KR102511152B1 - Bacillus siamensis LES120 EXHIBITING CONTROL EFFECT AGAINST BACTERIAL WILT - Google Patents

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Abstract

본 발명은 랄스토니아 솔라나세아륨(Ralstonia solanacearum) 병원균에 의해 발생되는 풋마름병에 대한 방제 효과를 나타내는 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP) 및 이를 포함하는 미생물 제제를 제공하여 풋마름병을 친환경적으로 방제할 수 있는 기술을 구축하고, 친환경적으로 작물을 생산할 수 있도록 한다.The present invention provides a Bacillus siamensis LES120 strain (KACC 81133BP) showing a control effect on foot blight caused by Ralstonia solanacearum pathogens and a microbial preparation containing the same, Establish technology that can control green blight in an eco-friendly way and produce crops in an eco-friendly way.

Description

세균성 풋마름병에 대한 방제 효과를 나타내는 바실러스 시아멘시스 LES120 균주{Bacillus siamensis LES120 EXHIBITING CONTROL EFFECT AGAINST BACTERIAL WILT}Bacillus siamensis LES120 strain showing control effect against bacterial blight {Bacillus siamensis LES120 EXHIBITING CONTROL EFFECT AGAINST BACTERIAL WILT}

본 발명은 랄스토니아 솔라나세아륨(Ralstonia solanacearum) 병원균에 의해 발생되는 풋마름병에 대한 방제 효과를 나타내는 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP) 및 이를 포함하는 미생물 제제에 관한 것이다. The present invention relates to a Bacillus siamensis LES120 strain (KACC 81133BP) exhibiting a control effect on foot blight caused by Ralstonia solanacearum pathogens and a microbial preparation comprising the same .

지구 표면 기온은 지난 한 세기 동안 지속해서 상승하고 있으며, 세기 말에는 1.0℃에서 4.8℃까지 상승할 것으로 예상된다(IPCC, 2014). 전 세계적인 평균 기온 상승은 식물이 극복해야 할 주요 비생물적 스트레스 중 하나로, 식물 병해 발생이 증가하는 원인이 된다. 국내에서도 아열대 기후가 북상하고 있어 국내 주요 작물의 고온성 병해의 발생이 심화될 것으로 예측되는데, 기온 상승은 겨울철 병원균의 월동에도 유리한 조건으로 작용한다.Global surface temperatures have been continuously rising over the past century and are projected to rise between 1.0°C and 4.8°C by the end of the century (IPCC, 2014). An increase in global average temperature is one of the major abiotic stresses that plants must overcome, causing an increase in the occurrence of plant diseases. In Korea, as the subtropical climate is moving north, it is predicted that the occurrence of thermophilic diseases of major domestic crops will intensify.

고추는 우리나라 5대 채소 중 하나로 고추생산액은 2018년에 11,449억 원, 2019년에는 11,851억 원으로 전망되며 이는 전체 농림축산식품 생산액 중에서 9순위에 해당되었다. 2017년 고추 생산량은 생육 초기 가뭄과 여름철 고온, 잦은 강우로 인한 병해 확산으로 전년보다 35% 감소하였으며, 2018년 건고추 10a당 수확량은 248kg으로, 작황이 크게 나빴던 전년보다는 28.4% 증가하였으나, 여름철 폭염과 가뭄으로 평년보다 5% 낮았다.Red pepper is one of the five major vegetables in Korea, and the amount of red pepper production is expected to be KRW 1,144.9 billion in 2018 and KRW 1,185.1 billion in 2019, which ranks ninth among the total production of agricultural, livestock and livestock products. In 2017, pepper production decreased by 35% from the previous year due to drought in the early stages of growth, high temperature in summer, and disease spread due to frequent rainfall. It was 5% lower than normal due to drought and drought.

고추에 발생하는 풋마름병은 랄스토니아 솔라나세아륨(Ralstonia solanacearum) 세균병원균에 의한 것으로서 매년 정식기 이후부터 수확기까지 작기 전반에 걸쳐 발병한다. RSC (Ralstonia solanacearum species complex)는 전 세계의 열대, 아열대 및 온대지역에서 200종 이상의 식물종에서 막대한 생산량 손실의 원인이 되는 주요 세균병원균이다. 랄스토니아 솔라나세아륨(R. solanacearum)에 의한 고추 풋마름병은 20℃이하에서는 발병이 거의 진행되지 않고, 고온 조건에서 발병이 심하다. 여름철 기온이 점점 상승하고 있는 국내에서도 랄스토니아 솔라나세아륨-(R. solanacearum)에 의한 풋마름병 피해가 증가하는 추세이며, 일반 농가에서는 두둑을 높여 배수가 잘되도록 하거나 이병주를 즉시 제거하고 있지만 효율적인 방제법은 없는 실정이다.Green pepper blight is caused by the bacterial pathogen Ralstonia solanacearum and occurs throughout the growing season from planting to harvesting every year. Ralstonia solanacearum species complex (RSC) is a major bacterial pathogen responsible for massive yield losses in more than 200 plant species in tropical, subtropical and temperate regions worldwide. Ralstonia solanacearum ( R. solanacearum ) Pepper green blight caused by onset rarely progresses below 20 ° C, and onset is severe under high temperature conditions. Even in Korea, where summer temperatures are gradually rising, damage from foot blight caused by Ralstonia solanacearum ( R. solanacearum ) is on the rise, and general farmhouses raise the dike to ensure good drainage or remove the blight immediately. There is no effective control method.

국내에 고추 풋마름병을 방제하기 위한 화학 농약으로는 유묘 정식 전에만 처리할 수 있는 다조멧(Dazomet)과 메탐소듐(metam-sodium)이 등록되어 있다. 고추와 같은 가지과 속에 속하는 토마토의 작기 중에 처리 가능한 화학 약제로 옥시테트라사이클린(oxytetracycline)이 등록되어 있으나, 고추에 처리했을 때 시간이 경과하면서 방제 효과가 빠르게 감소하였다. 뿐만 아니라 옥시테트라사이클린(oxytetracycline)은 테트라사이클린(Tetracycline)계 항생물질로서, 플라스미드(plasmid)나 전이인자(transposon)에 존재하는 저항성 유전인자의 세균 간 수평적인 이동을 통한 저항성 발현이 다양한 세균 속에서 보고되었다. 랄스토니아 솔라나세아륨(R. solanacearum)에 의한 고추 풋마름병은 이를 방제하기 위한 미생물제가 없어 친환경 재배에 어려움이 많은 실정이므로, 예방 및 치료 효과를 갖는 방제 미생물 개발이 필요하다.As chemical pesticides to control green pepper blight in Korea, Dazomet and metam-sodium, which can only be treated before planting seedlings, are registered. Oxytetracycline has been registered as a chemical agent that can be treated during the growing season of tomatoes belonging to the solanaceae genus such as pepper, but the control effect rapidly decreased over time when treated with pepper. In addition, oxytetracycline is a tetracycline-based antibiotic, and resistance is expressed in various bacteria through horizontal transfer of resistance genes present in plasmids or transposons between bacteria. reported Since Ralstonia solanacearum ( R. solanacearum ) causes green blight of pepper due to lack of microbial agents to control it, it is difficult to grow environmentally friendly, so it is necessary to develop control microorganisms having preventive and therapeutic effects.

본 발명은 상기한 바와 같이 종래기술이 가지는 문제를 해결하기 위해 안출된 것으로, 풋마름병 억제효과를 가지며 독성이 낮고 인축에 안전하며 토양 및 수질오염 문제가 없어 친환경 농작물 재배농가에서 고품질 농작물을 생산하는데 기여할 수 있는 풋마름병 방제용 조성물을 제공함에 목적이 있다.The present invention has been made to solve the problems of the prior art as described above, has a green blight inhibitory effect, is low in toxicity, safe for humans and animals, and has no soil and water pollution problems, contributing to the production of high-quality crops in eco-friendly farms It is an object to provide a composition for controlling foot blight that can be.

본 발명은 식물의 풋마름병 방제용 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP)를 제공한다.The present invention provides a Bacillus siamensis LES120 strain (KACC 81133BP) for controlling plant blight.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 풋마름병은 랄스토니아 솔라나세아륨(Ralstonia solanacearum) 병원균으로부터 발생될 수 있다.In one embodiment of the present invention, the foot blight may be caused by the Ralstonia solanacearum pathogen.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 균주는 서열번호 1의 염기서열을 포함할 수 있다.In one embodiment of the present invention, the strain may include the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 식물은 고추, 토마토, 가지, 담배를 포함하는 가지과 작물일 수 있다.In one embodiment of the present invention, the plant may be a solanaceous crop including pepper, tomato, eggplant, and tobacco.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 균주는 미생물 농약, 종자코팅제, 토양개량제, 퇴비부숙제, 엽면살포제, 및 관주살포제 중 적어도 하나를 포함할 수 있다.In one embodiment of the present invention, the strain may include at least one of a microbial pesticide, a seed coating agent, a soil improving agent, a compost composting agent, a foliar spreading agent, and a drenching agent.

본 발명은, 식물의 풋마름병 방제용 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP), 상기 균주의 포자, 상기 균주의 배양액 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 미생물 제제를 제공한다.The present invention provides a microbial preparation comprising Bacillus siamensis LES120 strain (KACC 81133BP) for controlling plant blight, spores of the strain, culture broth of the strain, or a mixture thereof as an active ingredient.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 상기 미생물 제제는 미생물 농약, 종자코팅제, 토양개량제, 퇴비부숙제, 엽면살포제, 및 관주살포제 중 적어도 하나를 포함할 수 있다.In one embodiment of the present invention, the microbial agent may include at least one of a microbial pesticide, a seed coating agent, a soil improving agent, a compost composting agent, a foliar spreading agent, and a drenching agent.

본 발명은 상기 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP)를 준비하는 단계, 및 상기 균주를 TSB(Tryptic Soy Broth) 배지에 접종한 후 20~35℃100~200 rpm 조건하에서 40~50시간동안 배양하는 단계를 포함하는, 식물의 풋마름병 방제용 미생물 제제의 제조방법을 제공한다.The present invention is the step of preparing the Bacillus siamensis LES120 strain (KACC 81133BP), and inoculating the strain into TSB (Tryptic Soy Broth) medium, and then 20 ~ 35 100 ~ 200 rpm under 40 ~ 200 rpm conditions It provides a method for producing a microbial agent for controlling plant blight, comprising culturing for 50 hours.

본 발명은 상기 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP)의 균체, 및 상기 균주를 이용하여 제조한 미생물 제제 중 적어도 하나 이상을 유효성분으로 포함하는, 식물의 풋마름병 방제용 비료를 제공한다.The present invention is a Bacillus siamensis LES120 strain (KACC 81133BP) strain, and at least one of the microbial preparations prepared using the strain as an active ingredient, a fertilizer for controlling plant blight to provide.

본 발명은 상기 비료를 토양에 관주처리하여 식물의 풋마름병에 대한 내성을 증가시키는 방법을 제공한다.The present invention provides a method for increasing the resistance of plants to green blight by drenching the soil with the above fertilizer.

본 발명에 따른 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주를 이용하여 풋마름병을 친환경적으로 방제할 수 있는 기술을 구축하고, 친환경적으로 작물을 생산할 수 있도록 한다.Using the Bacillus siamensis LES120 strain according to the present invention, a technology capable of environmentally friendly control of foot blight is established, and crops can be produced in an environmentally friendly manner.

도 1은 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주의 16S rRNA 유전자를 이용한 계통유전학적인 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 곰취(Ligularia fischeri)의 근권(Rhizosphere) 및 내권(Endosphere)에서 분리된 박테리아를 각각 TSA 배지 및 NA 배지에서 배양한 균주의 양(CFU/g)을 나타낸 그래프이다.
도 3a는 고추 유묘에 대한 LES120 균주의 배양액의 풋마름병 방제 효과를 시험한 고추 유묘를 나타낸 것이다.
도 3b는 고추 유묘에 대한 IC(Inoculated control; 병원균 접종 대조구)의 풋마름병 방제 효과를 시험한 고추 유묘를 나타낸 것이다.
도 4는 고추 유묘에 LES120 균주의 배양액, 세레나데(Serenade)를 처리하거나, 무처리한 경우(IC(Inoculated control; 병원균 접종 대조구) 및 UT(Untreated control; 병원균 비접종 대조구))의 이병주율(Diseased plant)을 나타낸 표이다.
도 5는 고추 유묘에 LES120 균주의 배양액, 세레나데(Serenade)를 처리하거나, 무처리한 경우(IC(Inoculated control; 접종 대조구) 및 UT(Untreated control; 비접종 대조구))의 초장(Plant height)을 나타낸 표이다.
Figure 1 shows the results of phylogenetic analysis using the 16S rRNA gene of Bacillus siamensis LES120 strain.
Figure 2 is a graph showing the amount (CFU / g) of strains of bacteria isolated from the rhizosphere and endosphere of Ligularia fischeri cultured in TSA medium and NA medium, respectively.
Figure 3a shows pepper seedlings tested for the green blight control effect of the LES120 strain culture medium on pepper seedlings.
Figure 3b shows pepper seedlings tested for the effect of controlling green blight of IC (Inoculated control; pathogen inoculation control) on pepper seedlings.
Figure 4 is a diseased state rate of pepper seedlings treated with a culture medium of LES120 strain, Serenade, or untreated (IC (Inoculated control; pathogen inoculated control) and UT (Untreated control; pathogen uninoculated control)) This is a table showing the plant.
Figure 5 shows the plant height of pepper seedlings treated with LES120 strain culture, Serenade, or untreated (IC (Inoculated control; inoculated control) and UT (Untreated control; non-inoculated control)) is the table shown.

본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 본문에서 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.Since the present invention can make various changes and have various embodiments, specific embodiments will be illustrated in the drawings and described in detail in the text. However, this is not intended to limit the present invention to specific embodiments, and should be understood to include all modifications, equivalents, and substitutes included in the spirit and scope of the present invention. In describing the present invention, if it is determined that a detailed description of related known technologies may obscure the gist of the present invention, the detailed description will be omitted.

이하, 본 명세서에 개시된 실시예들을 도면을 참조하여 상세하게 설명하고 자 한다. 상세한 설명, 도면들 및 청구항들에서 상술하는 예시적인 실시예들은 한정을 위한 것이 아니며, 기재된 실시예들과 다른 실시예들이 이용될 수 있으며, 여기서 개시되는 기술의 사상이나 범주를 벗어나지 않는 한 다른 변경들도 가능하다. Hereinafter, the embodiments disclosed in this specification will be described in detail with reference to the drawings. The illustrative embodiments described above in the detailed description, drawings and claims are not intended to be limiting, and other embodiments than those described may be used, and other changes may be made without departing from the spirit or scope of the technology disclosed herein. are also possible

개시된 기술에 관한 설명은 구조적 내지 기능적 설명을 위한 실시예에 불과하므로, 개시된 기술의 권리범위는 본문에 설명된 실시예에 의하여 제한되는 것으로 해석되어서는 아니된다. 즉, 실시예는 다양한 변경이 가능하고 여러 가지 형태를 가질 수 있으므로 개시된 기술의 권리범위는 기술적 사상을 실현할 수 있는 균등물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.Since the description of the disclosed technology is only an embodiment for structural or functional description, the scope of rights of the disclosed technology should not be construed as being limited by the embodiment described in the text. That is, since the embodiment can be changed in various ways and can have various forms, it should be understood that the scope of rights of the disclosed technology includes equivalents capable of realizing the technical idea.

여기서 사용된 모든 용어들은 다르게 정의되지 않는 한, 개시된 기술이 속하는 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 용어들은 관련기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미를 지니는 것으로 해석 될 수 없다.All terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which the disclosed technology belongs, unless defined otherwise. Terms defined in commonly used dictionaries should be interpreted as consistent with meanings in the context of related art, and cannot be interpreted as having ideal or excessively formal meanings unless explicitly defined in the present application.

풋마름병(세균성 시들음병)은 랄스토니아 솔라나세아륨(Ralstonia solanacearum) 병원균에 의해 발생되는 병으로서, 토마토, 고추, 가지, 담배 등 주요 가지과 작물에 대발생하여 극심한 피해를 초래한다. 또한, 과채류, 엽채류, 쌈채류 등의 거의 모든 원예작물에 잠재적 위해 요소로 작용할 수 있어 그 피해의 위험성이 매우 크다. 특히, 동일한 작물의 연작 재배 및 연중 재배가 성행하고 있는 최근 농업의 추세에 따라 발생빈도는 점차 증가하고 있으며, 다른 식물병과 달리, 일단 발생하면 세균의 특성상 급속도로 진전하여 재배지 전체로 번지며, 작물 전체가 고사하여 거의 모든 수확물을 수확할 수 없다.Green blight (bacterial wilt) is a disease caused by the Ralstonia solanacearum pathogen, which causes severe damage to major solanaceous crops such as tomatoes, peppers, eggplants, and tobacco. In addition, it can act as a potential hazard to almost all horticultural crops such as fruits and vegetables, leafy vegetables, and spinach, so the risk of damage is very high. In particular, the frequency of occurrence is gradually increasing according to the recent trend of agriculture in which continuous cultivation and year-round cultivation of the same crop are prevalent. Almost all crops cannot be harvested because the whole is dying.

풋마름병을 방제하기 위한 수단으로 화학 약제를 이용할 수 있으나, 국내에 풋마름병 방제 화학 농약으로는 유묘 정식 전에만 처리할 수 있는 다조멧(Dazomet)과 메탐-소듐(Metam-sodium)이 등록되어 있고, 고추 작기 중에는 처리가 불가하다., 토마토 작기 중에 처리 가능한 방제 약제로 옥시테트라사이클린(oxytetracycline)이 등록되어 있으나 고추에 처리하였을 때에는 처리 후 시간이 경과함에 따라, 풋마름병 방제 효과가 빠르게 감소하였을 뿐만 아니라, 저항성 유전인자의 세균 간 수평적 이동을 통한 저항성 발현이 나타났다.Chemical agents can be used as a means to control blight, but Dazomet and Metam-sodium, which can be treated only before planting seedlings, have been registered as chemical pesticides for blight control in Korea. , Treatment is not possible during the cultivation of pepper., Oxytetracycline has been registered as a control agent that can be treated during the cultivation of tomatoes. Rather, resistance was expressed through horizontal movement of resistance genes between bacteria.

식물병 방제를 위해 상기와 같은, 화학농약과 화학비료를 과다하게 사용할 경우, 토양의 오염, 연작장해, 토양양분의 불균형, 병해충 발생 등의 문제가 발생되어, 생산물의 품질저하, 농가의 소득 저하 등의 부작용이 나타나고 있다.If the above chemical pesticides and chemical fertilizers are used excessively for plant disease control, problems such as soil contamination, repeated crop failure, soil nutrient imbalance, and disease and pest occurrence occur, resulting in a decrease in product quality and farmer's income. side effects such as.

이에 따라 본 발명에서는, 생물학적 방법으로 식물의 풋마름병에 대한 방제 효과를 나타내는 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주 및 상기 균주의 배양액 또는 이들 중 적어도 하나를 포함하는 미생물 제제를 제공한다. 상기 식물은 예를 들어, 토마토, 고추, 가지, 담배 등 주요 가지과 작물일 수 있으며, 과채류, 엽채류, 쌈채류 등의 원예작물일 수도 있다. Accordingly, the present invention provides a Bacillus siamensis LES120 strain, a culture solution of the strain, or a microbial agent containing at least one of them, which exhibits a control effect on plant blight by a biological method. The plants may be, for example, major solanaceous crops such as tomatoes, peppers, eggplants, and tobacco, and may also be horticultural crops such as fruits and vegetables, leafy vegetables, and wraps.

상기 풋마름병은 랄스토니아 솔라나세아륨(Ralstonia solanacearum) 병원균 또는 슈도모나스 솔라나세아륨(Pseudomonas solanacearum) 병원균에 의해 발생된다.The foot blight is caused by Ralstonia solanacearum pathogens or Pseudomonas solanacearum pathogens.

본 명세서에서 “배양액”은 세균을 배지에 접종하고 일정시간 배양하여 얻은 결과물로서, 본 발명에 따른 세균을 적합한 액체 배지에서 배양한 배양액 자체, 상기 배양액을 여과 또는 원심분리하여 세균을 제거한 여액(여과액 또는 원심분리한 상등액), 상기 배양액을 초음파 처리하거나 상기 배양액에 용해효소(lysozyme)를 처리하여 수득한 세포 파쇄액, 상기 배양액, 여액, 상기 세포 파쇄액 등을 농축한 농축액 등을 포함하나 이에 한정되는 것은 아니다. 또한 상기 생균제 또는 항균용 조성물은 고체배지 배양물, 또는 상기 배양액의 건조물 또는 추출물 등의 배양물을 함유할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니고, 나아가 적합한 부형제 또는 담체(열성유전자를 이형접합의 상태로 가지고 있는 개체)를 추가로 포함할 수도 있다.In the present specification, "culture medium" is a result obtained by inoculating bacteria into a medium and culturing for a certain period of time, the culture medium itself in which the bacteria according to the present invention are cultured in a suitable liquid medium, and the filtrate obtained by filtering or centrifuging the culture medium to remove bacteria (filtration solution or centrifuged supernatant), a cell disruption solution obtained by sonicating the culture solution or treating the culture solution with a lysozyme, and a concentrate obtained by concentrating the culture solution, filtrate, or the cell disruption solution, etc. It is not limited. In addition, the probiotic or antibacterial composition may contain a culture such as a solid medium culture, or a dried product or extract of the culture medium, but is not limited thereto, and further suitable excipients or carriers (recessive gene in a heterozygous state) possessed object) may be additionally included.

본 발명의 미생물 제제는 액상 비료 형태로 제조될 수 있으며 이에 증량제를 첨가하여 가루분말의 형태로 이용하거나 이를 제형화하여 과립화시킬 수도 있다. 그러나 그 제형에 특별히 한정되지는 않으며, 액상, 분상 이외의 환 형태로 제조할 수도 있다.The microbial preparation of the present invention may be prepared in the form of a liquid fertilizer, and may be used in the form of a powder by adding an extender thereto, or may be formulated and granulated. However, the dosage form is not particularly limited, and it may be prepared in a ring form other than liquid or powder.

본 발명은 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주와 상기 균주의 배양액 또는 이들 중 적어도 하나를 포함하는 미생물 제제를 이용하여 식물의 풋마름병을 방제하는 방법을 제공한다.The present invention provides a method for controlling plant blight by using a Bacillus siamensis LES120 strain, a culture solution of the strain, or a microbial agent containing at least one of them.

본 발명에서 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주는 2020년 08월 26일자로 국립농업과학원에 미생물을 기탁하였으며, 수탁 번호로 KACC 81133BP를 부여받았다.In the present invention , Bacillus siamensis LES120 strain was deposited with the National Academy of Agricultural Sciences as of August 26, 2020, and was given KACC 81133BP as an accession number.

상기 균주의 16S rRNA 염기서열은 서열번호 1로 표시된다.The 16S rRNA base sequence of the strain is represented by SEQ ID NO: 1.

도 1은 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주의 16S rRNA 유전자를 이용한 계통유전학적인 분석 결과를 나타낸 것이다.Figure 1 shows the results of phylogenetic analysis using the 16S rRNA gene of Bacillus siamensis LES120 strain.

본 발명의 일 실시예에 있어서, 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP)는 미생물 농약, 종자코팅제, 토양개량제, 퇴비부숙제, 엽면살포제 및 관주살포제 중 적어도 하나의 유효성분으로 이용될 수도 있다.In one embodiment of the present invention, Bacillus siamensis LES120 strain (KACC 81133BP) is used as at least one active ingredient among microbial pesticides, seed coating agents, soil improving agents, compost composting agents, foliar spreading agents, and drenching agents It could be.

바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP)를 이용하여 제조한 미생물 제제는 상기 LES120 균주, 상기 LES120 균주의 배양액 또는 이들의 혼합물에 당해 분야에서 풋마름병균을 방제하는 것으로 사용되는 다른 임의의 성분을 추가로 포함할 수 있다. 그러나 이에 한정되는 것은 아니며, 예를 들어 식물 영양제, 식물 성장 조절제, 식물 성장 자극제, 다른 식물병을 방제할 수 있는 식물병 방제제 등을 더 포함할 수도 있다. 이에 더해, 제초제, 살균제, 살충제, 종자코팅제, 토양개량제, 퇴비부숙제 엽면살포제, 관주살포제, 퇴비, 및 비료 중 적어도 하나 이상을 더 포함할 수도 있다. Bacillus siamensis ( Bacillus siamensis ) The microbial preparation prepared using the LES120 strain (KACC 81133BP) is the LES120 strain, the culture medium of the LES120 strain, or a mixture thereof, any other used to control green blight in the field It may further include the components of. However, it is not limited thereto, and may further include, for example, a plant nutrient, a plant growth regulator, a plant growth stimulant, and a plant disease control agent capable of controlling other plant diseases. In addition, at least one or more of herbicides, fungicides, insecticides, seed coating agents, soil improvers, compost composting agents, foliar spreading agents, drenching agents, compost, and fertilizers may be further included.

상기 식물 성장 조절제에는 유익한 다른 미생물들, 미생물 활성물질 및 유기 비료가 포함될 수 있다. 그러나 이에 한정되는 것은 아니며, 화학비료를 더 포함할 수 있다.The plant growth regulator may include other beneficial microorganisms, microbial activators and organic fertilizers. However, it is not limited thereto, and may further include a chemical fertilizer.

상기 미생물 활성물질에는 효소 전구물질, 미생물 대사물질, 유기산, 탄수화물, 효소, 및 미량원소 중 적어도 하나 이상이 포함될 수 있다. 예를 들면, 미생물 활성물질에는 효모 자가용해질과 같은 가공된 효소 산물, 부식질(지표 및 땅 속에 존재하는 생물 이외의 유기물) 재료들, 해초 추출물, 전분, 아미노산, 그리고 아연, 철, 구리, 망간, 브롬, 몰리브덴과 같은 미량원소 등이 포함될 수 있다. 그러나 상기 미량원소에 한정되는 것은 아니다.The microbial active material may include at least one or more of enzyme precursors, microbial metabolites, organic acids, carbohydrates, enzymes, and trace elements. For example, microbial active substances include processed enzyme products such as yeast autolysates, humic (non-terrestrial and subsurface organic matter) materials, seaweed extracts, starch, amino acids, and zinc, iron, copper, manganese, Trace elements such as bromine and molybdenum may be included. However, it is not limited to the trace elements.

상기 식물 성장 조절제 또는 식물 성장 자극제는 기존에 식물 생육을 증진시키는 것으로 알려진 바실러스 속(Bacillus spp.), 아조토박터 속(Azotobacter spp.), 트리코데르마 속(Trichoderma spp.), 및 사카로미세스 속(Saccharomyces spp.) 균주 중 적어도 하나 이상이 포함될 수 있다. 그러나 상기 미생물 종에 한정되는 것은 아니며, 스트렙토마이세스 속(Streptomyces sp.), 리조비윰 속(Rhizobium sp.), 슈도모나스 속(Pseudomonas sp.) 균주를 더 포함할 수도 있다.The plant growth regulator or plant growth stimulant is a Bacillus spp., Azotobacter spp., Trichoderma spp., and Saccharomyces, known to promote plant growth. Genus ( Saccharomyces spp.) At least one or more strains may be included. However, it is not limited to the microbial species, Streptomyces genus ( Streptomyces sp . ), Rhizobium genus ( Rhizobium sp . ), Pseudomonas genus ( Pseudomonas sp . ) It may further include strains.

유익한 다른 미생물들, 미생물 활성물질 그리고 유기 비료는 상기에서 설명된 것과 동일할 수 있다. 화학비료에는 식물 생육을 지원하기 위하여 질소, 인, 및 칼륨 영양소를 제공할 수 있는 다양한 화학물질이 포함될 수 있다. 예를 들면, 화학비료에는 요소, 인산칼슘, 인산칼륨 및 혼합형 질소-인산-칼륨(N-P-K) 비료가 포함될 수도 있다. 그러나 이에 한정되는 것은 아니며, 상기 화학비료에는 해당분야에 공지된 다른 재료(탄소, 수소, 산소, 유황, 석회, 고토, 붕소, 철, 망간, 아연, 동, 몰리브덴, 염소 등)도 포함될 수 있다.Other beneficial microorganisms, microbial activators and organic fertilizers may be the same as described above. Chemical fertilizers can include a variety of chemicals that can provide nitrogen, phosphorus, and potassium nutrients to support plant growth. For example, chemical fertilizers may include urea, calcium phosphate, potassium phosphate and mixed nitrogen-phosphate-potassium (N-P-K) fertilizers. However, it is not limited thereto, and the chemical fertilizer may also include other materials known in the field (carbon, hydrogen, oxygen, sulfur, lime, goto, boron, iron, manganese, zinc, copper, molybdenum, chlorine, etc.) .

이하, 실험예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실험예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실험예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through experimental examples. These experimental examples are only for exemplifying the present invention, and it will be apparent to those skilled in the art that the scope of the present invention is not to be construed as being limited by these experimental examples.

<실험예 1> 균주 분리 및 배양방법<Experimental Example 1> Strain isolation and culture method

곰취(Gomchiw, Ligularia fischeri) 근권 토양으로부터 미생물을 분리하기 위해 근권 토양 3 g을 멸균수 27 ml에 넣고 28℃에서 180 rpm으로 30분 간 진탕 처리한 후 1 ml을 취하여 멸균수 9 ml에 현탁하였다. 뿌리로부터 미생물을 분리하기 위해, 곰취 뿌리를 표면살균한 뒤 멸균한 막자사발로 파쇄하였고 뿌리 1 g을 취하여 멸균수 9 ml에 현탁하였다. 근권토양 및 뿌리현탁액은 각각 단계 희석하여 TSA(Tryptic Soybean Agar) 배지와 NA(Nutrient Agar) 배지에 도말하여 28℃에서 48시간 동안 배양 후 색과 형태가 다른 단일 콜로니를 순수 분리하였고, 20% 글리세롤(glycerol)에 넣어 -70℃에 보관하며 실험에 이용하였다.To separate microorganisms from Gomchiw, Ligularia fischeri rhizosphere soil, 3 g of rhizosphere soil was added to 27 ml of sterilized water, shaken at 28 ° C. at 180 rpm for 30 minutes, and 1 ml was taken and suspended in 9 ml of sterilized water. . In order to isolate microorganisms from the roots, the roots of bear sting were surface sterilized and then crushed with a sterilized mortar and pestle, and 1 g of the root was suspended in 9 ml of sterile water. The rhizosphere soil and root suspension were diluted in stages, spread on TSA (Tryptic Soybean Agar) medium and NA (Nutrient Agar) medium, and cultured at 28 ° C for 48 hours. (glycerol) and stored at -70 ° C and used for experiments.

분리된 상기 균주는 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주이며, 서열번호 1로 표시되는 16S rRNA 염기서열을 갖는다. The isolated strain is Bacillus siamensis LES120 strain, and has a 16S rRNA nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 1.

도 1은 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주의 16S rRNA 유전자를 이용한 계통유전학적인 분석 결과를 나타낸 것이다.Figure 1 shows the results of phylogenetic analysis using the 16S rRNA gene of Bacillus siamensis LES120 strain.

도 2는 곰취(Ligularia fischeri)의 근권(Rhizosphere) 및 내권(Endosphere)에서 분리된 박테리아를 각각 TSA 배지 및 NA 배지에서 배양한 균주의 양(CFU/g)을 나타낸 그래프이다.Figure 2 is a graph showing the amount (CFU / g) of strains of bacteria isolated from the rhizosphere and endosphere of Ligularia fischeri cultured in TSA medium and NA medium, respectively.

근권(Rhizosphere)에서 NA 배지를 이용하여 배양한 균주는 3.7 X 106 CFU/g이고, 근권(Rhizosphere)에서 TSA 배지를 이용하여 배양한 균주는 6.8 X 106 CFU/g이다. 내권(Endosphere)에서 NA 배지를 이용하여 배양한 균주는 1.6 X 104 CFU/g이고, 내권(Endosphere)에서 TSA 배지를 이용하여 배양한 균주는 3.7 X 104 CFU/g이다.The strain cultured in rhizosphere using NA medium is 3.7 X 10 6 CFU/g, and the strain cultured in rhizosphere using TSA medium is 6.8 X 10 6 CFU/g. The strain cultured using the NA medium in the endosphere is 1.6 X 10 4 CFU/g, and the strain cultured in the endosphere using the TSA medium is 3.7 X 10 4 CFU/g.

상기 균주들 중 풋마름병균에 대한 방제효과가 가장 우수한 균주는 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주임을 확인하여, LES120 균주를 최종 선발하였다.Among the above strains, it was confirmed that the strain having the most excellent control effect against green blight was Bacillus siamensis LES120 strain, and the LES120 strain was finally selected.

상기 LES120 균주는 서열번호 1로 표시되는 16S rRNA 염기서열을 갖는다. The LES120 strain has a 16S rRNA nucleotide sequence represented by SEQ ID NO: 1.

<실험예 2> 분리 균주의 역병균에 대한 길항력 검정<Experimental Example 2> Test of antagonistic ability of the isolated strain against the reverse pathogen

분리균주의 파이토프토라 캡사이시(Phytophthora capsici)와 파이토프토라 드레취슬레리(Phytophthora drechsleri)에 대한 길항력을 3회에 걸쳐 검정하였다. PDA(Potato Dextrose Agar) 배지의 중앙으로부터 35 ㎜ 거리에 분리 균주를 획선 도말하여 25℃에서 24시간 동안 배양하였고, 대조구에는 멸균수를 이용하였다. 파이토프토라 캡사이시(P. capsici)와 파이토프토라 드레취슬레리(P. drechsleri) 균총을 각각 PDA 배지의 정 가운데에 치상하여, 25℃에서 5일 간 배양한 후 저지대(Inhibition zone)의 크기를 측정하여 항균력이 우수한 미생물을 선별하였다.The antagonism of the isolates against Phytophthora capsici and Phytophthora drechsleri was tested three times. The isolated strain was smeared at a distance of 35 mm from the center of a PDA (Potato Dextrose Agar) medium and cultured at 25° C. for 24 hours, and sterile water was used for the control. Phytophthora capsaishi ( P. capsici ) and Phytophthora drechsleri ( P. drechsleri ) colonies were placed in the center of each PDA medium, incubated at 25 ° C. for 5 days, and then incubated in the low zone (Inhibition zone) Microorganisms with excellent antibacterial activity were selected by measuring the size of.

표 1은 이중 대치배양 분석법을 이용하여 다양한 작물 (고추 식물 포함)에서 뿌리 썩음병을 유발하는 파이토프토라 캡사이시(Phytophthora capsici)에 대한 LES120 균주의 항진균 활성을 나타낸 표이다.Table 1 is a table showing the antifungal activity of the LES120 strain against Phytophthora capsici , which causes root rot in various crops (including pepper plants) using a double replacement culture assay.

TreatmentTreatment Mycelial growth inhibition rate(%)*Mycelial growth inhibition rate (%)* Mean of mycelial growth inhibition rate (%)Mean of mycelial growth inhibition rate (%) Standard errorstandard error 1st trial 1st trial 2nd trial 2nd trial 3rd trial 3rd trial LES120LES120 27.027.0 31.031.0 28.728.7 28.928.9 0.950.95 Control**Control** 0.00.0 0.00.0 0.00.0 0.00.0 0.00.0

*(대조구 균체 직경 (mm) - 처리구 균체 직경 (mm)) / 대조구 균체 직경 (mm))X100 **대조구는 멸균 증류수로 처리된다. 대조구의 균체 직경은 68.4mm이다.* (Control cell diameter (mm) - Treatment cell diameter (mm)) / Control cell diameter (mm)) X100 **Control is treated with sterile distilled water. The cell diameter of the control is 68.4 mm.

표 2는 이중 대치배양 분석법을 이용하여 다양한 작물 (고추 식물 포함)에서 뿌리 썩음병을 유발하는 파이토프토라 드레취슬레리(Phytophthora drechsleri)에 대한 LES120 균주의 항진균 활성을 나타낸 표이다.Table 2 is a table showing the antifungal activity of the LES120 strain against Phytophthora drechsleri that causes root rot in various crops (including pepper plants) using a double replacement culture assay.

TreatmentTreatment Micelial growth inhibition rate(%)*Micelial growth inhibition rate (%)* Mean of mycelial growth inhibition rate (%)Mean of mycelial growth inhibition rate (%) Standard errorstandard error 1st trial 1st trial 2nd trial 2nd trial 3rd trial 3rd trial LES120LES120 31.031.0 30.430.4 33.733.7 31.731.7 0.840.84 Control**Control** 0.00.0 0.00.0 0.00.0 0.00.0 0.00.0

*(대조구 균체 직경 (mm) - 처리구 균체 직경 (mm)) / 대조구 균체 직경 (mm))X100 **대조구는 멸균 증류수로 처리된다. 대조구의 균체 직경은 61.3mm이다.* (Control cell diameter (mm) - Treatment cell diameter (mm)) / Control cell diameter (mm)) X100 **Control is treated with sterile distilled water. The cell diameter of the control is 61.3 mm.

<실험예 3> 최종 선발된 LES120 균주의 배양액 처리에 의한 풋마름병균 방제 효과 검정<Experimental Example 3> Examination of the effect of controlling green blight by treatment of the culture solution of the finally selected LES120 strain

바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주의 풋마름병균(Ralstonia solanacearum)에 대한 방제 효과를 검정하기 위하여, 온실내에서 고추 유묘를 이용하여 생물 검정을 수행하였다. Bacillus siamensis ( Bacillus siamensis ) Green blight of LES120 strain ( Ralstonia solanacearum ) In order to test the control effect on, a bioassay was performed using pepper seedlings in a greenhouse.

먼저, LES120 균주를 TSA 배지에 획선 도말하여 28℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이후, 배양된 LES120 균주의 단일 콜로니를 TSB(Tripic Soy Broth)배지에 접종하여 28℃에서 150rpm으로 48시간 동안 배양한 후, 배양액의 농도를 1.0X108 CFU/mL로 조절하였다(OD600=0.25).First, the LES120 strain was smeared on TSA medium and cultured at 28° C. for 24 hours. Thereafter, a single colony of the cultured LES120 strain was inoculated into TSB (Tripic Soy Broth) medium and cultured at 28° C. at 150 rpm for 48 hours, and then the concentration of the culture medium was adjusted to 1.0X10 8 CFU/mL (OD 600 =0.25 ).

고추 종자(Super manitta, Nongwoo-bio, Korea)는 2시간 동안 흐르는 수돗물로 수세하고, 표면의 미생물을 제거하기 위해 1% 차아염소산나트륨과 70% 에탄올을 이용하여 표면을 살균한 후, 직경 10cm 포트에 상토(Green soil, Seoul Bio, Korea)를 담고 파종하였다(n=15). Pepper seeds (Super manitta, Nongwoo-bio, Korea) were washed with flowing tap water for 2 hours, sterilized the surface using 1% sodium hypochlorite and 70% ethanol to remove microorganisms on the surface, and then potted with a diameter of 10 cm. Top soil (Green soil, Seoul Bio, Korea) was added and seeded (n = 15).

파종 4주 후, 본엽이 7 내지 8매 전개된 고추 유묘에 분리 미생물 LES120 균주의 배양액을 50mL 관주 처리하고 7일이 경과된 후, 풋마름병균인 랄스토니아 솔라나세아륨(Ralstonia solanacearum)을 1.0X108 CFU/mL(OD600=0.15) 농도로 주당 20mL 관주처리하였다. 랄스토니아 솔라나세아륨 균주를 처리하고 5주 경과 후, 이병주율(%)과 초장을 조사하였다.After 4 weeks of sowing, pepper seedlings with 7 to 8 true leaves were treated with 50mL of the culture solution of the isolated microorganism LES120 strain, and after 7 days, the green blight Ralstonia solanacearum ( Ralstonia solanacearum ) 20mL per week at a concentration of 1.0X10 8 CFU/mL (OD 600 =0.15) was treated with irrigation. After 5 weeks of treatment with the Ralstonia solanacearum strain, disease incidence (%) and plant height were investigated.

도 3a는 고추 유묘에 대한 LES120 균주의 배양액의 풋마름병 방제 효과를 시험한 고추 유묘를 나타낸 것이고, 도 3b는 고추 유묘에 대한 IC(Inoculated control)의 풋마름병 방제 효과를 시험한 고추 유묘를 나타낸 것이다.Figure 3a shows pepper seedlings tested for the green blight control effect of the LES120 strain culture medium on pepper seedlings, Figure 3b shows the pepper seedlings tested for the green blight control effect of IC (Inoculated Control) on pepper seedlings .

풋마름병 방제를 위해 LES 균주의 배양액을 처리한 도 3a의 고추 유묘의 경우, 풋마름병이 거의 발생하지 않은 반면, 풋마름병 방제를 위해 균주를 처리하지 않고 병원균만 접종한(IC(Inoculated control))경우, 풋마름병 방제 효과가 현저히 떨어졌다. 도 3b의 고추 유묘의 경우, 고추 유묘의 지제부 줄기의 내부가 갈색을 나타내어, 도 3a의 고추 유묘에 비해 풋마름병 방제 효과가 현저히 떨어졌다. In the case of the pepper seedlings of FIG. 3a treated with the culture solution of the LES strain to control blight, blight rarely occurred, whereas only pathogens were inoculated without treating the strain for blight control (IC (Inoculated Control)) In this case, the effect of controlling green blight was significantly reduced. In the case of the pepper seedlings of FIG. 3b, the inside of the stem of the pepper seedlings was brown, and the green blight control effect was significantly lower than that of the pepper seedlings of FIG. 3a.

도 4는 고추 유묘에 SEL5, SEL1, SEL3, YP2, HC37, SB19, CeR16-2, RIR15, ObRS-5, ObRS-6, ObRS-15, HLS-9, ObBS-4, GJ6-4, LES4, LES37, LES58, LES61, LES88, LES93, LES118-1, LES118-2, LES120 균주의 배양액을 처리하거나, 무처리한 경우(IC(Inoculated control; 병원균 접종 대조구) 및 UT(Untreated control; 병원균 비접종 대조구))의 이병주율(Diseased plant)을 나타낸 표이다.4 is SEL5, SEL1, SEL3, YP2, HC37, SB19, CeR16-2, RIR15, ObRS-5, ObRS-6, ObRS-15, HLS-9, ObBS-4, GJ6-4, LES4, When cultures of LES37, LES58, LES61, LES88, LES93, LES118-1, LES118-2, LES120 strains were treated or untreated (IC (Inoculated control; pathogen inoculation control) and UT (Untreated control; pathogen uninoculated control) )) is a table showing the diseased plant rate.

시험은 2회 반복하여 수행되었다. 첫 번째 시도에서, 고추 유묘에 LES120 균주의 배양액을 처리하였을 때, 0%의 풋마름병 이병주율을 나타내었다. IC(Inoculated control)는 63.3%의 이병주율을 나타내며, UT(Untreated control)는 이병주율을 나타내지 않았다. 고추 유묘에 LES120 균주의 배양액을 처리했을 때 풋마름병 방제 효과가 100%로 나타났다. 두 번째 시도에서, 고추 유묘에 LES120 균주의 배양액을 처리하였을 때, 20.0%의 풋마름병 이병주율을 나타내었다. IC(Inoculated control)는 100%의 이병주율을 나타내며, UT(Untreated control)는 이병주율을 나타내지 않았다. 고추 유묘에 LES120 균주의 배양액을 처리했을 때 풋마름병 방제가는 80%로 나타나 유의미한 방제효과를 나타내었다.The test was performed in duplicate. In the first trial, when pepper seedlings were treated with the culture solution of strain LES120, 0% of green blight disease was observed. The IC (Inoculated control) showed a morbidity rate of 63.3%, and the UT (Untreated control) showed no morbidity rate. When pepper seedlings were treated with the culture solution of strain LES120, the effect of controlling green blight was 100%. In the second trial, when seedlings of pepper were treated with the culture solution of strain LES120, a 20.0% rate of blight was observed. IC (Inoculated control) showed 100% morbidity rate, and UT (Untreated control) showed no morbidity rate. When seedlings of pepper were treated with the culture solution of strain LES120, the control effect of green blight was 80%, indicating a significant control effect.

도 5는 고추 유묘에 LES120 균주의 배양액, 세레나데(Serenade)를 처리하거나, 무처리한 경우(IC(Inoculated control; 접종 대조구) 및 UT(Untreated control; 비접종 대조구))의 초장(Plant height)을 나타낸 표이다.Figure 5 shows the plant height of pepper seedlings treated with LES120 strain culture, Serenade, or untreated (IC (Inoculated control; inoculated control) and UT (Untreated control; non-inoculated control)) is the table shown.

시험은 2회 반복하여 수행되었다. 첫 번째 실험의 경우, 고추 유묘에 LES120 균주의 배양액을 처리하였을 때, 24.6cm의 초장을 나타내었다. 세레나데를 처리한 경우 23.6, IC(Inoculated control)의 경우 21.5cm, 및 UT(Untreated control)의 경우 22.3cm의 초장을 나타내어 처리구 간 고추 초장의 차이가 미미하였다.The test was performed in duplicate. In the first experiment, when seedlings of pepper were treated with the culture solution of strain LES120, plant height of 24.6 cm was shown. In the case of serenade treatment, the plant height was 23.6 cm, in the case of IC (Inoculated control), 21.5 cm, and in the case of UT (Untreated control), 22.3 cm.

두 번째 실험의 경우, 고추 유묘에 LES120 균주의 배양액을 처리하였을 때, 33.8cm의 초장을 나타내었다. 세레나데(Serenade)를 처리한 경우 31.6cm, IC(Inoculated control)의 경우 28.4cm, 및 UT(Untreated control)의 경우 29.8cm의 초장을 나타내어 1차 실험과 마찬가지로, 처리구 간 고추 초장의 차이가 미미하였다. 즉 2회 반복 실험을 통해 LES120 균주 처리에 의한 고추 유묘의 초장 변화가 미미하다는 점은, LES120 균주의 처리가 고추의 생육을 억제하는 영향 없이 풋마름병을 효과적으로 방제할 수 있다고 해석될 수 있다. In the second experiment, when seedlings of pepper were treated with the culture solution of strain LES120, plant height of 33.8 cm was shown. In the case of Serenade treatment, the plant height was 31.6 cm, IC (Inoculated control), 28.4 cm, and UT (Untreated control), 29.8 cm. . In other words, the fact that the change in plant height of pepper seedlings by treatment with LES120 strain was insignificant through two repeated experiments can be interpreted as the fact that treatment with LES120 strain can effectively control green blight without inhibiting the growth of pepper.

상기의 본 발명은 바람직한 실험예를 중심으로 살펴보았으며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 본질적 기술 범위 내에서 상기 본 발명의 상세한 설명과 다른 형태의 실시예들을 구현할 수 있을 것이다. 여기서 본 발명의 본질적 기술범위는 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.The above present invention has been examined with a focus on preferred experimental examples, and those skilled in the art can implement embodiments of a different form from the detailed description of the present invention within the essential technical scope of the present invention. You will be able to. Here, the essential technical scope of the present invention is shown in the claims, and all differences within the equivalent range should be construed as being included in the present invention.

국립농업과학원 농업유전자센터National Institute of Agricultural Science Agricultural Genetics Center KACC81133BPKACC81133BP 2020092320200923

<110> REPUBLIC OF KOREA, REPUBLIC OF KOREA <120> Bacillus siamensis LES120 EXHIBITING CONTROL EFFECT AGAINST BACTERIAL WILT <130> FP-2009045-KR <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1347 <212> RNA <213> Unknown <220> <223> Bacillus siamensis LES120 <400> 1 gctgatccgc gattactagc gattccagct tcacgcagtc gagttgcaga ctgcgatccg 60 aactgagaac agatttgtgg gattggctta acctcgcggt ttcgctgccc tttgttctgt 120 ccattgtagc acgtgtgtag cccaggtcat aaggggcatg atgatttgac gtcatcccca 180 ccttcctccg gtttgtcacc ggcagtcacc ttagagtgcc caactgaatg ctggcaacta 240 agatcaaggg ttgcgctcgt tgcgggactt aacccaacat ctcacgacac gagctgacga 300 caaccatgca ccacctgtca ctctgccccc gaaggggacg tcctatctct aggattgtca 360 gaggatgtca agacctggta aggttcttcg cgttgcttcg aattaaacca catgctccac 420 cgcttgtgcg ggcccccgtc aattcctttg agtttcagtc ttgcgaccgt actccccagg 480 cggagtgctt aatgcgttag ctgcagcact aaggggcgga aaccccctaa cacttagcac 540 tcatcgttta cggcgtggac taccagggta tctaatcctg ttcgctcccc acgctttcgc 600 tcctcagcgt cagttacaga ccagagagtc gccttcgcca ctggtgttcc tccacatctc 660 tacgcatttc accgctacac gtggaattcc actctcctct tctgcactca agttccccag 720 tttccaatga ccctccccgg ttgagccggg ggctttcaca tcagacttaa gaaaccgcct 780 gcgagccctt tacgcccaat aattccggac aacgcttgcc acctacgtat taccgcggct 840 gctggcacgt agttagccgt ggctttctgg ttaggtaccg tcaaggtgcc gccctatttg 900 aacggcactt gttcttccct aacaacagag ctttacgatc cgaaaacctt catcactcac 960 gcggcgttgc tccgtcagac tttcgtccat tgcggaagat tccctactgc tgcctcccgt 1020 aggagtctgg gccgtgtctc agtcccagtg tggccgatca ccctctcagg tcggctacgc 1080 atcgtcgcct tggtgagccg ttacctcacc aactagctaa tgcgccgcgg gtccatctgt 1140 aagtggtagc cgaagccacc ttttatgtct gaaccatgcg gttcagacaa ccatccggta 1200 ttagccccgg tttcccggag ttatcccagt cttacaggca ggttacccac gtgttactca 1260 cccgtccgcc gctaacatca gggagcaagc tcccatctgt ccgctcgact tgcatgtatt 1320 aggcacgccg ccagcgttcg tcctgag 1347 <110> REPUBLIC OF KOREA, REPUBLIC OF KOREA <120> Bacillus siamensis LES120 EXHIBITING CONTROL EFFECT AGAINST BACTERIAL WILT <130> FP-2009045-KR <160> 1 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1347 <212> RNA <213> unknown <220> <223> Bacillus siamensis LES120 <400> 1 gctgatccgc gattactagc gattccagct tcacgcagtc gagttgcaga ctgcgatccg 60 aactgagaac agatttgtgg gattggctta acctcgcggt ttcgctgccc tttgttctgt 120 ccattgtagc acgtgtgtag cccaggtcat aaggggcatg atgatttgac gtcatcccca 180 ccttcctccg gtttgtcacc ggcagtcacc ttagagtgcc caactgaatg ctggcaacta 240 agatcaaggg ttgcgctcgt tgcgggactt aacccaacat ctcacgacac gagctgacga 300 caaccatgca ccacctgtca ctctgccccc gaaggggacg tcctatctct aggattgtca 360 gaggatgtca agacctggta aggttcttcg cgttgcttcg aattaaacca catgctccac 420 cgcttgtgcg ggcccccgtc aattcctttg agtttcagtc ttgcgaccgt actccccagg 480 cggagtgctt aatgcgttag ctgcagcact aaggggcgga aaccccctaa cacttagcac 540 tcatcgttta cggcgtggac taccagggta tctaatcctg ttcgctcccc acgctttcgc 600 tcctcagcgt cagttacaga ccagagagtc gccttcgcca ctggtgttcc tccacatctc 660 tacgcatttc accgctacac gtggaattcc actctcctct tctgcactca agttccccag 720 tttccaatga ccctccccgg ttgagccggg ggctttcaca tcagacttaa gaaaccgcct 780 gcgagccctt tacgcccaat aattccggac aacgcttgcc acctacgtat taccgcggct 840 gctggcacgt agttagccgt ggctttctgg ttaggtaccg tcaaggtgcc gccctatttg 900 aacggcactt gttcttccct aacaacagag ctttacgatc cgaaaacctt catcactcac 960 gcggcgttgc tccgtcagac tttcgtccat tgcggaagat tccctactgc tgcctcccgt 1020 aggagtctgg gccgtgtctc agtcccagtg tggccgatca ccctctcagg tcggctacgc 1080 atcgtcgcct tggtgagccg ttacctcacc aactagctaa tgcgccgcgg gtccatctgt 1140 aagtggtagc cgaagccacc ttttatgtct gaaccatgcg gttcagacaa ccatccggta 1200 ttagccccgg tttcccggag ttatcccagt cttacaggca ggttacccac gtgttactca 1260 cccgtccgcc gctaaca gggagcaagc tcccatctgt ccgctcgact tgcatgtatt 1320 aggcacgccg ccagcgttcg tcctgag 1347

Claims (10)

랄스토니아 솔라나세아륨(Ralstonia solanacearum) 병원균으로부터 발생되는 풋마름병 방제용 및 파이토프토라 드레취슬레리(Phytophthora drechsleri) 병원균으로부터 발생되는 뿌리 썩음병 방제용 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP).Ralstonia solanacearum ( Ralstonia solanacearum ) For controlling green blight caused by pathogens and for controlling Phytophthora drechsleri ( Phytophthora drechsleri ) Bacillus siamensis for controlling root rot caused by pathogens Bacillus siamensis LES120 strain ( KACC 81133BP). 삭제delete 제1 항에 있어서,
상기 균주는 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP).
According to claim 1,
The strain is Bacillus siamensis LES120 strain (KACC 81133BP) containing the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1.
제3 항에 있어서,
상기 풋마름병 방제용 대상 식물은 고추, 가지, 및 담배를 포함하는 가지과 작물인 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP).
According to claim 3,
The target plant for controlling green blight is Bacillus siamensis LES120 strain (KACC 81133BP), which is a solanaceous crop including pepper, eggplant, and tobacco.
제4 항에 있어서,
상기 균주는 미생물 농약, 종자코팅제, 토양개량제, 퇴비부숙제, 엽면살포제, 및 관주살포제 중 적어도 하나를 포함하는, 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP).
According to claim 4,
The strain is a microbial pesticide, a seed coating agent, a soil conditioner, a compost composting agent, a foliar spraying agent, and a drenching agent, including at least one of Bacillus siamensis LES120 strain (KACC 81133BP).
랄스토니아 솔라나세아륨(Ralstonia solanacearum) 병원균으로부터 발생되는 풋마름병 방제용 및 파이토프토라 드레취슬레리(Phytophthora drechsleri) 병원균으로부터 발생되는 뿌리 썩음병 방제용 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP), 상기 균주의 포자, 상기 균주의 배양액 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 미생물 제제.Ralstonia solanacearum ( Ralstonia solanacearum ) For controlling green blight caused by pathogens and for controlling Phytophthora drechsleri ( Phytophthora drechsleri ) Bacillus siamensis for controlling root rot caused by pathogens Bacillus siamensis LES120 strain ( KACC 81133BP), spores of the strain, a culture broth of the strain, or a mixture thereof as an active ingredient. 제6 항에 있어서,
상기 미생물 제제는 미생물 농약, 종자코팅제, 토양개량제, 퇴비부숙제, 엽면살포제, 및 관주살포제 중 적어도 하나를 포함하는 미생물 제제.
According to claim 6,
The microbial agent is a microbial agent comprising at least one of a microbial pesticide, a seed coating agent, a soil improving agent, a compost composting agent, a foliar spraying agent, and a drenching agent.
제1 항, 제3 항 내지 제5 항 중 선택된 어느 한 항에 따른 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP)를 준비하는 단계; 및
상기 균주를 TSB(Tryptic Soy Broth) 배지에 접종한 후 20~35℃100~200 rpm 조건하에서 40~50시간동안 배양하는 단계;를 포함하는, 식물의 풋마름병 방제용 미생물 제제의 제조방법.
Preparing a Bacillus siamensis LES120 strain (KACC 81133BP) according to any one of claims 1, 3 to 5; and
After inoculating the strain in TSB (Tryptic Soy Broth) medium, incubating for 40 to 50 hours under 20 ~ 35 ℃ 100 ~ 200 rpm conditions; Method for producing a microbial agent for controlling green blight of plants.
제1 항, 및 제3 항 내지 제5 항 중 선택된 어느 한 항에 따른 바실러스 시아멘시스(Bacillus siamensis) LES120 균주(KACC 81133BP)의 균체, 및 상기 균주를 이용하여 제조한 미생물 제제 중 적어도 하나 이상을 유효성분으로 포함하는, 식물의 풋마름병 방제용 비료.At least one of the cells of the Bacillus siamensis LES120 strain (KACC 81133BP) according to any one of claims 1 and 3 to 5, and a microbial preparation prepared using the strain A fertilizer for controlling plant blight, containing as an active ingredient. 제9 항에 따른 비료를 토양에 관주처리하여 식물의 풋마름병에 대한 내성을 증가시키는 방법.A method for increasing the resistance of plants to green blight by drenching the soil with the fertilizer according to claim 9.
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