KR20000002087A - 이눌린의 항암제로서의 신규한 용도 및 이를유효성분으로 하는약학적 조성물 - Google Patents

이눌린의 항암제로서의 신규한 용도 및 이를유효성분으로 하는약학적 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20000002087A
KR20000002087A KR1019980022660A KR19980022660A KR20000002087A KR 20000002087 A KR20000002087 A KR 20000002087A KR 1019980022660 A KR1019980022660 A KR 1019980022660A KR 19980022660 A KR19980022660 A KR 19980022660A KR 20000002087 A KR20000002087 A KR 20000002087A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
inulin
nitric oxide
interferon
measuring
cancer medicine
Prior art date
Application number
KR1019980022660A
Other languages
English (en)
Inventor
김형민
Original Assignee
김형민
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 김형민 filed Critical 김형민
Priority to KR1019980022660A priority Critical patent/KR20000002087A/ko
Publication of KR20000002087A publication Critical patent/KR20000002087A/ko

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/733Fructosans, e.g. inulin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

본 발명은 이눌린의 항암제로서의 신규한 용도 및 이를 유효성분으로 하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 이눌린의 산화질소 생성량 및 이눌린 유도성 산화질소 합성효소 발현유도능력을 측정하여 이눌린의 산화질소 생성능력을 입증하고, 또한 항암효과와 관계있는 종양괴사인자-α의 생성능력을 측정하여 이눌린 유도성 산화질소 생성억제 능력을 규명하므로써 항암제로의 새로운 용도를 제공하는 뛰어난 효과가 있다.

Description

이눌린의 항암제로서의 신규한 용도 및 이를 유효성분으로 하는 약학적 조성물
본 발명은 이눌린(inulin)의 항암제로서의 신규한 용도에 관한 것이다. 더욱 상세하게는, 본 발명은 항암제로서의 이눌린 및 이를 유효성분으로 하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
이눌린은 국화과(Compositae), 도라지과(Campanulaceae), 백합과 (Liliaceae) 식물의 근경 등의 세포속에 콜로이드 상태로 존재하는 저장 당류(homoglycan)의 일종이다. 이와같은 이눌린은 근경에서 짜낸 즙을 더운물로 묽게 한 다음, 석회유로 약 염기성(pH 8.0)으로 조성하고, 조성액중 상등액만을 취하여 옥살산(H2C2O4)으로 중화하고 60 ~ 70℃에서 활성탄 처리하여 탈색한 후 3℃에서 냉각하여 백색구상결정으로 얻을 수 있다. 이 백색구상결정은 온수에는 쉽게 용해되지만 냉수에는 용해되기 어려우므로 일단 더운 물에 용해하여 알콜로 침전시키면 냉수에 용해된다. 이눌린의 분자량은 약 5000이며, 주로 프럭토스 약 98%로 이루어진 β2 → 1 결합의 프럭탄으로 말단기는 수크로스형으로 결합한 글루코스로 끝나있다. 이눌린의 화학구조는 하기 화학식 (1)과 같다.
이눌린의 기능으로는 포도당의 장내흡수를 감소시키고(Journal of Nutrition, 126 (9), 2236-2242, 1996) 신장기능검사에 유용하게 이용되고 있으며 또한, Cooper 등이 분리한 γ-이눌린은 세포성 및 체액성 반응의 증진 효과 (Immunology and Cell Biology, 66, 345-352, 1988)가 있음이 보고된 바 있다. 그러나 상기한 바와 같이 밝혀진 이눌린의 용도는 약물로서 이용한 예, 특히 항암제로서 이용한 예는 공지된 바 없다.
산화질소(nitric oxide, NO)는 매우 불안정하며 반응성이 강한 물질로서 생체내에서 다양한 작용을 하고 있다(Bredt, D. S. and Synder, S. H.: Nitric oxide, a novel neouronal messenger. Neuron 8, 3, 1992; Moncada, S., Palmer, R. M. J. and Higgs, E. A.: Nitric oxide: Physiology, pathophysiology, and pharmacology. Pharmacol. Rev. 43, 109, 1991; Nathan, C. F. and Hibbs, J. B. Jr.: Role of nitric oxide synthesis in macrophage antimicrobial activity. Curr. Opinion Immunol. 3, 65, 1991). 산화질소를 합성하는 효소는 크게 구성성 효소 (constitutive NO synthase, cNOS)와 유도성 효소 (inducible NO synthase, iNOS)로 구분되며, 전자는 이미 세포내에 존재하는 단백질로 어떤 자극에 의하여 활성을 갖게 되는 것이고 후자는 자극에 반응하여 새로운 단백질로 합성되는 것이다 (Nathan, C. F.: Nitric oxide as a secretory product of mammalian cells. FASEB J. 6, 3051, 1992; Stuehr, D. J. and Marletta M. A.: Mammalian nitrate biosynthesis: Mouse macrophages produce nitrite and nitrate in response to Escherichia coli lipopolysaccharide. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 7738, 1985). 산화질소는 내독소인 지다당류(lipopolysaccharide, LPS)를 투여한 실험동물에서 많은양의 질산염(nitrate, NO3 -)이 배설된다고 알려진 후(Wagner, D. A., Young V. R. and Tannenbaum, S. R.: Mammalian nitrate biosynthesis: Incorporation of15NH3into nitrate is enhanced by endotoxin treatment. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78, 7764, 1983), 대식세포가 인터페론-γ(IFN-γ)와 LPS에 의해 활성화되어 아질산염(nitrite, NO2 -)과 질산염을 발생시키고, 이 아질산염과 질산염은 대식세포에서 발생된 산화질소에서 유래하는 것임이 증명되었다(Hibbs, J. B., Jr., Taintor, R. R. and Vavrin, Z.: Iron depletion: possible cause of tumor cell cytotoxicity induced by activated macrophages. Biochem. Biophys. Res. Commun. 123, 716, 1984). 또한 이러한 산화질소는 대식세포의 항미생물작용과 항암작용의 중요한 매개물이라는 사실이 밝혀졌다(Hibbs, J. B., Jr., Taintor, R. R. and Vavrin, Z.: Macrophage cytotoxicity: role for L-arginine deiminase and imino nitrogen oxidation to nitrite. Science 235, 473, 1987; Stuehr, D. J., and Nathan, C. F.: Nitric oxide. A macrophage product responsible for cytostasis and respiratory inhibition in tumor target cells. J. Exp. Med. 169, 1543, 1989).
본 발명은 이눌린에 대한 연구를 거듭하여 이눌린의 산화질소 생성 능력이 현재 우수한 항암제로 사용되고 있는 탁솔과 유사한 정도로 탁월하다는 사실을 확인하고 이를 근거하여 안출한 것으로, 본 발명의 목적은 이눌린 또는 이를 유효성분으로 하는 약학적으로 허용가능한 조성물의 산화질소 생성능력을 규명하고, 상기 이눌린의 산화질소 생성능력을 바탕으로 항암제로서의 용도를 제공함에 있다.
본 발명의 상기 목적은 이눌린의 산화질소 생성량 및 이눌린 유도성 산화질소 합성효소(이하, iNOS라 한다) 발현유도능력을 측정하여 이눌린의 산화질소 생성능력을 입증하고, 항암효과와 관계있는 종양괴사인자-α의 생성능력 및 산화질소 생성의 경쟁적 억제제에 의한 이눌린 유도성 산화질소 생성억제 효과를 조사하므로써 달성하였다.
이하, 본 발명의 구성 및 작용을 상세하게 설명한다.
도1은 인터페론-γ를 처리한 대식세포에 이눌린을 부가하였을 때 이눌린의 농도에 따른 효과를 나타낸 눈금도이다.
도2는 이눌린 유도성 산화질소 합성효소의 발현을 나타낸 사진이다.
도3은 이눌린을 인터페론-γ와 함께 처리시 이눌린의 종양괴사인자-α의 생성농도를 나타낸 눈금도이다.
도4는 이눌린의 프로테인 카이네이스(Protein kinase) C-α 단백질의 유도능력을 나타낸 사진이다.
도5는 인터페론-γ와 NG-모노메틸-L-아르기닌에 의한 이눌린 유도성 산화질소 생성량을 나타낸 눈금도이다.
본 발명은 이눌린의 산화질소 생성능력 측정단계; 이눌린 유도성 산화질소 합성효소 발현유도 능력 시험단계; 이눌린의 종양괴사인자-α 생성 유도 효과의 측정단계; 이눌린의 프로테인 카이네이스 C-α 단백질의 유도능력 측정단계; 및 산화질소 생성 억제제인 NG-monomethyl-L-arginine(이하, NGMMA라 한다)에 의한 이눌린 유도성 산화질소 생성 억제 효과를 측정하는 단계로 이루어진다.
이하, 본 발명은 하기 실시예를 통하여 상세히 설명하고자 하지만 본 발명의 권리범위가 이들 실시예에 의하여 제한되는 것은 아니다.
실시예 1. 이눌린의 산화질소 생성능력
생쥐의 복강액에서 채취한 대식세포 1 × 106cells/mL를 96-웰 플레이트에 분주하여 인터페론-γ 5U/mL, 지다당류 1㎍/mL, 이눌린 1000㎍/mL, 탁솔 10μM을 다양한 조건으로 처리하여 48시간후에 산화질소 생성량을 측정했다. 산화질소 생성량은 산화질소의 산화물인 아질산염을 그리스(Griess) 반응으로 측정하여 실시하였다. 즉, 0.1% 나프틸에틸렌 디아민디하이드로클로라이드와 1% 설파닐아마이드를 동일양 섞은 그리스 시약 50㎕와 배양액 50㎕를 섞은 다음 10분 후에 ELISA reader (Bio-Tek Instruments Co.)를 이용하여 550nm에서의 흡광도를 측정하였다. NO2 -의 농도계산은 아질산나트륨을 표준물질로 사용하여 결정하였다. 실험결과, 표1에서 볼 수 있듯이 생리식염수, 인터페론-γ(INF-γ), 지다당류(lipopolysaccharide), 이눌린 및 지다당류와 이눌린과의 혼합물을 처리했을 때는 단지 적은량의 산화질소가 합성되었다. 그러나 인터페론-γ와 이눌린을 같이 처리했을 때는 대조군인 인터페론-γ와 지다당류를 처리했을 때와 거의 같은 다량의 산화질소가 합성되었다. 이러한 이눌린의 산화질소 합성량은 탁솔을 같은 조건으로 처리했을 때와 유사하였다. 또한 인터페론-γ를 처리한 대식세포에 이눌린을 부가하였을 때 이눌린의 농도에 따른 효과를 측정하였다. 그 결과, 도1에서 볼 수 있듯이 인터페론-γ를 처리한 대식세포에 이눌린 1000㎍/mL을 부가하였을 때 가장 큰 상승효과를 나타내었고 100㎍/mL 보다 적은 농도에서는 산화질소 생성량이 미량이었다(P < 0.01).
생쥐 복강대식세포 및 대식세포주에서 이눌린에 의한 산화질소 생성 유도 효과
처리액 NO2 -(μM)
생쥐 복강 대식세포 대식세포주
생리식염수 < 5 < 5
인터페론-γ 9.6 ± 3.4 12.0 ± 1
지다당류 10.7 ± 3.3 14.0 ± 2
인터페론-γ + 지다당류 55.7 ± 12.7* 60.5 ± 7*
인터페론-γ + 이눌린 50.5 ± 7* 63.8 ± 2*
이눌린 7.8 ± 0.4 17.0 ± 1
지다당류 + 이눌린 12.4 ± 0.5 21.0 ± 2
인터페론-γ + 탁솔 53.8 ± 9.5* 59.0 ± 3*
실시예 2. 이눌린의 유도성 산화질소 합성효소(iNOS) 발현유도 능력 측정
이눌린의 대식세포내에서 산화질소를 합성하는 효소로 알려진 유도성 산화질소 합성효소의 단백질 발현 유도 능력을 실험하였다. 대식세포에 인터페론-γ 처리후 이눌린을 처리하지 않은 대조군(레인 1), 이눌린을 처리한 다음 8시간후(레인 2), 16시간후(레인 3), 24시간후(레인 4), 48시간후(레인 5), 72시간후(레인 6)에 유도되는 산화질소 합성효소를 특이항체를 이용하여 검출하였다. 그 결과, 도2에서 볼 수 있듯이 인터페론-γ 처리후에 이눌린을 처리하지 않은 대조군(레인 1)에서는 유도성 산화질소 합성효소가 발현되지 않았고 인터페론-γ 처리후 이눌린을 처리한 8 ~ 48시간대(레인 1 ~ 5)에는 발현량이 현저하게 증가하였다. 그러나 72시간후(레인 6)에는 유도성 산화질소 합성효소의 발현이 없어졌다. 따라서, 이눌린은 대식세포에서 인터페론-γ와 함께 유도성 산화질소 합성효소의 단백질 발현을 48시간내에 급속하게 증가시키고 72시간후에는 영향을 미치지 않음을 알 수 있었다. 또한 이눌린에 의한 유도성 산화질소 합성효소의 단백질량 증가로 인해 산화질소 생성이 증가함을 알 수 있었다.
실시예 3. 이눌린의 종양괴사인자-α 생성능력 측정
항암제인 탁솔이 생쥐의 복강대식세포로부터 종양괴사인자-α의 생성능력이 있듯이 이눌린에서 종양괴사인자-α의 생성능력을 측정하여 항암효능이 있는가를 실험하였다. 상기 실시예 1의 대식세포 1 × 106cells/mL 를 96-웰 플레이트에 분주하여 인터페론-α 5U/mL, 지다당류 1㎍/mL, 이눌린 1000㎍/mL을 다양한 조건으로 처리하여 24시간후에 효소결합면역흡착검사(enzyme-linked immunosorbent assay)로 종양괴사인자-α를 정량하였다. 그 결과, 표2에서 볼 수 있듯이 이눌린은 인터페론-γ와 함께 처리했을 때 현저히 많은양의 종양괴사인자-α를 생성시켰다. 또한 상기 종양괴사인자-α에 대한 이눌린의 농도의존적 효과는 도3에서 볼 수 있듯이 이눌린 1000 ㎍/mL의 농도에서만 현저하게 종양괴사인자-α를 생성시켰다(P < 0.01).
생쥐 복강대식세포에서 이눌린에 의한 종양괴사인자-α 생성 유도 효과
처리액 종양괴사인자-α(ng/mL)
생리식염수 0.109 ± 0.007
인터페론-γ 0.241 ± 0.064
인터페론-γ + 지다당류 3.061 ± 1.127*
인터페론-γ + 이눌린 2.870 ± 1.276*
실시예 4. 이눌린의 프로테인 카이네이스 C-α 단백질의 유도능력
대식세포내의 신호전달 단백질로서 중요한 역할을 담당하고 있는 효소인 프로테인 카이네이스 C-α(protein kinase C - alpha ; PKC-α)의 발현량을 실험하여 이눌린의 효능기전을 살펴보았다. 그 결과, 도4에서 볼 수 있듯이, 처리시간 의존적으로 PKC-α 단백질의 발현이 증가되었다. 레인 1은 이눌린을 처리하지 않은 대조군, 레인 2는 이눌린을 처리한 24시간후, 레인 3은 이눌린을 처리한 48시간후의 결과로써, 대식세포에서 이눌린이 PKC-α 단백질의 발현량 증가에 따라 산화질소 및 종양괴사인자-α의 생성과 관련성이 높음을 알 수 있었다.
실시예 5. 산화질소 생성의 경쟁적 억제제인 NG-monomethyl-L-arginine (NGMMA)에 의한 이눌린 유도성 산화질소 생성 억제 효과
대식세포에서 이눌린 유도성 산화질소 생성이 L-argine 의존적 경로에 포함되는 지를 결정하기 위하여 인터페론-γ와 NGMMA의 존재하에서 이눌린을 처리하여 산화질소 생성량을 측정하였다. 그 결과, 도5에서 볼 수 있듯이 인터페론-γ와 이눌린에 의한 산화질소의 생성이 NGMMA 부가량을 증가시킴에 따라서 농도의존적으로 억제되었다. 특히 이눌린(1000 ㎍/mL) 유도성 산화질소의 생성은 NGMMA 1mM, 10 mM 농도에서 현저하게 억제되었다 (P < 0.01).
본 발명은 상기 실시예를 통하여 알 수 있는 바와 같이 이눌린의 항암제로서 신규한 용도를 제공하는 효과가 있다. 또한 본 발명은 산화질소와 종양괴사인자-α를 대량생산하는 효과가 있어 이를 유효성분으로 하는 약학적 조성물을 제공할 수 있으므로 생물의약산업상 매우 유용한 발명인 것이다.

Claims (2)

  1. 이눌린의 항암제로서의 신규한 용도.
  2. 제1항 기재의 이눌린을 유효성분으로 하는 항암제용 약학적 조성물.
KR1019980022660A 1998-06-17 1998-06-17 이눌린의 항암제로서의 신규한 용도 및 이를유효성분으로 하는약학적 조성물 KR20000002087A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1019980022660A KR20000002087A (ko) 1998-06-17 1998-06-17 이눌린의 항암제로서의 신규한 용도 및 이를유효성분으로 하는약학적 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1019980022660A KR20000002087A (ko) 1998-06-17 1998-06-17 이눌린의 항암제로서의 신규한 용도 및 이를유효성분으로 하는약학적 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20000002087A true KR20000002087A (ko) 2000-01-15

Family

ID=19539736

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1019980022660A KR20000002087A (ko) 1998-06-17 1998-06-17 이눌린의 항암제로서의 신규한 용도 및 이를유효성분으로 하는약학적 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20000002087A (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017044393A1 (en) * 2015-09-09 2017-03-16 Allergy Research Group, Llc Phospholipid compositions and use thereof to enhance spermatozoa motility and viability

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017044393A1 (en) * 2015-09-09 2017-03-16 Allergy Research Group, Llc Phospholipid compositions and use thereof to enhance spermatozoa motility and viability

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE60106905T2 (de) Formulierungen und verfahren zur verwendung von stickstoffmonoxid mimetika gegen einen malignen zellphänotyp
EP0604641B1 (en) Use of a combination containing an amine or amine-related derivative of benzoic acid and an amino-polysaccharide in the manufacture of a medicament for the treatment of inflammatory diseases
JP2015078185A (ja) N−アセチルシステイン組成物及び薬剤毒性治療または防止方法
WO2000048593A1 (en) Epoxide hydrolase complexes and methods therewith
KR100382183B1 (ko) 산화질소 및 인터페론-γ 생성 증가용 의약 조성물 및 그제조방법
CN111388461B (zh) 一种降血糖组合物及其应用
MOINARD et al. Phagocyte functions in stressed rats: comparison of modulation by glutamine, arginine and ornithine 2-oxoglutarate
KR20090073227A (ko) 2-아미노페놀 또는 그 유도체를 유효성분으로 하는 항염증제
EP2056830A1 (en) Compositions useful especially for treatment or prevention of metabolic syndrome
KR20000002087A (ko) 이눌린의 항암제로서의 신규한 용도 및 이를유효성분으로 하는약학적 조성물
WO2014065572A1 (ko) ENOblock을 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 약제학적 조성물
JP2017145236A (ja) AGEs関連反応抑制剤、AGEs関連疾患の予防治療用薬剤、並びにサプリメント、機能性食品及び化粧料組成物
CA1141662A (en) Pharmaceutical compositions containing paracetamol
US20030109490A1 (en) Composite stimulating iNOS enzyme which induce immuno-reactant nitric oxide synthesis and process for preparing the same
JP5123574B2 (ja) ヒアルロン酸生成増強剤
JP2008031094A (ja) Scf結合阻害剤
EP2027862A1 (en) Composition for enhancing immune function
Arumugam et al. Molecular docking studies of natural compounds of naringin on enzymes involved in the urea cycle pathway in hyperammonemia
RU2191582C2 (ru) Фармацевтические композиции на основе нестероидных противовоспалительных средств
US3065136A (en) Treatment of vascular diseases with 2-aminoethanol-1-nitrate salt of p-toluene sulfonic acid
JP7039083B1 (ja) Ampk活性化剤
Farhan et al. A review of overcome the side effect of digestion process on the drugs
KR20160106370A (ko) 염증성 질환의 예방 또는 치료용 조성물
RU2681649C1 (ru) Композиция на основе празиквантеля для лечения описторхоза
JP7231163B2 (ja) 糖及び/又は脂質の代謝改善剤

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application