PT1236402E

PT1236402E - Composições contendo produtos de soja

Info

Publication number: PT1236402E
Application number: PT02251391T
Authority: PT
Inventors: Miri Seiberg; Jue-Chen Liu; Jeffrey M Wu; Claude Saliou; Jonathan D Miller
Original assignee: Johnson & Johnson Consumer
Priority date: 2001-02-28
Filing date: 2002-02-27
Publication date: 2010-03-04
Also published as: EP1236402B1; DK1236402T3; CY1109995T1; EP1236402A3; EP2127698A1; ES2337341T3; EP2127698B1; EP1236402A2; DE60235132D1; ES2387717T3; ATE455579T1

Description

DESCRIÇÃO "COMPOSIÇÕES CONTENDO PRODUTOS DE SOJA"

CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a produtos à base de leguminosas e ao seu fabrico.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Os frutos de leguminosas contêm niveis elevados de proteínas, lipidos e hidratos de carbono. Consequentemente, os frutos de leguminosas, como a soja, e composições contendo frutos de leguminosas são considerados como um grande nutriente para utilização humana. Os frutos de leguminosas também contêm compostos que inibem a actividade de protease. Por exemplo, dois inibidores de proteases de proteína foram isolados de soja no início da década de 1940, o inibidor de tripsina do tipo Kunitz (inibidor de tripsina de soja, STI) e o inibidor de protease de Bowman-Birk (BBI). Ver, e. g., Birk, Int. J. Pept. Protein Res. 25:113-131 (1985) e Kennedy, Am. J. Clin. Neutr. 68:1406S-1412S (1998) .

O STI inibe a actividade proteolítica de tripsina pela formação de um complexo estequeométrico estável. Ver, e. g., Liu, K., Chemistry and Nutritional value of soybean components. Em: Soybeans, chemistry, technology and utilization. páginas 32-35 (Aspen Publishers, Inc., Gaithersburg, MD, 1999). O STI 1 consiste em 181 resíduos de aminoácidos com duas pontes dissulfureto e tem uma forma aproximadamente esférica. Ver, e. g., Song et al., J. Mol. Biol. 275:347-63 (1998). 0 BBI é uma proteína com 8 k-Da que inibe as proteases tripsina e quimiotripsina em sítios reactivos separados. Ver, e. g., Billings et al., Pro. Natl. Acad. Sei. 89:3120-3124 (1992). O STI e o BBI só são encontrados nas sementes de soja, e não em qualquer outra parte da planta. Ver, e. g., Birk, Int. J. Pept. Protein Res. 25:113-131 (1985).

Contudo, devido à sua origem natural, existem níveis elevados de microrganismos na parte exterior dos frutos de leguminosas, tal como a soja. Consequentemente, podem ser utilizados processos de descontaminação, tais como aquecimento, extraeção com solvente orgânico/aquoso e purificação com alto cisalhamento, para reduzir essas concentrações de microrganismos de forma a permitir a sua utilização humana em segurança, e. g., em aplicações para cuidados da pele. A requerente, contudo, constatou que estes processos, que frequentemente desnaturam os compostos activos na soja, resultam numa eficácia biológica comprometida (e. g., uma redução da actividade inibidora de proteases) que é importante para utilizações cosméticas e terapêuticas para a pele, cabelo e unhas. Além disso, esses processos também podem conduzir a instabilidade do produto de soja bem como à formação de um cheiro e de uma cor indesejáveis. Consequentemente, existe uma necessidade comercial de desenvolver meios para reduzir os níveis microbianos em produtos de soja sem comprometer as vantagens biológicas desses produtos. O objectivo da presente invenção é proporcionar um produto de soja (e. g., que pode ser utilizado como um ingrediente numa 2 composição para cuidados da pele, cabelo ou unhas) que tem um teor microbiano reduzido mas mantém a sua actividade inibidora de proteases. A presente invenção refere-se a produtos leguminosos com teor microbiano reduzido que retêm as actividades biológicas vantajosas dos produtos leguminosos, e com processos para a obtenção desses produtos leguminosos.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção apresenta produtos leguminosos com actividade inibidora de tripsina e teor microbiano reduzido e métodos de descontaminação desses produtos de soja. Numa forma de realização preferida, o produto leguminoso é um produto de so ja.

Outras caracteristicas e vantagens da presente invenção serão evidentes da descrição pormenorizada da invenção e das reivindicações.

DESCRIÇÃO PORMENORIZADA DA INVENÇÃO

Crê-se que um especialista na matéria pode, com base na descrição aqui apresentada, utilizar a presente invenção no seu potencial máximo. As seguintes formas de realização especificas são para ser consideradas como meramente ilustrativas e não limitativas da restante divulgação por qualquer forma. 3

Salvo definição em contrário, todos os termos técnicos e científicos aqui utilizados têm o mesmo significado que o normalmente entendido por um especialista na matéria à qual pertence a invenção. Além disso, todas as publicações, pedidos de patentes, patentes e outras referências aqui mencionadas são aqui incorporados por referência. Tal como aqui utilizadas, todas as percentagens são em peso, salvo indicação em contrário.

Como aqui utilizado, "actividade inibidora de tripsina" significa a capacidade do produto leguminoso numa concentração de 0,1% (p/p) para inibir a actividade da protease tripsina, determinada pelo ensaio descrito adiante no Exemplo 2. Numa forma de realização, os produtos leguminosos da presente invenção têm uma actividade inibidora de tripsina de, pelo menos, cerca de 15%. Numa forma de realização adicional, os produtos leguminosos da presente invenção têm uma actividade inibidora de tripsina de, pelo menos, cerca de 25%, tal como pelo menos cerca de 50%.

Como aqui utilizado, "a actividade de retenção de tiol" significa a capacidade do produto leguminoso numa concentração de 1% (p/v) para inibir a perda de tióis induzida por fumo, determinada pelo ensaio apresentado adiante no Exemplo 3. Numa forma de realização, os produtos leguminosos da presente invenção têm uma actividade de retenção de tiol de pelo menos cerca de 75%. Numa forma de realização adicional, os produtos leguminosos da presente invenção têm uma actividade de retenção de tiol de, pelo menos, cerca de 90%, tal como, pelo menos, cerca de 95%.

Como aqui utilizado, "teor microbiano" significa a quantidade de bactérias, fungos e leveduras presentes no produto 4 leguminoso. Exemplos de meios para medir o teor microbiano incluem, mas não estão limitados ao método AOAC 986.23 como descrito em "Official Methods of Analysis of AOAC International", editado por Patrícia Cunniff décima sexta edição, 5a Revisão, 1999 (AOAC International) ou Método USP, tal como descrito em "Official Compendia of Standards, USP 24 USP/nf 19", United States Pharmacopeial Convention, Inc., 2000 (Board of Trustees, United States Pharmacopeial Convention, Inc.). "Teor microbiano objeccionável" significa a quantidade de bactérias, fungos e leveduras presentes no produto leguminoso que são prejudiciais para os humanos, incluindo mas não limitadas a coliformes fecais, E. coli, Salmonella, esporos termófilos, Bacillus, Enterococcus, Staphylococcus, estreptococos fecais, e os listados em "Disinfection, sterilization, and preservation" 4a edição, Seymour S. Block, áginas 887-888 (1991, Lea & Febiger, Malvern, PA).

Produto Leguminoso O que se entende por um "produto leguminoso" é uma substância derivada de um fruto de leguminosa. Uma leguminosa é uma planta da família Leguminosae, que tem um fruto deiscente, tal como um feijão, ervilha ou lentilha. Exemplos de leguminosas incluem, mas não estão limitados a feijões como soja, lentilhas, ervilhas e amendoins. O produto leguminoso pode conter todo o fruto de leguminosa (e. g., o fruto de leguminosa triturado num pó) ou apenas uma parte do legume (e.g., um extracto da leguminosa). O produto leguminoso pode estar na forma de um fluido (e. g., uma 5 mistura do fruto de leguminosas e água) ou de um sólido (e. g., pós de frutos de leguminosas). Quando está na forma de um fluido, o termo "produto leguminoso" refere-se aos constituintes sólidos do fluido derivado do legume.

As composições da presente invenção compreendem uma quantidade segura e eficaz do produto leguminoso (e. g., produto de soja). Numa forma de realização, a composição contém desde cerca de 0,001% a cerca de 50%, desde cerca de 1% a cerca de 30% do produto leguminoso (e. g., produto de soja).

Produto de Soja O que se entende por "produto de soja" é uma substância derivada da soja. O produto de soja pode conter apenas uma parte da soja (e. g., um extracto de soja tal como uma soja em pó com teor reduzido de lipidos ou leite de soja filtrado) ou pode conter a soja inteira (e. g., um pó moido da leguminosa). O produto de soja pode estar na forma de um fluido (e. g., leite de soja) ou de um sólido (e. g., soja em pó ou leite em pó de soja). Quando está forma de um fluido, o termo "produto de soja" refere-se aos constituintes sólidos do fluido que são derivados da soja.

Numa forma de realização, o produto de soja é soja em pó. A soja em pó pode ser feita por trituração de soja seca. Numa forma de realização, a soja em pó tem um tamanho médio de partícula inferior a cerca de 10 micrometros, tal como inferior a cerca de 1 micrometro. Numa forma de realização, a soja em pó tem um teor de humidade inferior a cerca de 10%, tal como 6 inferior a cerca de 5%. Numa forma de realização, a soja em pó está liofilizada.

Numa forma de realização, o produto de soja é leite de soja ou leite em pó de soja. 0 leite de soja é uma combinação de sólidos derivados de soja e água, cuja mistura tem alguns ou todos os constituintes insolúveis separados por filtração. 0 leite de soja em pó é leite de soja evaporado, que numa forma de realização, está numa forma liofilizada ou seca por atomização. Os processos para fabricação de leite de soja incluem, mas não estão limitados aos três processos seguintes. Em primeiro lugar, o leite de soja pode ser feito colocando a soja em água para que possam absorver a água. Os feijões inchados são então triturados e é depois adicionada mais água. A mistura pode então ser filtrada para retirar qualquer resíduo insolúvel. Em segundo lugar, o leite de soja também pode ser preparado a partir de soja em pó. A soja em pó é muito bem misturada com água (e. g., durante, pelo menos uma hora), a que se pode seguir um processo de filtração para retirar resíduos insolúveis. Em terceiro lugar, o leite de soja também pode ser reconstituído a partir de leite de soja em pó por adição de água. Numa forma de realização, o leite de soja compreende entre cerca de 1% a cerca de 50%, em peso (e. g., de cerca de 5% a cerca de 20% em peso) de sólidos da soja.

Tratamento antimicrobiano do produto leguminoso

Como discutido acima, a superfície de frutos de leguminosas geralmente contem níveis elevados de microrganismos. Assim, antes da utilização por humanos, o produto leguminoso 7 precisa de ser tratado para reduzir ou eliminar esses microrganismos.

Numa forma de realização, os produtos leguminosos da presente invenção têm um teor microbiano total inferior a cerca de 10000 unidades formadoras de colónias ("CFU") por grama. Noutra forma de realização, os produtos de soja da presente invenção têm um teor microbiano inferior a cerca de 1000 cfu por grama (tal como inferior a cerca de 100 cfu por grama) do produto leguminoso.

Numa forma de realização, os produtos leguminosos da presente invenção têm um teor microbiano objeccionável total inferior a 300 cfu por grama, tal como inferior a 150 cfu por grama. Numa outra forma de realização, os produtos leguminosos da presente invenção têm uma quantidade indetectável de quaisquer agentes microbianos objeccionáveis por, pelo menos, um grama (e. g., pelo menos dez gramas) de produto leguminoso.

Numa forma de realização, o produto leguminoso é exposto irradiação gama. Noutra forma de realização, o produto leguminoso é exposto a entre cerca de 2 a cerca de 30 kGy de radiação gama, tal como entre cerca de 5 e cerca de 10 kGy de irradiação gama. A requerente inesperadamente verificou que esse tratamento reduz o teor microbiano do produto leguminoso, ao mesmo tempo que mantém a sua actividade biológica (e. g., actividade inibidora de serina protease) . A requerente também constatou que o tratamento de produtos leguminosos com irradiação gama mantém a elegância cosmética do produto leguminoso, tal a manutenção das suas cores naturais e não induziu maus cheiros significativos.

Outros processos antimicrobianos que também mantêm a actividade inibidora de proteases do produto leguminoso que podem ser praticados sós ou em combinação com irradiação gama, incluem, mas não estão limitados a exposição a raios X, feixes de electrões ou de protões de alta energia, radiação ultravioleta, pressão hidrostática e adição de agentes quimicos que possuem actividade antimicrobiana, e as suas combinações. Uma lista completa de métodos para a redução do teor microbiano está apresentada em "Disinfection, sterilization, and preservation", 4a edição, Seymour S. Block, pginas 887-888 (1991, Lea & Febiger, Malvern, PA). A requerente constatou que os processos que utilizam tratamento térmico podem resultar numa perda substancial da actividade inibidora de proteases e, assim, devem ser utilizados com precaução. Por exemplo, a requerente verificou que aquecendo leite de soja a 100 °C durante apenas 10 minutos reduziu a actividade inibidora de tripsina do leite de soja de 86% (quando mantido a 4 °C) para 46%. A requerente verificou que o aquecimento do leite de soja também pode resultar numa alteração da cor ou do cheiro do produto de soja. Água Mineral O produto leguminoso (e. g., leite de soja) e as composições da presente invenção podem ser preparados utilizando uma água mineral. Numa forma de realização, a água mineral tem uma mineralização de, pelo menos, cerca de 200 mg/L (e. g., desde cerca de 300 mg/L a cerca de 1000 mg/L) . Numa forma de realização, a água mineral compreende, pelo menos, cerca de 10 mg/L de cálcio e/ou, pelo menos, cerca de 5 mg/L de magnésio. 9

Exemplo 1: Irradiação Gama do Produto Leguminoso A requerente constatou que leite de soja em pó antes de qualquer processamento antimicrobiano, tal como irradiação gama tem um teor microbiano de niveis altos, que vão até às 50000 cfu por grama. Também se verificou que esses produtos têm níveis detectáveis de teor microbiano objeccionável, tal como estreptococos fecais, a niveis até 20000 cfu por grama. A requerente expôs várias quantidades (e. g., desde cerca de 1 g a cerca de 200 kg) de leite de soja em pó a irradiação gama variando de 1 kGy a 16 kGy. Verificou-se que a dose ou irradiação gama necessária para uma redução do teor microbiano total para menos de cerca de 100 cfu por grama era cerca de 10 kGy. A dose para a redução de uma unidade logarítmica para estreptococos fecais está determinada como sendo de cerca de 3 kGy e verificou-se que uma dose de cerca de 5 kGy reduzia consistentemente este teor microbiano numa amostra de 10 g de leite de soja em pó para níveis indetectáveis. No entanto, a quantidade de irradiação gama utilizada no produto leguminoso vai em última análise ser determinada pelo teor microbiano e tamanho do produto de soja a ser assim tratado.

Exemplo 2: Actividade Inibidora de Tripsina do Produto Leguminoso A inibição da clivagem induzida por tripsina de um péptido de caseína fluorescente foi determina utilizando o kit de ensaio de proteases EnzChek™, seguindo as instruções do fabricante 10

Revisto (EnzChek™ Protease Assay Kits Product Information, 3/15/99; Molecular Probes, Eugene OR) . Em resumo, várias preparações de soja foram primeiramente diluídas em IX tampão de digestão (fornecido no kit) e incubadas em diferentes concentrações com 1000 unidades de tripsina (Sigma, St. Louis, MO) dissolvida em lx tampão de digestão. Um inibidor de serina protease puro (inibidor de tripsina de soja, da Sigma, St. Louis, MO) foi utilizado como um controlo positivo a 0,1, 0,01% e 0,001% p/v. Em seguida, uma solução a 1,0 mg/mL de caseína BODIPY FL foi preparada pela adição de 0,2 mL de água desionizada aos frascos fornecidos com este substrato (fornecido no kit), depois levada até uma concentração final de trabalho de 10 microgramas/mL em tampão de digestão. Após incubação da tripsina, com ou sem o material de teste, com o substrato de caseina fluorescente BODIPY à temperatura ambiente durante uma hora, foi medida a fluorescência (excitação a 485 nm/emissão a 530 nm) num leitor de placas de microtitulação Gemini SpectraMax® (Molecular Devices Corporation, Sunnyvale, CA), utilizando o software SoftMax® Pro 3.0 (Molecular Devices Corporation) . Cada experiência foi realizada em três réplicas e foi repetida duas vezes.

Este ensaio foi realizado em produtos de soja processados de sete maneiras diferentes. O Exemplo A foi soja moída em pó (Sunlight Foods Corporation, Taipei County, Taiwan, ROC). O Exemplo B foi soja em pó do Exemplo A exposto a cerca de 8-15 kGy de irradiação gama. O Exemplo C foi soja em pó em que o óleo da soja em pó foi retirado por extracção (Soyafluff® 200W da Central Soya Company, Inc., Fort Weyne, IN). O Exemplo D era leite de soja em pó feito de soja descascada e água que foi posteriormente filtrado e aquecido e seco por atomização (Devansoy Farms, Carroll, Iowa) e exposto a entre cerca de 11 7-9 kGy de irradiação gama. 0 Exemplo E foi leite de soja em pó obtido por mistura de soja e água, aquecimento da mistura de um dia para o outro e adição de 1,3-butilenoglicol à mistura (Flavosterone SB de Ichimaru Pharcos Co., Ltd, Gifu, Japão). 0 Exemplo F era leite de soja em pó obtido por mistura de soja e água, aquecimento da mistura de um dia para o outro e, posteriormente, adição de etanol à mistura (Flavosterone SE de Ichimaru Pharcos Co., Ltd, Gifu, Japão). 0 Exemplo G era um extracto de proteínas de soja (Vegeresyl HGP LS 8572 de Laboratoires Sérobiologiques S.A., Pulnoy, França). Estes produtos de soja foram comparados com Inibidor de Tripsina de Soja (STI) (Sigma). A inibição percentual da clivagem de tripsina do substrato pelas diferentes preparações de soja foi calculada utilizando o Microsoft Excel™ e está descrita na Tabela 1.

Tabela 1

Produto testado Concentração % de inibição de tripsina STI 0,01 43, 0 STI 0,1 76,1 Exemplo A 0,01 32, 8 Exemplo A 0,1 67,1 Exemplo B 0,01 31,5 Exemplo B 0,1 67,2 Exemplo C 0,01 22, 7 Exemplo C 0,1 36,2 Exemplo D 0,01 8, 92 Exemplo D 0,1 17, 4 12 (continuação)

Produto testado Concentração % de inibição de tripsina Exemplo E 0,01 7,83 Exemplo E 0,1 10, 8 Exemplo F 0,01 4,87 Exemplo F 0,1 5,99 Exemplo G 0,1 6,85

Como mostrado na Tabela 1, o STI pode inibir a clivagem induzida por tripsina num modo de resposta à dose. 0 Exemplo A, que é soja em pó, também inibiu significativamente a actividade de tripsina. A irradiação gama adicional da soja em pó (i.e., Exemplo B), embora reduzisse o teor microbiano da soja em pó, inesperadamente não alterou significativamente o impacto da actividade de inibição de tripsina da soja em pó. 0 processamento térmico e/ou por extracção dos Exemplos C-G, no entanto, não reduziu significativamente a actividade inibidora de tripsina da soja em pó.

Exemplo 3: Actividade de Retenção de Tióis do Produto Leguminoso A capacidade da soja em pó para evitar a perda de tióis induzida por fumo foi avaliada em fibroblastos dérmicos humanos normais (Clonetics, San Diego, CA) . Os tióis, principalmente o glutationo, fazem parte do sistema de defesa antioxidante celular endógeno. 0 glutationo funciona como um tampão redox, mantendo assim o equilíbrio entre oxidantes e antioxidantes. 0 glutationo é também o substrato preferido para diversas enzimas, tais como o glutationo peroxidase (que decompõe peróxidos) e as 13 glutationo-S-transferases (um grande grupo de enzimas de destoxificação). Ver, A. Meister, Câncer Res. 54:1969s-1975s (1994) .

Os antioxidantes cutâneos (tanto enzimáticos como não enzimáticos), incluindo o glutationo, ficam esgotados após exposição a UV ou a ozono. Ver, M. J. Connor e L. A. Wheeler, Photochem. Photobiol. 46:239-246 (1987) e R. M. Tyrrell e M. Pidoux, Photochem. Photobiol. 47:405-412 (1988). Em modelos de cultura de células, os niveis baixos de glutationo intracelular (GSH) levam a uma maior sensibilidade à radiação UV. Demonstrou-se que a aplicação tópica de derivados de cisteina na pele de ratos protege contra a foto-lesão induzida por radiação UV; esta vantagem foi correlacionada com um aumento da sintese de GSH. Ver L. T. van den Broeke e G. M. J. Beijersbergen van Henegouwen, J. Photochem. Photobiol. B Biol. 27:61-65 (1995); Hanada K. et ai., J. Invest. Dermatol. 108:727-730 (1997); e D. P. T. Steenvoorden et ai., Photochem. Photobiol. 67:651-656 (1998). Por conseguinte, o glucotiono é um importante antioxidante endógeno, altamente responsivo contra os desafios ambientais, capaz de regular o tónus e as rugas da pele, bem como de tratar a agressão externa.

Nesta experiência, fibroblastos neonatais humanos normais cultivados em inserções Transwell em formato de 24 poços (Corning Costar, Cambridge, MA) foram incubados com meios contendo diferentes concentrações de leite de soja em pó (irradiado com radiação gama a cerca de 5 kGy) durante 24 horas antes da exposição com placebo (falso) ou fumo de cigarro (1 cigarro, cigarros BASIC Full Flavor 100, Philip Morris, Richmond, VA) durante 10 minutos. Antes da exposição ao fumo, o meio acima das inserções contendo o produto de soja foi removido 14 e as células foram lavadas 3 vezes com soro fisiológico tamponado com fosfato de Dulbecco (Life Technologies, Gaithersburg, MD), antes de serem expostas ao fumo só com os meios abaixo das inserções. Imediatamente após a exposição, as células foram incubadas durante um período de 24 horas com o meio anterior. As células foram lavadas novamente, 5 vezes com soro fisiológico tamponado com fosfato da Dulbecco, e os tióis intracelulares foram então medidos pela adição de monobromobimano 60 μΜ (Molecular Probes, Eugene, OR, EUA.) às células e incubação a 37 °C durante 30 minutos antes da leitura da fluorescência. Na presença de tióis, o monobromobimano tornou-se fluorescente. Esta fluorescência foi medida utilizando um leitor de placas de fluorescência CytoFluor™ (PerSeptive Biosystems, Framingham, MA, EUA) equipado com a seguinte combinação de filtros: excitação a 360 nm e emissão a 460 nm.

Os resultados desta experiência estão apresentados na Tabela 2.

Tabela 2

Concentração de Tióis (percentagem de tióis leite de soja em contidos no Grupo sem fumo: média pó ± S.E.M.) Sem fumo 0 100 ± 6,71 Fumo (10 min) 0 65,38 ± 7,16 0, 5 91,24 ± 14,25 1 95,39 ± 4,52 2 106,92 ± 17,06 15

Estes resultados indicam que o leite de soja em pó irradiado com radiação gama surpreendentemente conferiu uma protecção contra a perda de tióis induzida por fumo (os dados representam a média ± média do erro padrão de réplicas de 3 experiências independentes).

Entende-se que, embora a invenção tenha sido descrita juntamente com a sua descrição pormenorizada, a descrição apresentada acima destina-se a ilustrar e não a limitar o âmbito da invenção, que é definida pelo âmbito das reivindicações anexas. Outros aspectos, vantagens e modificações estão abrangidos pelas reivindicações.

Lisboa, 24 de Fevereiro de 2010 16

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Produto de soja com uma actividade inibidora de tripsina de, pelo menos, 50% e um teor microbiano inferior a 10000 cfu por grama, em que o referido produto de soja foi exposto a radiação gama em que o referido produto de soja é seleccionado de leite de soja em pó ou soja em pó com um tamanho médio de partícula inferior a 10 micrometros, e em que o referido produto de soja tem uma actividade de retenção de tióis de, pelo menos, 75%.
2. Produto de soja de acordo com a reivindicação 1 que tem uma actividade inibidora de tripsina de, pelo menos, 15% e um teor microbiano inferior a 1000 cfu por grama.
3. Produto de soja da reivindicação 2, tendo o referido produto de soja uma contagem microbiana nociva para humanos inferior a 1000 cfu por grama.
4. Produto de soja da reivindicação 1 ou a reivindicação 2, tendo o referido produto de soja uma contagem microbiana nociva para humanos inferior a 150 cfu por grama.
5. Produto de soja da reivindicação 4, tendo o referido produto de soja uma contagem microbiana inferior a 100 cfu por grama. 1
6. Produto de soja de acordo com qualquer reivindicação anterior, não tendo o referido produto de soja uma contagem microbiana nociva para humanos por grama detectável.
7. Produto de soja com qualquer da reivindicação anteriores, em que o referido produto de soja é leite em pó de soja.
8. Produto de soja de qualquer das reivindicações 1 a 7, em que o referido produto de soja é soja em pó.
9. Processo para a produção de um produto de soja descontaminado, em que o referido produto de soja é seleccionado de leite de soja em pó ou soja em pó com um tamanho médio das partículas inferior a 10 micrometros, tendo o referido produto de soja uma actividade inibidora de tripsina de, pelo menos, 50%, um teor microbiano inferior a 10000 cfu por grama e uma actividade de retenção de tióis de, pelo menos, 75%; compreendendo o referido processo a exposição do referido produto de soja a irradiação gama.
10. Processo de acordo com a reivindicação 9, em que o referido produto de soja é exposto a 5 a 16 kGy de irradiação gama.
11. Processo da reivindicação 9 ou reivindicação 10, em que o referido produto de soja é leite de soja em pó. 2
12. Processo da reivindicação 9 ou reivindicação 10, em que o referido produto de soja é soja em pó. Lisboa, 24 de Fevereiro de 2010 3