KR20000018848A

KR20000018848A - 동충하초버섯의 인공재배법

Info

Publication number: KR20000018848A
Application number: KR1019980036644A
Authority: KR
Inventors: 임양빈
Original assignee: 임양빈
Priority date: 1998-09-05
Filing date: 1998-09-05
Publication date: 2000-04-06

Abstract

본 발명은 누에변데기를 기주로한 눈꽃동충하초버섯(Paecilomyces japonica) 자실체를 효과적으로 생산하기 위한 재배방법을 제공한다.

본 발명의 눈꽃동충하초버섯 자실체 재배방법은 종균을 분리하여 접종실에서 5∼7일간 배양한 다음 25∼27℃의 종균실에서 누에번데기에 접종후 균사체 대량배양을 수행한 다음 약 40일간 15∼20℃의 항온항습실에서 저온 스트레스를 가하여 발이시키므로써 영양생장에서 포자형성 직전까지 생식생장을 유도함을 특징으로 한다.

Description

동충하초버섯의 인공재배법

본 발명은 누에번데기를 기주로한 눈꽃동충하초버섯(Paecilomyces japonica) 자실체를 효과적으로 생산하기 위한 재배방법에 관한 것이다.

더욱 상세하게는, 본 발명은 접종실에서 배양한 종균을 25∼27℃의 종균실에서 누에번데기에 종균이식을 수행한 다음 약 2∼3주간 균사체 배양을 실시한 후 15∼20℃의 항온항습실에서 발이(자실체 형성)시키므로써 영양생장에서 포자형성 직전까지 저온 스트레스에 의한 생식생장을 유도함을 특징으로 한다.

동충하초는 곤충에만 기생하는 버섯으로써 종래에도 누에번데기 또는 이와 유사한 곤충에 동충하초 종균을 접종하여 재배하는 방법이 공지된 바 있다. 즉, 건조시킨 곤충 예컨대 누에번데기, 누에, 벌, 매미, 메뚜기를 열탕에 넣고 수분함량 60∼65%가 되도록 수분을 조절한 후 이를 배양배지로하여 종균병에 ⅔정도 투입하여 고압살균한 후 냉각시키고 무균실에서 종균을 투입하고 혼합한 다음 배양하는 방법 등이 그것이다.

그러나 상기 동충하초버섯(Cordyceps militaris) 종균은 본원발명에서 달성하고자 하는 눈꽃동충하초버섯(Paecilomyces japonica)과는 그 자실체 형성과정이 전혀 다른 특성을 가지므로 따라서 그 재배방법도 서로 상이한 것이다.

동충하초는 겨울동안은 벌레 혹은 곤충의 몸에 기생하다가 여름에는 풀처럼 피어나오는 모양에서 나온 명칭으로 눈꽃동충하초는 그 피어나는 모양이 눈꽃과 유사하여 연유된 이름이다. 즉, 겨울에는 눈꽃동충하초의 포자나 균사가 곤충이나 식물의 종자내에 들어가서 생체기주 안에 있는 영양물질을 영양원으로 취하여 내성균핵을 만든다음 몸 밖으로 자실체를 형성한다. 이같은 눈꽃동충하초는 자연생태계에는 곤충집단의 밀도를 조절하지만 동물생체를 기주(Host)로 하여 생식생장을 하기 때문에 동물성 당-단백질을 포함하는 면역증강물질이 함유되어 있어서 항암효과가 인정되고 있다.

그러나, 눈꽃동충하초는 그 까다로운 생육조건으로 인하여 인공재배가 거의 불가능하여 전세계적으로 그 생산량이 극소하고 따라서 일부 사람에 의하여 고가로 구입 사용하고 있을 뿐이다.

본 발명은 상기와 같은 점들을 감안하여 안출한 것으로 지금까지 대량 재배가 불가능하였던 눈꽃동충하초의 신규한 인공재배방법을 제공함을 그 목적으로 한다.

상기의 본 발명의 목적은 충분한 영양 생장후에 저온 스트레스를 부여하므로서 자실체 성장을 유도함으로써 달성하였다.

이하, 본 발명의 구체적인 구성과 작용을 공정별 설명 및 실시예로 들어 설명하지만 이들 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 권리범위는 이들 실시예에만 제한되지 않는다.

본 발명은 동충하초버섯 종균의 분리 및 접종단계와; 25∼27℃의 종균실에서 5∼7일간 배양하는 단계와; 상기 액체종균 배양액을 누에번데기에 접종 및 균사체를 배양하는 단계; 및 15∼20℃의 항온·항습실에서 30∼40일간 자실체를 형성시키는 저온 스트레스(stress) 단계로 구성된다.

이하, 본 발명을 공정별로 설명한다.

제 1 공정 : 눈꽃동충하초 종균의 분리

돌틈에서 동충하초 자실체로부터 포자를 채취하여 시판용 Rosebengal PDA 배지에 접종하고 1주 이상 배양한 후 다시 균사체를 선별하여 상기 Rosebengal-free PDA 배지에 접종한 다음 2주 이상 배양하여 5㎜ 정도 크기의 콜로니가 형성되면 이를 냉장보관하여 종균으로 사용한다.

제 2 공정 : 눈꽃동충하초 종균의 액체배양

종균을 채취하여 멸균된 상기 PDA 액체 배지 30∼40mL를 담은 미리 준비된 120mL 삼각 플라스크에 접종하여 24시간 이상 배양한다. 1차 배양된 배양액(culture broth)을 5L 들이 멸균된 액체배지에 transfer하여 대량배양을 실시한다.

이때 일정기압의 멸균산소를 주입하면서 통기(Airation)를 실시한다.

5∼7일간의 대량배양을 실시하여 다음 종균접종공정에 공시한다. 이때 사용하는 액채배지는 멸균수 1L 당, 대두분 3g, 감자분 200g, 덱스트로스 30g, 황백당 200g을 혼합한 다음 고압 멸균된 배지이다.

제 3 공정 : 액체종균접종

선별된 누에번데기 100∼150마리를 500∼1,000mL들이 플라스틱으로된 배양용기에 각각 투입하고, 멸균한 뒤 실온으로 냉각시킨 다음, 제 2 공정에서 배양된 액체종균을 Vaccuum pump를 통하여 10∼15mL씩 살포하여 액체종균을 접종한다.

제 4 공정 : 균사배양

액체종균이 접종된 배양용기를 25∼27℃가 유지되는 종균실에서 육안으로 누에번데기가 안보일 정도로 종균이 하얗게 먹을 때까지 2∼3주간 배양한다.

제 5 공정 : 자실체 형성 및 수확

누에번데기에 균사가 하얗게 덮혀 균사배양이 완료되면 눈꽃동충하초의 영양생장은 종결된다. 영양생장이 종료된 배양용기는 온도 15∼20℃, 습도 85% 이상으로 유지되는 항온·항습실로 이동하여 약 4주간 저온 스트레스(stress)하여서 더 배양하면 제 4 공정에서 배양된 균사로부터 자실체가 형성된다. 왕성한 자실체가 형성된 상태에서 포자가 형성되기 전에 전량 수확하여 40℃의 열풍으로 13∼14시간 건조하여 수분함량 10% 이하의 눈꽃동충하초버섯 제품을 완성하여 창고에 보관한다.

눈꽃 동충하초버섯을 재배하기에 적합한 환경조건을 규명하기 위하여 다음과 같은 실험결과를 실시예로 나타내었다.

실시예 1 : 배양초기 저온배양 후 후기 고온배양

제 1 공정에서 얻은 종균을 채취하여 121℃에서 15분간 멸균된 시판용 PDA 액체배지 35mL를 담은 미리 준비된 120mL 삼각 플라스크에 접종하여 24시간 배양하였다. 이 배양액을 5L 들이 멸균된 액체배지(제 2 공정에 기재된)에 옮겨 6일간 대량배양을 실시한 후 냉암소에 보관하였다.

미리 선별한 누에번데기를 1,000mL 들이 플라스틱제 배양병에 각각 100마리씩 투입하고, 121℃에서 15분간 auto clave시켜 실온으로 냉각한 다음 제 2 공정의 대량배양 결과 얻은 액체종균을 vaccuum pump를 이용하여 각 배양병에 15mL씩 분주 살포 접종하였다.

액체종균이 접종된 배양용기를 15℃가 유지되는 종균실에서 3주간 배양한 후 약간의 균사체가 발생한 배양병을 25℃, 관계습도 85%가 유지되는 항온·항습실로 이동시켜 4주간 더 배양하였다.

실시예 2 : 생육전기간에 걸친 중온배양

실시예 1과 동일하게 실시하되 생육전기간에 걸쳐 온도 20℃, 관계습도 85%로 유지하여 배양하였다.

실시예 3 : 배양초기 고온배양 후 후기 저온배양

실시예 1과 동일하게 실시하되 배양초기에는 25℃로 배양하고 항온·항습실에 이동후에는 17℃ 저온으로 배양하였다.

실시예 4 : 배양전기간에 걸친 고온배양

실시예 1과 동일하게 실시하되 생육전기간에 걸쳐 27℃의 고온으로 배양하였다.

상기 실시예 1 내지 4의 실험결과 눈꽃동충하초버섯의 균사체, 자실체 형성 및 포자형성을 비교한 실험결과는 다음 표 1과 같다.

눈꽃동충하초버섯의 균사체, 자실체 형성 및 포자형성 정도

실 험 군	균사체	자실체	포 자
실시예 1	불 량	불 량	불 량
실시예 2	불 량	불 량	양 호
실시예 3	양 호	양 호	보 통
실시예 4	양 호	불 량	양 호

상기 실험결과 표 1에서 알 수 있는 바와 같이 눈꽃동충하초버섯의 균사체와 자실체 형성도가 비교적 양호한 실험군으로 실시예 2와 실시예 3의 경우로서 버섯균의 생육전기간에 걸쳐 중온배양을 하거나 생육초기에 고온배양후 생육후기에 저온배양한 경우이었다.

실시예 1의 경우에는 균사체 형성도 불량하고 자실체 형성도 불량하였다. 실시예 2의 경우에는 균사체 및 자실체 형성이 불량하였으나 포자형성은 양호하였다. 눈꽃동충하초의 포자는 독성(Toxic)이 있으므로 포자형성이 되기 직전에 수확하는 것이 좋으며 재배방법상 포자형성이 지연되는 방식인 생육초기 고온배양, 생육후기 저온배양이 가장 적합한 것으로 나타났다(실시예 3). 생육전기간에 걸친 고온배양의 경우는 자실체가 형성되자마자 포자가 다량 형성되므로 실시예 4의 재배방법은 우수한 눈꽃동충하초버섯을 얻기에 부적합한 것으로 나타났다.

이상 실시예 1 내지 4를 통하여 명백한 바와 같이 본 발명은 우수한 자실체를 얻는 눈꽃동충하초의 재배방법을 제공하는 효과가 있다. 또한, 본 발명은 눈꽃동충하초의 대량 재배방법을 제공하는 뛰어난 효과가 있으므로 약용버섯 재배산업상 유용한 발명인 것이다.

Claims

눈꽃동충하초버섯(Paecilomyces japonica) 종균의 액체배양액을 멸균된 배양용기의 누에번데기에 접종한 후 25∼27℃의 종균실에서 5∼7일간 고온배양하여 균사체를 얻는 단계와; 그 후 15∼20℃의 항온·항습실에서 30∼40일간 저온배양하여 저온 스트레스(stress)에 의거 자실체를 형성함을 특징으로 하는 눈꽃동충하초버섯의 인공재배법.