KR102345727B1 - 대기 오염물질로부터의 보호를 위한 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

대기 오염물질로부터 피부, 두피, 모발 및 외부 점막을 보호하기 위한, 오크 추출물, 포도씨 추출물 및 녹차 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 용도를 개시한다.

Description

대기 오염물질로부터의 보호를 위한 화장료 조성물

본 발명은, 대기 오염물질 (air pollutants)로부터의 보호에 유용한, 오크 추출물 (oak extract), 포도씨 추출물 (grape seed extract) 및 녹차 추출물 (green tea extract)을 포함하는 화장료 조성물 (cosmetic compositions)에 관한 것이다.

대기 오염이 인간 건강에 상당한 영향을 준다는 것이 오랫동안 알려져 왔고, 그 영향에 대한 다수의 구체적인 경고가 최근에 관계당국에 의해 제기되었다. 예를 들어, 2014년에 미국 환경 보호 기관 (US Environmental Protection Agency)은 대기 질 (air quality)이 국가 대기 질 기준 (National Ambient Air Quality Standards)을 충족하지 못하는 지역에 142,000,000명이 넘는 미국인이 거주하고 있다고 보고하였다 (https://www.epa.gov/air-trends).

같은 해에, WHO는 대기 오염 노출에 의해 7백만 명이 조기 사망한 것으로 추정하였고 (http://who.int/mediacentre/news/releases/2014/air-pollution/en/), 또한 대기 오염물질이 내부 장기에 악영향을 준다는 증거가 증가하고 있다 (Curr . Vasc. Pharmacol ., 2006, 4, 199-203).

호흡기가 명백하게 대기 오염물질에 대해 주된 표적이 되는, 내부 장기 이외에 (Annu . Rev. Public Health, 1994,15,107-132), 피부는 가장 많이 노출되는 표적 장기 중 하나이며, 이는 그의 표면이 크고 지속적으로 노출되기 때문이다.

현재까지, 피부 건강에 있어서 환경적 영향은 일광으로부터 자외선의 피부에 있어서의 영향에 대해서 주로 평가되어 왔으며 (J. Invest. Dermatol ., 2003, 120, 1087-1093; Prog .　 Biophys . Mol . Biol ., 2006, 92, 119-131); 그러나, UV 방사선 외에, 오염으로는 또한 잠재적으로 피부 건강에 추가 위험을 수반할 수 있는 유기 및 무기 물질들을 포함한다.

환경 오염물질들 중에, NO, CO 및 SO₂와 같은 기체 오염물질 및 휘발성 유기 화합물 (volatile organic compounds: VOC)로부터 잔류성 유기 오염물질 (살충제 및 디옥신-유사 화합물 포함)까지 다양한 화학적 부류가 확인되었다.

또한, 미립자 물질 (particulate matter) (기체 중 현탁액 중 액체 방울 및/또는 고체의 복합 혼합물, 카드뮴, 납, 크롬 및 수은과 같은 중금속이 통상의 대기 오염물질임)은 생물축적으로 인한 건강 위험의 원인이며, 이는 통상적으로 공기 중에 부유하는 탄소 입자에 의해 흡수되어, 피부에 침투하고 또한 축적될 수 있다 (Environ. Pollut . 2008 151, 362-367).

환경 오염물질이 피부를 손상시키는 전반적인 메카니즘에 대한 설명이 없고, 현재 이용가능한 데이터에 기반하여 피부 손상의 주요 원인이 되는 일부 메카니즘이 확인되었다. 주로 중금속과 관련된 상기 메카니즘은 하기를 포함한다:

- 자유 라디칼의 발생 (J. Toxicol . Cut & Ocular Toxicol ., 1987, 6(3), 183-191);

- 염증 캐스케이드의 유도 (중금속을 포함하는 분체는 전염증성 시토킨의 유전자 발현을 증가시키는 것으로 밝혀졌음) (Toxicol. Lett ., 1999, 105, 92-99);

- 자연 방어 메카니즘 감소.

피부의 외부 조직은 대기 오염물질에 가장 많이 노출되는 곳이고, (특히 중금속)은 자유 라디칼에 대한 세포 방어를 감소시킨다. 그러므로 중금속은 자연 방어 메카니즘의 효과를 감소시키고 또한 피부 노화를 촉진시키기 때문에 상기 중금속은 다른 모든 기체 오염물질들의 독성 효과를 가중시킨다.

이러한 사례가 특히 외인성 피부 노화 (주름 및 기미 (dark patches) 형성의 증가와 함께) (Biol . Chem ., 2010, 391, 1235-1248; J. Investig . Dermatol . 2010, 130, 2719-2726) 및 아토피 피부염 (atopic dermatitis)의 증가 (Allergy, 1996, 51, 532-539)를 초래하는 것으로 나타났다.

대기 오염물질이 피부에 유해한 영향을 미치는 메카니즘을 완전히 이해하기 위해 더 광범위한 연구가 필요하지만, 제한된 과학적 증거를 고려할 때, 대기 오염에 대한 노출 제한과는 별개로, 대기 오염으로부터 두피와 모발을 보호하기 위한 지침은 없다 (JEADV, 2015, 29, 2326-2332).

상기에 개시된 요인들을 고려하여, 특히 대기 오염물질로부터 피부, 두피, 모발 및 외부 점막을 효과적으로 보호하는 화장료 조성물을 찾을 필요가 있다.

본 발명은, 대기 오염물질로부터 피부, 두피, 모발 및 외부 점막을 보호하는데 유용한, 오크 추출물, 포도씨 추출물 및 녹차 추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명은, 대기 오염물질로부터 피부, 두피, 모발 및 외부 점막을 보호하는데 유용한, 오크 추출물, 포도씨 추출물 및 녹차 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 용도에 관한 것이다.

바람직한 구체예에 따르면, 본 발명에 따른 조성물은 외부 점막, 특히 코 및 입 (예컨대 입술)의 외부 점막을 보호하는데 유용하다.

상기 오크 추출물 (Q)은 바람직하게 총 폴리페놀 (polyphenol) 함량이 30% 내지 60% w/w, 더 바람직하게 45% w/w 이상인 것을 특징으로 하는 추출물이다. 상기 오크 추출물 (Q)은 바람직하게 수성 건조 추출물이다.

바람직한 구체예에 따르면, 상기 오크 추출물은 나무껍질 (bark)로부터 입수될 수 있다.

상기 오크 추출물은 상기 조성물 중에 0.01% 내지 5% w/w, 바람직하게 0.05% 내지 1% w/w의 양, 더 바람직하게 0.25% w/w의 양으로 존재할 수 있고, 및 더욱 바람직하게는 0.1% w/w이다.

상기 포도씨 (GS) 추출물은 바람직하게, 95% w/w 이상의 총 프로안토시아니딘 (proanthocyanidin) 함량 (Folin 방법에 의해 산출되고, 카테킨 (catechins)으로 표시됨) 및 HPLC 방법으로 평가하여 5 내지 15% w/w 범위의 모노머 (monomer) 함량 (카테킨 및 카테킨으로 표시되는 에피카테킨 (epicatechin)의 합으로부터 기인함)을 특징으로 하는 추출물이고, 및 더 바람직하게는 수성 건조 추출물이다.

상기 포도씨 추출물은 상기 조성물 중에 0.01% 내지 5% w/w, 바람직하게 0.05% 내지 1% w/w의 양, 더 바람직하게 0.25% w/w의 양으로 존재할 수 있고, 및 더욱 바람직하게는 0.1% w/w이다.

상기 녹차 (GT) 추출물은 바람직하게, 40% w/w 이상의 폴리페놀 함량 (Folin 방법으로 산출되고, 카테킨으로 표시됨), 및 HPLC 방법으로 평가하여, 15% w/w 이상의 카테킨 함량 (에피카테킨-3-O-갈레이트 (epicatechin-3-O-gallate)로 표시됨)을 특징으로 하는 추출물이고, 및 더 바람직하게는 수성 건조 추출물이다.

바람직한 구체예에 따르면, 상기 녹차 추출물은 잎 (leaves)으로부터 입수될 수 있다.

상기 녹차 추출물은 상기 조성물 중에 0.01% 내지 5% w/w, 바람직하게 0.05% 내지 1% w/w의 양, 더 바람직하게 0.25% w/w의 양으로 존재할 수 있고, 및 더욱 바람직하게는 0.1% w/w이다.

상기 모든 추출물은 상업적으로 이용가능하거나 또는 알려져 있는 기술을 사용하여 당업자에 의해 용이하게 제조될 수 있다.

상기 조성물은 바람직하게 국소로 (topically) 투여될 수 있다.

본 발명에 따른 조성물을 포함하는 제형 (Formulations)은 예를 들어, "Remington's Pharmaceutical Handbook", Mack Publishing Co., N.Y., USA에 개시된 바와 같은 기존의 기술에 의해 수득될 수 있다.

국소 제형의 예로는 에멀젼, 겔, 파운데이션 (foundations), 립스틱 및 연고이다.

놀랍게도, 오크 추출물, 포도씨 추출물 및 녹차 추출물을 함유하는 조성물은 대기 오염물질에 대한 피부, 두피, 모말 및 외부 점막에 있어서 보호 활성이, 상기 추출물을 개별적으로 사용할 때 얻을 수 있는 보호 활성보다, 더 큰 것을 보여주었고, 이는 시너지 활성을 나타내는 것으로 밝혀졌다. 이는 수행된 실험 연구의 결과에 의해 뒷받침된다.

특히, 본 발명에 따른 조성물은 대기 오염물질로서 중금속에 의해 유발된 유해한 효과를 감소시키는데 유용하다고 입증되었다.

하기 실시예는 본 발명을 추가로 예시한다.

실시예

제형 실시예 1

실시예 1의 화장료 조성물의 보호 효능과, 상기 추출물을 상기 조성물 중에 존재하는 양과 동일한 양으로 개별적으로 사용하였을 때의 보호 효능을 평가하기 위해 수행된 실험들을 하기에 개시하였다.

실시예 2 - 세포 생존력에 있어서 효능의 평가

본 시험에서 사용된 실험 모델은 인간 피부-유래된 섬유모세포 (fibroblasts) (ATCC-CRL-2703)로 나타낸다. 상기 세포를 10% 우태아혈청 (fetal bovine serum)을 갖는 완전 DMEM 배지에서 배양하였고 및 37℃, 5% CO2에서 인큐베이터에서 유지하였다. 상기 세포를 시험을 수행하기 위해 회류 (confluence)로 성장시켰다. 상기 시험을 수행하기 위해, 인간 섬유모세포 배양물을, 공기-분산된 오염 조건하에 통상적으로 존재하는 알려져 있는 오염물질인, 중금속의 혼합물 (Pb-Ef-Cr, 각 금속 90 μM)로, 24시간 동안 처리하였다. 환경적 손상과 동시에, 상기 세포 배양물을, 예비 세포독성 시험에서 세포독성이 입증되지 않은 것들 중에서 선택된, 3가지 농도의 시험 제품들로 처리하였다.

상기 세포 배양물을 상기 시료들에 48시간 동안 노출시켰다. 시험 기간 마지막에, 세포 생존력은 MTT 분석으로 평가하였다. 상기 MTT 분석 (3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸리움 브로미드)은 세포 생존력을 측정하기 위한 간단하고, 정확한, 표준 비색법 (colorimetric method)이다. 상기 분석은 미토콘드리아 효소인 숙시네이트 데히드로게나제에 의해 황색 테트라졸리움 염의 청색/자색 포르마잔 결정으로의 세포내 환원에 기반한다. 그러므로 상기 반응은 대사적으로 활성인 세포에서만 일어날 수 있고, 또한 분광계 판독으로부터 수득된 광학 밀도 값은 존재하는 살아있는 세포의 양과 상관관계가 있을 수 있다. 각 처리 마지막에, 모든 웰을 PBS로 세척하였고, 0.5 mg/mL MTT 용액으로 염색하였고, 및 3시간 동안 대기 중에 36.5℃/5% CO2에서 인큐베이트하였다. 그 다음에 상기 웰을 이소프로판올로 처리하였고 및 2시간 동안 실온에서 인큐베이트하였다. 인큐베이트한 후에, 흡광도 판독은 570 nm에서 마이크로플레이트 판독기 (microplate reader)에서 수행되었다 (이소프로판올 용액이 검정으로 사용됨). 각 실험 조건에 있어서, 처리된 배양물의 평균 광학 밀도와 네가티브 대조군의 평균 광학 밀도 사이의 비율은 세포 생존율 (cell viability rate)을 결정하였다.

상기 결과를 네가티브 대조군 배양물 (비처리됨, CTR-) 및 포지티브 대조군 배양물 (중금속만으로 처리됨, CTR+)과 비교하였다. 상기 처리들을 3회 (triplicate) 수행하였다.

하기 표 (표 1)는 결과를 단백질 함량과 포지티브 대조군과 비교된 % 보호로 나타낸 것을 보여준다. 통계적으로 유의한 t-검정 값은 p<0.05에 대해 (*) 및 p<0.95에 대해 (**)로 표시하였다.

실시예 3 - 세포 대사작용에 있어서 효능 평가 (단백질 함량)

본 시험에서 사용된 실험 모델은 인간 피부-유래된 섬유모세포 (ATCC-CRL-2703)로 나타낸다. 상기 세포를 10% 우태아혈청을 갖는 완전 DMEM 배지에서 배양하였고 및 37℃, 5% CO2에서 인큐베이터에서 유지하였다. 상기 세포를 시험을 수행하기 위해 회류로 성장시켰다. 상기 시험을 수행하기 위해, 인간 섬유모세포 배양물을, 공기-분산된 오염 조건하에 통상적으로 존재하는 알려져 있는 오염물질인, 중금속의 혼합물 (Pb-Ef-Cr, 각 금속 90 μM)로, 24시간 동안 처리하였다. 환경적 손상과 동시에, 상기 세포 배양물을, 예비 세포독성 시험에서 세포독성이 입증되지 않은 것들 중에서 선택된, 3가지 농도의 시험 제품들로 처리하였다.

상기 세포 배양물들을 상기 시료들에 48시간 동안 노출시켰다. 시험 기간 마지막에, 세포 대사작용은 상기 배양 배지 중에 단백질 함량을 분석하여 평가하였다.

상기 평가는 세포 배양 배지상에서 Lowry 비색법으로 수행하였다. 상기 Lowry 분석은 biuret 방법과 동일한 원리를 사용하며, 즉 알칼리 매질에서 Cu+ 이온이 단백질에 착화되어 티로신 및 트립토판 잔기의 산화 과정을 촉매하는 반응이다. 상기 산화로 Folin-Ciocalteu 시약의 환원을 일으켜서, 특징적인 황색으로부터 청색으로 변하고; 청색이 더 어두워질수록, 생물학적 기질 중에 단백질이 더 많이 존재한다. 정량적 결정은 표준 알부민의 알려져 있는 농도를 증가시켜서 구축된 검정 곡선을 사용한다.

하기 표는 결과를 단백질 함량과 포지티브 대조군과 비교된 % 보호로 나타낸 것을 보여준다. 통계적으로 유의한 t-검정 값은 p<0.05에 대해 (*) 및 p<0.95에 대해 (**)로 표시하였다.

상기 실시예들에 의해 명확하게 입증되는 바와 같이, 본 발명에 따른 조성물을 투여하여 수득가능한 효과는 오크, 포도씨 및 선택적으로 녹차 추출물들을 개별적으로 투여하여 수득가능한 개별의 효과의 합보다 더 크다. 즉, 상기 개별의 활성 성분들 사이의 상호작용으로 명백한 시너지 효과를 일으킨다.

Claims (11)

1. 대기 오염물질로부터 피부, 두피, 모발 또는 외부 점막의 보호에 비-치료적 사용을 위한 화장료 조성물로서,
   활성 성분들로서 오크 추출물 (oak extract), 포도씨 추출물 (grape seed extract), 및 녹차 추출물 (green tea extract)을 포함하고, 상기 대기 오염물질은 중금속인 것인 화장료 조성물.
2. 청구항 1에 있어서, 상기 외부 점막은 코 또는 구강 점막인 화장료 조성물.
3. 청구항 2에 있어서, 상기 외부 점막은 입술인 것인 화장료 조성물.
4. 청구항 1에 있어서, 국소 (topical) 투여를 위한 것인 화장료 조성물.
5. 청구항 1 내지 4 중 어느 한 항에 있어서, 상기 오크 추출물은 30% 내지 60% w/w의 범위의 총 폴리페놀 함량을 특징으로 하는 것인 화장료 조성물.
6. 청구항 1 내지 4 중 어느 한 항에 있어서, 상기 오크 추출물은 0.01% 내지 5% w/w 범위의 양으로 존재하는 것인 화장료 조성물.
7. 청구항 1 내지 4 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포도씨 추출물은 95% w/w 이상의 총 프로안토시아니딘 (proanthocyanidin) 함량 (Folin 방법에 의해 산출되고, 카테킨 (catechins)으로 표시됨) 및 5% 내지 15% w/w 범위의 모노머 (monomer) 함량 (카테킨 및 카테킨으로 표시되는 에피카테킨 (epicatechin)의 합으로부터 기인함)을 특징으로 하는 것인 화장료 조성물.
8. 청구항 1 내지 4 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포도씨 추출물은 0.01% 내지 5% w/w 범위의 양으로 존재하는 것인 화장료 조성물.
9. 청구항 1 내지 4 중 어느 한 항에 있어서, 상기 녹차 추출물은 40% w/w 이상의 폴리페놀 함량 (Folin 방법으로 산출되고, 카테킨으로 표시됨) 및 15% w/w 이상의 카테킨 함량 (에피카테킨-3-O-갈레이트 (epicatechin-3-O-gallate)로 표시됨)을 특징으로 하는 것인 화장료 조성물.
10. 청구항 1 내지 4 중 어느 한 항에 있어서, 상기 녹차 추출물은 0.01% 내지 5% w/w 범위의 양으로 존재하는 것인 화장료 조성물.
11. 청구항 1 내지 4 중 어느 한 항에 있어서, 상기 추출물들은 수성 건조 추출물들인 것인 화장료 조성물.