KR102386801B1 - 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 dna를 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 - Google Patents

알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 dna를 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 유효성분으로 함유함으로써, 우수한 피부재생, 피부장벽 강화, 보습 및 주름방지와 같은 항노화 효과를 나타낼 수 있고, 특히 청색광에 의한 피부노화를 방지할 수 있는 피부 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA를 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 {Cosmetic composition for skin improvement containing phyto DNA extracted from aloe vera adventitious root}
본 발명은 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 유효성분으로 함유하는 피부 개선용 화장료 조성물 관한 것이다.
피부노화는 유전적, 환경적 등의 다양한 요인에 의해 영향을 받는데 크게 두 종류로 나눌 수 있다. 하나는 내인성 노화(intrinsic aging)로 이는 자연노화로서 유전정보에 따라 시간이 지나면서 일어나는 노화현상이며, 다른 하나는 외인성 노화(extrinsic aging)로 광노화(photoaging)라고도 하며, 외부환경 요인, 그 중에서도 햇빛에 존재하는 자외선에 의해 일어나는 노화 현상을 말한다.
최근에는 자외선 이외의 다른 파장의 빛, 즉, 청색광이 피부에 미치는 유해성에 대해 연구되고 있다. 청색광은 망막까지 도달하는 빛 중에서 가장 파장이 짧고 강한 에너지를 갖고 있는 빛을 의미하며, 상기 청색광은 상피 세포의 미토콘드리아 DNA를 손상시키고 활성산소(ROS)를 생성하여, 세포 기능장애, 세포 노화 및 종양 발생을 야기한다고 보고되어 있다["Blue Light Induces Mitochondrial DNA Damage and Free Radical Production in Epithelial Cell", THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY Vol. 280, No. 22, Issue of June 3, pp.21061-21066, 2005].
이러한 피부노화를 방지 및 개선하기 위하여 알로에 베라(Aloe vera)를 이용한 화장료의 개발이 행해지고 있다. 알로에 베라는 화장품 및 약제의 원료, 식용 등 다양한 용도로 사용되며 살균 및 독소 중화, 피로 회복 및 피부 중성화, 콜라겐 합성 및 피부 주름개선, 자외선 차단 및 흡수, 염증억제, 자극완화, 해독 및 해열, 변비 및 궤양에도 효과가 있다고 밝혀졌다.
한편, 한국등록특허 제10-1651321호에는 '알로에 베라 태좌 세포 배양 추출물을 함유한 피부 장벽 기능 강화용 항노화 피부 외용제 조성물'이 개시되어 있으나, 조직배양한 알로에 베라 부정근의 피토 DNA를 함유하는 화장료 조성물에 대해서는 개시된 바가 없다.
본 발명은 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 유효성분으로 함유함으로써 청색광으로 인한 피부노화를 방지하는 피부 개선용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.
특히, 본 발명은 한국등록특허 제0133344호에 개시한 '알로에의 대량 증식방법', 한국등록특허 제10-1576787호에 개시한 '안트라퀴논 화합물의 함량이 증가된 알로에 부정근의 제조 방법 및 상기 방법에 의해 제조된 알로에 부정근', 한국등록특허 제10-1294742호에 개시한 '약리활성 물질이 증가된 알로에 부정근의 제조방법'을 기반으로 한 식물 조직배양 기술에 의해 생산된 알로에 부정근으로부터 추출한 피토 DNA를 이용하여, 항산화, 피부 세포보호 및 재생, 피부 주름개선, 피부장벽 개선 또는 피부보습 효과를 갖는 피부 개선용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.
상기 과제를 해결하기 위하여,
본 발명은 일실시예에서, 알로에 베라(Aloe vera) 부정근으로부터 추출한 피토(phyto) DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물을 유효성분으로 포함하고, 청색광으로 인한 피부노화를 방지하는 피부 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물을 유효성분으로 포함함으로써, 우수한 피부재생, 피부장벽 강화, 보습 및 주름방지와 같은 항노화 효과를 나타낼 수 있고, 특히 청색광에 의한 피부노화를 방지하는 효과가 우수하다.
도 1은 본 발명의 실시예에 있어서, 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA의 전기영동사진이다.
도 2는 본 발명의 실시예에 있어서, 청색광을 조사한 직후와 48 시간 배양 후의 셀(cell) 사진이다.
도 3은 본 발명의 실시예에 있어서, 복합물의 피부장벽 강화 효과, MMP-1 발현억제 효과, 콜라겐 발현 효과를 나타내는 그래프이다.
본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에 구체적으로 설명하고자 한다.
그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
본 발명에서, "포함한다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
본 발명에서, "알로에 베라(Aloe vera)"는 지중해 지방과 아프리카가 원산지이며 덤불성 여러해살이풀을 의미한다. 줄기는 높이 30 내지 60 cm로 짧고 최대 100 cm까지 자란다. 이 줄기에서 길고 단단한 잎이 로제트형으로 많이 나온다. 잎은 길이 15 내지 40 cm, 너비 2 내지 7 cm 정도의 엷은 녹색이며 두께가 두껍고 다육질이며 즙이 많다. 화장품 및 약제의 원료, 식용 등 다양한 용도로 사용되며 살균 및 독소 중화, 피로 회복 및 피부 중성화, 해열, 변비 및 궤양에도 효과가 있다고 밝혀 졌다. 비타민 A, C, D, E, B12, 지방산, 아미노산, 셀레늄, 칼슘 등과 알로인(aloin), 알로에신(aloesin), 에모딘(emodine) 등 안트라퀴논(anthraquinone)류 등 약 300여 가지의 다양한 성분을 함유하고 있다. 인도, 북아프리카, 마닐라 등 분포지역이 매우 넓다.
본 발명에서, 용어 "기내배양(in vitro culture)"은 체외배양이라고도 하며, 생물체에서 끄집어낸 물질을 체외에서 재현시키기 위한 실험실 내 배양을 의미한다. 일반적으로 식물체의 기내배양에 사용되는 식물 호르몬의 종류로는 BAP (6-benzyloaminopurine), 키네틴 (Kinetin, N-2-furanylmethyl-1H-purine-6-amine) 및 TDZ (Thiazuron-N-phenyl-N-1,2,3 thiadiazol-5ylurea)와 같은 사이토키닌(Cytokinins); IAA (Indole acetic acid), IBA (Indole butyric acid), NAA (Naphthalene-acetic acid) 및 2,4-D (2,4-dichlorophenoxy-acetic acid)와 같은 옥신(Auxins); GA3와 같은 지베렐린(Gibberellins) 등이 있다. 식물 호르몬은 적용되는 조직의 종류에 따라 유효농도가 다르며, 합성된 장소 이외의 곳에 운반되어 동일한 기능을 나타낼지 여부가 불확실한 경우가 많다. 따라서, 목적에 따라 식물 호르몬의 종류 및 농도를 적절히 선택하는 것이 중요하며, 이는 실제 실험을 통하지 않고는 예측하여 선택하기가 어려울 수 있다.
본 발명에서, 용어 "피토(phyto) DNA"는 인산, 4 종류의 염기, 데옥시리보오스(deoxyribose)로 이루어진 식물체 고분자에 해당하는 DNA로, 분자량이 저감된 단편 형태로 혼합되어 존재하는 것을 의미한다. 50 kDa 내지 2,500 kDa의 분자량으로 이루어진 피토 DNA는 피부 주름개선, 피부 미백 또는 피부 노화 방지를 통한 피부미용을 증진시키는 효과가 있다. 따라서, 알로에 피토 DNA는 알로에의 전초(생잎) 또는 꽃과 뿌리에서 분리한 것일 수 있고, 부정근과 같은 조직배양체 일수도 있으며, 본 발명에서는 알로에 베라(Aloe vera) 부정근의 조직배양 피토 DNA를 사용하였다.
본 발명에서, 용어 "청색광(blue light)"은 380 내지 500 ㎚ 사이의 파장에 존재하는 파란색 계열의 광원이다. 자연적으로도 존재하나, TVㆍ컴퓨터 등 스마트기기의 디스플레이와 LED조명기기에서 많이 방출된다. 자연 상태의 가시광선에 포함된 적당한 블루라이트는 행복 호르몬인 세로토닌과 멜라토닌 생성을 촉진하는 일종의 천연 활력소로서, 여드름 치료와 진정 치료, 모발 성장을 위한 두피 치료에도 이용된다. 그러나 피부 미용 측면에서 피부 내 활성산소 증가의 원인으로 지목된다. 블루라이트는 태양의 자외선보다 더 깊은 피부 층에 침투하며, 피부 속 활성산소(ROS)의 생성을 유발하고 생성된 활성산소(ROS)는 피부노화를 유발하는 Matrix Metalloproteases(MMPs) 효소의 발현을 활성화한다[Y. Kuse, K. Ogawa, K. Tsuruma, M. Shimazawa, and H. Hara, Damage of photoreceptor-derived cells in culture induced by light emitting diode-derived blue light, Sci. Rep-UK, 4, 5223 (2014)].
본 발명에서, 용어 "주름개선"은 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 의미한다. 본 발명에서 주름 생성은 콜라겐의 감소로 인해 발생하는 것이며, 상기 콜라겐의 감소는 과도한 산화 스트레스나 자외선 조사가 원인일 수 있다.
본 발명에서, 용어 "비드 비팅(bead beating)"은 시료 중의 고체 물질을 물리적인 힘으로 파쇄하는 방법으로서, 비드가 포함된 시료 용액을 손으로 흔들거나 자동진동기를 이용하여 수행한다. 본 발명에서는 자동진동 방법으로 비드를 진동시키는 방법을 사용하였다.
이하, 본 발명에 대하여 구체적으로 설명하기로 한다.
본 발명은 알로에 베라(Aloe vera) 부정근으로부터 추출한 피토(phyto) DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물을 유효성분으로 포함하고, 청색광으로 인한 피부노화를 방지하는 피부 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 상기 피토 DNA를 추출하기 위한 알로에 베라 부정근은 알로에 베라의 조직 일부를 떼어내어 무균상태로 기내(in vitro)에 도입하여 식물의 전형성능(totipotency)에 의해 형성되는 부정근을 이용한 것일 수 있다. 상기 알로에 베라 부정근은 일정기간 동안 사전배양(seed culture)한 후, 생물반응기에서 본 배양을 시도함으로써 대량생산이 가능하며, 상기와 같은 기내배양(in vitro culture) 방법에 의해 생산된 알로에 베라 부정근은 잔류농약(예: Diazinon, DDT, Metalaxyl)이나 중금속(예: 납, 카드뮴) 등의 유해성분이 근본적으로 배제되어, 자연상태의 생육과정에서 발생 가능한 병충해 및 바이러스의 감염으로부터 안전한 장점이 있다.
상기 조직배양한 알로에 베라 부정근으로부터 피토 DNA를 추출하는 과정은 우선적으로 세포를 추출 및 파쇄한 후 수행될 수 있다. 상기 세포 파쇄를 위한 방법은 비드 비팅(Cardinali et al. 2000), 엔자임을 통한 세포벽의 용해(Varma and Kwon-Chung. 1991), 및 복잡한 시약을 통한 방법(Holm et al. 1986, Lippke et al. 1987) 등이 있으나, 상기 종래의 방법들은 식물체를 완전히 액화시키는데 약 30 분 내지 1 시간 정도 소요되고, 그 후의 추출 과정에서 많은 시약들과 1.5 내지 2 시간 이상의 시간이 소요되는 등 많은 단점을 가지고 있다. 이에, 본 발명에 따른 조직배양한 알로에 베라 부정근으로부터 피토 DNA를 추출하는 과정은, 종래 방법의 단점을 해결하기 위해서 냉동 해동 방법과 물리적 파쇄 방법을 조합하여 사용하는 것일 수 있다.
상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체는 1:1 내지 4:1의 중량비로 혼합하는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다. 예를 들어, 상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체는 1:1 내지 3:1, 1:1 내지 2:1, 2:1 내지 3:1 또는 3:1 내지 4:1의 중량비로 혼합하는 것일 수 있다.
상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물은 피부 개선 효과, 특히 청색광 조사에 따른 세포독성의 완화 효과를 나타내는 것일 수 있다.
상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 5 중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다. 예를 들어, 상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 4 중량%, 0.001 내지 3 중량%, 0.001 내지 2 중량%, 0.001 내지 1 중량%, 0.01 내지 5 중량%, 0.1 내지 5 중량%, 0.1 내지 0.5 중량%, 0.3 내지 1.5 중량%, 1 내지 5 중량%, 1 내지 3 중량%, 2 내지 5 중량%, 3 내지 5 중량% 또는 4 내지 5 중량%를 포함하는 것일 수 있다.
상기 양이온 중합체는 하기 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다:
[화학식 1]
Figure 112020049727724-pat00001
;
[화학식 2]
Figure 112020049727724-pat00002
상기 화학식 1 또는 2에서, R은 상기 화학식 2로 표시되는 화합물 또는 수소 원자를 포함하고, n은 2 내지 10의 정수이며, p 및 q는 각각 독립적으로 양의 정수임.
상기 화학식 1은 폴리(L-라이신)(PLL), 폴리에틸렌이민(PEI), 폴리프로필렌이민(PPI), 펜타에틸렌아민, N,N'-비스(2-아미노에틸)-1,3-프로판디아민, N,N'-비스(2-아미노프로필)-에틸렌디아민, 스페르민, 스페르미딘, N-(2-아미노에틸)-1,3-프로판디아민, N-(3-아미노프로필)-1,3-프로판디아민, 트리(2-아미노에틸)아민, 1,4-비스(3-아미노프로필)피페라진, N-(2-아미노에틸)피페라진, 수지상 폴리아미도아민(PAMAM), 키토산, 폴리(2-디메틸아미노)에틸 메타크릴레이트(PDMAEMA) 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 올리고머를 포함하는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다.
상기 양이온 중합체는 100 내지 110의 평균 분자량을 가지는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다.
상기 화학식 1 또는 2에서, p 및 q는 각각 독립적으로 양의 정수일 수 있으나, p 및 q는 양이온 중합체(즉, 화학식 1)의 평균 분자량이 100 내지 110의 범위 내에서 선택되는 것일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 유효성분으로 미네랄 복합물을 추가 포함하는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다.
상기 미네랄 복합물은 칼슘, 마그네슘, 칼륨, 나트륨, 아연 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다. 예를 들어, 상기 미네랄 복합물은 칼슘 4.0 내지 6.0 ppm, 마그네슘 0.8 내지 1.2 ppm, 칼륨 0.4 내지 0.6 ppm, 나트륨 4.0 내지 6.0 ppm 및 아연 1.0 내지 3.0 ppm을 포함하는 것일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 유효성분으로 미네랄 복합물을 추가 포함할 경우, 상승작용에 의하여 더욱 우수한 항산화, 피부 장벽 강화, 피부 주름 개선, 피부 재생 및 피부 보습 효과를 나타낼 수 있다.
상기 화장료 조성물은 유효성분으로 미네랄 복합물을 추가 포함할 경우, 상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물 및 미네랄 복합물은 1:1 내지 1:10의 중량비로 혼합하는 것을 특징으로 하는 것일 수 있다. 예를 들어, 상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물 및 미네랄 복합물은 1:1 내지 1:10, 1:1 내지 1:8, 1:1 내지 1:6, 1:1 내지 1:4 또는 1:1 내지 1:2의 중량비로 혼합하는 것일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 유효성분으로 미네랄 복합물을 추가 포함할 경우, 상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물 및 미네랄 복합물은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 10 중량%, 0.001 내지 8 중량%, 0.001 내지 6 중량%, 0.001 내지 4 중량%, 0.001 내지 2 중량%, 0.001 내지 1 중량%, 1 내지 10 중량%, 1 내지 5 중량%, 1 내지 3 중량% 또는 5 내지 10 중량%를 포함하는 것일 수 있다.
상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물 및 미네랄 복합물은 천연 올리고당으로 안정화된 것을 특징으로 하는 것일 수 있다. 본 발명의 일 예로, 피토 DNA는 유리 상태인 무정형으로 올리고당과 같은 매트릭스에 의해 단분자로 캡슐화될 수 있고, 이에 따라, 피토 DNA가 유리화된 후 환경으로부터 보호되기 때문에 안정화가 달성되는 것일 수 있다.
예를 들어, 상기 안정화는 상기 피토 DNA가 물에 매우 가용성인 친수성 화합물임에 따라 수용액으로부터 직접 제형화될 수 있으므로 친수성 고분자 물질로 적당한 조건(예를 들어, 농도)을 맞추어 캡슐화(encapsulation)함으로써 안정화시키는 것일 수 있다.
상기 청색광은 380 내지 500 nm 파장의 광원인 것일 수 있다. 상기 청색광은 사람이 볼 수 있는 가시광선, 즉, 망막까지 도달하는 빛 중에서 가장 파장이 짧고 강한 에너지를 갖고 있는 빛을 의미한다. 예를 들어, 상기 청색광은 380 내지 480 nm, 420 내지 480 nm, 380 내지 450 nm, 400 내지 500 nm, 420 내지 500 nm 또는 450 내지 500 nm 파장의 광원인 것일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징 폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도우로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 제형인 것을 특징으로 하는 것일 수 있다. 상기 피부 개선용 화장료 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 조성 및 조성비는 제형에 따라 적절하게 선택되는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 상기 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우, 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우, 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제를 포함할 수 있고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 상기 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가, 트라가칸트 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 상기 화장료 조성물의 제형이 계면 활성제 함유 클렌징인 경우, 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 아세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 리놀린 유도체, 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트, 폴리아미드 파우더 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 포함할 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판-부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
이하 본 발명에 따르는 실시예 등을 통해 본 발명을 보다 상세히 설명하나, 본 발명의 범위가 하기 제시된 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.
실시예
<제조예 1: 알로에 베라 부정근 조직배양의 피토 DNA 및 양이온 중합체 혼합물 제조>
(1) 알로에 베라 부정근 배양
알로에 베라 부정근의 배양은 본 발명자의 발명인 대한민국 등록특허 제10-1576787호에 따라 준비되었다.
구체적으로, 어린 알로에 베라 유묘의 잎을 흐르는 잎에 깨끗하게 세척하고 조직이 단단하고 옅은 노란색을 띄는 부분을 남기고 나머지 부분은 절단시킨 후 4% 락스에 담가 5 분 동안 교반 없이 표면 살균을 시켰다. 표면 살균이 끝난 후 멸균수로 수 회 표면 세척했다. 세척된 조직은 0.7 g/L 플레이트 아가로 고형화된 0.5 mg/L NAA가 포함된 MS 배지에 28℃ 암(dark) 상태에서 3주간 배양되었다. 유도된 부정근은 MS 배지에 0.3 mg/L IBA가 포함된 액체 배지로 옮겨 배양되었다.
(2) 알로에 베라 부정근 조직배양의 피토 DNA 추출
본 제조예에서, 알로에 베라 부정근으로부터 피토 DNA를 추출하기 위하여 먼저, 조직배양하여 수득한 알로에 베라 부정근 50~100 g을 채취하여 파쇄기로 얻은 파쇄액 30~50 ㎖를 원심분리하여, 알로에 베라 부정근의 세포를 수득하였다. 상기 수득한 알로에 베라 부정근의 세포에 증류수 800~1,000 ㎕ 및 페놀 600~800 ㎕(pH 8.0)을 가하여 현탁시키고, 추가로 지르코니아/실리카 비드(0.5 mm, 0.4~0.8 g)를 가하였다. 다음으로 100℃의 물과 액체 질소를 이용하여 상기 현탁액을 냉동 및 해동하는 과정을 3 회 반복 처리하였다. 처리 후 상기 동결 및 해동절차를 수행한 현탁액을 3,800~4,000 rpm 및 50~60 초의 조건으로 비드비팅 기계에 적용하여 세포벽을 파쇄하였다.
상기 세포벽을 파쇄한 현탁액을 10,000 g에서 10~15 분간 원심분리하고, 이로부터 상등액을 수득하였다. 상기 수득한 상등액에 클로로포름 6.0~10.0 ㎖ 가하고, 15 초간 볼텍싱(vortex)하여 격렬하게 교반한 다음, 다시 10,000 g에서 5~10 분간 원심분리하고, 이로부터 상층액을 수득하였다.
상기 상층액에 동량의 이소프로필알코올 및 10%(v/v)의 3M 소디움아세테이트를 가하고, 서서히 혼합한 다음, -20℃에서 10~30 분 이상 보관 후 시료를 다시 10,000 g에서 5~10 분간 원심분리하고, 상층액을 제거하였다. 다음으로 70% 에탄올 100~200 ㎖를 가하고 혼합한 후에 동일한 방법으로 10,000 g에서 5~10 분간 원심분리하고, 상층액을 제거하였으며, 침전된 DNA 펠렛을 5~10 분 동안 진공건조시킨 다음, 멸균 증류수 1.0~1.5 ㎖ 가하여 DNA를 용해시키고 수득하여 이를 -70℃에 보관하였다.
도 1은 상기의 방법으로 추출된 DNA의 전기영동사진을 나타낸 것으로, M은 1kb 사이즈 마커를 나타내고, A~C는 알로에 베라 부정근으로부터 추출된 DNA를 나타낸 것으로, DNA가 추출되었음을 알 수 있었다.
(3) 알로에 베라 부정근 조직배양의 피토 DNA 및 양이온 중합체 혼합물(이하, 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물)의 제조
상기 제조예에서 추출된 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA와 양이온 중합체를 2:1의 중량비로 혼합하여 제조하였고, 상기 양이온 중합체는 폴리(L-라이신)(PLL) 및 폴리아미도아민(PAMAM)을 3:1로 혼합하여 사용하였다.
<제조예 2: 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물 및 미네랄 복합물을 혼합한 복합물의 제조>
우선, 미네랄 복합물을 제조하기 위하여, 칼슘 5.0 ppm, 마그네슘 1.0 ppm, 칼륨 0.5 ppm, 나트륨 5.0 ppm 및 아연 2.0 ppm을 혼합하여 미네랄 복합물을 제조하였다. 본 제조예 1의 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물 시료에 미네랄 복합물을 하기 표 1과 같은 비율로 혼합하여 복합물을 제조하였다. 상기 복합물을 부틸렌글라이콜에 용해시킨 후, 천연 올리고당을 첨가하여 육안으로 침전이 없는 상태가 될 때까지 안정화(약 5 내지 10 분 소요)시켜 복합물을 제조하였다.
구분 혼합비율(중량비)
실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 비교예 1 비교예 2
미네랄 복합물 1 2 5 10 - 1
피토 DNA 복합물 시료 1 1 1 1 1 -
<제조예 3: 제조예 2에서 수득된 복합물을 함유하는 크림 제조>
본 제조예 2에서 제조된 복합물 중 실시예 4의 복합물을 포함한 크림을 하기 표 2의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다. 하기 표에서 미량의 함량은 0.1 중량% 이하, 구체적으로 0.001 내지 0.1 중량% 포함하는 것을 의미한다.
성분 함량(중량%)
비교예 3 제조예 3
실시예 4의 복합물 - 1~3
스테아린산글리세린 1~3 1~3
스테아릴알콜 1~3 1~3
스테아린산 1~2 1~2
밀랍 1~2 1~2
솔비탄스테아레이트 1~2 1~2
폴리솔베이트 60 1~2 1~2
스쿠알란 2~4 2~4
정제식물유 1~2 1~2
트리옥타노인 4~6 4~6
광물유 4~6 4~6
트리에탄올아민 1~2 1~2
베타인 2~4 2~4
소듐마그네슘실리케이트 0.1~0.3 0.1~0.3
디메치콘 1~2 1~2
글리세린 4~6 4~6
소듐히아루로네이트 3~5 3~5
1,3 부틸렌글라이콜 1~2 1~2
향, 색소 미량 미량
정제수 잔량 잔량
합계 100 100
<실험예 1: 시료의 세포 독성 확인>
본 제조예 1에서 수득된 상기 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물 시료 처리에 의한 피부 세포의 세포 독성을 확인하였다.
사람 유래 섬유아 세포 2×105 cells/well 의 농도로 96 웰 플레이트(well plate)에 배양하고 10% FBS를 함유하는 IMDM 배지 0.2 ㎖를 공급한 후 24 시간 동안 CO2 배양기에서 배양하였다. 여기에 DMSO에 녹인 시료용액을 처리한 다음 24 시간 동안 배양하였다. 이후, 세포의 생존력을 알아보기 위하여 MTT assay를 수행하였다. MTT assay는 배양한 세포에 MTT 용액 0.1 ㎖을 가한 후, 4 시간 동안 배양한 다음 배지는 제거하고 DMSO 0.5 ㎖를 넣어 형성된 포마잔(MTT formazan)을 ELISA를 사용하여 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 하기 식에 의해 세포생존율(%)을 측정하였으며, 세포의 생존에 영향을 미치지 않는 시료의 농도를 결정하였다. 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
구분 100% 세포 생존 농도(%)
MTT formazan 대조구 0.007 ± 0.002
제조예 1 시료 비교구 0.85 ± 0.21
세포생존율(%) = [(St-Bo/(Bt-Bo)]×100
Bo: 세포배양 배지만을 발색 반응한 웰의 570 nm 흡광도
Bt: 시료를 처리하지 않고 발색 반응한 웰의 570 nm 흡광도
St: 시료를 처리하고 발색 반응한 웰의 570 nm 흡광도
상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물 시료에서 100% 세포생존농도가 0.85 ± 0.21%로 대조구에 비해 세포 독성이 낮아 상대적으로 피부 자극 유발 가능성이 낮고 안전한 것으로 확인되었다.
<실험예 2: DPPH 라디칼 소거 활성능(항산화 활성) 측정>
DPPH법은 α,α-디페닐-β-피크릴하이드라질(α,α-diphenyl-β-picrylhydrazyl) 라디칼의 소거 특성을 이용한 것으로 가장 널리 이용되는 항산화활성 측정 방법 중 하나이며, DPPH는 안정한 라디칼로 시스테인(cysteine) 및 글루타치온(glutathione)과 같은 함유황 아미노산과 아스코르브산(ascorbic acid), 토코페롤, 하이드로퀴논(hydroquinone), 피로갈롤(pyrogallol), 페닐렌디아민(phenylenediamine) 및 아미노페놀(aminophenol)과 같은 방향족 아민(aromatic amine) 등에 의해서 환원되어 짙은 자색이 탈색되므로 수소공여능 및 유리기 소거작용을 특정하는데 널리 이용되고 있다.
본 제조예 1에서 수득된 상기 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물을 이용하여 DPPH 라디칼 소거능을 측정하였다. 대조구로 아스코르브산(Ascorbic acid)을 비교구로 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물을 사용하였다.
구분 처리 농도(%) 항산화 효과(%)
아스코르브산 대조구 0.05 95.25 ± 0.21
제조예 1 시료 비교구 0.10 92.87 ± 0.35
상기 표 4에 나타낸 바와 같이, 0.1% 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물 시료는 0.05%의 아스코르브산 대조구에 비하여 우수한 DPPH 라디칼 소거능을 나타내었다.
<실험예 3: 청색광 조사에 의한 세포 독성 완화 효과 측정>
사람 유래 섬유아 세포 2×105 cells/well의 농도로 96 well plate에 배양하고 10% FBS를 함유하는 IMDM 배지 0.2 ㎖를 공급한 후 24 시간 동안 CO2 배양기에서 배양하였다. 여기에 DMSO에 녹인 시료용액을 처리한 다음 450 nm의 청색광을 120 분간 조사한 후 24 시간 동안 배양하였다. 이후, 세포의 생존력을 알아보기 위하여 MTT assay를 수행하였다. MTT assay는 배양한 세포에 MTT 용액 0.1 ㎖을 가한 후 4 시간 동안 배양한 다음 배지는 제거하고 DMSO 0.5 ㎖를 넣어 형성된 포마잔을 ELISA를 사용하여 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 대조구로는 아스코르브산을 사용하였다. 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다.
시료농도
(㎍/㎖)
세포 생존율(%)
0 50 100 500 1000
아스코르브산 대조구 40.3 52.7 63.5 75.2 85.3
제조예 1 시료 비교구 40.3 47.5 57.8 68.6 80.5
상기 표 5에 나타낸 바와 같이, 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물(제조예 1) 시료는 청색광 조건에서 세포독성 완화에 대한 우수한 효과를 나타내었다.
<실험예 4: 제조예 2에 따른 복합물 처리에 의한 세포 생장 효과 측정>
본 제조예 2에서 수득된 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물 및 미네랄 복합물을 혼합한 복합물 중, 실시예 4의 복합물을 처리한 후 세포의 생장을 관찰하였다. HaCaT 세포를 6 well plate에 1×106 cells/well의 농도로 분주하여 배양한 후, 10% FBS가 첨가된 배지로 교체하여 18 시간 동안 결핍(starvation)시키고, 24 시간 동안 배양하였다. HaCaT 세포에 시료 0.5(w/v%)씩 처리한 다음 450 nm의 청색광을 120 분간 조사한 후, 48 시간 동안 배양하였다.
도 2의 (a)는 실시예 4의 복합물을 10% FBS 배지에 처리하고 450 nm 파장의 청색광을 조사한 직후의 세포 사진이고, (b)는 실시예 4의 복합물을 10% FBS 배지에 처리하고 450 nm 파장의 청색광을 조사한 후 48 시간 배양한 후의 세포 사진이다. 도 2에 나타낸 바와 같이, 청색광에 의해 생장이 억제된 세포(a)에 실시예 4의 복합물 처리에 의해 세포의 생장이 촉진된 것을 확인할 수 있었다.
<실험예 5: 제조예 2에 따른 복합물 처리에 대한 SOD 활성 효과 측정>
항산화 효과를 측정하는 방법으로 SOD(Superoxide dismutase) 활성 측정 시험을 하기와 같이 수행하였다. 본 제조예 2에서 제조된 실시예 및 비교예 복합물의 SOD(Superoxide dismutase) 활성을 측정하였다. HaCaT 세포를 6 well plate에 1×106 cells/well의 농도로 분주하여 배양한 후, FBS가 첨가되지 않은 배지로 교체하여 18 시간 동안 starvation 시키고, 24 시간 동안 배양하였다. HaCaT 세포에 각 시료 0.5(w/v%)씩 처리한 다음 450 nm의 청색광을 120 분간 조사한 후, 48 시간 동안 배양하였다. 이후 세포는 RT-PCR을 이용하여 SOD 발현량을 조사하였다.
대조군으로 아스코르브산 50 ppm을 사용하였다. 그 결과를 도 3(a)에 나타내었다. 도 3(a)에 나타낸 바와 같이, 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물 시료에 미네랄 복합물을 함께 포함하는 실시예 1 내지 4의 복합물에서 비교예 1 및 2에 비하여 더욱 우수한 SOD 활성 효과를 나타낸 것을 확인할 수 있었다. 이는 청색광에 의한 피부노화의 방지 효과가 있음을 의미한다. 특히, 실시예 4에서 가장 우수한 SOD 활성 효과를 나타내었다.
<실험예 6: 피부장벽 관련 인자 활성 효과 측정>
본 제조예 2에서 제조된 실시예 및 비교예 복합물의 피부장벽 강화 효과를 확인하기 위해 관련 인자 필라그린(filaggrin)과 로리크린(loricrin) 활성을 측정하였다. HaCaT 세포를 6 well plate에 1×106 cells/well의 농도로 분주하여 배양한 후, FBS가 첨가되지 않은 배지로 교체하여 18 시간 동안 starvation 시키고, 24 시간 동안 배양하였다. HaCaT 세포에 각 시료 0.5(w/v%)씩 처리한 다음 450 nm의 청색광을 120 분간 조사한 후, 48 시간 동안 배양하였다. 이후 배양된 세포에서 RNA를 추출하여 RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction)을 통해 filaggrin 및 loricrin 발현량을 조사하였다. 대조군으로 레티노산(Retinoic acid) 50 ppm을 사용하였다.
도 3의 (b) 및 (c)에 나타낸 바와 같이, 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물과 미네랄 복합물을 함께 포함하는 실시예 1 내지 4의 복합물에서 비교예 1 및 2에 비하여 더욱 우수한 피부장벽 강화 효과를 나타냈다.
<실험예 7: MMP-1 생성 억제 효과 측정>
섬유아 세포(Human dermal fibroblasts adult)를 10% LSGS가 첨가된 Medium 106 배지를 이용하여 1×106 cells/well로 조절한 후, 12 well plate에 접종하고 18 시간 동안 배양하였다. 배양 후, 본 제조예 2에서 제조된 실시예 및 비교예 복합물의 각각의 시료를 0.5(w/v%)씩 처리하고, 450 nm의 청색광을 120 분간 조사한 후, 48 시간 동안 배양하였다. 배양된 세포에서 RNA를 추출하여 RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction)을 통해 MMP-1의 발현율을 확인하였다. 대조군으로는 아데노신(Adenosine) 50 ppm을 사용하였다. MMP-1 발현율을 하기 식에 의하여 산출하였다.
MMP-1 발현율(%) = (시료 MMP-1 발현량/양성 대조군 MMP-1 발현량) ×100
산출된 MMP-1 발현율을 도 3의 (d)에 나타내었다. 도 3의 (d)에 나타낸 바와 같이, 본 제조예 2에서 제조된 실시예 1 내지 4의 복합물에서 비교예 1 및 2에 비하여 더욱 우수한 MMP-1 발현 억제효과를 나타내었으며, 특히 실시예 4의 시료에서 가장 우수한 MMP-1 발현 억제 효과를 나타냈다.
<실험예 8: 콜라겐 발현 증가 평가>
섬유아 세포(Human dermal fibroblasts adult)를 10% LSGS가 첨가된 Medium 106 배지를 이용하여 1×106 cells/well로 조절한 후, 12 well plate에 접종하고 18 시간 동안 배양하였다. 배양 후, 제조예 및 비교예 각각의 시료를 0.5(w/v%)씩 처리하고, 450 nm의 청색광을 120 분간 조사한 후, 48 시간 동안 배양하였다. 배양된 세포에서 RNA를 추출하여 RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction)을 통해 콜라겐(Collagen)의 발현 증가율을 확인하였다. 콜라겐 발현 증가율을 하기 수학식에 의하여 산출하였다.
콜라겐 발현율(%) = (시료의 콜라겐 발현량/양성대조군 콜라겐 발현량)× 100
산출된 콜라겐의 발현율을 도 3의 (e)에 나타내었다. 대조군으로는 아데노신(Adenosine) 50ppm을 사용하였다. 도 3의 (e)에 나타낸 바와 같이, 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물과 미네랄 복합물을 함께 포함하는 실시예 1 내지 4의 복합물에서 더욱 우수한 콜라겐 발현율을 나타내었으며, 특히 실시예 4에서 가장 우수한 콜라겐 생성 촉진 효과를 나타내었다.
<실험예 9: 피부 세포 재생 효과>
피부 재생 효과를 확인하기 위해 wound healing assay를 수행하였다. 각질형성세포(HaCaT)를 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지를 이용하여 1×106 cells/well로 조절한 후, 6 well plate에 접종하고 18 시간 동안 배양하였다. 6 well plate에 가득 자란 세포에 스크래치를 내어 세포의 일부분을 플레이트 바닥에서 떨어지게 한 다음, 제조예 및 비교예 각각의 시료를 0.5(w/v%)씩 처리하여 48 시간 동안 배양하였다. 세포가 재생된 정도를 확인하였고, 세포재생율을 하기 수학식에 의하여 산출하였다. 대조군으로는 덱사메타손(Dexamethason)을 사용하였다.
세포재생율(%) = (시료 세포 재생율/대조군 세포 재생율)×100
산출된 세포재생율을 하기 표 6에 나타내었다.
구분 혼합비율(중량비)
실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 비교예 1 비교예 2 덱사메타손
처리농도(w/v%) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
세포재생율(%) 84.7 87.5 91.2 95.7 1 60.3 81.2
상기 표 6에서 확인되는 바와 같이, 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물과 미네랄 복합물을 함께 포함하는 실시예 1 내지 4의 복합물에서 현저히 높은 세포 재생효과를 나타내었다.
<실험예 10: 피부 장벽 기능 회복 효과 측정>
본 실험예는 사람의 상박에 태핑 스트리핑 방법(Taping stripping Method)을 이용하여 피부의 장벽을 손상시킨 후, 표피 수분 손실량(TEWL, transdermal water loss)을 servomed사(스웨덴) evaporimeter EP1으로 측정하여 4.0 g/m2/h에 도달하면, 본 제조예 3에서 제조된 알로에 베라 부정근의 조직배양 피토 DNA 복합물과 미네랄 복합물을 함께 포함하는 크림을 각각을 5 cm2 면적에 도포한 후, 표피 수분 손실량을 2 시간, 4 시간, 6 시간, 8 시간 경과 후에 측정하여 감소하는 정도를 평가함으로써 장벽기능이 회복되는 정도를 평가하였다. 결과는 초기 손상된 장벽 상태에서의 표피 수분 손실량을 기준(100%)으로 하여 시간에 따른 변화를 비교한 후, 하기 표 7에 나타내었다.
시료 0시간 2시간 4시간 6시간 8시간
비교예 3 85 68 55 50 45
제조예 3 82 43 28 26 23
상기 표 7에 나타낸 바와 같이, 본 제조예 3의 복합물을 함유하는 크림 조성물은 이를 함유하지 않은 비교예 3에 비해 우수한 피부 장벽기능 회복을 나타내었다.
<실험예 11: 피부 보습 개선 효과 측정>
피부 보습에 대한 임상시험으로 피부 수분 측정기(Corneometer, Courage+Khazaka, GmbH, Germany)를 이용하여 피부전도도를 측정함으로써 피부 보습력을 평가하였다. 피부 수분 측정은 실내온도 20~25℃ 상대습도 40~55%로 유지시킨 항온항습 조건 하에서 본 제조예 3 및 비교예 3의 크림을 10 명의 피검자 얼굴을 반으로 나누어 한쪽에는 제조예 3의 크림을 다른 한쪽에는 비교예 3의 크림을 도포(2 회/1 일)하여 사용 전 및 2 주 후의 수분 함유량을 측정하였다. 보습력을 하기 표 8에 나타내었다.
시료 0일 14일 수분 증가량(%)
비교예 3 31 35 13
제조예 3 32 44 36
상기 표 8에 나타낸 바와 같이, 본 제조예 3의 크림을 도포한 사람에게서 높은 보습효과를 나타내었다.

Claims (12)

  1. 알로에 베라(Aloe vera) 부정근으로부터 추출한 피토(phyto) DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물 및 미네랄 복합물을 유효성분으로 포함하고,
    상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물 및 미네랄 복합물은 천연 올리고당으로 안정화된 것이고,
    상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA는 냉동 및 해동 방법과 물리적 파쇄 방법을 조합하여 추출된 것이며,
    청색광으로 인한 피부노화를 방지하는 피부 개선용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체는 1:1 내지 4:1의 중량비로 혼합하는 것을 특징으로 하는 피부 개선용 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체는 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 5 중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 개선용 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 양이온 중합체는 하기 화학식 1로 표시되는 화합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 개선용 화장료 조성물:
    [화학식 1]
    Figure 112020049727724-pat00003
    ;
    [화학식 2]
    Figure 112020049727724-pat00004

    상기 화학식 1 또는 2에서,
    R은 상기 화학식 2로 표시되는 화합물 또는 수소 원자를 포함하고,
    n은 2 내지 10의 정수이며,
    p 및 q는 각각 독립적으로 양의 정수임.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 화학식 1은 폴리(L-라이신)(PLL), 폴리에틸렌이민(PEI), 폴리프로필렌이민(PPI), 펜타에틸렌아민, N,N'-비스(2-아미노에틸)-1,3-프로판디아민, N,N'-비스(2-아미노프로필)-에틸렌디아민, 스페르민, 스페르미딘, N-(2-아미노에틸)-1,3-프로판디아민, N-(3-아미노프로필)-1,3-프로판디아민, 트리(2-아미노에틸)아민, 1,4-비스(3-아미노프로필)피페라진, N-(2-아미노에틸)피페라진, 수지상 폴리아미도아민(PAMAM), 키토산, 폴리(2-디메틸아미노)에틸 메타크릴레이트(PDMAEMA) 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 올리고머를 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 개선용 화장료 조성물.
  6. 제4항에 있어서,
    상기 양이온 중합체는 100 내지 110의 수평균 분자량을 가지는 것을 특징으로 하는 피부 개선용 화장료 조성물.
  7. 삭제
  8. 제1항에 있어서,
    상기 미네랄 복합물은 칼슘, 마그네슘, 칼륨, 나트륨, 아연 및 이들의 조합들로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 개선용 화장료 조성물.
  9. 제1항에 있어서,
    상기 알로에 베라 부정근으로부터 추출한 피토 DNA 및 양이온 중합체를 혼합한 혼합물 및 미네랄 복합물은 1:1 내지 1:10의 중량비로 혼합하는 것을 특징으로 하는 피부 개선용 화장료 조성물.
  10. 삭제
  11. 제1항에 있어서,
    상기 청색광은 380 내지 500 nm 파장의 광원인 것인 피부 개선용 화장료 조성물.
  12. 제1항에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징 폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도우로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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