KR102593544B1 - 호장근 뿌리 추출물을 포함하는 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 호장근 뿌리 추출물 및 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐을 유효성분으로 포함하는, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 화장료 조성물; 의약외품 조성물; 및 상기 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 피부 탄력 증진 또는 주름 개선 방법에 관한 것이다.
본 발명에 따른 호장근 뿌리 추출물 및 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐을 포함하는 조성물은 제1형 프로콜라겐 C-말단 프로펩티드(PICP) 합성 촉진 효과가 우수하여, 피부 주름 개선을 위한 화장품 및 의약외품 등에 유용하게 사용할 수 있다.

Description

호장근 뿌리 추출물을 포함하는 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 화장료 조성물{Cosmetic composition for enhancing skin elasticity or improving skin wrinkle containing Polygonum Cuspidatum root exracts}
본 발명은 호장근 뿌리 추출물 및 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐을 유효성분으로 포함하는 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 화장료 조성물; 의약외품 조성물; 및 상기 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 피부 탄력 증진 또는 주름 개선 방법에 관한 것이다.
고령 인구 증가 및 기대 수명 상승에 따라 탄력 및 주름 개선을 중요시하는 피부 노화 방지에 대한 관심이 더욱 높아지고 있다. 피부는 인체 부피의 약 16%를 차지하는 기관으로, 신체의 가장 바깥에 존재하여 외부 환경 및 자극으로부터 우리 몸을 보호한다. 이러한 피부는 신체 내 기관들에 비해 외부 자극에 항상 노출되어 있기 때문에 쉽게 공격을 받을 수 있고, 특히 얼굴 피부의 경우에는 자외선 및 공해 물질에 직접적으로 노출되어 있으므로 다른 신체 피부에 비해 노화가 발생하기 쉬운 기관이다.
피부노화는 자연히 발생하는 내인성 노화와 외부 요인에 의해 일어나는 외인성 노화로 구분된다. 내인성 노화의 주된 요인으로 유전적인 요인이 언급되며, 이는 피부 세포 및 조직의 구조와 변화를 결정한다. 한편 외인성 노화의 요인은 외부에서 유래된 것으로, 영양 부족, 자외선, 환경오염에 의한 영향 등이 있을 수 있으며 이는 유전적인 요인과 달리 얼마든지 예방 가능하고 피할 수 있는 요인이다.
이러한 요인으로 인해 피부노화가 진행됨으로써, 피부가 건조해지고 거칠어지며 주름 생성, 탄력 저하, 색소 침착 등의 증상이 일어나게 된다. 특히, 대표적인 피부노화 증상으로 언급되는 주름 및 탄력 저하의 경우, 진피 내 주 단백질인 콜라겐 및 엘라스틴의 감소 및 변형이 직접적으로 관여하는 것으로 알려져 있다. 즉, 피부 주름의 시작은 진피의 노화에서부터 진행되는 것으로, 탄력 섬유인 엘라스틴의 구조가 변화되어 피부는 늘어지면서 주름이 생기게 되며, 진피의 콜라겐을 비롯한 결합조직 성분을 분해시키는 MMPs(matrix metalloproteinase) 활성 증가로 인해 콜라겐 합성이 저해되어 주름이 증가한다는 연구가 많이 보고되어 있다.
콜라겐은 피부의 생리적 기능 저하로 인해 양적 감소를 보이나, 자외선, 흡연, 스트레스 등의 외인적 요인으로 인해 콜라겐의 구조 및 합성량 감소가 가속화된다. 특히 중년 여성의 경우 폐경 이후 콜라겐이 더욱 빠르게 소멸되어 피부 탄력이 떨어지고 주름이 깊어지는 등의 노화가 가속화 된다고 알려져 있어, 콜라겐 합성을 촉진하는 화장료 조성물 연구가 지속되고있다.
콜라겐 합성 촉진을 위해 레티노인산, α-토코페롤, 아스코르빈산 등이 화장품 및 의약품 에 배합되어 이용되어 왔으나, 원료 불안정성으로 인해 제형에 배합되었을 경우 변취, 변색 등 제형의 안정성에 영향을 주고 피부 자극에 대한 이슈도 지속적으로 발생하고 있다. 이러한 단점을 극복하기 위해 천연물 유래 물질들을 이용한 주름 개선용 화장료 조성물 개발이 진행되고 있으며, 보다 효과적으로 피부 노화를 개선 및 방지할 수 있는 화장료 개발을 필요로 한다.
호장근(Polygonum Cuspidatum)은 한국, 일본, 타이완 및 중국에 분포하고 있는 산지에서 자라는 마디풀과에 속하는 다년생 초본식물로 뿌리줄기가 옆으로 자라면서 새싹이 돋아 포기를 형성하며 잎은 어긋나고 난형 식물로 예로부터 황달, 이질, 이뇨, 거풍, 월경불순, 간염, 골수염 등 치료를 위한 약재로 사용되어왔다. 호장근의 뿌리는 폴리고닌, 안스론, 크리소파놀, 레스베라트롤, 하이페란 등의 성분이 함유되어 있다. 호장근 뿌리 추출물은 부패나 변질을 방지하는 산화방지, 활성 산소를 차단하여 피부 세포를 보호하여 피부 노화를 방지, 멜라닌 색소의 형성을 돕는 티로시나아제의 활성을 막아 멜라닌 색소가 침착되는 현상을 방지하여 맑은 피부 톤 유지 및 개선 등의 효능을 가지고 있다고 알려져 있으나, 주름 개선 효과에 대해서는 알려진 바가 적고, 효능의 시너지 효과에 대해서는 알려진 바가 없다.
2,3-부탄다이올(2,3-butanediol)은 꿀, 와인, 된장 등의 천연 발효 식품뿐만 아니라, 식물의 뿌리, 흙과 같은 자연계에 널리 존재하는 천연물질로, 보습효과가 띄어나고, 항균 및 방부, 작물 보호 등의 효능이 있어 화장품과 농업 분야 등에서도 활용이 가능하다.
데사미도콜라겐(Desamido collagen)은 carboxylic acid 그룹에서 변형된 amide 그룹을 제거한 콜라겐으로서, 예를 들어, 헤어 컨디셔닝제, 피부 컨디셔닝제, 보습제, 수분증발차단제, 피부유연화제, 피막형성제 등, 피부에 보습 역할을 하고 피부를 탄력있고 매끄럽게 가꿀 목적으로 배합하는 원료로서 사용된다.
이러한 배경하에, 본 발명자들은 천연에 존재하는 재료를 활용하여 피부 주름 개선에 시너지 효과를 낼 수 있는 물질을 개발하고자 예의 노력한 결과, 호장근 뿌리 추출물 및 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐을 함유하는 혼합 조성물이, 단독 성분으로 함유하는 경우보다 콜라겐 합성 촉진에 의한 주름 개선에 더욱 탁월한 효능을 나타내며, 제형적으로도 안정함을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은 호장근 뿌리 추출물 (Polygonum Cuspidatum root extracts)을 유효성분으로 포함하는, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 호장근 뿌리 추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 호장근 뿌리 추출물 및 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐을 유효성분으로 포함하는 조성물을 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선 방법을 제공하는 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 하나의 양태는, 호장근 뿌리 추출물 (Polygonum Cuspidatum root extracts)을 유효성분으로 포함하는 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물은 호장근 뿌리 추출물을 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐과 혼합한 조성물일 수 있으며, 이를 통해 주름 개선에 대해 시너지 효과를 줄 수 있다.
본 발명에서 용어, "호장근"은, 다년초인 호장(Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.), 왕호장(Polygonum sachalinense F. Schmidt ex Maxim.) 및 둥근잎호장(Polygonum ellipticum Migo) 등 마디풀과(Polygonaceae)에 속하는 호장의 뿌리 및 근경을 말린 것으로, 호장근은 옛날부터 민간에서 이뇨, 통경제, 진정제로 사용되어 왔으며, 완하, 이뇨, 통경, 화농성 피부염, 뇨도염, 방광염, 고혈압, 암 동맥경화 등의 여러 질병을 치료하기 위하여 우리나라를 비롯하여 동양권의 전통의학에서 이용되어 왔다.
본 발명에 있어서, 상기 호장근 뿌리는 상업적으로 판매되는 것을 구입하여 사용하거나, 자연에서 채취 또는 재배된 것을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서 용어, "추출물(extract)"은, 목적하는 물질을 다양한 용매에 침지한 다음, 상온, 저온 또는 가온 상태에서 일정시간 동안 추출하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 뿐만 아니라, 상기 결과물에 더하여, 상기 결과물의 희석액, 이들의 농축액, 이들의 조정제물, 정제물 등을 모두 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있다. 이에 따라, 본 발명에서 제공하는 호장근 뿌리 추출물은 이를 추출 처리하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함하는 것으로 해석될 수 있다.
본 발명의 호장근 뿌리 추출물에 있어서 이의 추출 방법은 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
상기 추출에 사용되는 용매의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있고, 이들은 단독으로 사용되거나 1종 이상 혼합하여 사용될 수 있으며, 구체적으로 알코올이 사용될 수 있으며, 주로 탄소수 1 내지 4의 알코올을 사용할 수 있다.
또한, 상기 추출물은 추출 후 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 용어, "탄력 증진" 또는 "피부 탄력 증진"은, 본 발명의 조성물을 이용하여 피부의 탄력을 높이는 것을 의미할 수 있다.
본 발명에서 용어, "주름 개선" 또는 "피부 주름 개선"은, 본 발명의 조성물을 이용하여 개체의 피부에 존재하는 주름을 완화시키는 것을 의미할 수 있다.
본 발명에서 용어, "2,3-부탄다이올"은, 2R,3S-부탄다이올 및 2R,3R-부탄다이올, 2S,3S-부탄다이올 중 적어도 하나를 포함할 수 있고, 자연계에 널리 존재하는 천연물질이며 보습효과가 우수한 기능성 제제로서, 화장료 조성물의 제형, 용도에 따라 적절히 배합되어 사용될 수 있다. 또한, 상기 2,3-부탄다이올은 펜틸렌글라이콜과 1,2-헥산다이올 등 다른 방부, 보습, 용매제에 비해 세포 독성이 적은 원료일 수 있다.
본 발명에서 용어, "데사미도콜라겐"은, 화장품 성분으로 알려져 있는 제3형 콜라겐의 서열을 포함하는 폴리펩타이드(예컨대, 폴리펩타이드-69)로, 다른 아미노산보다 제3형 콜라겐에 특이적으로 많은 아미노산 서열 부분을 포함할 수 있다. 구체적으로, 프롤린(Proline), 및 글리신(Glycine)의 아미노산을 높은 비율로 포함할 수 있다. 상기 데사미도콜라겐을 화장료에 적용시 단독 원료 또는 혼합 원료로 사용이 가능할 수 있다. 예컨대, 화장료에 흔히 사용되는 데사미도 콜라겐 혼합 원료로는 베이비 콜라겐TM, Elastin PG 2000, Derason® 등이 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 호장근 뿌리 추출물과 2,3-부탄다이올, 또는 호장근 뿌리 추출물과 데사미도콜라겐을 각각 혼합한 조성물은 호장근 뿌리 추출물, 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐을 단독으로 처리했을 때보다 콜라겐 합성 유전자인 제I형 전구 콜라겐 C말단 펩타이드(PICP) 발현을 더욱 증가시키는 시너지 효과를 확인하였다 (도 1 및 도 2).
또한 일 실시예에서, 호장근 뿌리 추출물과 2,3-부탄다이올을 함께 사용함으로써 유효 성분의 제형 내 안정성을 높여 화장료 적용시 자극 없이 안정적임을 확인하였다 (도 4).
상기 호장근 뿌리 추출물 및 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐은 호장근 뿌리 추출물과 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐이 혼합되어 시너지 효과가 발생하는 것이라면, 혼합하는 비율에서 제한되지 않는다.
예컨대, 호장근 뿌리 추출물 및 2,3-부탄다이올은 1:100 내지 1:1, 1:100 내지 1:5, 1:100 내지 1:10 또는 1:100 내지 1:20로 혼합한 것일 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다.
상기 호장근 뿌리 추출물 및 2,3-부탄다이올 혼합 시료는 조성물 전체 중량 대비 0.0001 내지 50 중량%(v/v)로 포함할 수 있고, 구체적으로 0.001 내지 10 중량%(v/v)로 포함할 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다.
상기 호장근 뿌리 추출물 및 데사미도콜라겐 혼합 시료는 조성물 전체 중량 대비 0.0001 내지 50 중량%(v/v)로 포함할 수 있고, 구체적으로 0.001 내지 5 중량%(v/v)로 포함할 수 있으나, 특별히 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 있어서, 호장근 뿌리 추출물 및 2,3-부탄다이올, 또는 호장근 뿌리 추출물 및 데사미도콜라겐의 혼합 시료가 총 조성물 중량 대비 0.0001 중량% 미만일 경우 본래 목적으로 하는 활성을 충분하게 달성할 수 없어 바람직하지 못할 수 있고, 15중량%를 초과하는 경우 증가하는 함량만큼 뚜렷한 효과의 증대가 기대되지 않아 비경제적일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제 및 향료로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 물질을 추가로 포함하는 것인, 화장료 조성물을 제공할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
한편, 본 발명의 제형이 캡슐인 경우에는, 알지네이트(alginate) 캡슐, 아가(agar) 캡슐, 젤라틴(gelatin) 캡슐, 왁스(wax)류 캡슐, 또는 이중 캡슐의 형태로 제형화될 수 있으며, 특별히 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 호장근 뿌리 추출물 및 2,3-부탄다이올, 또는 호장근 뿌리 추출물 및 데사미도콜라겐 이외에 통상적으로 이용되는 보조제, 예컨대 친수성 또는 친지성 겔화제, 친수성 또는 친지성 활성제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충전제, 차단제, 안료, 흡취제 및 염료 등을 포함할 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 다른 하나의 양태는, 호장근 뿌리 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.
본 발명의 의약외품 조성물은 호장근 뿌리 추출물을 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐과 혼합한 조성물일 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어 "호장근 뿌리 추출물", "2,3-부탄다이올", "데사미도콜라겐", "피부 탄력 증진" 및 "주름 개선"은 상기에서 서술한 바와 같다.
본 발명의 의약외품 조성물에는 상기 성분 외에 필요에 따라 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더욱 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제는 본 발명의 효과를 해하지 않는한 제한되지 않으며, 예를 들어 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제, 윤활제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다.
본 발명의 의약외품 조성물은 소독 청결제, 샤워폼, 연고액, 물티슈, 코팅제 등을 예시할 수 있으나 이에 제한되는 것이 아니며, 의약외품의 제제화 방법, 용량, 이용방법, 구성성분 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 또 다른 하나의 양태는, 호장근 뿌리 추출물을 포함하는 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 피부 탄력 증진 또는 주름 개선 방법을 제공한다.
상기 조성물은 호장근 뿌리 추출물을 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐과 혼합한 조성물일 수 있다.
본 발명에서 사용된 용어 "호장근 뿌리 추출물", "2,3-부탄다이올", "데사미도콜라겐", "피부 탄력 증진" 및 "주름 개선"은 상기에서 서술한 바와 같다.
본 발명에서 사용되는 용어, "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 환자에게 본 발명의 조성물 도입하는 것을 의미하며, 상기 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물이 피부 탄력 증진 또는 주름 개선에 효과가 있는 특성상, 상기 조성물의 투여 경로는 피부에 도포하여 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물을 매일 투여 또는 간헐적으로 투여해도 좋고, 1일당 투여 횟수는 1회 또는 2~3회로 나누어 투여하는 것이 가능하다. 또한, 본 발명의 조성물은 피부 탄력 증진 또는 주름 개선을 위하여 단독으로, 또는 다른 약물 치료와 병용하여 사용할 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명에서 용어, "개체"는 주름 또는 피부 주름이 발생하였거나 발생할 수 있는 인간을 포함한 쥐, 생쥐, 가축 등의 모든 동물을 의미한다. 구체적으로, 인간을 포함한 포유동물일 수 있다.
본 발명에 따른 호장근 뿌리 추출물 및 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐을 유효성분으로 포함하는 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 조성물은 피부에 안전하면서도 콜라겐 합성 촉진에 대한 시너지 효과가 우수하여, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선을 위한 화장품 및 의약외품 등에 이용할 수 있다.
도 1의 A)~C)는 인간 섬유아세포에서 호장근 뿌리 추출물, 2,3-부탄다이올, 데사미도콜라겐 각각을 단독 처리했을 때의 Collagen type 1 발현량을 나타낸 그래프이다.
도 2의 A) 및 B)는 인간 섬유아세포에서 호장근 뿌리 추출물과 2,3-부탄다이올, 및 호장근 뿌리 추출물과 데사미도콜라겐 혼합 시료를 각각 처리했을 때의 Collagen type 1 발현량을 나타낸 그래프이다.
도 3의 A)~C)는 인간 섬유아세포에서 호장근 뿌리 추출물 및 호장근 뿌리 추출물과 상용성이 우수한 폴리올과의 혼합 시료를 처리했을 때의 Collagen type 1 발현량을 나타낸 그래프이다.
도 4는 화장료에 사용되는 폴리올 7종과 호장근 뿌리 추출물 간의 상용성을 평가한 사진이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 인간 섬유아세포 배양
인간 foreskin 유래 섬유아세포를 배양 접시의 바닥에 접종한 후, penicillin (100 IU/ml), streptomycin(100ug/ml) (GibcoBRL, U.S.A.) 및 10% 우태아혈청 (fetal bovine serum; FBS, GibcoBRL, U.S.A.)이 포함된 Dulbecco's modified eagles medium (DMEM, GibcoBRL, U.S.A.)을 넣고 37℃, 5% 이산화탄소를 포함하는 배양기(New Brunswick Scientific, UK) 내에서 배양을 시행하였다. 섬유아세포가 배양접시의 표면을 약 70-80%정도 덮을 정도가 되면 0.25% trypsin (Gibco BRL, U.S.A.)을 처리하여 세포들을 회수한 후 배양을 실시하였으며, 일부는 액체 질소 하에 냉동 보관하면서 계대배양을 실시하였다.
실시예 2: 콜라겐 합성 증진 평가
호장근 뿌리 추출물, 2,3-부탄다이올, 데사미도콜라겐 각각 또는 혼합 시료를 인간 유래 섬유아세포의 배양액에 첨가하여 세포 수준에서 콜라겐 합성 증진 효과를 평가하였다. 평가에는 섬유아세포에서 대표적으로 가장 많이 합성이 이루어지는 제 I 형 전구 콜라겐 C말단 펩타이드(PICP)를 정량적 측정하였다.
구체적으로, 인간 섬유아 세포를 세포 배양 플레이트 (24 well cell culture plate)에 각각 1x105/well로 분주하여 10% 우태아혈청을 포함한 DMEM 에서 24시간 배양하였다. 배양된 세포에 혈청을 포함하지 않은 DMEM으로 교체한 후, 각각의 시료를 배지에 희석하여 48시간 동안 처리하였다. 배양 상층액 20 ul를 취하여 PICP EIA kit(Procollagen Type I C-Peptide Enzyme ImmunoAssay KIT)로 각 농도에서의 콜라겐 증가 정도를 450 nm에서 측정하였다. PICP 표준 농도로 그래프를 작성하여 정량적인 계측을 하였으며, 하나의 농도 당 3가지 경우의 수로 실험하였고, 그 결과를 평균하여 표시하였다. 양성 대조군으로는 TGF-β(10 ng/ml)를 사용하였다.
그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 호장근 뿌리 추출물, 2,3-부탄다이올, 데사미도콜라겐을 단독으로 처리한 경우 Collagen type1 발현이 증가하였고, 이는 각 원료의 널리 알려진 효능에 부합하는 결과이다.
그러나, 도 2에 나타난 바와 같이, 호장근 뿌리 추출물과 2,3-부탄다이올, 또는 호장근 뿌리 추출물과 데사미도콜라겐을 혼합 처리한 경우, 도 1의 단독 처리 대비 콜라겐 발현량이 현저히 증가하는 것을 확인하였다.
이를 통해 본 발명의 화장료 조성물은 콜라겐 발현량을 증가시킴으로써 피부의 탄력 증진 효과를 나타낼 수 있고, 그 효과는 호장근 뿌리 추출물과 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐의 혼합에서 각각을 단독으로 처리한 경우에 비해 시너지 효능을 나타냄을 확인하였다.
실시예 3: 호장근 뿌리 추출물과 폴리올의 상용성 비교
호장근 뿌리 추출물의 석출 혹은 안정화 정도를 평가하기 위해, 화장료에 사용되는 폴리올 7종과의 상용성을 평가하였다.
구체적으로, 실시예 1과 2는 2,3-부탄다이올에 호장근 뿌리 추출물을 0.5% 또는 5.0%를 첨가하여 상온에서 900 rpm으로 1시간 교반하여 제조하였다.
또한, 비교예 1 내지 12는 실시예 1과 폴리올만 상이할 뿐 동일한 방법으로 제조하였다. 호장근 뿌리 추출물의 안정성 차이가 고온이나 온도 순환 조건보다 저온에서 두드러지게 나타나는 경향이 있어, 실시예 1과 2 및 비교예 1 내지 12의 상용성은 교반 직후, 상온(25℃ 조건에서 4주 동안 보관한 후 확인하였다. 냉동(-20℃) 조건의 경우, 해당 기간 동안 해동과 냉동을 5번 반복하였다. 각 조건에서의 안정성은 석출 및 변색 여부를 중점적으로 육안으로 관찰하여 하기 표 1 및 표 2에 나타내었다.
실시예
1 2
폴리올 2,3-부탄다이올
호장근뿌리 추출물 0.50% 5.00%
교반직후 O O
상온(25℃) O O
냉동(-20℃) O O
평가기준 - O: 안정, △: 미량 석출, Ｘ: 석출
비교예
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
폴리올 다이프로필렌글라이콜 1,3-부탄다이올 펜틸렌
글라이콜		 1,2-헥산다이올 에톡시
다이글라이콜		 다이메틸
아이소소바이드
호장근뿌리
추출물		 0.50% 5.00% 0.50% 5.00% 0.50% 5.00% 0.50% 5.00% 0.50% 5.00% 0.50% 5.00%
교반
직후		 △ Ｘ ○ △ △ Ｘ ○ Ｘ ○ ○ ○,변색 ○,변색
상온(25℃) △ Ｘ ○ △ ○ Ｘ ○ Ｘ ○ ○,변색 ○,변색 ○,변색
냉동(-20℃) △ Ｘ ○ △ △ Ｘ ○ Ｘ ○ ○,변색 ○,변색 ○,변색
평가기준 - O: 안정, △: 미량 석출, Ｘ: 석출
그 결과 상기 표 1 및 표 2에서 나타난 바와 같이, 실시예 1과 2에서 볼 수 있듯이, 호장근 뿌리 추출물과의 상용성은 2,3-부탄다이올이 가장 우수하였다.
에톡시다이글라이콜과 다이메틸아이소소바이드가 유사한 수준으로 우수하기는 하나, 에톡시다이글라이콜의 경우 소량 사용 시에도 피부 자극 이슈가 있고, 고함량 사용시(비교예 10) 분홍빛으로 변색되었으며, 이는 보관 기간이 길어짐에 따라 변색이 심화되었다. 다이메틸아이소소바이드는 호장근 뿌리 추출물 0.5% 사용시(비교예 12)에도 옅은 분홍색으로의 변색을 보였으며, 호장근 뿌리 추출물의 함량이 증가함에 따라 변색의 정도가 심해지는 것을 확인하였다.
이에 따라 호장근 뿌리 추출물과 2,3-부탄다이올을 함께 사용하는 것이 효능 측면뿐 아니라 원료의 상용성 및 안정성 측면에서도 우수한 결과를 나타냄을 확인하였다.
실시예 4: 호장근 뿌리 추출물과 폴리올 종류에 따른 콜라겐 합성 능력 평가
상기 표 2에서, 2,3-부탄다이올 외에 호장근 뿌리 추출물과 상용성이 우수하다고 평가된 1,3-부탄다이올, 에톡시다이글리세린, 다이메틸아이소소바이드에 대해 호장근 뿌리 추출물과 혼합시의 콜라겐 합성 능력을 추가로 평가 및 확인하였다.
그 결과, 도 3에 나타난 바와 같이, 호장근 뿌리 추출물과 2,3-부탄다이올을 혼합하여 사용한 경우 콜라겐 합성 능력이 두드러지게 증진되었지만, 그 외 폴리올과의 혼합 시료에서는 오히려 콜라겐 합성 능력이 저해됨을 확인할 수 있었다.
제조예 1: 에센스 조성물 제조
호장근 뿌리 추출물 및 2,3- 부탄다이올 또는 데사미도콜라겐을 함유하는 화장료의 제형 안정성을 평가하기 위해 하기 표 3에 기재한 성분과 함량으로 화장료 조성물을 제조하였다.
구체적으로, 실시예 3은 표 3에 나타난 조성비로, 원료 1에 원료 3을 용해시킨 후, 원료 4~10을 투입하여 용해하였다. 원료 3이 용해된 것을 확인한 후, 원료 4~9를 순차적으로 용해시키고, 이 후 원료 10을 서서히 투입하여 균일하게 교반하였다. 원료 11~13은 별도의 비이커에 계량하고, 40~45℃로 가온하고 용해시킨 후, 수상에 서서히 투입하여 15분간 균일하게 교반함으로써 에센스를 제조하였다. 비교예 13 및 비교예 14는 실시예 3과 같은 방법으로 제조하였다.
하기 표 3에 나타낸 성분과 함량을 사용하여 2,3-부탄다이올, 1,3-부탄다이올 각각을 포함한 실험군 및 부탄다이올을 포함하지 않은 대조군의 에센스 제형 화장료를 제조하였다(단위: 중량%).
성분명 실시예 3 비교예 13 비교예 14
1 2,3-부탄다이올 10 - -
2 1,3-부탄다이올 - 10 -
3 호장근뿌리추출물 0.2 0.2 0.2
4 정제수 To 100 To 100 To 100
5 킬레이트제 적량 적량 적량
6 방부제 적량 적량 적량
7 베타인 5 5 5
8 트레할로스 1 1 1
9 알란토인 0.2 0.2 0.2
10 잔탄검 0.2 0.2 0.2
11 가용화제 0.5 0.5 0.5
12 에탄올 3 3 3
13 항료 적량 적량 적량
(단위: 중량%)
실시예 5: 제형 안정성 평가
상기 실시예 3과 비교예 13 및 비교예 14의 화장료 조성물에 대하여 상용성을 평가하였다. 보관 조건은 앞의 폴리올 상용성 평가와 동일하게, 실험 간 차이가 두드러지게 관찰되는 온도 조건을 선별하여 상온 및 저온에서 중점적으로 관찰하였고, 비교를 위해 고온 조건도 추가 관찰하였다.
구체적으로, 상기 화장료 조성물을 초자 용기에 담아 고온(45℃), 상온(25℃), 냉장(0℃)에서 4주 동안 보관하였다. 냉동(-20℃) 조건의 경우 해동과 냉동을 5회 반복하였다. 각 조건에서 상(phase)의 분리 여부 및 석출 여부를 육안으로 관찰하여 하기 표 4에 나타내었다.
실시예 3 비교예 13 비교예 14
고온 (45℃) ○ ○ ○
상온 (25℃) ○ ○ △
냉장 (0℃) ○ ○ △
냉동 (-20℃) ○ △ Ｘ
평가기준 - O: 안정, △: 미량 석출, Ｘ: 석출
그 결과, 상기 표 4에 나타난 바와 같이, 2,3-부탄다이올을 사용한 실시예 3의 경우 모든 보관 조건에서 석출 현상 없이 균일하게 안정한 제형이 유지됨을 확인하였다. 그러나 1,3-부탄다이올을 사용한 비교예 13의 경우 냉동 조건을 반복하는 과정에서 약간의 석출이 발생하였고, 이동 횟수가 반복될수록 석출량이 증가하는 것이 관찰되었다. 또한 폴리올을 사용하지 않은 비교예 14의 경우에는, 대부분의 보관 조건에서 석출이 관찰되었다.
상기 실험 결과를 통해서, 폴리올은 호장근 뿌리 추출물의 제형 안정성에 도움을 주고, 폴리올 중에서도 2,3-부탄다이올과 함께 사용했을 때 화장료의 안정성이 두드러지게 향상됨을 확인할 수 있었다.
실시예 6: 피부 안정성 평가
상기 물질들의 화장료로서의 피부 안전성을 확인하기 위하여 피부 자극 테스트를 진행하였다.
구체적으로, 시험 부위에 피부질환이 없는 건강한 성인 지원자 20명 대상으로, IQ Ultra™ patch test units (Chemotechnique MB Diagnostics AB, Vellinge, Sweden)을 사용한 자극 테스트를 하였다. 아래의 계산식을 이용하여 일차자극지수 계산시 0.20을 초과하는 시료(전체 연구대상자의 20%를 초과하는 빈도로 1점에 해당하는 양성자극반응이 관찰된 경우 또는 그에 상당하는 경우에 해당)를 자극 유발 가능 시료로 판정하였고, 표준 물질로는 1% Sodium Lauryl Sulfate (CAS Number: 151-21-3) 수용액을 사용하였다. 그 결과, 하기 표 5에 나타난 바와 같이 피부에 안전함을 확인하였다.
시료명 자극지수
Positive control (1.0% SLS) 0.18
실시예 3* 0.03
*실시예 3: 호장근뿌리추출물 및 2,3-부탄다이올 함유
이를 종합하면, 본 발명의 호장근 뿌리 추출물 및 2,3-부탄다이올 또는 데사미도콜라겐을 함유하는 혼합 조성물이 단독 성분으로 함유하는 경우보다 콜라겐 합성 촉진에 의한 피부 탄력 증진 또는 주름 개선에 더욱 탁월한 효능을 나타내며, 제형적으로도 안정함을 확인함을 확인하였다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (5)

  1. 호장근 뿌리 추출물(Polygonum Cuspidatum extracts) 및 데사미도콜라겐을 유효성분으로 포함하는, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 제1형 프로콜라겐 C-말단 프로펩티드(procollagen type 1, C-terminal propeptide, PICP) 합성을 촉진하는 것인, 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은, 물, 계면활성제, 보습제, 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제 및 향료로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 추가로 포함하는 것인, 화장료 조성물.
  4. 호장근 뿌리 추출물 및 데사미도콜라겐을 유효성분으로 포함하는, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 의약외품 조성물.
  5. 호장근 뿌리 추출물 및 데사미도콜라겐을 유효성분으로 포함하는 조성물을 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 피부 탄력 증진 또는 주름 개선 방법.
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