KR102479358B1 - 항결핵제 - Google Patents

Abstract

본 발명은, 예를 들어 결핵의 치료에서의 항미코박테리아제로서의 용도를 포함한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염의 요법에서의 용도; 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온을 함유하는 조성물; 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 조합물 및 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 염에 관한 것이다.

Description

항결핵제

본 발명은, 예를 들어 결핵의 치료에서의 항미코박테리아제로서의 용도를 포함한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염의 요법에서의 용도; 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 함유하는 조성물; 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 조합물 및 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 염에 관한 것이다.

미코박테리움(Mycobacterium)은 미코박테리아카에(Mycobacteriacae)로서 공지된 그 자체의 별개의 패밀리를 갖는 악티노박테리아(Actinobacteria)로 불리는 박테리아의 부류의 속이다. 미코박테리움은 동물의 다양한 편성 및 기회 병원체를 함유하고, 이는 또한 인간에게 전염되어 인간에서 질환을 유발할 수 있고, 따라서 상당한 인수공통 잠재력을 나타낸다. 지난 수십년 동안, 미코박테리움 아비움-인트라셀룰라레(Mycobacterium avium-intracellulare) 복합체 (MAIC)의 구성원이 소아의 림프절염, 폐 결핵-유사 질환, 및 파종성 감염 (면역손상된 인간, 특히 AIDS 환자에서 우세하게 발생함)을 포함한 인간 질환의 병원체로서 부상하였다. 유사하게, 중요한 동물 질환, 예를 들어 조류 결핵 및 반추동물에서의 파라결핵증이 이러한 군의 구성원에 의한 동물 감염으로부터 발생한다. MAIC는 엠. 인트라셀룰라레(M. intracellulare) 및 엠. 아비움(M. avium)의 4종의 아종, 즉, 엠. 아비움 아종 아비움(M. avium subsp. avium), 엠. 아비움 아종 호미니수이스(M. avium subsp. hominissuis), 엠. 아비움 아종 실바티쿰(M. avium subsp. silvaticum), 및 엠. 아비움 아종 파라투베르쿨로시스(M. avium subsp. paratuberculosis)를 포함한다. 엠. 투베르쿨로시스(M. tuberculosis) 복합체의 구성원은 직접 숙주 접촉에 의해 전염되는 반면에, MAIC 종은 토양, 물, 먼지, 및 식품을 포함한 환경적 공급원으로부터 우세하게 획득된다.

미코박테리움 투베르쿨로시스 (MTB)는 작은 호기성 비-운동성 고-GC 바실루스로, 비통상적으로 두껍고, "왁스상"이며, 소수성이고, 미콜산이 풍부한, 극도로 불침투성인 "외부-막"을 갖고, 이는 미코박테리움 감염의 치료를 어렵게 만든다. 전세계 인구의 1/3이 감염된 것으로 생각되지만 (잠재성 MTB 포함), 이러한 수는 많은 아시아 및 아프리카 국가에서 인구의 80%를 넘어 증가된다. 치료하지 않을 경우, 활성 MTB 감염으로부터의 사망률은 50%를 초과한다. 또한, HIV 및 MTB의 조합은 치명적이고, 증가하는 수의 MTB 균주가 표준 관리 약물에 대해 저항성이 되고 있으며; 대략 300,000건의 새로운 사례의 다중약물 저항성 (MDR) 엠. 투베르쿨로시스가 매년 보고된다. 다중약물 저항성 (MDR) 엠. 투베르쿨로시스는 이소니아지드 및 리팜피신에 대해 저항성이고, 광범위한 약물 저항성 (XDR) 엠. 투베르쿨로시스는 또한 적어도 1종의 퀴놀론 및 1종의 아미노글리코시드에 대해 저항성이다. XDR 엠. 투베르쿨로시스는 세계의 많은 곳에서 보고되고 있다.

이들 이슈에 전염의 용이성, 여행의 세계화, 및 전세계 인구의 많은 부문의 계속되는 이주 및 이민이 더해지고, MTB가 세계적 위험이 되고 있다는 것은 분명하다.

결핵 (TB)을 치료하기 위한 합성 약물은 반세기를 넘어 이용가능하였지만, 질환의 발생률은 계속해서 전세계적으로 상승하고 있다. 2십억명을 초과하는 인간이 현재 엠. 투베르쿨로시스에 감염되어 있고, 대부분은 잠복 사례이며, 매년 9백만건을 초과하는 새로운 사례가 전세계적으로 발생하여, 1년에 1백7십만 내지 거의 2백만건의 사망을 초래하는 것으로 추정된다. 2004년에만 매일 대략 24,500건의 새로운 감염 및 5,500건에 가까운 사망이 기록되었다. 문헌 [Zignol, Met al., M. Surveillance of anti-tuberculosis drug resistance in the world: an updated analysis, 2007-2010. Bull. World Health Organ 2012, 90 (2), 111-119D]을 참조한다. HIV에 의한 공동-감염은 발생률의 증가를 주도하고 있고 (Williams, B. G.; Dye, C. Science, 2003, 301, 1535), 아프리카에서 AIDS 환자의 31 %의 사망 원인이 TB로 인한 것일 수 있다. 문헌 [Corbett, E. Let al.,. Arch. Intl. Med., 2003, 163, 1009, Septkowitz, Aet al., Clin. Microbiol. Rev. 1995, 8, 180]을 참조한다.

결핵 요법 및 예방의 한계는 널리 공지되어 있다. 현재 이용가능한 백신인, BCG는 1921년에 소개되었고, 대부분의 인간의 과거 소아기를 보호하는데 실패하였다. 2006년 보고서 - 파트너가 질환 통제 센터, 미국 흉부 학회, 결핵 재단, KNCV, 세계 보건 기구 및 국제 항결핵 및 폐 질환 연맹을 포함하는 기술 지원을 위한 결핵 연대 (TBCTA)에 의해 제작된 문서인 "International Standards for Tuberculosis Care" - 에 따르면, 현재 활성 질환에 감염된 환자는 50년 내지 60년 전에 소개된 의약 - 이소니아지드 (1952), 리팜핀 (1963), 피라진아미드 (1954) 및 에탐부톨 (1961)에 의한 2개월의 조합 요법에 이어 이소니아지드 및 리팜핀 (또한 리팜피신으로도 공지됨)에 의한 또 다른 4개월의 조합 요법을 견딘다. 대안적으로 부착을 평가할 수 없을 때 유지기는 6개월 동안 이소니아지드 및 에탐부톨을 포함할 수 있지만, 이러한 보고서에 따르면, 특히 HIV 감염된 환자에서, 보다 긴 유지기는 보다 높은 실패율 및 재발률과 연관된다. 또한, 이러한 보고서에서 상술된 바와 같이, 사용되는 항결핵 약물의 용량은 국제적 권장사항을 따라야 하고, 특히 치료제가 섭취되었는지 확실히 하기 위해 환자를 모니터링하는 것이 가능하지 않은 경우에, 2종 (이소니아지드 및 리팜피신), 3종 (이소니아지드, 리팜피신, 및 피라진아미드), 및 4종 (이소니아지드, 리팜피신, 피라진아미드, 및 에탐부톨)의 약물의 고정-용량 조합물이 매우 권장된다.

이들 치료기에는 매일 투여가 요구되고, 불량한 순응도는 다중약물-저항성 균주의 출현 및 확산을 주도하며, 이는 치료의 도전과제가 된다. 덜 빈번하게 섭취할 수 있고 저항성의 출현에 대한 높은 장벽을 제시하는 보다 짧은 과정의 보다 활성인 작용제, 즉 TB의 다중약물 저항성 균주 (MDR-TB)에 대해 효과적인 작용제가 긴급히 필요하다. 2013년 3월 보고서 (http://www.aidsmap.com/Once-weekly-continuation-phase-TB-treatment-equals-standard-of-care/page/2589498/)는 리파펜틴 (리팜피신의 장기-작용 유도체)과 목시플록사신 (이전에 TB 치료에 사용되지 않은 플루오로퀴놀론 항생제)의 2종의-약물 조합물이 결핵 (TB) 치료제가 4-개월 유지기 동안 매주-1회 섭취되는 것을 가능하게 할 수 있고, 이소니아지드 및 리팜핀에 의한 매일 치료인 전통적인 유지 치료와 동일한 표준 관리를 달성한다는 것을 시사한다. 이러한 치료기는 치료 감시가 유지기 내내 연장되게 하여, 부착을 증가시킬 것이다. 그러나, 목시플록사신은 TB의 치료에 대해 아직 승인되지 않았고, 매주-1회 치료 프로토콜은 대안적 표준 관리 치료로서 아직 추천되거나 승인되지 않았고 - 가이드라인 패널은 국제적 및 국가적 수준에서 이러한 대안적 유지 치료 프로토콜이 권장 및 채택될 지 여부를 결정하기 위해 공개된 증거를 검토할 필요가 있을 것이다. 또한, 리파펜틴은 고가이고, 리파펜틴, 및 비-뉴클레오시드 리버스 트랜스크립타제 억제제 (NNRTI) 및 프로테아제 억제제 부류의 항레트로바이러스 약물 사이의 상호작용은, 또한 HIV 양성이고 항레트로바이러스 의약을 섭취하고 있는 TB 환자에서의 그의 사용을 막을 수 있다. 따라서, 현 시점에서, 매주 리파펜틴 대 매일 리팜피신에 의한 유지 치료의 비용/이익 분석이 아직 완전히 평가되지 않았다.

결핵 약물 시르투로(Sirturo)™ (베다퀼린)는 2012년 12월 말에 미국에서 승인되었고, 또한 현재 EU에서도 승인되었다. 또 다른 결핵 약물, 델라마니드도 또한 EU에서 델티바(Deltyba)™로서 규제 승인을 획득하였다. 그러나, 이들 둘 다는 새로운 사례의 단지 5%를 차지하는 약물-저항성 결핵에 대해 예비된 것이다. 문헌 [A 2007 Editorial and News Focus in Nature Medicine]은 지금까지 TB의 많은 측면, 예컨대 발병기전, 역학, 약물 발견 및 백신 개발에 대해 논의하였고 (Nature Medicine, 2007, Focus on Tuberculosis, Vol 13(3), pages 263-312), 이는 미코박테리움 투베르쿨로시스가 발견된 후 125 주년에, 전세계에서 1/3을 초과하는 인간이 엠. 투베르쿨로시스에 감염되었고, 이들 중 1/10 초과에서 그의 일생 중, 이전에 가슴앓이로도 공지된, 결핵으로 공지된 질환이 발생할 것임을 지적하였다.

미코박테리움 투베르쿨로시스의 다중약물 저항성 균주 (MDR-TB)의 출현과 연관될 때, 문제의 규모는 증폭된다. 항생제 및 항미생물제에 대한 박테리아 및 다른 미생물 저항성의 세계적인 상승은 일반적으로 주요한 위협이 된다. 과거 60년 동안 생태권으로의 항미생물제의 대량의 배치는 항미생물-저항성 병원체의 출현 및 확산에 대해 강력한 선택 압력을 도입하였다. 따라서 TB를 치료하기 위한 새로운 화학 물질을 발견하고 개발할 필요가 존재한다 (최근의 지표는 문헌 [Grosset JH, Singer TG, Bishai WR. New Drugs for the Treatment of Tuberculosis: Hope and Reality. Int J Tuberc Lung Dis. 2012 Aug;16(8):1005-14]에서 검토됨).

본 발명은 요법에서의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 용도, 및 미코박테리움 투베르쿨로시스에 대한 특정한 그의 예상외의 활성에 관한 것이다.

본 발명의 제1 측면에서, 요법에 사용하기 위한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염이 제공된다.

본 발명의 제2 측면에서, 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료를 필요로 하는 포유동물에게 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 포유동물에서 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환을 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명의 제3 측면에서, 미코박테리아 감염의 치료를 필요로 하는 포유동물에게 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 상기 포유동물에서 미코박테리아 감염을 치료하는 방법이 제공된다.

본 발명의 제4 측면에서, 포유동물에서 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료에 사용하기 위한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염이 제공된다.

본 발명의 제5 측면에서, 포유동물에서 미코박테리아 감염의 치료에 사용하기 위한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염이 제공된다.

본 발명의 제6 측면에서, 포유동물에서 미코박테리아 감염의 치료에 사용하기 위한 의약의 제조에서의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도가 제공된다.

본 발명의 제7 측면에서, 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 염이 제공된다.

본 발명의 제8 측면에서, 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 제약상 허용되는 염이 제공된다.

본 발명의 제9 측면에서,

a) 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및

b) 제2 치료제

의 조합물이 제공된다.

본 발명의 제10 측면에서, a) 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 b) 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물이 제공된다.

본 발명의 제11 측면에서, 미코박테리움을 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염과 접촉시키거나, 또는 미코박테리움에 감염된 포유동물을 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염으로 처리하여 미코박테리움을 사멸시키고/거나 미코박테리움의 복제를 방지하는 것을 포함하는, 미코박테리움에 감염된 포유동물에서 미코박테리움을 사멸시키고/거나 미코박테리움의 복제를 억제하는 방법이 제공된다.

본 발명자들은 본원에 기재된 바와 같은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온이 본원에 기재된 검정에서 신규 작용 방식을 시사하는 활성 프로파일을 나타낸다는 것을 발견하였다. 이러한 새로운 생물학적 프로파일은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온이 현재의 항결핵 화합물과 조합하여 사용하기에 특히 적합하다는 것을 시사하고, 엠. 투베르쿨로시스에 감염된 인간을 포함한 동물을 치료하는데 보다 큰 효능을 달성할 것으로 고려된다.

저항성은 결핵 (TB) 치료에서 이슈로 남아있고, 하나의 임상 전략은 다른 TB 약물과의 조기 조합에 초점을 맞추고, 환자에서 화합물의 효능의 조기 평가를 추진하는 것이다. 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온은 TB의 치료 동안 발생하는 심각한 이슈, 예컨대 다중약물 저항성, 광범위한-약물 저항성, 다중약물 조합물에서 치료제들 사이의 반응성 및/또는 유해 상호작용, 및 치료 길이를 다루고, 그에 의해 잠재적인 환자 필요를 다루기 위한 특별한 기회를 제공한다.

본 발명은 요법에 사용하기 위한, 화합물 (I)로 불리는 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

한 실시양태에서, 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한 본원에 기재된 방법; 또는 미코박테리아 감염의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한 본원에 기재된 방법과 관련하여; 포유동물은 인간이다.

본 발명의 또 다른 실시양태는 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한 본원에 기재된 방법; 또는 미코박테리아 감염의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한 본원에 기재된 방법과 관련하여; 미코박테리아 감염은 목록 A: 미코박테리움 투베르쿨로시스, 미코박테리움 아비움 아종 아비움, 미코박테리움 아비움 아종 호미니수이스, 미코박테리움 아비움 아종 실바티쿰, 및 미코박테리움 아비움 아종 파라투베르쿨로시스를 포함한 미코박테리움 아비움 아종 (subsp.); 미코박테리움 칸사시이(Mycobacterium kansasii), 미코박테리움 말모엔세(Mycobacterium malmoense), 미코박테리움 시미아에(Mycobacterium simiae), 미코박테리움 스줄가이(Mycobacterium szulgai), 미코박테리움 크세노피(Mycobacterium xenopi), 미코박테리움 스크로풀라세움(Mycobacterium scrofulaceum), 미코박테리움 압세수스(Mycobacterium abscessus), 미코박테리움 켈로나에(Mycobacterium chelonae), 미코박테리움 하에모필룸(Mycobacterium haemophilum), 미코박테리움 레프라에(Mycobacterium leprae), 미코박테리움 마리눔(Mycobacterium marinum), 미코박테리움 포르투이툼(Mycobacterium fortuitum), 미코박테리움 파라포르투이툼(Mycobacterium parafortuitum), 미코박테리움 고르도나에(Mycobacterium gordonae), 미코박테리움 바카에(Mycobacterium vaccae), 미코박테리움 보비스(Mycobacterium bovis), 미코박테리움 보비스 BCG, 미코박테리움 아프리카눔(Mycobacterium africanum), 미코박테리움 카네티(Mycobacterium canetti), 미코박테리움 카프라에(Mycobacterium caprae), 미코박테리움 미크로티(Mycobacterium microti), 미코박테리움 핀니페디(Mycobacterium pinnipedi), 미코박테리움 울세란스(Mycobacterium ulcerans), 미코박테리움 인트라셀룰라레(Mycobacterium intracellulare), 미코박테리움 투베르쿨로시스 복합체 (MTC), 미코박테리움 아비움 복합체 (MAC), 미코박테리움 아비안-인트라셀룰라레 복합체 (MAIC), 미코박테리움 고르도나에 계통군; 미코박테리움 칸사시이 계통군; 미코박테리움 켈로나에 계통군; 미코박테리움 포르투이툼 계통군; 미코박테리움 파라포르투이툼 계통군; 및 미코박테리움 바카에 계통군으로부터 선택된 미코박테리움의 감염인 것을 제공한다.

한 실시양태에서, 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한 본원에 기재된 방법; 또는 미코박테리아 감염의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한 본원에 기재된 방법과 관련하여; 미코박테리아 감염은 미코박테리움 투베르쿨로시스 감염이다.

또 다른 실시양태에서, 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한 본원에 기재된 방법; 또는 미코박테리아 감염의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한 본원에 기재된 방법과 관련하여; 미코박테리아 감염은 탄소 공급원으로서 콜레스테롤을 사용할 수 있는 미코박테리움의 감염이다.

또 다른 실시양태는 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료를 필요로 하는 동물, 특히 포유동물, 보다 특히 인간에게 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 동물, 특히 포유동물, 보다 특히 인간에서 이러한 질환을 치료하는 방법을 제공한다.

또 다른 실시양태는 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한 본원에 기재된 방법과 관련하여, 포유동물의 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환이 목록 B: 결핵, 나병, 요네병, 부룰리 또는 베언즈데일 궤양, 크론병, 폐 질환 또는 폐 감염, 폐렴, 활액낭, 활막, 건초, 국부 농양, 림프절염, 피부 및 연부 조직 감염 레이디 윈더미어 증후군, MAC 폐 질환, 파종성 미코박테리움 아비움 복합체 (DMAC), 파종성 미코박테리움 아비움 인트라셀룰라레 복합체 (DMAIC), 온수 욕조 폐, MAC 유방염, MAC 화농근육염, 미코박테리움 아비움 파라투베르쿨로시스, 또는 육아종 질환으로부터 선택된 것인 것을 제공한다. 또 다른 실시양태에서, 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한 본원에 기재된 방법과 관련하여, 포유동물에서의 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환은 결핵이다.

또 다른 실시양태는 미코박테리아 감염의 치료를 필요로 하는 동물, 특히 포유동물에게 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 동물, 특히 포유동물에서 이러한 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 또 다른 실시양태는 미코박테리아 감염이 미코박테리움 투베르쿨로시스인, 동물, 특히 포유동물에서 미코박테리아 감염을 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명의 또 다른 실시양태는 동물에게 (i) 치료 유효량 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염; (ii) 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 치료 유효량의 조합물; 또는 (iii) 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염 중 어느 하나를 투여하여, 동물에서 미코박테리움 감염을 치료하는 것을 포함하는, 동물에서 미코박테리움 감염을 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명의 또 다른 실시양태는 동물에게 (i) 치료 유효량 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염; (ii) 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 치료 유효량의 조합물; 또는 (iii) 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염의 치료 유효량의 제약 제제 중 어느 하나를 투여하여, 동물에서 미코박테리움 감염을 치료하는 것을 포함하는, 동물에서 미코박테리움 감염을 치료하는 방법을 제공한다.

한 실시양태에서, 포유동물에서 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료에 사용하기 위한, 또는 포유동물에서 미코박테리아 감염의 치료에 사용하기 위한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염과 관련하여, 포유동물은 인간이다. 또 다른 실시양태에서, 미코박테리아 감염은 상기 본원에 기재된 목록 A로부터 선택된 미코박테리움의 감염이다. 또 다른 실시양태에서, 미코박테리아 감염은 미코박테리움 투베르쿨로시스 감염이다. 또 다른 실시양태에서, 미코박테리아 감염은 탄소 공급원으로서 콜레스테롤을 사용할 수 있는 미코박테리움의 감염이다.

본 발명은 추가로 동물, 특히 인간에서 미코박테리아 감염의 치료에 사용하기 위한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 용매화물을 제공한다. 관련 측면에서, 포유동물은 인간이고, 여기서 미코박테리아 감염은 미코박테리움 투베르쿨로시스 감염이다. 한 실시양태에서, 미코박테리움 투베르쿨로시스에 감염된 인간은 또한 인간 면역결핍 바이러스를 포함한 레트로바이러스에 감염된다.

본 발명은 추가로 인간을 포함한 동물에서 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료에 사용하기 위한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다. 본 발명의 또 다른 실시양태는 동물에서 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료에 사용하기 위한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공하며, 여기서 질환은 결핵, 나병, 요네병, 부룰리 또는 베언즈데일 궤양, 크론병, 폐 질환 또는 폐 감염, 폐렴, 활액낭, 활막, 건초, 국부 농양, 림프절염, 피부 및 연부 조직 감염 레이디 윈더미어 증후군, MAC 폐 질환, 파종성 미코박테리움 아비움 복합체 (DMAC), 파종성 미코박테리움 아비움 인트라셀룰라레 복합체 (DMAIC), 온수 욕조 폐, MAC 유방염, MAC 화농근육염, 미코박테리움 아비움 파라투베르쿨로시스, 또는 육아종 질환으로부터 선택된다. 또 다른 실시양태에서 동물에서 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환의 치료에 사용하기 위한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염이 제공되며, 여기서 질환은 결핵이다.

한 실시양태에서, 미코박테리움 투베르쿨로시스에 감염된 인간은 또한 인간 면역결핍 바이러스를 포함한 레트로바이러스에 감염된다.

한 실시양태에서, 포유동물에서 미코박테리아 감염의 치료에 사용하기 위한 의약의 제조에서의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도와 관련하여, 포유동물은 인간이다. 또 다른 실시양태에서, 미코박테리아 감염은 상기 본원에 기재된 목록 A로부터 선택된 미코박테리움의 감염이다. 또 다른 실시양태에서, 미코박테리아 감염은 미코박테리움 투베르쿨로시스 감염이다. 또 다른 실시양태에서, 미코박테리아 감염은 탄소 공급원으로서 콜레스테롤을 사용할 수 있는 미코박테리움의 감염이다. 한 실시양태에서, 포유동물에서의 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환은 상기 본원에 기재된 목록 B로부터 선택된다. 또 다른 실시양태에서, 포유동물에서의 미코박테리아 감염으로 인해 발생한 질환은 결핵이다.

또 다른 실시양태는 동물에서 미코박테리아 감염의 치료를 위한 의약의 제조에서의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도를 제공한다.

한 실시양태에서, a) 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 b) 제2 치료제의 조합물과 관련하여, 제2 치료제는 목록 C: 이소니아지드, 리팜핀, 피라진아미드, 에탐부톨, 목시플록사신, 리파펜틴, 클로파지민, 베다퀼린 (TMC207), 니트로이미다조-옥사진 PA-824, 델라마니드 (OPC-67683), OPC-167832, 옥사졸리디논, EMB (에탐부톨) 유사체 SQ109, 벤조티아지논, 디니트로벤즈아미드, 및 항레트로바이러스제를 포함한 항바이러스제로부터 선택된다. 추가 실시양태에서, 옥사졸리디논은 리네졸리드, 테디졸리드, 라데졸리드, 수테졸리드 (PNU-100480) 또는 포시졸리드 (AZD-5847)이다. 추가 실시양태에서, 제2 치료제는 결핵의 치료를 위해 승인되거나 권장되는 치료제이다.

한 실시양태에서, 기재된 바와 같은 조합물이 제공되며, 여기서 항레트로바이러스제는 독립적으로 지도부딘, 디다노신, 라미부딘, 잘시타빈, 아바카비르, 스타부딘, 아데포비르, 아데포비르 디피복실, 포지부딘, 토독실, 엠트리시타빈, 알로부딘, 암독소비르, 엘부시타빈, 네비라핀, 델라비르딘, 에파비렌즈, 로비리드, 이뮤노칼, 올티프라즈, 카프라비린, 레르시비린, GSK2248761, TMC-278, TMC-125, 에트라비린, 사퀴나비르, 리토나비르, 인디나비르, 넬피나비르, 암프레나비르, 포삼프레나비르, 브레카나비르, 다루나비르, 아타자나비르, 티프라나비르, 팔리나비르, 라시나비르, 엔푸비르티드, T-20, T-1249, PRO-542, PRO-140, TNX-355, BMS-806, BMS-663068 및 BMS-626529, 5-헬릭스, 랄테그라비르, 엘비테그라비르, GSK1349572, GSK1265744, 비크리비록 (Sch-C), Sch-D, TAK779, 마라비록, TAK449, 디다노신, 테노포비르, 로피나비르, 및 다루나비르로부터 선택된다.

본 발명의 특정 실시양태에서, 인간을 포함한 동물에서 미코박테리움 투베르쿨로시스 감염의 치료에 사용하기 위한 항결핵제 및 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 조합물이 제공된다. 특정한 실시양태에서, 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온은 미코박테리움 투베르쿨로시스에 감염된 동물 대상체를 치료하기 위해, 특히 추가적으로 인간 레트로바이러스, 특히 인간 면역결핍 바이러스 (HIV)에 감염된 동물 대상체에서 다른 공지된 항결핵제와 조합되어 사용된다.

본 발명의 한 실시양태에서, 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염인 제1 치료제; 및 제2 치료제; 및 임의로 제3 치료제; 임의로 제4 치료제; 임의로 제5 치료제; 및 임의로 제6 치료제를 포함하는 조합물이 제공되고, 여기서 제2, 및 임의적인 제3, 제4, 제5 또는 제6 치료제는 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염 이외의 것이다.

한 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 조합물이 제공되고, 여기서 제2, 또는 임의적인 제3, 제4, 제5 및 제6 치료제는 독립적으로 이소니아지드, 리팜핀, 피라진아미드, 에탐부톨, 목시플록사신, 리파펜틴, 클로파지민, 베다퀼린 (TMC207), 니트로이미다조-옥사진 PA-824, 델라마니드 (OPC-67683), OPC-167832, 옥사졸리디논 예컨대 리네졸리드, 테디졸리드, 라데졸리드, 수테졸리드 (PNU-100480) 또는 포시졸리드 (AZD-5847), EMB (에탐부톨) 유사체 SQ109, 벤조티아지논, 디니트로벤즈아미드, 및 항레트로바이러스제를 포함한 항바이러스제로부터 선택된다.

본 발명의 또 다른 실시양태는 기재된 바와 같은 조합물을 제공하며, 여기서 제2, 또는 임의적인 제3, 제4, 제5 및 제6 치료제는 결핵의 치료를 위해 승인되거나 권장되는 치료제로부터 선택된다.

또 다른 실시양태는 동물에게 (i) 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염; (ii) 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 치료 유효량의 조합물; 또는 (iii) 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 치료 유효량의 제약 제제 중 어느 하나를 투여하여, 동물에서 미코박테리움 감염을 치료하는 것을 포함하는, 동물에서 미코박테리움 감염을 치료하는 방법을 제공하며, 여기서 미코박테리움 감염은 엠. 투베르쿨로시스 감염이다. 한 실시양태에서, 미코박테리움 감염은 상기 본원에 기재된 목록 A로부터 선택된 미코박테리움의 감염이다. 또 다른 실시양태에서, 미코박테리움 감염은 탄소 공급원으로서 콜레스테롤을 사용할 수 있는 미코박테리움의 감염이다.

본원에 기재된 바와 같이, 본 발명의 실시양태는 동시, 순차적 또는 조합에 관계 없이, 미코박테리움 투베르쿨로시스 종을 포함한 미코박테리움 종에 노출되었거나 그에 감염된 대상체에게 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염인 제1 치료제를 제2 치료제와 조합하여, 임의로 제3 치료제와 조합하여, 임의로 제4 치료제와 조합하여, 임의로 제5 및/또는 제6 치료제와 조합하여 공투여하는 것을 포함한다. 특정 실시양태에서, 제1 치료제는 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염이고, 제2 및/또는 제3 및/또는 제4 치료제는 항결핵제이다. 특정 실시양태에서, 미코박테리움 종은 약물-저항성 변이체이고; 특정 실시양태에서 미코박테리움 종은 다중약물 저항성 변이체이다.

한 실시양태에서, a) 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 b) 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 상기 언급된 제약 조성물은 추가적으로 제2 치료제를 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 제2 치료제는 상기 본원에 기재된 목록 C로부터 선택된다. 추가 실시양태에서, 목록 C의 옥사졸리디논은 리네졸리드, 테디졸리드, 라데졸리드, 수테졸리드 (PNU-100480), 또는 포시졸리드 (AZD-5847)이다. 추가 실시양태에서, 제2 치료제는 결핵의 치료를 위해 승인되거나 권장되는 치료제이다.

한 실시양태에서, 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 제약상 허용되는 부형제, 아주반트 또는 희석제를 포함하는 제약 제제가 제공된다. 한 실시양태에서, 제약 제제는 제2 치료제를 포함한다.

본 발명의 한 실시양태에서, 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염인 제1 치료제를 포함하는 제약 제제가 제공된다. 관련 실시양태는 상기 기재된 바와 같은 조합물 및 제약상 허용되는 부형제, 아주반트 또는 희석제를 제공한다. 또 다른 실시양태에서, 제약 제제는 제2 치료제를 추가로 포함할 수 있다.

한 실시양태에서 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염인 제1 치료제, 및 제약상 허용되는 부형제, 아주반트 또는 희석제를 포함하는 제약 제제가 제공된다.

보다 특히, 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염인 제1 치료제이며, 본원에 기재된 바와 같은 임의의 실시양태에서 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염인 상기 제1 치료제; 제약상 허용되는 부형제, 아주반트 또는 희석제; 및 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염 이외의 것인 제2 치료제를 포함하는 제약 제제가 제공된다.

관련 실시양태에서, 제약 제제는 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염인 제1 치료제를 포함하고, 임의로 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염 이외의 것인 제2 치료제를 포함하고, 임의로 제3 치료제를 포함하고, 임의로 제4 치료제를 포함하고, 임의로 제5 치료제를 포함하고, 임의로 제6 치료제를 포함한다. 관련 실시양태에서, 제2, 제3, 제4, 제5 및 제6 치료제는 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염 이외의 항미코박테리아제이다. 관련 실시양태에서, 제2, 제3, 제4, 제5 및 제6 치료제는 이소니아지드, 리팜핀, 피라진아미드, 에탐부톨, 목시플록사신, 리파펜틴, 클로파지민, 베다퀼린 (TMC207), 니트로이미다조-옥사진 PA-824, 델라마니드 (OPC-67683), OPC-167832, 옥사졸리디논 예컨대 리네졸리드, 테디졸리드, 라데졸리드, 수테졸리드 (PNU-100480), 및 포시졸리드 (AZD-5847), EMB (에탐부톨) 유사체 SQ109, 벤조티아지논, 디니트로벤즈아미드, 및 항레트로바이러스제를 포함한 항바이러스제로부터 선택된다. 관련 실시양태에서, 제2, 제3, 제4, 제5 및 제6 치료제는 결핵의 치료를 위해 승인되고/거나 권장되는 치료제이다.

관련 실시양태는 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 염, 및 제2 치료제; 및 임의로 제3, 제4, 제5 또는 제6 치료제를 포함하는 제약 제제를 제공하며, 여기서 제2 또는 임의적인, 제3, 제4, 제5 또는 제6 치료제는 지도부딘, 디다노신, 라미부딘, 잘시타빈, 아바카비르, 스타부딘, 아데포비르, 아데포비르 디피복실, 포지부딘, 토독실, 엠트리시타빈, 알로부딘, 암독소비르, 엘부시타빈, 네비라핀, 델라비르딘, 에파비렌즈, 로비리드, 이뮤노칼, 올티프라즈, 카프라비린, 레르시비린, GSK2248761, TMC-278, TMC-125, 에트라비린, 사퀴나비르, 리토나비르, 인디나비르, 넬피나비르, 암프레나비르, 포삼프레나비르, 브레카나비르, 다루나비르, 아타자나비르, 티프라나비르, 팔리나비르, 라시나비르, 엔푸비르티드, T-20, T-1249, PRO-542, PRO-140, TNX-355, BMS-806, BMS-663068 및 BMS-626529, 5-헬릭스, 랄테그라비르, 엘비테그라비르, GSK1349572, GSK1265744, 비크리비록 (Sch-C), Sch-D, TAK779, 마라비록, TAK449, 디다노신, 테노포비르, 로피나비르 또는 다루나비르로부터 선택된 항레트로바이러스제이다.

한 실시양태에서, 미코박테리움을 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염과 접촉시키거나, 또는 미코박테리움에 감염된 포유동물을 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염으로 처리하여 미코박테리움을 사멸시키고/거나 미코박테리움의 복제를 방지하는 것을 포함하는, 미코박테리움에 감염된 포유동물에서 미코박테리움을 사멸시키고/거나 미코박테리움의 복제를 억제하는 방법과 관련하여, 미코박테리움은 미코박테리움 투베르쿨로시스이다. 또 다른 실시양태에서, 포유동물은 인간이다. 추가 실시양태에서, 미코박테리움은 탄소 공급원으로서 콜레스테롤을 사용할 수 있다.

또 다른 실시양태는 미코박테리아를 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염과 접촉시켜 미코박테리아를 사멸시키고/거나 미코박테리아의 복제를 방지하는 것을 포함하는, 동물에서 질환을 유발하는 미코박테리아를 사멸시키고/거나 미코박테리아의 복제를 억제하는 방법을 제공한다.

추가 실시양태에서, 본 발명은 동물 예컨대 소, 양, 염소, 개 및 고양이를 포함한 가축 및 애완동물, 또는 면역-억제된 인간을 포함한 인간에서 미코박테리아를 사멸시키고/거나 미코박테리아의 복제를 억제하는 방법 또는 미코박테리아 감염을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 미코박테리아를 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온과 접촉시켜 미코박테리아를 사멸시키고/거나 미코박테리아의 복제를 억제하는 것을 포함하거나, 또는 상기 방법은 미코박테리아에 감염된 동물에게 치료 유효량의 화합물 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함한다. 예시적 실시양태에서, 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온은 본원에 기재된 제약 제제의 일부이다. 또 다른 예시적 실시양태에서, 접촉시키는 것은 화합물이 미코박테리움 내로 진입하는 것을 허용하는 조건 하에 이루어진다.

다른 특정한 실시양태에서 미코박테리아, 또는 미코박테리움에 노출되었거나 그에 감염된 인간을 포함한 동물을 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염인 제1 치료제와 접촉시키고, 임의로 세포 또는 대상체를 제2 치료제와 접촉시키고, 임의로 세포 또는 대상체를 제3 치료제와 접촉시키고, 임의로 세포 또는 대상체를 제4 치료제와 접촉시키고, 임의로 세포 또는 대상체를 제5 및/또는 제6 치료제와 접촉시켜, 접촉이 미코박테리아 세포를 사멸시키도록 하는 것을 포함하는, 미코박테리아를 사멸시키는 방법이 제공된다. 특정한 실시양태에서, 제1 치료제는 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염이고, 임의적인 제2, 제3, 제4, 제5 및/또는 제6 치료제는 항결핵제 또는 그의 염이다. 다른 특정한 실시양태에서, 대상체는 미코박테리움 투베르쿨로시스에 노출되었거나 그에 감염되었다.

다른 특정한 실시양태는 미코박테리아 세포, 또는 미코박테리아 세포에 노출되었거나 그에 감염된 인간을 포함한 동물을 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 염인 제1 치료제와 접촉시키고, 임의로 미코박테리아 세포 또는 동물을 제2 치료제와 접촉시키고, 임의로 미코박테리아 세포 또는 동물을 제3 치료제와 접촉시키고, 임의로 미코박테리아 세포 또는 동물을 제4 치료제와 접촉시키고, 임의로 미코박테리아 세포 또는 동물을 제5 및/또는 제6 치료제와 접촉시켜, 접촉이 미코박테리아 세포의 복제를 억제하도록 하는 것을 포함하는, 미코박테리아 세포의 복제를 억제하는 방법을 제공한다. 특정한 실시양태에서, 제1 치료제는 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 염이고, 임의적인 제2, 제3, 제4, 제5 및/또는 제6 치료제는 항결핵제 또는 그의 염이다. 다른 특정한 실시양태에서, 대상체는 미코박테리움 투베르쿨로시스에 노출되었거나 그에 감염되었다.

6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 콜레스테롤-의존성 작용 방식은 특히 중요하다. 이러한 생물학적 프로파일은 화합물을 공지된 항결핵 약물 중에서 특별하게 만든다. 신규 경로를 표적화함으로써, 화합물은 임상 세팅에 존재하는 TB 저항성의 메카니즘을 우회하여, 결핵에 대한 새로운 치료 요법에 유용한 요소를 제공할 것으로 기대된다. 또한, 콜레스테롤 이화작용 경로를 표적화함으로써, 화합물은 표준 약물에 대해 불량하게 감수성인 바실루스의 하위-집단을 표적화하는 것이 가능할 수 있다. 따라서, 이러한 화합물은 또한 콜레스테롤을 분해하여 그것을 탄소 공급원으로서 사용할 수 있는 다른 박테리아에 대해 활성을 가질 수 있다.

구체적 실시양태의 상세한 설명

본원에 사용된 "동물"은 전형적으로 특화된 감각 기관 및 신경계를 갖고 자극에 대해 신속하게 반응할 수 있는, 유기 물질을 섭식하는 살아있는 유기체의 계 (동물계) 중 임의의 것을 의미한다. "동물"은 소, 양, 염소, 개 및 고양이를 포함한 가축 및 애완동물, 또는 면역-억제된 인간을 포함한 인간을 포함한다.

본원에 사용된 "포유동물"은 모발 또는 털의 보유, 및 암컷이 새끼, 및 (전형적으로) 갓 태어난 새끼의 영양을 위해 젖을 분비하는 것에 의해 구별되는 온혈 척추동물 부류의 동물을 의미한다.

본원에 사용된 "본 발명의 화합물"은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 지칭한다.

본원에 사용된 "본 발명의 조합물(들)"은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및 제2 치료제; 및 임의로 제3 치료제; 임의로 제4 치료제; 임의로 제5 치료제; 및 임의로 제6 치료제의 조합물을 지칭한다.

화합물, 그의 조합물 또는 그의 제제의 "유효"량은 양이 목적하는 국부 또는 전신 효과를 제공하는데 충분한, 그의 조합물 또는 제제를 포함한 활성제인 화합물의 양을 의미한다. "치료 유효" 또는 "제약 유효"량은 목적하는 치료 또는 제약 결과를 달성하는데 충분한, 그의 조합물 또는 제제를 포함한 화합물의 양을 지칭한다.

한 측면에서, 본 발명은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 염, 예를 들어 트리플루오로아세트산 염에 관한 것이다. 추가 측면에서, 본 발명은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 화합물의 제약상 허용되는 염에 관한 것이다.

용어 "제약상 허용되는 염"은 상대적으로 비독성인 산 또는 염기로 제조된 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 염을 포함하는 것으로 의도된다. 염기 부가염은 화합물의 중성 형태를 충분한 양의 목적하는 염기와, 순수한 또는 적합한 불활성 용매 중에서 접촉시킴으로써 수득될 수 있다. 제약상 허용되는 염기 부가염의 예는 나트륨, 칼륨, 칼슘, 암모늄, 유기 아미노 (예컨대 콜린 또는 디에틸아민 또는 아미노산 예컨대 d-아르기닌, l-아르기닌, d-리신 또는 l-리신) 또는 마그네슘 염 또는 유사한 염을 포함한다. 산 부가염은 화합물의 중성 형태를 충분한 양의 목적하는 산과, 순수한 또는 적합한 불활성 용매 중에서 접촉시킴으로써 수득될 수 있다. 제약상 허용되는 산 부가염의 예는 염산, 브로민화수소산, 질산, 탄산, 모노히드로겐탄산, 인산, 모노히드로겐인산, 디히드로겐인산, 황산, 모노히드로겐황산, 아이오딘화수소산 또는 아인산 등과 같은 무기 산으로부터 유래된 것, 뿐만 아니라 아세트산, 프로피온산, 이소부티르산, 말레산, 말론산, 벤조산, 숙신산, 수베르산, 푸마르산, 락트산, 만델산, 프탈산, 벤젠술폰산, p-톨릴술폰산, 시트르산, 타르타르산, 메탄술폰산 등과 같은 상대적으로 비독성인 유기 산으로부터 유래된 염을 포함한다. 또한, 아미노산 예컨대 아르기네이트 등의 염, 및 글루쿠론산 또는 갈락투론산 등과 같은 유기 산의 염이 포함된다 (예를 들어, 문헌 [Berge et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science 66: 1-19 (1977)] 참조).

본 발명의 한 실시양태에서, 제약상 허용되는 염은 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 히드르아이오다이드, 니트라이드, 카르보네이트, 모노히드로겐카르보네이트, 포스페이트, 모노히드로겐포스페이트, 디히드로겐포스페이트, 술페이트, 모노히드로겐술페이트, 디히드로겐술페이트 또는 포스포네이트 염으로부터 선택된다.

본 발명의 한 실시양태에서, 제약상 허용되는 염은 아세테이트, 프로피오네이트, 이소부티레이트, 말레에이트, 말로네이트, 벤조에이트, 숙시네이트, 수베레이트, 푸마레이트, 글루카로네이트, 갈락투로네이트, 락테이트, 만델레이트, 프탈레이트, 벤젠술포네이트, p-톨릴술포네이트, 시트레이트, 타르트레이트 또는 메탄술포네이트 염으로부터 선택된다.

화합물 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온은 화합물이 염기 또는 산 부가염으로 전환되게 하는 염기 및 산성 관능기 둘 다를 함유한다.

6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 중성 형태는 바람직하게는, 염을 염기 또는 산과 접촉시키고 통상적인 방식으로 모 화합물을 단리하는 것에 의해 재생성된다. 화합물의 모 형태는 다양한 염 형태와 특정 물리적 특성, 예컨대 극성 용매 중 용해도에서 상이하다.

화합물 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온은 수많은 상이한 호변이성질체 형태로 존재할 수 있다는 것이 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 인지될 것이다. 한 실시양태에서, 화합물은 화학 명칭 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온과 상이한 호변이성질체 형태로 존재한다. 또한, 화합물 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온은 아민 기를 보유하고, 또한 결과적으로, 내부 염으로도 공지되어 있는 쯔비터이온의 형태로 존재할 수 있다. 따라서, 한 실시양태에서, 화합물은 쯔비터이온 형태로 존재한다. 쯔비터이온 형태는 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 호변이성질체 형태로서 간주될 수 있다. 쯔비터이온의 예를 포함한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 호변이성질체의 예가 하기 도시된다.

본원에서 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온에 대한 언급은 그의 모든 호변이성질체, 및 또한 그의 2종 이상의 호변이성질체의 혼합물을 포괄하는 것으로 의도된다는 것이 이해되어야 한다.

화합물 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온은 결정질 또는 비-결정질 형태로 제조될 수 있고, 결정질인 경우 임의로 예를 들어 수화물로서 용매화될 수 있다. 용매화물은 화학량론적 용매화물 (예를 들어 수화물) 뿐만 아니라 가변량의 용매 (예를 들어 물)를 함유하는 화합물의 형태로 존재할 수 있다. 화합물 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온과 동일하지만 1개 이상의 원자가 자연에서 가장 통상적으로 발견되는 원자 질량 또는 질량수와 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자에 의해 대체된 동위원소-표지된 형태로 제조될 수 있다. 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 내로 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 플루오린, 아이오딘 및 염소의 동위원소 예컨대 ³H, ¹¹C, ¹⁴C, ¹⁸F, ¹²³I 또는 ¹²⁵I를 포함한다.

동위원소 표지된 화합물, 예를 들어 방사성 동위원소 예컨대 ³H 또는 ¹⁴C가 혼입된 것은 약물 및/또는 기질 조직 분포 검정에 유용하다. 삼중수소, 즉 ³H, 및 탄소-14, 즉 ¹⁴C 동위원소는 그의 제조의 용이성 및 검출감도로 인해 특히 바람직하다. ¹¹C 및 ¹⁸F 동위원소는 PET (양전자 방출 단층촬영)에 특히 유용하다.

본원에 기재된 바와 같은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온은 제약 조성물에서의 사용이 의도되기 때문에 바람직하게는 실질적으로 순수한 형태, 예를 들어 적어도 60% 순수, 보다 적합하게는 적어도 75% 순수 및 바람직하게는 적어도 85%, 특히 적어도 98% 순수한 형태로 제공된다는 것이 용이하게 이해될 것이다 (%는 중량 기준 중량임). 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 염의 불순한 제조물은 제약 조성물에 사용되는 보다 순수한 형태를 제조하기 위해 사용될 수 있다.

한 실시양태에서 본 발명은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 1종 이상의 제약상 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

본 발명의 또 다른 실시양태는 미코박테리아 감염의 치료를 필요로 하는 포유동물, 특히 인간에게 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염인 유효량의 제1 치료제를 투여하는 것을 포함하는, 포유동물, 특히 인간에서 미코박테리아 감염을 치료하는 방법을 추가로 제공한다. 관련 실시양태는 이러한 치료를 필요로 하는 포유동물에게 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염인 유효량의 제1 치료제를 투여하는 것, 임의로 유효량의 제2 치료제와 조합하여 투여하는 것, 임의로 유효량의 제3 치료제와 조합하여 투여하는 것, 임의로 유효량의 제4 치료제와 조합하여 투여하는 것, 임의로 유효량의 제5 치료제와 조합하여 투여하는 것, 임의로 유효량의 제6 치료제와 조합하여 투여하는 것을 추가로 포함한다.

관련 실시양태에서 임의적인 제2, 제3, 제4, 제5 및 제6 치료제는 항미코박테리아제이다. 관련 실시양태에서, 제1 치료제를 투여하는 것 및 임의로 제2, 제3, 제4, 제5 및 제6 치료제를 투여하는 것은 공동으로 이루어지거나, 또는 제1 치료제를 투여하는 것 및 임의로 제2, 제3, 제4, 제5 및 제6 치료제를 투여하는 것은 순차적으로 이루어진다. 본 발명의 다른 관련 실시양태에서, 제2, 제3, 제4, 제5 또는 제6 치료제 중 어느 하나는 항미생물제, 항바이러스제, 항감염제, 진통제, 비타민, 영양 보충제, 항염증제, 진통제, 및 스테로이드로부터 선택된다.

본 발명은 또한 포유동물, 특히 인간에서 미코박테리아 감염의 치료에 사용하기 위한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 1종 이상의 제약상 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한 포유동물, 특히 인간에서 미코박테리아 감염의 치료에 사용하기 위한 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 1종 이상의 제약상 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

특정한 실시양태에서, 미코박테리아 감염 및/또는 질환은 본 발명의 화합물 또는 조합물의 경구 투여를 통해 치료된다. 예시적 실시양태에서, 미코박테리아 감염 및/또는 질환은 본 발명의 화합물 또는 조합물의 정맥내 투여를 통해 치료된다.

제약 제제

한 실시양태에서, 본 발명은 (a) 제약상 허용되는 부형제; (b) 본 발명의 화합물 또는 조합물을 포함하는 제약 제제이다. 또 다른 실시양태에서, 제약 제제는 (a) 제약상 허용되는 부형제; 및 (b) 본원에 기재된 화합물 또는 조합물을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 제약 제제는 (a) 제약상 허용되는 부형제; 및 (b) 본원에 기재된 화합물 또는 조합물, 또는 그의 염을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 제약 제제는 (a) 제약상 허용되는 부형제; 및 (b) 본원에 기재된 화합물 또는 조합물, 또는 그의 염을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 제약 제제는 (a) 제약상 허용되는 부형제; 및 (b) 본원에 기재된 화합물 또는 조합물, 또는 그의 염을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 제약 제제는 (a) 제약상 허용되는 부형제; 및 (b) 본원에 기재된 화합물 또는 조합물의 염을 포함한다. 예시적 실시양태에서, 염은 제약상 허용되는 염이다. 또 다른 실시양태에서, 제약 제제는 (a) 제약상 허용되는 부형제; 및 (b) 본원에 기재된 화합물 또는 조합물을 포함한다. 예시적 실시양태에서, 제약 제제는 단위 투여 형태이다. 예시적 실시양태에서, 제약 제제는 단일 단위 투여 형태이다.

예시적 실시양태에서, 제약 제제는 단위 투여 형태이다. 예시적 실시양태에서, 제약 제제는 단일 단위 투여 형태이다. 예시적 실시양태에서, 제약 제제는 2개의 단위 투여 형태이다. 예시적 실시양태에서, 제약 제제는 3개의 단위 투여 형태이다. 예시적 실시양태에서, 제약 제제는 4개의 단위 투여 형태이다. 예시적 실시양태에서, 제약 제제는 5개의 단위 투여 형태이다. 예시적 실시양태에서, 제약 제제는 6개의 단위 투여 형태이다. 예시적 실시양태에서, 제약 제제는 제1 단위 투여 형태 및 제2, 제3, 제4, 제5 및/또는 제6 단위 투여 형태를 포함하는 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개의 단위 투여 형태이며, 여기서 제1 단위 투여 형태는 a) 치료 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 및 b) 제1 제약상 허용되는 부형제를 포함하고; 제2, 제3, 제4, 제5, 및/또는 제6 단위 투여 형태는 c) 치료상 허용되는 양의 항미코박테리아제인 추가의 치료제 및 d) 제2 제약상 허용되는 부형제를 포함한다.

본 발명의 제제에 유용한 부형제에 관한 정보는 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Pharmaceutical Press (2011)]에서 확인할 수 있고, 이는 본원에 참조로 포함된다.

조합물

예시적 실시양태에서, 본 발명은 a) 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온인 제1 치료제; b) 제2 치료 활성을 제공한다. 특정 실시양태에서, 제2 치료제는 항박테리아제, 보다 구체적으로 항결핵제, 보다 구체적으로 항-엠. 투베르쿨로시스 작용제이다.

예시적 실시양태에서, 조합물은 본원에 기재된 제약 제제의 일부이다. 이러한 상태는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지되어 있고, 특정 상태가 본원에 첨부된 실시예에 제시된다.

화합물 또는 그의 조합물의 투여 형태

본 발명의 화합물의 개별 성분 또는 본 발명의 조합물, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 조합물은 동시에 또는 순차적으로 단위 투여 형태로 투여될 수 있다. 단위 투여 형태는 단일 또는 다중 단위 투여 형태일 수 있다. 예시적 실시양태에서, 본 발명은 단일 단위 투여 형태의 화합물 또는 조합물을 제공한다. 단일 단위 투여 형태의 예는 캡슐이고, 여기서 본 발명의 화합물 또는 본 발명의 화합물과 추가의 치료제 둘 다는 동일한 캡슐 내에 함유된다. 예시적 실시양태에서, 본 발명은 2개의 단위 투여 형태의 조합물을 제공한다. 2개의 단위 투여 형태의 예는 본 발명의 화합물을 함유하는 제1 캡슐 및 추가의 치료제를 함유하는 제2 캡슐이다. 따라서 용어 '단일 단위' 또는 '2개의 단위' 또는 '다중 단위'는 대상의 내부 성분이 아닌 환자가 섭취하는 대상을 지칭한다. 본 발명의 화합물의 적절한 용량은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 인지될 것이다. 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염 이외의 것인 추가의 치료제의 적절한 용량은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 인지될 것이다. 하나의 특정한 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 치료 유효량으로 단독으로 또는 조합되어 존재한다. 하나의 특정한 실시양태에서, 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 이외의 추가의 치료제는 엠. 투베르쿨로시스를 포함한, 본 발명의 화합물에 노출된 미코박테리아를 사멸시키거나 또는 그의 존재, 양 또는 성장 속도를 감소시키기에 충분한 양으로 조합되어 존재한다.

본 발명의 조합물, 예를 들어 본원에 기재된 조합물은 또한 추가의 치료제 또는 치료제들을 포함할 수 있다. 본 발명은 따라서, 추가 실시양태에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 적어도 1종의 추가의 치료제를 포함하는 조합물을 제공한다. 본 발명은 따라서, 추가 실시양태에서, 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 적어도 1종의 추가의 치료제를 포함하는 조합물을 제공한다. 예시적 실시양태에서, 추가의 치료제는 항미코박테리아제이다. 한 실시양태에서, 본 발명은 a) 본 발명의 조합물; 및 b) 적어도 1종의 추가의 치료제를 포함한다. 또 다른 예시적 실시양태에서, 본 발명은 a) 본 발명의 조합물; b) 제1 추가의 치료제; 및 c) 제2 추가의 치료제를 포함한다. 또 다른 예시적 실시양태에서, 본 발명은 a) 본 발명의 조합물; b) 제1 추가의 치료제; c) 제2 추가의 치료제; 및 d) 제3 추가의 치료제를 포함한다. 제1 추가의 치료제 또는 제2 추가의 치료제 또는 제3 추가의 치료제는 본원에 기재된 추가의 치료제로부터 선택될 수 있다.

본 발명의 화합물 또는 조합물은 제약 제제의 형태로의 사용을 위해 편리하게 제시될 수 있다. 본 발명의 추가 실시양태에서 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을, 1종 이상의 추가의 치료제, 및 1종 이상의 제약상 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제와 함께 포함하는 제약 조합물이 제공된다. 이러한 조합물의 개별 성분은 임의의 편리한 경로에 의해 개별 또는 조합된 제약 제제로 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있다.

추가의 치료제가 동일한 질환 상태에 대해 본원에 기재된 바와 같은 조합물과 함께 사용되는 경우, 각각의 화합물의 용량은 화합물이 단독으로 사용될 때와 상이할 수 있다. 적절한 용량은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 인지될 것이다. 치료에 사용하기 위해 요구되는 본원에 기재된 바와 같은 화합물의 양은, 치료할 상태의 속성 및 환자의 연령 및 상태에 따라 달라질 것이고, 궁극적으로 담당 의사 또는 수의사의 재량에 달려있을 것임이 인지될 것이다.

조성물 및 제제

화합물 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염은, 항미코박테리아제 제제 또는 다른 항결핵제 제제에서 유추하여, 인간 또는 수의학적 의약으로의 사용을 위해 임의의 편리한 방법으로의 투여를 위해 제제화될 수 있다.

화합물 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염은, 반드시 그러하지는 않지만, 통상적으로 환자에게의 투여 전에 제약 조성물로 제제화될 것이다. 한 실시양태에서, 본 발명은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 제약상 허용되는 염을 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다. 또 다른 실시양태에서 본 발명은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 1종 이상의 제약상 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다. 담체, 부형제 또는 희석제는 제제의 다른 성분과 상용성이고 그의 수용자에게 유해하지 않다는 의미에서 "허용"되어야 한다.

본원에 기재된 제약 조성물은 경구 또는 비경구 사용에 적합화된 형태의 것을 포함하고, 인간을 포함한 포유동물에서 미코박테리아 감염의 치료에 사용될 수 있다.

본원에 기재된 제약 조성물은 경구 또는 비경구 사용에 적합화된 형태의 것을 포함하고, 인간을 포함한 포유동물에서 미코박테리아 감염들의 치료에 사용될 수 있다.

조성물은 임의의 편리한 경로에 의한 투여를 위해 제제화될 수 있다. 결핵의 치료를 위해, 조성물은 정제, 캡슐, 분말, 과립, 로젠지, 에어로졸 또는 액체 제제, 예컨대 경구 또는 멸균 비경구 용액 또는 현탁액 형태일 수 있다.

경구 투여를 위한 정제 및 캡슐은 단위 투여 제시 형태일 수 있고, 통상적인 부형제, 예컨대 결합제, 예를 들어 시럽, 아카시아, 젤라틴, 소르비톨, 트라가칸트 또는 폴리비닐피롤리돈; 충전제, 예를 들어 락토스, 당, 옥수수-전분, 인산칼슘, 소르비톨 또는 글리신; 정제화 윤활제, 예를 들어 스테아르산 마그네슘, 활석, 폴리에틸렌 글리콜 또는 실리카; 붕해제, 예를 들어 감자 전분; 또는 허용되는 습윤제, 예컨대 소듐 라우릴 술페이트를 함유할 수 있다. 정제는 통상적 제약 실시에서 널리 공지된 방법에 따라 코팅될 수 있다. 경구 액체 제제는, 예를 들어 수성 또는 유성 현탁액, 용액, 에멀젼, 시럽 또는 엘릭시르 형태일 수 있거나, 또는 사용 전에 물 또는 다른 적합한 비히클로 재구성하기 위한 건조 생성물로서 제공될 수 있다. 이러한 액체 제제는 통상적인 첨가제, 예컨대 현탁화제, 예를 들어 소르비톨, 메틸 셀룰로스, 글루코스 시럽, 젤라틴, 히드록시에틸 셀룰로스, 카르복시메틸 셀룰로스, 스테아르산알루미늄 겔 또는 수소화 식용 지방, 유화제, 예를 들어 레시틴, 소르비탄 모노올레에이트 또는 아카시아; 비-수성 비히클 (이는 식용 오일을 포함할 수 있음), 예를 들어 아몬드 오일, 유성 에스테르, 예컨대 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 에틸 알콜; 보존제, 예를 들어 메틸 또는 프로필 p-히드록시벤조에이트 또는 소르브산, 및 원하는 경우에, 통상적인 향미제 또는 착색제를 함유할 수 있다.

좌제는 통상적인 좌제 베이스, 예를 들어 코코아-버터 또는 다른 글리세리드를 함유할 것이다.

비경구 투여를 위해, 유체 단위 투여 형태는 화합물 및 멸균 비히클을 사용하여 제조되며, 물이 바람직하다. 화합물은 사용되는 비히클 및 농도에 따라 비히클 중에 현탁 또는 용해될 수 있다. 용액의 제조에 있어서, 화합물은 주사용수 중에 용해될 수 있고, 여과 멸균된 후에 적합한 바이알 또는 앰플에 충전 및 밀봉될 수 있다.

작용제 예컨대 국부 마취제, 보존제 및 완충제가 비히클 중에 용해될 수 있다. 안정성을 증진시키기 위해, 조성물은 바이알 내에 충전되고 물이 진공 하에 제거된 후에 동결될 수 있다. 이어서, 건조 동결건조된 분말을 바이알 내에 밀봉하고, 주사용수를 동반하는 바이알을 공급하여 사용 전에 액체를 재구성할 수 있다. 비경구 현탁액은 화합물을 비히클 중에 용해시키는 대신 현탁시키고, 멸균이 여과에 의해 달성될 수 없다는 것을 제외하고는, 실질적으로 동일한 방식으로 제조된다. 화합물을 에틸렌 옥시드에 노출시켜 멸균시킨 후에 멸균 비히클 중에 현탁시킬 수 있다. 유리하게는, 계면활성제 또는 습윤제가 조성물에 포함되어 화합물의 균일한 분포를 용이하게 한다.

조성물은 투여 방법에 따라 0.1 중량％, 바람직하게는 10-60 중량％의 활성 물질을 함유할 수 있다. 조성물이 투여 단위를 포함하는 경우에, 각각의 단위는 바람직하게는 20-1000 mg의 활성 성분을 함유할 것이다. 성인인 인간의 치료를 위해 사용되는 투여량은 전형적으로, 투여 경로 및 빈도에 따라 1일에 50 내지 300 mg, 예를 들어 1일에 150 내지 200 mg 범위일 것이다. 이러한 투여량은 1일에 0.5 내지 5 mg/kg에 상응한다. 바람직하게는 투여량은 1일에 0.5 내지 2 mg/kg이고, 보다 바람직하게는 용량은 1일에 1 mg/kg 미만이다.

6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 용매화물은 본원에 기재된 조성물 중 단독 치료제일 수 있거나, 또는 이는 제제 중 1종 이상의 추가의 치료제와 조합되어 존재할 수 있다. 본 발명은 따라서, 추가 실시양태에서, 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 1종 이상의 추가의 치료제와 함께 포함하는 조합물을 제공한다.

1종 이상의 추가의 치료제는, 예를 들어, 포유동물에서 결핵의 치료에 유용한 작용제이다. 이러한 치료제의 예는 리팜핀, 피라진아미드, 에탐부톨, 목시플록사신, 리파펜틴, 클로파지민, 베다퀼린 (TMC207), 니트로이미다조-옥사진 PA-824, 델라마니드 (OPC-67683), OPC-167832, 옥사졸리디논 예컨대 리네졸리드, 테디졸리드, 라데졸리드, 수테졸리드 (PNU-100480) 및 포시졸리드 (AZD-5847), EMB (에탐부톨) 유사체 SQ109, 벤조티아지논, 디니트로벤즈아미드, 및 항레트로바이러스제를 포함한 항바이러스제, 또는 IIa상 EBA 시험에서 양성 반응을 갖는 TB의 치료를 위해 개발된 임의의 TB 작용제, 또는 결핵을 위해 글로벌 얼라이언스(Global Alliance)에 의해 개발 중인 임의의 TB 작용제를 포함한다.

6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 용매화물이 1종 이상의 추가의 치료제와 조합되어 사용되는 경우에, 화합물 또는 작용제의 용량은 화합물 또는 작용제가 단독으로 사용될 때와 상이할 수 있다. 적절한 용량은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 인지될 것이다. 치료에 사용하기 위해 요구되는 본원에 기재된 화합물 및 1종 이상의 추가의 치료제의 양은, 치료할 상태의 속성 및 환자의 연령 및 상태에 따라 달라질 것이고, 궁극적으로 담당 의사 또는 수의사의 재량에 달려있을 것임이 인지될 것이다.

조합물은 제약 제제의 형태로의 사용을 위해 편리하게 제공될 수 있다. 본 발명의 추가 실시양태에서 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 1종 이상의 추가의 치료제, 및 1종 이상의 제약상 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제와 함께 포함하는 제약 조합물이 제공된다. 이러한 조합물의 개별 성분은 임의의 편리한 경로에 의해 개별 또는 조합된 제약 제제로 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있다.

투여가 순차적인 경우에, 본 발명의 화합물 또는 1종 이상의 추가의 치료제 중 어느 하나가 먼저 투여될 수 있다. 투여가 동시인 경우에, 조합물은 동일하거나 상이한 제약 조성물로 투여될 수 있다. 동일한 제제 중에 조합된 경우에, 화합물 및 작용제는 서로 및 제제의 다른 성분에 대해 안정하고 그와 상용성이어야 하는 것으로 인지될 것이다. 개별적으로 제제화된 경우에, 이들은 편리하게는 이러한 화합물에 대해 관련 기술분야에 공지된 바와 같은 방식으로 임의의 편리한 제제로 제공될 수 있다.

박테리아 성장의 억제 또는 박테리아의 사멸 방법

본 발명의 화합물 또는 조합물은 미코박테리아에 대해 효력을 나타내어, 미코박테리아를 사멸시키고/거나 미코박테리아의 복제를 억제하는 잠재력을 가질 것으로 예상된다. 본 발명의 화합물 또는 조합물은 표준 관리 항미코박테리아제에 대한 저항성을 보유하는 미코박테리아에 대해 효력을 나타내어, 미코박테리아를 사멸시키고/거나 이러한 "저항성" 미코박테리아의 복제를 억제하는 잠재력을 가질 것으로 예상된다. 본 발명의 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물은 콜레스테롤-함유 배지에서의 시험 시 MDR-TB (다중약물 저항성 TB) 임상 분리주를 포함한 약물-감수성 미코박테리아 분리주의 선택에 대해 유의한 활성을 보유한다.

추가 실시양태에서, 본 발명은 동물 예컨대 소, 양, 염소, 개 및 고양이를 포함한 가축 및 애완동물, 또는 면역-억제된 인간을 포함한 인간에서 미코박테리아를 사멸시키고/거나 미코박테리아의 복제를 억제하는 방법 또는 미코박테리아 감염을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 미코박테리아를 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조합물과 접촉시켜 미코박테리아를 사멸시키고/거나 미코박테리아의 복제를 억제하는 것을 포함하거나, 또는 상기 방법은 미코박테리아에 감염된 동물에게 치료 유효량의 본 발명의 화합물 또는 조합물을 투여하는 것을 포함하며, 여기서 조합물은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다. 예시적 실시양태에서, 화합물 또는 조합물은 본원에 기재된 제약 제제의 일부이다. 또 다른 예시적 실시양태에서, 접촉시키는 것은 화합물 또는 조합물이 미코박테리움 내로 진입하는 것을 허용하는 조건 하에 이루어진다.

예시적 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조합물의 경구 투여를 통해, 미코박테리아는 사멸되거나, 그의 복제가 억제되거나, 또는 미코박테리아 감염이 치료된다. 예시적 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조합물의 정맥내 투여를 통해, 미코박테리아는 사멸되거나, 그의 복제가 억제되거나, 또는 미코박테리아 감염이 치료된다. 예시적 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 조합물의 피하 투여를 통해, 미코박테리움은 사멸되거나, 그의 복제가 억제되거나, 또는 미코박테리아 감염이 치료되며, 여기서 조합물은 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다.

예시적 실시양태에서, 임의적인 제3, 제4, 제5 및 제6 치료제 중 어느 1종 초과에 대해 저항성을 부여하는 돌연변이를 갖는 저항성 미코박테리움을 포함한 미코박테리아 집단에서, 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 염인 제1 치료제, 및 제2 치료제를 포함하고, 임의로 제3, 제4, 제5 및 제6 치료제를 포함하는 본원에 기재된 바와 같은 조합물과 미코박테리움이 접촉되거나, 또는 그에 의해 미코박테리아 감염이 치료된다. 관련 실시양태에서, 임의적인 제3, 제4, 제5 및 제6 치료제, 또는 그의 염은 항미코박테리아제, 특히 공지된 항미코박테리아제, 보다 바람직하게는 표준 관리 항미코박테리아제이다.

또 다른 예시적 실시양태에서, 미코박테리아를 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 염과 접촉시켜 미코박테리움을 사멸시키고/거나 그의 복제를 방지하는 것, 또는 동물에게 치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 또는 그의 염을 투여하는 것을 포함하는, 동물에서 질환을 유발하거나 또는 그러한 질환과 연관된 미코박테리아를 사멸시키고/거나 그의 복제를 억제하는 방법, 또는 동물에서 미코박테리아 감염을 치료하는 방법이 제공되며, 여기서 미코박테리움은 미코박테리움 투베르쿨로시스, 미코박테리움 아비움 아종 아비움, 미코박테리움 아비움 아종 호미니수이스, 미코박테리움 아비움 아종 실바티쿰, 및 미코박테리움 아비움 아종 파라투베르쿨로시스를 포함한 미코박테리움 아비움 아종 (subsp.); 미코박테리움 발네이(Mycobacterium balnei), 미코박테리움 세리시이(Mycobacterium sherrisii), 미코박테리움 아프리카눔, 미코박테리움 미크로티, 미코박테리움 실바티쿰, 미코박테리움 콜롬비엔세(Mycobacterium colombiense), 미코박테리움 인디쿠스 프라니이(Mycobacterium indicus pranii), 미코박테리움 가스트리(Mycobacterium gastri), 미코박테리움 고르도나에, 미코박테리움 히베르니아에(Mycobacterium hiberniae), 미코박테리움 논크로마게니쿰(Mycobacterium nonchromagenicum), 미코박테리움 테라에(Mycobacterium terrae), 미코박테리움 트리비알(Mycobacterium trivial), 미코박테리움 칸사시이; 미코박테리움 말모엔세; 미코박테리움 시미아에; 미코박테리움 트리플렉스(Mycobacterium triplex), 미코박테리움 게나벤세(Mycobacterium genavense), 미코박테리움 플로렌티눔(Mycobacterium florentinum), 미코박테리움 렌티플라붐(Mycobacterium lentiflavum), 미코박테리움 팔루스트레(Mycobacterium palustre), 미코박테리움 쿠비카에(Mycobacterium kubicae), 미코박테리움 파라스크로풀라세움(Mycobacterium parascrofulaceum), 미코박테리움 헤이델베르겐세(Mycobacterium heidelbergense), 미코박테리움 인테르젝툼(Mycobacterium interjectum), 미코박테리움 스줄가이; 미코박테리움 브란데리(Mycobacterium branderi), 미코박테리움 쿠키에(Mycobacterium cookie), 미코박테리움 셀라툼(Mycobacterium celatum), 미코박테리움 보헤미쿰(Mycobacterium bohemicum), 미코박테리움 하에모필룸, 미코박테리움 레프라에무리움(Mycobacterium lepraemurium), 미코박테리움 레프로마토시스(Mycobacterium lepromatosis), 미코박테리움 보트니엔세(Mycobacterium botniense), 미코박테리움 키마에라(Mycobacterium chimaera), 미코박테리움 콘스피쿠움(Mycobacterium conspicuum), 미코박테리움 도리쿰(Mycobacterium doricum), 미코박테리움 포르시노게네스(Mycobacterium forcinogenes), 미코박테리움 헥케스호르넨세(Mycobacterium heckeshornense), 미코박테리움 라쿠스(Mycobacterium lacus), 미코박테리움 모나센세(Mycobacterium monacense), 미코박테리움 몬테피오렌세(Mycobacterium montefiorense), 미코박테리움 무랄레(Mycobacterium murale), 미코박테리움 네브라스켄세(Mycobacterium nebraskense), 미코박테리움 사스카트체와네네세(Mycobacterium saskatchewanenese), 미코박테리움 스크로풀라세움, 미코박테리움 시모이델(Mycobacterium shimoidel), 미코박테리움 투스시아에(Mycobacterium tusciae), 미코박테리움 크세노피, 미코박테리움 인테르메디움(Mycobacterium intermedium), 미코박테리움 볼레티이(Mycobacterium bolletii), 미코박테리움 포르투이툼, 미코박테리움 포르투이툼 아종 아세타미돌리티쿰(Mycobacterium foruitum subsp. acetamidolyticum), 미코박테리움 보에닉케이(Mycobacterium boenickei), 미코박테리움 페레그리눔(Mycobacterium peregrinum), 미코박테리움 포르시눔(Mycobacterium porcinum), 미코박테리움 세네갈렌세(Mycobacterium senegalense), 미코박테리움 셉티쿰(Mycobacterium septicum), 미코박테리움 뉴올레안센세(Mycobacterium neworleansense), 미코박테리움 호우스토넨세(Mycobacterium houstonense), 미코박테리움 뮤코게니쿰(Mycobacterium mucogenicum), 미코박테리움 마게리텐세(Mycobacterium mageritense), 미코박테리움 브리스바넨세(Mycobacterium brisbanense), 미코박테리움 코스메티쿰(Mycobacterium cosmeticum), 미코박테리움 파라포르투이툼(Mycobacterium parafortuitum), 미코박테리움 아우스트로아프리카눔(Mycobacterium austroafricanum), 미코박테리움 디에른호페리(Mycobacterium diernhoferi), 미코박테리움 호디에리(Mycobacterium hodieri), 미코박테리움 네오아우룸(Mycobacterium neoaurum), 미코박테리움 프레데르키스베르겐세(Mycobacterium prederkisbergense), 미코박테리움 아우룸(Mycobacterium aurum), 미코박테리움 바카에, 미코박테리움 치타에(Mycobacterium chitae), 미코박테리움 팔락스(Mycobacterium fallax), 미코박테리움 콘플루엔티스(Mycobacterium confluentis), 미코박테리움 플라베센스(Mycobacterium flavescens), 미코박테리움 마다가스카리엔세(Mycobacterium madagascariense), 미코박테리움 플레이(Mycobacterium phlei), 미코박테리움 스메그마티스(Mycobacterium smegmatis), 미코박테리움 구디에(Mycobacterium goodie), 미코박테리움 올린스키(Mycobacterium wolinski), 미코박테리움 테르모레시스트빌레(Mycobacterium thermoresistbile), 미코박테리움 가디움(Mycobacterium gadium), 미코박테리움 코르모스센세(Mycobacterium kormossense), 미코박테리움 오부엔세(Mycobacterium obuense), 미코박테리움 스파그니(Mycobacterium sphagni), 미코박테리움 아그리(Mycobacterium agri), 미코박테리움 아이시엔세(Mycobacterium aichiense), 미코박테리움 알베이(Mycobacterium alvei), 미코박테리움 아루펜세(Mycobacterium arupense), 미코박테리움 브루마에(Mycobacterium brumae), 미코박테리움 카나리아센세(Mycobacterium canariasense), 미코박테리움 추부엔세(Mycobacterium chubuense), 미코박테리움 콘셉티오넨세(Mycobacterium conceptionense), 미코박테리움 두발리이(Mycobacterium duvalii), 미코박테리움 엘레판티스(Mycobacterium elephantis), 미코박테리움 길붐(Mycobacterium gilvum), 미코박테리움 하시아쿰(Mycobacterium hassiacum), 미코박테리움 홀사티쿰(Mycobacterium holsaticum), 미코박테리움 이무노게눔(Mycobacterium immunogenum), 미코박테리움 마실리엔세(Mycobacterium massiliense), 미코박테리움 모리오카엔세(Mycobacterium moriokaense), 미코박테리움 프시크로톨레란스(Mycobacterium psychrotolerans), 미코박테리움 피레니보란스(Mycobacterium pyrenivorans), 미코박테리움 반바알레니이(Mycobacterium vanbaalenii), 미코박테리움 풀베리스(Mycobacterium pulveris), 미코박테리움 아로시엔세(Mycobacterium arosiense), 미코박테리움 아우바그넨세(Mycobacterium aubagnense), 미코박테리움 카프라에, 미코박테리움 클로로페놀리쿰(Mycobacterium chlorophenolicum), 미코박테리움 플루오로안테니보란스(Mycobacterium fluoroanthenivorans), 미코박테리움 쿠마모토넨세(Mycobacterium kumamotonense), 미코박테리움 노보카스트렌세(Mycobacterium novocastrense), 미코박테리움 파르멘세(Mycobacterium parmense), 미코박테리움 포카이쿰(Mycobacterium phocaicum), 미코박테리움 포리페라에(Mycobacterium poriferae), 미코박테리움 로데시아에(Mycobacterium rhodesiae), 미코박테리움 세오울렌세(Mycobacterium seoulense), 미코박테리움 토칼렌세(Mycobacterium tokalense), 미코박테리움 크세노피; 미코박테리움 스크로풀라세움; 미코박테리움 압세수스; 미코박테리움 켈로나에; 미코박테리움 하에모필룸; 미코박테리움 레프라에; 미코박테리움 마리눔; 미코박테리움 포르투이툼; 미코박테리움 보비스; 미코박테리움 울세란스; 미코박테리움 프세우도쇼트시이(Mycobacterium pseudoshottsii), 미코박테리움 쇼트시이(Mycobacterium shottsii), 미코박테리움 인트라셀룰라레; 미코박테리움 투베르쿨로시스 복합체 (MTC); 미코박테리움 아비안-인트라셀룰라레 복합체 (MAIC) 구성원 및 미코박테리움 아비움 복합체 (MAC) 구성원으로부터 선택된다.

관련 실시양태에서, 미코박테리움은 미코박테리움 투베르쿨로시스이다. 다른 실시양태에서, 미코박테리움은 미코박테리움 아비움, 미코박테리움 칸사시이, 미코박테리움 말모엔세, 미코박테리움 시미아에, 미코박테리움 스줄가이, 미코박테리움 크세노피, 미코박테리움 스크로풀라세움, 미코박테리움 압세수스, 미코박테리움 켈로나에, 미코박테리움 하에모필룸, 미코박테리움 레프라에, 미코박테리움 마리눔, 엠. 포르투이툼, 미코박테리움 보비스, 엠. 보비스 BCG, 엠. 아프리카눔, 엠. 카네티, 엠. 카프라에, 엠. 미크로티, 엠. 핀니페디, 또는 미코박테리움 울세란스이다. 관련 실시양태에서, 미코박테리움은 미코박테리움 아비움 아종 아비움, 미코박테리움 아비움 아종 호미니수이스, 미코박테리움 아비움 아종 실바티쿰, 및 미코박테리움 아비움 아종 파라투베르쿨로시스를 포함한 미코박테리움 아비움의 아종 (subsp.)이다. 또 다른 관련 실시양태에서, 미코박테리움은 미코박테리움 인트라셀룰라레이다. 추가의 관련 실시양태에서, 미코박테리움은 미코박테리움 투베르쿨로시스 복합체 (MTC) 미코박테리움 아비움 복합체 (MAC) 또는 미코박테리움 아비안-인트라셀룰라레 복합체 (MAIC)의 구성원이다. 관련 실시양태에서, 미코박테리움은 미코박테리움 아비움 복합체; 미코박테리움 고르도나에 계통군; 미코박테리움 칸사시이 계통군; 미코박테리움 켈로나에 계통군; 미코박테리움 포르투이툼 계통군; 미코박테리움 파라포르투이툼 계통군; 및 미코박테리움 바카에 계통군을 포함한 비-투베르쿨로시스 복합체 또는 계통군이다.

예시적 실시양태에서, 본원에 기재된 방법에서 미코박테리움은 저항성 미코박테리움을 포함한다. 예시적 실시양태에서, 저항성 미코박테리움은 본원에 기재된 미코박테리움의 돌연변이이다. 또 다른 실시양태에서, 미코박테리아 감염은 탄소 공급원으로서 콜레스테롤을 사용할 수 있는 미코박테리움의 감염이다.

질환의 치료 및/또는 예방 방법

본 발명의 화합물 또는 조합물은 미코박테리아에 대해 효력을 나타내고, 따라서 인간을 포함한 동물에서 치료 효능을 달성할 잠재력을 갖는다.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공한다. 방법은 동물에게 질환을 치료 및/또는 예방하기에 충분한 본 발명의 화합물 또는 조합물의 치료 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 예시적 실시양태에서, 본 발명의 화합물 또는 조합물은 인간 또는 수의학적 의료 요법, 특히 미코박테리아-연관 질환의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다.

또 다른 예시적인 실시양태에서, 동물은 본원에 정의된 바와 같다. 또 다른 예시적인 실시양태에서, 질환은 전신 질환 또는 피부 질환이다. 또 다른 예시적인 실시양태에서, 질환은 호흡기 질환이다. 또 다른 예시적인 실시양태에서, 질환은 결핵이다.

화합물 제조

화합물 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 및 그의 염을 합성하는데 사용될 수 있는 일반적 절차가 반응식 1에 요약되고, 실시예 1a 및 1b에 예시된다.

반응식 1

약어

본 발명을 기재하는데 있어서, 화학 원소는 원소 주기율표에 따라 확인된다. 본원에서 사용되는 약어 및 기호는 화학 기술분야의 통상의 기술자에 의한 이러한 약어 및 기호의 통상의 용법에 따른다. 하기 약어가 본원에 사용된다:

실시예

하기 실시예는 본 발명을 예시한다. 이들 실시예는 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않고, 오히려 통상의 기술자에게 본 발명의 화합물, 조성물 및 방법을 제조 및 사용하는 지침을 제공하는 것으로 의도된다. 본 발명의 특정한 실시양태가 기재되어 있지만, 통상의 기술자는 다양한 변화 및 변형이 이루어질 수 있다는 것을 인지할 것이다. 다른 제조법과 유사한 방식으로 또는 그의 일반적 방법에 의해 수행되는 제조법에 대한 언급은 시간, 온도, 후처리 조건, 시약 양에서의 소량의 변화 등과 같은 상용 파라미터에서의 변동을 포괄할 수 있다.

양성자 핵 자기 공명 (¹H NMR) 스펙트럼을 기록하였고, 화학적 이동은 용매 참조물 (DMSO-d6 = 2.50, CDCl₃ = 7.27) 대비 백만분율 (δ)로 보고된다. NMR 데이터에 대한 약어는 다음과 같다: s = 단일선, d = 이중선, t = 삼중선, q = 사중선, m = 다중선, dd = 이중선의 이중선, dt = 삼중선의 이중선, app = 겉보기, br = 넓음. 질량 스펙트럼은 전기분무 (ES) 이온화 기술을 사용하여 수득하였다. 모든 온도는 섭씨 온도로 보고된다.

실시예 1a: 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 합성

2,3-디메틸페놀 (2.14 g, 1.0 당량), tert-부틸 4-((메틸술포닐)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트 (10.04 g, 1.6 당량), 및 탄산세슘 (14.6 g, 2.0 당량)을 N,N-디메틸 포름아미드 (400 mL) 중에 용해시키고, 생성된 용액을 90℃로 20시간에 걸쳐 가열하였다. 이어서, 용매를 증발시키고, 생성된 슬러리를 디클로로메탄 (250 mL) 및 3M 수성 수산화나트륨 (250 mL)으로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 디클로로메탄 (250 mL x2)으로 2회 추출하였다. 합한 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 조 오일을 수득하였다. 이 오일을 부분적으로 칼럼 크로마토그래피 (0-10% 에틸 아세테이트:시클로헥산 구배를 사용하여 용리함)에 의해 정제하였다. 용매를 목적 분획으로부터 증발에 의해 제거한 다음, 다시 디클로로메탄 (150 mL) 및 3M 수산화나트륨 (150 mL)으로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 디클로로메탄 (2x150 mL)으로 2회 추출하였다. 합한 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 tert-부틸 4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-카르복실레이트 및 제거 부산물 tert-부틸 5,6-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트의 ~2:1 혼합물을 수득하였다. 이 혼합물을 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.

상기 언급된 혼합물을 메탄올 중 3M 염산 용액 (25 mL) 중에 용해시켰다. 박층 크로마토그래피 및 NMR 분취물 분석에 의해 출발 물질의 완전한 전환이 관찰될 때까지 반응물을 실온에서 7시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시킨 후, 생성된 조 고체를 디클로로메탄 (100 mL) 및 1M 수성 수산화나트륨 (100 mL)으로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 디클로로메탄 (4x100 mL)으로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 조 오일을 수득하였다. 오일을 고진공 하에 1.5시간 동안 둔 후에도 미량의 불순물이 여전히 검출되었다. 샘플을 디클로로메탄 (100 mL) 및 2M 수성 수산화나트륨 (100 mL)으로 희석하였다. 수성 층을 분리하고, 디클로로메탄 (2x100 mL)으로 2회 추출하였다. 합한 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘 (2.93 g, 정량적 수율)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.03 (1H, t, J = 7.8 Hz), 6.78 (1H, d, J = 7.3 Hz), 6.74 (1H, d, J, = 8.1 Hz), 4.35 (1H, m), 3.15 (2H, ddd, J = 3.8, 6.3, 12.4 Hz), 2.74 (2H, ddd, J = 3.3, 8.8, 12.4 Hz), 2.28 (3H, s), 2.18 (3H, s), 2.00 (2H, m), 1.72 (2H, m), 1.58 (1H, bs).

6-(클로로메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 (2.5 g, 1.1 당량), 4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘 (2.93 g, 1.0 당량) 및 CH₃CN (15 mL/gr)을 플라스크에 넣었다. Et₃N (3.95 mL, 2 당량)을 현탁액에 첨가하고, 혼합물을 환류 하에 2.5시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 고체를 NaOH (0.5 M, 15 mL), 과량의 6-(클로로메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온, H₂O (3x15 mL) 및 Et₂O (2x15 mL)로 세척하여 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온을 96% 수율로 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 6.98 (1H, t, J = 8.1 Hz), 6.77 (1H, d, J = 8.1 Hz), 6.73 (1H, d, J = 7.6 Hz), 4.49 (1H, m), 2.76 (2H, m), 2.45 (2H, m), 2.24 (3H, s), 2.15 (3H, s), 2.01 (2H, m), 1.86 (2H, m).

실시예 1b: 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온의 합성

6-(클로로메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온 (166 g, 1034 mmol, 1.0 당량) 및 4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘, 히드로클로라이드 (250 g, 1034 mmol, 1.0 당량)를 10L 재킷 유리 용기 내의 CH₃CN (3 L) 중에 현탁시킨 다음, 트리에틸아민 (0.288 L, 2068 mmol, 2.0 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 환류 하에 3시간 30분 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 조 물질에 NaOH (0.5 M, 1075 mL, 538 mmol, pH 9-10)를 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반한 다음, 여과하고, 물 (1000mL)로 세척하고, 진공 하에 건조시켰다. 고체를 1-부탄올 (1.7 L) 중에 용해시키고, 30분 동안 140℃로 가열한 다음, 3시간 동안 실온으로 냉각시켰다. 침전물을 여과한 다음, H₂O (2L) 중에 현탁시키고, 환류 하에 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 5℃로 냉각시킨 다음, 여과하였다. 고체를 TBME (1000mL)로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온을 78% 수율 및 고순도 (99.35%)로 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.94 (1H, s), 10.64 (1H, br s), 6.99 (1H, t, J = 7.8 Hz), 6.81 (1H, d, J = 8.1 Hz), 6.73 (1H, d, J = 7.3 Hz), 5.47 (1H, s), 4.36 (1H, m), 3.20 (2H, s), 2.64 (2H, m), 2.35 (2H, m), 2.19 (3H, s), 2.08 (3H, s), 1.89 (2H, m), 1.68 (2H, m); LCMS (ES) [M+H] 계산치 C₁₈H₂₃N₃O₃ 330.17, 실측치 330.

화합물 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온은 또한 엔아민(Enamine)으로부터 구입하였다.

생물학적 활성

실시예 2: 미코박테리움 보비스 BCG 균주 파스퇴르 1173P2에 대한 활성

엠. 보비스 BCG에 대한 항결핵제 활성을 고처리량 검정을 사용하여 연구하였다.

탄소 공급원으로서 글루코스를 함유하는 미들브룩(Middlebrook) 7H9 배지 (디프코 cat.# 271310)에서 박테리아 접종물을 4-5일 동안 성장시켰다. 배양 배지는 리터당 4.7 g 미들브룩 7H9 분말, 5 g 알부민, 1 g 글루코스, 0.85 g NaCl 및 0.25 g 트윈 80을 함유하였다. 용액을 0.2 μm 필터를 통해 여과에 의해 멸균하였다.

1536-웰 멸균 플레이트 (그라이너(Greiner), 782074)에서 검정을 실시하였다. 에코 555 기기 (랩사이트 인크.(Labcyte Inc.))를 사용하여 검정 성분을 첨가하기 전에, 시험할 화합물(들)을 순수한 DMSO 중의 50 nL 용액으로서 플레이트에 첨가하였다. 후속해서 멀티드롭 콤비 NL 기기 (써모 피셔 사이언티픽 인크.(Thermo Fischer Scientific Inc.))를 사용하여 검정 플레이트를 박테리아 용액 5 μL (mL당 10⁵마리 박테리아로 조정됨)로 채웠다. 접종된 플레이트를 7-8개 플레이트 그룹으로 적층하였고, 상부 플레이트는 멸균 뚜껑으로 덮었다. 알루미늄 호일로 플레이트를 조심스럽게 감싸 증발을 방지하고, 7일 동안 37℃ 및 80% 상대 습도에서 인큐베이션되도록 하였다.

인큐베이션 기간 후에, 인큐베이터에서 플레이트를 꺼내고, 실온에서 평형화되도록 하였다. 새롭게 재구성된 박타이터-글로(BacTiter-Glo) (5 μL, 프로메가(Promega))를 멀티드롭 콤비를 사용하여 각각의 웰에 첨가하였다. 실온에서 7-8분 동안 정치시킨 후, 어퀘스트 판독기(Acquest reader) (몰레큘라 디바이시스(Molecular Devices))를 사용하여 초점식 발광 모드로 발광 신호를 정량화하였다. 모든 검정 플레이트는 100% 활성 반응 (최대 발광)에 상응하는 DMSO를 함유하는 음성 대조군 (ctrl1)의 2개의 칼럼, 및 공지된 억제제 (표준물로서 2 μM 리팜피신; 박테리아 성장이 완전히 억제됨)를 첨가하는 것에 의해 100% 억제가 달성된 양성 대조군 (ctrl2)의 2개의 칼럼을 함유하였다. 이들 대조군은 Z'의 결정을 통해 검정 품질을 모니터링하고, 뿐만 아니라 플레이트-마다의 기준으로 데이터를 정규화하는데 사용되었다. 주어진 화합물의 효과를: % 억제=100x[(데이터-ctrl1)/(ctrl2-ctrl1)]로서 계산하였다.

실시예 3a: 세포외 생존율 검정 (방법 1)

상이한 탄소 공급원 (글루코스 또는 콜레스테롤) 중에서 성장시킨, 녹색-형광 단백질 (GFP)을 발현하는 미코박테리움 투베르쿨로시스 (ATCC로부터의 H37Rv 균주 cat# 27294)에 대한 항결핵제 활성을 384-웰 플레이트에서 수행하였다. 출발 배양물은 동결된 분취물을 7H9C 배지 (4.7 g/리터 미들브룩 7H9 분말, 0.81 g/리터 NaCl, 5 g/리터 BSA, 2 g/리터 d-덱스트로스 및 0.05% 트윈 80) 50 mL 중에 희석시킴으로써 제조하였다.

배양물을 37℃에서 3일 동안 인큐베이션하여 OD₆₀₀ 0.2 내지 0.3의 성장 배양물을 수득하였다.

표준 검정 (글루코스 배지)

성장 배양물을 7H9 무 글리세롤 배지로 희석하여 작업 접종물을 제조하고, 검정 마이크로플레이트에의 첨가 전에 OD₆₀₀을 0.02로 조정하였다.

콜레스테롤 검정 (콜레스테롤 배지)

박테리아 현탁액을 제조하기 위해, 7H9 배지에서 성장시킨 대수기 세포를 사용하여 한정 최소 배지 (4.7 g/리터 미들브룩 7H9 분말, 1 g/리터 KH₂PO₄, 2.5 g/리터 Na₂HPO₄, 0.5 g/리터 아스파라긴, 50 mg/리터 제2철 암모늄 시트레이트, 10 mg/리터 MgSO₄·7H₂O, 0.5 mg/리터 CaCl₂, 및 0.1 mg/리터 ZnSO₄, 2% BSA, 및 1 mg/ml 콜레스테롤)를 0.02의 초기 A₆₀₀으로 접종하였다. 콜레스테롤 원액 (100 mg/ml)을 틸록사폴/에탄올 (1:1) 중에서 제조하고, 첨가 전 30분 동안 65℃에서 가온하였다.

시험 화합물을 100% DMSO 중 2 mM의 최고 농도에서 연속 희석하였다 (3-배 희석, 10 포인트).

각각의 웰로부터의 0.5 μL를 허밍버드 플러스38을 사용하여 40μl 박테리아 작업 스톡 및 10μl 배지로 옮겨 화합물 마스터 플레이트를 검정 플레이트로 복제하였다.

플레이트를 37℃에서 5일 동안 인큐베이션하였다. 플레이트 판독기 빅토르3(VICTOR3)을 사용하여 상대 형광 강도를 측정함으로써 박테리아 성장을 결정하였다. 5일 후에 약물 무함유 대조군과 비교하여 성장을 50%만큼 억제시키는 화합물의 농도인 IC50을 그래프 패드 프리즘(Graph Pad PRISM)® 소프트웨어를 사용하여 결정하였다.

실시예 3b: 세포외 생존율 검정, 글루코스 배지 (방법 2)

엠. 투베르쿨로시스 균주 H37Rv를 10% ADC 및 0.025% 트윈 80이 보충된 미들브룩 7H9 배지에서 배양하고, 37℃에서 대략 10일 동안 인큐베이션하였다.

이어서 순도를 체크하고, 배양물을 10% ADC 및 0.025% 트윈이 보충된 미들브룩 7H9 배지에서 OD(600nm)=0.01까지 계대배양하고, 37℃에서 4-6일 동안 인큐베이션하였다. 600nm에서 OD를 측정하여 접종물을 대략 1x10⁷ cfu/ml로 표준화하였다. 배양물을 10% ADC 및 0.025% 트윈이 보충된 미들브룩 7H9 브로쓰 중에서 희석하였다 (1/100). V-바닥 마이크로타이터 웰 내 DMSO 중에서 10회의 2-배 약물 희석을 행하고, 약물 용액 5 ul를 미들브룩 95ul에 첨가하였다.

7H9 배지 (행 1-10, 열 A-H)를 편평-바닥 마이크로타이터 플레이트에 넣었다. 병행하여, DMSO 중에서 이소니아지드 대조군의 8회의 2-배 희석을 행하고 (160 ug/ml에서 출발), 대조군 5 ul를 미들브룩 H9 배지 95 ul (행 11, 열 A-H)에 첨가하였다.

DMSO 5 ul를 행 12에 첨가하였다. 접종물 100 ul를 12A-12F (블랭크 대조군)를 제외한 전체 플레이트에 첨가하였다. 10% ADC를 함유하는 미들브룩 7H9 배지 100 ul를 블랭크 대조군에 첨가하였다. 모든 플레이트를 밀봉된 박스 내에 두어 증발을 방지하고, 37℃에서 6일 동안 인큐베이션하였다. 그 후, 레자주린 용액 25 ul를 각각의 웰에 첨가하고 (30 ml 멸균 PBS 중 1개의 정제), 플레이트를 추가로 2일 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 마지막으로, 형광을 측정하였다. MIC 값은 블랭크 대조군의 평균 형광의 2.5배 미만의 형광 신호를 제시하는 화합물의 최소 농도이다. 웰은 또한 마이크로타이터 거울 판독기 상에서 시각적으로 판독할 수 있었고, MIC 값을 기록하였고; MIC 값은 레자주린의 환원에 의해 검출되는 바와 같은 (청색 웰) 유기체의 시각적 성장을 완전히 억제하는 화합물의 최소 농도로서 간주되었다.

실시예 3c: 세포외 생존율 검정, 에르드만(Erdman) 균주, 콜레스테롤 배지 (방법 3)

콜레스테롤 배지 0.01% 제조

기초 배지 제조

2L 기초 배지 2병을 제조하였다:

449.5 ml 밀리큐-물 중에 용해시켰다.

기초 배지를 65℃에서 사전-가온하였다.

콜레스테롤 용액

100 mg 콜레스테롤 (시그마(Sigma), Cat.# C8667-25G)을 에펜도르프 튜브에 칭량해 넣었다 (4l 배지당 4개의 콜레스테롤 분취물을 사용함).

에탄올 100% (머크 밀리포어(Merck Millipore), Cat.# 159010) 및 틸록사폴 100% (시그마, Cat.#T0307-60G) 1:1 용액을 제조하였다.

용액을 교반 하에 건조 조에서 72℃까지 가온하였다.

콜레스테롤 용액: 콜레스테롤 100 mg을 72℃에서 교반 하에 건조 조에서 1:1 틸록사폴 및 에탄올 용액 1 ml 중에 희석하고, 볼텍스를 사용하여 교반하여 콜레스테롤을 완전히 용해시켰다.

콜레스테롤 용액 1ml를 65℃에서 사전-가온한 기초 배지 1 리터 중에 재현탁시켰다.

콜레스테롤이 완전히 용해될 때까지 배지를 교반하고 비등시켰다.

레자주린

PBS 1X 30 ml당 레자주린 (피셔 사이언티픽스(Fisher Scientifics), cat#R/0040/74) 1개의 정제를 첨가하였다.

세포 배양물 제조.

미코박테리움 투베르쿨로시스 에르드만 균주를 0.01% 콜레스테롤이 보충된 기초 배지에서 12-16일 동안, 광학 밀도 [OD(600nm)]가 0.15-0.26에 도달할 때까지 성장시켰다. 세포를 신선한 콜레스테롤 배지 중에서 초기 OD(600nm) =0.015 (1.2x10⁶ CFU/ml)로 희석하고, 웰당 200 ml를 분배하였다. 플레이트를 파라필름으로 밀봉하고, 용기 안에서 37℃에서 7일 동안 인큐베이션하였다.

7일 인큐베이션 후에, 레자주린 25 ml를 각각의 웰에 첨가하고 (부속 섹션 A2 참조), 37℃에서 48시간 동안 인큐베이션하였다. 그러한 기간 후에, 플레이트가 실온에서 평형화되도록 하고, 마이크로플레이트 판독기 스펙트라맥스 M5 분광광도계 (몰레큘라 디바이스 이큅먼트(Molecular Devices Equipment)) 상에서 600 nm에서 종점 형광을 측정하였다.

데이터 분석을 위해 엑셀(Excel)의 애드-인 XLFit(Add-in XLFit)를 사용하여 비-선형 회귀 모델을 생성하여 용량 반응 곡선의 정규화된 결과 및 IC50을 피팅하였다.

실시예 4a: 세포내 생존율 검정 1a

반딧불이 루시페라제 유전자를 함유하는 엠. 투베르쿨로시스 H37Rv를 사용하여, 인간 THP-1 단핵구 내부에서 성장하는 미코박테리움 투베르쿨로시스에 대한 화합물의 항결핵제 활성을 결정하였다.

10% FBS, 1mM 피루베이트, 2mM L-글루타민을 함유하는 RPMI-1640 배지가 존재하는 현탁액에서 THP1 단핵구를 유지시키고, 37℃에서 5% CO2 하에 인큐베이션하였다.

단핵구를 전면생장률-미만 (5x10⁵개 세포/ml)으로 성장시키고, 세포 롤러 병 내에서 4시간 동안 RPMI-0.05% 트윈 80 중의 무균 유리 비드 분산된 박테리아 현탁액으로 감염 다중도 (MOI) 1로 감염시켰다. RPMI 배지에서 5회 세척하여 (1500 rpm 5분) 과량의 박테리아를 제거하였다.

감염된 세포를 화합물의 1:2 연속 희석물을 함유하는 96 웰 백색 플레이트에 분배하였다 (50,000개 세포/웰). DMSO 백분율은 0.5% 미만이어야 한다.

5일 후 스테디-글로 프로메가(Steady-Glo Promega) 키트를 사용하여 빅토르 1420 시스템 내에서 발광을 측정하였다.

그라피트(Grafit) 소프트웨어를 사용하여 결과를 프로세싱하였다. 비-선형 회귀 분석에 의해 용량-반응 곡선으로부터 IC50 값을 계산하였다.

실시예 4b: 세포내 생존율 검정 1b

반딧불이 루시페라제 유전자를 함유하는 엠. 투베르쿨로시스 H37Rv를 사용하여, 인간 THP-1 단핵구 내부에서 성장하는 미코박테리움 투베르쿨로시스에 대한 화합물의 항결핵제 활성을 결정하였다.

10% FBS, 1mM 피루베이트, 2mM L-글루타민을 함유하는 RPMI-1640 배지가 존재하는 현탁액에서 THP1 단핵구를 유지시키고, 37℃에서 5% CO2 하에 인큐베이션하였다.

단핵구를 전면생장률-미만 (5x10⁵개 세포/ml)으로 성장시키고, 세포 롤러 병 내에서 4시간 동안 감염 다중도 (MOI) 1로 감염시켰다. RPMI 배지에서 4회 세척하여 (1500 rpm 5분) 과량의 박테리아를 제거하였다.

감염된 세포를 96 웰 백색 플레이트에 분배하고 (50,000개 세포/웰), 화합물의 1:3 연속 희석물을 세포 플레이트에 첨가하였다. DMSO 백분율은 0.5% 미만이어야 한다.

5일 후 브라이트-글로프로메가(Bright-GloPromega) 키트를 사용하여 발광을 측정하였다.

그라피트 소프트웨어를 사용하여 결과를 프로세싱하였다. 비-선형 회귀 분석에 의해 용량-반응 곡선으로부터 MIC90 값을 계산하였다.

실시예 5: 세포내 생존율 검정 2

GFP 유전자를 삽입하는 것에 의해 ATCC로부터 수득된 H37Rv 균주로부터 변형된 엠. 투베르쿨로시스 (Cat. 27294)를 사용하여, 뮤린 원료 264.7 (Cat.TIB-71) 세포주 내부에서 성장하는 미코박테리움 투베르쿨로시스에 대한 화합물의 항결핵제 활성을 결정하였다.

원료 대식세포는 ATCC로부터 수득하여 10% 태아 소 혈청 (깁코(Gibco), Cat. 26140-079)이 보충된 RPMI 1640 (웰젠(Welgene), Cat. LM011-01)으로부터 제조된 대식세포 배양 배지 (RPMIC) 내에서 배양하였다.

출발 배양물은 여과 캡이 달린 75 cm2 세포 배양 플라스크 내에서 대식세포의 동결된 분취물을 RPMIC 30 mL 중 희석하여 제조하였다. 이를 RPMIC 중 37℃ 인큐베이터 5% CO2에서 유지시키고, 이들이 80% 전면생장률에 도달했을 때 1:5로 분할하여 계대배양하였다. 이를 3 계대부터 화합물의 세포내 활성을 정량화하는데 사용하였고, 10 계대는 넘지 않았다.

각각의 실험에서, 품질 관리 목적상 리팜피신 및 이소니아지드를 용량-반응으로 시험하였다. 리팜피신은 12 μM에서 0.4 nM까지, 이소니아지드는 73 μM에서 2 nM까지 (16 포인트 용량-반응 곡선) 시험하였다.

시험 화합물을 2 mM의 농도에서 시작하여 (100x) 100% DMSO 중 연속 희석하였다 (3-배 희석, 10 포인트 희석). 이어서, 허밍버드 플러스384를 사용하여 웰당 10 μL의 RPMIC를 이미 함유하고 있는 검정 플레이트 내로 0.5 μL를 옮겨 화합물 마스터 플레이트를 검정 플레이트로 복제하였다.

대식세포를 하기와 같이 수거하였다. 상청액 부분을 제거하여 단지 10 mL만 남겼다. 이어서 세포-스크래퍼를 사용하여, 세포를 온화하게 떼어내고, 15 mL-원추형 튜브로 옮겨 1,100 rpm에서 5분 동안 원심분리하였다. 상청액을 폐기하고, 세포를 신선한 RPMIC 10 mL 중에 재현탁시켰다. 혈구계를 사용하여 세포 수를 결정하였다.

감염 2시간 후, 세포/박테리아 현탁액을 1100 rpm 미만에서 5분 동안 원심분리하여 세포외 박테리아를 제거하였다. 감염된 세포를 단지 1% FBS만이 보충된 RPMI 내로 30 mL/튜브로 온화하게 재현탁시키고, 다시 1100 rpm에서 5분 동안 원심분리하였다. 그러한 작업을 2회 반복하고 (총 3회 세척), 최종 세포 펠릿을 소정의 부피의 RPMIC로 300,000개 세포/mL의 세포 농도로 재현탁시켰다.

검정은 384-웰 편평 바닥 마이크로-플레이트에서 50.5 μL의 최종 부피로 수행하였다. 10 μl의 배지가 보충된 일련의 희석된 시험 화합물 0.5 μL를 함유하는 각각의 웰에, 감염된 대식세포 40 μL를 첨가하였다.

플레이트를 37℃ 5% CO2에서 5일 동안 인큐베이션하였다.

5일 후, 시토60을 10 μL/웰로 첨가하여 (5 μM의 최종 농도를 제공하는 30 μM) 37℃에서 1시간 동안 핵을 염색하였다.

이어서 핵/세포 국재화에 대해 시토 60용 청색 채널 (635 nm에서 여기, 690/50 필터로 판독)에서, 및 박테리아 국재화에 대해 GFP용 녹색 채널 (488 nm에서 여기, 520/35 필터로 판독)에서 10x 공기의 배율로; 웰당 적어도 4개의 시야로 판독하기 위해, 아카펠라(Acapella) 획득 소프트웨어가 구비된 에보텍 오페라(Evotec OPERA) (퍼킨 엘머(Perkin Elmer)) 형광 현미경으로 플레이트를 옮겼다. 그래프 패드 프리즘을 사용하여 데이터를 분석하여 엠. 투베르쿨로시스 (H37Rv-GFP)에 대한 IC50 값을 결정하였다.

실시예 6: 급성 마우스 모델

특정 병원체-무함유, 8-10 주령 암컷 C57BL/6 마우스를 하를란 래보러토리즈(Harlan Laboratories)에서 구입하여, 1주 동안 순응하게 하였다. 마우스를 100,000 CFU/마우스 (엠. 투베르쿨로시스 H37Rv 균주)로 기관내로 감염시켰다. 감염 후 1일에 시작하여 연속 8일 동안 1일 1회 화합물을 투여하였다. 마지막 투여 24시간 후에 폐를 수거하였다. 모든 폐엽을 무균 제거하고, 증류수 중에서 균질화하고, 동결시켰다. 균질물을 0.4% 활성탄이 보충된 10% OADC-7H11 중에 37℃에서 18일 동안 플레이팅하였다.

결과를 비처리 대조군과 관련하여 폐내 미생물 부담의 감소 (log10 cfu/폐)로서 나타내었다 (제9일).

양성 대조군 (목시플록사신): 30 mg/kg에서 3.2 log₁₀ CFU 감소

시험 화합물: 200 mg/kg에서 1.6 log₁₀ CFU 감소

실시예 7: 다중약물 저항성 (MDR) 엠. 투베르쿨로시스에 대한 세포외 검정

엠. 투베르쿨로시스 약물 저항성 균주를 24-웰 플레이트에서 97 mg/mL 콜레스테롤이 보충된 정규 7H9-기반 배지에서 0.2-0.6의 OD로 성장시켰다. 96-웰 투명 둥근 바닥 플레이트에서 제1줄을 제외하고 배지 50 uL를 첨가하였다. 동일한 배지 중에 희석시킨 각각의 약물 100 uL를 제1 행에 100 uM 첨가하였다. 50uL를 제1 행에서 제12 행까지 각각의 웰로 옮겼다. 각각의 웰에 2 x 10⁴마리의 박테리아를 첨가하고, 플레이트를 지프-락 백에서 37℃에서 3주 동안 인큐베이션하였다. 다양한 시점에서 도립 확대 거울 플레이트 판독기를 사용하여 성장 또는 무 성장으로서 등급화하였다. 성장을 완전히 억제하는 농도로서 MIC를 확립하였다. MIC는 저항성 또는 조절 적응 메카니즘과 관련된 보다 긴 시점에서의 생장을 피하기 위해 성장이 분명하게 시각화될 때 조기에 판독하여야 한다. 이러한 시점은 균주 의존적이다 (일반적으로 1 내지 2주).

제2주에, 1/10 부피의 알라마르 블루(Alamar Blue)를 7H9-정규 및 콜레스테롤 배지가 담긴 플레이트에 첨가하였다. 37℃에서 24시간 동안 인큐베이션한 후, 시각적 점수화 (청색 = 성장 억제, 분홍색 =성장)를 통해 플레이트를 판독하였다. 콜레스테롤 배지에의 알라마르 블루 첨가는 배지가 MIC 셋업 동안 냉각되는 경우에 발생하는 성장으로부터 콜레스테롤 침전을 구별하는데 필요하다.

논의

상기 실시예 2-7에 제시된 데이터는 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온이 특정 조건 하에, 즉 바실루스가 대식세포 내부에 존재할 때, 또는 달리 콜레스테롤의 존재 하에, 예컨대 콜레스테롤 배지를 사용한 세포외 검정에서, 항미코박테리아 활성을 보유한다는 것을 예시한다. 이들 발견은 대식세포가 높은 세포내 콜레스테롤 농도를 갖는 것으로 공지되어 있다는 것을 고려하면 일치한다. 화합물의 이러한 콜레스테롤-관련 생물학적 프로파일은 비통상적이고, 화합물이 신규 작용 메카니즘을 통해 작용한다는 것을 시사한다. 신규 생물학적 표적은 기존 저항성이 본 분야에 존재하지 않을 것이라고 예상되므로 TB 요법에서 바람직하다. 추가적으로, 탄소 공급원으로서 콜레스테롤을 사용할 수 있는 미코박테리아를 표적화함으로써, 이러한 화합물은 TB 조합 약물 요법에 대한 특별한 살박테리아 성분으로 기여할 수 있다. 마지막으로, 뮤린 생체내 데이터는 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온이 경구로 생체이용가능하고, 동물 실험에서 발견되는 이질적인 조건 하에서 박테리아에 대해 효과적이라는 것을 입증한다.

본 발명은 실시양태와 본원에 기재된 모든 다른 적합한 실시양태 및/또는 예시적 실시양태의 모든 조합을 포괄하는 것으로 이해되어야 한다. 또한 본 발명은 예시적 실시양태와 본원에 기재된 모든 다른 적합한 실시양태의 모든 조합을 포괄하는 것으로 이해되어야 한다.

본원에 기재된 실시예 및 실시양태는 단지 예시적 목적을 위한 것이고, 이에 비추어 다양한 변형 또는 변화가 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 시사될 것이며 본 출원의 취지 및 범위, 및 첨부된 청구범위의 범주 내에 포함되어야 하는 것으로 이해된다.

Claims (26)

1. 미코박테리움 보비스(Mycobacterium bovis) 및 미코박테리움 투베르쿨로시스(Mycobacterium tuberculosis) 중 하나 이상에 의해 유발되는 결핵의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한,
   치료 유효량의 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4 (1H,3H)-디온 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 제약 조성물.
2. 제1항에 있어서, 포유동물이 인간인 제약 조성물.
3. 제1항에 있어서, 결핵이 미코박테리움 투베르쿨로시스의 감염에 의해 유발되는 것인 제약 조성물.
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5. 삭제
6. 삭제
7. 삭제
8. 삭제
9. 삭제
10. 미코박테리움 보비스 및 미코박테리움 투베르쿨로시스 중 하나 이상에 의해 유발되는 결핵의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한,
    a) 6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온, 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및
    b) 제약상 허용되는 부형제
    를 포함하는 제약 조성물.
11. 제10항에 있어서, 결핵이 미코박테리움 투베르쿨로시스의 감염에 의해 유발되는 것인 제약 조성물.
12. 삭제
13. 미코박테리움 보비스 및 미코박테리움 투베르쿨로시스 중 하나 이상에 의해 유발되는 결핵의 치료를 필요로 하는 포유동물에서 상기 질환을 치료하기 위한,
    6-((4-(2,3-디메틸페녹시)피페리딘-1-일)메틸)피리미딘-2,4(1H,3H)-디온, 또는 그의 제약상 허용되는 염; 및
    제약상 허용되는 부형제, 아주반트 또는 희석제를 포함하는 제약 조성물.
14. 제13항에 있어서, 결핵이 미코박테리움 투베르쿨로시스의 감염에 의해 유발되는 것인 제약 조성물.
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