloroform)용액으로 깨끗이 세정한다.

<제 4과정>

; 깨끗이 세정된 DNA 등의 유전자를 100％의 알코올 혹은 100％의 이소 프로판올(iso-propanol)용액을 이용하여 DNA 유전자만을 선별적으로 추출한다.

<제 5과정>

; 추출된 DAN 유전자를 최종적으로 PCR법에 의해 원하는 유전자를 증폭함으로서 일련의 실험과정을 종료하게 된다.

상기에서와 같이, 기존의 방법은 동물의 조직 또는 세포로부터 여러 단계를 거쳐 DNA 유전자를 추출한 후 비로소 PCR법에 의해 원하는 유전자를 검출할 수 있었기 때문에 상당히 많은 시간과 경비가 소비되었다. 또한, 한번에 한 샘플만을 대상으로 실험하여야 하는 단점이 있었다.

즉, 기존의 방법에서 사용하던 라이시스 버퍼를 사용하여 추출된 DNA 유전자를 곧바로 PCR법을 실행 할 경우 라이시스 버퍼에 들어있던 시약이 PCR을 할 경우에 사용되는 시약의 작용을 억제함으로서 PCR이 원활하게 이루어지지 않아 여러 단계를 거쳐서야 비로소 PCR에 의해 원하는 유전자를 증폭할 수 있었다.

이에, 본 발명은 상기한 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 본 발명의 목적은 기존의 라이시스 버퍼(Lysis buffer) 시약을 획기적으로 개선함으로서 이를 이용하여 한번의 단계로 DNA 유전자를 용이하게 추출할 수 있도록 하는 한 단계에 의해 유전자를 추출하기 위한 라이시스 버퍼시약을 제공하는데 있다.

상기한 본 발명의 목적을 달성하기 위한 기술적 사상으로써 본 발명은

소정의 라이시스 버퍼 시약을 이용하여 동물의 조직 또는 세포의 일부로부터 한번의 단계를 거쳐 유전자를 추출할 수 있도록 함을 특징으로 하는 한 단계에 의해 유전자를 추출하기 위한 라이시스 버퍼시약이 제시된다.

이하, 본 발명에 따른 한 단계에 의해 유전자를 추출하기 위한 라이시스 버퍼시약에 대하여 좀 더 상세히 설명하기로 한다.

먼저, 라이시스 버퍼 시약에 동물의 조직 또는 세포의 일부를 넣고 잘게 부순 다음, 라이시스 버퍼 시약으로부터 녹아 나오는 RNA, DNA 등의 유전자를 추출한다.

이 때, 상기 라이시스 버퍼 시약은 25 mM Tris-HCl pH 8.0, 10 mM EDTA, 1% Tween 20, 0.4 % Nonidet P-40 인 범위에서 실시한다.

그 후, PCR법에 의해 원하는 DNA 유전자만을 증폭함으로서 본 발명에 따른 일련의 실험 과정을 마치게 된다.

이상에서와 같이 본 발명에 따르면, 종래의 라이시스 버퍼 조성을 획기적으로 개선함으로서 동물의 조직 또는 세포로부터 한 단계에 의해 간단하게 DNA 유전자를 추출함으로서 곧바로 PCR에 의해 원하는 유전자를 증폭할 수 있게 된다.

즉, 기존의 방법에서 사용하던 라이시스 버퍼는 PCR을 이용하는데 있어서 PCR 버퍼에 영향을 주어 PCR에 의해 원하는 유전자를 증폭하는 것이 복잡하고 어려웠지만, 본 발명에 따른 라이시스 버퍼시약을 이용함으로서 DNA 유전자를 추출한 후 PCR에 의해 아무런 문제없이 간단한 실험 방법에 따라 PCR에 의해 원하는 유전자를 증폭할 수 있다.

이상에서와 같이 본 발명에 의한 한 단계에 의해 유전자를 추출하기 위한 라이시스 버퍼시약에 따르면 다음과 같은 효과가 있다.

첫째, 기존의 방법에서 사용하던 라이시스 버퍼(Lysis buffer)를 사용하여 추출된 DNA를 곧바로 PCR을 실행 할 경우 라이시스 버퍼에 들어있던 시약이 PCR을 할 경우에 사용되는 시약의 작용을 억제함으로서 PCR이 원활하게 이루어지지 않아 여러 단계를 거쳐서야 비로소 PCR에 의해 원하는 유전자를 증폭할 수 있었다.

그러나, 본 발명에서와 같이 라이시스 버퍼를 조성함으로써 라이시스 버퍼의 작용도 원활하게 이루어지도록 함은 물론 실험을 함에 있어서 한 단계에 의해 간단하게 DNA 유전자를 추출할 수 있게 되었다.

둘째, 기존의 방법으로 DNA 유전자를 추출하고 PCR을 실행 할 경우 시간이 많이 걸리는 단점과 실험 단계가 복잡하기 때문에 동시에 실험을 할 수 있는 범위가 상당히 제한되었다.

그러나, 본 발명에서와 같이 라이시스 버퍼를 조성함으로써 시간을 단축할 수 있을 뿐만 아니라 실험 방법이 좀 더 간단하게 됨으로서 대량으로 실험을 할 수 있는 길이 열리게 되었다.

Claims (2)

1. 소정의 라이시스 버퍼 시약을 이용하여 한번의 단계를 거쳐 동물의 조직 또는 세포의 일부로부터 유전자를 추출하는 것을 특징으로 하는 한 단계에 의해 유전자를 추출하기 위한 라이시스 버퍼시약.
2. 청구항 1에 있어서, 상기 라이시스 버퍼 시약은 25 mM Tris-HCl pH 8.0, 10 mM EDTA, 1% Tween 20, 0.4 % Nonidet P-40 인 범위에서 실시하는 것을 특징으로 하는 한 단계에 의해 유전자를 추출하기 위한 라이시스 버퍼시약.