KR102513248B1 - 펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물을 포함하는 조성물 - Google Patents
펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물을 포함하는 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명의 실시예에 따라, 펄스 전기장(PEF)이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함하는 주름 개선 또는 피부 재생용 조성물이 제공된다.
Description
본 발명은 펄스 전기장(Pulsed Electric Field, PEF)이 처리된 미역귀 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로 펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함함으로써, 피부 재생, 주름 개선 등의 효과가 우수한 피부 개선용 조성물에 관한 것이다.
현대인들의 피부는 유전적 요인, 오염 물질, 먼지, 공해, 자외선, 바람, 온도 등에 의하여 노화가 촉진되며, 이로 인하여 피부 주름, 탄력 손실, 불규칙한 색소 침착 등이 발생하고 있다. 또한, 노화에 따른 피부 기능 저하로 인해 활성 유해 산소가 증가하여 피부 재생 기능이 저하되는 등의 문제가 발생되고 있다.
이러한 문제를 해결하기 위하여, 주름 개선, 피부 재생 등의 효과를 갖는 기능성 화장품들이 개발되고 있다. 특히, 피부에 자극이 없고, 트러블을 유발하지 않는 천연물을 이용한 화장품의 수요가 커지면서, 천연 재료들의 발굴과 효능 증대를 위한 많은 연구가 이루어지고 있다.
그러나, 천연물에서 특정 효능을 갖는 유효 성분을 추출해 내는데 한계가 있고, 추출하더라도 수율이 높지 않아 실질적으로 주름 개선, 피부 재생 등의 효과가 충분히 구현되지 않는 문제가 있다.
본 발명은 상기 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 펄스 전기장(Pulsed Electric Field, PEF)이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함함으로써, 피부 재생, 주름 개선 등의 효과가 우수한 조성물을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.
본 발명의 기술적 과제들은 이상에서 언급한 기술적 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 기술적 과제들은 아래의 기재들로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명의 실시예에 따라, 주름 개선 또는 피부 재생용 조성물이 제공된다. 상기 조성물은, 펄스 전기장(PEF)이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함할 수 있다.
또한, 상기 미역귀 추출물은, 상기 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 에탄올, 메탄올, 프로필알코올, 부틸알코올, 헥산다이올, 메틸프로판다이올, 글리세린, 부틸렌글라이콜, 펜틸렌글라이콜, 프로필렌글라이콜 및 디프로필렌글라이콜 중 적어도 하나로 추출할 수 있다.
또한, 상기 미역귀 추출물은, 상기 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 에탄올로 추출할 수 있다.
또한, 상기 펄스 전기장은, 펄스 넓이 10 내지 30㎛, 펄스 빈도 20 내지 80Hz 및 에너지 0.5 내지 50kJ의 조건으로 처리될 수 있다.
상기 펄스 전기장은, 펄스 횟수 50 내지 150회 및 펄스 시간 0.1 내지 10초의 조건으로 처리될 수 있다.
또한, 상기 미역귀 추출물은, 액상 형태 또는 건조한 분말 형태일 수 있다.
또한, 상기 미역귀 추출물은, 펄스 전기장을 미처리한 경우에 비해 푸코스테롤(Fucosterol)을 더 높은 함량으로 포함할 수 있다.
또한, 상기 조성물은, 화장료 조성물일 수 있다.
또한, 상기 조성물은, 식품 조성물일 수 있다.
또한, 상기 조성물은, 피부 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물이고, 상기 피부 질환은, 피부 주름 및 피부 상처 중 적어도 하나일 수 있다.
본 발명의 실시예에 따라, 미역귀 추출물의 제조방법이 제공된다. 상기 방법은, 미역귀를 정제수에 혼합시키는 단계; 상기 혼합된 미역귀에 펄스 전기장을 처리하는 단계; 및 상기 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 용매에서 추출하는 단계를 포함할 수 있다.
또한, 상기 펄스 전기장을 처리하는 단계는, 펄스 넓이 10 내지 30㎛, 펄스 빈도 20 내지 80Hz 및 에너지 0.5 내지 50kJ의 조건으로 수행될 수 있다.
또한, 상기 용매는 에탄올일 수 있다.
본 발명에 따르면, 미역귀에 PEF 기술을 적용하여 세포막 붕괴를 유도함으로써, 추출 시 푸코스테롤과 같은 유효 성분의 함량을 크게 증가시킬 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 이러한 펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함함으로써 주름 개선 또는 피부 재생의 효과가 우수한 특징이 있다.
또한, 본 발명에 따르면, 저온가공기술 중 하나인 PEF 기술을 사용함으로써, 일반적인 가열 추출법에 비하여 에너지 또는 탄소의 발생률을 크게 낮추어 환경에 친화적이라는 장점이 있다.
본 발명의 상세한 설명에서 인용되는 도면을 보다 충분히 이해하기 위하여 각 도면의 간단한 설명이 제공된다.
도 1은 본 발명의 실시예 및 비교예에 대한 푸코스테롤의 함량 확인 실험과 관련된 도면이다.
도 2 내지 도 4는 본 발명의 실시예 및 비교예에 대한 피부 재생 효능 평가와 관련된 도면이다.
도 1은 본 발명의 실시예 및 비교예에 대한 푸코스테롤의 함량 확인 실험과 관련된 도면이다.
도 2 내지 도 4는 본 발명의 실시예 및 비교예에 대한 피부 재생 효능 평가와 관련된 도면이다.
다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다. 또한, 본 발명의 실시예를 설명함에 있어, 관련된 공지 구성 또는 기능에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 실시예에 대한 이해를 방해한다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명은 생략한다. 또한, 이하에서 본 발명의 실시예들을 설명할 것이나, 본 발명의 기술적 사상은 이에 한정되거나 제한되지 않고 당업자에 의해 변형되어 다양하게 실시될 수 있다.
본 발명의 조성물은, 펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함할 수 있다. 본 발명자는 미역귀에 펄스 전기장을 처리한 뒤, 용매 등을 이용하여 추출하면 미역귀 내의 유효 성분(예를 들어, 푸코스테롤(Fucosterol))을 높은 수율로 수득할 수 있음을 확인하고, 이를 화장료 조성물, 식품 조성물, 약학적 조성물 등에 적용하여 본 발명을 완성하였다.
미역귀(Undaria pinnatifida Sporophyll)는 미역 중에서 알긴산(Alginic Acid) 함량이 높은 부위이다. 미역은 갈조류 곤포과에 속하는 식물로, 칼슘, 칼륨, 철분, 요오드 등의 무기질 성분과 각종 비타민, 산성 다당류, 점질 다당류 등이 함유되어 있어 중금속 배출, 항바이러스, 항종양, 항암 등의 활성을 갖는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서, 펄스 전기장이 처리되는 미역귀는, 분쇄 또는 마쇄 과정을 거치지 않은 원물이거나, 분쇄 또는 마쇄 과정을 거친 절단물일 수도 있고, 미역의 머리 부분을 이용하는 것이 바람직하나, 이에 한정하는 것은 아니며 미역의 모든 부위를 포함할 수 있다. 다만, 이에 한정하는 것은 아니다.
본 발명에서 미역귀에 처리되는 '펄스 전기장(Pulsed Electric Field, PEF)'은, 동식물 세포막에 펄스 에너지를 가하여 세포막의 붕괴를 유도하는 기술로, 세포막에 고전압 에너지와 낮은 에너지를 반복적으로 노출시킴에 따라 세포 내외의 전위차를 발생시켜 세포 내의 유효 성분의 방출을 촉진시킬 수 있다. 또한, 펄스 전기장은 저온가공기술이기 때문에, 가열 처리를 하는 경우에 비하여 영양소 손실을 최소화하고, 에너지, 탄소 발생이 20％ 이상 절감되는 등 환경에 친화적이며, 미생물 살균 및 생육억제, 식물 및 동물의 추출 수율, 유효 성분 증대 등의 기능을 갖는다.
실시예에 따라, 펄스 전기장은, 미역귀에 펄스 넓이 10 내지 30㎛, 펄스 빈도 20 내지 80Hz 및 에너지 0.5 내지 50kJ의 조건으로 처리될 수 있다. 예를 들어, 미역귀와 정제수를 혼합한 뒤, 펄스 넓이 10 내지 30㎛, 펄스 빈도 20 내지 80Hz, 펄스 횟수 50 내지 150회, 처리 시간 0.1 내지 10s 및 에너지 0.5 내지 50kJ의 조건으로 펄스 전기장을 처리할 수 있고, 구체적으로, 펄스 넓이 20㎛, 펄스 빈도 50Hz, 펄스 횟수 100회, 처리 시간 1s, 및 에너지 1kJ의 조건으로 펄스 전기장을 처리할 수 있다.
본 발명에서 '미역귀 추출물'은 미역귀에 펄스 전기장을 처리한 뒤, 용매를 이용하여 유효 성분을 추출한 것을 의미한다. 구체적으로, 미역귀에 펄스 전기장을 처리하여 세포벽 또는 세포막이 붕괴된 상태에서 용매를 이용하여 유효 성분을 추출한 것으로, 추출 용매에 따라 유효 성분과 효능이 달라질 수 있다. 예를 들어, 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 에탄올로 추출한 경우에 푸코스테롤의 추출 효율이 극대화될 수 있다.
실시예에 따라, 미역귀 추출 시 이용되는 '용매'는, 에탄올일 수 있고, 구체적으로 60 내지 100％의 에탄올일 수 있으며, 보다 구체적으로, 70％ 에탄올일 수 있다. 다만, 이에 한정하는 것은 아니고, 당해 기술 분야에서 적용 가능한 다양한 용매를 단독으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 예를 들어, 추출 용매로 메탄올, 프로필알코올, 부틸알코올 등의 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올; 글리세린, 부틸렌글라이콜, 프로필렌글라이콜, 메틸프로판다이올, 1,2-헥산다이올 등의 다가 알코올; 및 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 아세톤, 벤젠, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 탄화수소계 용매; 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있다.
실시예에 따라, 미역귀 추출물의 추출 방법은, 침지 추출 방법을 이용할 수 있다. 예를 들어, 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 용매에 침지 처리한 뒤, 5℃ 내지 35℃의 온도에서 1 내지 240시간 동안 추출함으로써 수득할 수 있다. 다만, 미역귀를 추출하는 방법은, 침지 추출 방법에 한정하는 것은 아니며, 냉침 추출, 환류 추출, 초임계 추출, 아임계 추출, 용출법, 압착법, 고온 추출, 고압 추출 또는 초음파 추출 등의 당업계에서 통상적으로 사용되는 추출 방법을 이용할 수 있다. 이때, 미역귀 추출물은 추출, 분획 또는 정제 등 각각의 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함할 수 있다.
실시예에 따라, 미역귀 추출물은, 액상의 형태일 수도 있고, 액상의 추출물을 건조한 고형 형태이거나, 고형 형태의 추출물을 분쇄한 분말 형태일 수 있다. 이때, 건조 방식은 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 다양한 방식이 적용될 수 있다. 또한, 펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물을 감압 증류하거나, 농축시키는 등 다양한 방식으로 제조 또는 가공될 수 있다.
본 발명에 따른 미역귀 추출물은, 펄스 전기장을 미역귀에 처리하여 세포벽 또는 세포막을 파괴한 이후에 추출하기 때문에, 미역귀에 펄스 전기장을 처리하지 않은 경우에 비해, 푸코스테롤(Fucosterol)과 같은 유효 성분을 높은 함량으로 포함할 수 있다.
푸코스테롤은 분자 구조 내에 fucose기를 함유하고 있는 sterol로, 저농도에서도 콜레스테롤의 생합성 억제 활성이 우수하며, 자외선에 의한 세포외 기질의 분해, 주름 형성, 수분 손실 등을 유발하는 인자인 MMP-1, IL-6 등의 발현을 억제함으로써, 피부 손상을 개선하는 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
예를 들어, 본 발명의 미역귀 추출물은 펄스 전기장을 처리한 후 에탄올을 용매로 추출 시 푸코스테롤을 4,000ppm 이상으로 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 미역귀 추출물은, 펄스 전기장을 미역귀에 처리하지 않은 경우에 비해, 푸코스테롤을 1.4배 이상으로 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은, 미역귀 추출물에 푸코스테롤이 고함량으로 포함됨으로써, 주름 개선 및 피부 재생 중 적어도 하나의 효과가 매우 우수하다는 특징이 있다. 이와 같은 효과는 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 에탄올로 추출한 경우에 극대화될 수 있다. 즉, 미역귀를 에탄올 이외의 용매(예를 들어, 물)로 추출한 경우에 비하여 에탄올로 추출한 경우, 푸코스테롤의 추출 효율이 보다 증가하기 때문에, 주름 개선 또는 피부 재생과 같은 효과가 더욱 우수해질 수 있다.
본 발명에서 '주름 개선'은 콜라겐 합성을 촉진하고 Matrix Metalloprotease(MMPs), 콜라게나아제, 엘라스타아제 등의 주름 유발 인자의 활성을 억제하여, 피부에 주름이 생성되는 것을 저해하거나 완화시킬 수 있다. 또한, 본 발명에서 '피부 재생'은 피부 또는 세포에 발생된 손상에 대한 피부 조직의 회복을 의미하는 것으로, 피부 세포의 재생을 촉진하여 피부 상처, 흉터 등이 빠르게 치료될 수 있다. 여기서 '피부'는 동물의 체표를 덮는 조직을 의미하는 것으로서, 얼굴 또는 바디 등의 체표를 덮는 조직 뿐만 아니라, 두피를 포함하는 광범위한 개념이다.
이와 같이, 본 발명의 조성물은, 펄스 전기장을 미역귀에 처리하여 세포벽 또는 세포막을 파괴한 이후에 유효 성분을 추출하기 때문에, 미역귀에 펄스 전기장을 처리하지 않은 경우에 비하여 주름 개선 또는 피부 재생 등의 효과가 매우 우수한 특징이 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 조성물은, 화장료 조성물, 식품 조성물, 약학적 조성물 등으로 활용될 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함하는 화장료 조성물은, 주름 개선 또는 피부 재생에 효과가 있는 다양한 제품으로 제조될 수 있다. 예를 들어, 영양크림, 에센스, 앰플과 같은 기능성 화장품이나, 화장수, 로션 등의 기초 화장품으로 제조될 수 있다. 그 외에도, 비누, 세정제, 클렌징 크림, 클렌징 워터 등으로 제조되거나, 립스틱, 립밤, 마스카라, 블러셔, 쉐이딩, 하이라이터, 메이크업 베이스, 파운데이션, 팩트, 컨실러, 스킨커버 등과 같은 색조 화장품으로 제조될 수 있다. 또한, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 젤 등과 같은 모발 세정 제품으로 제조될 수도 있다. 또한, 예를 들어, 팩, 하이드로젤 슬리밍패치 등과 같이 피부에 부착되는 제품으로 제조되거나, 미스트, 에어로졸 등과 같이 피부에 분사되는 제품으로 제조될 수도 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 화장료 조성물은, 당업계에서 통상적으로 제조되는 제형으로 제공될 수 있다. 예를 들어, 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 유탁액, 고체, 겔, 오일, 분말, 페이스트 또는 포말(foam) 에어로졸 등의 제형으로 제공될 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 효과를 해치지 않는 범위 내에서, 당업계에서 통상적으로 사용되는 다른 성분, 예를 들면, 점증제, pH 조절제, 등장화제, 계면활성제, 안정화제, 보존제, 방부제, 자외선 흡수제, 살균제, 보습제, 차단제, 산화 방지제, 유기 안료, 무기 안료, 향료, 비타민 등을 더 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하다.
본 발명은 화장료 조성물 뿐만 아니라, 펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함하는 식품 조성물을 제공할 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함하는 식품 조성물은, 주름 개선 또는 피부 재생에 효과가 있는 다양한 제품으로 제조될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 식품 조성물은, 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나 이미 생성된 주름을 완화하는 기능, 피부 표피 등의 상처를 치유하고 세포 성장을 유발하는 기능 등을 가지는 제품으로서, 주름 개선 또는 피부 재생에 도움을 주는 기능성 식품, 영양 보조제, 건강식품, 식품 첨가제, 특수 영양 식품, 식육 가공품, 조미 식품, 절임 식품, 유가공품 등의 제품으로 제조될 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 식품 조성물은 당업계에 통상적으로 제조되는 다양한 형태로 제공될 수 있다. 예를 들어, 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽, 음료 등의 제형으로 제공될 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 효과를 해치지 않는 범위 내에서, 식품 조성물의 업계에서 통상적으로 사용되는 다른 성분, 예를 들면, 향, 추출물, 영양 성분 등의 식품첨가물, 식품소재 등을 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 식품소재는, 향미제, 천연 탄수화물, 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제, 음료에 사용되는 과육 등을 포함할 수 있다. 예를 들어, 향미제로서 타우마틴, 스테비아 추출물 등을 포함하는 천연 향미제나, 사카린, 아스파르탐 등을 포함하는 합성 향미제를 사용할 수 있고, 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스 등을 포함하는 디사카라이드, 텍스트린, 사이클로텐스트린 등을 포함하는 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등을 포함하는 당알콜을 사용할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하다.
실시예에 따라, 본 발명은 펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공할 수 있다. 실시예에 따라, 피부 질환은, 피부 주름 및 피부 상처 중 적어도 하나일 수 있다. 보다 구체적으로, 본 발명의 약학적 조성물은, 약용 로션, 약용 크림, 약용 유액, 약용 파운데이션 등의 약용 화장품으로도 제조될 수 있다.
예를 들어, 본 발명의 약학적 조성물은, 자외선에 의한 주름 생성을 억제하는 데 효과가 있을 수 있다. 이에 더하여 노화 유전자, 피부 속 탄력 섬유, 결합 조직, 근육 퇴화, 피하지방 감소, 혈액순환 저하, 피지 분비 감소, 수분 감소 등에 의하여 유발된 주름의 완화에 효과가 있을 수 있다.
또한, 다른 예로, 본 발명의 약학적 조성물은, 피부 노화, 염증, 긁힘, 외부 원인(예를 들어, 자외선, 외부 오염 물질, 창상, 외상, 내부 스트레스 등)에 의한 피부 손상 치료 또는 개선하는 등 피부 재생에 효과가 있을 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 약학적 조성물은, 본 발명의 효과를 해치지 않는 범위 내에서, 약학적으로 허용 가능한 염을 더 포함할 수 있다. 여기서 '약학적으로 허용 가능한 염'은, 화합물이 투여되는 유기체에 심각한 자극을 유발하지 않고 화합물의 생물학적 활성과 물성들을 손상시키지 않는 염일 수 있다.
예를 들어, 약학적으로 허용 가능한 염은, 무기산, 예컨대 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 또는 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 옥살산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 신남산, 만델산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, p-톨루엔설폰산, 살리실산, N-아세틸시스테인 등을 포함하는 유기산으로부터 형성될 수 있다.
또한, 예를 들어, 약학적으로 허용 가능한 염은, 무기 염기 또는 유기 염기를 자유 산에 첨가하여 제조될 수 있다. 무기 염기로부터 유도된 염은, 비제한적으로 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘 염 등을 포함할 수 있다. 유기 염기로부터 유도된 염은, 비제한적으로 1차, 2차 및 3차 아민, 자연적으로 발생하는 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 사이클릭 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예를 들어, 아이소프로필아민, 트라이메틸아민, 다이에틸아민, 트라이에틸아민, 트라이프로필아민, 에탄올아민, 리신, 아르기닌, N-에틸피페리딘, 피페리딘, 폴리이민 수지 등의 염을 포함한다.
실시예에 따라, 본 발명의 약학적 조성물은, 본 발명의 효과를 해치지 않는 범위 내에서, 약학적으로 허용 가능한 담체(carrier) 또는 첨가제를 더 포함할 수 있다. 여기서 '약학적으로 허용 가능한 담체'는, 제제 시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용 또는 처방 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않으며, 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물일 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 약학적 조성물은, 고형 제제 또는 액상 제제로 제형화될 수 있다. 예를 들어, 고형 제제로 제형화될 경우, 담체, 착향제, 결합제, 방부제, 붕해제, 활택제, 충진제 등을 더 포함할 수 있고, 액상 제제로 제형화될 경우, 물, 프로필렌글라이콜 용액 같은 용액제, 현탁액제, 유제 등을 더 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 착색제, 착향제, 안정화제, 점성화제 등을 더 포함할 수 있다.
실시예에 따라, 고형 제제는, 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 좌제 등을 포함할 수 있다. 예를 들어, 산제는, 본 발명의 유효성분인 미역귀 추출물과 유당, 전분, 미결정 셀룰로오스 등의 담체를 단순 혼합함으로써 제조될 수 있다. 과립제는, 본 발명의 미역귀 추출물과 담체, 폴리비닐피롤리돈, 하이드록시프로필셀룰로오스 등의 결합제를 혼합한 후, 물, 에탄올, 이소프로판올 등의 용매를 이용한 습식과립법 또는 압축력을 이용한 건식과립법을 이용하여 제조될 수 있다. 또한, 정제는, 상기 과립제를 마그네슘스테아레이트 등의 활택제와 혼합한 후, 타정기를 이용하여 타정함으로써 제조될 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 약학적 조성물은, 치료해야 할 질환 또는 개체의 상태에 따라 경구제, 주사제(예를 들어, 근육주사, 복강주사, 정맥주사, 주입(infusion), 피하주사, 임플란트), 흡입제, 비강투여제, 질제, 직장투여제, 설하제, 트랜스더말제, 토피칼제 등으로 투여될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은, 투여 경로에 따라 통상적으로 사용되고 비독성인, 약학적으로 허용 가능한 운반체, 첨가제, 비히클을 포함하는 적당한 투여 유닛 제형으로 제제화될 수 있다.
실시예에 따라, 본 발명의 약학 조성물의 투여량은, 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여 경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있으며, 약학 조성물의 투여 형태, 투여 경로 및 투여 방식은 각각 독립적일 수 있고, 그 방식에 있어 특별히 제한되지 아니하며, 목적하는 해당 부위에 약학 조성물이 도달할 수 있는 한 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 따른 약학 조성물의 투여 형태는 이들의 약학적으로 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 단독으로 또는 기타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다. 또한, 예를 들어, 본 발명에 따른 약학 조성물의 투여 방식은, 정맥 내 투여, 복강 내 투여, 근육 내 투여, 경피 투여 또는 피하 투여뿐만 아니라, 질환 부위에 조성물을 도포하거나 분무, 흡입하는 방법 또한 이용할 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.
본 발명의 펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물은 다음의 방법을 통해 제조될 수 있다.
우선, 미역귀를 원료로 준비할 수 있다. 이 때, 미역귀는 분쇄 또는 마쇄 과정을 거치지 않은 원물이거나, 분쇄 또는 마쇄 과정을 거친 절단물일 수 있다. 예를 들어, 미역귀를 세척하여 물기를 제거한 뒤 분쇄하여 사용할 수 있으며, 이때, 미역귀는 채취한지 7일 이내의 것을 사용할 수 있다.
다음으로, 미역귀를 매질과 적절한 비율로 혼합할 수 있다. 매질은 펄스 전기장 처리 시 전기장을 전달하는 역할을 할 수 있다. 매질은 정제수 등일 수 있으며 혼합 비율은 당업자에 의해 적절히 조절될 수 있다. 예를 들어, 미역귀와 정제수를 1 : 15의 비율로 혼합할 수 있다.
다음으로, 매질과 혼합된 미역귀에 펄스 전기장(PEF)을 처리할 수 있다. 펄스 전기장은 미역귀의 세포벽 또는 세포막을 파괴시킬 수 있다. 펄스 전기장의 조건은 적용 대상이나 실험자의 기호에 따라 적절히 조절될 수 있다. 실시예에 따라, 펄스 전기장은, 펄스 넓이 10 내지 30㎛, 펄스 빈도 20 내지 80Hz, 펄스 횟수 50 내지 150회, 처리 시간 0.1 내지 10s 및 에너지 0.5 내지 50kJ의 조건으로 처리될 수 있고, 구체적으로, 펄스 넓이 20㎛, 펄스 빈도 50Hz, 펄스 횟수 100회, 처리 시간 1s, 및 에너지 1kJ의 조건으로 처리될 수 있다.
이후, 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 용매에서 추출할 수 있다. 세포벽 또는 세포막이 붕괴된 상태의 원재료에서 유효 성분을 추출하는 단계로 추출 용매에 따라 성분과 효능이 달라질 수 있다. 실시예에 따라, 용매는, 에탄올일 수 있으며, 구체적으로 70％ 에탄올일 수 있다. 추출 방법은, 침지 추출이 바람직하나, 환류 추출, 초임계 추출, 아임계 추출, 고온 추출, 고압 추출 또는 초음파 추출 등의 당업계에서 통상적으로 사용되는 추출 방법을 이용하여 수행될 수 있다.
실시예에 따라, 용매를 이용하여 추출된 액상의 추출물을 건조하여 고형 형태로 제조하거나, 고형 형태의 추출물을 분쇄하여 분말 형태로 제조하는 등 후가공 처리가 이루어질 수 있다. 이때, 건조 방식은 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 다양한 방식이 적용될 수 있다. 또한, 펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물을 감압 증류하거나, 농축시키는 등 다양한 방식으로 제조 또는 가공될 수 있다.
이처럼, 본 발명은 미역귀에서 유효 성분을 추출하기 이전에 미역귀에 펄스 전기장을 처리하여 미역귀의 세포막을 붕괴시키기 때문에, 미역귀에 펄스 전기장을 처리하지 않고 미역귀를 추출하는 일반 추출법에 비하여 푸코스테롤과 같은 유효 성분의 추출 효율이 증진될 수 있다.
따라서, 미역귀 추출물이 푸코스테롤을 고함량으로 포함하기 때문에, 주름 개선 및 피부 재생 중 적어도 하나의 효과가 매우 우수할 수 있다. 이와 같은 효과는 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 에탄올로 추출한 경우에 극대화될 수 있다. 즉, 미역귀를 에탄올 이외의 용매(예를 들어, 물)로 추출한 경우에 비하여 에탄올로 추출한 경우, 푸코스테롤의 추출 효율이 보다 증가하기 때문에, 주름 개선 또는 피부 재생과 같은 효과가 더욱 우수해질 수 있다.
[실험예]
이하에서, 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기 위한 실시예를 다음과 같이 나타내었으나, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
실시예와 비교예의 제조
(1) 실시예의 제조
미역귀에 정제수를 1 : 15의 비율로 혼합한 뒤 미역귀에 펄스 넓이 20㎛, 펄스 빈도 50Hz, 펄스 횟수 100회, 처리 시간 1s, 및 에너지 1kJ의 조건으로 펄스 전기장을 처리하였다. 이후, 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 건져 용매로서 70％ 에탄올을 이용하여 침지 추출한 후 건조한 뒤 실시예의 미역귀 추출물을 수득하였다.
(2) 비교예 1 및 2의 제조
펄스 전기장의 처리 유무에 따른 효과를 비교하기 위하여, 실시예의 제조 방법에서 펄스 전기장 처리 과정만을 제외하여, 비교예 1의 일반 미역귀 추출물을 제조하였다.
또한, 추출 용매의 종류에 따른 효과를 비교하기 위하여, 실시예의 제조 방법에서 추출 용매로서 70％ 에탄올을 대신하여 물을 이용하여 비교예 2의 미역귀 추출물을 제조하였다.
실험예
(1) 푸코스테롤의 함량 확인
상기 실시예 및 비교예 1에 대하여 푸코스테롤의 함량을 알아보기 위하여, HPLC(High Performance Liquid Chromatography)로 분석하였으며, 그 결과를 표 1 및 도 1에 나타내었다. 구체적으로 도 1에서 파란색 라인은 실시예의 HPLC 라인이고, 분홍색 라인은 비교예 1의 HPLC 라인이다. HPLC 분석 조건은 이동상 A: Methanol, B: Acetonitrile, 70％ B(30min; Isocratic)을 사용하여 35℃의 온도, 1.2㎖/min의 유속으로 분리하였으며, Phenomenon Luna C18 (250 × 4.6mm) 칼럼을 사용하였고, 푸코스테롤을 검출하기 위하여 사용한 파장은 210nm이다.
실험 결과, 펄스 전기장을 처리한 실시예는 펄스 전기장을 처리하지 않은 비교예 1에 비하여 푸코스테롤의 함량이 매우 높은 것으로 확인되었다. 또한, 푸코스테롤은 주름 개선, 피부 탄력 개선, 피부 손상 개선 등의 기능이 알려진 성분으로, 높은 함량으로 측정될수록 주름 개선, 피부 탄력 개선, 피부 손상 개선 효능이 높게 평가될 수 있는 바, 실시예의 주름 개선, 피부 탄력 개선, 피부 손상 개선 효능이 비교예 1에 비하여 우수하다는 것을 알 수 있었다. 특히, 실시예의 푸코스테롤의 함량은 4,500ppm 이상으로, 비교예 1에 비하여 약 1.4배 증가한 것으로 확인되었다.
즉, 미역귀에서 유효 성분을 추출하기 이전에 미역귀에 펄스 전기장을 처리하여 미역귀의 세포막을 붕괴시키기 때문에, 미역귀에 펄스 전기장을 처리하지 않고 추출하는 일반 추출법에 비하여 유효 성분의 추출 효율이 증진됨을 알 수 있었다.
(2) 주름 개선 효능 평가
1) 세포 독성 평가
상기 실시예 및 비교예 1에 대하여 세포 독성 시험을 CCD-986sk MTT assay에 따라 실시하여 그 결과를 표 2에 나타내었다.
구체적인 실험방법은 다음과 같다.
CCD-986sk 세포주를 96well plate에 well 당 적정 농도로 200㎕ 분주하고 37℃, 5％ CO2 인큐베이터 조건 하에 24시간 배양하였다. 배양된 세포에 샘플을 농도 별로 처리 후 37℃, 5％ CO2 인큐베이터 조건 하에 24시간 배양하였다. 배양 완료 3시간 전 20mg/㎖ MTT 20㎕ 처리 후 3시간 동일조건으로 배양하였다. 배양 완료 후 배양액을 버리고 DMSO 150㎕ 분주 후 상온에서 10분 교반하였다. Microplate reader(Thermo, UV/Vis)를 이용하여 570nm에서 흡광도 측정하였다. 세포 생존율은 (실험군 흡광도/대조군 흡광도) × 100 식으로 도출하였다.
실험 결과, 실시예 및 비교예 1은 12.5㎍/㎖ 농도 이하에서 세포 생존율이 80％ 이상으로 측정되어 세포 독성을 나타내지 않음을 알 수 있었다.
2) 주름 개선 평가
상기 실시예 및 비교예 1에 대하여 주름 개선 효능을 평가하여 그 결과를 표 3에 나타내었다.
구체적인 실험방법은 다음과 같다.
CCD-986sk 세포주를 6 well plate에 적정 농도로 2㎖ 분주하고 37℃, 5％ CO2 인큐베이터에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 배지를 제거하고 HBSS를 넣은 후, UV irradiation system(VILBER LOURMAT, UV-irradiation BIO-SUN)을 이용하여 UVA 30J/cm2를 조사하였고, 대조군은 동일 시간동안 25℃ 인큐베이션 하였다. 반응 종료 후 Serum Free 배지로 교체하고, UVA 조사한 세포에 샘플을 농도 별로 처리 후 37℃, 5％ CO2 인큐베이터 조건 하에 24시간 동안 배양하였다. 배양 완료 후 각 well에 Trizol(Invitrogen)를 1㎖ 처리하여 RNA 추출하고 클로로포름, 2-프로판올, 75％ EtOH 및 원심분리기 사용하여 RNA 응축 및 워싱을 진행하였다. RNA 건조 후 Nuclease free water를 적정량 넣고 Nano drop(ALLSHENG)을 이용하여 정량하였다. 각 RNA를 동일 농도가 되도록 제조한 후, cDNA Synthesis Kit(PhileKorea)를 이용하여 Reverse transcription하였다. 합성된 cDNA 및 Primer(MMP-1 Oligonucleotide), SYBR green 및 Nuclease free water를 적정 비율로 혼합한 후 Real time PCR 장비(Applied Biosystem, Quantstudio 5)를 사용하여 RT-qPCR을 실행하였다. PCR 결과 분석은 ΔΔCt 값을 산출하여 유전자의 발현을 비교하였다. 효능 평가 시 사용한 인자는 콜라게나아제 기능을 보유한 인자이기 때문에 UV 조사 시, 이에 대한 발현 정도가 무처리 군인 Blank 대비 높아지며 UVA 처리한 음성 대조군 대비 샘플의 mRNA 발현이 낮게 측정될수록 광에 의한 주름 형성 억제 효능이 높게 평가될 수 있다.
실험 결과, 각 시료의 농도에서 펄스 전기장을 처리한 실시예가 펄스 전기장을 처리하지 않은 비교예 1과는 달리, MMP-1의 억제 활성이 높게 측정됨에 따라 주름 개선의 효능이 우수함을 확인하였다. 특히, 비교예 1에서는 주름 개선 효능이 전혀 나타나지 않는 반면, 실시예에서는 주름 개선의 효능이 매우 높게 나타나는 것을 알 수 있었다.
즉, 미역귀에서 유효 성분을 추출하기 이전에 미역귀에 펄스 전기장을 처리하여 미역귀의 세포막을 붕괴시키기 때문에, 미역귀에 펄스 전기장을 처리하지 않고 추출하는 일반 추출법에 비하여 주름 개선의 효능이 우수함을 알 수 있었다.
또한, 에탄올을 용매로 사용한 실시예의 주름 개선 효능이 극대화되는 것을 확인할 수 있었다. 즉, 추출 용매에 따라 미역귀 추출물의 극대화되는 효능이 상이해지는 것을 알 수 있었다.
(3) 피부 재생 효능 평가
1) 세포 독성 평가
상기 실시예 및 비교예 1과 2에 대하여 세포 독성 시험을 HaCaT MTT assay에 따라 실시하여 그 결과를 표 4에 나타내었다.
구체적인 실험방법은 다음과 같다.
HaCaT 세포주를 96well plate에 well 당 적정 농도로 200㎕ 분주하고 37℃, 5％ CO2 인큐베이터 조건 하에 24시간 배양하였다. 배양된 세포에 샘플을 농도 별로 처리 후 37℃, 5％ CO2 인큐베이터 조건 하에 24시간 배양하였다. 배양 완료 3시간 전 5mg/㎖ MTT 20㎕ 처리 후 3시간 동일조건으로 배양하였다. 배양 완료 후 배양액을 버리고 DMSO 200㎕ 분주 후 상온에서 10분 교반하였다. Microplate reader(Thermo, UV/Vis)를 이용하여 570nm에서 흡광도 측정하였다. 세포 생존율은 (실험군 흡광도/대조군 흡광도) × 100 식으로 도출하였다.
실험 결과, 실시예 및 비교예 1은 1.6㎍/㎖ 농도 이하에서, 비교예 2는 0.8㎍/㎖ 농도 이하에서 세포 생존율이 80％ 이상으로 측정되어 세포 독성을 나타내지 않음을 알 수 있었다.
2) 피부 재생 평가
상기 실시예 및 비교예 1과 2에 대하여 피부 재생 효능을 평가하여 그 결과를 표 5 및 도 2 내지 도 4에 나타내었다. 구체적으로 도 2는 실시예의 결과, 도 3은 비교예 1의 결과, 도 4는 비교예 2의 결과 사진이다.
구체적으로 실험방법은 다음과 같다.
HaCaT 세포주를 24well plate에 well 당 적정 농도로 1㎖ 분주하고 37℃, 5％ CO2 인큐베이터에서 24시간 배양 후 분주한 각질형성세포에 피펫 끝으로 scratch(긁힘, 손상)을 유도하고 0시간대에 세포층의 이미지를 현미경 사진으로 찍었다. 이후, 세포층에 실시예 및 비교예의 샘플을 세포 무독성 농도 내의 동일 농도에서 비교 가능하도록 처리한 후 48시간 동안 37℃, 5％ CO2 조건에서 추가 배양한 후 48시간대 세포층의 이미지를 현미경 사진으로 찍어 Cell migration을 측정하였다. 구체적으로, 도 2 내지 도 4의 (a)는 0시간대의 세포층의 사진이고, 도 2 내지 도 4의 (b)는 48시간대의 세포층의 사진이다. 0시간대에 비하여 48시간 후의 scratch 면적이 감소할수록 세포 이동능이 우세하여, 피부 재생의 효능이 높게 평가될 수 있다.
실험 결과, 각 시료의 농도에서 펄스 전기장을 처리한 실시예가 펄스 전기장을 처리하지 않은 비교예 1에 비하여 48시간 후의 scratch 면적이 크게 감소하였고, 피부 재생 효능이 우수함을 확인하였다. 구체적으로, 0.4㎍/㎖ 농도 기준에서 실시예가 비교예 1에 비하여 피부 재생 효능이 약 8배 이상 우수함을 알 수 있었다.
즉, 미역귀에서 유효 성분을 추출하기 이전에 미역귀에 펄스 전기장을 처리하여 미역귀의 세포막을 붕괴시키기 때문에, 미역귀에 펄스 전기장을 처리하지 않고 추출하는 일반 추출법에 비하여 피부 재생의 효능이 우수함을 알 수 있었다.
또한, 추출 용매로서 에탄올을 사용한 실시예가 추출 용매로서 물을 사용한 비교예 2와는 달리, 48시간 후의 scratch 면적이 크게 감소하였고, 피부 재생 효능이 우수함을 확인하였다. 특히, 비교예 2에서는 피부 재생 효능이 전혀 나타나지 않는 반면, 실시예에서는 주름 개선의 효능이 매우 높게 나타나는 것을 알 수 있었다.
즉, 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 추출할 때 에탄올을 용매로 사용하기 때문에, 피부 재생 효능이 극대화되며, 추출 용매에 따라 미역귀 추출물의 극대화되는 효능이 상이해질 수 있는 점을 알 수 있었다.
이상으로 본 발명의 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (13)
- 주름 개선 또는 피부 재생용 화장료 조성물로서,
펄스 전기장(PEF)이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함하고,
상기 미역귀 추출물은, 상기 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 에탄올로 추출하며,
상기 미역귀 추출물은, 펄스 전기장을 미처리한 경우에 비해 푸코스테롤(Fucosterol)을 더 높은 함량으로 포함하는 것을 특징으로 하는, 조성물. - 삭제
- 삭제
- 제 1 항에 있어서,
상기 펄스 전기장은, 펄스 넓이 10 내지 30㎛, 펄스 빈도 20 내지 80Hz 및 에너지 0.5 내지 50kJ의 조건으로 처리되는 것을 특징으로 하는, 조성물. - 제 1 항에 있어서,
상기 펄스 전기장은, 펄스 횟수 50 내지 150회 및 펄스 시간 0.1 내지 10초의 조건으로 처리되는 것을 특징으로 하는, 조성물. - 제 1 항에 있어서,
상기 미역귀 추출물은, 액상 형태 또는 건조한 분말 형태인 것을 특징으로 하는, 조성물. - 삭제
- 삭제
- 식품 조성물로서,
펄스 전기장(PEF)이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함하고,
상기 미역귀 추출물은, 상기 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 에탄올로 추출하며,
상기 미역귀 추출물은, 펄스 전기장을 미처리한 경우에 비해 푸코스테롤(Fucosterol)을 더 높은 함량으로 포함하는 것을 특징으로 하는, 식품 조성물. - 피부 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로서,
펄스 전기장(PEF)이 처리된 미역귀 추출물을 유효 성분으로 포함하고,
상기 미역귀 추출물은, 상기 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 에탄올로 추출하며,
상기 미역귀 추출물은, 펄스 전기장을 미처리한 경우에 비해 푸코스테롤(Fucosterol)을 더 높은 함량으로 포함하고,
상기 피부 질환은, 피부 주름 및 피부 상처 중 적어도 하나인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물. - 미역귀 추출물의 제조방법으로서,
미역귀를 정제수에 혼합시키는 단계;
상기 혼합된 미역귀에 펄스 전기장을 처리하는 단계; 및
상기 펄스 전기장이 처리된 미역귀를 용매에서 추출하는 단계를 포함하고,
상기 용매는 에탄올이며,
상기 미역귀 추출물은 펄스 전기장을 미처리한 경우에 비해 푸코스테롤(Fucosterol)을 더 높은 함량으로 포함하는 것을 특징으로 하는, 방법. - 제 11 항에 있어서,
상기 펄스 전기장을 처리하는 단계는, 펄스 넓이 10 내지 30㎛, 펄스 빈도 20 내지 80Hz 및 에너지 0.5 내지 50kJ의 조건으로 수행되는 것을 특징으로 하는, 방법. - 삭제
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020220102869A KR102513248B1 (ko) | 2022-08-17 | 2022-08-17 | 펄스 전기장이 처리된 미역귀 추출물을 포함하는 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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|---|---|
| KR102513248B1 true KR102513248B1 (ko) | 2023-03-24 |
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| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102513248B1 (ko) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20190035444A (ko) * | 2017-09-26 | 2019-04-03 | 제주대학교 산학협력단 | 미역귀 추출물, 감태 추출물 및 글리코사미노글리칸을 포함하는 항노화 기능성 화장료 조성물 |
-
2022
- 2022-08-17 KR KR1020220102869A patent/KR102513248B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20190035444A (ko) * | 2017-09-26 | 2019-04-03 | 제주대학교 산학협력단 | 미역귀 추출물, 감태 추출물 및 글리코사미노글리칸을 포함하는 항노화 기능성 화장료 조성물 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Biomedical Science Letters, 2019, 25(4), pp.313-320(2019.12.31.) 1부.* * |
| 대한화장품학회지, 제46권 제3호, 페이지 231-241(2020.09.30.) 1부.* * |
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