KR20010089781A - 콩을 이용한 탈색 및 피부 보호 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은, 변형되지 않은 콩 제품과 안정화 시스템을 포함하는 콩 제품의 국소 전달을 위한 피부 보호 조성물에 관한 것으로, 상기 안정화 시스템은 산화방지제, 킬레이트제, 또는 방부제를 포함하는 그룹으로부터 선택되는 성분을 포함한다. 본 발명은 또한 피부 질병을 치료하고 피부의 외양과 느낌을 향상시키기 위해 본 발명의 피부 보호 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다.

Description

콩을 이용한 탈색 및 피부 보호 조성물{SOY DEPIGMENTING AND SKIN CARE COMPOSITIONS}
멜라닌생성(melanogenesis)의 화학적, 효소적 기초의 이해는 대량으로 문서화되어 있다. 멜라닌 세포(melanocyte)는, 멜라닌을 생성하는 멜라노솜(melanosomes), 분비성 미립(secretory granules)을 만들기 위해 태생기 신경능선 (embryonal neural crest)으로부터 피부로 이전된다. 멜라닌생성은 멜라노솜 내에서 일어나고, 멜라닌은 그 후 멜라닌 세포 수상돌기(dendrites)를 통해서 각질 세포(keratinocyte)에 분배된다. 멜라닌생성에 있어서 주요 효소는 티로시나아제(tyrosinase)이며, 이는 티로신을 생체고분자 멜라닌으로 전환시키는 연쇄 반응(cascade of reaction)을 개시한다. 두 개의 티로시나아제 관련 단백질(TRPs)이 알려져있는데, 이는 TRP-1과 TRP-2이다. 이 단백질들은 티로시나아제와 약 40%의 상동관계(homology)를 공유하며, 멜라닌생성에서 조절(regulatory) 역할뿐만 아니라 촉매 활성도 갖는다. TRP-1은 멜라닌세포에서 가장 풍부한 글리코프로테인이다.
피부의 착색은 오랜 세월동안 사람의 걱정거리였다. 특히, 노화 반점(age spot), 기미(freckles), 또는 노화 피부에서 발견되는 것과 같은 색소과다침착(hyperpigmentation)을 제거할 수 있는 능력은 균일한 얼굴빛(complexion)을 원하는 개인들의 일반적인 관심이다. 세계의 특정 지역에서는, 일반적인 몸의 화이트닝(whitening)이 희망된다. 탈색을 이루기 위해서 많은 방법이 제안되었다. 예를 들면, 코직 산(kojic acid), 하이드로퀴논(hydroquinone), 레티노이드(retinoid), 및 다른 화학 화합물들이 탈색을 위해서 사용되어 왔다. 위의 해결책들의 대다수는 만족스럽지(acceptable) 않았음이 밝혀졌다. 종종 그러한 조성물이 적용된 피부의 영역 사이에 뚜렷한 경계선(demarcation)이 존재한다. 그러므로, 요구되는 결과를 달성하기 위해서 이러한 조성물의 정확한 적용이 필요하다. 이러한 조성물의 다수는 피부를 자극하는 것이 발견되어서 그 사용이 바람직하지 못하다.
염증 후(post-inflammatory) 과다 착색은 치료상의 개입(therapeutic interventions)과 함께 다양한 피부의 질병(cutaneous disorders)을 나타내는 빈번한 문제이다. 그러나, 잠재적 메카니즘과 염증후 과다 착색을 발달시키는 개인의다양성은 잘 알려지지 않았다. 펄스(pulsed) 레이저 치료법은 피내의(intradermal) 합성물 또는 염증후의 착색에 대해서는 효과적이지 않으며, 항상 가격이 알맞은(affordable) 것은 아니다. 하이드로퀴논과 광-스펙트럼 태양광 차단제가 일반적으로 치료후에 사용되나, 이들이 과다 착색 병변(lesions)을 완벽하게 방지하거나 제거하는 것은 아니다. 염증후 과다 착색에 대한 안전하고, 효과적이며, 적용 가능한 치료법이 몹시 요구된다. 더욱더 요구되는 것은 이러한 치료법이 일상의 피부 보호 제품에 통합되어, 더욱 건강하고 보기 좋은 피부를 만들도록 하는 것이다.
피부의 노화는 몇몇의 본질적이고 외부적인 요인의 상호작용으로부터 발생하는 복잡한 현상이다. 노화와 관련된 피부의 변화는 종종 화장용 장애로 나타난다. 심리적인 영향 때문에, 피부의 노화는 엄청난 사회적 중요성과 관심을 갖는 이슈가 되었다. 베이비 붐 시대 사람들(baby boomers)의 노화로, 미용 관리의 시대에, 미용 유지와 회춘(rejuvenation)은 점점 관심이 늘어간다. 피부 노화를 방지하고 치료하는 방법이 매우 요구된다. 본질적인 노화는 피할 수 없고, 일반적으로 진행되는 과정이다. 외부로부터의 영향(바람, 열, 담배연기, 화학물질 등) 중에서 자외선이 피부의 노화와 관련된 단독의 가장 중요한 요인인 듯 하다. 광노화(photoaging)는 자외선(UVR)에 대한 누적 노출로 인하여 유도된다. 과도한 일광욕을 포함하는 휴양시의 태양 노출의 증가와 성층권의(stratospheric) 오존의 고갈 및 다양한 피부의 질병 치료시에 UVR의 사용이 지난 10년 동안의 광노화가 더욱 널리 퍼지도록 유도하였다. 광손상(photodamage)은 태양광 차단과 적절한 태양광 보호에 의해서 방지될 수 있고 국소성 레티노이드의 사용에 의해서 되돌려질(reverse) 수 있으나이는 매우 자극적이고 고가이다. 자외선과 가시광선에 대한 과다한 노출은 햇빛에 타는 것(sunburn)을 일으킨다. 아스피린과 다른 비-스테로이드계 항 염증성 약물, 냉욕(cool baths)과 국소적인 스테로이드의 사용은 오직 고통의 경감을 제공할 뿐이다.
피부 노화를 방지하거나 혹은 되돌릴 수 있고 햇빛에 타는 것을 방지하거나 혹은 이를 완화시켜줄 수 있는 단일의 국소 치료법이 요구된다. 매일의 피부 보호를 위한 단일의 그리고 가격이 알맞은 국소 치료법으로서, 자극이나 부작용 없이 이러한 효과를 제공할 수 있고, 추가적으로 바람직한 균일한 피부 혈색을 제공하고, 피부결과 피부톤을 평탄하게 하고, 피부가 탄탄하고 건강하고, 젊어 보이도록 유도하는 치료법을 갖는 것이 더욱 요구된다.
여드름(acne)은 청소년기에 종종 일어나고 인류의 더 나이들은 어른에게 정약간 일어나는 염증성 피부의 질병이다. 여드름의 상태는 모지 소포(pilosebaceous follicle)의 면포(comedo)부터 농포(pustules), 구진(papules), 구진 낭포(cysts) 및 결절(nodules)과 같은 좀더 심한 코모-염증성(como-inflammatory) 증상까지의 피부 손상을 포함할 수 있다. 상기의 상태는 피해자에게 불편할 뿐만 아니라, 난처할 수 있고, 외관을 손상하며, 무섭게 할 수도 있다.
이러한 질병을 개선하기 위한 많은 서로 다른 접근법이 과거에 있었으며 그 중의 일부는 다른 것들보다 효과적이기도 했다. 단순한 세안과 클린싱으로부터 약제에 이르기까지의 방법들이 채용되었다.
여드름을 방지하거나 혹은 되돌릴 수 있으며, 약제학적인 조제가 필요 없는단일의 국소적 치료법이 요구된다. 매일의 피부 보호를 위한 단일의 가격이 알맞은 국소적 치료법이 더욱 요구되는데, 자극이나 부작용 없이 이러한 효과를 제공할 수 있고, 추가적으로 바람직한 균일한 피부 혈색을 제공하고, 피부결과 피부톤을 평탄하게 하고, 피부가 탄탄하고 건강해 보이도록 유도하는 치료법을 갖는 것이 더욱 요구된다.
넓적다리와 엉덩이의 피부의 요와형성(凹窩形成)(dimpling)은 일반적으로 셀룰라이트(cellulite)라고 언급되는 현상인데, 이것은 남성보다 여성에게 훨씬 자주 침범한다(affect). 셀룰라이트의 기본적인 병태생리학(pathophysiology)은 명백하게 밝혀지지 않았다. 이론적으로, 셀룰라이트는 비-침범된 개인 또는 개인의 부분과 침범된 개인의 지방질 조직(adipose tissue) 생화학 또는 연결 조직 구조에서 차이를 반영할 수 있다. 비록 여성의 넓적다리의 연결 조직이 작은 서브-피부(sub-dermal) 지방질 조직 저장소(depots)에서 차이를 강조하도록 구성되어 있지만, 지방질 조직 생리학, 혈류(blood flow), 또는 셀룰라이트의 병인(etiology)의 생화학에 대한 어떤 주된 역할의 증거는 없다. 셀룰라이트{예를 들면, 셀라센(cellasene)}를 경화시키는 것을 목적으로 하는 제품은 전 세계에 널리 팔리고 있으나, 그 효능은 의심스럽다. 금속-탐침(solid-probe) 초음파-보조 리포플라스티(lipoplasty) 기술 또는 주사 리포스컬프쳐(syringe liposculpture)와 같은 셀룰라이트를 치료하는 방법은 몸의 곡선(contouring)에 약간의 결과가 있지만 고통스럽고 고가이며, 반복적인 치료를 요한다. 셀룰라이트를 방지하거나 되돌릴수 있고 피부가 탄탄해 지도록 하여, 건강하고 젊어 보이는 피부를 만들고, 자극과 부작용이 없는 매일의 피부 보호를 제공할 수 있는, 국소적이고 가격이 알맞은 치료법이 요구된다.
본 출원인의 이미 출원된 PCT 특허 출원 WO 99/04752에서, 피부를 탈색시키기 위한 비-살균(non-pasteurized) 대두-유도 추출물이 기술되었다. 0.1% 이하의 계면활성제를 함유하고, 더 큰 피부 탈색 활성도를 갖고 제조하기에 덜 비싼, 콩 제품을 함유한 새로운 안정적이고 미용학상 우월한 조성물을 본 출원인이 새롭게 발견하였다. 예기치 않게 대두-함유 조성물이 노화방지 활성을 갖는다는 것이 발견되었는데, 이 조성물은 피부의 탄력과 탄탄함을 증가시키고, 태양 광에 의한 손상과 여드름의 치료와 방지에 유용하다.
본 발명은 탈색시키고, 피부 톤과 피부 결을 매끄럽게 하며, 피부를 탄탄하게 하고, 피부 보호에 사용될 수 있는 변성되지 않은(non denatured) 콩 제품을 함유한 조성물에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 균일한 톤과 색을 갖는 피부를 만들고 피부의 탄력을 증가시키며, 피부의 노화를 줄이고 피부를 탄탄하게 하며 피부의 젊음을 증진시키는 탈색을 하고, 태양광에 의한 피부의 손상을 방지 및 치료하며, 셀룰라이트(cellulite)의 치료에 의해 여드름(acne)을 방지 및 치료하고, 번들거림을 제어하며, 심미적으로 만족스런 피부 감촉을 유도하기 위한 대두(soybean) 함유 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다.
도 1은, 콩밀크가 트립신, PAR-2 분열(cleavage), 각질세포 식작용(keratinocyte phagocytosis)을 억제할 수 있는 것을 증명하는 세 개의 그래프.
도 2는, 콩 제제로 처리되고 안료 침착(pigment deposition)을 증명하기 위해 착색된 돼지 피부의 조직학적 부분도.
도 3은, 콩밀크(soymilk)와 DHLA 제제로 처리된 검정 피부를 가진 돼지의 옆구리 사진.
도 4는, 콩밀크로 처리되고 엘라스틴(elastin) 섬유를 나타내기 위해 착색된 쥐 피부의 조직학적 부분도.
도 5는, 얼굴 절반이 콩밀크로 처리된 후 태양에 과도하게 노출된 사람의 얼굴 사진.
도 6은, 얼굴 절반이 콩밀크로 처리된 후 태양에 과도하게 노출된 사람의 피부 확대도.
도 7은, 여드름발생도(acnegenicity)와 자극도(irritancy)를 그래프 형태로 나타내기 위한 결과도.
도 8은, 대두 트립신 억제제(Soybean Trypsin Inhibitor, STI)를 조사하기 위한 콩 제제의 특수단백 검출검사(Western blot)를 도시하는 도면.
본 발명은 콩(soy) 제품(예: 단백질 변성이 되지 않은 콩밀크 또는 분말)을 포함하는 콩 제품을 인간과 같은 포유동물 등에 국소적으로 전달(delivery)하기 위한 피부 보호 조성물 및 산화방지제, 킬레이트제, 또는 방부제로 구성된 그룹에서 선택된 하나 이상의 요소를 포함하는 안정화 시스템에 관한 것이다. 바람직하게는, 본 발명의 조성물은 약 0.1%를 초과하여 계면활성제를 포함하지 않는다. 한편, 상기 조성물은 탈색제(depigmenting agent), 농축제(thickening agent), 완화제, 산화방지제 또는 태양광선 차단제와 같은 하나 이상의 다른 피부-관련 활성제를 더 포함할 수 있으나 이에 한정되지는 않는다.
본 발명은, 또한 포유동물의 피부를 탈색시키기 위한 방법에 관한 것으로, 상기 방법은 상기 조성물을 피부(skin)에 도포하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 피부를 보호하기 위한 향상된 방법에 관한 것이다. 콩밀크(soymilk) 또는 콩-유도체 조성물을 피부에 도포하면, 피부의 탄탄함, 탄력성(elasticity), 심지어 피부톤 및 피부결(texture)이 향상되고, 피부 노화가 감소되며, 태양에서 유도되는 손상 및 여드름(acne)이 예방되고 치료되는데 유용함이 알려졌다. 본 발명은 피부 보호에 유용한 콩-유도체 조성물의 예를 제공한다.
본 발명의 다른 특성 및 장점은 발명의 상세한 설명과 특허청구범위로부터 명백히 알 수 있을 것이다.
본 발명의 당업자라면 본 발명의 상세한 설명에 기초하여 본 발명을 완전히 실시할 수 있을 것이다. 하기의 구체적인 실시예는 단지 일 예로서 기재한 것으로서, 본 발명의 사상을 한정하는 것은 아니다. 본 발명의 명세서에서 정의하지 아니한 기술적, 과학적 단어들은 본 발명이 속한 분야의 보통의 당업자가 통상적으로 이해할 수 있는 것이다. 또한, 본 발명에서 언급되는 모든 공보, 특허 출원서, 특허 및 다른 참고자료는 본 발명의 참고 자료로 병합되었다.
본 발명에 따른 신규의 조성물은 콩과(legume) 제품, 바람직하게는 콩 제품을 포함하며, 상기 제품은 유체(예: 콩밀크)나 고체(예: 대두 분말 또는 콩밀크 분말)의 형태일 수 있다. "콩 제품"이란 콩에서 발견되는 상대적인 농도 조건에서, 대두에서 자연적으로 발견되는 성분을 포함하는 대두-유도 물질을 말한다. 일 실시예에서 콩 제품은 인공 처리되지 않은 콩 제품이다. "변성(denaturation)"이란 반탐 의학 사전(1990년 판)에 의하면, "열, X-선 또는 화학약품에 의해 단백질의 물리적(physical) 및 생리학적(physiological) 특성의 변화"를 의미한다. 상기 변화는 (효소가 있는 경우) 활성도 감소와 (항원에서의) 항원의 반응성(antigenicity)의 감소(또는 변경)를 포함한다. "변성이 되지 않은(non-denatured) 콩 제품"은 조성물에 기초하여 액체를 형성하기 위하여 (예컨대 크림, 로션, 주사 가능한 용액이나 젤을 형성하기 위하여) (예컨대 콩밀크 내에서) 그러한 콩 제품을 유도하는 과정을 포함하는 콩 제품을 말한다. 상기 조성물은 약 50 질량% 부터 약 98 질량% 까지(예: 약 70 질량%부터 약 98 질량% 까지)의 물을 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 국소적으로(topically), 경구적으로(orally), 또는 비경구적(parenterally)으로 전달될 수 있으나, 상기 투여 방법들에 한정되지 않는다.
본 발명에서 유용한 콩 제품은 지리적 기원, 태양 노출정도, 수확 시기 등에 관계없이 모든 대두 종으로부터 생성될 수 있을 것이다. 그러나, 특정한 스트레인(strain), 지리적 기원 또는 성장 조건이 더 바람직할 수 있다. 예를 들면, 제한되지는 않지만, 특히 트립신 억제제(예: STI, LTI, BBI)가 풍부한 대두 스트레인이나 다른 콩류 스트레인, 또는 콩에서 트립신 억제제가 풍부하도록 하는 성장 조건이 바람직할 수 있다. 본 발명의 조성물에 유용한 콩과 제품은 특유의 냄새를 갖고 있는데, 상기 냄새는 특정 문화에서는 허용될 수 있으나, 다른 문화에서는 바람직하지 않을 수 있음을 알아야 한다. 따라서 만약 필요하다면, 본 발명에 따른 조성물의 냄새는 리폭시게나아제-2가 결핍된(lipoxygenase-2-deficient) 콩 및 변형된 당류 프로파일(sugar profile)을 함유하는 콩 등을 포함하지만, 이에 한정되지 않는 감소된 냄새를 생성하는 것으로 알려진 대두의 특정 스트레인에서 유도된 대두 제품을 사용함으로써 감소될 수 있다. 제제 내에서의 산소 레벨을 감소하는과정 역시 냄새를 감소시킬 수 있다. 또한 다양한 차폐제(masking agent) 또는 방향제가 상기 냄새를 차폐하기 위해 사용될 수 있다.
일 실시예에서, 본 발명에 따른 조성물은 하나 이상의 방부제를 포함한다. 본 발명에 따른 조성물이 변성되지 않았기 때문에(즉, 프로테아제 억제제 활성도가 유지되는 조성물), 미생물(microbial) 성장의 배지(medium)로서 더욱 선호될 수 있다. 방부제는 실질적으로 미생물의 분해작용(decomposition)을 방지하는데 유용하다. 방부제는 예를 들면, 메틸-파라벤, 에틸-파라벤 및 프로필-파라벤과 같은 파라벤 및 페녹시 에탄올을 포함한다. 방부제의 다른 예들은, 웨닝거 및 멕웬의 국제 코즈메틱 성분 사전 및 핸드북(CTFA, 7판, 1997년)(이하, "코즈메틱 핸드북"이라 한다)의 1654-55 페이지에 기재되어 있다. 조성물은 약 0.01 중량%로부터 약 20 중량%까지(더욱 바람직하게는. 약 0.5 중량%로부터 약 5 중량%)의 방부제를 포함할 수 있다. 또한 미생물적 오염은 감마 조사(gamma irradiation) 또는 마이크로 필터레이션 또는 프로테아제 억제 활성을 제거하지 않는 간단한 열처리에 의해 제거될 수 있다.
산화방지제 및/또는 킬레이트제는 조성물의 저장 수명(shelf life) 및 안정도를 증가시키는데 이용될 수 있다. 산화방지제는 제제 안정화 및 생물학적 효능(efficacy) 모두를 위해 첨가될 수 있다. 산화방지제 화합물 및 이들의 유도체는 설프하이드릴 화합물 및 이들의 유도체[예: 소듐 메타비설파이트(sodium metabisulfite) 및 N-아세틸-시스테인], 리포익산 및 디하이드로리포익산, 레스버라트롤(resveratrol), 아세틸-시스테인(등록상표 Iniferine) 또는 락토페린 및 아스코르브산 및 아스코르브산 유도체(예: 아스코르빌 팔미테이트 및 아스코르빌 폴리펩티드)와 같은 수용성 산화방지제를 포함하나 이들에 한정되지 않는다. 본 발명에 따른 조성물에 사용하기 적합한 지용성 산화방지제는 부틸화된 하이드록시톨루엔, 레티노이드(예: 레티놀 및 레티닐 팔미테이트), 토코페롤(예: 토코페롤 아세테이트), 토코트리에놀 및 우비퀴논(ubiquinone)을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 본 발명에 따른 조성물에 사용하기 적합한 산화방지제를 포함하는 자연 추출물은 플라보노이드와 이소플라보노이드 및 이들의 유도체(예: 게니스테인 및 다이아드제인을 함유하는 추출물, 레스버라트롤 등을 함유하는 추출물을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 이러한 자연 추출물의 예는, 포도 씨, 녹차, 소나무 껍질(pine bark), 프로폴리스 및 콩과 추출물을 포함한다. 다른 산화방지제의 예들은 코즈메틱 핸드북 1612-13 페이지에서 발견할 수 있을 것이다. 본 발명에 따른 조성물은 약 0.001 중량%로부터 약 20 중량%까지(예: 약 0.01 중량%로부터 약 10 중량%까지)의 조성물의 양으로 산화방지제를 포함할 수 있다.
킬레이트제(chelating agent)는 본 발명의 조성물의 안정화를 보조하는 데 있어서도 유용하다. 킬레이트제의 예로는 EDTA와 그의 유도체(예를 들어, 2 나트륨 EDTA와 2칼륨 EDTA), 이니페린{Iniferine(등록상표)}, 락토페린(lactoferrin), 및 구연산(citric acid)을 포함한다. 킬레이트제의 다른 예는 Cosmetic Handbook의 1626쪽에 등재되어 있다. 본 발명의 조성물은 약 0.001 중량% 내지 약 20 중량%(예를 들어, 약 0.01중량% 내지 약 10중량%)의 양으로 킬레이트제를 포함할 수 있다.
농축제(thickening agent)(예를 들어, 농축제 또는 점도 증가제)는 본 발명의 조성물에서 그 점도를 변경시키는데 사용될 수 있다. 본 조성물의 바람직한 점도는 의도하는 용도{예를 들어, 목욕용품(bath product), 크림, 로션, 또는 젤}에 따라 달라진다. 예를 들어, 목욕용품이나 세척용품으로 사용할 때, 본 조성물의 점도는 수용액의 점도과 비슷하게 비교적 낮아야한다. 크림, 로션, 또는 젤로 사용할 때의 점도는 약간 더 높을 것이다(예를 들어, 약 100cps와 약 100,000cps 사이).
점도를 변경시키기 위해 본 발명의 조성물에 첨가할 수 있는 농축제는 폴리아크릴레이트(예를 들어, 폴리아크릴아미드)와 같은 중합체를 포함한다. 그 밖의 점도를 변경시키는 제제의 예는 Cosmetic Handbook의 1692쪽 내지 1697쪽에 등재되어 있다. 적당한 점도를 얻기 위해서, 본 발명의 조성물은 농축제를 약 0.01중량% 내지 약 20중량%(예를 들어, 약 0.1중량% 내지 약 5중량%)를 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 콩 제품에 더하여 다른 탈색제도 포함할 수 있다. 그러한 탈색제의 예로는 리포익산(lipoic acid), 디히드로리포익산(dihydrolipoic acid), 레스베라트롤(resveratrol), 아스코르브산(ascorbic acid), 코직산(kojic acid), 하이드로퀴논(hydroquinone), 이소플라본(isoflavones), 레티노이드(retinoids){예를 들어, 레티놀(retinol), 레티노익산(retinoic acid) 및 레티닐 팔미테이트(retinyl palmitate)}, 티로시나제 억제제(tyrosinase inhibitors), 멜라노좀 전이 억제제(melanosome transfer inhibitors) 및 멜라닌 생성 세포(melanocytes)에 대한 선택적 세포 독성제(cytotoxic agent) 또는 이러한 효과를 포함하는 천연 추출물을 포함하나, 이에 국한되지는 않는다. 사용되는 탈색제의 양은 화합물의 활성에 따라서 달라질 것이며, 일반적으로는 조성물의 중량으로 약 0.001% 내지 약 20%(예를 들어, 약 0.01중량% 내지 약 10중량%)일 것이다.
본 발명의 조성물은 사용자의 피부에 닿는 조성물의 느낌을 향상시키는 화합물을 포함할 수도 있다. 그러한 화합물의 예로는 오일, 실리콘(silicones){예를 들어, 디메티콘(dimethicone)과 같은 실록산 중합체(siloxane polymer)} 그리고 연화제(emollients) 및 보습제(humectants)와 같은 피부 컨디셔닝제(skin-conditioning agents)를 포함할 수 있으나, 이에 국한되지는 않는다. 이러한 피부 컨디셔닝 제제의 예는 Cosmetic Handbook의 1656쪽 내지 1670쪽에서 찾을 수 있다.
본 발명의 조성물은 유리하게 카페인(caffeine), 레티놀 및 다른 레티노이드류와 같은 다른 셀룰라이트 억제제도 포함할 수 있으나, 이에 국한되지는 않는다. 물론, 코르티코스테로이드(corticosteroid)와 같은 항염증제, 항소양제, 국소진통제, 벤조일 퍼옥사이드(benzoyl peroxide)와 같은 여드름 억제제와 살리실산(salicylic acid)과 같은 베타-히드록시산(beta-hydroxy acid)과 같은 여드름 억제제, 레티노이드, 레티놀, 알파 히드록시산(alpha-hydroxy acid), 코엔자임Q(co-enzyme-Q) 등을 포함하는 노화방지제품, 미코나졸(miconazole), 케토코나졸(ketoconazole), 에루비올(elubiol), 이트라코나졸(itraconazole)을 포함하는 항생제(antibiotics) 및 항진균제(antimycotics) 및 광택조절제품(shine-control products)과 그밖에 당 업계의 일반적 기술을 가진 사람들에게 알려진 제품 등 피부에 활성을 가질 수 있는 그 밖의 국소 제제가 본 발명의 조성물에 혼합될 수 있고, 본 발명의 방법으로 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 적절한 성분을 혼합함으로써 제조될 수 있다. 예를 들어, 콩밀크(soymilk)는 킬레이트제, 방부제 및/또는 산화방지제와 혼합된다. 그 후 농축제가 이 시스템에 첨가되고 혼합물은 적절한 점도로 균일하게 될 때까지 추가적으로 혼합된다. 본 발명의 조성물은 제제(formulation)의 안정도 향상 및/또는 대두의 냄새를 줄이기 위해 아르콘 또는 질소(또는 그 밖의 불활성기체) 블랭킷(blanket) 하에서 제조될 수 있다. 본 발명의 조성물은 튜브, 씰링된 패킷(sealed packet), 단지(jar), 펌프(pump), 병(bottle), 캔(can), 가제(pledget), 타월렛(towelet), 와이프(wipe) 등에 포장될 수 있다. 알루미늄 튜브, 알루미늄 포켓(pocket), 펌프, 라미네이트 튜브와 같은 밀폐된 패키지(package)도 제품의 안정도를 추가적으로 향상시키기 위해 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 포유류(예를 들어, 사람)의 피부를 탈색시키는 데 사용될 수 있다. 탈색이 의미하는 바는 피부 부위의 색을 밝게 한다는 것으로, 사용자의 피부 톤/안색(예를 들어, 얼굴, 손, 피부 노화로 인해 피부색이 균일하지 않은 몸 전체 또는, 인종적 또는 병 등 때문에 원하는 것보다 어두운 몸 전체)을 전반적으로 밝게 하고, 피부 색 톤을 고르게 하며, 노화로 인한 반점, 주근깨, 제한되지 않지만 염증 후의 색소 과침착 병변(post-inflammatory hyper-pigmentary lesions)과 같은 보다 어두운 착색 부위를 특정하게 밝게 하는 것을 포함하고, 이에 국한되지는 않는다.
본 발명의 조성물은, 감소된 피부 기름기와 광택을 일으키는 사람의 피부를 치료하는데 사용될 수 있다는 것이 예상치 않게 발견되었다. 목욕 첨가제로 또는 와이프(wipe)에 첨가되어 사용되는 것을 포함해서 피부에 국소 도포되었을 때, 프로테아제 억제 활성을 포함하는 콩-함유 조성물을 포함하지만 이에 국한되지는 않는 본 발명의 조성물은 얼굴 피부의 기름기와 광택을 줄여준다. 바람직한 일 실시예에서, 조성물은 사용자가 바람직한 효과를 원하는 한 적어도 하루에 한번씩 매일 바를 수 있다.
본 발명의 조성물은 여드름을 예방하거나 치료하는 데 사용될 수도 있다. 본 발명의 조성물은 피부의 외관을 개선하고 질병을 치료하는 것을 증명할 수 있도록 일정 기간 동안 바람직하게는 적어도 약 45일간 바람직하게는 하루에 2번 바를 수 있다. 그러나, 개인의 피지선(sebaceous gland) 활성에 따라, 적어도 약 2주 내지 약 4주 동안 본 조성물을 도포하는 것이 질병의 개선 또는 예방을 제공해야 하는 것으로 생각된다.
다른 실시예에서, 본 발명의 조성물에 국한되지 않는 프로테아제 억제 활성을 포함하는 콩 제품이 목욕 첨가제로 또는 패치제에 함유되어 사용되는 것을 포함하여 피부에 국소적으로 사용되었을 때, 사용자에게 진정, 상쾌함, 및/또는, 이완 효과와, 미적으로 만족스러운 피부 느낌을 주는데 도움을 준다는 것을 발견하였다. 도포되는 조성물의 양과 도포 빈도는 조성물(예를 들어, 콩밀크) 내의 콩 약제의 농도, 치료되는 피부 부위의 상태, 그리고 원하는 효과에 따라 달라질 것이므로, 궁극적으로는 조성물을 사용하는 사용자가 결정하게 될 것이다. 일 실시예에서 본 조성물은 사용자가 바람직한 효과를 원하는 한 적어도 하루에 한 번씩 매일 바른다.
게다가, 태양에 과다하게 노출된 후 사람 피부에 콩밀크를 바르면, 태양에의한 화상으로 생기는 통증이나 작열감을 경감시켜주고, 피부가 벗겨지는 것을 줄여준다는 것을 예상치 않게 발견하였다. 본 발명은 태양에 의한 화상 또는 태양에 과다하게 노출된 후 진정, 상쾌함 및 통증 경감 효과를 위한 방법을 제공한다. 본 방법은 사용자가 바람직한 효과를 원하는 한 적어도 하루에 한 번씩 매일 국소 도포를 하는 것으로 이루어져 있고 프로테아제 억제 활성을 함유하는 조성물을 포함하는 콩밀크로 이루어져 있다.
다른 실시예에서, 콩밀크를 사람 피부에 미리 도포하면(예를 들어, 목욕 첨가제로 사용되어 국소 도포를 함) 태양이 유발하는 손상을 막을 수 있었다는 것이 예상치 않게 발견되었다. 콩밀크를 도포한 후 태양에 과다한 노출을 한 피부는 같은 사람의 도포하지 않은 피부처럼 붉어지고, 벗겨지며, 건조해지고, 통증이 생기지 않았다. 본 발명은 과다하게 태양에 노출된 후 피부의 벗겨짐, 붉어짐, 통증 발생을 막기 위한 방법을 제공한다. 본 방법은 사용자가 바람직한 효과를 원하는 한 적어도 하루에 한 번씩 매일 국소 도포를 하는 것으로 이루어져 있고 프로테아제 억제 활성을 함유하는 조성물을 포함하는 콩밀크로 이루어져 있다.
그러므로, 콩밀크와 그 유도체는 탄력성, 태양에 과다 노출로 인한 피부 벗겨짐/붉어짐/통증 방지, 태양 노출/태양에 의한 화상 후, 상쾌함, 목욕용, 탈색, 피부의 톤과 조직을 고르게 함, 염증이 있은 후의 색소 과침착, 여드름 및 셀룰라이트를 포함하는 피부 보호 특성을 제공할 수 있다.
여기에서의 실시예에 의해 명시되었듯이, 콩밀크를 국소적으로 사용함으로써 도포한 피부의 탄력성이 증가하게 되는 사실을 예상치 않게 발견하였다. 그러므로,프로테아제 억제 활성을 포함하는 콩류 추출물과 특히, 콩밀크와 대두 처방에 대하여 적절히 국소 사용을 하면, 엘라스틴과 콜라겐 섬유질, 그리고 피부 탄력 특성에 영향을 미쳐 피부의 탄력과 탄탄함(firming)이 증가되게 된다. 본 발명과 우리의 이전 발명(PCT 특허출원 WO99/04752)의 조성물에 국한되지 않는, 프로테아제 억제 활성을 포함하는 콩 제품을 국소 도포하면 피부가 탄탄하게되고, 피부 탄력이 증가하며, 항 노화 효과를 얻고, 미적으로 만족스러운 피부 느낌이 유도된다는 것을 예상치 않게 발견하였다. 본 발명은 피부의 탄탄함과 피부의 탄력을 증가시키고, 피부 노화 징후를 감소시키는 방법을 제공하는데, 몸 전체 부분, 바람직하게는 얼굴, 상체 및 넓적다리와 엉덩이 피부에 유용하다. 본 방법은 사용자가 바람직한 효과를 원하는 한 적어도 하루에 한번씩 매일 국소 도포를 하는 것으로 이루어져 있고 프로테아제 억제 활성을 함유하는 조성물을 포함하는 콩밀크로 이루어져 있다.
다음의 실시예는 본 발명의 조성물에 대한 몇 가지 실시예를 설명하고 있다. 그것들은 어떤 방법으로도 본 발명의 범위를 제한하거나 한정하는데 사용되어서는 안된다.
실시예 1 : 대두분말로부터 두유의 제조
대두분말(대만, 타이페이의 Sunlight Foods로부터 구입 가능한) 160g을 탈이온화된 물 약 1440g에 첨가한다. 상기 혼합물을 실온에서 약 1시간 동안 교반한다. 그 후 상기 혼합물을 직경 75㎛의 구멍을 갖는 체(sieve)로 거른다. 여과하면 약 1.1 kg의 콩밀크가 얻어진다.
실시예 2 : 콩밀크로부터 콩밀크 젤의 제조
본 발명의 후술하는 조성물은 다음과 같이 제조된다. 조성물에서 각 성분의 중량%는 아래에 있는 표 1 및 표 2에 나타나 있다. 우선, 실시예 1에서 제조된 콩밀크를 첫 번째 비커에 넣는다. 등록상표 페노닙(Phenonip)(델라웨어주, 윌밍턴의 NIPA로부터 구입가능한 방부제 메틸-파라벤, 프로필렌-파라벤, 에틸-파라벤 및 페녹시-에탄올의 혼합물)으로 판매되는 방부제 또는 방부제 페녹시에탄올을 상기 콩밀크에 첨가한다. 다음으로, 킬레이트제 디소듐 EDTA(Disodium EDTA) 및 여러 실시예에서의 습윤제 글리세린을 첫 번째 비커에 넣고 콩밀크와 혼합한다. 사이클로메티콘(Cyclomethicone), 또는 디메티콘(상표명 Dow Corning 200 Fluid), 또는 폴리소르베이트 20(Polysorbate 20), 또는 알루미늄 스타치 옥틸 석씨네이트(Aluminum Starch Octyl Succinate), 또는 수크로스 코코에이트(Sucrose Cocoate), 또는 PEG-6 카프릭/카프릴릭 트리글리세라이드(PEG-6 Capric/Caprylic Triglycerides)를 표 1 및 표 2에서의 여러 실시예에서 요구되는 본 단계에서 콩밀크 혼합물에 추가로 첨가하는 것이 또한 가능하다. 농축제 폴리아크릴아미드(polyacrylamide), 라우레스-7(laureth-7) 및 C13-14이소파라핀(C13-14isoparaffin)(등록상표 Sepigel로 프랑스 파리의 Seppic으로부터 구입 가능한)을 산화방지제 BHT와 함께 두 번째 비커에 넣는다. 그 후 두 번째 비커에 있는 성분들을 첫 번째 비커의 성분들에 첨가하고 균일해 질 때까지 혼합한다. 그런 다음 산화방지제 아스코르브산(ascorbic acid), 소디움 아스코르빌 포스페이트(sodium ascorbyl phosphate), 락토페린(lactoferrin), 또는 토코페롤(tocopherol)을 비커에 첨가하고 최종 젤을생성하기 위해 균일하게 혼합된다.
실시예3: 대두 분말, 콩밀크 분말 또는 대두 추출물로부터 콩밀크 젤의 제조
본 발명의 후술하는 조성물은 다음과 같이 제조된다. 조성물에서 각 성분의 중량%는 아래에 있는 표 2에 나타나 있다.우선, 콩밀크 분말(LA Carroll의 Devansoy Farms로부터 구입 가능한) 또는 대두분말(대만, 타이페이의 Sunlight Foods로부터 구입 가능한) 또는 대두 추출물과 탈이온화된 물을 첫 번째 비커에 두고 콩 분말을 재구성하기 위해 혼합한다. 그 후 등록상표명 페노닙(Phenonip)으로 판매되는 방부제와 킬레이트제 디소듐 EDTA를 첫 번째 비커에 첨가하고 콩밀크와 혼합한다. 폴리아크릴아미드, 라우레스-7 및 C13-14이소파라핀 혼합물을 산화방지제 BHT와 함께 두 번째 비커에 넣는다. 그런 다음, 두 번째 비커에 있는 성분들을 첫 번째 비커의 성분들에 첨가하고 균일해 질 때까지 혼합한다.
대두 에센스
1 6 8 21 23
콩밀크(Soymilk) 87.42% 89.04% 96.09% 96.05% 95.70%
페녹시에탄올(Phenoxyethanol) 0.73%
페녹시에탄올과 파라벤(Phenoxyethanol and Parabens) 1.00% 1.00% 1.00% 1.00%
글리세린(Glycerin) 2.50% 2.50%
시클로메티콘(Cyclomethicone) 2.00%
알루미늄 전분 옥틸 쑥시네이트(Aluminum Starch Octyl Succinate) 0.75%
수크로스 코코에이트(Sucrose Cocoate) 1.00% 1.00%
PEG-6 카프릭/카프릴 트리글리세리드(Capric/Caprylic Triglycerides) 3.00% 3.00%
디소듐 EDTA 0.10% 0.10% 0.05%
폴리아크릴아미드/라우레쓰(Laureth)-7/C13-14이소파라핀 2.50% 2.75% 2.90% 2.90% 3.20%
아스코르브산 0.01%
부틸화 하이드록시톨루엔(Butylated Hydroxytoluene) 0.10% 0.01% 0.05% 0.05%
폴리소르베이트(Polysorbate) 20 0.50%
총계 100% 100% 100% 100% 100%
24 26 27 28 33 34 35
콩밀크 94.40% 92.40% 90.70% 94.70%
페녹시에탄올과 파라벤 1.00% 1.00% 1.00% 1.00% 1.00% 1.00% 1.00%
글리세린 5.00%
디소듐 EDTA 0.05% 0.05% 0.05% 0.05% 0.05% 0.05% 0.05%
폴리아크릴아미드/라우레쓰-7/C13-14이소파라핀 3.50% 3.50% 3.20% 3.20% 3.20% 3.20% 3.20%
아스코르브산 1.00%
부틸화 하이드록시톨루엔 0.05% 0.05% 0.05% 0.05% 0.05% 0.05% 0.05%
탈이온수(Deionized Water) 90.70% 90.70% 85.70%
락토페린(Lactoferrin) 1.00% 1.00%
토코페롤(Tocopherol) 1.00%
다우 코닝 200 유체(Fluid) 1.00%
콩밀크 분말 5.00%
에탄올/물 혼합물을 이용한 대두 추출물 5% 10%
총계 100% 100% 100% 100% 100% 100% 100%
실시예 4 : PAR-2 경로를 방해하는 콩밀크
본 출원인의 특허출원 WO 99/04752에서는 염색에서의 PAR-2경로에 대한 중요성을 기술하고 있고, 또한 대두에 의해 유도된 프로테아제(protease) 억제제 STI는 상기 경로를 방해하고 탈색을 일으킨다는 것을 기술하고 있다. 게다가, 출원인의 특허출원 WO 99/30729는 각질세포 식작용을 유도하는데 있어서 PAR-2경로의 역할과 멜라노좀 전이(melanosome transfer) 및 염색에 대한 PAR-2경로의 영향을 기술하고 있다. PAR-2 유도된 식작용을 억제함으로써 콩밀크가 탈색을 일으킬 수 있는 가능성을 테스트하기 위해, 후술하는 실험이 행해졌다. 먼저, STI 및 콩밀크는 복용 의존 방법(dose-dependent manner)(도 1a)으로 형광성의 카제인 펩티드(casein peptide)의 트립신에 의해 유발된 분열(trypsin-induced cleavage)을 억제함으로써 세린 프로테아제 억제제로 작용하는 것으로 보인다. 총 프로테아제 활성은, 후술하는 제조자의 지시(분자 탐침)인 EnzChek(등록상표) 프로테아제 에세이 키트를 사용하여 측정한다. STI 및 콩밀크는 PBS(Life Technologies)에 희석되고 PBS에서 제조된 트립신 1000 단위를 가진 1:1(v/v)에서 배양된다. BODIPY 형광 카제인 배양기를 사용하여 실온에서 1 시간 동안 배양한 다음, 형광성은 등록상표 SoftMax Pro 3.0 소프트웨어(Molecular Devices Corporation)를 사용한 등록상표 SpectraMax Gemini microtiter plate reader(Molecular Devices Corporation)상에서 측정되었다(여기 505/방사 515). 각 실험은 6개의 리플리케이트(replicates)에서 수행되었고 세 번 반복했다. STI 및 콩밀크에 의한 기질의 트립신 분열의 억제 백분율(percent inhibition)은 마이크로소프트 엑셀을 사용하여 계산하였고 시그마 플롯(Sigmaplot)으로 그래프를 그렸다. 도 1a에서 알 수 있는 바와 같이, 콩밀크는 복용 응답 방법(dose response manner)으로 트립신에 기인한 분열을 억제할 수 있다.
두 번째 실험에서, 유사한 에세이가 PAR-2 분열에 대한 콩밀크의 특정한 억제 가능성을 테스트하기 위해 고안되었다. 상기 에세이에서 human PAR-2인 SKGRSLIGK(유사한 에세이가 다음의 책에 기재되어 있다: Lourbakos A, Chinni C, Thompson P, Potempa J, Travis J, Mackie EJ, Pike RN의 "포르피로모나스 진저발리스로부터 진저페인-R에 의한 휴먼 뉴트로필상에서의 프로테이나제-활성된 리셉터-2의 분열과 활성" FEBS Lett 435: 1, 45-8, 1998년 9월 11일)의 분열 위치를 포함하는 합성 형광 펩티드는 기질로서 트립신을 카제인 펩티드로 대체한다. 펩티드는 플루오로포어 페어 에단스/대브실(캐나다 몬트리올의 Advanced Bioconcept로부터 구입 가능한)로 라벨이 붙여져 있고, PAR-2 세린 프로테아제 활성화제를 위한 기질로 사용된다. 트립신과 같은 PAR-2 활성화제를 가진 상기 펩티드의 분열은 형광성으로 감지되어질 수 있다(여기 335/ 방사 515). STI 또는 콩밀크에 의한 트립신으로 야기된 PAR-2 펩티드 분열의 억제는 트립신[100mM TRIS (hydroxymethyl) 아미노메탄 완충제, pH 8.0, Digene, Beltsville, MD에서] 10 단위를 가지고, 시험물질은 가지거나 가지지 않고, 100 마이크로몰 펩티드를 빛이 차단된 실온에서 1 시간 동안 배양함으로써 측정된다. 형광성은 등록상표 SoftMax Pro 3.0 소프트웨어(Molecular Devices Corporation)를 사용한 등록상표 SpectraMax Gemini microtiter plate reader(Molecular Devices Corporation)상에서 측정되었다. 각 실험은 6개의 리플리케이트(replicates)에서 수행되었고 세 번 반복했다. 트립신분열의 억제 백분율(percent inhibition)은 마이크로소프트 엑셀을 사용하여 계산하였고 시그마 플롯(Sigma plot)으로 그래프를 그렸다. 도 1b에서 알 수 있는 바와 같이, 트립신에 의한 상기 PAR-2 펩티드의 분열은 STI 존재 하에서 완전히 억제되었다. 상기 트립신으로부터 야기된 PAR-2분열(도 2b)을 억제하기 위한 능력을 가진 콩밀크는, STI와 유사하게 대두 추출물이 PAR-2활성을 억제할 수 있음을 시사한다.
콩밀크가 PAR-2에 의해 유도된 각질세포 식작용을 저해할 수 있다는 가능성을 조사하기 위하여, 우리는 바이브란트 식작용 분석법[Vybrant(상표) Phagocytosis Assay](Molecular Probes)을 사용하였다. HaCaT 각질세포를 SLIGRL, 펩타이드를 활성화시키고 STI 또는 콩밀크의 농도를 증가시키는 PAR-2로 24시간 동안 처리한 후, 100 ㎕의 형광-표지된 E.coli K-12 생물입자(bioparticles)를 4시간 동안 배양하였다. 섭취된 E.coli 입자를 나타내는 세포내 형광도를, 흡수되지 못한 형광을 트리판 블루로 억제(trypan blue quenching)한 후 측정하였다. SpectraMax(등록상표) Gemini 미세적정 플레이트 판독기(microtiter plate reader)(Molecular Devices Corporation, Sunnyvale, CA)를 이용하여 형광도를 측정(485nm 여기/538nm 방출)하였다. Softmax(등록상표) Pro 3.0 소프트웨어(Molecular Device Corporation)를 이용하여 데이터를 수집하였고, SigmaPlot(등록상표) 5.0(SPSS Science, Chicago, IL)과 SigmaStat(등록상표) 2.0(SPSS Science) 소프트웨어를 이용하여 이를 분석하였다. 6개의 리플리케이트(replicates)에서 각 실험을 수행하였고, 이를 적어도 세 번 반복하였다. 도 1c에 나타나 있는 바와 같이 SLIGRL은 각질세포 식작용을 증가시켰고, STI는 투여량에 의존하는 방식으로 이러한 증가를 방해하였다. 흥미롭게도, 신선하게 제조된 콩밀크는 각질세포에서 식작용을 일으키는 SLIGRL을 비슷한 정도로 억제할 수 있었다. 이들 세 실험은 콩밀크가 PAR-2 활성화를 억제하여 결국 각질세포 식작용을 감소시키는, 프로테아제 억제 활성을 함유한다는 것을 나타낸다. 이 데이터는 콩 제품의 탈색소 활성이 부분적으로 그들의 PAR-2 억제 활성에 의한 것임을 나타낸다.
실시예 5 : 새로운 콩밀크 제제의 탈색소 활성 - 우수
우리의 특허출원 WO 99/04752는 콩밀크의 탈색소 활성과 탈색소에 사용하기 위한 콩밀크-함유 제제를 나타내고 있다. 이러한 제제의 한 예가 상기 표 1에 기재되어 있는 콩 에센스 1(Soy Essence 1)이다. 본 발명은 콩 제품과, 단지 0.1%의 계면활성제를 함유하는 안정화 시스템(stabilizing system)를 포함하는 탈색소 조성물을 개시한다. 이러한 제제의 한 예가 상기 표 1에 기재되어 있는 콩 에센스 23이다. 콩 에센스 23이 에센스 1보다 탈색소 활성에 있어서 우수하다는 것을 증명하기 위하여 다음과 같은 실험을 수행하였다.
검은색 피부의 유카탄 소형 돼지(Yucatan microswine)(Charles River, Maine)를 12시간씩 각각 명암의 광주기를 갖도록 환경적으로 제어되는 장소에 있는 적당한 크기의 우리에 가둬 두고 음식과 물을 임의로 공급하였다. 동물 관리는 "실험용 동물의 관리와 사용을 위한 안내서"(NIH 간행물 제85-23호)에 기초하였다. 20㎕의 테스트 화합물을 8주 또는 9주 동안 하루에 2번, 5일/주, 돼지의 등 부분에 국소적으로 도포했다. 개개의 돼지에 대해서 한쪽은 항상 머리에서 꼬리순으로 처리하도록 하였고 다른 한쪽은 꼬리에서 머리순으로 처리하도록 조정하였다. 생체검사를 표준방법을 따라 실시하였다. 모든 돼지 연구물에서 눈에 보이는 염증이 나타나지 않았으며, 조직 검사에서 염증 표지나 다른 병리학상의 징후가 나타나지 않았다.
생체검사 조직의 일부를 Fontana-Mason(F&M)으로, 표준 실험절차(Sheenan 및 Hrapckak, 1980)에 따라 염색하였다. F&M 염색은 분자를 환원시키는 질산은을 식별하여 나타낸다. 피부에서 이러한 비특이적 염색은 주로 멜라닌을 나타낸다. 생체조직 당 적어도 세 절편을 처리하였다. 각 실험을 적어도 세 번 반복하였다.
도 2는 상기 두 실험에서의 조직 절편을 보여준다. 상기 절편을 F&M으로 염색하여 처리된 부분에서의 멜라닌 침착(deposition)을 표시하였다. 상단은 한 돼지의, 대조구(a)와 콩 에센스 23(b)로 처리된 부분들을 나타낸다. 하단은 또 다른 돼지의, 대조구(c)와 콩 에센스 1(d)로 처리된 부분을 나타낸다. 이 도면으로부터, 콩 에센스 23에 의해 유도된, 색소 침착의 상대적 및 절대적 감소 모두가 콩 에센스 1에 의해 유도된 수준보다 월등함이 분명하다.
실시예 6 : 산화방지제와 조합되었을 때 증진되는 콩밀크의 탈색소 활성
우리의 특허출원 WO 99/04752는 콩밀크의 탈색소 활성을 나타내고 있다. 여기에서 볼 수 있듯이 이러한 탈색소 활성은, 부분적으로 PAR-2에 의해 유도된 각질세포 식작용의 억제에 의한 것이다. 향상된 탈색소화가 탈색소화를 이끄는 메카니즘이 하나 이상 결합되어 이루어진 것이라는 가정을 테스트하기 위하여, 우리는 콩밀크와 산화방지제 조합물의 탈색소화 효과를 테스트하였다.
돼지를 콩밀크 또는 콩밀크 에센스 제제, 1% 디하이드로리포익 산(dihydrolipoic acid : DHLA), 및 1% Resveratrol(Res)으로 하루에 2번 처리하거나, 또는 콩밀크를 하루에 한 번, 그리고 DHLA나 Res를 하루에 한 번 처리하는 것을 조합하여 처리하였다. 처리하고 7-8주 후에 눈에 띄게 피부의 희어짐이 관찰되었다. 이러한 실험의 한 예가, 콩밀크 에센스 및 DHLA 조합물로 처리하고 8주가 지난 검은색 피부의 돼지 옆구리 살을 보여주는 도 3에 나타나 있다. 좌측 부분(1)은 콩밀크 에센스 23, 즉 상기한 콩밀크 제제로 처리하였다. 우측 부분(3)은 DHLA로, 중간 부분(2)은 콩밀크 에센스 23과 DHLA를 모두 처리하였다. 이 도면은 콩밀크 에센스 23과 DHLA을 조합해서 처리했을 때가 각 구성원소를 단독으로 처리했을 때에 비해 탈색소화가 증진되었음을 명백히 보여준다. 콩밀크 또는 콩밀크 에센스를 DHLA 또는 Res와 조합하여 사용하였을 때 유사한 결과를 얻었다. 이 예는, 서로 다른 메카니즘의 첨가제가 콩밀크의 탈색소화 효과를 향상시킬 수 있음을 명백히 보여주는 것이다.
실시예 7 : 피부 탄력에 영향을 미치는 콩밀크
우리의 출원 JBP-430, JBP-464 및 JBP-467에 기재되어 있는 콩밀크 연구를 수행하는 중에, 우리는 예기치 않게도 콩밀크로 처리한 쥐의 피부가 보다 탄력적임을 만져보고 알게 되었다. 콩밀크가 피부 탄력에 긍정적인 효과를 가진다는 가능성을 테스트하기 위하여, 우리는 2 세트의 실험을 수행하였다: 비침입적 탄성 측정{큐토미터(cutometer) 측정} 및 엘라스틴 섬유에 대한 피부 절편의 염색. 이들 연구에서, 콩밀크 처리가 피부의 엘라스틴 섬유를 증가시키고, 처리된 피부의 탄력성은증가함을 보여준다.
C3H 및 C57B1/6 쥐는, 우리의 출원 JBP-430, JBP-464 및 JBP-467에 기재되어 있는 바와 같이 새로운 모발 주기(hair cycle)가 유도되거나 털이 제거되었다. 쥐를 상기 출원에 기재되어 있는 바와 같이 매일 콩밀크로 처리하였다. 실험 첫날(1일, 첫 번째 처리 전), 및 21일에 피부 탄성을 측정하기 위하여 큐토미터 측정을 수행하였다. 우리는 Acaderm(Menlo Park, California)으로부터 이용 가능한 큐토미터를 사용했고, Couturaud 등의 "Skin Biomechanical Properties:In VivoEvaluation of Influence of Age and Body Site by a Non-Invasive Method"{1 Skin Res. and Technol. 68-73 (1995)} 및 Elsner 등의 "Mechanical Properties of Human Forearm and Vulvar Skin"{122 Br. J. Dermatol. 607-614 (1990)}에 기재된 방법을 이용하였다. 이 두 문헌은 그 전체가 참고자료에 의해 여기에 편입되어 있다. 2mm 구멍을 통해 흡입(suction)을 하였고 상응하는 피부의 변위(displacement)와 음압(negative pressure) 제거 후의 회복율을 측정하였다. 사람을 대상으로 한 연구에서, 변형 매개변수의 비율 Ua/Uf{피부 피로율, 즉 부하(load)로부터의 총 회복율}, Ur/Uf(생물학적 탄성율, 즉 부하 후의 탄성 회복율), 및 Ur/Ue(견성율, 즉 피부의 변형 저항에 있어서의 향상성)에 있어서의 향상은 피부의 강직성(tonicity)과 탄력성이 보다 더 좋아졌음을 나타낸다. 변형 매개변수 Ue, Uf, Ua, 및 Ur은 부분적으로 피부 두께에 의존한다. 결론적으로, Barel 등의 "Suction Method for Measurement of Skin Mechanical Properties: The Cutometer"와 비침입적 방법에 대한 안내서, 및 그 전체가 참고자료에 의해 편입되어 있는 Skin 335-340(1995)에기재되어 있는 것과 같이, 평가를 위해 비율을 사용하였다.
이러한 실험의 한 예가 표 3에 나타나 있고, 표 3은 콩밀크 처리시 이들 매개변수가 향상(이것은 향상된 피부 탄성을 반영한다)된다는 것을 보여준다. 동물간 편차가 상당한 반면, 탄성(cutometric properties)의 증가는, 일정하였고 이것은 피부 탄력에 콩밀크가 유익한 효과가 있음을 나타내는 것이다.
털을 깎고, 콩밀크로 처리한 C3H 쥐 피부의 기계적 특성
생물 물리적 파라미터 1일째 21일째
처리되지 않은 대조구 콩밀크 처리 처리되지 않은 대조구 콩밀크 처리
Ua/Uf 0.860 +/- 0.066 0.815 +/- 0.154 0.839 +/- 0.068 0.904 +/- 0.043
Ur/Ue 0.943 +/- 0.172 0.964 +/- 0.103 0.617 +/- 0.151 1.402 +/- 0.846
Ur/Uf 0.720 +/- 0.115 0.677 +/- 0.168 0.506 +/- 0.136 0.787 +/- 0.067
이러한 탄력성 효과(elasticity effect)를 더 연구하기 위해, 이 실험 전반에 걸쳐서 피부 생체검사(skin biopsies)가 행해졌고, 피부 박편(section)은 참조에 의해 완전히 병합되는 Kligman, L.H.의 "루나의 기술, 엘라스틴을 위한 멋진 착색"[3(2) The Amer. J. of Dermatopathol. 199-200 (1981)]에 개시되어 있는 방법에 따라 엘라스틴을 위해 착색되었다.
도 4에 도시되어 있는 바와 같이, 처리되지 않은 대조구(왼쪽 패널)와 비교했을 때, 콩밀크로 처리된 C3H 쥐(오른쪽 패널)의 피부 부속물(skin appendage)과 상부 진피(dermis) 주위에서 엘라스틴 섬유(진한 청자줏빛으로 착색)의 두께와 밀도가 증가했다. 이러한 증가는 이미 처리를 시작한지 4일째 감지되었고, 연구 전반에 걸쳐 일정하였다. C57B1/6 쥐를 사용해서도 또한 동일한 결과를 얻었다. 이러한 실시예는, 피부 보호를 위해 콩밀크와 콩밀크 제제를 사용하는 것이 피부의 탄력성을 증가시키고 피부 노화를 감소시키는 것을 증명한다.
개별적인 실험에서, 콜라겐 합성에 대한 콩 분말의 효과는 생체외 연구되었다. 정상적인 사람의 피부 섬유아세포(human dermal fibroblast)에서 콜라겐 합성 속도를 증가시키는 처리 3일 후 세포외 콜라겐(extracellular collagen)에서 방사성 프롤린(radioactive proline)의 결합을 평가함으로써, 콩 분말의 효과가 평가되었다. 표 4에 나타나는 바와 같이, 콩 분말은 1㎍/㎖에서 정상적인 사람의 피부 섬유아세포에서 콜라겐의 합성 속도를 58% 향상시켰다. 더 낮은 농도에서는, 콩 분말을 이용해서 의미 있는 자극이 나타나지 않았다. 따라서, 피부는 더욱 탄탄하고 풍만하며, 보다 젊게 보인다.
정상적인 사람의 피부 섬유아세포에서 세포외 콜라겐 합성에 대한 콩 분말의 효과.
소자(soja)(㎍/㎖)
대조구 0.01 0.1 1
콜라겐 합성(dpm/세포)*1000 11.26±1.62 15.0±1.46NS 13.68±2.51NS 17.80±2.01p<0.05
자극(stimulation) +33% +21% +58%
NS: 현저하지 않은
실시예 8: 햇볕에 의해 유발되는 손상을 방지하는 콩밀크
한 사람의 개인은, 하루에 한 번, 면도 후 즉시 얼굴의 오른편 절반 부위에콩밀크를 함유하는 본 발명에 따른 조성물이 처리되었다. 콩밀크를 처리한 지 8주 후에, 이 사람은 태양광선 차단제를 사용하지 않고 여가 활동 중 과도하게 해빛에 노출되었다. 이 사람의 피부는 "햇볕에 탄" 증상을 나타내었다. 즉, 이 사람의 얼굴은 붉게 변하고 고통스러웠으며, 태양에 노출된 후 2일과 3일째 피부의 벗겨짐(scaliness)이 시작되었다. 예상치 못하게, 본 발명에 따른 콩밀크 조성물로 미리 처리된 얼굴의 오른쪽 면은 붉게 변하지 않고, 고통스럽거나 피부가 벗겨지지 않았다. 도 5는, 사람의 얼굴의 두 면을 보여준다. 이 도면에서 피부의 적열 상태(redness)와 태양으로 인한 손상의 차이가 명백하다. 도 6은, 사람 피부의 높은 배율의 영상(hi-scope image)을 도시하는데, 이것은 처리되지 않은 면의 피부 벗겨짐과 처리된 면의 부드러움을 증명한다. 이 실시예는, 본 발명에 따른 콩밀크 조성물의 일상적인 사용이, 예상치 않은 강한 태양광선 노출로부터 피부를 보호하고, "햇볕에 타는 것"과 관련된 적열 상태, 피부의 벗겨짐 및 고통을 감소시킬 수 있음을 증명한다.
실시예 9: 태양광선에 의해 유발된 손상을 치료할 수 있는 콩밀크
실시예 7에 설명되어 있는 사람은, 또한 태양광선에 노출된 후 24시간과 48시간째에만 처리되지 않은 면의 부분에 콩밀크 조성물을 사용했다. 태양 광선에 노출된 후 콩밀크를 도포하는 것은, 손상된 피부에 수분을 공급하는 것만은 아니다. 시원함과 감정의 진정을 유발하고, 과도한 태양광선 노출과 관련된 고통을 경감시키고, "상쾌한" 느낌을 남기면서 적열 상태와 피부 벗겨짐을 감소시키는 것이 발견되었다. 이러한 실시예는, 콩밀크 또는 콩밀크 제제의 국소 도포가 고통을 경감시키고, 과도한 태양광선 노출로부터 발생하는 적열 상태와 피부 벗겨짐을 감소시킬 수 있음을 증명한다. 태양광선에 노출된 피부에 콩밀크를 사용하면, 시원하고 상쾌한 감정이 된다.
실시예 10: 여드름 병변을 감소시킬 수 있는 콩을 함유하는 조성물
가벼운 여드름(즉, 연구를 시작할 때 10개를 초과하는 비염증성 및 염증성 병변을 갖는)을 갖는 대상과 여드름이 없는 대상에 대해 45일 동안 하루에 두 번 콩을 함유하는 조성물을 도포하는 효과를 연구하기 위해, 임상 연구가 실행되었다. 여드름 병변 개수의 계산, 홍반(erythema)의 평가 및 사진 평가가 실행되었다. 0.005% 이소플라본을 함유하는 콩 에센스23(soy essence 23)이 양쪽 그룹의 대상에 도포되었다.
가벼운 여드름 대상에서는, 베이스라인으로부터 염증성 구진(inflammatory papule)(p = 0.001) 개수의 매우 큰 감소, 즉 41.9%의 감소가 있었다. 또한 베이스라인으로부터 홍반(p = 0.063)의 감소에 대한 지향성 경향이 있었다. 여드름이 없는 대상에서는, 면포(comedones), 구진(papules) 또는 농포(pustules)의 큰 증가가 없었다. 이러한 감소된 수의 구진은 도 7에 그래프적으로 도시되어 있다.
실시예 11: 손상되지 않은 STI를 함유하는 본 발명의 콩밀크 함유 조성물.
본 발명의 콩밀크를 함유하는 조성물은, 변성되지 않고(non-denatured), 프로테아제 억제 활성을 갖는다. 이러한 조성물은, 손상되지 않은 포르테아인(porteains), 구체적으로는 손상되지 않은 STI, 세린 프로테아제 억제제를 함유하기 때문에 특이하다. 이러한 특이성을 증명하기 위해, 상기 실시예 3에 설명되어 있는 동일한 부피의 에센스 23과, 상업적으로 구입할 수 있는 콩을 원료로 한 제품[성분에 "소자 단백질(soja protein)"이 있다고 주장하는 헤레나 루빈스타인사의 퓨쳐 화이트 에센스]은, STI 함량을 위해, Bonifacino J.S.(ed.)(1999)에 따라 특수 단백 검출검사(western blot)를 이용하여 비교되었다. 면역 형광검사 착색(immunofluoresence staining). CD-ROM으로 된 세포 생물학[죤 윌리 앤드 선(Teton Data Systems, Jackson, WY)]의 현재 프로토콜에서, 샘플은 PBS에 용해되어 있는 RIPA 완충용액[1% 논이뎃-P40(nonidet-P40), 0.5% 소듐 데옥시콜레이트(sodium deoxycholate), 0.1% 소듐 도세딜 설페이트(sodium docedyl sulfate), 및 컴플리트(상표) 프로테아제 억제제(인디아나주, 인디아나폴리스의 베링거 만하임사)]에 용해된다. RIPA 용매물(lysate)[래인(lane) 당 10㎍]은 10% SDS-PAGE 젤(gel)에서 전기영동되었고, 단백질은 향상된 화학 발광(enhanced chemiluminescence)(ECL) 특수 단백 검출검사(일리노이주, 아링턴 하이트시의 아머샴)에 의해 분석되었다. STI에 대한 항제는 Chemicon사로부터 구입되었고, 1:500 희석으로 사용되었다.
도 8에서 도시되는 바와 같이, 콩 제제 에센스 23은, STI 표지(평행 래인으로 움직이는)와 크기가 동일한 손상되지 않은 STI를 함유한다. 이와 반대로, 에센스 23의 플라시보와 상업적으로 구입할 수 있는 콩을 원료로 한 제품 모두는 손상되지 않은 STI를 함유하지 않는다.
본 발명은, 상세한 설명과 함께 설명되었지만, 상기 설명은 첨부된 청구항의 범위에 의해 한정되는 본 발명의 범위를 설명하기 위해 의도되었으며, 한정하기 위해 의도되지 않는다는 것을 이해해야만 한다. 다른 양상, 장점 및 변형은 청구항 내에 있다.

Claims (13)

  1. 변형되지 않은 콩 제품과 안정화 시스템(stabilizing system)을 포함하는 콩 제품의 국소 전달을 위한 피부 보호 조성물(skin care composition)로서,
    상기 안정화 시스템은 산화방지제, 킬레이트제, 또는 방부제를 포함하는 그룹으로부터 선택되는 성분(member)을 포함하는, 피부 보호 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 약 0.1%를 초과하는 계면활성제를 포함하지 않는, 피부 보호 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 산화방지제를 포함하는, 피부 보호 조성물.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 킬레이트제를 포함하는, 피부 보호 조성물.
  5. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 방부제를 포함하는, 피부 보호 조성물.
  6. 제 3항에 있어서, 상기 산화방지제는 BHT를 포함하는 그룹으로부터 선택되는 성분인, 피부 보호 조성물.
  7. 제 4항에 있어서, 상기 킬레이트제는 EDTA와 상기 EDTA 유도체를 포함하는그룹으로부터 선택되는, 피부 보호 조성물.
  8. 제 5항에 있어서, 상기 방부제는 파라벤(paraben)인, 피부 보호 조성물.
  9. 제 1항에 있어서, 상기 안정화 시스템은 BHT, EDTA, 또는 이들 유도체, 및 파라벤을 포함하는, 피부 보호 조성물.
  10. 제 1항에 있어서, 상기 변형되지 않은 콩 제품은 콩밀크(soymilk)인, 피부 보호 조성물.
  11. 제 1항에 있어서, 상기 변형되지 않은 콩 제품은 대두 분말(soy bean powder)인, 피부 보호 조성물.
  12. 제 10항에 있어서, 상기 조성물은 농축제(thickening agent)를 더 포함하는, 피부 보호 조성물.
  13. 필수적으로 변형되지 않은 콩 제품과 안정화 시스템을 포함하는 콩 제품의 국소 전달을 위한 피부 보호 조성물로서,
    상기 안정화 시스템은 산화방지제, 킬레이트제, 또는 방부제를 포함하는 그룹으로부터 선택되는 하나 이상의 성분을 포함하는, 피부 보호 조성물.
KR1020017008573A 1999-11-05 2000-10-30 태양광선에 의한 손상의 치료용 조성물 및 여드름 병변을 감소시키는 조성물 KR100928211B1 (ko)

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