KR102508665B1 - 소화율이 개선된 단백질 제제의 제조방법 - Google Patents

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Abstract

소화율이 개선된 단백질 제제의 제조방법이 개시된다. 일 실시예에 따르면 점액성 물질인 뮤신을 유효성분으로 갖는 마를 활용하여, 단백질 제제의 소화력을 증가시키며 나아가 항산화 효과를 높일 수 있다. 또한, 곡물 발효 효소 분말 및 유산균을 함께 처리함에 따라 소화력 및 항산화 효과를 현저히 증가시킬 수 있다.

Description

소화율이 개선된 단백질 제제의 제조방법 {Preparation method for protein preparations with improved digestion}
아래 실시예들은 소화율이 개선된 단백질 제제의 제조방법 기술에 관한 것이다.
식물성 단백질인 완두단백파우더는 낮은 칼로리를 갖는다는 장점이 있지만, 시판되는 동물성 단백질 대비 단백질 소화율이 나쁘고 파우더 내에 필수아미노산이 함유되지 않아 아미노산 합성에 있어서 불리하다. 이를 보완하기 위해 식물성 단백질에는 함유되지 않으며 유용한 생리활성 물질들이 함유되어 있는 산양유나 콜라젠, 초유단백분말 등을 추가로 혼합한 단백질 제제 등이 개발되고 있다.
관련하여, 소의 초유(colostrum)는 일반적으로 분만 후 3일까지 모체의 유선을 통해 분비되는 유즙 성분으로 알려져 있다. 정상유에 비해 성분의 차이가 현저하여 현재 유제품으로 이용이 잘 되지 않고 있다. 하지만 새끼가 태어나 외부로부터 여러 가지 감염물질에 노출되었을 때 이를 제거하여 새끼의 개체를 보호하는데 필요한 다양한 생리활성 물질이 함유되어 있고 기능 또한 다양한 것으로 밝혀졌다. 소의 초유에는 정상유와는 달리 단백질의 함량이 높을 뿐만 아니라 유청 단백질의 함량이 카세인보다 높은 특징이 있다. 그 이유는 유청 단백질에는 다량의 면역글로불린이 함유되어 있기 때문이다. 면역글로불린은 새끼에게 수동면역기능을 제공하여 출생초기 동안 능동면역기능이 성숙하기 전까지 외부의 감염에 대한 저항성을 높여주는 역할을 한다. 초유를 섭취하면 면역력을 증가시킬 수 있는 것으로 알려지고 있으며 초유는 유아 또는 성인의 면역증강 소재로 이용되고 있으나, 초유 중에는 면역증강 성분뿐만 아니라 면역억제 성분도 함께 함유되어 있어, 면역증강 및 억제 성분에 의해 면역조절 기능을 가지고 있다.
이러한 추가적인 제제를 단순 혼합하는 경우에는 여전히 소화율이 떨어질 뿐만 아니라 단백질이 나타내는 산화기능으로 인해 흡수가 용이하지 않거나 산화에 의한 부작용이 나타날 가능성이 문제되고 있다.
한편, 마(Dioscorea opposita Thunb)는 마과(Dioscoreaceae)에 속하는 여러해살이 덩굴식물로 중국 원산이다. 산과 들에서 자라며, 덩이뿌리는 크고 편평한 공 모양이고 줄기는 긴 덩굴로 가지가 갈라진다. 잎은 어긋나고 잎자루는 길며 삼각형 또는 심장형으로 길이와 나비가 각각 4~13㎝이다. 잎 가장자리가 밋밋하고 갈라지지 않으며 털이 없고 주아(珠芽)가 잎겨드랑이에서 생긴다. 주아는 지름 2㎝ 정도이며 겉은 노란빛을 띤 갈색이다. 꽃은 단성화로 6~7월에 핀다. 수꽃 이삭은 잎겨드랑이에 1~3개씩 달리고 꽃대가 짧으며 작은 꽃대는 없고 꽃이 다소 많이 달린다. 화피갈래조각은 6개로 줄 모양 바소꼴이고 흰색이며 수술은 6개이다. 암꽃 이삭은 밑으로 처지며 작은 꽃대가 없는 꽃이 드문드문 달린다. 덩이뿌리를 식용하거나 강장제 또는 지사제로 사용한다. 한국 각지에서 재배한다.
마의 주요 성분으로 알려진 뮤신(Mucin)은 주로 동물계에 분포하는 점액질로 당단백체의 일종으로 구조는 커다란 코어 단백질(core protein)의 펩티드에 당쇄가 연결되어 있는 형태이며(David J. et al., Biochem. J, 316, 967-975, 1996), 그 pH에 따라 acid mucin, neutral mucin 등으로 분류되고, 인간의 침, 위점막 분비액, 달팽이 점액질 등이 뮤신으로 불리운다.
이러한 상황에서, 본 발명자는 단백질 제제에 뮤신을 포함하는 마를 혼합 및 가공 처리함으로써 소화율을 높이고자 하였으며, 이러한 경우 단백질의 환원이 증대되며 항산화 효과가 나타날 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
등록특허공보 제10-2206519호
실시예들은 단백질 제제에 뮤신을 유효성분으로 갖는 마를 혼합 및 가공처리 하여 소화율을 높이는 것에 있다. 나아가, 실시예들은 단백질의 환원이 증대되고 항산화 효과를 가질 수 있는 단백질 제제를 제공하는 것에 있다.
상기 과제를 해결하기 위한 하나의 양태로서, 본 발명은
완두단백분말, 산양유 단백분말, 콜라젠, 초유단백분말, 마 분말, 및 증류수를 혼합하고 교반하여 단백질 용액을 제조하는 제1단계; 상기 제1단계에 따른 단백질 용액에 곡물발효 효소 분말을 첨가하고 교반하여 단백질 용액을 제조하는 제2단계; 및 상기 제2단계에 따른 단백질 용액에 유산균 처리하고 교반하여 단백질 용액을 발효하는 제3단계를 포함하는, 소화율이 개선된 단백질 제제의 제조방법을 제공한다.
일 실시예에 따르면, 완두단백분말 18 내지 22 중량부, 산양유 단백분말 4.5 내지 5.5 중량부, 콜라젠 1.8 내지 2.2 중량부, 초유단백분말 0.9 내지 1.1 중량부, 마 분말 0.9 내지 1.1 중량부, 및 증류수 67 내지 75 중량부를 혼합하고 교반하여 단백질 용액을 제조하는 제1단계; 상기 제1단계에 따른 단백질 용액 100 중량부에 곡물발효 효소 분말 0.9 내지 1.1 중량부를 첨가하고 교반하여 단백질 용액을 제조하는 제2단계; 및 상기 제2단계에 따른 단백질 용액 100 중량부에 유산균 0.9 내지 1.1 중량부를 처리하고 교반하여 단백질 용액을 발효하는 제3단계를 포함할 수 있다.
일 실시예에 따르면, 상기 곡물발효 효소 분말은 현미, 보리, 통밀, 검정콩, 팥, 조, 수수, 귀리, 메밀, 호밀, 옥수수, 율무, 대두, 감자, 및 고구마가 혼합된 곡물의 효소인 것으로, α-아밀라아제가 200,000 unit/g 이상 프로테아제가 300unit/g이상 포함되는 것일 수 있다.
일 실시예에 따르면, 상기 유산균은 L.plantarum, L.paracasei, Bi.longum, L.rhamnosus, Bi.infantis, Leu.citreum, S.thermophilus, L.casei, Bi.breve, Bi.animalis ssp.lactis, Bi.bifidum, L.acidophilus, L.reuteri, L.bulgaricus, L..fermentum, L.gasseri, L.salivarius, L.helveticus, 및 Lc.lactis가 함유된 혼합유산균인 것일 수 있다.
일 실시예에 따르면, 완두단백분말 18 내지 22 중량부, 산양유 단백분말 4.5 내지 5.5 중량부, 콜라젠 1.8 내지 2.2 중량부, 초유단백분말 0.9 내지 1.1 중량부, 마 분말 0.9 내지 1.1 중량부, 및 증류수 67 내지 75 중량부를 15 내지 25℃에서 20 내지 40분간 혼합 및 교반한 후, 75 내지 85℃에서 30분 내지 90분간 교반하여 단백질 용액을 제조하는 제1단계; 상기 제1단계에 따른 단백질 용액 100 중량부에 곡물발효 효소 분말 0.9 내지 1.1 중량부를 첨가하고 36 내지 38℃에서 90분 내지 150분간 교반하여 단백질 용액을 제조하는 제2단계; 및 상기 제2단계에 따른 단백질 용액 100 중량부에 유산균 0.9 내지 1.1 중량부를 처리하고 36 내지 38℃에서 18 내지 30시간 교반하여 단백질 용액을 발효하는 제3단계를 포함하는 것일 수 있다.
일실시예에 따른 장치는 하드웨어와 결합되어 상술한 방법들 중 어느 하나의 항의 방법을 실행시키기 위하여 매체에 저장된 컴퓨터 프로그램에 의해 제어될 수 있다.
실시예들은 점액성 물질인 뮤신을 유효성분으로 갖는 마를 활용하여 단백질 제제의 소화력을 증가시키며 나아가 항산화 효과를 높일 수 있다. 또한, 곡물 발효 효소 분말 및 유산균을 함께 처리함에 따라 소화력 및 항산화 효과를 현저히 증가시킬 수 있다.
이하에서, 첨부된 도면을 참조하여 실시예들을 상세하게 설명한다. 그러나, 실시예들에는 다양한 변경이 가해질 수 있어서 특허출원의 권리 범위가 이러한 실시예들에 의해 제한되거나 한정되는 것은 아니다. 실시예들에 대한 모든 변경, 균등물 내지 대체물이 권리 범위에 포함되는 것으로 이해되어야 한다.
실시예들에 대한 특정한 구조적 또는 기능적 설명들은 단지 예시를 위한 목적으로 개시된 것으로서, 다양한 형태로 변경되어 실시될 수 있다. 따라서, 실시예들은 특정한 개시형태로 한정되는 것이 아니며, 본 명세서의 범위는 기술적 사상에 포함되는 변경, 균등물, 또는 대체물을 포함한다.
제1 또는 제2 등의 용어를 다양한 구성요소들을 설명하는데 사용될 수 있지만, 이런 용어들은 하나의 구성요소를 다른 구성요소로부터 구별하는 목적으로만 해석되어야 한다. 예를 들어, 제1 구성요소는 제2 구성요소로 명명될 수 있고, 유사하게 제2 구성요소는 제1 구성요소로도 명명될 수 있다.
어떤 구성요소가 다른 구성요소에 "연결되어" 있다고 언급된 때에는, 그 다른 구성요소에 직접적으로 연결되어 있거나 또는 접속되어 있을 수도 있지만, 중간에 다른 구성요소가 존재할 수도 있다고 이해되어야 할 것이다.
실시예에서 사용한 용어는 단지 설명을 목적으로 사용된 것으로, 한정하려는 의도로 해석되어서는 안된다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 명세서에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서 상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 실시예가 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 첨부되는 도면과 함께 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
본 발명의 실시예들에서, 별도로 다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 발명의 실시예에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
본 발명의 실시예를 설명하기 위한 도면에 개시된 형상, 크기, 비율, 각도, 개수 등은 예시적인 것이므로 본 발명이 도시된 사항에 한정되는 것은 아니다. 또한, 본 발명을 설명함에 있어서, 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명은 생략한다. 본 명세서 상에서 언급된 '포함한다', '갖는다', '이루어진다' 등이 사용되는 경우 '~만'이 사용되지 않는 이상 다른 부분이 추가될 수 있다. 구성 요소를 단수로 표현한 경우에 특별히 명시적인 기재 사항이 없는 한 복수를 포함하는 경우를 포함한다.
구성 요소를 해석함에 있어서, 별도의 명시적 기재가 없더라도 오차 범위를 포함하는 것으로 해석한다.
도면에서 나타난 각 구성의 크기 및 두께는 설명의 편의를 위해 도시된 것이며, 본 발명이 도시된 구성의 크기 및 두께에 반드시 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 여러 실시예들의 각각 특징들이 부분적으로 또는 전체적으로 서로 결합 또는 조합 가능하며, 당업자가 충분히 이해할 수 있듯이 기술적으로 다양한 연동 및 구동이 가능하며, 각 실시예들이 서로에 대하여 독립적으로 실시 가능할 수도 있고 연관 관계로 함께 실시 가능할 수도 있다.
이하, 구체적인 실시예와 비교예를 통하여 본 발명의 구성 및 그에 따른 효과를 보다 상세히 설명하고자 한다. 그러나, 본 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 단백질 제제의 제조방법
가. 원재료의 입수
마 분말(제조원: 농업회사법인 (유)마 누룽지 서동팜, 원산지:국내산, 익산시), 완두단백분말 (제조원: AGT FOODS, 원산지: 미국), 산양유단백분말 (제조원: Ausnutria Dairy Ingredients, 원산지: 네덜란드산), 초유단백분말 (제조원: Keytone Enterprises, 원산지: 뉴질랜드 산), 피쉬콜라겐 (제조원: LAPI GELANTINE S.p.A, 원산지: 이탈리아산), 곡물발효 효소 분말 (제조원: 현대바이오랜드, 15곡혼합분[현미(국산) 46%, 보리(국산) 15%, 통밀(국산) 15%, 검정콩, 팥, 조, 수수, 귀리, 메밀, 호밀, 옥수수, 율무, 대두, 감자, 고구마] 95%), 및 유산균(제조원: ㈜메디오젠, 1.0x 108CFU/g 이상, 생유산균 19종 10% 함유 (L.plantarum, L.paracasei, Bi.longum, L.rhamnosus, Bi.infantis, Leu.citreum, S.thermophilus, L.casei, Bi.breve, Bi.animalis ssp.lactis, Bi.bifidum, L.acidophilus, L.reuteri, L.bulgaricus, L..fermentum, L.gasseri, L.salivarius, L.helveticus, Lc.lactis)을 준비하였다. 상기 곡물발효효소는 α-아밀라아제가 200,000 unit/g 이상 프로테아제가 300unit/g이상 포함된다.
나. 마 분말이 혼합된 단백질 용액 제조단계
완두단백분말 20 중량부, 산양유 단백분말 5 중량부, 피쉬콜라겐 2 중량부, 초유단백분말 1 중량부에 마 분말 1 중량부를 혼합한 후, 증류수 71 중량부를 첨가하였다. 상기 혼합물을 1,000rpm, 20℃에서 30분 동안 전분산하였고, 그 후 80mesh 표준체를 이용하여 찌꺼기 및 불순물을 걸러내었다. 이후 2,000rpm, 80℃에서 1시간 동안 교반하고 30℃로 냉각하여 단백질 용액을 제조하였다.
다. 곡물발효 효소 처리된 단백질 용액 제조단계
상기 단백질 용액 100 중량부 기준으로 곡물발효 효소 분말 1 중량부를 첨가한 후 37℃에서 800rpm에서 2시간 교반하였다.
라. 유산균 발효 처리된 단백질 용액 제조단계
상기 곡물발효 효소 처리된 단백질용액 100 중량부 기준으로 상기 혼합 유산균 1중량부를 첨가한 후 37℃에서 500rpm으로 24시간 교반하였다.
마. 동결건조 및 단백질 제제의 준비
상기 단백질용액은 동결건조하여 분쇄기로 분쇄 후 0.08mm 체를 통과시켜, 단백질 제제로 준비하였다.
비교예 1. 실시예 1에서 나. 단계에서 마 분말을 첨가하지 않은 것만 제외하고 동일하게 제조하였다.
비교예 2. 실시예 1에서 다. 단계를 생략한 것만 제외하고 동일하게 제조하였다.
비교예 3. 실시예 1에서 라. 단계를 생략한 것만 제외하고 동일하게 제조하였다.
실험예 1. 단백질 이화학적 특성 분석
실시예 및 비교예의 단백질의 이화학적 특성을 분석하기 위해, 조단백질과 수용성 단백질을 분석하였다. 조단백질 함량은 micro-Kjeldahl 방식을 적용한 자동 분해기 및 자동 단백질 분석기(Kjeltec 2400 AUT, Foss Tecator, Mulgrave, Austrailia)를 이용하여 분석하였다. 또한, 수용성 단백질 함량분석을 위하여, 헥산으로 3번 탈지한 시료에 증류수를 넣고 교반하여 NaOH로 pH 8.0을 맞춰준 다음, homogenizer tool rotor(HT1010, DAIHAN Scientific, Seoul, Korea)와 homogenizer(HG-15A, DAIHAN Scientific, Seoul, Korea)로 균질하였다. 상기 균질한 시료를 5000g에서 20분간 원심분리(HK-CR22N, NuAire, Plymouth, USA) 후, Whatman filter paper 1번으로 여과하였다. 이후 여액을 BCA assay의 방법을 적용한 BCA Protein Assay Kit(23225, Thermo scientific, Rockford, USA)를 이용하여 수용성 단백질 함량을 정량하였다. 참고로, 표준물질로는 키트에 포함된 bovine serum albumin을 사용하였다.
Protein (%) Soluble Protein (%)
실시예 1 25.06 11.76
비교예 1 24.53 6.82
비교예 2 26.23 4.90
비교예 3 24.81 6.13
그 결과 표 1에서와 같이 실시예 및 비교예의 조단백질 함량을 유사하게 나타났으나, 수용성 단백질의 함량에서 마 분말, 곡물분해효소, 및 유산균이 모두 처리된 실시예 1이 현저한 효과를 나타냄을 알 수 있었다. 이를 통해 상기 세가지 처리의 시너지 효과가 있음을 알 수 있었다.
실험예 2. 단백질 소화율 측정
실시예 및 비교예의 단백질 소화율(%) 측정을 위해 ninhydrin assay의 방법에 따라 Megazyme Kit(Prtein Digestibility Assay Kit, Bray Co., Wicklow, Ireland)를 이용하여 분석하였다.
구체적으로, 동결건조한 시료 0.5g에 pepsin, chymotrypsin, trypsin을 가하여 37℃에서 교반하여 단백질 소화 후, TCA buffer(Sigma-Aldrich Co.)로 소화되지 않은 단백질을 침전시킨 후 상등액을 취하여 ninhydrin solution과 35분간 70℃에서 교반하여 발색시키고, microplate reader(Varioskan LUX, Thermo Scientific Co., Casper, Massachusetts, USA)를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하여 소화된 단백질의 농도(mM)를 도출하였다. 표준으로 0.005 mM ~ 1 mM의 L-Glycine을 사용하여 시료내 단백질 소화량을 mg L-glycine/g sample로 변환 후 시료 내 총 단백질 함량에 대한 소화된 단백질 함량의 비율(%)을 하기의 계산식으로 구하였다.
[계산식]
단백질 소화율(%) = 소화된 단백질 함량 (mg/g sample)/시료 내 조단백질 함량(mg/g sample) × 100
단백질 소화율 (%)
실시예 1 87.21
비교예 1 64.51
비교예 2 59.92
비교예 3 67.10
그 결과 표 2에서와 같이, 마 분말, 곡물분해효소, 및 유산균이 모두 처리된 실시예 1이 현저히 높은 소화율을 나타냄을 알 수 있었다. 이를 통해 상기 세가지 처리의 시너지 효과가 있음을 알 수 있었다.
실험예 3. 항산화 활성 측정
상기 실시예 및 비교예가 기존 완두단백분말 대비 향상되는 항산화 효과를 평가하기 위해 DPPH 법(Radical scavenging activity)을 사용하여 환원 활성을 측정하였다.
항산화제의 환원력을 측정하는 시약으로서 1,1-디페닐-2-피크릴하이드라질 라디칼(DDPH; 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical)이 있다. DPPH는 화합물 내 질소 중심의 안정화된 구조의 라디칼로 존재하고, 517nm에서 최대 흡수를 나타내며, 환원되면 517nm에서 흡수가 없어진다. 0.2mM DPPH 메탄올 용액 0.5ml에 25μg/mL 농도의 시료 1ml을 첨가하고 섞은 다음 30분간 실온반응 시킨 후 UV-VIS 분광광도계로 517nm에서 흡광도의 감소를 측정하였다. 이때 대조군은 DPPH 메탄올 용액와 메탄올을 혼합한 것으로 하였다.
하기 수학식 1에 따라 라디칼 소거능을 계산하고, 그 결과를 표 3에 나타내었다.
[수학식 1]
소거능(%)=[(대조군의 흡광도-시험군의 흡광도)/대조군의 흡광도)] × 100
DPPH 소거 속도
실시예 1 75.2
비교예 1 56.4
비교예 2 48.4
비교예 3 61.2
완두단백분말 12.2
표 3을 참조하면 실시예 및 비교예 모두에서 원료 완두단백분말 대비 항산화 활성이 있음을 확인할 수 있으며, 실시예 1에서 현저히 효과가 증가하였음을 알 수 있었다.
처방예 1. 실시예 1에 따른 단백질 제제를 이용한 단백질 보충제
실시예 1의 단백질 보충제에 프락토올리고당, 식물성크림(로즈버드크리머), 바니라미크론, 효소처리스테비아, 비타민C, 산화아연, 혼합아미노산, 락토페린 농축물, 멀티비타민, 및 L-류신을 적당한 함량으로 첨가하여 단백질 제제를 제조하였다.
실험예 4. 처방예 1의 단백질 보충제의 함량 분석
처방예 1에 따라 제조된 단백질 보충제에 대해 함량분석을 실시한 결과는 표 4와 같다.
시험항목 결과 단위
열량 410.14 Kca/100g
탄수화물 39.19 g/100g
당류 0.92 g/100g
조단백질 43.68 g/100g
조지방 8.74 g/100g
포화지방 6.32 g/100g
트랜스지방 0.00 g/100g
콜레스테롤 8.70 mg/100g
나트륨 388.26 mg/100g

Claims (3)

  1. 완두단백분말 18 내지 22 중량부, 산양유 단백분말 4.5 내지 5.5 중량부, 콜라젠 1.8 내지 2.2 중량부, 초유단백분말 0.9 내지 1.1 중량부, 마 분말 0.9 내지 1.1 중량부, 및 증류수 67 내지 75 중량부를 15 내지 25℃에서 20 내지 40분간 혼합 및 교반한 후, 75 내지 85℃에서 30분 내지 90분간 교반하여 단백질 용액을 제조하는 제1단계;
    상기 제1단계에 따른 단백질 용액 100 중량부에 곡물발효 효소 분말 0.9 내지 1.1 중량부를 첨가하고 36 내지 38℃에서 90분 내지 150분간 교반하여 단백질 용액을 제조하는 제2단계로서, 상기 곡물발효 효소 분말은 현미, 보리, 통밀, 검정콩, 팥, 조, 수수, 귀리, 메밀, 호밀, 옥수수, 율무, 대두, 감자, 및 고구마가 혼합된 곡물의 효소인 것으로, α-아밀라아제가 200,000 unit/g 이상 프로테아제가 300unit/g이상 포함되는 것인 제2단계; 및
    상기 제2단계에 따른 단백질 용액 100 중량부에 유산균 0.9 내지 1.1 중량부를 처리하고 36 내지 38℃에서 18 내지 30시간 교반하여 단백질 용액을 발효하는 제3단계로서, 상기 유산균은 L.plantarum, L.paracasei, Bi.longum, L.rhamnosus, Bi.infantis, Leu.citreum, S.thermophilus, L.casei, Bi.breve, Bi.animalis ssp.lactis, Bi.bifidum, L.acidophilus, L.reuteri, L.bulgaricus, L.fermentum, L.gasseri, L.salivarius, L.helveticus, 및 Lc.lactis가 함유된 혼합유산균인 제3단계를 포함하는, 소화율이 개선된 단백질 제제의 제조방법.


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