KR102534017B1

KR102534017B1 - 약제학적 제형의 점도 감소

Info

Publication number: KR102534017B1
Application number: KR1020177011706A
Authority: KR
Inventors: 크리스토퍼 제임스 슬로에이; 세카 카나푸람
Original assignee: 암젠 인크
Priority date: 2014-10-23
Filing date: 2015-10-22
Publication date: 2023-05-19
Also published as: EP3909611A1; AU2021200990A1; EP3909611B1; JP2017531682A; CA2964786A1; CN107206070B; JP2020037559A; EA038462B1; WO2016065181A1; JP7411615B2; AU2021200990B2; EA201991447A1; MX2021015789A; US20240066124A1; CL2017000984A1; CN114569716A; EP3209332A1; ZA201702762B; MX2017005243A; AU2015335743B2

Abstract

치료 단백질과 조합하여, 점도-감소(viscosity-reducing) 농도의 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제를 이용하는, 약제학적 제형의 점도를 감소시키는 방법이 제공된다. 또한 안정한 약제학적 제형이 제공된다.

Description

약제학적 제형의 점도 감소{REDUCING VISCOSITY OF PHARMACEUTICAL FORMULATIONS}

관련 출원에 대한 교차참조

본원은 2014년 10월 23일 출원된 미국 가출원 번호 62/067,637을 우선권으로 주장하고, 이것은 전체적으로 본 명세서에 참고로 편입된다.

약제학적으로 활성 단백질, 예컨대 항체는 액체 용액에, 특히 비경구 주사용으로 빈번하게 제형화된다. 피하 경로를 통해 투여되어야 하는 제품, 예를 들면 자가 투여에 사용하는 제품에 대해서; 1-2 밀리리터보다 더 큰 전달 용적으로의 제형은 잘 용인되지 않는다. 그와 같은 경우에 고농축 단백질 제형이 제한된 용량 용적을 충족시키는 것이 바람직하다. 고용량 및 작은 용적 요건의 이러한 투여는 단백질 치료제가 100mg/ml 또는 그 이상의 상향의 농도에 도달할 수 있다는 것을 의미한다. 고농축 단백질 제형은 단백질 치료제의 제조가능성 및 투여에 많은 어려움을 줄 수 있다. 일부 고농축 단백질 제형에 의해 제기된 한 가지 어려움은 증가된 점도이다. 고점도 제형은 체적 및 충전 단계를 포함하여 제조하는 동안 조작하기가 어렵다. 고점도 제형은 또한 주사기 안으로 주입하여 주사하기가 어렵기 때문에, 환자에게 투여하기가 어렵고 불쾌하게 한다. 고농축 단백질 제형의 점도를 감소시키기에 유용한 화합물을 동정하고, 이러한 제형의 점도를 감소시키는 방법을 개발하고, 그리고 감소된 점도를 갖는 약제학적 제형을 제공하는 필요성은 약제학적 산업에서 잘 알려져 있다. 본 발명은 이러한 화합물, 방법 및 제형을 제공한다.

요약

단백질 제형의 점도 감소에 사용하기 위해 선택된 농도로 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제가 제공된다. 고농도 치료 단백질을 점도-감소시키기 위하여 사용되는, 선택된 농도에서의 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제와 조합함에 의해 단백질 제형의 점도를 감소시키는 방법이 본 명세서에서 제공된다. 또한, 치료 단백질과 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제를 포함하는 동결건조된 분말이 제공되고 여기서 상기 부형제는 희석제로 재구성 시 점도를 감소시키기에 유효한 중량: 중량 농도로 존재한다. 또한, 치료 단백질과 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제를 함유하는 재구성용 희석제를 포함하는 동결건조된 분말이 제공된다.

n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제와 조합하는 단계를 포함하는, 적어도 70mg/ml의 농도로 치료 단백질을 포함하는 액체 약제학적 제형의 점도를 감소시키는 방법이 본 명세서에서 제공된다. 일 구현예에서 상기 제형의 점도는 적어도 5% 감소된다. 또 다른 구현예에서 상기 제형의 점도는 적어도 10% 감소된다. 또 다른 구현예에서 상기 제형의 점도는 적어도 20% 감소된다. 또 다른 구현예에서 상기 제형의 점도는 적어도 30% 감소된다. 또 다른 구현예에서 상기 제형의 점도는 적어도 40% 감소된다. 또 다른 구현예에서 상기 제형의 점도는 적어도 50% 감소된다. 또 다른 구현예에서 상기 제형의 점도는 적어도 60% 감소된다. 또 다른 구현예에서 상기 제형의 점도는 적어도 70% 감소된다. 또 다른 구현예에서 상기 제형의 점도는 적어도 80% 감소된다. 관련된 구현예에서, 이러한 방법에 의해 생산된 약제학적 제형이 제공된다.

또한, 적어도 70mg/ml의 농도로 치료 단백질과, n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 일 구현예에서 상기 부형제의 농도는 약 5mM 내지 약 700mM이다. 관련된 구현예에서 상기 부형제의 농도는 약 100mM 내지 약 400mM이다. 또 다른 관련된 구현예에서 상기 부형제의 농도는 약 200mM 내지 약 300mM이다. 여전히 또 다른 관련된 구현예에서 상기 부형제의 농도는 약 140mM 내지 약 170mM이다. 또한, 약 4.0 내지 약 8.0의 pH를 갖는 이러한 약제학적 조성물이 제공된다. 관련된 구현예에서 pH는 약 4.0 내지 약 6.0이다. 추가의 관련된 구현예에서 pH는 약 4.8 내지 약 5.4이다.

또한, 상기에서 기재된 바와 같은 약제학적 제형을 동결건조하는 단계를 포함하는 동결건조된 분말을 제조하는 방법이 제공된다.

치료 단백질과 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제를 포함하는 동결건조된 분말이 본 명세서에서 제공되고 여기서 상기 부형제는 희석제로 재구성 시 점도를 감소시키기에 유효한 중량:중량 농도로 존재한다. 일 구현예에서 상기 부형제는 치료 단백질 mg당 약 100㎍ 내지 치료 단백질 mg당 약 1mg의 농도로 존재한다. 관련된 구현예에서 상기 부형제는 치료 단백질 mg당 약 200㎍ 내지 약 500㎍의 농도로 존재한다. 추가의 관련된 구현예에서 상기 부형제는 치료 단백질 mg당 약 150㎍ 내지 약 250㎍의 농도로 존재한다. 또한, 멸균된 수성 희석제를 첨가하는 단계를 포함하는 상기에서 기재된 바와 같은 동결건조된 분말을 재구성하는 방법이 제공된다.

또한, 항체인 치료 단백질이 제공된다. 또한, 상기에서 기재된 바와 같은 제형 또는 조성물이 제공되고 여기서 상기 치료 단백질은 항체이다. 부가하여, 상기에서 기재된 바와 같은 동결건조된 분말이 본 명세서에서 또한 제공되고 여기서 상기 치료 단백질은 항체이다.

비특허문헌 1: C. Jackisch, et al., Geburtshilfe Frauenheilkd 2014; 74(4): 343-349 비특허문헌 2: Shire et al., (2010), "Challenges in the Development of High Protein Concentration Formulations," Current Trends in Monoclonal Antibody Development and Manufacturing. Biotechnology: Pharmaceutical Aspects, vol XI. Springer, New York, NY.

도 1은 항체 용액의 점도에 대한 다양한 부형제의 효과를 도시하는 막대 그래프이다.
도 2는 항체 용액의 점도에 대한 다양한 부형제의 효과를 도시하는 막대 그래프이다.

고농도 치료 단백질 제형의 점도를 감소시키는 것은 약제학적 산업에서 흥미로운 것이다. 부형제인, n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물은 이러한 제형의 점도를 감소시키는 것으로 밝혀졌다. 본 발명은 단백질 제형의 점도를 감소시키는데 사용하기 위해 선택된 농도로 부형제를 제공한다. 치료 단백질을 점도-감소 농도의 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제와 조합함에 의해 단백질 제형의 점도를 감소시키는 방법이 본 명세서에서 제공된다. 또한 치료 단백질과 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제를 포함하는 동결건조된 분말이 제공되고 여기서 상기 부형제는 희석제로 재구성 시 점도를 감소시키기에 유효한 중량:중량 농도로 존재한다.

맥락에 의해 달리 요구되지 않는 한, 단수의 용어들은 복수의 것들을 포함하고 그리고 복수의 용어들은 단수의 것을 포함한다. 일반적으로, 본 명세서에서 기재된 세포 및 조직 배양, 분자 생물학, 면역학, 미생물학, 유전학 및 단백질 및 핵산 화학 및 혼성화와 관련하여 사용된 명명법 및 이들의 기술은 당해 기술에 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다. 본 발명의 방법 및 기술은 당해 기술에서 잘 알려진 종래의 방법에 따라 그리고 달리 명시되지 않는 한 본 명세서 전반에 걸쳐 인용되고 논의된 다양한 일반적이고 그리고 보다 구체적인 참조에 기재된 바와 같이 일반적으로 수행된다. 예를 들면, 다음을 참고한다: Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (2001) 및 Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates (1992), 및 Harlow and Lane Antibodies: A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990). 효소 반응 및 정제 기술은 당해 기술에서 통상적으로 달성된 바와 같이 또는 본 명세서에서 기재된 바와 같이 제조자의 명세서에 따라 수행된다. 본 명세서에서 기재된 분석 화학, 합성 유기 화학 및 의약과 약제학 화학과 관련하여 사용된 용어 및 이들의 실험실 절차와 기술은 당해 기술에서 잘 알려지고 그리고 통상적으로 사용되는 것들이다. 화학 합성, 화학 분석, 약제학적 제제, 제형, 및 환자의 전달 및 치료에 대한 표준 기술이 사용될 수 있다.

확인된 모든 특허 및 다른 공보는, 예를 들면 기재된 것과 관련하여 사용될 수 있는 그러한 공보들에 기재된 방법론을 기술하고 개시하기 위해 전체적으로 참조로 본 명세서에 명확히 편입된다.

쌍성이온은 화합물에 대해 순 제로 전하를 초래하는 별도의 양전하 및 음전하를 갖는 것으로 특징지어진다. 대부분의 아미노산은 생리적 pH에서 쌍성이온이다. 본 명세서에서 개시된 바와 같이, 쌍성이온, 특히 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물을 함유하는 약제학적 제형은 폴리올 함유 제형보다 더 큰 또는 비교할만한 안정성을 가지면서 그 보다 낮은 점도를 일반적으로 가지는 것으로 밝혀졌다.

n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, 및 n-아세틸 프롤린은 천연 발생 아미노산의 변형된 형태이다. n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, 및 n-아세틸 프롤린은 아미노산의 d 및 l 형태 양자, 예컨대 n-아세틸-l 아르기닌, n-아세틸-d 아르기닌, n-아세틸-l 라이신, n-아세틸-d 라이신, n-아세틸-l 히스티딘, n-아세틸-d 히스티딘, n-아세틸-l 프롤린 및 n-아세틸-d 프롤린을 포함한다.

용어들 "폴리펩티드" 및 "단백질"은 본 명세서에서 상호교환적으로 사용된다. 본 발명의 안정한 약제학적 제형에서의 사용이 고려되는 예시적인 폴리펩티드는 항체, 펩티바디, 면역글로불린-유사 단백질, 비-항체 단백질 및 비-면역글로불린-유사 단백질을 포함한다. 변형된 당화를 갖는 폴리펩티드, 당화 없는 (비당화된) 폴리펩티드를 포함하는 천연 발생 단백질의 유사체가 본 발명의 제형에 봉입체로 고려된다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, "유사체"는 모 서열에 대해 삽입, 결실 또는 치환을 가지는 반면, 당해 분야의 숙련가에 공지된 생물학적 검정을 사용하여 측정된 바와 같이, 여전히 실질적으로 모 서열의 생물학적 활성을 유지하는 아미노산 서열을 지칭한다. 본 발명의 제형은 또한, 예를 들면, 수용성 폴리머 (예를 들면, 페길화된 것), 방사선핵종, 또는 다른 진단 또는 표적화 또는 치료적 모이어티를 부착하도록 화학적으로 변형된 천연 발생 또는 유사체 폴리펩티드의 유도체를 포함할 수 있다.

항체는 본 발명에 따라 제형화될 수 있다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "항체"는 완전히 조립된 항체, 단클론성 항체 (인간, 인간화된 또는 키메라성 항체를 포함함), 다클론성 항체, 다중특이적 항체 (예를 들면, 이중특이적 항체), 맥시바디, BiTe, DART, 및 이들이 원하는 생물학적 활성을 나타내는 한 전술한 것의 상보성 결정 영역 (CDR)을 포함하는 항원 (예를 들면, Fab', F'(ab)2, Fv, 단일 쇄 항체, 디아바디)에 결합할 수 있는 항체 단편을 포함한다.

적어도 1종의 항원-결합 펩티드에 부착된 항체 Fc 도메인을 포함하는 분자인 펩티바디는 일반적으로 PCT 공개공보 WO 00/24782에 기재된다. 면역글로불린 슈퍼패밀리의 구성원인 면역글로불린-유사 단백질은 항체 가변 영역의 일부분에 유사한 구조로 접힌 1종 이상의 면역글로불린-유사 도메인을 함유한다.

하기 중 1종 이상에 결합하는 것을 포함하는 단백질이 본 발명의 조성물 및 방법에 유용하다. 이들은, 비제한적으로, CD3, CD4, CD8, CD19, CD20, CD22, CD30, 및 CD34를 포함하고; 결합하는 수용체와 충돌하는 것을 포함하는 CD 단백질을 포함한다. HER2, HER3, HER4, 및 EGF 수용체를 포함하는 HER 수용체 패밀리 단백질. 세포 부착 분자, 예를 들면, LFA-I, MoI, pl50, 95, VLA-4, ICAM-I, VCAM, 및 알파 v/베타 3 인테그린. 비제한적으로, 혈관 내피 성장 인자 ("VEGF"), 성장 호르몬, 갑상선 자극 호르몬, 여포자극 호르몬, 황체형성 호르몬, 성장 호르몬 방출 인자, 부갑상선 호르몬, 뮬레리안-억제 물질, 인간 대식세포 염증성 단백질 (MIP-I -알파), 에리트로포이에틴 (EPO), 신경 성장 인자, 예컨대 NGF-베타, 혈소판-유도된 성장 인자 (PDGF), 예를 들면, aFGF 및 bFGF 포함하는 섬유아세포 성장 인자, 표피 성장 인자 (EGF), 다른 것 중에서, TGF-α와 TGF-βl, TGF-β2, TGF-β3, TGF-β4, 또는 TGF-β5를 포함하는 TGF-β를 포함하는 형질전환 성장 인자 (TGF), 인슐린-유사 성장 인자-I 및 -II (IGF-I 및 IGF-II), des(l-3)-IGF-I (뇌 IGF-I), 및 골유도성 인자를 포함하는 성장 인자. 비제한적으로 인슐린, 인슐린 A-쇄, 인슐린 B-쇄, 프로인슐린, 및 인슐린-유사 성장 인자 결합 단백질을 포함하는 인슐린 및 인슐린-관련된 단백질. 응고 및 응고-관련된 단백질, 예컨대, 다른 것 중에서, 인자 VIII, 조직 인자, 폰 빌레브란트 인자, 단백질 C, 알파-1-항트립신, 플라스미노겐 활성제, 예컨대 우로키나제 및 조직 플라스미노겐 활성제 ("t-PA"), 봄바진, 트롬빈, 및 트롬보포이에틴; (vii) 비제한적으로 알부민, IgE, 및 혈액형 항원을 포함하는 다른 혈액 및 혈청 단백질. 다른 것 중에서, 하기를 포함하는 이들의 콜로니 자극 인자 및 수용체, M-CSF, GM-CSF, 및 G-CSF, 및 이들의 수용체, 예컨대 CSF-1 수용체 (c-fms). 예를 들면, flk2/flt3 수용체, 비만 (OB) 수용체, LDL 수용체, 성장 호르몬 수용체, 트롬보포이에틴 수용체 ("TPO-R", "c-mpl"), 글루카곤 수용체, 인터류킨 수용체, 인터페론 수용체, T-세포 수용체, 줄기세포 인자 수용체, 예컨대 c-키트, 및 본 명세서에서 열거된 다른 수용체를 포함하는 수용체 및 수용체-관련된 단백질. 예를 들면, OX40 수용체에 대한 리간드인 OX40L을 포함하는 수용체 리간드. 비제한적으로, 골-유도된 신경영양성 인자 (BDNF) 및 뉴로트로핀-3, -4, -5, 또는 -6 (NT-3, NT-4, NT-5, 또는 NT-6)을 포함하는 신경영양성 인자. 릴락신 A-쇄, 릴락신 B-쇄, 및 프로릴락신; 예를 들면, 인터페론-α, -β, 및 -γ, 및 그것의 수용체를 포함하는 인터페론 및 인터페론 수용체. 비제한적으로 IL-I 내지 IL-33 및 IL-I 내지 IL-33 수용체, 예컨대 다른 것 중에서 IL-8 수용체를 포함하는 인터류킨 및 인터류킨 수용체. 비제한적으로, AIDS 외피 바이러스 항원을 포함하는 바이러스 항원. 지질단백질, 칼시토닌, 글루카곤, 심방나트륨 이뇨 인자, 폐 계면활성제, 종양 괴사 인자-알파 및 -베타, 엔케팔리나제, RANTES (발현되고 분비된 T-세포를 정상적으로 활성화함으로 조절됨), 마우스 성선자극호르몬-관련된 펩티드, DNAse, 인히빈, 및 액티빈. 인테그린, 단백질 A 또는 D, 류마티스성 인자, 면역독소, 골 형태형성 단백질 (BMP), 디스무타제 초과산화물, 표면 막 단백질, 붕괴 촉진 인자 (DAF), AIDS 외피, 수송 단백질, 귀소(homing) 수용체, 아드레신, 조절 단백질, 면역접합체, 항체. 마이오스타틴, TALL-I을 포함하는 TALL 단백질, 비제한적으로 아밀로이드-베타 단백질을 포함하는 아밀로이드 단백질, 흉선 기질상 림포포이에틴 ("TSLP"), RANK 리간드 ("OPGL"), c-키트, TNF 수용체 1형을 포함하는 TNF 수용체, TRAIL-R2, 안지오포이에틴, 및 임의의 전술한 것의 생물학적 활성 단편 또는 유사체 또는 변이체.

예시적인 단백질 및 항체는 액티바제® (알테플라제); 알리로쿠맙 (H1H316P로 지정된 항-PCSK9 단클론성 항체, U.S.P.N. 8.062,640 참고); 아라네스프® (다베포에틴-알파), 에포젠® (에포에틴 알파, 또는 에리트로포이에틴); 아보넥스® (인터페론 β-Ia); 벡사르® (토시투모맙); 베타세론® (인터페론-β); 보코시주맙 (L1L3로 지정된 항-PCSK9 단클론성 항체, U.S.P.N. 8,080,243 참고); 캄파쓰® (알렘투주맙); 디네포® (에포에틴 델타); 벨케이드® (보르테조밉); MLN0002 (항-α4β7 mAb); MLN1202 (항-CCR2 케모카인 수용체 mAb); 엔브렐® (에타네르셉트); 에프렉스® (에포에틴 알파); 어비툭스® (세툭시맙); 에볼로쿠맙 (21B12로 지정된 항-PCSK9 단클론성 항체, U.S.P.N. 8,030,467 참고); 제노트로핀® (소마트로핀); 헤르셉틴® (트라스투주맙); 휴마트로페® (주사용 소마트로핀 [rDNA 기원]); 휴미라® (아달리무맙); 인퍼겐® (인터페론 알파콘-1); 나트레코® (네시리타이드); 키네렛® (아나킨라), 류킨® (사가모스팀); 림포시드® (에프라투주맙); 벤리스타^TM(벨리무맙); 메탈라제® (테넥테플라제); 밀세라® (메톡시 폴리에틸렌 글리콜-에포에틴 베타); 밀로타그® (젬투주맙 오조가마이신); 랍티바® (에팔리주맙); 심지아® (세르톨리주맙 페골); 솔리리스^TM(에쿨리주맙); 펙셀리주맙 (항-C5 보체); MEDI-524 (누맥스®); 루센티스® (라니바이주맙); 에드레콜로맙 (,파노렉스®); 트라비오® (레르델리무맙); 데라심 hR3 (니모투주맙); 옴니타그 (페르투주맙, 2C4); 오시뎀® (IDM-I); 오바렉스® (B43.13); 누비온® (비실리주맙); 칸투주맙 메르탄신 (huC242-DMl); 네오레콜몬® (에포에틴 베타); 뉴메가® (오프렐베킨); 뉴라스타® (페길화된 필가스트림, 페길화된 G-CSF, 페길화된 hu-Met-G-CSF); 뉴포겐® (필그라스팀); 오르도클론 OKT3® (무로모납-CD3), 프로크리트® (에포에틴 알파); 레미케이드® (인플릭시맙), 레오프로® (압식시맙), 악템라® (항-IL6 수용체 mAb), 아바스틴® (베바시주맙), 휴맥스-CD4 (자놀리무맙), 리툭산® (리툭시맙); 타르세바® (에를로티닙); 로페론-A®-(인터페론 알파-2a); 시뮬렉트® (바실릭시마맙); 스텔라라^TM(우스테키누맙); 프렉시지® (루미라콕십); 시나기스® (팔리바주맙); 146B7-CHO (항-IL15 항체, U.S.P.N. 7.153,507 참고), 타이사브리® (나탈리주맙); 발로팀® (MDX-1303, 항-B. 안트라시스 보호성 항원 mAb); 에이비스락스^TM; 벡티빅스® (파니투무맙); 솔에어® (오말리주맙), ETI211 (항-MRSA mAb), IL-I 트랩 (양 IL-I 수용체 구성요소(유형 I 수용체 및 수용체 보조 단백질)의 세포외 도메인 및 인간 IgGl의 Fc부), VEGF 트랩 (IgGl Fc에 융합된 VEGFRl의 Ig 도메인), 제나팍스® (다클리주맙); 제나팍스® (다클리주맙), 제발린® (이브리투모맙 티욱세탄), 제티아 (에제티마이브), 아타시셉트 (TACI-Ig), 항-α4β7 mAb (베돌리주맙); 갈릭시맙 (항-CD80 단클론성 항체), 항-CD23 mAb (루밀릭시맙); BR2-Fc (huBR3 / huFc 융합 단백질, 가용성 BAFF 길항제); 심포니^TM (골리무맙); 마파투무맙 (인간 항-TRAIL 수용체-1 mAb); 오크렐리주맙 (항-CD20 인간 mAb); 휴맥스-EGFR (잘루투무맙); M200 (볼록식시맙, 항-α5β1 인테그린 mAb); MDX-010 (이필리무맙, 항-CTLA-4 mAb 및 VEGFR-I (IMC-18F1); 항-BR3 mAb; 항-C. 디피실레 독소 A 및 독소 B C mAbs MDX-066 (CDA-I) 및 MDX-1388); 항-CD22 dsFv-PE38 콘주게이트 (CAT-3888 및 CAT-8015); 항-CD25 mAb (휴맥스-TAC); 항-TSLP 항체 (U.S.P.N. 7,982,016, U.S.P.N. 8232372 및 U.S. 출원 공보 20090186022 참고); 항-TSLP 수용체 항체 (U.S.P.N. 8,101,182 참고); A5로 지정된 항-TSLP 항체 (U.S.P.N. 7,982,016 참고); (항-CD3 mAb (NI-0401) 참고; 아데카투무맙 (MT201, 항-EpCAM-CD326 mAb); MDX-060, SGN-30, SGN-35 (항-CD30 mAbs); MDX-1333 (항-IFNAR); 휴맥스 CD38 (항-CD38 mAb); 항-CD40L mAb; 항-크립토 mAb; 항-CTGF 특발성 폐 섬유증 상 I 피브로겐 (FG-3019); 항-CTLA4 mAb; 항-에오탁신 l mAb (CAT-213); 항-FGF8 mAb; 항-강글리오사이드 GD2 mAb; 항-스클레로스틴 항체 (U.S.P.N. 8,715,663 또는 U.S.P.N.7,592,429 참고)를 포함한다. Ab-5로 지정된 항-스클레로스틴 항체 (U.S.P.N. 8,715,663 또는 U.S.P.N. 7,592,429 참고); 항-강글리오사이드 GM2 mAb; 항-GDF-8 인간 mAb (MYO-029); 항-GM-CSF 수용체 mAb (CAM-3001); 항-HepC mAb (휴맥스 HepC); MEDI-545, MDX-1103 (항-IFNα mAb); 항-IGFIR mAb; 항-IGF-IR mAb (휴맥스-인플람); 항-IL12/IL23p40 mAb (브리아키누맙); 항-IL-23p19 mAb (LY2525623); 항-IL13 mAb (CAT-354); 항-IL-17 mAb (AIN457); 항-IL2Ra mAb (휴맥스-TAC); 항-IL5 수용체 mAb; 항-인테그린 수용체 mAb (MDX-O18, CNTO 95); 항-IPIO 궤양성 대장염 mAb (MDX- 1100); 항-LLY 항체; BMS-66513; 항-만노스 수용체/hCGβ mAb (MDX-1307); 항-메소텔린 dsFv-PE38 콘주게이트 (CAT-5001); 항-PDlmAb (MDX-1 106 (ONO- 4538)); 항-PDGFRα 항체 (IMC-3G3); 항-TGFβ mAb (GC-1008); 항-TRAIL 수용체-2 인간 mAb (HGS-ETR2); 항-TWEAK mAb; 항-VEGFR/Flt-1 mAb; 항- ZP3 mAb (휴맥스-ZP3); NVS 항체 #1; NVS 항체 #2; 및 서열식별번호:8 및 서열식별번호:6의 서열을 포함하는 아밀로이드-베타 단클론성 항체 (U.S.P.N. 7,906,625 참고).

상기 제형에서 예시적인 단백질 농도는 약 70mg/ml 내지 약 300mg/ml, 약 120mg/ml 내지 약 270mg/ml, 약 140mg/ml 내지 약 255mg/ml, 약 140mg/ml 내지 약 240mg/ml, 또는 약 140mg/ml 내지 약 220mg/ml, 또는 대안적으로 약 190mg/ml 내지 약 210mg/ml의 범위로 될 수 있다. 단백질의 농도는 약제학적 제형의 최종 용도에 의존할 것이고 그리고 당해 기술의 통상인에 의해 쉽게 측정될 수 있다. 특히 고려된 단백질의 농도는 적어도 약 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 240, 245, 250, 255, 260, 265, 270, 275, 280, 285, 290, 295 및 300 mg/ml이고 그 사이의 모든 값을 포함한다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, "약제학적 제형"은 필요로 하는 환자에게 비경구 투여 (비제한적으로 정맥내, 근육내, 피하, 에어로졸화된, 폐내, 비강내 또는 척추강내를 포함함)에 대해 적합하고 그리고 단지 약제학적으로 허용가능한 부형제, 희석제, 및 연방 약물 관리청 또는 다른 외국 당국에 의해 안전한 것으로 간주된 다른 첨가제를 포함하는, 약제학적으로 활성 약물, 예컨대 생물학적 활성 단백질의 멸균된 조성물이다. 약제학적 제형은 직접적으로 투여될 수 있는 액체, 예를 들면 수성, 용액, 및 투여 전에 희석제의 부가에 의해 용액으로 재구성될 수 있는 동결건조된 분말을 포함한다. 특이적으로 환자에 대한 국소 투여를 위한 조성물, 경구 섭취를 위한 조성물, 및 비경구적 급식을 위한 조성물은 용어 "약제학적 제형"의 범위로부터 제외된다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, "유통 기한"은 보관 기간이 약제학적 제형 내 활성 성분 예컨대 치료 단백질이 상기 약제학적 제형이 명시된 보관 상태, 예를 들면, 2-8℃ 하에서 보관될 때 최소 분해 (예를 들면, 약 5% 내지 10% 분해보다 많지 않음)를 가지는 동안인 것을 의미한다. 분해를 평가하기 위한 기술은 약제학적 제형에서 단백질의 동일성에 의존하여 다양하다. 예시적인 기술은 예를 들면, 응집을 검출하기 위한 크기-배제 크로마토그래피 (SEC)-HPLC, 예를 들면 단백질 단편화를 검출하기 위한 역상 (RP)-HPLC, 예를 들면 단백질의 하전에서 변화를 검출하기 위한 이온 교환-HPLC, 질량 분광분석법, 형광 분광법, 원형 2색성 (CD) 분광법, 푸리에 변환 적외선 분광법 (FT-IR), 및 단백질 형태적 변화를 검출하기 위한 라만 분광법을 포함한다. 모든 이들 기술은 약제학적 제형에서 단백질의 분해를 평가하고 그리고 그 제형의 유통 기한을 결정하기 위해 단독으로 또는 조합하여 사용될 수 있다. 본 발명의 약제학적 제형은 바람직하게는 2-8℃에서 보관될 때 2년에 걸쳐 분해 (예를 들면, 단편화, 응집 또는 비-접힘)에서 약 5 내지 10% 이하의 증가율을 나타낸다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 생물학적으로 활성 단백질의 "안정한" 제형은 대조 구조식 샘플과 비교하여 적어도 2년 동안 2-8℃에서 보관시 적어도 20%의 생물학적 활성의 감소된 응집 및/또는 감소된 손실을 나타내거나, 또는 대안적으로 열 응력, 예를 들면 1주 내지 12주 동안 25℃; 1 내지 12주 동안 40℃; 7-8일 동안 52℃, 등의 조건 하에서 생물학적 활성의 감소된 응집 및/또는 감소된 손실을 나타내는 제형이다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, "점도"는 유동하는 유체의 저항성이며, 센티푸아즈 (cP) 또는 밀리파스칼-초 (mPa-s)의 단위로 측정될 수 있고, 여기서 주어진 전단율에서 1cP = 1mPa-s이다. 점도는 점도계, 예를 들면, 브룩필드 엔지니어링 다이얼 판독 점도계인, 모델 LVT, 및 AR-G2, TA 기기를 사용하여 측정될 수 있다. 점도는 당해 기술 (예를 들면 절대적인, 운동학적 또는 역학 점도)에 공지된 임의의 다른 방법 사용하여 임의의 다른 단위로 측정될 수 있으며, 중요한 것은 본 발명에 의해 기재된 부형제의 사용에 의해 제공되는 점도에서의 퍼센트 감소라는 것이다. 점도를 측정하기 위해 사용된 방법에 무관하게, 부형제 제형 대 대조군 제형에서의 점도의 퍼센트 감소는 주어진 전단율에서 대략적으로 동일하게 유지될 것이다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, "점도를 감소"하기에 유효한 양의 부형제 (또는 이러한 부형제의 "점도-감소시키는" 양 또는 농도)를 함유하는 제형은 (용액이면, 또는 분말이면, 의도된 양의 희석제로 재구성에 의해) 투여를 위한 그것의 최종 형태에서 제형의 점도가 적절한 대조군 제형, 예컨대 물, 버퍼, 다른 공지된 점도-감소제 예컨대 염, 등 및 예를 들면, 본 명세서에서 예시된 이들 대조군 제형의 점도보다 적어도 5% 미만인 것을 의미한다. 부형제-없는 대조군 제형이 또한 예를 들면, 저삼투압으로 인해 치료적 제형으로 구현될 수 없더라도 사용될 수 있다.

유사하게, "감소된 점도" 제형은 대조군 제형에 비교하여 감소된 점도를 나타내는 제형이다.

단백질 치료제는 때로는 용액의 증가된 점도를 초래할 수 있는 고농도로 제공되어 지는 것을 요한다. 이러한 높은 단백질 농도로 전형적으로 나타나는 증가된 점도를 나타내지 않는 고농도 제형을 제공하는 것이 매우 바람직하다.

고점도 제형은 체적 및 충전 단계에서의 것을 포함한 제조 동안 조작하기가 어렵다. 고점도 제형은 또한 주사기 안으로 주입하여 주사하기가 어려워, 종종 환자에게 불쾌할 수 있는 낮은 게이지 바늘의 사용을 필요로 한다. 생물학적으로 활성 단백질의 용액에 n-아세틸-l-아르기닌의 부가는 고농도 단백질 용액의 점도를 감소시켰다.

n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제의 사용은 다른 부형제에서 전형적으로 보여진 것만큼 점도에서 큰 증가 없이 제형에 사용되는 치료 단백질의 보다 높은 농도를 허용한다. 따라서, 본 발명은 점도를 감소시키기에 유효한 양으로 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제를 부가함에 의해 단백질 제형의 점도를 안전하게 하거나 감소시키는 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제의 유효한 양 또는 농도를 함유하는, 항체를 포함하는 치료 단백질의 감소된 점도 제형을 제공한다. 또한 점도를 감소시키는 적합한 또는 최적의 농도를 동정하기 위해 본 명세서에서 기재된 부형제의 상이한 농도를 각각 함유하는 1종 이상의 제형을 분별하는 방법이 고려된다. 더욱이 본 발명의 감소된 점도 용액 제형으로부터 동결건조된 분말을 제조하는 방법, 및 멸균된 희석제의 부가를 통해 본 발명의 동결건조된 분말을 재구성하는 방법이 제공된다.

따라서, 본 발명은 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제의 점도-감소 농도 및 생물학적 활성 폴리펩티드를 함유하는 약제학적 제형을 제공한다. 점도에서의 감소는 대조군 제형 대비 적어도 약 5-90%이다. 일 구현예에서 점도에서의 감소는 약 10-80% 범위이다. 다른 예시적인 구현예에서, 점도에서의 감소는 적어도 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80% 또는 85%이다.

본 발명의 제형은 임의로 약제학적으로 허용가능한 염, 버퍼, 계면활성제, 다른 부형제, 담체, 희석제, 및/또는 다른 제형 제제를 포함할 수 있다.

예시적인 약제학적으로 허용가능한 버퍼는 아세테이트 (예를 들면 아세트산나트륨), 석시네이트 (예컨대 소디움 석시네이트), 글루탐산, 글루타메이트, 글루코네이트, 히스티딘, 시트레이트 또는 다른 유기 산 버퍼를 포함한다. 예시적인 버퍼 농도는 예를 들면, 버퍼 및 제형의 원하는 긴장성 (예를 들면 등장성, 고장성 또는 저삼투압)에 따라서, 약 1mM 내지 약 200mM, 또는 약 10mM 내지 약 60mM일 수 있다. 예시적인 pH는 약 4.5 내지 약 8.0, 또는 약 4.8 내지 약 5.5, 또는 약 4 내지 6, 또는 약 5 내지 5.5, 또는 약 5, 약 5 초과, 약 5.5 초과, 약 6 초과, 또는 약 6.5 초과를 포함한다.

적합한 희석제, 다른 부형제, 또는 담체 및 다른 제제는, 비제한적으로, 항산화제, 착색제, 풍미 및 희석 제제, 유화제, 현탁화제, 용매, 충전제, 팽화제, 버퍼, 비히클, 희석제 및/또는 약제학적 보조제를 포함한다. 예를 들면, 적합한 담체는, 가능하게는 비경구 투여용 조성물에서 공통적인 다른 물질로 보강된, 생리적 염수 용액, 시트레이트 완충된 염수, 또는 인공 CSF일 수 있다. 중성 완충된 염수 또는 혈청 알부민과 혼합된 염수가 추가의 예시적인 비히클이다. 당해 분야의 숙련가는 본 조성물에 사용될 수 있는 다양한 버퍼 및 본 발명에서 사용된 복용 형태를 쉽게 인지할 것이다. 전형적인 버퍼는, 비제한적으로 약제학적으로 허용가능한 약산, 약염기, 또는 이들의 혼합물을 포함한다. 예시적인 버퍼 구성요소는 수용성 물질 예컨대 인산, 타르타르산, 락트산, 석신산, 시트르산, 아세트산, 아스코르브산, 아스파르트산, 글루탐산, 또는 이들의 염이다. 예시적인 염은 무기 및 유기 산, 또는 염기 예컨대 금속 또는 아민을, 예시적인 농도 예컨대 약 50-200mM, 또는 100-200mM, 또는 약 100mM, 또는 약 150mM로 포함한다.

다른 부형제 또는 안정제, 예를 들면, 당류 (예를 들면, 수크로오스, 글루코오스, 트레할로오스, 푸룩토오스, 자일로스, 만니토스, 푸코스), 폴리올 (예를 들면, 글리세롤, 만니톨, 소르비톨, 글리콜, 이노시톨), 아미노산 또는 아미노산 유도체 (예를 들면, 아르기닌, 프롤린, 히스티딘, 라이신, 글리신, 메티오닌, 등) 또는 계면활성제 (예를 들면, 폴리소르베이트 20, 또는 폴리소르베이트 80을 포함하는 폴리소르베이트, 또는 폴록사머 188을 포함하는 폴록사머, TPGS (d-알파 토코페릴 폴리에틸렌 글리콜 1000 석시네이트)가 또한 포함될 수 있다. 계면활성제의 예시적인 농도는 약 0.001% 내지 약 1.0%, 또는 약 0.003% 내지 약 0.5%의 범위일 수 있다. 보존제, 예컨대 벤질 알코올, 페놀, m-크레졸, 클로로부탄올 또는 벤즈에토늄 Cl이, 예를 들면 약 0.1% 내지 약 2%, 또는 약 0.5% 내지 약 1%의 범위로 되는 농도로 또한 포함될 수 있다.

1종 이상의 다른 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 안정제 예컨대 하기에 기재된 것들이, 이들이 제형의 원하는 특징에 부정적으로 영향을 미치지 않는다면 제형에 포함될 수 있다: Remington's Pharmaceutical Sciences 21st edition, Osol, A. Ed. (2005).

제형 내 치료 단백질, 예컨대 항체의 농도는 약제학적 제형의 최종 용도에 의존할 것이고 그리고 당해 기술의 숙련가에 의해 쉽게 측정될 수 있다.

길항제인 치료 단백질은 빈번하게 효능제인 것들보다 높은 농도로 투여된다. 특히 항체를 포함하는, (페길화와 같은 화학 변형의 중량을 고려함이 없이) 치료 단백질의 고려된 고농도는 적어도 약 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 175, 180, 185, 190, 195 200, 250, 300, 350, 400, 450, 또는 500mg/ml, 및/또는 약 250 300, 350, 400, 450 또는 500mg/ml 미만이다. 제형 내 치료 단백질, 예컨대 항체의 예시적인 고농도는 적어도 약 100mg/ml 내지 약 500mg/ml의 범위일 수 있다. (페길화와 같은 화학 변형의 중량을 고려함이 없이) 다른 단백질 농도는 또한, 예를 들면, 적어도 약 1, 5, 10, 20, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65 또는 70mg/ml로 고려된다. 본 발명은 특히 치료 단백질의 농도가 적어도 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 25, 30, 35cP 또는 그 이상, 예컨대 100, 125, 150, 175 또는 200cP의 점도를 초래하고 그리고 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제의 함입이 5% 이상으로 점도의 감소를 초래하는 제형 및 방법을 고려한다. 예를 들면, 약 30cP의 점도를 갖는 용액은 표준 27 게이지 바늘로 주사하기에 어려울 수 있다. 본 명세서에서 치료 단백질의 mg/ml 농도에 대한 모든 언급, 치료 단백질의 중량(mg) 또는 치료 단백질의 분자량(kD)은 임의의 비-단백질성 변형을 배제하여 치료 단백질의 단백질성 부분의 각각의 중량을 의미한다.

본 발명은 치료 단백질과 점도-감소시키는 양의 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제를 조합함에 의해, 치료 단백질의 액체 약제학적 제형의 점도를 감소시키고/감소시키거나 안정성을 개선하는 방법을 제공한다.

예시적인 구현예에서, 치료 단백질은 상기에서 기재된 바와 같이 높은 단백질 농도로 된다. 일부 구현예에서, 점도에서의 감소는 대조군 제형에 비교하여 적어도 약 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80% 또는 85%이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 치료 단백질 및 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제를 포함하는 액체 용액을 제공하고 여기서 상기 제형은 대조군 제형에 대해 감소된 점도를 나타낸다. 예시적인 구현예에서, 치료 단백질은 상기에서 기재된 바와 같이 높은 단백질 농도로 된다. 일부 구현예에서, 본 명세서에서 기재된 부형제는 점도-감소시키는 (중량:용적) 농도로 존재한다. 임의의 이들 부형제가 최대 그것의 용해도 한계의 농도로 사용될 수 있다. 이러한 용액은 추가로 당 또는 다른 폴리올 예컨대 수크로오스 또는 소르비톨, 또는 아미노산 예컨대 아르기닌, 프롤린, 히스티딘, 라이신, 글리신, 메티오닌 등을, 점도를 유의미하게 증가함에 없이, 더욱 안정성 개선하고, 응집을 감소시키고/감소시키거나 제형을 등장으로 만들기에 유효한 양으로 포함할 수 있다.

예시적인 구현예에서, n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제의 농도는 적어도 약 50mM 내지 약 300mM, 또는 적어도 약 100mM 내지 약 250mM, 또는 적어도 약 140mM 내지 약 200mM이다. 예시적인 구현예에서 상기 부형제의 농도는 적어도 약 50, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 210, 220, 250, 또는 300mM 또는 그보다 더 크다. 다른 예시적인 구현예는 점도를 유의미하게 증가함에 없이, 제형을 등장으로 만들기에 유효한 농도의 부형제를 포함한다. 예시적인 농도는 적어도 약 180mM 또는 그보다 더 큰 것을 포함하고, 추가 구현예에서 양은 적어도 약 200 mM 또는 그보다 더 크다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 치료 단백질 및 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제를 포함하는 동결건조된 단백질 제형을 제공하고 여기서 권고된 양의 희석제로 재구성에 의해, 제형은 대조군 제형에 대해 감소된 점도를 나타낸다. 예시적인 구현예에서, 치료 단백질은 상기에서 기재된 바와 같이 높은 단백질 농도로 된다. 일부 구현예에서, 부형제는 희석제 (중량:중량 농도)로 재구성에 의해 점도를 감소시키기에 유효한 양으로 존재한다. 이러한 제형은 추가로 당 또는 다른 폴리올 예컨대 수크로오스 또는 소르비톨, 또는 적어도 1종의 아미노산 예컨대 아르기닌, 프롤린, 히스티딘, 라이신, 글리신, 메티오닌 등을, 점도를 유의미하게 증가함에 없이, 더욱 안정성 개선하고, 응집을 감소시키고/감소시키거나 제형을 등장으로 만들기에 유효한 양으로 포함할 수 있다.

예시적인 구현예에서, n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제의 농도는 치료 단백질 mg 당 적어도 약 1㎍, 치료 단백질 mg 당 최대 약 1.0mg이다. 일부 구현예에서, 부형제의 농도는 치료 단백질 mg 당 적어도 약 1, 10, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500 또는 550㎍이다. 다른 예시적인 구현예에서, 부형제의 농도는 치료 단백질 mg 당 최대 약 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950 또는 1000㎍이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 본 명세서에서 기재된 임의의 양 또는 농도로 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물을 부형제로 사용함에 의해 액체 제형에서 단백질의 자기-회합을 방지하는 방법을 제공한다. 개선된 안정성 (예를 들면, 감소된 응집) 및 저장수명을 갖는 제형이 또한 제공된다.

본 발명 또한 본 발명의 액체 단백질 제형 및 그것의 투여에 대한 설명서를 포함하고, 임의로 용기, 주사기 및/또는 다른 투여 장비를 갖는 키트를 제공한다. 본 발명은 더욱이 본 발명의 동결건조된 단백질 제형, 임의로 용기 안에 그것의 재구성 및 투여에 대한 설명서를 포함하고, 임의로 멸균된 희석제의 바이알을 갖고 그리고 임의로 주사기 또는 다른 투여 장비를 갖는 키트를 제공한다. 예시적인 용기는 바이알, 튜브, 병, 단일 또는 다중-챔버로 미리 충전된 주사기, 또는 카트리지를 포함한다. 예시적인 투여 장비는 바늘 유무에 관계없이 주사기, 주입 펌프, 제트 인젝터, 펜 기기, 경피 주사기, 또는 다른 바늘-없는 주사기, 또는 비강 또는 폐 전달용 분무주입법 장비를 포함한다.

또 다른 측면에서, (1) n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제의 제1 농도 및 치료 단백질, 예컨대 항체를 포함하는 제1 용액의 점도를 평가하는 단계, (2) 상기 부형제의 상이한 제2 농도 및 상기 치료 단백질을 포함하는 제2 용액의 점도를 평가하는 단계, 및 (3) 만일 상기 제1 용액이 점도가 낮으면 부형제의 제1 농도가 부형제의 제2 농도보다 더욱 점도-감소시키는 것으로 결정하는 단계를 포함하는 부형제의 점도-감소 농도를 분별하는 방법이 제공된다. 점도는, 예를 들면, 아리에스(Aries) ARG2 유량계 또는 브룩필드 RV-DVIII 유량계를 사용하여 측정될 수 있다.

부형제의 응집-감소 또는 안정화 농도를 분별하기 위한 유사한 방법이 제공된다.

안정성은 온도 (열안정성) 및/또는 기간 (저장수명)에 걸쳐 및/또는 스트레스성 취급 상황 (예를 들면 물리적 흔들림)에 노출된 후 형태적 변화를 모니터링하는 것을 포함하여 많은 방법으로 평가될 수 있다. 가변 농도의 제형 구성요소를 함유하는 제형의 안정성은 다양한 방법을 사용하여 측정될 수 있다. 예를 들면, 단백질 응집의 양은 탁도의 시각적 관찰에 의해, 특정한 파장에서 흡광도를 측정함에 의해, (단백질의 응집체가 그것의 원상태 활성 상태에서의 단백질에 비교하여 상이한 분획에서 용출되는) 크기 배제 크로마토그래피, HPLC, 또는 다른 크로마토그래피 방법에 의해 측정될 수 있다. 예를 들면, 단백질의 몰 타원율을 측정하는, 원형 2색성 (CD) 또는 변성의 온도를 측정하기 위한 시차주사열량계 (DSC)를 사용하는 것을 포함하여, 형태적 변화를 측정하는 다른 방법이 사용될 수 있다. 조성물을 분석하기 위해 형광이 또한 사용될 수 있다. 형광은 빛 또는 열의 형태로 에너지의 방출 또는 흡수를 포괄하고 빛의 극성 특성을 변화시킨다. 형광 방출은 단백질에 고유할 수 있거나 형광 리포터 분자로 인한 것일 수 있다. 예를 들면, ANS는 부분적으로 접히지 않은 단백질의 소수성 포켓병에 결합하는 형광성 프로브이다. 접히지 않은 단백질의 농도가 증가함에 따라, 소수성 포켓병의 수가 증가하고, 이어서 결합할 수 있는 ANS의 농도가 증가한다. 이 ANS 결합에서의 증가는 단백질 샘플의 형광 신호의 검출에 의해 모니터링될 수 있다. 안정성을 측정하기 위한 다른 수단이 사용될 수 있고 당해 분야의 숙련가에게 잘 알려져 있다.

본 발명은 본 발명의 예시적인 구현예를 상세히 설명하는 하기 실시예를 참고함으로써 더욱 완전하게 이해될 것이다. 그러나, 이들은 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다. 본 개시내용 전반에 걸친 모든 인용은 이로써 명확히 참고로 편입된다.

실시예

실시예 1

IgG2 항체 제제 (140mg/ml)(항체 A)가 Snakeskin^®주름 투석 튜우빙 10,000 MWCO (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA)를 사용하여 10mM 글루탐산나트륨 1% 수크로오스 pH 5.2에 대해 투석되었다. 10mM 글루탐산나트륨 1% 수크로오스 pH 5.2 내 120mg/mL 항체 A가 3cc 바이알에 각 1mL씩 충전되었다. 바이알은 비르티스(Virtis) 동결 건조기를 사용하여 동결건조되었다. 바이알은 450uL의 다양한 용액 (물 - 대조군 또는 200mM 부형제 용액)으로 재구성되었다. 재구성 후, 항체 A 농도는 SOLO-VPE 기기를 사용하여 190mg/mL인 것으로 측정되었다. 점도는 아리에스(Aries) ARG2 유량계를 사용하여 25℃에서 측정되어 아래 표 1에 기록되었다.

표 1: 항체 A의 부형제 제형, 20℃에서 190mg/mL

도 1은 항체 용액의 점도에 대한 다양한 부형제의 효과를 도시한다. 본 데이터는 시험된 부형제가 물 대조군에 비해 점도를 감소했다는 것을 나타낸다.

실시예 2

IgG1 항체 제제 (70mg/ml)(항체 B) 및 IgG2 항체 제제 (70mg/ml)(항체 C)가 10,000 MWCO 투석 튜우빙을 사용하여 각각 20mM 아세트산나트륨 pH 4.7 및 4.9에 대해 투석되었다. 항체 샘플은 30,000 MWCO 원심 필터 및 Allegra X-12R 원심분리기를 사용하여 농축되었다. 항체 샘플 농도는 Agilent UV/Vis 분광측정기를 사용하여 측정되었다. 부형제-함유 샘플은 예비-칭량된 고체 부형제로 벌크 농축된 용액을 첨가함에 의해 제조되었다. 점성 샘플은 양성 변위 피펫을 사용하여 이동되었다. 점도는 25℃에서 브룩필드 RV-DV III+ 프로그래밍가능한 유량계를 사용하여 측정되어 아래 표 2.1 및 2.2에 기록되었다.

표 2.1: 항체 B - 210mg/mL

표 2.2: 항체 C - 140mg/mL

부형제인, n-아세틸-l 아르기닌의 경우, 항체 B의 점도 저하는 대략 45%이며 항체 C의 점도 저하는 대략 56%이다.

실시예 3

IgG2 항체 제제 (140mg/ml)(항체 D)가 Snakeskin^®주름 투석 튜우빙 10,000 MWCO (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA)를 사용하여 10mM 글루탐산나트륨 1% 수크로오스 pH 5.2에 대해 투석되었다. 10mM 글루탐산나트륨 1% 수크로오스 pH 5.2 내 100mg/mL 항체 D가 3cc 바이알에 각 1mL씩 충전되었다. 바이알은 비르티스(Virtis) 동결 건조기를 사용하여 동결건조되었다. 바이알은 450uL의 물 (대조군 - 무 부형제) 또는 10mM 글루타메이트 200mM n-아세틸-L 아르기닌 pH 5.2로 재구성되었다. 항체 D 농도는 SOLO-VPE 기기를 사용하여 측정되었다. 점도는 아리에스(Aries) ARG2 유량계를 사용하여 25℃에서 측정되어 아래 표 3.0에 기록되었다.

표 3.0: 항체 D - 175mg/mL

부형제인, n-아세틸-l 아르기닌의 경우, 항체 D의 점도 감소는 대략 40%이다.

실시예 4

IgG2 항체 제제 (140mg/ml)(항체 E)가 버퍼 A (10mM 글루타메이트 260mM n-아세틸-l 아르기닌 pH 4.6) 또는 버퍼 B (10mM 글루탐산나트륨 pH 4.6)의 6 정용여과 용적으로 200mg/ml로 한외여과 및 정용여과를 사용하여 농축되었다. UFDF 샘플의 최종 pH는 5.2인 것으로 측정되었다. 항체 E 농도는 SOLO-VPE 기기를 사용하여 측정되었다. 점도는 아리에스(Aries) ARG2 유량계를 사용하여 20℃에서 측정되어 아래 표 4.0에 기록되었다.

표 4.0: 항체 E - 200mg/mL

부형제인, n-아세틸-l 아르기닌의 경우, 항체 E의 점도 감소는 대략 54%이다.

실시예 5

IgG2 항체 제제 (140mg/ml)(항체 A)가 Snakeskin^®주름 투석 튜우빙 10,000 MWCO (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA)를 사용하여 10mM 글루탐산나트륨 1% 수크로오스 pH 5.2에 대해 투석되었다. 10mM 글루탐산나트륨 1% 수크로오스 pH 5.2 내 120mg/mL 항체 A가 3cc 바이알에 각 1mL씩 충전되었다. 바이알은 Virtis 동결 건조기를 사용하여 동결건조되었다. 바이알은 450uL의 다양한 용액 (물 - 대조군 또는 200mM 부형제 용액)으로 재구성되었다(아래 표 5 참고). 재구성 후, 항체 A 농도는 SOLO-VPE 기기를 사용하여 190mg/mL인 것으로 측정되었다. 점도는 Aries ARG2 유량계를 사용하여 25℃에서 측정되어 아래 표 5에 기록되었다.

표 5: 항체 A의 부형제 제형, 20℃에서 190mg/mL

도 2는 항체 용액의 점도에 대한 다양한 부형제의 효과를 도시한다. 본 데이터는 시험된 부형제가 대조군에 비해 점도를 감소시켰고, 그리고 부형제인, n-아세틸-l 아르기닌 및 n-아세틸-l 히스티딘이 부형제 히스티딘 단독에 비해 점도를 감소시켰다는 것을 나타낸다.

Claims

적어도 70 mg/ml 농도의 항체를 포함하는 액체 약제학적 제제의 점도를 감소시키는 방법이며,
상기 항체를, 점도-감소(viscosity-reducing) 농도의 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제와 조합하는 단계를 포함하고,
상기 조합하는 단계 후 항체의 농도가 적어도 70 mg/ml이고, 상기 액체 약제학적 제제의 점도가 상기 부형제 중 어느 것도 포함하지 않는 대조군 제형보다 적어도 5% 감소하는 것인 방법.
제1항에 있어서, 상기 부형제가 n-아세틸 아르기닌인 방법.
제1항에 있어서, 상기 부형제가 n-아세틸 라이신인 방법.
제1항에 있어서, 상기 부형제가 n-아세틸 히스티딘인 방법.
제1항에 있어서, 상기 부형제가 n-아세틸 프롤린인 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제제의 점도가 적어도 25% 감소되는 것인 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항 에 있어서, 상기 제제의 점도가 적어도 50% 감소되는 것인 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항 에 있어서, 상기 제제의 점도가 적어도 80% 감소되는 것인 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 부형제의 농도가 50 mM 내지 300 mM, 또는 100 mM 내지 400 mM인 방법.
적어도 70 mg/ml 농도의 항체, 및
점도-감소 농도의 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제
를 포함하는 약제학적 조성물로서, 상기 점도가 상기 부형제 중 어느 것도 포함하지 않는 대조군 제형보다 적어도 5% 감소하는 것인 약제학적 조성물.
제10항에 있어서, 상기 부형제가 n-아세틸 아르기닌인 약제학적 조성물.
제10항에 있어서, 상기 부형제가 n-아세틸 라이신인 약제학적 조성물.
제10항에 있어서, 상기 부형제가 n-아세틸 히스티딘인 약제학적 조성물.
제10항에 있어서, 상기 부형제가 n-아세틸 프롤린인 약제학적 조성물.
제10항에 있어서, 상기 부형제의 농도가 200 mM 미만인 약제학적 조성물.
제10항에 있어서, 상기 부형제의 농도가 50 mM 내지 300 mM, 또는 100 mM 내지 400 mM인 약제학적 조성물
제10항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 30cP의 미만의 점도를 갖는 약제학적 조성물.
제10항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 4.0 내지 8.0의 pH를 갖는 약제학적 조성물.
제18항에 있어서, 4.6 내지 5.4의 pH를 갖는 약제학적 조성물.
제10항 내지 제16항 중 어느 한 항의 약제학적 조성물을 동결건조하는 단계를 포함하는, 동결건조된 분말을 제조하는 방법.
항체, 및 n-아세틸 아르기닌, n-아세틸 라이신, n-아세틸 히스티딘, n-아세틸 프롤린 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 부형제를 포함하고, 여기서 상기 부형제는 희석제로 재구성 시 점도를 감소시키기에 유효한 중량:중량 농도로 존재하는 것이며, 상기 점도가 상기 부형제 중 어느 것도 포함하지 않는 대조군 제형보다 적어도 5% 감소하는 것인 동결건조된 분말.
제21항에 있어서, 상기 부형제가 항체 1 mg 당 100 ㎍ 내지 항체 1 mg 당 1 mg의 농도로 존재하는 것인 동결건조된 분말.
제21항에 있어서, 상기 부형제가 항체 1 mg 당 200 ㎍ - 500 ㎍ 내지 항체 1 mg 당 1 mg의 농도로 존재하는 것인 동결건조된 분말.
제21항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간, 인간화된 또는 키메라성 단클론성 항체인 동결건조된 분말.
멸균된 수성 희석제를 첨가하는 단계를 포함하는, 제21항 내지 제23항 중 어느 한 항의 동결건조된 분말을 재구성하는 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간, 인간화된 또는 키메라성 단클론성 항체인 방법.
제10항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 인간, 인간화된 또는 키메라성 단클론성 항체인 약제학적 조성물.
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