CN110897957B

CN110897957B - 一种植物提取物组合物和制备方法及其在化妆品中的应用

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Publication number: CN110897957B
Application number: CN201911300199.9A
Authority: CN
Inventors: 刘学; 杨成; 杜养标; 曹卫兵
Original assignee: Jiangsu Ruiting Biotechnology Co ltd
Current assignee: Jiangsu Ruiting Biotechnology Co ltd
Priority date: 2019-12-16
Filing date: 2019-12-16
Publication date: 2022-07-08
Anticipated expiration: 2039-12-16
Also published as: CN110897957A

Abstract

本发明公开了一种植物提取物组合物和制备方法及其在化妆品中的应用，包括，枸骨叶提取物、虎杖提取物、葡萄提取物和黄芩提取物，其中，以原料总质量为百分百计，所述枸骨叶提取物30～60％，所述虎杖提取物为10～30％，所述葡萄提取物为10～30％，所述黄芩提取物为1～20％；所述植物提取物组合物中，有机酸含量为1.5～3.0mg/g，虎杖苷含量为0.2～0.6mg/g，原花青素含量为0.1～0.3mg/g，白藜芦醇含量为0.25～0.75mg/g，黄芩苷含量为0.01～0.1mg/g。本发明提供一种植物提取物组合物，以枸骨叶提取物为主要组分，配伍虎杖提取物、葡萄提取物和黄芩提取物，协同增效，能够实现多靶点清除多种自由基的目的。

Description

一种植物提取物组合物和制备方法及其在化妆品中的应用

技术领域

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种植物提取物组合物和制备方法及其在化妆品中的应用。

背景技术

护肤类化妆品目前已经成为人们生活中的必需品，其护肤功效的往往从保湿和抗衰老等方面进行较为科学和客观的论证。在抗衰老的机理研究中，自由基学说占有非常重要的地位。在紫外线、雾霾、辐射、抽烟、不良作息等环境因素的影响下，机体内自由基增多，对正常细胞和组织造成累积性损伤，促使皮肤弹性纤维发生交联聚合，加速皮肤老化。有效的自由基清除剂可以起到清除过量自由基，延缓皮肤衰老的功效。另外，自由基清除也是活性物质具有美白、防晒等功效的作用机制之一。

由此，具有一定自由基清除能力的化学物质、天然提取物以及生物发酵制品等产品或物质在市场上都已屡见不鲜。

但目前市面上具有清除自由基能力的产品或物质往往存在活性较低、只能清除单一自由基、安全性未经验证等问题。因此，如何制备一种具有高效清除自由基能力且成本较低，配制工艺简单的植物提取物组合物是本领域有待解决的技术问题。

发明内容

本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

鉴于上述的技术缺陷，提出了本发明。

因此，作为本发明其中一个方面，本发明克服现有技术中存在的不足，提供一种具有高效清除自由基能力的植物提取物组合物。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种植物提取物组合物，其特征在于：包括，枸骨叶提取物、虎杖提取物、葡萄提取物和黄芩提取物，其中，以各原料质量百分比计，所述枸骨叶提取物30～60％，所述虎杖提取物为10～30％，所述葡萄提取物为10～30％，所述黄芩提取物为1～20％；所述植物提取物组合物中，有机酸含量为1.5～3.0mg/g，虎杖苷含量为0.2～0.6mg/g，原花青素含量为0.1～0.3mg/g，白藜芦醇含量为0.25～0.75mg/g，黄芩苷含量为0.01～0.1mg/g。

作为本发明所述植物提取物组合物的一种优选方案：所述枸骨叶提取物，其中，有机酸类物质含量为4mg/g。

作为本发明所述植物提取物组合物的一种优选方案：所述虎杖提取物，其中，虎杖苷含量为2mg/g。

作为本发明所述植物提取物组合物的一种优选方案：所述葡萄提取物，其中，原花青素含量为1mg/g，白藜芦醇含量为2.5mg/g。

作为本发明所述植物提取物组合物的一种优选方案：所述黄芩提取物，其中，黄芩苷含量为1mg/g。

作为本发明所述植物提取物组合物的一种优选方案：所述枸骨叶提取物50％，所述虎杖提取物为20％，所述葡萄提取物为20％，所述黄芩提取物为10％。

作为本发明的另一个方面，本发明克服现有技术中存在的不足，提供一种植物提取物组合物的制备方法，包括，包括，

取枸骨叶提取物，其中有机酸类物质含量为4mg/g；

取虎杖提取物，其中虎杖苷含量为2mg/g；

取葡萄提取物，其中原花青素含量为1mg/g，白藜芦醇含量为2.5mg/g；

取黄芩提取物，其中黄芩苷含量为1mg/g；

将所述枸骨叶提取物、所述虎杖提取物、所述葡萄提取物和所述黄芩提取物混合，在5～10℃条件，4000～5000rpm搅拌5～10min，即得植物提取物组合物；其中，以各原料质量百分比计，所述枸骨叶提取物30～60％，所述虎杖提取物为10～30％，所述葡萄提取物为10～30％，所述黄芩提取物为1～20％。

作为本发明所述植物提取物组合物制备方法的一种优选方案：所述植物提取物组合物中，有机酸含量为1.5～3.0mg/g，虎杖苷含量为0.2～0.6mg/g，原花青素含量为0.1～0.3mg/g，白藜芦醇含量为0.25～0.75mg/g，黄芩苷含量为0.01～0.1mg/g。

本发明的再一个目的是，克服现有技术中存在的不足，提供一种植物提取物组合物在化妆品中的应用。

本发明的有益效果：

(1)本发明提供一种植物提取物组合物，以枸骨叶提取物为主要组分，配伍虎杖提取物、葡萄提取物和黄芩提取物，协同增效，能够实现多靶点清除多种自由基的目的。

(2)本发明提供一种植物提取物组合物，优选植物提取物组合物中有机酸含量范围在1.5～3.0mg/g，虎杖苷含量范围在0.2～0.6mg/g，原花青素含量范围在0.1～0.3mg/g，白藜芦醇含量范围在0.25～0.75mg/g，黄芩苷含量范围在0.01～0.1mg/g，原料中活性物质控制在此范围内，清除自由基效果最佳。

(3)本发明提供的植物提取物组合物，清除自由基同时，安全无刺激，颜色无色至淡黄色，适用于化妆品领域。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：

图1为本发明实施中植物提取物组合物抗氧化活性测定图，其中，图1A为DPPH自由基清除效果图，图1-B为ABTS自由基清除效果图，图1-C活性氧自由基清除效果图，图1-D为总还原能力对比图。

图2为本发明实施4中不同提取物DPPH自由基清除图。

图3为本发明实施6中细胞毒性检测结果图。

具体实施方式

为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。

在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。

其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。

本发明中所用原料，如无特殊说明，均为市售通用产品。

实施例1

本发明提供一种植物提取物组合物制备方法：

(1)取枸骨叶提取物，其中有机酸类物质含量为4mg/g；

(2)取虎杖提取物，其中虎杖苷含量为2mg/g；

(3)取葡萄提取物，其中原花青素含量为1mg/g，白藜芦醇含量为2.5mg/g；

(4)取黄芩提取物，其中黄芩苷含量为1mg/g；

(5)将所述枸骨叶提取物、所述虎杖提取物、所述葡萄提取物和所述黄芩提取物混合，在5～10℃条件，4000～5000rpm搅拌5～10min，即得植物提取物组合物；其中，以原料总质量为百分百计，所述枸骨叶提取物40％，所述虎杖提取物为30％，所述葡萄提取物为20％，所述黄芩提取物为10％。

实施例2

本发明提供一种植物提取物组合物制备方法：

(1)取枸骨叶提取物，其中有机酸类物质含量为4mg/g；

(2)取虎杖提取物，其中虎杖苷含量为2mg/g；

(4)取黄芩提取物，其中黄芩苷含量为1mg/g；

(5)将所述枸骨叶提取物、所述虎杖提取物、所述葡萄提取物和所述黄芩提取物混合，在5～10℃条件，4000～5000rpm搅拌5～10min，即得植物提取物组合物；其中，以原料总质量为百分百计，所述枸骨叶提取物50％，所述虎杖提取物为20％，所述葡萄提取物为20％，所述黄芩提取物为10％。

实施例3

本发明提供一种植物提取物组合物制备方法：

(1)取枸骨叶提取物，其中有机酸类物质含量为4mg/g；

(2)取虎杖提取物，其中虎杖苷含量为2mg/g；

(4)取黄芩提取物，其中黄芩苷含量为1mg/g；

(5)将所述枸骨叶提取物、所述虎杖提取物、所述葡萄提取物和所述黄芩提取物混合，在5～10℃条件，4000～5000rpm搅拌5～10min，即得植物提取物组合物；其中，以各原料质量百分比计，所述枸骨叶提取物60％，所述虎杖提取物为15％，所述葡萄提取物为30％，所述黄芩提取物为5％。

实施例1～实施例3自由基清除组合物各组分及质量分数，见表1。

表1

本发明DPPH自由基清除实验：DPPH(1，1-二苯基-2-三硝基苯肼)法是评价天然抗氧化剂的最常用方法之一，快速、简便、灵敏。将上述实施例1、实施例2和实施例3所制备的自由基清除组合物，以及市售的某韩国公司同类产品，分别以去离子水溶解成质量分数为0.5％的溶液，以100μM的Trolox溶液为阳性对照，采用DPPH法进行抗氧化活性测定，结果见图1中图1A，从图1A中可以看出，本发明制得的植物提取物组合物DPPH自由基清除效果较好。

本发明ABTS自由基清除实验：ABTS[2，2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐)]法最早是用于测定生物样品样品总抗氧化能力的方法，此方法花费时间短、成本低，与抗氧化剂的生物活性相关性强，较为广泛的应用于包括血清在内的生物样品和果蔬类样品的抗氧化能力的测定。本发明将上述实施例1、实施例2和实施例3所制备的自由基清除组合物，以及市售的某韩国公司同类产品，分别以磷酸盐缓冲液PBS(pH7.4)配制成质量分数为0.5％的溶液，以100μg/mL的维生素C为对照，以ABTS法检测其清除自由基能力，结果见图1-B，从图1-B中可以看出，本发明制得的植物提取物组合物ABTS自由基清除效果较好。

本发明活性氧自由基清除实验(ORAC)：ORAC法的中文全称为氧自由基清除能力法，以偶氮类化合物AAPH作为过氧自由基来源，Sodium Fluorescein为荧光指示剂，维生素E水溶性类似物Trolox为定量标准，ORAC实验需要设定两种对照，即没有添加自由基的FL荧光自然衰减对照(-AAPH)和没有抗氧化剂存在时的自由基作用对照(+AAPH)。样品的抗氧化能力与自由基作用下荧光衰退曲线的延缓部分面积(NetAUC)直接相关。

本发明将上述实施例1、实施例2和实施例3所制备的自由基清除组合物，以及市售的某韩国公司同类产品，分别以磷酸盐缓冲液PBS(pH7.4)配制成质量分数为0.5％的溶液，再以PBS溶液稀释50倍后(即质量分数稀释至0.01％)，以10μM的Trolox为对照，以ORAC法检测其清除自由基能力，结果见图1-C。

总还原力检测实验(FRAP)：FRAP检测法是在酸性条件下，样品还原铁离子为亚铁离子，利用亚铁离子与TPTZ(tripyridyltriazine，三吡啶基三嗪)生成蓝紫色复合物来测量样品抗氧化能力。本发明将上述实施例1、实施例2和实施例3所制备的自由基清除组合物，以及市售的某韩国公司同类产品，分别以去离子水配制成质量分数为0.5％的溶液，以20μg/mL的维生素C为对照，检测其总还原能力，结果见图1-D。

实施例4

DPPH自由基清除能力检测：

(1)将实施例2制得植物提取物组合物以50％的1，3-丁二醇溶液配制成质量分数为0.5％的溶液，备用。

(2)取枸骨叶提取物，其中有机酸类物质含量为4mg/g；

取虎杖提取物，其中虎杖苷含量为2mg/g；

取黄芩提取物，其中黄芩苷含量为1mg/g；

将所述枸骨叶提取物、虎杖提取物、葡萄提取物、黄芩提取物，分别以质量比为1：1、1：4、1：4、1：9的比例加入1，3-丁二醇混匀，得到各提取物与1，3-丁二醇的混合物。再将各混合物分别以50％的1，3-丁二醇配制成质量分数为0.5％的溶液，备用。

(3)将上述各溶液按照前述自由基清除实验部分中DPPH自由基清除实验的方法，进行抗氧化能力的测定，结果见图2。从图2可以看出，在相同的浓度下，本发明所述组合物对于DPPH自由基清除能力比各单一提取物的能力显著提高。

实施例5

本发明在实施例2的基础上，通过控制枸骨叶提取物、虎杖提取物、葡萄提取物和黄芩提取物的添加量，测定植物提取物组合物中有机酸含量、虎杖苷含量、原花青素含量、白藜芦醇含量、黄芩苷含量以及相应的DPPH自由基清除效果，见表2。植物提取物组合物以50％的1，3-丁二醇溶液配制成质量分数为0.5％的溶液，各溶液按照前述自由基清除实验部分中DPPH自由基清除实验的方法，进行抗氧化能力的测定。

表2

可以看出，本发明所述植物提取物组合物中有机酸含量范围在1.5-3.0mg/g，虎杖苷含量范围在0.2-0.6mg/g，原花青素含量范围在0.1-0.3mg/g，白藜芦醇含量范围在0.25-0.75mg/g，黄芩苷含量范围在0.01-0.1mg/g内，DPPH自由基清除效果较好，同时，发明人进一步研究发现，是因为超过此范围时，加入时细胞存活率降低，不利于其在化妆品中进一步应用。

实施例6

本发明细胞毒性检测方法：

取10～30代对数生长期的角质形成细胞(HaCaT)，以8000个/孔的密度接种于96孔板，每孔100μL。用含10％(v/v)胎牛血清和1％(v/v)青霉素-链霉素双抗的DMEM培养液，培养于温度37℃，CO2浓度5％，饱和湿度的培养箱中，培养24h，待细胞贴壁后，移去孔中培养液。以DMEM培养液为溶剂，将样品配制成一定质量浓度的溶液，每孔加入100μL；以100μLDMEM培养液代替样品作为对照，每组设置3个复孔，于培养箱中孵育24h。

移去孔中培养液，用PBS冲洗两遍，每孔加入100μL按体积比稀释10倍的CCK-8溶液，并向不含细胞的孔中加入100μL稀释后的CCK-8溶液作为空白，于培养箱中避光孵育1h。孵育结束后，立即用酶标仪测定其在450nm处的OD值，按式下列公式进行计算：

本发明将上述实施例2所制备的自由基清除组合物以DMEM培养液依次配制成质量分数为10％，5％，2.5％和1.25％的溶液，按照上述细胞毒性检测方法检测细胞毒性，结果见图3。从图3可以看出，上述实施例2所制备的自由基清除组合物溶液在质量分数10％及以下，对角质形成细胞(HaCaT)无毒性作用。

本发明提供一种植物提取物组合物，以枸骨叶提取物为主要组分，配伍虎杖提取物、葡萄提取物和黄芩提取物，协同增效，能够实现多靶点清除多种自由基的目的。本发明提供一种植物提取物组合物，优选植物提取物组合物中有机酸含量范围在1.5～3.0mg/g，虎杖苷含量范围在0.2～0.6mg/g，原花青素含量范围在0.1～0.3mg/g，白藜芦醇含量范围在0.25～0.75mg/g，黄芩苷含量范围在0.01～0.1mg/g，原料中活性物质控制在此范围内，清除自由基效果最佳。

本发明提供的植物提取物组合物，清除自由基同时，安全无刺激，颜色无色至淡黄色，适用于化妆品领域。

应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims

1.一种植物提取物组合物，其特征在于：所述组合物由枸骨叶提取物、虎杖提取物、葡萄提取物和黄芩提取物组成，其中，以各原料质量百分比计，所述枸骨叶提取物为30~60%，所述虎杖提取物为10~30%，所述葡萄提取物为10~30%，所述黄芩提取物为1~20%；

所述枸骨叶提取物，其中有机酸类物质含量为4mg/g；

所述虎杖提取物，其中，虎杖苷含量为2 mg/g；

所述葡萄提取物，其中，原花青素含量为1 mg/g，白藜芦醇含量为2.5 mg/g；

所述黄芩提取物，其中，黄芩苷含量为1 mg/g；

所述植物提取物组合物中，有机酸含量为1.5mg/g，虎杖苷含量为0.2~0.6 mg/g，原花青素含量为0.1~0.3 mg/g，白藜芦醇含量为0.25~0.75 mg/g，黄芩苷含量为0.01~0.1 mg/g。

2.如权利要求1所述的植物提取物组合物，其特征在于：所述枸骨叶提取物为50%，所述虎杖提取物为20%，所述葡萄提取物为20%，所述黄芩提取物为10%。

3.权利要求1或2所述的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于：包括，

取枸骨叶提取物，其中有机酸类物质含量为4mg/g；

取虎杖提取物，其中虎杖苷含量为2 mg/g；

取葡萄提取物，其中原花青素含量为1 mg/g，白藜芦醇含量为2.5 mg/g；

取黄芩提取物，其中黄芩苷含量为1 mg/g；

将所述枸骨叶提取物、所述虎杖提取物、所述葡萄提取物和所述黄芩提取物混合，在5~10℃条件，4000~5000rpm搅拌5~10min，即得植物提取物组合物；其中，以各原料质量百分比计，所述枸骨叶提取物30~60%，所述虎杖提取物为10~30%，所述葡萄提取物为10~30%，所述黄芩提取物为1~20%。

4.如权利要求3所述的植物提取物组合物的制备方法，其特征在于：所述植物提取物组合物中，有机酸含量为1.5mg/g，虎杖苷含量为0.2~0.6 mg/g，原花青素含量为0.1~0.3 mg/g，白藜芦醇含量为0.25~0.75 mg/g，黄芩苷含量为0.01~0.1 mg/g。

5.权利要求1或2所述的植物提取物组合物在化妆品中的应用。