KR20010084402A - 홍화씨로 부터 추출한 멜라닌 생합성 저해 추출물 및 그추출물을 포함하는 멜라닌 생합성 저해제 - Google Patents

홍화씨로 부터 추출한 멜라닌 생합성 저해 추출물 및 그추출물을 포함하는 멜라닌 생합성 저해제 Download PDF

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Abstract

본 발명은 티로시나제 저해 활성, 멜라닌 색소 형성 미생물인 스트렙토마이세스 비키니엔시스 (Streptomyces bikiniensis)의 멜라닌 생합성 억제 효과와 자외선 조사 후 피부 미백 효과와 항산화 효과에 의한 피부노화 방지기능을 가지는 착유 잔유물인 홍화씨박의 추출물과 추출물로부터 분리한 분획물들 중의 1종 이상의 각각의 피부 미백효과를 갖는 성분조성물 및 그 용도에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 물 또는 유기용매를 사용하여 열수 또는 가열 조건에서 홍화씨로부터 추출한 추출물과 추출물로부터 분리한 미백효과를 갖는 분획물들의 피부미백 성분조성물 및 이의 화장료, 멜라닌 관련 질환의 치료제 및 식품 첨가물로서의 용도에 관한 것이다.

Description

홍화씨로부터 추출한 멜라닌 생합성 저해 추출물 및 그 추출물을 포함하는 멜라닌 생합성 저해제{Safflower Seeds Extracts Inhibiting Melanin Biosynthesis and Composition Comprising Same}
본 발명은 산업 폐기물인 기름을 짜고 남은 홍화씨박으로부터 잔류 지방층을 제거하고, 이를 물 또는 유기용매로 추출한 후 수득되는 티로시나제 저해 및 멜라닌 색소형성억제 활성을 지니는 새로운 추출물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.
더욱 상세하게는, 본 발명은 티로시나제 (tyrosinase) 저해의 활성, 멜라닌 색소 형성 미생물인 스트렙토마이세스 비키니엔시스 (Streptomyces bikiniensis)의 멜라닌 생합성 억제 효과와 자외선 조사 후 미백효과를 지니는 홍화씨(Carthamus tinctorius)로부터 추출된 추출물을 함유하는 미백 추출물에 관한 것이다.
본 발명은 또한, 홍화씨박의 추출물에서 지방 성분을 예비 전처리 공정에 의해 제거하고, 물, 에탄올, 메탄올, 아세톤 또는 이들의 혼합용매에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여, 열수 또는 가열 조건하에서 수득된 추출물의 화장료, 멜라닌 관련 질환의 치료제 및 식품 첨가물로서의 용도에 관한 것으로, 상기 피부미백제들은 강력한 항산화 활성을 가져 멜라닌 생성 억제, 피부 노화 방지, 피부 보호, 미백 기능을 가지는 화장료, 기미ㆍ주근깨ㆍ반점 또는 임신기 과색소 침착 (hyper pigmentation)의 치료제 및 식품의 갈변 억제제로 사용될 수 있는 용도를 지닌 것이다.
멜라닌(melanin)은 검은 색소와 단백질의 복합체 형태를 지니는 페놀류의 생체 고분자 물질로서, 사과, 감자, 바나나의 잘린 표면이 공기 중에 노출될 때 발생하는 갈변 또는 동물의 외피, 깃털, 피부, 머리, 눈 등에서 관찰된다. 그러나 멜라닌이 과잉 생산되는 경우, 피부에 기미, 주근깨 등이 형성되고 피부 노화도 촉진되며, 피부암도 유발될 수 있고 또한 식품에서는 채소, 과일, 생선 등의 품질을 저하시키는 작용도 한다.
멜라닌은 주로 티로시나제의 작용에 의하여 생합성되는 것으로 보고되고 있다. 티로시나제는 구리와 결합한 효소로서, 동물, 식물, 미생물 및 사람 등에 넓게분포되어 있고, 모노하이드록시 또는 디하이드록시 페닐알라닌(dihydroxy- phenylalanine, DOPA) 등의 페놀 화합물에서 호기적 산화를 촉진시키고, 자외선에 심하게 노출된 피부에 멜라닌토스(melanintorth)를 침착시켜 피부의 노화나 손상을 유발시키는 작용을 한다. 또한 야채 또는 과실류에서도 티로시나제 등과 같은 폴리페놀 옥시다제 (polyphenol oxidase)가 식품의 갈변화 현상을 초래한다.
멜라닌의 생합성 대사는 피부암과의 관련하여 최근 집중적으로 연구되고 있고, 이로부터 다양한 멜라닌 생성 저해제 등이 개발되어 의약품 산업에서 피부 질환 치료제, 화장품 산업에서 기미, 주근깨 등을 예방 및 치료하는 피부 미백제 또는 식품 산업에서 갈변 방지제 등으로 적용되고 있다. 또한 최근에는 환경문제와 관련하여 그 수요가 급격히 증가되고 있다.
지금까지 멜라닌 생성 저해제의 연구는 주로 티로시나제 저해제를 개발하는 방향으로 집중되어 왔고, 대표적인 티로시나제 저해제로는 티로시나제 활성부위의 구리이온에 대한 킬레이트 형성물질, 퀴논류를 페놀류로 환원시키는 아스코빅산등의 환원제 그리고 티로시나제 자체를 변성시키는 비설파이트(bisulfites) 제제 등을 들 수 있다.
이와 같이 티로시나제 저해제가 다양한 미백제 등으로 개발되어 현재 사용되고 있지만, 여러 가지 문제점도 동시에 제기되고 있다. 실제로 기미, 주근깨, 반점 및 임신기 과색소 침착과 같은 과잉 색소증 치료에 국부적으로 사용되고 있는 4-하이드록시아니솔(4-hydroxyanisole) 및 하이드로퀴논등은 강력한 멜라닌 생성 저해활성은 있으나 동시에 색소세포의 변성 또는 치사를 유발하고 세포 본래의 기능을손상시키는 등의 부작용을 나타내는 것으로 알려져 있다. 특히 하이드로퀴논 계열의 화합물은 멜라닌 생합성을 저해하는 미백용 크림으로 개발되어 사용되었으나, 세포 독성으로 인한 피부 자극 또는 피부병을 유발하는 것으로 알려져 현재 일부 국가에서만 사용이 허가되고 있는 실정이다. 따라서, 미리 안정성이 입증되어 있는 천연물을 이용하여 티로시나제 저해물질을 선별하려는 시도들이 이루어지고 있다.
이에 본 발명자들은 천연물로부터 멜라닌 생성을 억제하는 티로시나제 저해제와 멜라닌 색소 생성 저해제를 개발하기 위하여 연구하던 중, 산업폐기물인 홍화씨박으로부터 분리한 추출물과 이들로부터 분리한 분획물들의 단독 또는 혼합물이 멜라닌 생성을 효과적으로 억제하고 우수한 항산화 효과를 나타낸다는 사실을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명의 목적은 홍화씨로부터 멜라닌 색소의 형성을 억제하는 활성 추출물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 홍화씨로부터 분획한 멜라닌 색소의 형성을 억제하는 활성 분획물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 홍화씨로부터 추출한 활성 추출물을 포함하는 미백 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 홍화씨로부터 추출한 활성 추출물을 포함하는 멜라닌 생성 억제제용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 홍화씨로부터 추출한 활성 추출물을 포함하는 식품의 갈변을 억제하는 식품 첨가물을 제공하는 것이다.
도 1은 본 발명의 방법에 따라 추출한 홍화씨 추출물의 미백효과를 스트렙토마이세스 비키니엔시스 (Streptomyces bikiniensis) 균주를 사용하여 조사한 사진,
도 2는 본 발명의 방법에 따라 추출한 홍화씨 추출물의 자외선(UV) 스펙트럼도,
도 3은 자외선 조사후 본 발명의 방법에 따라 제조된 미백제를 도포한 부위(A)와 도포하지 않은 부위(B)를 촬영한 사진,
도 4는 본 발명의 추출물의 기미 치료효과를 사용전 및 사용 후(7주 경과)로 나누어 사진.
이와 같은 본 발명의 목적은, 홍화씨를 분쇄하고 탈지하여 전처리하고, 상기 전처리된 수득물을 추출 용매로 추출하는 단계를 포함하는 멜라닌 색소의 형성을 억제하는 활성 추출물에 의해 달성될 수 있다.
본 발명에 있어서, 홍화씨를 전처리하기 위해 분쇄 및 탈지 과정을 거치지만, 홍화씨에서 기름을 짠 후의 박으로부터 직접 추출하여 추출물을 얻을 수도 있다. 이 때 추출용매는 물, 에탄올, 메탄올, 아세톤 및 에틸아세테이트 등을 사용할 수 있으며, 이들 용매를 2종 이상 혼합한 혼합 용매를 사용하여도 좋다.
본 발명은 이렇게 추출된 홍화씨 추출물을 유기 용매로 분획함으로써 이들 분획물을 유효 성분으로 멜라닌 색소의 형성을 억제하는 분획물을 제공한다. 분획을 위해서 유기 용매로 추출물을 분획하되, 분획용매의 일례로 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올, 물을 사용하여 분획층을 형성한다. 유기 용매의 농도는 60 내지 99중량%로 할 수 있다.
이렇게 얻어지는 홍화씨의 활성 추출물 또는 그 추출물을 분획한 분획물은 멜라닌 색소의 형성을 억제하므로 미백 화장료, 멜라닌 생성 억제제용 약학적 조성물 또는 식품의 갈변을 억제하는 식품 첨가물로 사용될 수 있다.
이하, 본 발명을 더욱 상세히 설명한다.
본 발명은 티로시나제 저해활성을 가지는 홍화씨로부터 추출물을 제조하기 위하여, 헥산으로 지방을 제거한 추출물을 물과 유기용매 등을 사용하여 다양한 온도에서 추출한다.
상기 홍화씨로부터 추출한 추출물들의 티로시나제 저해 활성을 버섯 티로시나제 등을 L-디하이드록시페닐알라닌 (L-DOPA) 등과 반응시켜 측정한 흡광도로부터 조사한 결과, 홍화씨 추출물들은 기존의 하이드로퀴논, 코직산(Kojic acid), 아부틴(arbutin) 보다 티로시나제 저해 활성이 우수한 것으로 나타났다 (표 1,2 참조).
추출시료 중 홍화씨로부터 높은 가열 조건에서 70∼80% 에탄올과 메탄올을 사용하여 얻은 추출물들과 에틸아세테이트 분획물이 바람직한 상기 저해 활성을 나타낸다.
또한, 상기 추출물과 분획물들의 멜라닌 생합성 저해 활성은 멜라닌을 생합성하는 미생물인 스트렙토마이세스 비키니엔시스 균주 등을 이용하여 조사한다 (도 1, 표3 참조). 이 때 멜라닌 생성 저해환 (Inhibition zone, mm)의 크기를 측정한 결과, 상기 홍화씨로부터의 70∼80% 에탄올 또는 메탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획물들은 코직산(kojic acid), 아부틴(arbutin)보다 비교적 크고 깨끗한 저해환을 생성시켰고, 유리기 억제효과(Free Radical Scavenging)와 지질과산화 억제효과를 테스트한 결과 우수한 항산화 효과를 나타내었다(표4 참조).
따라서, 상기 식물류의 추출물과 그 추출물의 분획물들의 단독 또는 혼합물은 티로시나제 활성을 저해 및 우수한 항산화 효과를 갖는 멜라닌 생성 억제제로서 기미, 주근깨, 반점 또는 임신기 과색소 침착등의 예방 및 치료에 사용될 수 있다(도 3와 도 4참조). 또한, 상기 식물류의 추출물과 그 추출물의 분획물들의 단독 또는 혼합물은 멜라닌 생성 억제, 피부 노화 방지, 피부 보호 또는 미백 기능을 가지는 화장료로도 사용되어 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 맛사지크림, 에센스, 팩 등에 첨가될 수 있다. 또한, 상기 식물류의 추출물과 그 추출물의 분획물들의 단독 또는 혼합물은 과일, 야채 및 생선 등의 식품의 갈변을 억제하여 신선도를 높이는 식품 첨가제로 사용될 수 있다.
상기 홍화씨로부터의 추출물과 그들의 분획물들은 이미 독성이 없음이 확인된 식용의 천연물이고, 상기 과정을 통하여 제조된 추출물이 치료용 약제로 이용되기 위해서 약제학적 분야에서 공지의 방법에 의하여 제조될 수 있으며, 그 자체 또는 약학적으로 허용되는 담체(carrier), 부형제(forming agent), 희석제(diluent) 등과 혼합하여 연고제, 분말, 과립, 정제, 캡슐제 또는 주사제 등의 제형으로 제조되어 사용될 수 있다. 또한, 이들은 비경구 또는 경구로 투여하던지 피부에 도포하여 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 유효 성분의 투여량은 체내에서 활성성분의 흡수도, 불활성화율, 배설속도, 환자의 연령, 성별 및 상태, 치료할 질병의 중증정도 등에 따라 적절히 선택되나, 일반적으로 성인에게 1일에 30 - 300 mg 정도를 사용하나 50 - 200 mg 정도를 사용하는 것이 바람직하다. 이렇게 제형화된 제제는 필요에 따라 약제의 투여를 감시하거나 관찰하는 전문가의 판단과 개인의 요구에 따라 전문화된 투약법을 사용하거나, 일정시간 간격으로 수회 투여하거나 피부에 도포할 수 있다.
이하 실시예, 제조예 및 실험예에 의하여 본 발명을 상세히 설명한다.
다만, 하기 실시예, 제조예 및 실험예들은 본 발명을 예시하기 위해 제공되는 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예로 제한되는 것은 아니다.
실시예 1: 홍화씨 추출물과 분획물들의 제조
기름을 짜고 남은 홍화씨 박을 분쇄기로 분쇄하여 석유에테르나 헥산으로 지방을 제거한 다음 건조시켜 얻은 분말 100g에 각각 추출용매로 물과 온도를 달리한 에탄올, 메탄올 또는 아세톤을 0.5∼3L 첨가하여 12시간 이하로 각 추출 온도에 따라 진탕 배양기(shaking incubator, 30℃) 또는 온도 조절 수조가 부착된 환류 추출기(95℃)로 추출한 다음 회전증발기(rotary evaporator)를 사용하여 50℃에서 상기 추출물을 감압, 농축시키고 다시 진공 건조시켜 분말 상태의 추출물을 얻었다.
특히, 홍화씨의 80% 메탄올 추출물을 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올,물 등을 이용하여 각각의 분획물을 얻었다.
실시예 2: 본 발명에 따른 홍화씨 추출물과 분획물들의 티로시나제 저해 활성 조사
상기 실시예 1에서 제조한 분말 상태의 홍화씨 추출물과 분획물들의 티로시나제 저해 활성은 버섯 티로시나제(mushroom tyrosinase, Sigma, E.C. 1.14.18.1)에 대한 저해 정도로 측정하였다. 이 때 티로시나제는 0.67M 인산완충용액 (phosphate buffer, pH 6.8)에 1560 units/㎖ 농도로 녹여 동결시킨 다음 냉동보관하고, 사용시에 빙상에서 녹여 효소원으로 이용하였다. 또한 기질로는 L-3,4-디하이드록시페닐알라닌 (L-3,4-dihydroxyphenylalanine, L-DOPA)을 차광병에서 사용직전에 0.67M 인산 완충용액에 녹여 사용하였다.
티로시나제 저해 활성은 티로시나제 (78 units/㎖) 0.0625㎖, 0.67M 인산 완충용액 1.4615㎖를 함께 넣어 25℃에서 5분간 프리인큐베이션 (preincubation)시키고 이에 상기 L-DOPA를 0.476㎖ 넣어 475㎚에서 10분 30초간 일정한 시간 간격으로 흡광도를 측정하였다. 즉, 티로시나제 효소와 홍화씨의 용매 추출물 또는 분획물을 모두 넣은 시료군(C), 시료 대신 동량의 1/15M 인산 완충용액을 넣은 대조군(A), 효소 대신 1/15M 인산 완충용액을 넣은 효소 대조군(D) 그리고 효소 및 시료 대신 1/15M 인산 완충용액을 넣은 공시험군(B)으로 나누어 실험을 수행하였다.
각 군은 모두 3개씩 반복하여 실험하였고, 아래의 수식으로부터 효소 저해율 (%)을 산출하였다. 이 때 대조군으로는 하이드로퀴논, 코직산, 아부틴을 사용하였다.
그 결과, 홍화씨 80% 메탄올 추출물과 이로부터 분리한 에틸아세테이트 분획물이 상기 대조군보다 매우 높은 저해 활성을 나타내었다(표1, 2 참조).
× 100
A: 시료가 없는 대조군의 475nm 에서 흡광도;
B: 시료와 효소가 없는 대조군의 475nm 에서 흡광도;
C: 시료와 효소를 넣은 실험군의 475nm 에서 흡광도;
D: 효소가 없는 대조군의 475nm 에서 흡광도
본 발명에 의한 추출물들의 티로시나제 활성에 대한 저해도 (%)
추출 용매 추출 온도 (℃) 첨가 농도 (㎎/㎖) 저해도 (%)
CU 열수추출물 95 1 15.37
CR 열수 추출물 95 1 18.28
CU 40% 에탄올 추출물 30 1 28.29
CR 40% 에탄올 추출물 30 1 35.10
CU 70, 80% 에탄올 추출물 30 1 33.57
CR 70, 80% 에탄올 추출물 30 1 39.20
CU 40% 에탄올 추출물 80 1 34.80
CR 40% 에탄올 추출물 80 1 44.85
CU 70, 80% 에탄올 추출물 80 1 45.73
CR 70, 80% 에탄올 추출물 80 1 61.99
CR 99% 에탄올 추출물 75 1 62.12
CU 40% 아세톤 추출물 30 1 22.10
CR 40% 아세톤 추출물 30 1 29.75
CU 70, 80% 아세톤 추출물 30 1 26.27
CR 70, 80% 아세톤 추출물 30 1 31.96
CU 40% 메탄올 추출물 80 1 30.81
CR 40% 메탄올 추출물 80 1 40.62
CU 70, 80% 메탄올 추출물 80 1 52.43
CR 70, 80% 메탄올 추출물 80 1 68.36
CU : 안볶은 홍화씨CR : 볶은 홍화씨
추출물로부터 분리한 분획물들과 기존 미백제의 티로시나제 저해도
추출물 첨가 농도 (㎎/㎖) 저해도(%)
볶은 홍화씨 80% MeOH 추출물 1 68.36
클로로포름 분획물 1 41.86
에틸아세테이트 분획물 1 74.29
부탄올 분획물 1 22.94
물 분획물 1 45.73
하이드로퀴논 1 54.46
코직산 1 39.23
아부틴 1 31.87
실시예 3: 본 발명에 따른 홍화씨 추출물과 분획물들의 멜라닌 생합성 저해 활성 조사
상기 실시예 1에서 제조한 홍화씨 추출물과 분획물들의 멜라닌 생합성 저해 활성을 조사하기 위하여, 멜라닌 생합성 미생물인 스트렙토마이세스 비키니엔시스 B-1049 (Streptomyces bikiniensis NRRL B-1049)를 사용하였다. 구체적으로 상기스트렙토마이세스 비키니엔시스 균주를 V-8 쥬스 (Cambell Soup Co., USA) 200㎖, 포도당 2g, 효모 추출물 2g, CaCO31g, 박토 아가 2g과 증류수 800㎖을 함유하는 pH 7.2의 파파비자스 VDYA (Papavizas' VDYA(15)) 사면 배지에 접종하고 이를 28℃에서 2주일간 배양한 다음, 상기 사면 배양배지 표면에 2㎖의 증류수를 가하여 기균사에 형성된 포자를 백금이로 긁어내고 포자 현탁액을 만든 다음, 이 포자 현탁액을 멸균된 시험관에 냉동 보관하였다.
또한, 포도당 1.5%, L-타이로신 0.05%, L-아스파라진 0.1%, K2HPO40.05%, MgSO4·7H2O 0.05%, NaCl 0.05%, FeSO4·7H2O 0.001%, 박토 아가 2% 를 함유하는 타이로신 아가(ISP No. 7) 배지 조성에 박토 효모 추출물(Bacto-yeast extract)을 0.2% 로 첨가하여 고체 배지를 만들고 멸균하여 패트리디쉬(90mm i.d.)당 40 mL씩 분주하였다. 이렇게 제작한 아가 플레이트에 각 플레이트당 0.4mL의 상기S. bikiniensis포자 현탁액을 가하여 유리 하키 바(glass hockey bar)로 균일하게 도포하였다. 다음 배지 표면을 건조시키고 이에 50㎕의 시료를 적신 직경 8mm의 종이 디스크(paper disc, Toyo Roshi Kasha Ltd., Japan)를 올려놓아 28℃ 조건에서 48시간 동안 배양함으로 멜라닌 생성 저해환(inhibition zone, mm)이 생성되도록 하였다. 이 멜라닌 생성 저해환의 크기는 배지의 배면에서 계측하였고, 이 때 대조군으로는 하이드로퀴논, 코직산, 아부틴을 사용하였다.
그 결과, 본 홍화씨 추출물과 분획물들의 저해환은 대조군인 하이드로퀴논과 코직산, 아부틴과 비교하였을 때 비교적 크고 깨끗하게 나타났다 (도1, 표3 참조).
홍화씨 추출물과 분획물들의Streptomyces bikiniensis NRRL B-1049의 멜라닌 생합성에 대한 저해도
첨가물 첨가 농도(㎍/paper disc) 저해환(㎜)
볶은 홍화씨 80% MeOH 추출물 30 35
클로로포름 분획물 30 22
에틸아세테이트 분획물 30 43
부탄올 분획물 30 16
물 분획물 30 27
하이드로퀴논 30 26
코직산 30 0
아부틴 30 0
실시예 4: 본 발명에 따른 홍화씨 추출물을 이용하여 도2에서와 같이 자외선 흡수능력을 보기 위해 UV 스펙트럼을 190~700㎚ 에서 측정하였으며, 도2에서 알 수 있듯이 190 내지 400㎚에서 효과적인 자외선 흡수능이 나타났다.
실시예 5: 본 발명에 따른 홍화씨 추출물을 이용하여 항산화력을 알아보기 위해 유리기 억제효과(Free Radical scavenging)와 지질과산화 억제효과를 측정하였다.
유리기 억제효과(Free Radical scavenging)는 0.4mM DPPH 용액 1㎖에 메탄올에 녹인 홍화씨 추출물과 분획물들을 25ppm 정도 첨가하여 25℃에서 30분간 반응시킨 후 517㎚에서 흡광도를 측정하였고 무첨가 시료와 비교하여 표4에서와 같이 억제율을 구하였다.
지질과산화 억제효과는 쥐의 간으로부터 분리한 마이크로좀(1mg protein/ml) 250㎕와 홍화씨 추출물이나 분획물 25ppm에 2mM ascorbic acid 50㎕, 0.2mMFeSO4ㆍ7H2O를 첨가한것과 17mM ADP 50㎕,4mM NADPH 50㎕,1mM FeCl350㎕를 첨가한것을 37℃에서 30분간 반응한 후 TBA가 방법을 이용하여 지질과산화 억제효과를 측정하였다.
즉, 표4에서 알 수 있는 바와 같이 홍화씨 추출물과 분획물은 유리기 억제효과와 지질과산화에 대한 항산화 효과가 모두 우수하게 나타났다.
홍화씨 추출물과 분획물들의 유리기 억제효과와 지질과산화에 대한 저해도
첨가물 유리기 억제효과(%) 지질과산화 억제효과(%)
Ascorbic acid/Fe2+ ADP/NADPH/Fe3+
볶은 홍화씨 80% MeOH 추출물 51 32 28
클로로포름 분획물 62 38 33
에틸아세테이트 분획물 96 56 53
부탄올 분획물 68 42 35
물 분획물 8 0 0
BHT 54 41 39
BHA 89 54 51
제조 실시예 1: 유연 화장수 제조
홍화씨 추출물과 분획물들을 함유한 화장료 중 유연 화장수 처방예는 다음과 같다. 여기서 추출물들(C 추출물로 통칭)과 분획물들(C 분획물로 통칭)은 실시예 1 의 유기용매 추출물과 이로부터 분리한 분획물을 사용하였다.
중량부
C 추출물(또는 C 분획물) 0.01
글리세린 3.0
부틸렌글리콜 2.0
프로필렌글리콜 2.0
카르복시비닐폴리머 0.1
에탄올 10.0
트리에탄올아민 0.1
방부제 미량
색소 미량
향료 미량
정제수 잔액
계 100.0
제조 실시예 2: 영양 화장수 제조
홍화씨 추출물과 분획물들을 함유한 화장료 중 영양 화장수 처방예는 다음과 같다. 여기서 추출물들(C 추출물로 통칭)과 분획물들(C 분획물로 통칭)은 실시예 1 의 유기용매 추출물과 이로부터 분리한 분획물을 사용하였다.
중량부
C 추출물(또는 C 분획물) 0.01
밀납 4.0
폴리솔베이트 60 1.5
솔비탄세스퀴올레이트 0.5
유동 파라핀 5.0
스쿠알란 5.0
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0
글리세린 3.0
부틸렌글리콜 3.0
프로필렌글리콜 3.0
카르복시비닐폴리머 0.1
트리에탄올아민 0.2
방부제 미량
색소 미량
향료 미량
정제수 잔액
계 100.0
제조 실시예 3: 영양 크림 제조
홍화씨 추출물과 분획물들을 함유한 화장료 중 영양크림 처방예는 다음과 같다. 여기서 추출물들(C 추출물로 통칭)과 분획물들(C 분획물로 통칭)은 실시예 1 의 유기용매 추출물과 이로부터 분리한 분획물을 사용하였다.
중량부
C 추출물(또는 C 분획물) 0.005
밀납 10.0
폴리솔베이트 60 1.5
솔비탄세스퀴올레이트 0.5
유동파라핀 10.0
스쿠알란 5.0
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0
글리세린 5.0
부틸렌글리콜 3.0
프로필렌글리콜 3.0
트리에탄올아민 0.2
방부제 미량
색소 미량
향료 미량
정제수 잔액
계 100.0
제조 실시예 4: 맛사지 크림 제조
홍화씨 추출물과 분획물들을 함유한 화장료 중 맛사지크림 처방예는 다음과 같다. 여기서 추출물들(C 추출물로 통칭)과 분획물들(C 분획물로 통칭)은 실시예 1 의 유기용매 추출물과 이로부터 분리한 분획물을 사용하였다.
중량부
C 추출물(또는 C 분획물) 0.005
밀납 10.0
폴리솔베이트 60 0.8
솔비탄세스퀴올레이트 0.5
유동파라핀 40.0
스쿠알란 5.0
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 4.0
글리세린 5.0
부틸렌글리콜 3.0
프로필렌글리콜 3.0
트리에탄올아민 0.2
방부제 미량
색소 미량
향료 미량
정제수 잔액
계 100.0
제조 실시예 5: 팩의 제조
홍화씨 추출물과 분획물들을을 함유한 화장료 중 팩의 처방예는 다음과 같다. 여기서 추출물들(C 추출물로 통칭)과 분획물들(C 분획물로 통칭)은 실시예 1 의 유기용매 추출물과 이로부터 분리한 분획물을 사용하였다.
중량부
C 추출물(또는 C 분획물) 0.005
폴리비닐알콜 13.0
소듐카르복시메틸셀룰로스 0.2
알란토인 0.1
노닐페닐에테르 0.3
방부제 미량
색소 미량
향료 미량
정제수 잔액
계 100.0
실험예 1: 피부의 색소 침착 억제
건강한 남녀 20명의 실험 대상자의 양 팔 하박부에 2×2cm2의 부위를 설정하였다. 실험 대상 부위에만 자외선이 조사되도록 알루미늄 호일을 팔에 씌우고 10 cm 거리에서 일본 도시바 (주) 제조의 FL20S BLB 램프 및 FL20S E-30 램프를 각 2개 동시에 0.8×107erg/cm3/회로 1일 1회씩 연속 3회 조사하였다. 조사전에 실험 대상 부위를 70% 이소프로필알콜 수용액으로 잘 세척하였다. 조사후 자외선 조사 부위에 홍화씨 추출물을 함유한 제조예 1 ∼ 5의 처방을 1일 3회씩 도포하였다. 3주 도포한 후에 육안으로 색소 침착도를 판정하고, 실험군이 대조군 (기제만 도포)에 비하여 색소 침착을 얼마나 억제하였는가를 현저한 효과, 유효, 무효의 3단계로 평가하였다. 표 5에서 나타난 바와 같이 유효 이상의 양성 효과가 높게 나타남으로써 탁월하게 색소 침착이 억제되는 효과를 보여주었다(도 3 참조).
색소 침착의 억제 효과
실험군 현저한 효과 (명) 유효 (명) 무효 (명)
제조예 1 2 11 7
제조예 2 2 12 6
제조예 3 3 13 4
제조예 4 2 13 5
제조예 5 1 13 6
본 발명의 효과는 홍화씨로부터의 추출물과 이로부터 분리한 분획물들은 천연물로서 부작용이 없고, 티로시나제 활성을 효과적으로 저해하여 탁월하게 멜라닌 생성을 억제하고 우수한 항산화 효과를 나타내므로 피부 노화 방지, 피부 보호 및 미백 기능을 가지는 화장료, 기미, 주근깨, 반점 또는 임신기 과색소 침착 등의 과잉 색소증 치료제 및 식품의 갈변을 억제하는 식품 첨가제 등을 제공할 수 있는 것이다.

Claims (11)

  1. 홍화씨를 분쇄하고 탈지하여 전처리하고,
    상기 전처리된 수득물을 추출 용매로 추출하여 얻어지는 멜라닌 색소의 형성을 억제하는 활성 추출물.
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 추출용매가 물, 에탄올, 메탄올, 아세톤 및 에틸아세테이트로 구성된 군에서 선택되는 1종의 용매 또는 2 이상의 혼합용매임을 특징으로 하는 활성 추출물.
  3. 홍화씨를 분쇄하고 탈지하여 전처리하고,
    상기 전처리된 수득물을 추출 용매로 추출하고,
    상기 추출물을 유기 용매로 분획하여 얻어지는 멜라닌 색소의 형성을 억제하는 활성 분획물.
  4. 제 3 항에 있어서, 상기 추출물을 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올, 및 물층으로 분리하여 얻는 분획하는 것을 특징으로 하는 분획물.
  5. 제 3 항 또는 제 4 항에 있어서, 상기 유기 용매의 농도는 60 내지 99중량%임을 특징으로 하는 방법.
  6. 제 1항의 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 미백 화장료 조성물.
  7. 제 3 항의 분획물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 미백 화장료 조성물.
  8. 제 1 항의 추출물을 유효성분으로 함유하는 멜라닌 생성 억제제용 약학적 조성물.
  9. 제 3 항의 분획물을 유효성분으로 함유하는 멜라닌 생성 억제제용 약학적 조성물.
  10. 제 1 항의 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품의 갈변을 억제하는 식품 첨가물.
  11. 제 3 항의 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품의 갈변을 억제하는 식품 첨가물.
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