KR102392896B1

KR102392896B1 - 신규한 3-((1-벤질-1h-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)퀴나졸린-4(3h)-원 및 n-(1-벤질피페리딘-4-일)퀴나졸린-4-아민 및 이의 용도

Info

Publication number: KR102392896B1
Application number: KR1020200042040A
Authority: KR
Inventors: 한상배; 김영수; 홍진태; 박은재; 하이 남 응우옌; 더 하이 팜; 티 마이 둥 도; 타오 트란 푸웅
Original assignee: 충북대학교 산학협력단
Priority date: 2020-04-07
Filing date: 2020-04-07
Publication date: 2022-05-03
Also published as: KR20210125138A

Abstract

본 발명은 신규한 3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)퀴나졸린-4(3H)-원 및 N-(1-벤질피페리딘-4-일)퀴나졸린-4-아민 및 이의 용도에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 AChE(Acetylcholine esterase) 억제제로서 신규한 3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)퀴나졸린-4(3H)-원 및 N-(1-벤질피페리딘-4-일)퀴나졸린-4-아민 및 신경계 질환 치료제로서의 이의 용도에 관한 것이다.

Description

신규한 3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)퀴나졸린-4(3H)-원 및 N-(1-벤질피페리딘-4-일)퀴나졸린-4-아민 및 이의 용도 {Novel 3-((1-Benzyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)quinazolin-4(3H)-ones and N-(1-benzylpiperidin-4-yl)quinazolin-4-amines and its use}

알츠하이머 질환(Alzheimer's disease, AD)은 치매의 가장 흔한 형태 중 하나이다 [1]. 이는 연령과 관련된 퇴행성 신경 질환이며 전세계 치매 환자의 약 80 %를 차지한다. AD는 임상적으로 점진적인 기억 상실과 인지 기능의 손상을 특징으로 한다 [1,2]. 현재 AD는 65세 이상 인구 약 3천만 명에게 영향을 미치는 것으로 추정된다.

AD의 병리학 연구에 전념한 과학자들의 엄청난 노력에도 불구하고 질병의 주요 원인은 아직 완전히 밝혀지지 않았다. 따라서 AD는 현재까지 치료할 수 없는 신경계 질환 중 하나로 남아있으며 이 질환의 치료는 증상 치료로 남아있다 [1]. 병리학적으로, 다수의 연구를 통해 신경 섬유 엉킴을 초래하는 타우 단백질의 비정상적인 번역 후 변형, 아밀로이드 β-단백질 (Aβ) 전염의 침착, 및 신경 전달 물질 아세틸콜린의 수준 감소와 같은 여러 요인이 AD의 시작 및 진행에 밀접하게 관련되어 있을 것으로 나타났다 [3,4]. 치료적으로, 아세틸콜린 에스테라제 억제제는 여전히 AD의 치료를 위해 승인된 유일한 종류의 약물이다. 예를 들면, Donepezil, tacrine, galanthamine 및 rivastigmine가 존재한다 [5].

아세틸콜린 에스테라아제 (AChE; EC 3.1.1.7)는 세린 히드롤라제 효소 부류에 속한다. 이 효소들은 신경 전달 물질인 아세틸콜린의 가수 분해를 촉진하여 콜린과 아세트산을 유리시켜 콜린성 신경 전달을 종결시킨다 [6]. 따라서, 아세틸콜린 에스테라아제의 억제는 아세틸콜린의 분해를 방지하고 콜린성 신경 전달을 촉진시켜 임상적 이점을 제공한다. 치료의 중요성으로 인해 전 세계의 의약 화학자들은 새로운 AChE 억제제 개발에 많은 노력을 기울이고 있다.

선행문헌

[비특허 문헌 1] Kumar, A.; Singh, A.; Ekavali. A review on Alzheimer's disease pathophysiology and its management: an update. Pharmacol. Rep. 2015, 67, 195-203.

[비특허 문헌 2] Huang, Y.; Mucke, L. Alzheimer mechanisms and therapeutic strategies. Cell 2012, 148, 1204-1222.

[비특허 문헌 3] Yiannopoulou, K.G.; Papageorgiou, S.G. Current and future treatments for Alzheimer's disease. Ther. Adv. Neurol. Disord. 2013, 6, 19-33.

[비특허 문헌 4] Olivero, G.; Grilli, M.; Chen, J.; Preda, S.; Mura, E.; Govoni, S.; Marchi, M. Effects of soluble β-amyloid on the release of neurotransmitters from rat brain synaptosomes. Front Aging Neurosci. 2014, 6, 166.

[비특허 문헌 5] Rodda, J.; Carter, J. Cholinesterase inhibitors and memantine for symptomatic treatment of dementia. BMJ. 2012, 344, e2986.

[비특허 문헌 6] Massoulie, J.; Pezzementi, L.; Bon, S.; Krejci, E.; Vallette, F.M. Molecular and cellular biology of cholinesterases. Prog. Neurobiol, 1993, 41, 31-91.

[비특허 문헌 7] Singh, M.; Kaur, M.; Kukreja, H.; Chugh, R.; Silakari, O.; Singh, D. Acetylcholinesterase inhibitors as Alzheimer therapy: from nerve toxins to neuroprotection. Eur. J. Med. Chem, 2013, 70, 165-188.

본 발명자들은 AChE(Acetylcholine esterase) 억제 활성을 갖는 신규한 화합물을 개발하기 위해 예의 노력한 결과, 3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)퀴나졸린-4(3H)-원 및 N-(1-벤질피페리딘-4-일)퀴나졸린-4-아민 화합물들을 신규 합성하였고, 이들의 AChE 억제 활성 및 DPPH 소거 활성을 실험적으로 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "신경계 질환"은 대상(subject) 또는 개체(유기 개체)의 신경계통의 질환을 의미하며, 여기서 신경계통은 크게 뇌와 척수의 중추신경계, 이를 제외한 말초신경계로 분류된다. 이러한 신경계통의 질환은 부상, 혈관장애, 감염, 퇴행성(degeneration), 구조적 결함, 조양으로 분류되고, 이의 증상으로는 만성 또는 급성 두통, 감각 상실 또는 따끔거림, 근육의 허약 및 피곤, 시력저하, 기억력 저하, 운동실조, 근육경직, 근육경련 등이 있다.

본 발명은 신규한 3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)퀴나졸린-4(3H)-원 및 N-(1-벤질피페리딘-4-일)퀴나졸린-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 또한 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 신경계 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 또한 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 신경계 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

제1구현예에 따르면,

본 발명은 신규한 3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)퀴나졸린-4(3H)-원 및 N-(1-벤질피페리딘-4-일)퀴나졸린-4-아민 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하고자 한다.

본 명세서에서 사용된 용어 “약제학적으로 허용가능한 염”은 상기 화합물의 생물학적 효능 및 특성을 보유하며, 적절한 무독성 유기산 또는 무기산, 또는 무독성 유기염기 또는 무기염기로부터 형성되는 통상의 산부가염 또는 염기 부가염을 의미한다. 산부가염의 예는 염산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산, 술팜산, 인산 및 질산과 같은 무기산으로부터 유래된 산부가염, p-톨루엔술폰산, 살리실산, 메탄술폰산, 옥살산, 숙신산, 시트르산, 말산, 락트산, 푸마르산 등과 같은 유기산으로부터 유래된 산부가염이 포함된다. 염기 부가염의 예는 암모늄, 칼륨, 나트륨, 및 4차 수산화암모늄 예컨대, 수산화테트라메틸암모늄으로부터 유래된 염기부가염이 포함된다. 화합물의 개선된 물리적 및 화학적 안정성, 흡습성, 유동성 및 가용성을 얻기 위해, 약학적 화합물(즉, 약물)을 염으로 화학적으로 변형시키는 것은 약학 화학자에게 잘 공지되어 있는 기술이며, 이러한 내용은 문헌 [H. Ansel et. al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (6th Ed. 1995) at pp. 196 and 1456-1457]에 기재되어 있고, 이 문헌은 본 명세서에 참조로써 포함된다.

본 명세서에서 사용된 용어 “약제학적으로 허용가능한”은 예를 들면, 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제 등이 특정한 화합물이 투여되는 환자에게 약리학적으로 허용될 수 있으며 실질적으로 무독성을 나타낸다는 것을 의미한다.

본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염에 있어서, 상기 화합물은 하기의 화학식 1 또는 2인 것을 특징으로 한다:

[화학식 1]

[화학식 2]

(상기 화학식 1 또는 2에 있어서,

상기 R은 수소, 할로겐, C1-6의 알킬 또는 C1-6의 알콕시를 나타낸다)

본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염에 있어서, 상기 할로겐은 F, Cl, Br 또는 I인 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염에 있어서, 상기 화합물은 하기의 화합물 중 어느 하나인 것을 특징으로 한다:

3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)퀴나졸린-4(3H)-원 (4a);

3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)-6-메틸퀴나졸린-4(3H)-원 (4b);

3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)-7-메틸퀴나졸린-4(3H)-원 (4c);

3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)-7-메톡시퀴나졸린-4(3H)-원 (4d);

3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)-6,7-디메톡시퀴나졸린-4(3H)-원 (4e);

3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)-6-플루오로퀴나졸린-4(3H)-원 (4f);

3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)-7-플루오로퀴나졸린-4(3H)-원 (4g);

3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)-6-클로로퀴나졸린-4(3H)-원 (4h);

3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)-6-브로모퀴나졸린-4(3H)-원 (4i);

3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)-6-아이오도퀴나졸린-4(3H)-원 (4j);

N-(1-벤질피페리딘-4-일)퀴나졸린-4-아민 (6a);

N-(1-벤질피페리딘-4-일)-6-메틸퀴나졸린-4-아민 (6b);

N-(1-벤질피페리딘-4-일)-7-메틸퀴나졸린-4-아민 (6c);

N-(1-벤질피페리딘-4-일)-7-메톡시퀴나졸린-4-아민 (6d);

N-(1-벤질피페리딘-4-일)-6,7-디메톡시퀴나졸린-4-아민 (6e);

N-(1-벤질피페리딘-4-일)-6-플루오로퀴나졸린-4-아민 (6f);

N-(1-벤질피페리딘-4-일)-7-플루오로퀴나졸린-4-아민 (6g);

N-(1-벤질피페리딘-4-일)-6-클로로퀴나졸린-4-아민 (6h);

N-(1-벤질피페리딘-4-일)-6-브로모퀴나졸린-4-아민 (6i); 및

N-(1-벤질피페리딘-4-일)-6-아이오도퀴나졸린-4-아민 (6j).

본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염에 있어서, 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 AChE(Acetylcholine esterase) 억제 활성을 갖는 것을 특징으로 한다.

제2구현예에 따르면,

본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 신경계 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물에 있어서, 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 AChE(Acetylcholine esterase) 억제 활성을 갖는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물에 있어서, 상기 신경계 질환은 알츠하이머 질환(Alzheimer's disease), 뇌졸증(stroke), 뇌경색(cerebral infarct), 머리외상(head trauma), 뇌동맥 경화증(cerebral arteriosclerosis), 및 파킨슨 질환(Parkinson disease) 헌팅턴병(huntington's disease), 크로이츠펠트-야콥병(Creutzfeldt-Jakob disease), 피크(Pick)병, 루이체병(Lewy body disease), 근위축성 축삭 경화증(Amyotrophic lateral sclerosis), 다발성 경화증(multiple sclerosis) 및 허혈성 뇌질환(ischemic brain disease), 뇌혈관성질환, 뇌신경질환, 인지 질환 또는 장애, 정신분열증, 주의력결핍과다 행동질환(ADHD), 주의력결핍질환(ADD), 중추신경계 (CNS) 또는 말초신경계 (PNS) 질환, 길랑-바레 증후군, 신경 세포의 점차적인 사멸에 의한 진행성 치매(dementia) 및 진행성 실조증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 (i) 상기 화학식 1 또는 2로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 약제학적 유효량; 및 (ⅱ) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물의 형태로 제공되는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물에 포함될 수 있는 담체는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물은 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제 또는 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 따라 다양한 방법으로 처방될 수 있다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물의 투여량은 바람직하게는 1일 당 0.001-1000 mg/kg(체중) 일 수 있다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구로 투여되는 경우, 정맥내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물에 포함되는 유효 성분의 농도는 치료 목적, 환자의 상태, 필요 기간, 질환의 위중도 등을 고려하여 결정되며 특정 범위의 농도로 한정되지 않는다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제형화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.

제3구현예에 따르면,

본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 신경계 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명에 따른 건강기능식품 조성물에 있어서, 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 AChE(Acetylcholine esterase) 억제 활성을 갖는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 건강기능식품 조성물에 있어서, 상기 신경계 질환은 알츠하이머 질환(Alzheimer's disease), 뇌졸증(stroke), 뇌경색(cerebral infarct), 머리외상(head trauma), 뇌동맥 경화증(cerebral arteriosclerosis), 및 파킨슨 질환(Parkinson disease) 헌팅턴병(huntington's disease), 크로이츠펠트-야콥병(Creutzfeldt-Jakob disease), 피크(Pick)병, 루이체병(Lewy body disease), 근위축성 축삭 경화증(Amyotrophic lateral sclerosis), 다발성 경화증(multiple sclerosis) 및 허혈성 뇌질환(ischemic brain disease), 뇌혈관성질환, 뇌신경질환, 인지 질환 또는 장애, 정신분열증, 주의력결핍과다 행동질환(ADHD), 주의력결핍질환(ADD), 중추신경계 (CNS) 또는 말초신경계 (PNS) 질환, 길랑-바레 증후군, 신경 세포의 점차적인 사멸에 의한 진행성 치매(dementia) 및 진행성 실조증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 건강기능식품 조성물이 사용될 수 있는 건강식품의 종류에는 제한이 없다. 아울러 본 발명의 두충 추출물은 당업자의 선택에 따라 건강기능식품에 함유될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조 할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림 류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 추출물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다.

본 발명에 따른 건강기능식품 조성물은 상기 유효성분뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함할 수 있다. 상기 탄수화물은 단당류, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 이당류, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 다당류, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트 린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스 파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 건강기능식품은 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 유효성분 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 두충 추출액, 대추 추출액 또는 감초 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.

본 발명에 따른 신규한 3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)퀴나졸린-4(3H)-원 및 N-(1-벤질피페리딘-4-일)퀴나졸린-4-아민는 우수한 AChE 억제 활성 및 DPPH 소거 활성을 나타낸다. 따라서, 본 발명에 따른 화합물은 강력한 신경계 질환 치료제의 활성성분으로 개발될 수 있을 것으로 기대된다.

도 1은 본 발명에 따른 화학식 1 화합물의 합성 경로를 나타낸다.
도 2는 본 발명에 따른 화학식 2 화합물의 합성 경로를 나타낸다.
도 3은 본 발명의 실험예 1에 따른 AChE 억제 활성 실험 결과를 나타낸다.
도 4는 본 발명의 실험예 2에 따른 DPPH 소거 활성 실험 결과를 나타낸다.

이하, 발명의 이해를 돕기 위해 다양한 실시예를 제시한다. 하기 실시예는 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐 발명의 보호범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

<실험 재료 및 방법>

화학물질

모든 생성물들은 균일하게 얻었으며, 이들은 Whatman® 250μm Silica Gel GF Uniplates 상에서 박막 크로마토그래피를 행하고 254 nm 및 365 nm 에서의 UV 광으로 시각화하여 확인하였다. 끓는점은 Gallenkamp Melting Point Apparatus(LabMerchant, London, United Kingdom)를 사용하여 측정하였고, 보정되지 않았다. 크로마토그래피를 사용한 정제는 Merck silica gel 60 (240 - 400 mesh)를 사용하여 오픈 플래쉬 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 통해 행하였다. 핵자기공명스펙트럼(¹H NMR)은 다르게 지정하지 않으면 테트라메틸실란을 내부표준물질로 사용하고 디메틸설폭사이드-d ₆(DMSO-d ₆)를 용매로 사용하여 Bruker 500 MHz 분광기상에서 측정하였다. 화학적 이동(chemical shift)은 내부표준물질인 테트라메틸실란으로부터의 다운필드로 ppm(parts per million)으로 기록하였다. 전자이온화(electron ionization, EI), 전기분무 이온화(electrospray ionization, ESI) 및 고해상도 질량스펙트럼은 각각 PE Biosystems API 200 (Perkin Elmer, Palo Alto, CA, USA) 및 Mariner®(Azco Biotech, Inc. Oceanside, CA, USA) 질량 분광기를 사용하여 측정하였다. 시약 및 용매는 다르게 지정하지 않는 한 Aldrich 또는 Fluka Chemical Corp. (Milwaukee, WI, USA) 또는 머크(Merck)사로부터 구입하여 사용하였다. 용매는 사용 전에 증류하고 건조시켰다.

<실시예>

본 발명에 따른 3-((1-벤질-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)메틸)퀴나졸린-4(3H)-원 및 N-(1-벤질피페리딘-4-일)퀴나졸린-4-아민 화합물들(4a-j, 6a-j)을 도 1에 나타낸 단계에 따라 합성하였다.

실시예 1. 화합물 4a-j 의 합성

과량의 포름 아미드 (4 mL) 중 각각의 2-아미노 벤조dls산 (1a-j) (2 mmol)의 용액을 120 ℃에서 6 시간 동안 교반하였다. 반응 완료 후, 생성 된 혼합물을 냉각시키고 얼음 냉수 (10 mL)에 부었다. NaHCO₃ 5 % 용액을 서서히 첨가하고 pH를 7로 조정하여 백색 고체를 형성하였다. 고체를 여과하고 건조시켜 상응하는 퀴나졸린원 유도체 2를 얻었으며, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.

DMF (3 mL) 중 화합물 2a-j (1 mmol)의 각각의 용액에 K₂CO₃ (165.5 mg, 1.2 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 80 ℃에서 1 시간 동안 교반 한 다음, 촉매량의 KI (8.3 mg, 0.05 mmol)를 첨가하였다. 추가로 15 분 동안 교반 한 후, 톨루엔 중 프로파질 브로마이드 80 % 용액 0.15 ml를 천천히 혼합물에 적가하였다. 반응 혼합물을 다시 60 ℃에서 3 시간 동안 교반 하였다. 반응은 TLC로 확인했다. 반응이 완료된 후, 생성된 혼합물을 냉각시키고 얼음 냉수에 붓고 pH~4로 산성화시켰다. 형성된 백색 고형물을 여과하고 건조시켜 프로파길화 된 화합물 3을 얻었으며, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.

아세토니트릴 (10 mL) 중 화합물 3a-j 및 (아지도메틸) 벤젠 (0.5 mmol)의 각각의 용액을 실온에서 10 분 동안 교반 한 다음, CuI (10 mg, 0.05 mmol)를 첨가하였다. 반응이 완료 될 때까지 (12-24 시간) 혼합물을 60 ℃에서 교반 하였다. 상응하는 생성된 혼합물을 감압 하에서 증발시켜 잔류 물을 수득하고, 이를 50 ml의 DCM에 재용해시켰다. 혼합물을 여과하고 DCM 층을 감압 하에 증발시켜 표적 화합물 4a-j를 수득 하였다.

3-((1-Benzyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)quinazolin-4(3H)-one (4a)

White solid; Yield: 68%. mp: 169-170 oC. Rf = 0.67 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3138, 3061 (CH, arene); 2941 (CH, CH2); 1676 (C=O); 1609, 1474 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.61 (1H, s, H-2); 8.24 (1H, s, H-6'); 8.15 (1H, d, J = 8.00 Hz, H-5); 7.84 (1H, t, J = 7.50 Hz, H-7); 7.77 (1H, d, J = 7.50 Hz, H-8); 7.56 (1H, t, J = 7.50 Hz, H-6); 7.40-7.31 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 5.57 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 5.30 (2H, s, H-1'a, H-1'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 160.30, 148.67, 148.15, 136.21, 134.96, 129.23, 129.19, 128.91, 128.68, 128.63, 128.53, 127.74, 126.56, 124.66, 122.03, 54.07, 53.44, 41.62, 31.16. ESI-MS m/z: 318.00 [M+H]+ .

3-((1-Benzyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)-6-methylquinazolin-4(3H)-one (4b)

White solid; Yield: 65%. mp: 175-176 oC. Rf = 0.68 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3113, 3067 (CH, arene); 2986 (CH, CH2); 1657 (C=O); 1603, 1454 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.40 (1H, s, H-2); 8.06 (1H, s, H-6'); 7.85 (1H, s, H-5); 7.57 (1H, dd, J = 8.25 Hz, J' = 1.75 Hz, H-7); 7.51 (1H, d, J = 8.50 Hz, H-8); 7.29-7.21 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 5.47 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 5.16 (2H, s, H-1'a, H-1'b); 2.35 (3H, s, 6-CH3). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 160.28, 147.57, 146.39, 137.43, 136.37, 136.19, 129.24, 129.23, 129.22, 129.21, 129.20, 129.19, 128.63, 128.50, 128.49, 127.60, 125.86, 124.25, 121.84, 53.31, 41.45, 21.28. ESI-MS m/z: 312.10 [M+H]+ .

3-((1-Benzyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)-7-methylquinazolin-4(3H)-one (4c)

White solid; Yield: 67%. mp: 176-177 oC. Rf = 0.68 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3136, 3063 (CH, arene); 2955 (CH, CH2); 1661 (C=O); 1603, 1454 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.44 (1H, d, J = 8.00 Hz, H-2); 8.11 (1H, d, J = 9.50 Hz, H-6'); 7.93 (1H, d, J = 8.50 Hz, H-5); 7.43 (1H, d, J = 5.50 Hz, H-8); 7.29-7.21 (6H, m, H-6, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 5.47 (2H, d, J = 2.50 Hz, H-1"a, H-1"b); 5.17 (2H, d, J = 6.50 Hz, H-1'a, H-1'b); 2.37 (3H, s, 7-CH3). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 160.21, 148.59, 145.50, 136.29, 129.21, 129.07, 128.64, 128.51, 127.34, 126.40, 124.47, 119.68, 53.38, 41.43, 21.76. ESI-MS m/z: 332.00 [M+H]+ .

3-((1-Benzyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)-7-methoxyquinazolin-4(3H)-one (4d)

White solid; Yield: 58%. mp: 191-192 oC. Rf = 0.62 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3084 (CH, arene); 2972 (CH, CH2); 1674 (C=O); 1609, 1450 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.50 (1H, s, H-2); 8.15 (1H, s, H-6'); 7.95 (1H, d, J = 9.00 Hz, H-5); 7.29-7.22 (6H, m, H-8, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 7.05 (1H, d, J = 9.00 Hz, H-6); 5.48 (2H, d, J = 3.00 Hz, H-1"a, H-1"b); 5.17 (2H, s, H-1'a, H-1'b); 3.81 (3H, s, 7-OCH3). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 164.51, 129.23, 129.19, 128.92, 128.69, 128.55, 128.22, 117.45, 109.06, 56.35, 54.07, 53.47. ESI-MS m/z: 348.00 [M+H]+ .

3-((1-Benzyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)-6,7-dimethoxyquinazolin-4(3H)-one (4e)

White solid; Yield: 54%. mp: 211-212 oC. Rf = 0.59 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3061 (CH, arene); 2970 (CH, CH2); 1662 (C=O); 1607, 1499 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.41 (1H, s, H-2); 8.13 (1H, d, J = 5.00 Hz, H-6'); 7.31-7.22 (6H, m, H-5, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 7.13 (1H, s, H-8); 5.49 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 5.18 (2H, s, H-1'a, H-1'b); 3.78 (3H, s, 7-OCH3); 3.76 (3H, s, 6-OCH3). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 159.53, 154.97, 149.33, 147.33, 144.20, 136.24, 129.23, 128.68, 128.56, 124.61, 115.06, 108.50, 105.51, 56.49, 56.18, 53.45, 41.58, 31.16. ESI-MS m/z: 378.10 [M+H]+ .

3-((1-Benzyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)-6-fluoroquinazolin-4(3H)-one (4f)

White solid; Yield: 63%. mp: 181-182 oC. Rf = 0.65 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3061, 3028 (CH, arene); 2922 (CH, CH2); 1689 (C=O); 1605, 1483 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.47 (1H, s, H-2); 8.12 (1H, s, H-6'); 7.74-7.64 (3H, m, H-5, H-7, H-8); 7.29-7.21 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 5.48 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 5.19 (2H, s, H-1'a, H-1'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 161.74, 159.78, 159.72, 147.91, 145.28, 136.33, 130.71, 130.64, 129.22, 128.65, 128.51, 127.93, 124.42, 123.52, 123.33, 111.30, 111.11, 53.35, 41.65. ESI-MS m/z: 336.00 [M+H]+ .

3-((1-Benzyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)-7-fluoroquinazolin-4(3H)-one (4g)

White solid; Yield: 60%. mp: 185-186 oC. Rf = 0.65 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3107, 3061 (CH, arene); 2954 (CH, CH2); 1661 (C=O); 1603, 1477 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.53 (1H, s, H-2); 8.13 (1H, s, H-6'); 8.11-8.10 (1H, m, H-5); 7.43 (1H, d, J = 10.00 Hz, H-6); 7.35-7.21 (6H, m, H-8, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 5.48 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 5.18 (2H, s, H-1'a, H-1'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 167.08, 165.08, 163.37, 159.69, 150.46, 149.88, 136.29, 129.80, 129.71, 129.22, 128.65, 128.51, 127.93, 124.49, 119.13, 116.38, 116.19, 112.97, 112.80, 53.37, 41.60. ESI-MS m/z: 336.00 [M+H]+ .

3-((1-Benzyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)-6-chloroquinazolin-4(3H)-one (4h)

White solid; Yield: 67%. mp: 191-192 oC. Rf = 0.64 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3107 (CH, arene); 2999, 2953 (CH, CH2); 1665 (C=O); 1605, 1472 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.50 (1H, s, H-2); 8.11 (1H, s, H-6'); 7.99 (1H, d, J = 2.50 Hz, H-5); 7.78 (1H, dd, J = 9.00 Hz, J' = 2.50 Hz, H-7); 7.64 (1H, d, J = 9.00 Hz, H-8); 7.28-7.21 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 5.47 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 5.18 (2H, s, H-1'a, H-1'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 159.42, 148.89, 147.13, 142.98, 136.34, 135.07, 131.95, 130.05, 129.22, 128.64, 128.50, 125.52, 124.35, 123.32, 53.33, 41.72. ESI-MS m/z: 352.10 [M+H]+ .

3-((1-Benzyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)-6-bromoquinazolin-4(3H)-one (4i)

White solid; Yield: 63%. mp: 223-124 oC. Rf = 0.66 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3127, 3063 (CH, arene); 2945 (CH, CH2); 1676 (C=O); 1615, 1460 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.51 (1H, s, H-2); 8.12 (1H, d, J = 2.00 Hz, H-5); 8.11 (1H, s, H-6'); 7.89 (1H, dd, J = 8.50 Hz, J' = 2.50 Hz, H-7); 7.56 (1H, d, J = 8.50 Hz, H-8); 7.29-7.21 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 5.48 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 5.18 (2H, s, H-1'a, H-1'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 159.29, 148.97, 147.40, 142.89, 137.77, 136.36, 130.16, 129.22, 128.64, 128.49, 124.29, 123.66, 120.12, 53.33, 41.73. ESI-MS m/z: 396.00 [M+H]+ .

3-((1-Benzyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methyl)-6-iodoquinazolin-4(3H)-one (4j)

White solid; Yield: 65%. mp: 231-232 oC. Rf = 0.63 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3132, 3059 (CH, arene); 2986, 2930 (CH, CH2); 1665 (C=O); 1605, 1458 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.50 (1H, s, H-2); 8.32 (1H, d, J = 2.00 Hz, H-5); 8.11 (1H, s, H-6'); 8.04 (1H, dd, J = 8.50 Hz, J' = 2.00 Hz, H-7); 7.41 (1H, d, J = 8.50 Hz, H-8); 7.29-7.21 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 5.47 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 5.17 (2H, s, H-1'a, H-1'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 159.10, 149.04, 147.68, 143.30, 136.35, 134.81, 129.93, 129.23, 128.65, 128.50, 124.34, 123.85, 92.81, 53.33, 41.74. ESI-MS m/z: 444 [M+H]+ .

실시예 2. 화합물 6a-j 의 합성

화합물 6a-j는 반응식 2에 예시된 바와 같이 3 단계 경로를 통해 합성하였다. 첫번째 단계는 화합물 4a-j에 대해 기재된 것과 마찬가지로, 티 오닐 클로라이드로 염소화하여 4-클로로-퀴나 졸린 유도체 5a-j를 생성 하였다. 화합물 2 및 티오닐 클로라이드의 혼합물을 120 ℃에서 5 시간 동안 교반하였다. 그 다음, 생성된 혼합물을 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득하고, 이를 50 ml의 물에 재용해시켰다. 그 후, 혼합물을 NaHCO₃ 5 %의 용액으로 중화시키고 DCM (3x15 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 합하고 무수 Na₂SO₄로 여과하였다. 용매를 감압하에 제거하여 중간체 5a-j를 수득하였다.

4-클로로-퀴나졸린을 K₂CO₃의 존재하에 1-벤질피페리딘-4-아민과 반응시켰다. 2-프로판올 (10 mL) 중 중간체 5a-j 및 1-벤질피페리딘-4-아민 (1 mmol)의 각각의 용액을 실온에서 10 분 동안 교반한 다음, K₂CO₃ (165.5 mg, 1.2 mmol)을 첨가하였다. 반응이 완료될 때까지 (5 시간) 혼합물을 70 ℃에서 교반하였다. 생성된 혼합물을 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득하고, 이를 50 ml의 DCM에 재용해시켰다. 혼합물을 여과하고 DCM 층을 감압 하에 증발시켜 백색 고체를 수득 하였다. 조 생성물을 칼럼 크로마토 그래피 (DCM / 메탄올 = 100 : 5)로 추가로 정제하여 표적 화합물 6a-j를 수득 하였다.

N-(1-Benzylpiperidin-4-yl)quinazolin-4-amine (6a)

White solid; Yield: 69%. mp: 171-172 oC. Rf = 0.46 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3063 (CH, arene); 2951 (CH, CH2); 1580 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.45 (1H, s, H-2); 8.31 (1H, d, J = 8.00 Hz, NH); 7.91 (1H, d, J = 7.50 Hz, H-5); 7.75 (1H, t, J = 8.00 Hz, H-7); 7.66 (1H, d, J = 8.00 Hz, H-8); 7.50 (1H, t, J = 7.25 Hz, H-6); 7.33-7.25 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 4.23-4.17 (1H, m, H-1'); 3.50 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 2.89-2.87 (2H, m, H-3'a, H-5'a); 2.10-2.06 (2H, m, H-3'b, H-5'b); 1.93-1.90 (2H, m, H-2'a, H-6'a); 1.70-1.67 (2H, m, H-2'b, H-6'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 159.20, 155.57, 149.68, 139.17, 132.91, 129.17, 128.64, 127.91, 127.32, 125.83, 123.34, 115.37, 62.61, 52.84, 48.39, 31.64. ESI-MS m/z: 319.20 [M+H]+ .

N-(1-Benzylpiperidin-4-yl)-6-methylquinazolin-4-amine (6b)

White solid; Yield: 65%. mp: 185-186 oC. Rf = 0.48 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3026 (CH, arene); 2934 (CH, CH2); 1580 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.40 (1H, s, H-2); 8.12 (1H, s, H-5); 7.89 (1H, d, J = 7.50 Hz, H-7); 7.60-7..57 (1H, m, H-8); 7.36-7.25 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 4.21-4.15 (1H, m, H-1'); 3.50 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 2.88-2.86 (2H, m, H-3'a, H-5'a); 2.47 (3H, s, 6-CH3); 2.09-2.05 (2H, m, H-3'b, H-5'b); 1.92-1.90 (2H, m, H-2'a, H-6'a); 1.71-1.63 (2H, m, H-2'b, H-6'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 158.82, 154.81, 147.93, 139.18, 135.37, 134.54, 129.17, 128.64, 127.73, 127.32, 122.27, 115.19, 62.60, 52.85, 48.34, 31.70, 21.59. ESI-MS m/z: 333.20 [M+H]+ .

N-(1-Benzylpiperidin-4-yl)-7-methylquinazolin-4-amine (6c)

White solid; Yield: 67%. mp: 188-189 oC. Rf = 0.49 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3026 (CH, arene); 2938 (CH, CH2); 1574 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.40 (1H, s, H-2); 8.20 (1H, d, J = 8.50 Hz, H-5); 7.82 (1H, d, J = 7.50 Hz, H-6); 7.46 (1H, s, H-8); 7.36-7.25 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 4.20-4.14 (1H, m, H-1'); 3.50 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 2.88-2.86 (2H, m, H-3'a, H-5'a); 2.09 (3H, s, 7-CH3); 2.20-2.05 (2H, m, H-3'b, H-5'b); 1.92-1.89 (2H, m, H-2'a, H-6'a); 1.71-1.63 (2H, m, H-2'b, H-6'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 159.07, 155.65, 149.89, 145.89, 143.01, 139.15, 129.19, 128.64, 127.56, 127.33, 127.11, 126.17, 123.15, 113.22, 62.60, 52.84, 48.31, 31.68, 21.74. ESI-MS m/z: 333.20 [M+H]+ .

N-(1-Benzylpiperidin-4-yl)-7-methoxyquinazolin-4-amine (6d)

White solid; Yield: 54%. mp: 201-202 oC. Rf = 0.45 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3071 (CH, arene); 2947 (CH, CH2); 1582, 1566 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.47 (1H, s, H-2); 8.33 (1H, d, J = 9.50 Hz, H-5); 8.01 (1H, d, J = 7.50 Hz, H-8); 7.45 (1H, t, J = 9.50 Hz, H-6); 7.36-7.25 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 4.21-4.18 (1H, m, H-1'); 4.02 (3H, s, 7-OCH3); 3.50 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 2.89-2.86 (2H, m, H-3'a, H-5'a); 2.09-2.05 (2H, m, H-3'b, H-5'b); 1.92-1.89 (2H, m, H-2'a, H-6'a); 1.70-1.64 (2H, m, H-2'b, H-6'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 162.77, 159.13, 158.90, 158.02, 156.72, 156.09, 152.00, 147.48, 139.16, 129.17, 128.64, 127.33, 124.94, 123.42, 116.89, 116.24, 112.18, 110.58, 109.54, 107.29, 62.57, 57.19, 55.93, 52.84, 52.81, 48.61, 48.26, 31.65. ESI-MS m/z: 349.20 [M+H]+ .

N-(1-Benzylpiperidin-4-yl)-6,7-dimethoxyquinazolin-4-amine (6e)

White solid; Yield: 51%. mp: 231-232 oC. Rf = 0.43 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3132 (CH, arene); 2934 (CH, CH2); 1582 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.32 (1H, s, H-2); 7.61 (1H, s, H-5); 7.57 (1H, d, J = 7.50 Hz, NH); 7.36-7.25 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 7.07 (1H, s, H-8); 4.20-4.17 (1H, m, H-1'); 3.99 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 3.90 (3H, s, 7-OCH3); 3.89 (3H, s, 6-OCH3); 2.90-2.88 (2H, m, H-3'a, H-5'a); 2.10-2.06 (2H, m, H-3'b, H-5'b); 1.94-1.92 (2H, m, H-2'a, H-6'a); 1.71-1.64 (2H, m, H-2'b, H-6'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 158.06, 154.16, 153.99, 148.71, 146.61, 139.24, 129.12, 128.65, 127.32, 108.89, 107.51, 102.54, 62.56, 56.61, 56.11, 52.95, 48.22, 32.03. ESI-MS m/z: 379.20 [M+H]+ .

N-(1-Benzylpiperidin-4-yl)-6-fluoroquinazolin-4-amine (6f)

White solid; Yield: 61%. mp: 197-198 oC. Rf = 0.54 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3136, 3069 (CH, arene); 2941 (CH, CH2); 1584 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.45 (1H, s, H-2); 8.20 (1H, dd, J = 10.25 Hz, J' = 2.75 Hz, H-5); 7.87 (1H, d, J = 7.00 Hz, NH); 7.76-7.73 (1H, m, H-7); 7.68-7.64 (1H, m, H-8); 7.35-7.25 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 4.18-4.15 (1H, m, H-1'); 3.49 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 2.88-2.86 (2H, m, H-3'a, H-5'a); 2.09-2.04 (2H, m, H-3'b, H-5'b); 1.93-1.91 (2H, m, H-2'a, H-6'a); 1.69-1.62 (2H, m, H-2'b, H-6'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 160.49, 158.97, 158.94, 158.56, 155.09, 155.08, 146.79, 139.13, 130.76, 130.69, 129.17, 128.63, 127.32, 122.33, 122.13, 115.82, 115.75, 107.84, 107.66, 62.59, 52.75, 48.54, 31.60, 31.14. ESI-MS m/z: 337.20 [M+H]+ .

N-(1-Benzylpiperidin-4-yl)-7-fluoroquinazolin-4-amine (6g)

White solid; Yield: 63%. mp: 187-188 oC. Rf = 0.53 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3022 (CH, arene); 2926 (CH, CH2); 1591 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.45 (1H, s, H-2); 8.43-8.40 (1H, m, H-5); 8.01 (1H, d, J = 7.50 Hz, H-6); 7.42-7.23 (6H, m, H-8, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 4.20-4.16 (1H, m, H-1'); 3.48 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 2.87-2.84 (2H, m, H-3'a, H-5'a); 2.09-2.03 (2H, m, H-3'b, H-5'b); 1.91-1.89 (2H, m, H-2'a, H-6'a); 1.70-1.63 (2H, m, H-2'b, H-6'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 165.75, 163.76, 159.00, 156.71, 151.80, 151.70, 139.13, 129.15, 128.62, 127.30, 126.67, 126.59, 115.17, 114.98, 112.48, 111.86, 111.70, 62.58, 52.77, 48.48, 40.50, 40.26, 40.09, 31.61. ESI-MS m/z: 337.20 [M+H]+ .

N-(1-Benzylpiperidin-4-yl)-6-chloroquinazolin-4-amine (6h)

White solid; Yield: 64%. mp: 194-195 oC. Rf = 0.54 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3086 (CH, arene); 2941 (CH, CH2); 1580 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.50 (1H, d, J = 2.00 Hz, H-2); 8.47 (1H, s, H-5); 8.03 (1H, d, J = 7.50 Hz, NH); 7.76 (1H, dd, J = 8.75 Hz, J' = 2.75 Hz, H-7); 7.68 (1H, d, J = 8.50 Hz, H-8); 7.35-7.25 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 4.19-4.13 (1H, m, H-1'); 3.49 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 2.88-2.85 (2H, m, H-3'a, H-5'a); 2.09-2.04 (2H, m, H-3'b, H-5'b); 1.92-1.90 (2H, m, H-2'a, H-6'a); 1.67-1.64 (2H, m, H-2'b, H-6'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 158.46, 155.95, 148.40, 139.11, 133.30, 130.12, 130.04, 129.17, 128.63, 127.32, 122.68, 116.19, 62.57, 52.74, 48.62, 31.54, 31.14. ESI-MS m/z: 353.10 [M+H]+ .

N-(1-Benzylpiperidin-4-yl)-6-bromoquinazolin-4-amine (6i)

White solid; Yield: 66%. mp: 211-212 oC. Rf = 0.55 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3061 (CH, arene); 2940 (CH, CH2); 1574 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.64 (1H, d, J = 2.00 Hz, H-2); 8.48 (1H, s, H-5); 8.06 (1H, d, J = 7.50 Hz, NH); 7.87 (1H, dd, J = 9.00 Hz, J' = 2.00 Hz, H-7); 7.61 (1H, d, J = 9.00 Hz, H-8); 7.35-7.25 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 4.17-4.14 (1H, m, H-1'); 3.48 (2H, d, J = 2.00 Hz, H-1"a, H-1"b); 2.87-2.85 (2H, m, H-3'a, H-5'a); 2.09-2.04 (2H, m, H-3'b, H-5'b); 1.92-1.90 (2H, m, H-2'a, H-6'a); 1.69-1.64 (2H, m, H-2'b, H-6'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 158.30, 156.00, 148.62, 139.13, 135.92, 130.24, 129.16, 128.63, 127.31, 125.81, 118.28, 116.71, 62.57, 52.75, 48.63, 31.55. ESI-MS m/z: 399.10 [M+H]+ .

N-(1-Benzylpiperidin-4-yl)-6-iodoquinazolin-4-amine (6j)

White solid; Yield: 62%. mp: 234-235 oC. Rf = 0.57 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3059 (CH, arene); 2945 (CH, CH2); 1572 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 8.77 (1H, d, J = 2.00 Hz, H-2); 8.47 (1H, s, H-5); 8.06 (1H, d, J = 7.50 Hz, NH); 8.01 (1H, dd, J = 8.75 Hz, J' = 1.75 Hz, H-7); 7.45 (1H, d, J = 9.00 Hz, H-8); 7.36-7.24 (5H, m, H-3", H-4", H-5", H-6", H-7"); 4.18-4.15 (1H, m, H-1'); 3.50 (2H, s, H-1"a, H-1"b); 2.88-2.86 (2H, m, H-3'a, H-5'a); 2.09-2.04 (2H, m, H-3'b, H-5'b); 1.92-1.90 (2H, m, H-2'a, H-6'a); 1.70-1.62 (2H, m, H-2'b, H-6'b). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 157.97, 155.96, 148.88, 141.28, 139.15, 131.84, 130.03, 129.15, 128.64, 127.32, 117.21, 90.79, 62.55, 52.77, 48.60, 31.57. ESI-MS m/z: 445.10 [M+H]+.

<실험예>

실험예 1. AChE inhibition assay

AChE 억제 활성은 이전에 보고 된 바와 같이 Ellman의 방법을 사용하여 측정하였다 [Ellman, G.L.; Courtney, K.D.; Andres, V.; Featherstone, R.M. A new and rapid colorimetric determination of acetylcholinesterase activity. Bio Pharm, 1961, 7, 88-95.]. 60 μL의 50 mM NaHPO₄ 완충액 (pH 7.7)에 10 μL의 각각의 분석된 샘플 (0.2 mM의 원액)을 첨가하였다. 그 다음, 10 μL의 효소 (웰당 0.005 단위 효소)를 첨가하였다. 생성된 내용물을 혼합하고 405 nm에서 사전 판독한 후, 내용물을 37 ℃에서 10 분 동안 사전 배양 하였다. 각 웰에서의 반응은 10 μL의 0.5 mM 기질 (아세틸티오콜린 요오다이드 또는 부티릴티오콜린 브로마이드)을 각 웰에 첨가한 다음 10 μL DTNB (웰당 0.5 mM)를 첨가하여 개시하였다. 웰을 37 ℃에서 인큐베이션한 다음, 96 웰 플레이트 리더 Synergy HT, Biotek, USA를 사용하여 412 nm에서 각각의 웰의 흡광도를 측정하였다. 모든 실험은 3 회 수행되었다. 양성 대조군으로서 Donepezil (0.2 mM 원액)을 사용 하였다. 억제 백분율은 하기의 식을 이용하여 계산하였다:

IC₅₀ 값 (측정된 경우)은 EZ-Fit 효소 동역학 소프트웨어 (Perrella Scientific Inc. Amherst, USA)를 사용하여 계산하였다.

그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이, 화합물 6a-j는 도네페질과 비교하여 87 %까지의 상대 억제 백분율로 우수한 AChE 억제 활성을 나타내는 것으로 확인되었다. 특히, 그 중에서도 화합물 6c 및 화합물 6e는 가장 우수한 AChE 활성을 나타내었다.

실험예 2. DPPH radical scavenging assay

1,1-디페닐-2-피크릴히드라지일 (DPPH) 라디칼 소거 활성은 문헌 [Thuong P.T; Na, M.K.; Dang, N.H.; Hung, T.M.; Ky, P.T.; Thanh, T.V.; Nam, N.H.; Thuan, N.D.; Sok, D.E.; Bae, K.H. Antioxidant activities of Vietnamese medicinal plants. Nat. Prod. Sci. 2006, 12, 29-37]에 설명된 방법에 따라 측정하였다. MeOH에 용해된 5㎕의 각각의 샘플을 96 웰 플레이트에서 195㎕의 150㎕ 메탄올 DPPH에 첨가하였다. 용액을 1 분 동안 혼합하고 어두운 곳에서 실온에서 인큐베이션 하였다. 30 분 후, 반응 혼합물의 흡광도를 마이크로 플레이트 판독기에서 520 nm에서 측정하였다. 소거 활성은 대조군과 비교하여 테스트 그룹의 라디칼 감소 정도로 표현하였다.

그 결과, 도 4에 나타낸 바와 같이, 화합물 6a-j는 우수한 DPPH 소거 활성을 나타내는 것으로 확인되었다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

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AChE(Acetylcholine esterase) 억제 활성을 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로,
상기 화합물은 하기의 화합물 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염:
N-(1-벤질피페리딘-4-일)퀴나졸린-4-아민;
N-(1-벤질피페리딘-4-일)-6-메틸퀴나졸린-4-아민;
N-(1-벤질피페리딘-4-일)-7-메틸퀴나졸린-4-아민;
N-(1-벤질피페리딘-4-일)-7-메톡시퀴나졸린-4-아민;
N-(1-벤질피페리딘-4-일)-6,7-디메톡시퀴나졸린-4-아민;
N-(1-벤질피페리딘-4-일)-6-플루오로퀴나졸린-4-아민;
N-(1-벤질피페리딘-4-일)-7-플루오로퀴나졸린-4-아민;
N-(1-벤질피페리딘-4-일)-6-클로로퀴나졸린-4-아민;
N-(1-벤질피페리딘-4-일)-6-브로모퀴나졸린-4-아민; 및
N-(1-벤질피페리딘-4-일)-6-아이오도퀴나졸린-4-아민.
제3항에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 것인, 신경계 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
제4항에 있어서,
상기 신경계 질환은 알츠하이머 질환(Alzheimer's disease), 뇌졸증(stroke), 뇌경색(cerebral infarct), 머리외상(head trauma), 뇌동맥 경화증(cerebral arteriosclerosis), 및 파킨슨 질환(Parkinson disease) 헌팅턴병(huntington's disease), 크로이츠펠트-야콥병(Creutzfeldt-Jakob disease), 피크(Pick)병, 루이체병(Lewy body disease), 근위축성 축삭 경화증(Amyotrophic lateral sclerosis), 다발성 경화증(multiple sclerosis) 및 허혈성 뇌질환(ischemic brain disease), 뇌혈관성질환, 뇌신경질환, 인지 질환 또는 장애, 정신분열증, 주의력결핍과다 행동질환(ADHD), 주의력결핍질환(ADD), 중추신경계 (CNS) 또는 말초신경계 (PNS) 질환, 길랑-바레 증후군, 신경 세포의 점차적인 사멸에 의한 진행성 치매(dementia) 및 진행성 실조증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 것인, 신경계 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
제4항에 있어서,
상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 AChE(Acetylcholine esterase) 억제 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 것인, 신경계 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.
제4항에 있어서,
상기 약제학적 조성물은 (i) 상기 화학식 1 또는 2로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 약제학적 유효량; 및 (ⅱ) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물의 형태로 제공되는 것을 특징으로 하는 것인, 신경계 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물.