KR102477182B1 - 아로니아 착즙박 추출물을 포함하는 피부 염증 및 주름 개선용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 아로니아 착즙박 추출물을 포함하는 피부 염증 완화 또는 개선, 피부 주름 개선 및 피부 재생용 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 아로니아 착즙박 추출물은 피부세포의 염증 반응을 억제하고, 염증반응에 의해 유도되는 콜라겐 분해를 억제하며, 여드름 완화에 있어 독성이 없이 피부 세포의 재생을 촉진시킴으로써, 피부 염증 완화 또는 개선, 피부 주름 개선 또는 피부 재생 효과를 나타낼 수 있다.

Description

아로니아 착즙박 추출물을 포함하는 피부 염증 및 주름 개선용 화장료 조성물{Cosmetic composition for improving skin inflammation and wrinkles comprising Aaronia pomace extract}

본 발명은 아로니아 착즙박 추출물을 포함하는 피부 염증 완화 또는 개선, 피부 주름 개선 및 피부 재생용 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 크게 표피, 진피 및 피하지방으로 구분되며, 인체의 물리적, 화학적 혹은 생물학적 자극으로부터 몸을 보호하는 중요한 역할을 한다. 피부의 가장 외층인 표피는 외부로부터 인체를 보호하는 역할을 하며, 표피의 최상층부인 각질층이 표피 장벽(epidermal barrier)으로서 표피의 수분 증발과 손실 억제, 표피의 건조화 방지, 및 세균, 곰팡이, 바이러스 등의 피부 침입을 방지하는 역할을 한다.

콜라겐은 피부 진피층에 존재하는데, 피부 전체 건조 중량의 약 70 내지 80%를 차지하는 엘라스틴과 함께 피부에 탄력을 부여하는 주요 성분으로 알려져 있다. 콜라겐은 자연 노화에 따른 세포활성 저하와 같은 내부 요인에 의해 감소되고, 여러 유해 환경에서의 스트레스 증가나 태양 광선에 의한 활성 산소 종의 증가와 같은 외부 요인에 의하여 생합성이 감소되거나, 분해가 촉진되고 있다.

활성산소종(reactive oxygen species, ROS)의 과생산은 UVB 노출 환경에서 보고된 바 있고, UVB 노출과 연관된 신호전달 체계는 MAPKs(mitogen activated protein kinases), ERK(extracellular signal-regulated kinase), p38 카이나아제, 및 JNK(c-Jun amino-terminal kinase) 등의 단백질과 관련되어 있는데, NF-ĸB 및 AP-1 전사인자의 발현증가를 유도한다. 또한, AP-1 단백질은 MMP(matrix metalloproteinase) 유전자의 활성과 관련되어 있고, NF-ĸB 단백질은 인터루킨(ILs)과 같은 전염증 사이토카인(proinflammatory cytokines)의 발현에 영향을 미친다. 따라서 자외선 등과 같은 산화적 스트레스에 의한 피부 노출은 MAP(Mitogen Activated Protein) kinase 경로를 활성화시켜 AP-1의 발현을 유도하고 MMPs(MMP-1, -2, -3, -9, -13 등)의 발현을 증가시켜 세포외기질을 분해하여 주름생성을 촉진시킨다고 할 수 있다.

노화된 피부에서 콜라겐 및 엘라스틴의 붕괴는 주로 MMP 단백질과 같은 그 분해 효소의 증가된 발현에 의해 야기된다. 또한, 전염증 사이토카인은 콜라겐의 합성을 방해하고, 콜라겐의 붕괴를 촉진시킨다. 타입 I 콜라겐은 연결 조직의 세포외 기질에서 가장 풍부한 단백질이다. 세포외 기질에는 타입 III, V, 및 VII 콜라겐, 엘라스틴, 프로테오글라이칸, 파이브로넥틴과 같은 다른 유형의 단백질을 포함한다.

타입 I 콜라겐 단백질의 발현 수준을 조절하는 것은 피부 광노화를 예방하는데 있어서 가장 중요한 인자이다. UVB의 조사는 TGF-β/Smad 신호전달 체계의 억제를 통해 피부 섬유아세포에서 콜라겐 전구체인 프로콜라겐(procollagen)의 발현을 감소시키게 된다. 또한, TGF-β1 신호전달 체계는 인간 피부 섬유아세포에서 세포외 기질의 합성을 조절하는 중요한 인자의 하나이다.

따라서, AP-1 및 MAPKs 인자에 의해 조절되는 활성산소종(ROS)의 생성, 및 MMPs, ILs, TGF-β, 및 타입 I 프로콜라겐의 발현은 피부 광노화 연구에 있어서 유용한 마커로 작용한다.

또한, 염증은 상처나 질병에 반응하는 인체의 면역 반응으로, 자외선이나 활성산소, 자유라디칼 등의 산화적 스트레스 등이 염증성 인자를 활성화시켜 각종 질병 및 피부의 노화를 일으킨다. 혈관 활성 폴리펩타이드인 키닌(kinin), 플라스민(plasmin), 보체 (complement) 등이 혈관 확장과 수축 및 주화성(chemotaxis) 작용을 하고, 그 외에 인터루킨-6(IL-6) 등과 같은 림포카인과 아라키돈산(arachidonic acid) 등이 염증 반응을 담당한다. 아라키돈산은 싸이클로옥시게나아제(cyclooxygenase) 혹은 리포옥시게 나아제(lipooxygenase)의 2가지 경로를 거쳐 염증 매개체인 프로스타글란딘(prostaglandin), 류코트리엔 (lukotriene)들로 대사되어 다양한 염증 반응을 매개한다.

여드름은 피부과학적 용어로 심상 성 좌창이라고 하는 모낭 피지선의 만성 염증성 질환으로 얼굴에 가장 큰 영향을 미치며 심한 경우 영구적인 흔적을 남길 수 있으며, 발생원인은 복합적이고 다양한 원인이 작용한다. 대표적으로 피지선의 증대 및 활성화가 일어나 피지가 과다 분비되고 각화과정의 이상이 생겨나 각질형성세포의 이각화증 혹은 과각화증이 발생하는 것이 일차적 원인으로 작용하며, 따라서 피지가 자연스럽게 분비되지 못하고 케라틴, 세포 찌꺼기와 함께 모낭 내에 저류되게 되면 여드름의 특징적 병변인 면포가 생겨나게 되고, 여기에 Propionibacterium acnes 등의 세균이 증식하면서 영향을 미치면 염증성 병변을 만들어 내게 되어 육안으로 보이는 붉거나 곪은 여드름 병변을 만들어 내게 된다.

한편, 아로니아(Aronia melanocarpa)은 장미과에 속하는 베리류로서, 동북 아메리카 및 동유럽에서 자생하고 있다. 검붉은색을 띠는 아로니아는 근래에는 전 세계에 널리 재배되고 있으며, 원예종에서 2품종간에 교배육종으로 재배되고 있다. 아로니아는 특히, 안토시아닌이 자연계 식물들 중에서 가장 높은 군에 속한다고 알려져있다. 이러한 아로니아는 연구를 통해 뛰어난 항산화 효능을 보일 뿐만 아니라, 당뇨 및 각종 심혈관계 질환 관련 효능에 대해서도 많은 연구가 이루어졌다.

이와 같이 다양한 효능을 가진 아로니아는 착즙 또는 추출하여 쥬스나 음료의 형태로 많이 복용되고 있으나, 아로니아 착즙 후 부산물로 남는 잔여물은 그대로 버려지거나 작물의 비료 정도로 이용되어 온 실정이다.

이에, 본 발명자들은, 아로니아 열매 착즙 후 얻어진 잔여물로부터 아로니아 착즙박 추출물을 제조하여, 상기 추출물이 피부세포에서 염증 억제 및 주름 개선 효과를 나타낼 수 있음을 확인하여, 본 발명을 완성하였다.

한국공개특허 제10-2019-0018108호

본 발명의 목적은 아로니아 착즙박 추출물을 포함하는, 피부 염증 완화 또는 개선, 피부 주름 개선 및 피부 재생용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여,

본 발명은 아로니아 착즙박 추출물을 포함하는, 피부 염증 완화 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 아로니아 착즙박 추출물을 포함하는, 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

나아가, 본 발명은 아로니아 착즙박 추출물을 포함하는, 피부 재생용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 아로니아 착즙박 추출물은 피부세포의 염증 반응을 억제하고, 염증반응에 의해 유도되는 콜라겐 분해를 억제하며, 여드름 완화에 있어 독성이 없이 피부 세포의 재생을 촉진시킴으로써, 피부 염증 완화 또는 개선, 피부 주름 개선 또는 피부 재생 효과를 나타낼 수 있다.

도 1은 본 발명에 따른 아로니아 착즙박 추출물의 처리농도별 HaCaT 세포의 세포 생존율(Viability)에 미치는 영향을 MTT assay를 통해 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명에 따른 아로니아 착즙박 추출물의 처리농도별 NHDF 세포의 세포 수(Relative cell number)에 미치는 영향을 CCK-8 assay를 통해 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명에 따른 아로니아 착즙박 추출물(AR) 및 녹차 추출물(GT)의 처리농도별 섬유아세포의 MMP 유전자들(MMP-1, -3 및 -13)상대적 mRNA 발현량(Relative amount of mRNA)에 미치는 영향을 real-time PCR을 통해 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명에 따른 아로니아 착즙박 추출물(AR) 및 녹차 추출물(GT)의 처리농도별 HaCaT 세포의 염증 관련 유전자들(IL1β, TGF-β 및 IL-6)의 상대적 mRNA 발현량(Relative amount of mRNA)에 미치는 영향을 real-time PCR을 통해 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

아로니아 착즙박 추출물을 포함하는 화장료 조성물

본 발명은 아로니아 착즙박 추출물을 포함하는, 피부 염증 완화 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 아로니아 착즙박 추출물을 포함하는, 피부 재생용 화장료 조성물을 제공한다.

나아가 본 발명은 아로니아 착즙박 추출물을 포함하는, 피부 재생용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "아로니아 착즙박(pomace)"은 아로니아 열매를 착즙기에 넣어 착즙을 통하여 껍질 이외의 수분 성분들을 모두 제거한 뒤, 착즙하고 남은 잔여물(부산물)을 의미한다. 따라서, 상기 아로니아 착즙박 추출물은 아로니아 열매를 착즙한 후 얻어진 잔여물로부터 추출된 추출물인 것일 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "추출물(extract)"은 추출 대상을 적절한 침출액으로 짜내고 침출액을 증발시켜 농축한 제제를 의미하는 것으로, 이에 제한되지는 않으나, 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 이들의 조정제물 또는 정제물일 수 있다. 상기 흑미 발효 추출물은 통상의 기술분야에 공지된 일반적인 추출방법, 분리 및 정제방법을 이용하여 제조할 수 있다. 상기 추출방법으로는, 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게 열탕 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 방법을 사용할 수 있다.

본 발명에서, 상기 추출용매는 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매 등을 사용할 수 있으며, 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 4의 알코올이나, 에틸아세테이트 또는 아세톤 등의 극성용매, 헥산 또는 디크로로메탄의 비극성용매 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다. 또한, 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 탄소수 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있으며, 더 바람직하게는 물 및 탄소수 1 내지 탄소수 4의 알코올의 혼합용매를 사용할 수 있고, 보다 바람직하게는 물 및 에탄올 혼합용매를 사용할 수 있다. 본 발명의 일실시예에서는 상기 용매로서 70% 에탄올 수용액을 이용하여 추출한 뒤 감압 농축 및 동결 건조하여 아로니아 착즙박 추출물을 제조하였다.

본 발명에 따른 상기 아로니아 착즙박 추출물은 피부세포의 염증 반응을 억제하고, 염증반응에 의해 유도되는 콜라겐 분해를 억제하며, 여드름 완화에 있어 독성이 없이 피부 세포의 재생을 촉진시킴으로써, 피부 염증 완화 또는 개선, 피부 주름 개선 또는 피부 재생 효과를 나타내는 것일 수 있다.

본 발명의 일실시예서는 본 발명에 따른 아로니아 착즙박 추출물이 피부각화세포(HaCaT)에서 독성을 나타내지 않으면서 세포 성장을 촉진시키고, 섬유아세포의 증식을 증가시키며, 섬유아세포에서 MMPs(MMP-1, -3 및 -13)의 mRNA 발현을 억제하고, 피부 각화세포(HaCaT)에서 염증 관련 인자(IL1β, TGF-β 및 IL-6)의 mRNA 발현을 억제하는 것을 확인하였다(실험예 1 내지 4 참조).

본 발명의 화장료 조성물의 제형으로는 특별히 한정되는 것은 아니지만 피부 외용제의 제형인 것이 바람직하며, 상기 피부 외용제 제형의 하나의 바람직한 형태는 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크 로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 제형으로 제조된 것일 수 있다. 또한, 각 제형의 외용제 조성물에 있어서, 상기한 필수 성분 이외의 다른 성분들은 기타 외용제의 제형 또는 사용 목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 바람직하게는 화장품학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액 마이크로 에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및/또는 바이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 폼(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다. 또한, 본 발명의 화장료 조성물은 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유함으로써 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 국소적용 또는 전신적용할 수 있는 보조제 형태로 제조될 수 있으며, 이들 조성물은 당해 분야의 통상적 방법에 따라 제조될 수 있다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제, 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 이들 보조제는 화장품학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.

본 발명의 조성물은 액제, 에어로졸제, 멸균 주사용액 형태로 제형화하여 사용할 수 있으며, 상기 조성물을 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용할 수 있다.

이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1> 아로니아 열매 착즙박 추출물의 제조

먼저 무농약으로 재배되는 아로니아 열매를 구입하여, 흐르는 수돗물에 1차 세척한 후 정제수로 다시 한 번 2차 세척을 한 후 건조하였다. 건조시킨 아로니아 열매를 착즙기에 넣어 착즙을 통하여 껍질 이외의 수분성분들을 모두 제거한 뒤, 착즙하고 얻어진 잔여물을 대상으로 추출물을 제조하였다.

구체적으로, 아로니아 열매 착즙 잔여물 양의 10배 무게만큼 70% 에탄올에 48시간가량 침지하는 과정을 3번 반복하였고, 추출된 추출액을 여과 후 감압농축을 진행하였다. 농축물을 동결 건조하여 아로니아 열매 착즙 잔여물의 건조분말 추출물 시료를 수득하였다.

상기와 같은 방법으로 추출과 농축 및 동결건조를 통해 얻어진 아로니아 열매 착즙 잔여물의 건조분말 추출물 시료를 아로니아 착즙박 추출물이라 명명하였다.

<실험예 1> 아로니아 착즙박 추출물의 피부 각화세포에 대한 독성 평가

피부 각화세포 HaCaT 세포를 96 well plate에 seeding 하고, 상기 아로니아 착즙박 추출물(실시예 1)을 농도 별로 희석하여 배지에 넣어 준 후 37℃, 5% CO₂ incubator에서 24시간동안 배양하였다. 이후 MTT 용액 첨가하여 2시간 배양한 후 solubilizing solution 을 넣어주어 37℃ incubator에서 O/N(Over night) 반응 시킨 후 ELISA reader로 570nm에서 흡광도를 측정하여, 이로부터 세포 생존율(Viability)을 계산하여 도 1에 나타내었다.

도 1은 본 발명에 따른 아로니아 착즙박 추출물의 처리농도별 HaCaT 세포의 세포 생존율(Viability)에 미치는 영향을 MTT assay를 통해 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.

MTT Assay 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 아로니아 착즙박 추출물은 0.01μg/ml부터 고농도 100μg/ml 처리 군 모두에서 세포의 독성이 관찰되지 않았다. 오히려 viability가 증가된 양상이 보임에 따라 아로니아 착즙박 추출물은 세포 성장을 촉진하거나 혹은 외부 스트레스의 완충 역할을 할 가능성이 있음을 확인하였다.

이러한 결과를 토대로 아로니아 착즙박 추출물은 피부 세포에 독성이 없을 뿐만 아니라 HaCaT 각화세포 성장을 촉진하는 것으로 나타났으며, 이는 아로니아 착즙박 추출물이 피부세포의 재생에 도움을 줄 가능성이 높다는 것을 의미한다.

<실험예 2> 아로니아 착즙박 추출물의 피부 세포 재생 효능 평가

상기 실험예 1에서 확인한 바와 같이, 아로니아 착즙박 추출물이 HaCaT cell에서 독성이 없으며 오히려 세포의 증식을 꾀할 수 있다는 데이터를 토대로 피부 재생에 좀 더 직접적인 영향을 줄 수 있는 섬유아세포를 이용하여 피부 세포 재생 효능을 평가하였다. 특히, primary human dermal fibroblast (섬유아세포)를 이용하여 HaCaT cell line 대비 좀 더 정확한 해석을 실시하였다.

상기 아로니아 착즙박 추출물(실시예 1)을 NHDF(Normal Dermal Human Fibroblast) 세포에 농도별로 처리 후 72시간 incubation 시켰다. 이후 CCK-8 assay 실시하여 450nm에서 흡광도 측정하여 상대적 세포 수(Relative cell number)를 나타내었다.

도 2는 본 발명에 따른 아로니아 착즙박 추출물의 처리농도별 NHDF 세포의 세포 수(Relative cell number)에 미치는 영향을 CCK-8 assay를 통해 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.

도 2에 나타난 바와 같이, 10ng/ml, 1ug/ml, 3ug/ml 및 30ug/ml 농도 모두에서 대조군 대비 상대적 세포의 수가 증가되는 것을 확인하였다.

이를 토대로 아로니아 착즙박 추출물은 독성이 매우 적으며 세포의 성장을 촉진한다는 것을 확인하였으며, 이는 아로니아 착즙박 추출물이 여드름 완화에 있어 독성이 없이 세포의 재생을 촉진할 수 있는 소재로 가능성이 있음을 시사하는 것이다.

<실험예 3> 아로니아 착즙박 추출물의 피부 세포 콜라겐 분해 억제 효능 평가

섬유아세포(NHDF 세포)에 상기 아로니아 착즙박 추출물(실시예 1, AR)과 양성 대조군으로서 시중에서 구입한 녹차 추출물(GT)을 각각 2ug/ml 또는 10ug/ml 농도로 처리한 후 24시간 배양하여 total RNA를 획득하였고, real-time PCR을 통해 MMP 유전자들(MMP-1, -3 및 -13)의 발현 양상을 확인하여, 상대적 mRNA 발현량(Relative amount of mRNA)을 도 3에 나타내었다.

도 3은 본 발명에 따른 아로니아 착즙박 추출물(AR) 및 녹차 추출물(GT)의 처리농도별 섬유아세포의 MMP 유전자들(MMP-1, -3 및 -13)상대적 mRNA 발현량(Relative amount of mRNA)에 미치는 영향을 real-time PCR을 통해 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.

도 3에 나타난 바와 같이, MMP-1의 경우 아로니아 착즙박 추출물 처리시 mRNA 발현이 감소하였으며, 특히, 10ug/ml로 처리한 실험군에서 MMP-1 mRNA 발현이 유의성 있게 감소한 것을 확인하였다(*, p<0.05). 반면에, 녹차 2ug/ml 및 10ug/ml 처리 군 에서는 MMP-1 mRNA의 발현이 감소하지 않았다. 이를 토대로 아로니아 착즙박 추출물은 섬유아세포의 MMP-1 발현을 줄여 콜라겐의 분해를 저해할 수 있음을 확인하였다.

MMP-3의 경우 아로니아 착즙박 추출물 10ug/ml 처리 군에서 MMP-3 mRNA의 발현을 유의성 있게 감소된 것을 확인하였다(*, p<0.05). 반면에 녹차 추출물 처리군 에서는 MMP-3 의 발현 감소를 확인할 수 없었다.

MMP-13의 경우 아로니아 착즙박 추출물 10ug/ml 처리군에서 MMP-13 mRNA의 발현이 유의성 있게 감소된 것을 확인하였다(*, p<0.05). 녹차 추출물 10ug/ml을 처리한 군에서 수치 상으로 30 %이상의 MMP-13의 발현을 감소시켰으나 통계적으로는 유의성이 없어 녹차 추출물에 대한 효과는 미미하거나 없다고 판단할 수 있다.

상기의 결과를 요약하자면, 아로니아 착즙박 추출물 10ug/ml 농도의 처리는 섬유아세포에서 콜라겐 단백질을 분해하는 MMP-1, -3 및 -13의 mRNA 발현을 낮춘다는 것을 확인하였고, 이를 토대로 아로니아 착즙박 추출물이 콜라겐 분해를 저해하여 주름개선 및 염증 반응에 따른 콜라겐 분해의 저해에 효과를 나타낼 수 있음을 확인하였다.

<실험예 4> 아로니아 착즙박 추출물의 피부 세포 염증 억제 효능 평가

아로니아 착즙박 추출물이 피부세포 염증 반응에 어떠한 효능이 있는지 보기위해 이때 세포로는 일반적인 면역 관련 세포가 아닌 피부에서의 염증을 효과적으로 보기 위해 HaCaT 각화세포를 이용하여 염증 억제 효능을 분석하였다.

상기 실시예 1의 아로니아 착즙박 추출물(AR) 또는 시중에서 구입한 녹차 추출물(GT)을 각각 10ug/m 처리 후 1시간 incubation 한 뒤, Lipopolysaccharide (LPS)를 1ug/ml 의 농도로 24시간 처리하여 세포 면역반응을 유도하였다. 타겟 유전자(IL1β, TGF-β 및 IL-6)의 mRNA의 발현 양상을 real-time PCR로 분석하여 도 4에 상대적 mRNA 발현량(Relative amount of mRNA)을 나타내었다.

도 4는 본 발명에 따른 아로니아 착즙박 추출물(AR) 및 녹차 추출물(GT)의 처리농도별 HaCaT 세포의 염증 관련 유전자들(IL1β, TGF-β 및 IL-6)의 상대적 mRNA 발현량(Relative amount of mRNA)에 미치는 영향을 real-time PCR을 통해 확인한 결과를 나타낸 그래프이다.

IL1β의 경우 녹차추출물은 미미하게 감소하는 양상을 보였으나 통계적으로는 유의하지 않았다. 반면, 아로니아 착즙박 추출물 10ug/ml을 처리시 IL1β mRNA의 발현이 20% 이상 감소하는 것을 확인하였다(*, p<0.05).

TGF-β의 경우에도 아로니아 착즙박 추출물 10ug/ml 처리군에서는 TGF-β 발현이 20% 이상 감소하는 것을 확인하였으나 녹차 추출물 처리군 에서는 미세한 감소만을 보였고 이는 통계적으로 유의미 하지 않았다(*, p<0.05).

IL-6의 발현 양상에서는 아로니아 착즙박 추출물 10ug/ml 처리군에서 IL-6 mRNA가 30% 이상 감도한 것을 확인하였으나 녹차 추출물에서는 감소효과를 확인할 수 없었다(***, p<0.001).

이러한 결과로부터, 본 발명의 실시예 1에 따른 아로니아 착즙박 추출물은 피부세포에서 염증을 억제하는 효과를 나타낼 수 있음을 확인하였다.

결과적으로, 본 발명자들은 아로니아 착즙박 추출물은 피부세포에서의 독성이 매우 낮음을 확인할 수 있었고, 피부세포 증식을 유도할 수 있음을 확인하였다. 또한 콜라겐의 분해에 주요 역할을 하는 유전자들의 발현을 억제함과 염증 유발 상황에서 피부세포의 염증 반응을 줄일 수 있음을 확인하였다. 이는 아로니아 착즙박 추출물이 피부세포의 염증 반응을 줄임과 동시에 염증 반응에 의해 유도되는 콜라겐 분해를 막으며 피부 세포의 재생 효과를 발휘할 수 있다는 것을 의미한다.

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (6)

1. 아로니아 열매를 착즙한 후 얻어진 잔여물로부터 70% 에탄올 수용액을 사용하여 추출된 아로니아 착즙박 추출물을 포함하는, 피부 염증 완화 또는 개선용 화장료 조성물로서, 상기 조성물은 피부 각화세포인 HaCaT 세포 및 섬유아세포인 NHDF(Normal Dermal Human Fibroblast) 세포를 성장시키는 것인 조성물.
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