본 발명에 따른 고밀도 길항 미생물 기재의 제조방법은
(1) 쌀겨를 주성분으로 하는 유기질 배지에 스트렙토마이시스(Streptomyces)속에 속하는 방선균, 세균 및 사상균을 함유하는 효모를 주성분으로 하는 토양 미생물 혼합체를 접종하여 원균을 계대배양하는 단계; 및,
(2) 상기 원균을 퇴적토가 함유된 화산 암광물 파쇄토, 배합 영양물 및 물을 배합한 배양기에 접종하여 일정 시간 배양하며, 이때 배양물은 온도 상승에 따라 적절히 교반 통기시키는 단계를 포함한다.
이때, 상기 (1) 원균의 배양은, 온도 25 내지 35℃, 수분함유량 25 내지 30%의 조건하에 1일당 복수회 교반하여 4 내지 5일간 유기질 배양시킴으로써 이루어질 수 있다.
또한, 상기 (2) 원균을 접종시킬 배양기는, 퇴적토가 함유된 화산 암광물 파쇄토 100중량부에 대해 전분 등의 배합 영양물 10 내지 20중량부를 가하고, 이를 다시 수분함유량 30 내지 40% 정도로 조절하면서 혼합하는 것에 의해 만들어질 수 있다.
상기 방법에 의해 생성된 고밀도 길항 미생물 기재는 차후에 과립화하는 것이 바람직하다.
한편, 본 발명의 방법에 따라 제조된 고밀도 길항 미생물 기재의 최종 수분 함유율은 4 내지 5%로 조정되는 것이 바람직하며, 이를 위해 상기 과립화 단계와 동시에 순차적으로 수분을 증산(蒸散)시키고, 강제 건조시킴으로써 최종 수분 함유율을 조절할 수 있다.
상기 각 단계들의 작용을 상술하면 다음과 같다.
상기 (1) 및 (2) 단계는, 토양으로부터 채취하고 또한 선별 배양하여 얻은 원균을 본원 발명의 원균으로서 사용하는 것으로서, 즉 상기 선별 배양된 원균을 유기질 배양에 일차 배양하고, 퇴적토가 함유된 화산 암광물 파쇄토, 전분 등의 배합 영양물 및 물을 포함한 배양기에 2차 배양하는 단계이다. 배양제조과정에서 기재에 흡착된 길항 미생물의 밀도는 1011내지 1012세포/g이며, B/F 치(방선균수 + 세균수 ÷사상균수)는 103내지 104레벨이 확보됨과 함께, 길항성이 높은 대사생산물의 흡착유지도 가능하며, 따라서 본 발명에 따라 제조되는 고밀도 길항 미생물기재에 의하면 문우병(紋羽病), 위조병(萎凋病)으로 대표되는 곰팡이에 기인한 작물의 병해 등을 신속히 방제하는 것이 가능하다.
이하, 상술한 본 발명에 관련된 고밀도 길항 미생물 기재의 제조방법에 바람직한 실시예를 첨부한 도면과 함께 상세히 설명한다.
실시예
1. 원균의 계대배양
쌀겨를 주성분으로 하는 유기질 배지에 스트렙토마이시스(Streptomyces)속에 속하는 방선균, 세균 및 사상균을 함유하는 효모를 주성분으로 하는 토양 미생물 혼합체를 접종하여 원균을 계대배양하였다.
상기 계대배양한 원균(토양 미생물 혼합체)의 균 속(屬) 및 균의 수는, 상기 원균을 알부민 냉천 배지 및 로즈벤칼 냉천 배지에서 배양한 후 각각 측정하였다. 현미경 관찰 결과 밝혀진 원균의 주요한 균명 및 상기 원균의 수를 희석 평판법으로 계수한 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
원균의 균속성 및 균수 (Cells/g)
균속성 |
균수 레벨 |
배지 |
배양 |
사상균 : F |
107∼108 |
로즈벤갈 |
3일 25℃ |
효모 : Y |
108∼109 |
방선균 : A |
108∼109 |
알부민 |
6일 28℃ |
세균 : B |
108∼109 |
상기 측정 결과, 사상균 약 107내지 108개, 효모 약 108내지 109개, 방선균 약 108내지 109개, 세균 약 108내지 109개가 각각 존재함을 알 수 있었다.
한편, 하기 표 2는 본 발명에서 사용된 원균을 구성하는 주요 균명을 나열한 것이다.
속성별 주요한 균명
균속성 |
균의 명칭 |
사상균 : F |
Aspergillus-Versicolor |
효모 : Y |
Saccharomyces-Cervisiae |
방선균 : A |
Streptomyces-Griseus |
세균 : B |
Corynebacterium-Ammonigenum |
이중 어떤 것도 우월한 배양 작용을 발휘하는 것이 가능하다.
2. 원균의 2차 배양
다음으로, 상기 계대배양한 원균을 퇴적토가 함유된 화산 암광물 파쇄토, 배합 영양물 및 물을 배합한 배양기에 접종하여 일정 시간 배양하였다.
원균을 2차 배양하는 상기 배양기(배지)로서는 퇴적토가 함유된 화산 암광물 파쇄토, 배합 영양질 및 물로 이루어진 배양기를 사용한다. 본 실시예에서 이용된 퇴적토를 함유한 화산 암광물 파쇄토는, 나가노현 한다분지 근처에서 얻은 것으로서, 사암, 점판암 등의 원력암(円礫岩) 또는 안산암력(安山岩礫)을 포함하고 있이다. 재단법인 일본 비료 검정협회에 의한 화산 암광물 파쇄토의 분석 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
성 분 |
함 유 량 |
P2O5 |
312.2 mg |
N |
15.4 mg |
SiO2 |
55.80 % |
Al2O3 |
20.19 % |
CaO |
4.13 % |
MgO |
1.81 % |
K2O |
1.40 % |
H2O |
1.84 % |
강열감량 |
2.75 % |
상기 성분과 동질의 것이 있으면 기타 화산 암광물 파쇄토의 본 발명으로의 사용이 가능한 것은 물론이며, 상기 화산암 파쇄토에는 당연히 자연 상태의 방선균, 세균 등의 미생물이 포함되어 있다.
본 실시예에서는, 화산 암광물 파쇄토 100kg, 카니가라분 2kg, 쌀겨 5kg 및 모로콘분 5kg을 혼합하고, 수분 함유량 25%가 되도록 물을 첨가한 상기 표 3의 조성을 갖는 배양기에, 앞선 단계에서 배양하여 둔 스트렙토마이시스 속에 속한 방선균을 포함한, 효모를 주성분으로 하는 토양 미생물을 접종하고, 교반하여 28 내지 30℃에서 2차 배양하였다. 한편, 기동(機動)온도 30℃에서 달할 때까지는 히터를 이용하여 발효를 촉진시켰다. 분립 개체 배양에 있어서는 배양 과정에서 배양 상황의 측정이 곤란하기 때문에 경과 시간 및 배양기의 온도 변화로부터 증식곡선을 산출해내었다.
유도기로부터 대수기(증식기)에 들어가면 배양기의 온도가 급격히 상승해가나, 세포분열 또는 포자형성 또는 대사활성이 일어나는 정상기를 경과하여 사멸기로 이르는 직전의 시기에 교반 통기하여 발열 과승을 방지하고, 동시에 산소 보급및 가스 제거를 수행하는 동시에 제조 루트 총체의 균일화를 계산하였다.
교반할 때에는 채치는 작업도 겸할 수 있다.
이와 같은 배양기를 사용함으로써 발효가 촉진된다. 배양 종료후, 속(屬)성별 균수를 계수하기 위해 앞에서 설명한 알부민 냉천 배지에서 배양하였다. 계수 방법으로 희석 평판법을 사용하였으며, 그 결과는 하기 표 4와 같다.
원균의 균속성 및 균수 (세포(Cells)/g)
균속성 |
균수 레벨 |
배지 |
배양 |
사상균 : F |
108∼109 |
로즈벤갈 |
3일 25℃ |
효모 : Y |
107∼107 |
방선균 : A |
1012∼1013 |
알부민 |
6일 28℃ |
세균 : B |
1013∼1014 |
B / F 값 |
103∼104 |
|
측정 결과, 방선균 및 세균이 사상균 및 효모에 비교하여 현저히 증식되고 있는 것으로 나타났다.
상기 조작을 1일에 2 내지 3회 시행하되, 시간 및 온도의 추이 곡선을 감시하여 55℃를 피크점으로 하도록 조절한다.
상기와 같이 제조된 배양물은 이후 과립화시키는 것이 바람직하며, 이를 통해 증식된 배양물의 깊은 곳에까지 통기를 계획하는 것이 가능하고, 균의 밀도도 증가시킬 수 있다. 한편, 상기 과정을 통하여 증식세포 또는 포자를 거두어들여 가는 것이 가능하다.
3. 배양물의 건조
상기 배양물을 앞서 상술한 조작으로 3 내지 4일간 순차적으로 수분을 증산시키고, 다시 강제 조작에 의해 최종 수분 함유율을 4 내지 5%로 조정한 후 기밀성(機密性)이 높은 포대에 넣고 봉한다. 이를 통해 미생물을 휴면 상태로 하여 상온 보관이 가능하게 된다. 따라서 안정한 상태에서 계속 제조가 가능하고, 나아가 유통 보존적인 측면에서도 장기간 동안 변질 또는 열화되지 않은 상태로 공급하는 것이 가능하다.
4. 균주의 분리 및 동정
대표적 균주의 콜로니를 순수하게 분리하여 동정을 시험하기 위하여, 슬라이드 배양을 수행하고 현미경하에서 휴대관찰을 수행하여 속의 판정을 하였다. 그 결과를 하기 표 5 내지 8에 나타내었다.
(곰팡이)
콜로니의 성질 |
균 주 |
크 기(mm) |
형 상 |
균사의 형태 |
색 |
현미경관찰에 의한 속의 판정 |
1 |
30 X 30 |
원 형 |
선 상 |
백 색 |
Mucor |
2 |
11 X 11 |
〃 |
편평상 |
진한녹색 |
Aspergillus |
3 |
8 X 8 |
〃 |
선 상 |
〃 |
Mucor |
4 |
11 X 11 |
〃 |
편평상 |
〃 |
Aspergillus |
5 |
20 X 20 |
〃 |
선 상 |
〃 |
〃 |
6 |
15 X 15 |
〃 |
선 상 |
〃 |
〃 |
7 |
10 X 10 |
〃 |
편평상 |
〃 |
〃 |
8 |
12 X 12 |
〃 |
편평상 |
〃 |
〃 |
9 |
10 X 10 |
〃 |
편평상 |
〃 |
〃 |
10 |
5 X 5 |
〃 |
편평상 |
황록색 |
〃 |
(효모)
콜로니의 특성 |
균주 |
크기(mm) |
형상 |
색 |
융기 |
주연(周緣) |
기타 |
현미경관찰에의한 속의 판정 |
1 |
4×4 |
원형 |
백색 |
볼록상 |
Erose |
표면 상 |
Saccharomyces |
2 |
3×3 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
3 |
3×3 |
별모양 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
4 |
4×4 |
원형 |
〃 |
〃 |
〃 |
|
〃 |
5 |
2.5×2.5 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
표면 상 |
〃 |
6 |
2×2 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
7 |
2×2 |
〃 |
박백(薄白) |
〃 |
전연(全緣) |
|
〃 |
8 |
1.5×1.5 |
〃 |
백색 |
〃 |
〃 |
|
〃 |
9 |
3.5×3.5 |
별모양 |
〃 |
〃 |
Erose |
표면 상 |
〃 |
10 |
3.5×3.5 |
원형 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
(방선균)
콜로니의 성질 |
균 주 |
크 기(mm) |
형 상 |
색 |
융기 |
주연 |
현미경관찰에 의한 속의 판정 |
1 |
9 X 9 |
원 형 |
녹회색 |
편평 |
실모양 |
Streptomyces |
2 |
9 X 9 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
3 |
9 X 9 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
4 |
5 X 5 |
〃 |
암황색 |
〃 |
〃 |
〃 |
5 |
9 X 9 |
〃 |
녹회색 |
〃 |
〃 |
〃 |
6 |
8 X 8 |
〃 |
회백색 |
〃 |
〃 |
〃 |
7 |
9 X 9 |
〃 |
녹회색 |
〃 |
〃 |
〃 |
8 |
8 X 8 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
9 |
8 X 8 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
〃 |
10 |
7 X 7 |
〃 |
황백색 |
〃 |
〃 |
〃 |
(세균)
콜로니의 성질 |
세포의 성질 |
균주 |
크기(mm) |
형상 |
색 |
주연 |
포자 |
그램염색 |
형태 |
운동성 |
카타라아제 |
오긴다아제 |
O.F테스트 |
판정 |
1 |
1.0×1.0 |
g원형 |
백 |
전록 |
- |
+ |
단도(短棹) |
- |
+ |
+ |
O |
C |
2 |
0.5×0.5 |
〃 |
황 |
〃 |
- |
+ |
〃 |
- |
(+) |
+ |
O |
C |
3 |
0.5×1.0 |
타원 |
황백 |
〃 |
- |
+ |
구모양 |
- |
+ |
+ |
F |
S |
4 |
1.0×2.0 |
〃 |
〃 |
〃 |
- |
+ |
〃 |
- |
+ |
+ |
O |
M |
5 |
1.5×1.5 |
원형 |
백 |
〃 |
- |
+ |
단도 |
- |
(+) |
+ |
O |
C |
6 |
0.5×1.0 |
타원 |
황 |
〃 |
- |
+ |
〃 |
- |
+ |
+ |
O |
C |
7 |
0.5×0.7 |
〃 |
오렌지 |
|
- |
+ |
〃 |
- |
+ |
+ |
O |
C |
8 |
1.5×1.5 |
원형 |
백 |
전록 |
- |
+ |
〃 |
- |
+ |
+ |
O |
C |
9 |
1.0×1.5 |
타원 |
황 |
〃 |
- |
+ |
〃 |
- |
+ |
+ |
O |
C |
10 |
0.5×0.5 |
원형 |
백 |
〃 |
- |
- |
〃 |
- |
+ |
+ |
F |
E |
*C=Corynebacterium, S=Staphyrococcus, M=Micrococcus
E=Enterobacteriaceal
5. 본 발명에 따른 미생물 기재의 이용
본 발명에 따라 제조된 고밀도 길항 미생물 기재는, 단독으로 사용하는 것도 좋으나, 유기질 비료와 혼용하여 산포한다거나, 밑거름과 혼용하여 토양에 시용하는 것이 바람직하다. 또한 유기 배합 비료를 제조하는 과정에 혼입하면 미생물에 의한 양분화가 촉진되어 유기비료의 지속성과 속효성이 향상되고, 추비(追肥)에도 사용될 수 있다. 사용량에 관해서는 대상 토양 또는 작물의 상황을 고려하여 결정해 시용하는 것이 바람직하다. 표준적인 사용량은 전면 산포의 경우, 20 내지 30kg/10a. 육묘용 배토에 사용하는 경우에는 1m2당 10 내지 15kg, 포트용 시용은 작물에 따라 결정된다. 또한 퇴비 등의 유기물 발효시킨 경우는 10 내지 15kg/t. 나아가, 살균제와의 혼용은 피하지 않으면 안된다. 이상에서와 같은 본 발명에 따른고밀도 길항 미생물 기재의 평균적인 사용량 및 방법을 정리하면, 하기 표 9와 같다.
평균 사용량 및 사용방법
시용 대상 |
사용량 |
사용방법 |
야채.과채.화훼 |
육묘에 사용하는 경우 |
육묘배토1m3당 |
10∼15kg |
육묘시에 혼합 또는 본 발명의 기재로 배토 조성 |
정식(定植)전에 사용하는 경우 |
10a당 |
20∼30kg |
퇴비 또는 유기배합비료와 함께 기초비료시에 산호 경운한다. 토양이 건조한 경우에 관수한다. |
생육도(生育途)중에 사용하는 경우 |
1포기당 |
10∼50g |
주원(株元)에 토랑을 파고 산포하여 덮는다. |
추비로서 사용하는 경우 |
20kg/10a |
유기질비료와 혼합하고, 밭에 산포하고 가볍게 관수한다. |
화훼재배의 분재에 사용하는 경우 |
배토에 넣어, 1t당. |
10∼15kg |
배토를 분재에 넣기 전에 혼합한다. |
수용액으로 사용하는 경우(1)엽면산포 |
500ℓ에 5kg을 넣고 100배 희석 |
한달에 한두번 살포 |
기타 액체비료를 혼합하는 것도 좋으나, 농약과의 혼합은 피한다. |
(2)수경재배에 사용하는 경우 |
용액 탱크에 2000-3000배 희석 계산하여 집어넣는다 |
|
과수등 |
유목(개식) |
1그루당 |
1∼2kg |
동량의 유기질 비료와 혼합하여 개식 구멍에 산포하고 덮는 것을 반복하면서 산포한다. |
수령 5-10년 |
1그루당 |
2∼3kg |
그루의 주위를 파서 동량의 유기질비료와 혼합하여 산포하고 덮는 것을 반복하면서 사용한다. |
수령 20년 이상 |
1그루당 |
5kg |
그루의 주위를 파서 동량의 유기질 비료와 혼합하여 산포하고 덮는 것을 반복하면서 사용한다. 어느 경우에도 토양이 건조할 때 관수하면서 산포한다. |
골프장 |
조성시 |
1m2당 |
1∼2kg |
유기질 비료와 혼합하여 상토에 혼합하여 관수한다. |
그린 시용 |
1m2당 |
50g |
에어레이션의 시기에 목토, 유기질비료와 혼합하여 박아넣는다. |
페어웨이 시용 |
1m2당 |
50g |
장해의 발생이 있는 장소에 유기질 비료로 증량하고, 혼합물을 1m2당 1kg 산포하여 관수한다. |
퇴비 |
|
1t당 |
2∼3kg |
쌀겨 20kg에 2-3kg을 혼합하고, 발효시킨 후에 퇴비에 넣는다. 퇴비의 수분은 50%로 조정한 유기배합비료를 조성한 경우도 마찬가지. |
한편, 본 명세서에 첨부된 도 1 및 도 2는 각각 본 발명에 따른 제조된 고밀도 길항 미생물 기재를 장해 토양에 산포하고, 토양 미생물군이 건전하게 회복된 사례를 나타낸 그래프와 설명도로서, 도 1은 본 발명에 따라 제조된 고밀도 길항 미생물 기재를 장해 토양에 시용한 경우의 토양의 회복 상태를, 균의 증감치에 따라 나타낸 표이며, 도 2는 본 발명에서 제조된 고밀도 미생물 기재를 장해 토양에 시용한 경우의 방선균에 의한 사상균의 제압(制壓) 상태를 설명한 도면이다.
도 2에서, 단순하게 흰 부분은 사상균의 콜로니이며, 엷게 흰 부분은 방선균의 콜로니이다. 도 2의 사진 (B)에 나타난 바와 같이, 사상균의 콜로니는 적어진 반면, 방선균의 콜로니는 확대되고 있는 것을 알 수 있다.
이하에서는, 본 발명에 따른 고밀도 미생물 기재를 여러 농장에서 시용한 결과를 구체적으로 나타낸다.
A. 애원(愛媛)현 이예시에 있어서 실시된 호과재배의 시용 결과
(조건)
1. 재배방법하우스 시설 재배
2. 하우스 면적14.4m X 190.8m = 2,747.5m2
(832.58평)
3. 대조구남측 하우스
4. 처리구북측 하우스
5. 호과품종샤프 1
6. 실험방법
처리구 하우스에, 본 발명에 의한 고밀도 길항 미생물 기재 10kg, 골분 40kg, 화학 합성 비료 20kg의 혼합물을 식물을 심기 전에 토양 관주기를 사용하여 2m간격, 깊이 55cm로 박아 넣었다.
7. 시용일
(수확)
1. 수확개시일 1992년 4월 11일 개시
2. 대조구는 6월말에 수확 종료
수량1만엔/평당, 합계 8,480,000엔
3. 처리구는 7월에 들어서도 수량이 떨어지지 않았다.
수량1만 2천엔/평당, 합계 10, 176, 000엔
증수액1,696,000엔
B. 나가노현 한다시에 있어서, 시금치의 하우스 재배 농장에서의 시용 결과
(조건)
1. 품종재래종
2. 실험방법
본 발명에 의한 고밀도 길항 미생물 기재를 1평당 1kg, 쌀겨 1.8ℓ를 혼합하고 산포 경운 하였다.
3. 파종일1992년 8월 30일
(수확)
수확일1992년 10월 7일 개시
(결과)
1. 본 발명에 따른 고밀도 길항 미생물 기재처리구에서는, 뿌리의 길이는 짧으나 모근의 수가 많고, 크로로필의 양도 많으며, 1포기당의 중량이 많고 또한 수확량이 많았다.
2. 무처리구에서는, 뿌리가 길고 가늘며, 모근의 수가 적고, 클로로필의 양이 작다. 잎의 수는 1개 많으나, 1포기당의 중량이 적고 수확량도 적었다. 결과를 하기 표 10에 나타내었다.
C. 나가노현 한다시에 있어서, 본 발명의 고밀도 길항 미생물 기재에 의한 수도육표(水稻育苗) 실험 결과
(조건)
1. 품종재래종
2. 육묘방식육묘 포트
3. 1992년 5월 14일
물 50ℓ에 고밀도 길항 미생물 기재 1kg을 넣고, 온도 30℃에서 3시간 산소를 넣으면서 교반하고, 육묘상에 산포하였다.
4. 1992년 5월 19일 10a에 이식.
(결과)
1992년 5월 24일-이식 5일후
1. 고밀도 길항 미생물 기재를 처리한 묘(苗)는, 포기의 길이 10cm, 클로로필 양은 평균 25.8이었다.
2. 무처리구의 묘는, 뿌리의 길이 6cm, 클로로필의 양은 평균 22.3이었다.
D. 나가노현 남부의 골프장의 페어웨이에 고밀도 길항 미생물 기재의 시용 결과
나가노현 남부의 골프장의 페어웨이에 고밀도 길항 미생물 기재에 따른 위황병(萎黃病)(라아지 팻치-병원균 리족토니아·에스피(Rhizoctonia·SP)에 대한 시용 실험을 수행하였다. 결과는 다음과 같다.
(조건)
1. 시용장소페어웨이
2. 시용일1991년 4월 상순
3. 사용량
고밀도 길항 미생물 기재를 50g/m2(40m2에 본 발명에 따른 기재 2kg을 산포)하였다.
4. 사용방법
매년 발생하는 장소에, 사이클론으로 산포하였다.
(결과)
매년 결정된 발생하는 악조건하의 장소였으나, 본 발명의 고밀도 길항 미생물 기재를 산포한 장소에서의 발병은 나타나지 않았고, 또한 본 기재의 다량 산포에 의해 폐해도 발생되지 않았다.
E. 이바라키죠 이와이시에 있는 노지배양의 백견병(白絹病)에 대한, 본 발명의 고밀도 길항 미생물 기재에 의한 시용 결과
(조건)
1. 재배방법노지재배
2. 품종장열(긴 파)
3. 실험면적330평
4. 본 기재 사용량 20kg/330평
5. 사용방법
고밀도 길항 미생물 기재 20kg으로, 깻묵, 어분(魚粉), 골분, 쌀겨, 화학합성비료를 혼합한 자가제(自家製) 유기배합비료 500kg을 제조하였다. 비료로서, 자가제 퇴비(본 발명에 따른 기재에서 발효시킨다) 10t, 농협 유기비료(7-6-2-) 100kg, 상기 자가제 유기배합비료 150kg을 산포하고 경운하였다.
6. 사용일1994년 11월 26일
7. 추비1995년 1월 10일
자가제 유기배합비료 110kg
1995년 3월 24일
자가제 유기배합비료 100kg
1995년 4월 28일
자가제 유기배합비료 50kg
8. 수확일 1995년 5월 27일 개시
(결과)
작년은 연작 장해의 영향 및 비료 설계 실수에 의해 백견병을 크게 발생시켰고, 출하율 50%로 떨어지고, 본년 취화(臭化) 메틸제를 사용하고 토양 살균 소독을 시행할 계획이었으나 유기재배를 목표로 하기 위하여 본 발명인 고밀도 길항 미생물 기재 실용시험을 수행하였다.
1995년 전국적으로 강우량이 많고, 수확기 근처까지 비가 왔었으나 문제의 백견병의 발생은 격감하였고, 출하율은 97%를 확보하였다.
한 포기당의 중량도 20% 증가하였고, 품질도 당도 14.2L 클라스가 80%를 점하는 결과가 되었다.
이상에서와 같이, 상기 수단에 의해 상술한 기술적 과제를 해결하여 상기 종래 기술의 문제점을 해소하는 것이 가능하다.