KR102429032B1 - 붉은 동백꽃 유래의 신규한 락토코커스 락티스 R-camellia 균주 및 이를 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물 - Google Patents
붉은 동백꽃 유래의 신규한 락토코커스 락티스 R-camellia 균주 및 이를 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 붉은 동백꽃 유래의 신규한 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) R-camellia 균주 및 상기 균주의 가열 용출물(lysate)을 포함하는 탈모 방지, 발모/육모 촉진, 모발 성장/생장을 목적으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 붉은 동백꽃 유래의 신규한 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) R-camellia 균주 및 상기 균주의 가열 용출물(lysate)을 포함하는 탈모 방지, 발모/육모 촉진, 모발 성장/생장을 목적으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물에 관한 것이다.
최근 chemical 원료, 곤충 및 동물성 원료의 인체 유해성으로 인해, 해당 원료의 사용을 지양하게 됨에 따라 자연 유래의 친 바이오 효능 소재에 대한 연구개발이 활발하게 진행되고 있으며, 안전성 이슈가 있는 chemical 원료와 달리 프로바이오틱스(Probiotics)는 미국과 유럽의 안전성 평가기준에서 인체에 위험성이 없는 것으로 간주되고 있다.
특히, 식품 시장에서는 이미 프로바이오틱스의 유당불내증 개선과 면역체계 강화, 염증과 알레르기 반응 개선 등의 다양한 효능이 입증되어 그 활용가치가 매우 큰 것으로 평가받고 있다.
미생물 자원은 석유, 물 등과는 달리 재생산할 수 있다는 점에서 지속가능한 자원으로 분류되고, 다양한 환경에 적응한 미생물 고유의 특성을 이용하므로 연구 및 산업적 적용 가능성이 매우 높다.
이에, 프로바이오틱스를 활용하여 최근 급증하고 있는 탈모환자에 적용하기 위한 탈모 방지, 발모/육모 촉진, 모발 성장/생장을 목적으로 한 제품 개발이 이루어지고 있으며, 일 예로, 본 발명의 동일 출원인이 출원한 대한민국공개특허 제10-2017-0038462호 등이 있다.
한편, 모근을 구성하는 여러 세포 중에서 모유두세포(Dermal Papilla Cells, DPCs)는 모낭 가장 아래쪽에 위치하고 있으며 모발의 발생과 형성에 가장 중요한 작용을 하는 것으로 알려지고 있다.
모유두세포의 표식 유전자로는 smooth muscle actin, nexin, thrombospondin 1 등이 알려지고 있으나 아직 모유두세포에 의한 모발 성장 조절의 정확한 기전이나 새로운 조절 물질에 관한 연구는 아직 미비한 상태이다.
이에, 본 발명자들은 모낭 모유두세포(hDPCs, human Dermal Papilla Cells)의 증식을 촉진시킬 수 있는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물에 대해 다각적으로 연구를 수행한 결과, 붉은 동백꽃에서 획득한 신규의 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) R-camellia 균주가 모낭 모유두세포의 증식을 촉진함을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 목적은 붉은 동백꽃 유래의 신규한 락토코커스 락티스 R-camellia 균주(Lactococcus lactis R-camellia, 수탁번호 KCCM12006P)를 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 목적은 상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주를 이용한 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.
상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따르면 붉은 동백꽃에서 분리 동정한 신규의 락토코커스 락티스 R-camellia 균주(Lactococcus lactis R-camellia, 수탁번호 KCCM12006P)를 제공한다.
상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는 모낭 모유두세포(human Dermal Papilla Cells, hDPCs)의 증식을 촉진시킬 수 있으며, 모낭 모유두세포에서의 탈모 유발 인자(TGFbeta2) 발현 억제 및 육모 촉진 인자(VEGF) 발현 증진 효과를 나타낼 수 있다.
상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는 락토코커스 락티스 표준균주 대비 더 우수한 당이용성을 나타낼 수 있으며, 특히, 상기 균주는 당이용성에 있어서, 상기 락토코커스 락티스 표준균주와 달리 L-아라비노스(L-arabinose), D-만니톨(D-mannitol) 및 D-사카로스(D-saccharose)를 추가로 더 이용할 수 있다.
또한, 본 발명의 다른 실시예에 따르면, 상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 용출물(lysate)을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물을 제공한다.
상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 용출물은 락토코커스 락티스 R-camellia의 세포를 가열하여 용출시켜 얻은 가열 용출물일 수 있다.
상기 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물은 천연 성분으로서 인체 적용시 자극이나 독성이 거의 없어 안정성이 우수하며, 모낭 모유두세포의 증식을 촉진하고, 모낭 모유두세포에서의 탈모 유발 인자(TGFbeta2) 발현 억제 및 육모 촉진 인자(VEGF) 발현 증진 효과가 있어, 우수한 탈모 방지 및 발모 촉진 효과를 나타낼 수 있다.
상기 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물은 두피용 또는 모발용 조성물을 포함하는 화장료 조성물이거나, 피부 외용제, 경구 투여제 또는 비경구 투여제를 포함하는 약학 조성물 또는 식품보조제일 수 있다.
이상에서 설명한 바와 같이 본 발명은, 붉은 동백꽃에서 획득한 신규의 락토코커스 락티스 R-camellia 균주(Lactococcus lactis R-camellia, 수탁번호 KCCM12006P) 및 이를 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물을 제공함으로써, 인체 독성 또는 유해성으로부터 자유로운 자연 유래의 친 바이오 효능 소재의 조성물을 제공할 수 있는 장점이 있다.
또한, 상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는 모낭 모유두세포의 증식을 촉진시키며, 모낭 모유두세포에서의 탈모 유발 인자(TGFbeta2) 발현 억제 및 육모 촉진 인자(VEGF) 발현 증진 효과를 나타내는 동시에, 우수한 당이용성을 나타내고 있어, 탈모환자에 적용하기 위한 탈모 방지, 발모/육모 촉진, 모발 성장/생장을 목적으로 한 제품의 개발에 이용할 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 16S rDNA 유전자 염기서열(a) 및 분자계통학적 분류(b)를 나타내는 도면이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 락토코커스 락티스 R-camellia 용출물의 모낭 모유두세포 증식 촉진 효과를 나타낸 결과 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 락토코커스 락티스 R-camellia 용출물의 모낭 모유두세포에서의 탈모 유발 인자(TGFbeta2) 발현 억제 효과를 나타낸 결과 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 락토코커스 락티스 R-camellia 용출물의 모낭 모유두세포에서의 육모 촉진 인자(VEGF) 발현 증진 효과를 나타낸 결과 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 락토코커스 락티스 R-camellia 용출물의 모낭 모유두세포 증식 촉진 효과를 나타낸 결과 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 락토코커스 락티스 R-camellia 용출물의 모낭 모유두세포에서의 탈모 유발 인자(TGFbeta2) 발현 억제 효과를 나타낸 결과 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 락토코커스 락티스 R-camellia 용출물의 모낭 모유두세포에서의 육모 촉진 인자(VEGF) 발현 증진 효과를 나타낸 결과 그래프이다.
이하, 본 발명에 대한 이해를 돕기 위하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.
본 발명은 붉은 동백꽃에서 분리 동정한 신규한 락토코커스 락티스 R-camellia(Lactococcus lactis R-camellia)균주를 제공한다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 균주는 수탁번호 KCCM12006P로 수탁된 균주로서, 제주도에서 채집한 동백나무(Camellia japonica)의 붉은 꽃으로부터 단일 균주를 분리하고, 분리된 균주를 16S rDNA 분석으로 동정한 결과 락토코커스 락티스와 가장 높은 상동성을 나타내어, 상기 균주를 락토코커스 락티스 R-camellia(Lactococcus lactis R-camellia)로 명명하고 한국미생물보존센터(KCCM)에 2017년 04월 04일자로 기탁하였다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는 락토코커스 락티스 표준균주(Lactococcus lactis KCTC3769, type strain)에 비해 모낭 모유두세포(human Dermal Papilla Cells, hDPCs)의 증식 촉진 효과가 더 높은 것으로 확인되었다(도 2 참조).
또한, 본 발명의 일 실시예에서, 상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는 모낭 모유두세포에서의 탈모 유발 인자(TGFbeta2) 발현을 억제하고, 육모 촉진 인자(VEGF) 발현을 증진시키는 효과가 있는 것으로 확인되었다(도 3 및 도 4 참조).
연구에 의하면 모근을 구성하는 여러 세포 중에서 모유두세포(Dermal Papilla Cells, DPCs)는 모낭 가장 아래쪽에 위치하고 있으며 모발의 발생과 형성에 가장 중요한 작용을 하는 것으로 보고되어 있다.
따라서, 상기 균주는 모낭 모유두세포의 증식을 촉진시킴과 동시에, 모낭 모유두 세포에서의 탈모 유발 인자(TGFbeta2) 발현 억제 및 육모 촉진 인자(VEGF) 발현 증진 효과가 있어, 탈모환자에 적용하기 위한 탈모 방지, 발모/육모 촉진, 모발 성장/생장을 목적으로 한 제품의 개발에 기여할 것으로 기대된다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는 상기 락토코커스 락티스 표준균주에 비해 당이용성이 더 우수한 것으로 확인되었다.
즉, 본 발명에 따른 상기 균주는 당이용성 테스트(BioMerieux사, API 50 CHB kit 사용, 49개의 단일 탄소원(carbon source)을 이용할 수 있는지를 분석함) 결과, 락토코커스 락티스에 속하나, 상기 표준균주와 달리 당이용성에 있어서 L-아라비노스(L-arabinose), D-만니톨(D-mannitol) 및 D-사카로스(D-saccharose)를 추가로 더 이용할 수 있는 것으로 나타났다.
또한, 본 발명은 상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 용출물(lysate)을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 용출물은 락토코커스 락티스 R-camellia의 세포를 가열하여 용출시켜 얻은 가열 용출물일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 용출물은 (1) 상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주를 배지에서 배양하고, (2) 원심 분리를 통해 영양세포를 수확한 후, (3) 수확된 균체를 세척 및 재분산(resuspension)시키고, (4) 가압가온하여 멸균 용기에 담아 동결건조하는 단계를 포함하여, 모낭 모유두세포의 증식을 촉진 시키며 당이용성이 우수한 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 용출물을 제조할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 (1) 단계에서 상기 균주의 배양은 MRS 브로스(Broth) 배지에서 37℃, 24시간 동안 정치 배양한 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 (2) 단계에서 상기 영양세포의 수확은 상기 배지 내 균 농도가 5 × 108 ~ 1 × 109 CFU/mL 가 되었을 때, 4℃ 에서, 4000rpm의 원심 분리를 통해 수확한 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 (3) 단계에서 상기 균체의 세척은 인산완충생리식염수(phosphate buffered saline, PBS)로 세척한 것일 수 있으며, 상기 균체의 재분산은 상기 세척된 균체를 PBS에 5 × 108 ~ 1 × 109 CFU/mL 의 농도로 재분산 시킨 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 (4) 단계에서 상기 가압가온은 100℃에서 10분 동안 실시할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 조성물은 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 용출물을 유효성분으로 포함하는 동결건조된 제형일 수 있으며, 천연 성분으로서 인체 적용시 자극이나 독성이 거의 없어 안정성이 우수하고, 모낭 모유두세포의 증식을 촉진시키며, 모낭 모유두 세포에서의 탈모 유발 인자(TGFbeta2) 발현 억제 및 육모 촉진 인자(VEGF) 발현 증진 효과가 있을 뿐만 아니라, 우수한 당이용성을 나타내고 있어 탈모 방지, 발모/육모 촉진, 모발 성장/생장에 우수한 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서 상기 조성물은 조성물 총 중량에 대해 상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 용출물이 0.001 ~ 20 중량% 함유될 수 있으며, 바람직하게는 0.001 ~ 1 중량% 함유될 수 있으나, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니며, 후술하는 상기 조성물의 사용 용도에 따라 당업자가 상기 용출물의 함량을 가감하여 사용할 수 있음은 물론이다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 조성물은 약학 조성물인 것일 수 있다.
상기 약학 조성물은 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 용출물 이외에 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 약제학적 보조제 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 함유할 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 다양한 경구 투여제 또는 비경구 투여제 형태로 제형화 할 수 있다.
상기 경구 투여제는 예를 들면, 정제, 환제, 경질 및 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 분제, 산제, 세립제, 과립제, 펠렛제 등이 있으며, 이들 제형은 유효성분 이외에 계면 활성제, 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로오스 및 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및 폴리에틸렌 글리콜)를 함유할 수 있다. 정제는 또한 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로오스, 나트륨 카복시메틸셀룰로오스 및 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제, 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제 등의 약제학적 첨가제를 함유할 수 있다. 상기 정제는 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다.
또한, 상기 비경구 투여 형태로는 경피 투여형 제형일 수 있으며, 예를 들어 주사제, 점적제, 연고, 로션, 겔, 크림, 스프레이, 현탁제, 유제, 좌제(坐劑), 패취 등의 제형일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 조성물의 투여량 결정은 통상의 기술자의 수준 내에 있으며, 약물의 1일 투여 용량은 투여하고자 하는 대상의 진행 정도, 발병 시기, 연령, 건강상태, 합병증 등의 다양한 요인에 따라 달라지지만, 성인을 기준으로 할 때, 일 측면에서 체중 1kg당 상기 조성물 1mg 내지 20mg, 다른 일 측면에서 체중 1kg당 상기 조성물 1mg 내지 10mg을 1일 1 내지 3회 분할하여 투여할 수 있으며, 상기 투여량은 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.
상기 약학 조성물은 피부 외용제일 수 있으며, 상기 피부 외용제는 피부 외부에서 도포되는 어떠한 것이라도 포함될 수 있는 총칭으로서 다양한 제형의 의약품이 여기에 포함될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 조성물은 화장료 조성물인 것일 수 있다.
상기 화장료 조성물에는 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 용출물 이외에 기능성 첨가물 및 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분이 추가로 포함될 수 있다. 상기 기능성 첨가물로는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분을 포함할 수 있다. 이외에 포함되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알코올, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.
상기 화장료 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절히 선택할 수 있다. 예를 들어, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 화장료 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화 될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.
이 뿐만 아니라, 상기 화장료 조성물은 두피용 또는 모발용 조성물 등으로 사용될 수 있다. 따라서 상기 화장료 조성물은 두피 및 모발에 함께 사용하는 제형, 예를 들어 샴푸, 린스, 스칼프트리트먼트, 헤어트리트먼트, 두피 모발 겸용 트리트먼트, 탈모 방지 모발용 트리트먼트, 손상모발용 트리트먼트, 잔류(leave-in) 컨디셔너, 워시오프(wash-off) 컨디셔너 또는 헤어 에센스 등 두피 또는 모발, 두피 및 모발 겸용 제품 등으로 제형화될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 조성물은 식품보조제일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 식품보조제의 제형은 특별히 한정되지 않으나, 예를 들어, 정제, 과립제, 분말제, 드링크제와 같은 액체, 캐러멜, 겔, 바 등으로 제형화될 수 있다. 각 제형의 식품보조제는 유효 성분 이외에 해당 분야에서 통상적으로 사용되는 성분들을 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 선정하여 배합할 수 있으며, 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승 효과가 일어날 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 식품보조제 조성물에 있어서, 상기 조성물의 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 1mg 내지 2,000mg 보다 구체적으로는 1mg 내지 1,000mg이 될 수 있으나, 이에 제한되지 않으며, 투여하고자 하는 대상의 연령, 건강 상태, 합병증 등 다양한 요인에 따라 달라질 수 있다.
또한, 상기 식품보조제는, 예를 들어, 츄잉껌, 캐러멜 제품, 캔디류, 빙과류, 과자류 등의 각종 식품류, 청량 음료, 미네랄 워터, 알코올 음료 등의 음료 제품, 비타민이나 미네랄 등을 포함한 건강기능성 식품류일 수 있다.
이외에도, 상기 식품보조제는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 증진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 일 관점에 있어서, 기능성 식품 조성물들은 천연 과일 주스, 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있음은 물론이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명하다 할 것이다.
<실시예 1> 붉은 동백꽃으로부터 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 분리 및 동정
1. 균주의 분리
제주도에서 채집한 동백나무(Camellia japonica)의 붉은 꽃을 멸균 증류수에 1회 세척하여 이물질을 제거하고 중량 대비 10배의 인산완충생리식염수(phosphate buffered saline, PBS)에 침지시킨 후 250 rpm의 속도로 1시간 동안 반응시켰다. 상기 반응 용액을 브롬크레졸퍼플 아가(plate count agar with bromcresol purple, BCP agar)에 적정량 분주하여 배양하고, 주변이 노란색으로 변하는 콜로니(colony)를 취하여 MRS 아가(MRS agar) 배지에서 단독배양 하였다. 상기 MRS 아가 배지에 옮긴 콜로니를 여러 회에 걸쳐 계대배양(subculture)하여 단일 균주를 분리하였다. 상기와 같은 방법으로 붉은 동백꽃으로부터 미지의 균주를 분리하였다.
2.
균주의 동정
상기와 같이 분리된 균주의 미생물 동정 및 분류를 위한 16S rDNA 염기서열 분석 결과 락토코커스 락티스 MP14_2B(Lactococcus lactis MP14_2B)와 가장 높은 상동성을 나타내어 상기 미생물을 락토코커스 락티스로 동정하고 락토코커스 락티스 R-camellia(Lactococcus lactis R-camellia)로 명명하였으며, 한국미생물보존센터에 2017년 04월 04일자로 기탁하였다(수탁번호 KCCM12006P). 얻어진 결과는 도 1에 나타내었다.
<실시예 2> 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 배양 및 용출물의 제조
분리 동정한 락토코커스 락티스 R-camellia 균주를 배지(MRS Broth)에서 37℃, 24시간 동안 정치 배양하였다. 액체 배지 내 균 농도가 5 × 108 ~ 1 × 109 CFU/mL 가 되었을 때, 4℃ 에서, 4000rpm 원심 분리를 통하여 영양세포를 수확하고 인산완충생리식염수(phosphate buffered saline, PBS)로 균체를 세척하였다. 상기 세척된 균체를 PBS에 5 × 108 ~ 1 × 109 CFU/mL 의 농도로 재분산(resuspension)시키고, 100℃에서 10분간 가열하여 사멸시키고 멸균용기에 담아 동결건조하여 용출물(lysate)을 제조하였다.
<시험예 1> 모낭 모유두세포의 증식 효과(MTT assay)
상기 실시예 2에서 제조된 용출물을 이용하여 모낭 모유두세포(human Dermal Papilla Cells, hDPCs)에서의 증식 효과를 확인하였다.(도 2 참조)
1. hDPCs 분리 및 배양
후두부 두피조직으로부터 현미경을 이용하여 모낭 모유두세포를 분리하여 1형 콜라겐(collagen type)이 코팅된 배양접시에서 14일 동안 배양하였다. 항생제(1%), 펀지존(fungizone, 0.1%), 20% FBS를 첨가한 DMEM (Dulbecco's modified eagles medium; HyClone GE Healthcare)을 포함하는 배양 배지, 5% CO2, 37℃ 조건에서 72시간 동안 배양 후, 10% FBS 첨가한 DMEM 배지로 배지를 교체한 후, 세포가 dish의 90% 이상 자랐을 때, 배양된 세포를 0.25% trypsin/10mM EDTA (Welgene)를 이용하여 세포를 모으고, 10% FBS 첨가한 DMEM 배지, 5% CO2, 37℃ 에서 72시간(세포가 dish의 90% 이상 자랄 때까지) 동안 배양하여 이후 실험에 제공하였다.
2. hDPCs 세포 증식 효과 확인을 위한 배양
96 well plate에 hDPCs를 2000개/well씩 접종 후 5% CO2, 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 여기에 상기 실시예 2에서 제조된 용출물을 각각 1ppm, 5ppm 및 10ppm 처리하여 72시간 동안 5% CO2, 37℃에서 배양하였다. 대조군(control)으로는 무처리군을 사용하였고, 양성 대조군으로 5% FBS를 상기 용출물과 동량 처리하였으며, 기존의 락토코커스 락티스 균주와의 비교를 위하여 락토코커스 락티스 표준균주(type strain, Lactococcus lactis KCTC3769)를 상기 용출물과 동량 처리하였다.
3. 세포 증식 측정: 대조군(control) 및 표준균주(type strain) 대비 120% 이상 생존도(viability)
상기 96 well plate의 각 well마다 MTT 용액(Sigma, 70㎍/well)을 넣고 5% CO2, 37℃에서 3시간 동안 배양하였다. 이후 포르마잔(formazan)을 DMSO로 녹여 평판배양측정기(Microplate reader)를 사용하여 570nm에서 흡광도를 측정하였다. 측정된 결과에서 대조군(control)의 값을 100으로 하여 상대적인 세포 증식율을 도 2에 나타내었다.
도 2의 결과에서, 실시예 2의 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는 120% 이상의 생존도(viability)를 보여주고 있어, 우수한 모낭 모유두 세포 증식 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있으며, 이에 따라 탈모 방지, 발모/육모 촉진, 모발 성장/생장에 우수한 효과를 나타낼 수 있다.
<시험예 2> 당이용성 테스트
락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 당이용성을 분석하고, 락토코커스 락티스 표준균주와의 비교를 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.
당이용성을 분석하기 위하여, 50 CHB 키트(BioMeriux사, 프랑스)를 사용하였으며, 락토코커스 락티스 R-camellia 균주 및 락토코커스 락티스 표준균주를 각각 YM 한천배지(Difco사, 미국)에서 37℃에서 2일간 배양한 후 콜로니를 5㎖의 희석액에 고농도로 현탁하여 다시 5㎖의 희석액에 맥팔랜드(McFarland) 탁도 2에 맞추어 현탁하고, 10㎖ CHL 배지(BioMerieux사, 프랑스)에 접종하여 최종적으로 McF 2 탁도에 맞추었다. 수분조절을 위하여 CH50 용기 내에 각 구역마다 5㎖씩 멸균수를 붓고, 접종된 배지를 CH50의 각 구멍의 아래눈금까지 배지를 삽입시킨 후, 미네랄 오일을 각 구멍의 눈금이 볼록해질 때까지 분주하여 37℃에서 배양하면서 반응여부를 +, -로 기록하여 API(BioMeriux사) 분석프로그램을 이용하여 분석하였다.
분석 결과는 하기의 표 1 및 2에 나타내었으며, 당이용성 분석 결과 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)에 속하나 상기 표준균주와 달리 당이용성에 있어서 L-아라비노스(L-arabinose), D-만니톨(D-mannitol) 및 D-사카로스(D-saccharose)를 추가로 더 이용할 수 있는 것으로 나타났다.
| 기질 | 이용성 | 기질 | 이용성 | 기질 | 이용성 |
| 글리세롤 | - | 에리트리톨 | - | D-아라비노스 | - |
| L-아라비노스 | + | 리보스 | + | D-자일로스 | + |
| L-자일로스 | - | 아코나이트 | - | β-메틸-자일로시드 | - |
| 갈락토스 | + | D-글루코오스 | + | D-플럭토스 | + |
| D-만노스 | + | L-솔보스 | - | 람노스 | - |
| 둘시톨 | - | 이노시톨 | - | D-만니톨 | + |
| 솔비톨 | - | α-메틸-D-만노시드 | - | α-메틸-D-글루코시드 | - |
| N-아세틸글루코사민 | + | 아미그달린 | + | 알부틴 | + |
| 이큘린 | + | 살리신 | + | 셀로비오스 | + |
| 말토즈 | + | 락토오스 | + | 멜리비오스 | - |
| D-사카로스 | + | 트레할로스 | + | 인라인 | - |
| 멜레지토스 | - | D-라피노스 | - | 아미돈 | - |
| 글리코겐 | - | 자일리톨 | - | β-젠티오비오스 | + |
| D-투라노스 | - | D-릭소스 | - | D-타가토스 | - |
| D-푸코스 | - | L-푸코스 | - | D-아라비톨 | - |
| L-아라비톨 | - | 글루코네이트 | - | 2-세토글루코네이트 | - |
| 5-세토글루코네이트 | - | 대조군 | - | ||
| +: 이용, -: 비이용 | |||||
| 기질 | 이용성 | 기질 | 이용성 | 기질 | 이용성 |
| 글리세롤 | - | 에리트리톨 | - | D-아라비노스 | - |
| L-아라비노스 | - | 리보스 | + | D-자일로스 | + |
| L-자일로스 | - | 아코나이트 | - | β-메틸-자일로시드 | - |
| 갈락토스 | + | D-글루코오스 | + | D-플럭토스 | + |
| D-만노스 | + | L-솔보스 | - | 람노스 | - |
| 둘시톨 | - | 이노시톨 | - | D-만니톨 | - |
| 솔비톨 | - | α-메틸-D-만노시드 | - | α-메틸-D-글루코시드 | - |
| N-아세틸글루코사민 | + | 아미그달린 | + | 알부틴 | + |
| 이큘린 | + | 살리신 | + | 셀로비오스 | + |
| 말토즈 | + | 락토오스 | + | 멜리비오스 | - |
| D-사카로스 | - | 트레할로스 | + | 인라인 | - |
| 멜레지토스 | - | D-라피노스 | - | 아미돈 | - |
| 글리코겐 | - | 자일리톨 | - | β-젠티오비오스 | + |
| D-투라노스 | - | D-릭소스 | - | D-타가토스 | - |
| D-푸코스 | - | L-푸코스 | - | D-아라비톨 | - |
| L-아라비톨 | - | 글루코네이트 | - | 2-세토글루코네이트 | - |
| 5-세토글루코네이트 | - | 대조군 | - | ||
| +: 이용, -: 비이용 | |||||
<시험예 3> 탈모 유발 인자(TGFbeta2) 억제 효과
상기 실시예 2에서 제조된 용출물을 이용하여 모낭 모유두세포에서의 탈모 유발 인자(TGFbeta2) 억제 효과를 확인하였다(도 3 참조).
1. hDPCs 분리 및 배양
후두부 두피조직으로부터 현미경을 이용하여 모낭 모유두세포를 분리하여 1형 콜라겐(collagen type Ⅰ)이 코팅된 배양접시에서 14일 동안 배양하였다. 항생제(1%), 펀지존(fungizone, 0.1%), 20% FBS를 첨가한 DMEM (Dulbecco’s modified eagles medium; HyClone GE Healthcare)을 포함하는 배양 배지, 5% CO2, 37℃ 조건에서 72시간 동안 배양 후, 10% FBS 첨가한 DMEM 배지로 배지를 교체한 후, 세포가 dish의 90% 이상 자랐을 때, 배양된 세포를 0.25% trypsin/10mM EDTA (Welgene)를 이용하여 세포를 모으고, 10% FBS 첨가한 DMEM 배지, 5% CO2, 37℃ 에서 72시간(세포가 dish의 90% 이상 자랄 때까지) 동안 배양하여 이후 실험에 제공하였다.
2. hDPCs의 TGFbeta2 mRNA 발현 억제 확인
6 well plate에 hDPCs를 150000개/well씩 접종 후 5% CO2, 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 여기에 상기 실시예 2에서 제조된 용출물을 각각 1ppm, 5ppm 및 10ppm 처리하여 24시간 동안 5% CO2, 37℃에서 배양하였다. 대조군(control)으로는 무처리군을 사용하였고, 기존의 락토코커스 락티스 균주와의 비교를 위하여 락토코커스 락티스 표준균주(type strain, Lactococcus lactis KCTC3769)를 상기 용출물과 동량 처리하였다.
획득한 hDPCs에 Trizol(Invitrogen) 용액 1mL을 첨가하여, hDPCs로부터 RNA를 분리하였다. 분리된 RNA는 Nanodrop을 이용하여 농도, 순도 및 무결성을 확인하였다. hDPCs로부터 분리된 RNA를 이용하여 Quantitative real-time PCR (TaqMan PCR technology, TaqMan Universal PCR Master Mix, part no. 4304437) 을 수행하여 hDPCs mRNA를 정량하였다. 이때 RNA 농도를 보정하기 위하여, GAPDH(house keeping gene) 유전자를 비교군으로 사용하였다. 그리고 무처리군과 상기 실시예 2에서 제조된 용출물 처리군 내의 TGFbeta2 유전자의 상대적인 양을 비교하기 위하여 Quantitative real-time PCR 결과를 하기 공식을 이용하여 분석하였다.
Fold change = 2-ΔΔCt (threshold cycle number)
ΔΔCt=(Ct of gene of TGFbeta2 용출물 내 - Ct of GAPDH 용출물 내)-(Ct of TGFbeta2 무처리군 내 - Ct of GAPDH 무처리군 내)
분석한 결과를 가지고 Student's t test를 시행하였고, p<0.05인 경우 의미있는 차이라고 판단하였다. 그 결과는 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타낸 바와 같이 용출물 5, 10 ppm 처리군은 무처리군에 비하여, TGFbeta2 유전자의 발현이 각각 0.79, 0.71배 이상 감소되어 있으며, 이는 통계적으로 유의한 수준이다. 상기 결과는 용출물 처리에서 분리한 hDPCs은 TGFbeta2 유전자를 저농도로 포함하고 있다는 것을 시사하며, 따라서 본 발명에 따른 상기 용출물은 탈모 방지에 우수한 효과를 나타낼 수 있다.
<시험예 4> 육모 촉진 인자(VEGF) 증진 효과
상기 실시예 2에서 제조된 용출물을 이용하여 모낭 모유두세포에서의 육모 촉진 인자(VEGF) 증진 효과를 확인하였다(도 4 참조).
1. hDPCs 분리 및 배양
후두부 두피조직으로부터 현미경을 이용하여 모낭 모유두세포를 분리하여 1형 콜라겐(collagen type Ⅰ)이 코팅된 배양접시에서 14일 동안 배양하였다. 항생제(1%), 펀지존(fungizone, 0.1%), 20% FBS를 첨가한 DMEM (Dulbecco’s modified eagles medium; HyClone GE Healthcare)을 포함하는 배양 배지, 5% CO2, 37℃ 조건에서 72시간 동안 배양 후, 10% FBS 첨가한 DMEM 배지로 배지를 교체한 후, 세포가 dish의 90% 이상 자랐을 때, 배양된 세포를 0.25% trypsin/10mM EDTA (Welgene)를 이용하여 세포를 모으고, 10% FBS 첨가한 DMEM 배지, 5% CO2, 37℃ 에서 72시간(세포가 dish의 90% 이상 자랄 때까지) 동안 배양하여 이후 실험에 제공하였다.
2. hDPCs의 VEGF mRNA 발현 확인
6 well plate에 hDPCs를 150000개/well씩 접종 후 5% CO2, 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 여기에 상기 실시예 2에서 제조된 용출물을 각각 1ppm, 5ppm 및 10ppm 처리하여 24시간 동안 5% CO2, 37℃에서 배양하였다. 대조군(control)으로는 무처리군을 사용하였고, 기존의 락토코커스 락티스 균주와의 비교를 위하여 락토코커스 락티스 표준균주(type strain, Lactococcus lactis KCTC3769)를 상기 용출물과 동량 처리하였다.
획득한 hDPCs에 Trizol(Invitrogen) 용액 1mL을 첨가하여, hDPCs로부터 RNA를 분리하였다. 분리된 RNA는 Nanodrop을 이용하여 농도, 순도 및 무결성을 확인하였다. hDPCs로부터 분리된 RNA를 이용하여 Quantitative real-time PCR (TaqMan PCR technology, TaqMan Universal PCR Master Mix, part no. 4304437) 을 수행하여 hDPCs mRNA를 정량하였다. 이때 RNA 농도를 보정하기 위하여, GAPDH(house keeping gene) 유전자를 비교군으로 사용하였다. 그리고 무처리군과 상기 실시예 2에서 제조된 용출물 내의 VEGF 유전자의 상대적인 양을 비교하기 위하여 Quantitative real-time PCR 결과를 하기 공식을 이용하여 분석하였다.
Fold change = 2-ΔΔCt (threshold cycle number)
ΔΔCt=(Ct of gene of VEGF 용출물 내 - Ct of GAPDH 용출물 내)-(Ct
of VEGF 무처리군 내 - Ct of GAPDH 무처리군 내)
분석한 결과를 가지고 Student's t test를 시행하였고, p<0.05인 경우 의미있는 차이라고 판단하였다. 그 결과는 도 4에 나타내었다.
도 4에 나타난 바와 같이 용출물 10ppm 처리군은 무처리군에 비하여, VEGF 유전자의 발현이 4.94배 이상 증가되어 있으며, 이는 통계적으로 유의한 수준이다. 상기 결과는 용출물 처리에서 분리한 hDPCs은 VEGF 유전자를 고농도로 포함하고 있다는 것을 시사하며, 따라서 본 발명에 따른 상기 용출물은 발모/육모 촉진, 모발 성장/생장에 우수한 효과를 나타낼 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 조성물의 제형예를 아래에서 설명하나, 이들 제형예 외에도 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 제형예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<제형예 1> 정제
본 발명의 실시예 1 및 2에 따라 제조된 용출물 100mg, 락토오스 400mg, 옥수수 전분 400mg 및 스테아린산 마그네슘 2mg을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
<제형예 2> 캡슐제
본 발명의 실시예 1 및 2에 따라 제조된 용출물 100mg, 락토오스 400mg, 옥수수 전분 400mg 및 스테아린산 마그네슘 2mg을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조 방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
<제형예 3> 과립제
본 발명의 실시예 1 및 2에 따라 제조된 용출물 50mg, 무수결정 포도당 250mg 및 전분 550mg을 혼합하고, 유동층 과립기를 사용하여 과립으로 성형한 후 포에 충진하였다.
<제형예 4> 드링크제
본 발명의 실시예 1 및 2에 따라 제조된 용출물 50mg, 포도당 10g, 구연산 0.6g 및 액상 올리고당 25g을 혼합한 후 정제수 300ml를 가하여 각 병에 200ml씩 충진한 후 130℃에서 4~5초간 살균하여 드링크제를 제조하였다.
<제형예 5> 주사제
하기 표 3에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 주사제를 제조하였다.
| 배합 성분 | 함량 |
| 실시예 1 및 2에 따라 제조된 용출물 | 10-50 mg |
| 주사용 멸균 증류수 | 적량 |
| pH 조절제 | 적량 |
<제형예 6> 유연화장수(스킨로션)
하기 표 4에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 유연화장수를 제조하였다.
| 배합 성분 | 함량 (중량%) |
| 실시예 1 및 2에 따라 제조된 용출물 | 0.2 |
| 글리세린 | 3.0 |
| 부틸렌글리콜 | 2.0 |
| 프로필렌글리콜 | 2.0 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.1 |
| 피이지-12 노닐페닐에테르 | 0.2 |
| 폴리솔베이트 80 | 0.4 |
| 에탄올 | 10.0 |
| 트리에탄올아민 | 0.1 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
<제형예 7> 영양화장수(밀크로션)
하기 표 5에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 영양화장수를 제조하였다.
| 배합 성분 | 함량 (중량%) |
| 실시예 1 및 2에 따라 제조된 용출물 | 1.0 |
| 글리세린 | 3.0 |
| 부틸렌글리콜 | 3.0 |
| 프로필렌글리콜 | 3.0 |
| 카르복시비닐폴리머 | 0.1 |
| 밀납 | 4.0 |
| 폴리솔베이트 60 | 1.5 |
| 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 | 5.0 |
| 스쿠알란 | 5.0 |
| 솔비타세스퀴올레이트 | 1.5 |
| 유동파라핀 | 0.5 |
| 세테아릴 알코올 | 1.0 |
| 트리에탄올아민 | 0.2 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
<제형예 8> 마사지 크림
하기 표 6에 기재된 조성에 따라 통상적인 방법으로 마사지 크림을 제조하였다.
| 배합 성분 | 함량(중량%) |
| 실시예 1 및 2에 따라 제조된 용출물 | 2.0 |
| 글리세린 | 8.0 |
| 부틸렌글리콜 | 4.0 |
| 유동파라핀 | 45.0 |
| 베타글루칸 | 7.0 |
| 카보머 | 0.1 |
| 카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 | 3.0 |
| 밀납 | 4.0 |
| 세테아릴 글루코사이드 | 1.5 |
| 세스퀴 올레인산 소르비탄 | 0.9 |
| 바세린 | 3.0 |
| 파라핀 | 1.5 |
| 방부제, 색소, 향료 | 적량 |
| 정제수 | 잔량 |
<제형예 9> 헤어 로션의 제조
하기 표 7에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 헤어 로션을 제조하였다.
| 성분 | 함량(중량%) |
| 실시예 1 및 2에 따라 제조된용출물 | 2.0 |
| 정제수 | 잔량 |
| 글리세린 | 3.0 |
| 부틸렌그리콜 | 3.0 |
| 유동파라핀 | 7.0 |
| 베타글루칸 | 7.0 |
| 카보머 | 0.1 |
| 에델바이스 추출물 | 2.0 |
| 카프릴릭 카프릭 트리글리세라이드 | 3.0 |
| 스쿠알렌 | 5.0 |
| 세테아릴 그루코사이드 | 1.5 |
| 소르비탄 스테아레이트 | 0.4 |
| 폴리솔베이트 | 1.2 |
| 방부제 | 적량 |
| 향 | 적량 |
| 색소 | 적량 |
| 트리에탄올 아민 | 0.1 |
<제형예 10> 샴푸 조성물의 제조
하기 표 8에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 샴푸 조성물을 제조하였다.
| 성분(중량%) | 함량(중량%) |
| 폴리쿼터늄-10 | 0.5 |
| 소듐라우레스설페이트 | 20 |
| 실시예 1 및 2에 따라 제조된 용출물 | 0.3 |
| 향 | 1.0 |
| 메틸파라벤 | 0.1 |
| 세틸알콜 | 0.5 |
| 염화나트륨 | 0.8 |
| 정제수 | To 100 |
<제형예 11> 헤어 트리트먼트의 제조
하기 표 9에 기재된 조성으로 통상의 방법에 따라 헤어 트리트먼트를 제조하였다.
| 구분(중량%) | 함량(중량%) |
| 실시예 1 및 2에 따라 제조된 용출물 | 0.5 |
| 스테아라미도프로필디메틸아민 | 2 |
| 글리세린 | 0.5 |
| 향료 | 0.5 |
| 방부제 | 0.03 |
| 세토스테아릴알코올 | 5 |
| 락트산 | 1 |
| 증류수 | to 100 |
Claims (20)
- 수탁번호 KCCM12006P로 수탁된 신규한 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) R-camellia 균주.
- 제 1항에 있어서,
상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는,
붉은 동백꽃에서 분리 동정한 것을 특징으로 하는 락토코커스 락티스 R-camellia 균주.
- 제 1항에 있어서,
상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는,
모낭 모유두세포(human Dermal Papilla Cells, hDPCs)의 증식을 촉진시키는 것을 특징으로 하는 락토코커스 락티스 R-camellia 균주.
- 제 1항에 있어서,
상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는,
모낭 모유두세포에서의 탈모 유발 인자의 발현을 억제시키고, 육모 촉진 인자의 발현을 증진시키는 것을 특징으로 하는 락토코커스 락티스 R-camellia 균주.
- 제 4항에 있어서,
상기 탈모 유발 인자는 전환성장인자-베타2(Transforming Growth Factor-bata 2, TGF-beta2)이며,
상기 육모 촉진 인자는 혈관표피성장인자(Vascular endothelial growth factor, VEGF)인 것을 특징으로 하는 락토코커스 락티스 R-camellia 균주.
- 제 1항에 있어서,
상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는,
락토코커스 락티스 표준 균주 대비 더 우수한 당이용성을 나타내는 것을 특징으로 하는 락토코커스 락티스 R-camellia 균주.
- 제 6항에 있어서,
상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는,
당이용성에 있어서,
L-아라비노스(L-arabinose), D-만니톨(D-mannitol) 및 D-사카로스(D-saccharose)에 대해 양성을 나타내는 것을 특징으로 하는 락토코커스 락티스 R-camellia 균주.
- 수탁번호 KCCM12006P의 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) R-camellia 균주의 용출물(lysate)을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물.
- 삭제
- 제 8항에 있어서,
상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주는,
붉은 동백꽃에서 분리 동정한 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물.
- 제 8항에 있어서,
상기 락토코커스 락티스 R-camellia 균주의 용출물은,
상기 락토코커스 락티스 R-camellia의 세포를 가열하여 용출시켜 얻은 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물.
- 제 8항, 제 10항 및 제 11항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은,
모낭 모유두세포(human Dermal Papilla Cells, hDPCs)의 증식을 촉진시키는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물.
- 제 8항, 제 10항 및 제 11항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은,
모낭 모유두세포에서의 탈모 유발 인자의 발현을 억제시키고, 육모 촉진 인자의 발현을 증진시키는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물.
- 제 13항에 있어서,
상기 탈모 유발 인자는 전환성장인자-베타2(Transforming Growth Factor-bata 2, TGF-beta2)이며,
상기 육모 촉진 인자는 혈관표피성장인자(Vascular endothelial growth factor, VEGF)인 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물.
- 제 8항, 제 10항 및 제 11항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은,
탈모 방지, 발모/육모 촉진 또는 모발 성장/생장용인 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물.
- 제 8항, 제 10항 및 제 11항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은,
화장료 조성물인 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물.
- 제 16항에 있어서,
상기 화장료 조성물은,
두피용 또는 모발용 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물.
- 제 8항, 제 10항 및 제 11항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은,
약학 조성물인 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물.
- 제 18항에 있어서,
상기 약학 조성물은,
피부 외용제, 경구 투여제 또는 비경구 투여제 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물.
- 제 8항, 제 10항 및 제 11항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 조성물은
식품보조제인 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물.
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| KR1020170115666A KR102429032B1 (ko) | 2017-09-11 | 2017-09-11 | 붉은 동백꽃 유래의 신규한 락토코커스 락티스 R-camellia 균주 및 이를 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물 |
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|---|---|---|---|
| KR1020170115666A KR102429032B1 (ko) | 2017-09-11 | 2017-09-11 | 붉은 동백꽃 유래의 신규한 락토코커스 락티스 R-camellia 균주 및 이를 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물 |
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| KR1020170115666A KR102429032B1 (ko) | 2017-09-11 | 2017-09-11 | 붉은 동백꽃 유래의 신규한 락토코커스 락티스 R-camellia 균주 및 이를 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| JP2015187171A (ja) * | 2015-07-16 | 2015-10-29 | 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 | 乳酸菌を利用した育毛・発毛用皮膚外用剤 |
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|---|---|---|---|---|
| KR102394638B1 (ko) | 2015-09-30 | 2022-05-09 | (주)아모레퍼시픽 | 유산균 유래의 세포외 소낭을 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물 |
-
2017
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| JP2015187171A (ja) * | 2015-07-16 | 2015-10-29 | 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構 | 乳酸菌を利用した育毛・発毛用皮膚外用剤 |
Non-Patent Citations (1)
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|---|
| Front. Microbiol. May 2017, 8:846. |
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