KR20010101178A - αｖβ６ 인테그린 저해제 - Google Patents

Abstract

본 발명은 α_vβ₆인테그린의 리간드로서, 생물학적으로 활성을 가지는 신규한 펩티드에 관한 것이다. 상기 펩티드는 일반적인 구조 모티프, 즉, - Asp Leu Xaa Xaa Leu - 또는 바람직한 형태 - Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu Arg - 를 가지며, 여기서, Xaa 는 임의의 아미노산 잔기를 나타낸다. 본 발명에 따른 펩티드는 α_vβ₆인테그린 수용체의 효과적인 저해제로서 다양한 질환 및 병리학적 발견의 치료에 사용될 수 있다.

Description

αｖβ６ 인테그린 저해제 {αｖβ６ INTEGRIN INHIBITORS}

인테그린은 헤테로다이머 - 다수의 세포-매트릭스 및 세포-세포 부착 과정에서 중요한 역할을 하는 막투과 수용체 - 의 클래스 I 계열에 속한다(Tuckwell et al., 1996, Symp. Soc. Exp. Biol. 47). 이것은 대략 세 종류로 나눌 수 있다: 세포외 매트릭스를 위한 수용체인 β₁인테그린, 백혈구에서 활성화될 수 있고, 염증을 일으키는 과정 동안 "유발되는" β₂인테그린, 및 상처 치료 및 다른 병리학적 과정 동안 세포 반응에 작용하는 α_v인테그린(Marshall and Hart, 1996, Semin. Cancer Biol. 7, 191).

인테그린 α₅β₁, α_IIbβ₃, α₈β₁, α_vβ₁, α_vβ₃및 α_vβ₆은 모두, 예를 들면, 천연 리간드 피브로넥틴에서, Arg-Gly-Asp (RGD) 펩티드 서열에 결합한다. 가용성 RGD-함유 펩티드는 각각의 이들 인테그린과 피브로넥틴과의 상호작용을 저해할 수 있다. α_vβ₆은 비교적 드문 인테그린으로(Busk et al., 1992 J. Biol. Chem. 267(9), 5790), 상피 조직에서 치료 과정 동안 증가된 양으로 형성되고, 바람직하게는 천연 매트릭스 분자 피브로넥틴 및 테나신(tenascin)을 결합시킨다(Wang et al., 1996, Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 15(5), 664) . α_vβ₆의 생리학적 및 병리학적 작용은 아직 정확히 알려지지는 않았지만, 이 인테그린은 상피 세포가 관련되는 생리학적 과정 및 질환(예를 들어, 염증, 상처 치료, 종양)에서 매우 중요한 역할을 한다. 따라서, α_vβ₆은 상처 중의 케라틴구(keratinocytes)에서 발현되며(Haapasalmi et al., 1996, J. Invest. Dermatol. 106(1), 42), 상처 치료 과정 및 염증 이외에 건선과 같은 다른 병리학적 피부 질환도 상기 인테그린의 증진제 또는 항진제에 의해 영향을 받을 수 있다. α_vβ₆은 호흡관 상피에서도 작용하므로(Weinacker et al., 1995, Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 12(5), 547), 이 인테그린의 적당한 증진제/항진제는 기관지염, 천식, 폐 섬유증 및 호흡관 종양과 같은 호흡관 질환에 성공적으로 사용할 수 있다. 마지막으로, α_vβ₆은 또한 장의 상피에서도 작용하므로 적당한 인테그린 증진제/항진제는 위/장관의 염증, 종양 및 상처 치료에 사용할 수 있다.

본 발명은 인테그린 α_vβ₆의 리간드로서 생물학적으로 활성을 가지는 신규한 펩티드에 관한 것이다. 이 펩티드들은 모두 공통된 구조 모티프, 즉 -Asp Leu Xaa Xaa Leu-, 또는 바람직한 형태 - Arg XaaAsp Leu Xaa Xaa LeuArg - 를 가지며, 여기서 Xaa는 임의의 바람직한 아미노산 잔기이다. 본 발명에 따른 펩티드들은 α_vβ₆인테그린 수용체의 효과적인 저해제로서, 따라서, 다양한 질환 및 병리학적 발견을 치료하는데 사용될 수 있다.

지금까지, α_vβ₆인테그린에 선택적으로 결합하는 저분자량 저해제를 발견하지 못하였다. 따라서, 치료적 및 진단적으로 다루기 어려운 이제까지 공지된 천연 고분자량 리간드 및 항체 외에, 언급된 치료 영역에서 사용할 수 있을 뿐만 아니라 진단제 또는 시약으로도 사용할 수 있는, α_vβ₆에 대하여 효능이 있고, 특이적이거나 선택적인 저분자량 리간드, 바람직하게는 펩티드를 찾는 것이 목적이다.

가용성 분자로서 하기 일반식의 펩티드 화합물 및 이의 염은 언급된 수용체를 운반하는 세포에 작용하거나, 그들이 표면에 결합하는 경우, α_vβ₆-매개된 세포 부착을 위한 인공 리간드이다. 특히, 이들은 α_vβ₆인테그린 저해제로 작용하며, 특히, 피브로넥틴의 결합과 같은 수용체와 다른 리간드의 상호작용을 저해한다. 이 작용은 문헌(J.W. Smith et al. in J. Biol. Chem.265, 12267-12271 (1990))에 기재된 방법으로 설명할 수 있다.

혈관 인테그린과 세포외 매트릭스 단백질과의 상호작용에 대한 혈관형성 기점의 의존성은 문헌(P.C. Brooks, R.A. Clark 및 D.A. Cheresh in Science264, 569-71 (1994))에 기재되어 있다.

또한, 신규한 물질이 우수한 내성과 함께 매우 가치있는 약제학적 특성을 가지며, 약제로서 사용될 수 있다는 것이 발견되었다. 이것은 하기에 더 상세하게 설명된다.

본 발명에 따른 펩티드 화합물은 또한 선행 기술에 따라 적당한 표지(예를들어, 비오티닐 라디칼)를 가진다면, 상피 조직의 병리학적 상태를 검출 및 위치결정하기 위한 진단약으로서 생체 내에 사용될 수 있다. 본 발명은 또한 세포독성 활성 화합물과 같은 다른 활성 화합물과의 결합체 및 방사선 요법 또는 PET 진단법을 위한 방사성 동위원소로 표지된 결합체 뿐만 아니라, GFP 또는 항체와 같은 표지 단백질, 또는 IL-2와 같은 치료 단백질을 가진 융합 단백질을 포함한다.

따라서, 본 발명은 화학식 I의 펩티드 화합물

W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu X³X⁴Leu X⁵X⁶ _m-W²

(상기 식에서,

X¹, X², X³, X⁴, X⁵, X⁶는 상호 독립적으로 각각 아미노산 잔기, 상호 독립적으로 Ala, Asn, Asp, Arg, Cys, Gln, Glu, Gly, Phe, His, Ile, Leu, Lys, Met, Nle, 호모-Phe, Phg, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr 또는 Val으로 이루어진 그룹에서 선택된 아미노산, 및 유도될 수 있을 것으로 언급된 아미노산이고,

W²는 그룹 OH, OR, NHR, NR₂, NH₂로부터 선택되고,

W¹은 H 또는 아실 라디칼이고,

R은 탄소수가 1-6인 알킬이고,

n, m은 상호 독립적으로 각각 0-15의 수이다)

에 관한 것이다. m 또는 n이 1보다 큰 값이면, 라디칼 X¹및 X⁶는 상호 독립적으로 각각 같거나 또는 다를 수 있다.

본 발명에 따르면, 천연 아미노산에서 출발하여 유도되거나, 또는 이의 동족체 또는 이성질체인 아미노산 또는 아미노산 잔기도 포함된다. 아미노산 잔기는 통상적으로 그의 α-아미노기 및 α-카르복실기를 통해 서로 연결된다(펩티드 결합).

본 발명은 또한 바람직하게는 X²가 Thr, Ser, Asp 및 글리신으로 이루어진 그룹에서 선택되는 아미노산 잔기인 펩티드 화합물, 또한, X³가 Asp, Glu, Arg, Lys, His 및 Tyr으로 이루어진 그룹에서 선택되는 아미노산 잔기인 펩티드 화합물, 및 마지막으로 X⁴가 Ser, Tyr, Thr, Gly 및 Val로 이루어진 그룹에서 선택되는 아미노산 잔기인 펩티드 화합물에 관한 것이다.

따라서, 바람직한 화합물(의미 및 약어는 상기 및 하기 참조)은 화학식 II의 화합물들:

W¹-X¹ _nArg Thr Asp Leu X³X⁴Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg Ser Asp Leu X³X⁴Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg Asp Asp Leu X³X⁴Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg Ser Asp Leu X³X⁴Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg Gly Asp Leu X³X⁴Leu Arg X⁶ _m-W²

및 화학식 III의 화합물들:

W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu Asp X⁴Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu Glu X⁴Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu Arg X⁴Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu Lys X⁴Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu His X⁴Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu Tyr X⁴Leu Arg X⁶ _m-W²

및 화학식 IV의 화합물들:

W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu X³Ser Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu X³Tyr Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu X³Thr Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu X³Gly Leu Arg X⁶ _m-W²

W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu X³Val Leu Arg X⁶ _m-W²

을 포함한다.

본 발명에 따른 특히 바람직한 펩티드 화합물은 화학식 V의 화합물:

W¹-X¹ _nArg Thr Asp Leu Asp Ser Leu Arg X⁶ _m-W²

및 이와 관련하여 특히 화학식 VI의 화합물:

W¹-X¹ _nArg Thr Asp Leu Asp Ser Leu Arg Thr X⁶ _m-1-W²

이다.

마지막으로, N 및 C 말단이 변형된 것도 포함하여, 하기 개별 화합물들이 특히 바람직하다:

(a) H-Arg-Thr-Asp-Leu-Asp-Ser-Leu-Arg-Thr-Tyr-Thr-Leu-OH

(b) H-Arg-Thr-Asp-Leu-Asp-Ser-Leu-Arg-OH

(c) Ac-Arg-Thr-Asp-Leu-Asp-Ser-Leu-Arg-Thr-OH

(d) Ac-Arg-Thr-Asp-Leu-Asp-Ser-Leu-Arg-Thr-NH₂

(e) H-Arg-Thr-Asp-Leu-Asp-Ser-Leu-Arg-Thr-OH

(f) H-Arg-Thr-Asp-Leu-Asp-Ser-Leu-Arg-Thr-NH₂

(g) H-Arg-Thr-Asp-Leu-Tyr-Tyr-Leu-Arg-Thr-Tyr-OH

(h) Ac-Arg-Thr-Asp-Leu-Asp-Ser-Leu-Arg-NH₂

상기 및 하기에 언급된 약어는 하기 아미노산의 라디칼을 의미한다:

Ala A 알라닌

Asn N 아스파라긴

Asp D 아스파르트산

Arg R 아르기닌

Cys C 시스테인

Gln Q 글루타민

Glu E 글루탐산

Gly G 글리신

His H 히스티딘

Ile I 이소류신

Leu L 류신

Lys K 리신

Met M 메티오닌

Nle 노르류신

Orn 오르니틴

Phe F 페닐알라닌

Phg 페닐글리신

Pro P 프롤린

Ser S 세린

Thr T 트레오닌

Trp W 트립토판

Tyr Y 티로신

Val V 발린

상기 아미노산이 다수의 거울상 이성질체 형태로 나타나는 경우, 모든 이들 형태 및 이들의 혼합물은 예를 들어, 화학식 I-VI의 화합물의 성분으로서 상기 및 하기에 포함된다. 또한, 예를 들어, 화학식 I-VI의 화합물의 성분으로서의 아미노산에는 그 자체로 공지된 적당한 보호기가 제공될 수 있다.

화학식 I-VI의 화합물은 하나 이상의 키랄 중심을 가질 수 있고, 따라서, 다양한 입체 이성질체 형태로 나타날 수 있다. 언급된 화학식은 모든 형태, 특히 D 및 L 형태, 특별히 거울상 이성질체 및 라세미체 혼합물을 포함한다. 마지막으로, 본 발명에 따른 상기 및 하기의 화학식 I 및 II의 화합물은 또한 대응하는 염, 특히 대응하는 생리학적으로 허용가능한 염들을 포함한다.

일명 프로드러그 유도체, 즉, 예를 들어, 알킬 또는 아실기, 당류 또는 올리고펩티드로 변형된 화학식 I의 화합물도 본 발명에 따른 화합물에 포함되며, 체내에서 신속하게 분해되어 본 발명에 따른 활성 화합물을 생성한다. 또한, 본 발명에 따른 실제 펩티드 및 펩티드를 쉽게 검출할 수 있게 하는 공지된 표지 화합물로 이루어지는 유도체들도 본 발명에 따른 화합물에 포함된다. 이러한 유도체들의 예로는 비오티닐화된 또는 형광-표지된 펩티드를 들 수 있다.

일반적으로, 본 발명에 따른 펩티드는 선형이지만, 고리화될 수도 있다. 본발명은 언급된 화학식 I 내지 VI의 펩티드 뿐만 아니라 본 발명에 따른 화합물에 더하여 바람직한 방법으로 본 발명에 따른 펩티드의 주요 약제학적 작용에 영향을 미칠 수 있는 다른 약제학적 활성 화합물 또는 보조제를 함유하는 혼합물 및 제제를 포함한다.

이와 달리, 본 발명에 따른 화합물 및 또한 이들 제제의 출발 물질은 문헌(예를 들어, Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie [Methods of Organic Chemistry], Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart와 같은 표준 작업서)에 기술된 바와 같은 그 자체로 공지되고, 자주 사용되는 방법에 의해, 즉, 상기 반응에 적합하고 공지되어 있는 반응 조건하에서 제조된다. 본 발명에서 그 자체로 공지된 변형 방법들도 사용할 수 있다.

바람직하게는, 본 발명에 따른 펩티드는 예를 들어, 종지크 및 메옌호퍼(Jonczyk 및 Meienhofer)(Peptides, Proc. 8^thAm. Pept. Symp., Eds. V. Hruby 및 D.H. Rich, Pierce Comp. III, p. 73-77, 1983, 또는 Angew. Chem.104, 1992, 375)에 의해 기재된 바와 같이, 또는 메리필드(Merrifield)(J. Am. Chem. Soc.94, 1972, 3102)에 따라, 고상 합성 및 뒤이은 제거 및 정제에 의하여 제조할 수 있다. 이와 달리, 본 발명에 따른 펩티드는 공지된 바와 같은 통상적인 아미노산 및 펩티드 합성 방법(예를 들어, Novabiochem - 1999 Catalog & Peptide Synthesis Handbook of Calbiochem - Novabiochem GmbH, D-65796 Bad Soden, 다수의 표준 작업서 및 공개된 특허 출원)으로 제조할 수 있다. 이와 유사하게, 비오티닐화된 또는 형광-표지된 펩티드/단백질은 표준 방법(예를 들어, E.A. Bayer and M. Wilchek in Methods of Biochemical Analysis, Vol. 26, The Use of the Avidin-Biotin Complex as a Tool in Molecular Biology; 및 Handbook of Fluorescent Probes and Reserch Chemicals, 6^thEdition, 1996, by R.P. Haugland, Molecular Probes, Inc.; 또는 대안으로WO 97/14716)으로 제조할 수 있다.

물론, 화학식 I-VI의 펩티드들은 또한 가용매분해, 특히 가수분해, 또는 이의 작용 유도체의 가수소분해에 의해 유리될 수 있다. 가용매분해 또는 가수소분해를 위한 바람직한 출발 물질은 하나 이상의 유리 아미노 및/또는 히드록실기 대신에 대응하는 보호된 아미노 및/또는 히드록실기를 포함하고, 바람직하게는, N 원자에 연결된 H 원자 대신에 아미노 보호기를 가지거나, 히드록실기의 H 원자 대신에 히드록실 보호기를 가지는 것을 포함한다.

이의 -CO-OH 히드록실 작용이 예를 들어, 에스테르와 같은 보호기로 치환되어 보호될 수 있는 카르복시산에 대해서도 동일하게 적용된다.

"아미노 보호기"라는 용어는, 일반적으로 공지되고, 아미노기를 화학 반응으로부터 보호(차단)하기에 적당하지만, 분자 내의 다른 위치에서 원하는 화학 반응을 실시한 후에는 용이하게 제거할 수 있는 기를 의미한다. "히드록실 보호기"라는 용어는, 이와 유사하게 일반적으로 공지되고, 히드록실기를 화학 반응으로부터 보호하기에 적당하지만, 분자 내의 다른 위치에서 원하는 화학 반응을 실시한 후에는 용이하게 제거할 수 있는 기를 의미한다. 사용되는 보호기에 따라, 예를 들면,강산, 편리하게는 TFA 또는 과염소산을 사용하거나, 염산 또는 황산과 같은 다른 무기강산, 트리클로로아세트산과 같은 강한 유기 카르복실산 또는 벤젠술폰산 또는 p-톨루엔술폰산과 같은 술폰산을 사용하여 작용 유도체로부터 화합물을 유리시킨다. 가수소분해적으로 제거가능한 보호기(예를 들어, CBZ 또는 벤질)는 촉매(예를 들어, 편리하게는 탄소와 같은 지지체 상의 팔라듐과 같은 귀금속 촉매)의 존재 하에 수소로 처리하여 제거할 수 있다. 본 과정은 일반적으로 공지되어 있으며, 본 명세서에서는 더 상세하게 기재되지 않는다.

상기한 바와 같이, 본 발명에 따른 펩티드는 표준 방법에 의해 이와 유사하게 제조될 수 있는, 이의 생리학적으로 허용가능한 염을 포함한다. 따라서, 화학식 I의 염기는 에탄올과 같은 불활성 용매 중에서 동등한 양의 염기와 산을 반응시키고, 이어서 증발시킴으로써, 산을 사용하여 관련 산 부가염으로 전환시킬 수 있다. 이 반응에 적당한 산은, 특히, 생리학적으로 허용가능한 염을 생성하는 산이다. 따라서, 무기산, 예를 들어, 황산, 질산, 염산 또는 브롬화수소산과 같은 할로겐화수소산, 오르토인산과 같은 인산, 술팜산, 또한, 유기산, 특히, 지방족, 지환족, 또는 방향성지방족, 방향족 또는 헤테로고리 일- 또는 다염기 카르복시산, 술폰산 또는 황산, 예를 들어, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 피발산, 디에틸아세트산, 말론산, 숙신산, 피멜산, 푸마르산, 말레산, 락트산, 타르타르산, 말산, 시트르산, 글루콘산, 아스코르브산, 니코틴산, 이소니코틴산, 메탄- 또는 에탄술폰산, 에탄디술폰산, 2-히드록시에탄술폰산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산, 나프탈렌모노- 및 디술폰산, 라우릴 황산을 사용할 수 있다. 피크레이트와 같이 생리학적으로 허용불가능한 산을 가진 염은 본 발명에 따른 화합물을 분리 및/또는 정제하는데 사용할 수 있다. 한편, 화학식 I의 산은 염기와의 반응에 의해 생리학적으로 허용가능한 금속 또는 암모늄염 중에 하나로 전환될 수 있다. 이 경우, 가능한 염은 특히, 나트륨, 칼륨, 마그네슘, 칼슘 및 암모늄염, 또한 치환된 암모늄염, 예를 들어, 디메틸-, 디에틸- 또는 디이소프로필암모늄염, 모노에탄올-, 디에탄올- 또는 디이소프로필암모늄염, 시클로헥실- 또는 디시클로암모늄염, 디벤질에틸렌디암모늄염, 또한, 예를 들어, 아르기닌 또는 리신을 가진 염이다.

본 발명에 따른 펩티드 화합물은 상기한 바와 같이, 인간 및 동물 의학에서, 특히, 상피 세포가 관련된 질환의 예방 및/또는 치료를 위한 약제학적 활성 화합물로 사용할 수 있다. 특히, 이와 관련하여 강조되는 것은, 피부, 호흡기관 및 위 및 장 부분의 질환 또는 염증 또는 상처 치료 과정, 따라서, 예를 들어, 졸중, 협심증, 종양증, 골다공증과 같은 골용해성 질환, 예를 들면 염증과 같은 병리학적 맥관 유래 질환, 폐 섬유증, 안과학적 질환, 당뇨성 망막증, 황반 변성, 근시, 안히스토플라스마증, 류마티즘성 관절염, 골관절염, 홍색 녹내장(rubeotic glaucoma), 궤양성 대장염, 크론 질환(Crohn's disease), 동맥경화증, 건선, 혈관성형 후의 협착증, 급성 신부전 또는 신장염이다.

따라서, 본 발명은 약제, 진단약 또는 시약으로서, 상기 및 하기 및 청구항에 정의된 화학식의 펩티드 화합물 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다.

본 발명은 특히, α_vβ₆인테그린 수용체의 발현에 직접 또는 간접적으로 근거한 질환, 특히, 병리학적 맥관 유래 질환, 혈전증, 심근경색, 관상 심장 질환, 동맥경화증, 종양, 골다공증, 염증, 감염을 치료하고, 상처 치료 과정에 영향을 주기 위한 저해제로서 적당한 약제에 관한 것이다.

본 발명은 또한 하나 이상의 화학식 I 내지 VI의 약제 및, 적합하다면, 비히클 및/또는 부형제를 포함하는 적당한 약제학적 제제에 관한 것이다.

본 발명은 또한 α_vβ₆인테그린 수용체의 발현에 직접 또는 간접적으로 근거한 질환, 특히, 병리학적 맥관 유래 질환, 혈전증, 심근경색, 관상 심장 질환, 동맥경화증, 종양, 골다공증, 염증, 감염을 치료하고, 상처 치료 과정에 영향을 주기 위한 약제의 제조를 위한 청구항 및 본 명세서에 따른 펩티드 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염의 용도에 관한 것이다. 본 발명에 따른 약제 또는 이를 포함하는 약제학적 제제는 인간 또는 동물 의학에서 사용할 수 있다. 가능한 부형제는 장내(예를 들어, 경구), 또는 비경구 투여 또는 국부 투여 또는 흡입 스프레이 형태의 투여에 적합한 유기 또는 무기 물질로서, 예를 들어, 물, 식물성 오일, 벤질 알콜, 알킬렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세롤 트리아세테이트, 젤라틴, 락토오스 또는 녹말과 같은 탄수화물, 마그네슘 스테아레이트, 탈크 또는 와셀린과 같이 신규한 화합물과 반응하지 않는 것이다. 정제, 환제, 제피정, 캅셀제, 산제, 과립제, 시럽제, 즙제 또는 드롭제는 특히 경구 투여용으로 사용되고, 좌제는 직장 투여용으로 사용되고, 용액, 바람직하게는 오일 또는 수용액, 또한 현탁액, 에멀젼 또는 임플란트는 비경구 투여용으로 사용되고, 연고제, 크림제 또는 산제는 국부 투여용으로 사용된다. 신규한 화합물은 또한 동결 건조될 수 있고, 얻어진 동결 건조물은 예를 들면, 주사제를 제조하는데 사용될 수 있다. 상기 제제는 멸균될 수 있고, 및/또는 윤활제, 방부제, 안정화제 및/또는 습윤제, 에멀젼화제, 삼투압에 영향을 주는 염, 완충 물질, 착색제, 향미제 및/또는 예를 들어, 하나 이상의 비타민과 같은 하나 이상의 다른 활성 화합물을 함유할 수 있다.

흡입 스프레이로 투여하기 위해서, 스프레이는 추진제 또는 추진제 혼합물(예를 들어, CO₂또는 클로로플루오로하이드로카본)에 용해되거나 현탁된 활성 화합물을 포함하는 것을 사용할 수 있다. 편리하게는, 본 명세서에서 활성 화합물은 미세화된 형태로 사용되고, 에탄올과 같은 하나 이상의 추가의 생리학적으로 내성이 있는 용매가 존재할 수 있다. 흡입 용액은 통상의 흡입기를 사용하여 투여될 수 있다.

본 발명에 따른 물질은 일반적으로 다른 공지된, 시판되는 펩티드(예를 들어, US-A-4 472 305에 기재된 것)와 유사하게, 바람직하게는 투여량 단위 당 바람직하게는 약 0.05 내지 500 mg, 특히 바람직하게는 0.5 내지 100 mg의 투여량으로 투여될 수 있다. 일일 투여량은 체중 1kg당 약 0.01 내지 20 mg이 바람직하다. 그러나, 각 환자에 대한 특정 투여량은 모든 종류의 인자, 예를 들어, 사용된 특정 화합물의 효능, 나이, 체중, 전반적인 건강 상태 및 성별, 식이요법, 투여 시간 및 경로, 배설률, 약제학적 배합 및 치료할 특별한 질병의 심각도에 따라 달라진다.경구 투여가 바람직하다.

마지막으로 본 발명은 또한 본 발명에 따른 화학식 I 내지 VI의 펩티드 구조 모티프를 포함하는 펩티드 영역을 암호화하는 부분을 포함하는 재조합 DNA 서열을 포함한다.

이러한 DNA는 문헌(Ch. Andree et al. Proc. Natl. Acad. Sci. 91, 12188-12192 (1994))에 기재된 바와 같이, 입자에 의해 세포로 전이될 수 있고, 또는 리포좀과 같은 다른 비히클에 의해 세포로의 전이가 증가될 수 있다(A.I. Aronsohn 및 J.A. Hughes J. Drug Targeting, 5, 163-169 (1997)).

따라서, 본 발명의 펩티드 물질의 제조를 위해서, 이러한 DNA의 전이는 바쿨로바이러스(bacculoviruses)에 의해 이스트 또는 포유류 세포에 사용될 수 있다.

동물 또는 인간의 몸이 이러한 재조합 DNA로 감염되면, 감염된 세포에 의해 형성된 본 발명에 따른 펩티드 자체가 마침내 예를 들면, 종양 세포의 α_vβ₆인테그린 수용체에 직접 결합하여 그것을 차단한다.

그러나, 공지된 통상의 기술로 제조될 수 있는 적합한 재조합 DNA는 예를 들면, 바이러스 피막 단백질을 암호화하는 부분을 포함하는 바이러스 DNA의 형태로 존재할 수 있다. 재조합, 바람직하게는 이 형태의 비-병원성 바이러스로 숙주를 감염시킴으로써, 인테그린 α_vβ₆을 발현하는 숙주 세포는 바람직하게 침습(표적화)될 수 있다.

적당한 바이러스는 예를 들면, 이미 수차례 포유류 세포에서 외인성 유전자에 대한 벡터로 사용되었던 아데노바이러스종이다. 수많은 특성으로 인해 이것은 유전자 치료에서 우수한 후보이다(S.J. Watkins et al. Gene Therapy 4, 1004-1012 (1997) 및 J. Engelhardt et al. Hum. Gene Ther. 4, 759-769 (1993) 참조). 문헌(A. Fasbender et al. J. Clin. Invest. 102, 184-193 (1998))에서 알 수 있는 바와 같이, 유전자 전이의 제한된 효능은 바이러스성 및 비-바이러스성 벡터에 의한 유전자 치료에서는 일반적인 문제점이다. 상기 아데노바이러스의 피막 단백질에서 α_vβ₆인테그린에 대한 추가적인 리간드 서열을 사용하여, 예를 들면, 낭포성섬유증 막투과 컨덕턴스 조절자(CFTR) cDNA의 전이를 개선할 수 있다.

다나카 등의 연구(T. Tanaka et al. Cancer Research 58, 3362-3369 (1998))와 유사하게, 레트로바이러스 또는 아데노바이러스 벡터에 의한 세포 유전자도입을 위해 안지오스타틴(angiostatin)의 DNA 대신 본 발명의 서열의 DNA를 사용할 수도 있다.

본 발명에 따른 펩티드는 또한 인간의 유전자 치료에 사용하기 위하여 세포 배양의 유전자도입을 위해 준비된 지질/펩티드/DNA의 리포좀 복합체 및 지질/DNA(펩티드 없이)로 구성된 리포좀 복합체 내에 사용될 수 있다. 지질/DNA/펩티드의 리포좀 복합체의 제조는 문헌(예를 들면, Hart S.L. et al 1998: Lipid-Mediated Enhancement of Transfection by a Non-Viral Integrin-Targeting Vector, Human Gene therapy 9, 575-585)에 기재되어 있다.

지질/펩티드/DNA의 리포좀 복합체는 예를 들면, 하기 모액으로부터 제조할수 있다: 1 ㎍/㎕의 리포펙틴{DOTMA (= N-[1-(2,3-디올레일옥시)프로필]-N,N,N-트리메틸암모늄 클로라이드)와 DOPE(디올레일포스파티딜에탄올아민)의 동일한 몰의 혼합물}, 10 ㎍/㎖의 플라스미드 DNA 및 100 ㎍/㎖의 펩티드. 이를 위해 DNA 및 펩티드 모두 세포 배양 배지에 용해시킨다. 리포좀 복합체는 세 성분을 특정 중량비(예를 들면, 지질:DNA:펩티드=0.75:1:4)로 혼합함으로써 제조된다. 인간의 유전자 치료를 위한 리포좀 DNA 복합체는 이미 문헌(Caplen N.J., et al 1995: Loposome-mediated CFTR gene transfer to the nasal epithelium of patients with cystic fibrosis, Nature Medicine 1, 39-46)에 기재되어 있다.

따라서, 본 발명은 또한 α_vβ₆인테그린 수용체의 발현에 직접 또는 간접적으로 근거한 질환, 특히, 병리학적 맥관 유래 질환, 혈전증, 심근경색, 관상 심장 질환, 동맥경화증, 종양, 골다공증, 염증, 감염을 치료하고, 상처 치료 과정에 영향을 주기 위하여, 유전자 방출 시스템의 적절하게 변형된 재조합 DNA, 특히, 바이러스 DNA를 사용하는 것에 관한 것이다.

본 발명에 따른 신규 화합물은 또한 순수한 형태의 인테그린을 제조하기 위한 친화성 크로마토그래피용 컬럼을 준비하는데 인테그린 리간드로서 사용될 수 있다. 세파로즈와 같은 아비딘-유도된 지지 물질 및 화학식 I의 신규 화합물의 복합체는 그 자체로 공지된 방법(예를 들면, E.A. Bayer 및 M. Wilchek in Methods of Biochemical Analysis, Vol. 26, The Use of the Avidin-Biotin Complex as a Tool in Molecular Biology)에 의해 형성된다. 이 경우, 적당한 중합체 지지 물질은 펩티드 화학에서 그 자체로 공지되고, 바람직하게는 친수 특성을 가지는 중합체 고체상, 예를 들면, 셀룰로오스(세파로스 또는 세파덱스(Sephadex))와 같은 교차결합된 다당류, , 아크릴아미드, 폴리에틸렌 글리콜에 기초한 중합체 또는 텐타켈 중합체(Tentakel polymer)이다.

실시예 1

본 발명에 따른 펩테드의 제조 및 정제:

원칙적으로, 호브너 등(J. Am. Chem. Soc. 118, 1996, 17703)의 상세한 기술에 따라 시판되는 연속 흐름 펩티드 합성기를 사용하여 산-불안정 수지에서 산-불안정 측쇄를 보호하면서 Fmoc 방법으로 제조 및 정제하였다.

하기에서, 합성 및 정제는 펩티드 아미드 Ac-RTDLDSLR-NH₂에 대한 실시예로 기재하였다. 펩티드 산을 합성하기 위해, 제조업자의 지시에 따라 o-클로로트리틸 클로라이드 수지(Novabiochem)를 적당한 C-말단 Fmoc 아미노산으로 코팅하고, 제조업자의 지시에 따라 합성 장치에서 사용하였다(Milligen). 주요 단계는 세척 - Fmoc 보호기 제거 - 세척 - 다음 Fmoc 아미노산과 결합 - 캡핑 (아세틸화) - 세척이다. N-말단 아세틸화를 마지막 아미노산 결합 후에 하는 경우, 무수 아세트산과 같은 적당한 활성화된 아실 라디칼을 사용하여 마지막 Fmoc 보호기를 제거한 후에 수행한다.

2 g의 9-Fmoc-아미노크산테닐옥시 수지(Novabiochem, 0.37 mmol/g)를 0.45 g의 히드록시벤조트리아졸 수화물(HOBt), 0.5 ml의 에틸디이소프로필아민, 4 당량의 디이소프로필카르보디이미드 (DIC) 및 디메틸포름아미드(DMF) 중의 Fmoc-아미노산과 연속적으로, 각각 60분 동안 통상의 합성 장치에서 통상의 방법(장치 및 Milligen 9050 PepSynthesizer^TMHandbook, 1987)으로 결합시키는 단계를 거쳤다. 세척 단계는 DMF 중에서 10분 동안 수행하고, 제거 단계는 피페리딘/DMF(1:4부피)에서 5분 동안, N-말단 아세틸화(캡핑)는 무수 아세트산/피리딘/DMF(2:3:15부피)를 사용하여 15분 동안 수행하였다. 아미노산 Fmoc-Arg(Pmc), 그리고 Fmoc-Leu, 그리고 Fmoc-Ser(But), 그리고 Fmoc-Asp(OBut), 그리고 Fmoc-Leu, 그리고 Fmoc-Asp(OBut), 그리고 Fmoc-Thr(But), 그리고 마지막으로 Fmoc-Arg(Pmc)를 사용하였다. DMF 및 이소프로판올로 세척하고, 이어서 진공에서 건조시킨 후, 3.48 g의 N-말단 아세틸화 펩티딜 수지, Ac-Arg(Pmc)-Thr(But)-Asp(OBut)-Leu-Asp(OBut)-Ser(But)-Leu-Arg(Pmc)-아미노크산테닐옥시 수지를 얻었다.

이 펩티딜 수지를 트리플루오로아세트산/아니솔/디클로로메탄(74 ml/3.7 ml/74 ml)으로 실온에서 4시간 동안 처리, 여과, 진공 농축 및 디에틸 에테르로 연화(trituration)하여, 0.6 g의 펩티드, Ac-Arg-Thr-Asp-Leu-Asp-Ser-Leu-Arg-NH₂의 침전물을 얻을 수 있었다. 24% 2-프로판올에 대한 4%의 농도 구배를 사용하여 8 ml/min에서 2시간 동안 0.3% TFA 중에서 Lichrosorb RP18(250-25, 7 ㎛, Merck KGaA) 상의 RP-HPLC를 사용하여 생성물을 정제하고, 215 nm에서 UV 병류 광도계로 평가하였다.

생성물-함유 분획을 동결-건조시켰다. FAB-MS(Fast Atom Bombardment Mass Spectroscopy)에 따르면, 얻어진 생성물은 기대에 부응하였다: C₄₁H₇₃N₁₅O₁₅M 1015.5 g/mol; (M+H)⁺는 1016이었다. 0-99% A(0.08 M 인산염 pH 3.5, 15% 아세토니트릴) 내지 B(0.03 M 인산염 pH 3.5, 70% 아세토니트릴)의 농도 구배로 1 ml/min에서 50분 동안 SuperSpher RP18e (250-4, Merck KGaA) 상의 분석 HPLC 및 215 nm에서 검출에서, 정제된 생성물 Ac-Arg-Thr-Asp-Leu-Asp-Ser-Leu-Arg-NH₂는 7.22분의 보유시간을 가졌다.

하기 두 시스템에서 HPLC 분석을 더 수행하였다:

시스템 A: LichroSpher 60 RP-Select B(250-4)(Merck KGaA, Darmstadt, Germany) 상에서 1 ml/min로 50분 동안 0-80% 2-프로판올 농도 구배를 가진 0.3% 트리플루오로아세트산으로 HPLC분석 및 215 nm에서 검출.

시스템 B: SuperSpher 100 RP18e(250-4)(Merck KGaA, Darmstadt, Germany) 상에서 1 ml/min로 50분 동안 30-70% 아세토니트릴의 농도 구배를 가진 0.1% 트리플루오로아세트산으로 HPLC분석 및 215 nm에서 검출.

실시예 2

표 1에 나타낸 하기 펩티드들은 실시예 1과 유사하게 제조 및 정제하였다.

사용된 비교 화합물은 GRGDSPK, 시클로-(RGDfV) 및 선형 펩티드 DLYYLMDL과 같이 공지된 RGD 펩티드이다.

실시예 3

α _v β ₆ 인테그린 제제의 제조:

14D9.F8 항체 친화성 크로마토그래피(Mitjans et al., 1995, J Cell Sci. 108, 2825)를 사용하여, α_vβ₃에 대해 공지된 재조합 기술(Mehta et al., 1998, Biochem. J. 330, 861)에 따라 바쿨로바이러스(Baculovirus) 발현 시스템으로부터 가용성 막투과 절단된 형태(Weinacker et al. 1994, J. Biol. Chem. 269, 6940)의 α_vβ₆을 얻어서, 정제하였다. 인간 α_v및 β₆cDNA 클론들은 일반적으로 공지되어있고, 상업적으로 입수가능하다. 두 개의 다른 표적 cDNA을 동시 발현하는 전이 벡터 pAcUW31(Clontech Lab. Inc., USA)를 재조합 바쿨로바이러스 세포로부터 막투과 절단된 α_vβ₆을 발현하기 위해 사용하였다. 이를 위하여, α_v전이 벡터를 제조하고, 제한효소 EcoRI 및 XbaI를 사용하여 막투과 절단된 (△TM)α_v를 플라스미드 α_v△TM (pBAc9)로부터 잘라내고(Mehta et al. 참조), 둔단 결합으로 다면체 프로모터 하류의 pAcUW31의 BamHI 절단 부위에 클로닝하였다. 제한 효소 EcoRI 및 XbaI를 사용하여 막투과 절단된 β₆cDNA를 플라스미드 pCDNAneoβ₆로부터 잘라내고(Weinacker et al. 참조), 이와 유사하게 둔단 결합으로 다면체 프로모터 하류의 pAcUW31의 BamHI 절단 부위에 클로닝하였다. 절단된 α_v및 β₆을 포함하는 텐덤 벡터를 사용하여 재조합 바쿨로바이러스를 얻었다(Mehta et al. 참조). 재조합 바쿨로바이러스를 사용하여 하이 파이브(High Five) 곤충 세포를 감염시켰다. 48-71시간 동안 배양시킨 후에 상기 형태의 친화성 컬럼을 통해 세포 배양으로부터 상등액을 통과시키고, pH 3.1에서 용리시킴으로써 가용성 수용체를 얻었다. 모든 과정의 단계는 실온에서 어떤 세제도 없는 가운데 수행하였다. 피크 분획을 중화시키고, 농축하고, 40℃에서 투석하고, 마지막으로 -80℃에서 저장하였다. 따라서, 얻어진 재조합 가용성 인간 수용체는 생물학적으로 활성을 가지고, 이의 리간드 특이성을 유지한다. 가용성 α_vβ₃에 사용되는 유사한 제조 방법은 EP 0846 702에 기재되어 있다.

실시예 4:

α _v β ₆ /피브로넥틴 수용체 결합 실험:

본 발명에 따라 제조된 펩티드를 용액 내에서 경쟁적으로 작용하는 피브로넥틴과 함께 고정된 α_vβ₆수용체에 결합시키고, α_vβ₆에 대해 실험할 펩티드 결합의 선택성의 척도로서 Q 값을 측정하였다. 이 경우, Q 값은 실험 펩티드와 표준의 IC₅₀값의 몫으로부터 계산하였다. 사용한 표준은 선형 헵타-RGD 펩티드 GRGDSPK이었다(ref./Patent cf. Pytela et al. Science 231, 1559, (1986)).

상세하게는, 하기와 같이 결합 시험을 수행하였다:

단백질 용액을 TBS++에 희석시키고, 이어서 4℃에서 밤새 배양시켜 가용성 α_vβ₆수용체를 미세적정 플레이트에 고정시켰다(100 ㎕/well). 비-특이적 결합 부위는 TBS++에서 3%(w/v) BSA와 함께 배양시켜(2시간, 37℃) 차단하였다(200 ㎕/well). TBSA++로 3회 세척하여 과량의 BSA를 제거하였다. 펩티드를 연속적으로 TBSA++에서 희석시키고(1:10), 비오티닐화된 피브로넥틴(2 ㎍/ml)과 고정된 인테그린과 함께 배양하였다(각 웰 당 펩티드 50 ㎕ + 리간드 50 ㎕; 2 시간; 37℃). TBSA++로 3회 세척하여 결합하지 않은 피브로넥틴 및 펩티드를 제거하였다. 결합된 피브로넥틴은 알칼리성 포스파타아제-결합된 항비오틴 항체(Biorad)와 함께 배양(1 시간; 37℃)하여 검출하였다(TBSA++에서 1:20,000; 100 ㎕/well). TBSA++로 3회 세척한 후, 기질 용액(5 mg의 니트로페닐 인산염, 1 ml의 에탄올아민, 4 ml의H₂O; 100 ㎕/well)과 함께 배양하여(10-15분; 25℃, 암실에서) 비색 검출하였다. 0.4 M NaOH (100 ㎕/well)을 첨가하여 효소 반응을 중지시켰다. ELISA 측정 장치에서 405 nm에서의 색 강도를 측정하고, 0 값이 동일하게 만들었다. 수용체로 코팅되지 않은 웰들을 0 값으로 사용하였다. 사용한 표준은 GRGDSPK이었다. 실험 펩티드에 대한 IC₅₀값을 그래프로부터 읽고, 본 발명에 따른 펩티드의 Q 값은 표준 펩티드의 IC₅₀값과 함께 이로부터 측정하였다. 상기 실험의 결과는 하기 표 2에 요약하였다:

Q 값이 1보다 작다는 것은, 절대항이 이미 천연 리간드 피브로넥틴과 경쟁하여 우수한 결합을 가지는 것으로 나타나는 표준 펩티드보다 수용체에 비교적 더 잘 결합한다는 것을 의미한다.

실시예 5

상기 실시예와 유사하게, 결과를 비교하기 위해, 상이한 인테그린(예를 들어, α_vβ₃, α_vβ₅) 및 이의 대응하는 리간드(예를 들어, 비트로넥틴, 피브리노겐)와 함께 인테그린 리간드 결합 실험을 수행하였다.

실시예 6:

DNA-리포좀 복합체의 일반적인 제조 및 유전자 치료를 위한 사용:

지질 및 DNA를 Krebs-HEPES 용액(140mM NaCl, 1mM MgCl₂, 2mM CaCl₂, 6mM KCl, 10mM HEPES, 10mM D-글루코오스; pH 9.0)에서 5:1(지질:DNA)의 중량비로 혼합하였다. 여기서, 개별 투여량은 30 ㎍의 DNA/200㎕이었다. 200 ㎕의 이 지질-DNA 복합체는 펌프 분무기를 사용하여 코 상피에 투여하였다. 이것을 15분 간격으로 10회 반복하였다. DNA의 총 투여량은 300 ㎍이다.

하기 실시예들은 약제학적 제제에 관한 것이다:

실시예 A: 주사용 바이알

화학식 I의 활성 화합물 100g과 제 2인산나트륨 5g을 이차 증류수 3ℓ중에 용해시킨 용액을 2N의 염산을 사용하여 pH 6.5로 조절하고, 멸균 여과하며, 주사용 바이알에 충전하고, 멸균 조건하에 동결 건조하고, 멸균 방법으로 밀봉하였다. 활성 화합물을 5mg 함유하는 주사용 바이알을 얻었다.

실시예 B: 좌제

화학식 I의 활성 화합물 20g을 콩레시틴 100g 및 코코아버터 1400g과 함께 용융시킨 혼합물을 몰드에 붓고 냉각시켰다. 활성 화합물을 20mg 함유하는 좌제를 얻었다.

실시예 C: 액제

화학식 I의 활성 화합물 1g, NaH₂PO₄ㆍ2H₂O 9.38g, Na₂HPO₄ㆍ12H₂0 28.48g 및 벤즈알코늄 클로라이드 0.1g을 이차증류수 940㎖ 중에 용해시켜 용액을 제조하였다. 이 용액을 pH 6.8로 조절하고, 1ℓ로 채우고, 방사선으로 멸균 처리하였다. 이 용액은 점안제 형태로 사용할 수 있다.

실시예 D: 연고제

화학식 I의 활성 화합물 500mg을 무균 조건하에서 와셀린 99.5g과 혼합하여 연고제를 제조하였다.

실시예 E: 정제

화학식 I의 활성 화합물 1kg, 락토오스 4kg, 감자전분 1.2kg, 탈크 0.2kg 및 마그네슘 스테아레이트 0.1kg의 혼합물을 각 정제가 활성 화합물 10mg을 함유하도록 통상의 방법으로 압착하여 정제를 제조하였다.

실시예 F: 제피정

실시예 E와 유사하게 정제를 압착하고, 이어서 슈크로오스, 감자 전분, 탈크, 트라가칸트 및 착색제로 이루어진 제피물을 사용하여 통상의 방법으로 제피하여 제피정을 제조하였다.

실시예 G: 캅셀제

경질 젤라틴 캅셀에 화학식 I의 활성 화합물 2kg을 각 캅셀이 활성 화합물 20mg을 함유하도록 통상의 방법으로 충전하여 캅셀제를 제조하였다.

실시예 H: 앰플

화학식 I의 활성 화합물 1kg을 이차증류수 60ℓ중에 용해시킨 용액을 멸균여과하고, 앰플에 충전하고, 멸균 조건하에서 동결 건조하고, 멸균 방법으로 밀봉하였다. 활성 화합물을 10mg 함유하는 앰플을 얻었다.

실시예 I: 흡입 스프레이

화학식 I의 활성 화합물 14g을 10ℓ의 NaCl 등장액에 용해시킨 용액을 펌프 메커니즘이 장착된 통상의 스프레이 용기에 충전시켰다. 용액을 입 또는 코로 스프레이할 수 있다. 스프레이 1회 분무량(약 0.1 ml)은 약 0.14 mg의 투여량에 해당한다.

Claims (16)

1. 화학식 I의 펩티드 화합물:

   [화학식 I]

   W¹-X¹ _nArg X²Asp Leu X³X⁴Leu X⁵X⁶ _m-W²

   (상기 식에서,

   X¹, X², X³, X⁴, X⁵, X⁶는 상호 독립적으로 각각 아미노산 잔기, 상호 독립적으로 Ala, Asn, Asp, Arg, Cys, Gln, Glu, Gly, Phe, His, Ile, Leu, Lys, Met, Nle, 호모-Phe, Phg, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr 또는 Val으로 이루어진 그룹에서 선택된 아미노산, 및 유도될 수 있을 것으로 언급된 아미노산이고,

   W¹은 H 또는 Ac이고,

   W²는 OH, OR, NHR, NR₂, NH₂이고,

   R은 탄소수가 1-6인 알킬이고,

   n, m은 상호 독립적으로 각각 0-15의 수이다).
2. 제 1항에 있어서,

   상기 X²가 Thr, Ser, Asp 또는 글리신으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 잔기인 것을 특징으로 하는 펩티드 화합물.
3. 제 1항에 있어서,

   상기 X³가 Asp, Glu, Arg, Lys, His 또는 Tyr으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 잔기인 것을 특징으로 하는 펩티드 화합물.
4. 제 1항에 있어서,

   상기 X⁴가 Ser, Tyr, Thr, Gly 또는 Val로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 잔기인 것을 특징으로 하는 펩티드 화합물.
5. 제 1항에 있어서,

   제 1항에 나타난 의미를 가지는 화학식 V:

   [화학식 V]

   W¹-X¹ _nArg Thr Asp Leu Asp Ser Leu Arg X⁶ _m-W²

   로 표시되는 펩티드 화합물.
6. 제 5항에 있어서,

   화학식 VI과 같은 펩티드 화합물.

   [화학식 VI]

   W¹-X¹ _nArg Thr Asp Leu Asp Ser Leu Arg Thr X⁶ _m-1-W²
7. 약제로서의 제 1항 내지 제 6항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I 또는 II의 펩티드 화합물 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염.
8. α_vβ₆인테그린 수용체의 발현 및 병리학적 작용에 근거한 질환을 치료하기 위한 저해제로서의 제 7항에 따른 약제.
9. 혈전증, 심근경색, 관상 심장 질환, 동맥경화증, 종양, 골다공증, 섬유증, 염증, 감염, 건선을 치료하고, 상처 치료 과정에 영향을 주기 위한 제 8항에 따른 약제.
10. 하나 이상의 제 7항 내지 제 9항에 따른 약제, 및 적절하다면 비히클 및/또는 부형제, 및 적절하다면 다른 활성 화합물을 포함하는 약제학적 제제.
11. α_vβ₆인테그린 수용체의 발현 및 병리학적 작용에 근거한 질환 치료용 약제를 제조하기 위한 1항 내지 제 6항 중의 어느 한 항에 따른 펩티드 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염의 용도.
12. 제 11항에 있어서,

    혈전증, 심근경색, 관상 심장 질환, 동맥경화증, 종양, 골다공증, 섬유증, 염증, 감염, 건선을 치료하고, 상처 치료 과정에 영향을 주기 위한 약제의 제조를 위한 용도.
13. 제 1항 내지 제 6항 중의 어느 한 항에 따른 펩티드 화합물에 대응하는 펩티드 부분을 암호화하는 서열을 포함하는 재조합 DNA.
14. 제 13항에 따른 재조합 바이러스 DNA.
15. 제 1항 내지 제 6항 중의 어느 한 항에 따른 펩티드 화합물에 대응하는 서열을 가진 피막 단백질을 가지는 것을 특징으로 하는 바이러스.
16. α_vβ₆인테그린 수용체의 발현 및 병리학적 작용에 근거한 질환 치료용 약제를 제조하기 위한 제 15항에 따른 바이러스의 용도.