KR102308302B1 - 황기 발효물을 유효성분으로 포함하는 항노화 화장료 조성물 - Google Patents

황기 발효물을 유효성분으로 포함하는 항노화 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 황기 추출물을 오디 발효물로 발효시켜 수득된 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 항노화 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명으로부터 제공되는 발효물은 콜라겐 생성, 멜라닌 생성 저해 효능 및 히알루론산 생성 효능이 우수하기 때문에, 주름개선, 미백 및 보습용 화장료 조성물로 활용 가능하다.

Description

황기 발효물을 유효성분으로 포함하는 항노화 화장료 조성물{Cosmetic Compositions for Anti-aging Comprising Fermented Product of Astragalus membranaceus}
본 발명은 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 항노화 화장료 조성물에 관한 것이다.
주름이 형성되는 원인은 자연적 노화에 의한 주름의 생성과 자외선 노출(광노화)에 의한 주름의 생성으로 크게 나눌 수 있는데, 두 가지 원인에 의한 주름 형성 메커니즘은 아직까지 정확하게 밝혀져 있지 않은 상태이다. 자연적 노화와 광노화에 의한 피부변화와 관련되어 발견되는 공통적인 현상은 진피 내의 주 구성단백질인 콜라겐 및 엘라스틴의 감소 및 변형, 진피의 기질인 히알루론산의 감소에 의한 피부 탄력 감소이다. 특히 지금까지의 연구결과 의하면 진피 내 주 단백질인 콜라겐 및 엘라스틴의 감소 및 변형이 주름의 생성 및 피부의 탄력저하에 직접적으로 관여하는 것으로 알려져 있다. 콜라겐은 피부의 섬유아세포에서 생성되는 주요 기질 단백질로서 세포외 간질에 존재하고, 중요한 기능으로는 피부의 기계적 견고성, 결합조직의 저항력과 조직의 결합력, 세포 접착의 지탱, 세포분할과 분화(유기체의 성장 혹인 상처 치유시)의 유도 등이 알려져 있다. 이러한 콜라겐은 연령 및 자외선 조사에 의한 광노화에 의해 감소하며, 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 연관이 있다고 알려져 있다. 또한 근래에 들어 피부 노화에 대한 광범위한 연구 결과가 보고되면서 피부에서의 콜라겐의 중요한 기능이 밝혀지고 있다. 콜라겐 합성을 촉진하여 주름개선 효과를 나타내는 유효성분들이 알려져 있다. 예를 들어, 레티노산(retinoic acid), TGF(Transforming growth factor), 동물 태반 유래의 단백질, 베툴린산(betulinic acid), 클로렐라 추출물 등이 콜라겐 합성 촉진 물질로서 알려져 있다.
일반적으로 피부 미백과 가장 밀접하게 연관되어 있는 것은 멜라닌으로 알려져 있다. 사람의 피부색은 피부 내부의 멜라닌(Melanin)의 함량, 분포에 따라 결정되는데, 유전적인 요인 외에도 태양 자외선이나 피로, 스트레스 등의 환경적 또는 생리적 조건에 의해서도 영향을 받는다. 멜라닌은 피부 표피층에 있는 멜라노사이트(Melanocyte)에서 합성되는데, 멜라노사이트 내 소기관인 멜라노좀(Melanosome)에서 아미노산의 일종인 티로신(Tyrosine)에 티로시나제(Tyrosinase)라는 효소가 작용하여 도파(DOPA), 도파퀴논(Dopaquinone)으로 바뀐 후 비효소적인 산화반응을 거쳐 만들어진다. 이와 같은 멜라닌의 합성이 피부 내에서 과도하게 일어나면, 피부 톤을 어둡게 하고, 기미, 주근깨, 노인성 흑자, 모반 등을 발생시킨다. 따라서, 피부 내의 티로시나제 활성을 저해하여 멜라닌 색소의 합성을 저해시키면, 피부 톤을 밝게 하여 피부 미백을 실현할 수 있을 뿐만 아니라 자외선, 호르몬 및 유전적인 원인에 기인하여 발생하는 기미, 주근깨 등의 피부 과색소 침착증을 개선시킬 수 있다.
최근 기술의 발달과 삶의 질 향상으로 미(美)에 대한 욕구와 관심이 증대되면서 과도한 멜라닌 생성을 막는 미백 제품 개발이 필요하게 되었고, 이에 따라 미백제 및 미백 화장품 개발에 관한 연구가 활발히 진행 중이다. 멜라닌 침착 질환들을 치료하기 위해 오늘날 여러 미백 물질들이 사용되고 있으나 이들 대부분은 멜라닌형성세포에 독성을 나타내며 여러 부작용들을 유발한다. 예를 들면, 미백 효과가 우수한 하이드로퀴논(Hydroquinone)은 세포독성이 있으며, 신장독성 및 발암 가능성이 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 조직흑변증(Ochonosis)과 같은 피부손상으로 인해 유럽에서는 미백화장품에 사용이 금지되어 있다. 코직산(Kojic acid)은 미백효과가 우수하지만 세포독성이 있으며, 접촉성 피부염 또는 암을 일으킬 수 있는 것으로 알려져 있다.
피부는 환경의 변화나 내부의 요인에 의한 스트레스 및 외부 요인에 의한 자극 등으로 민감해지며 수분 보유력이 저하될 수 있으며, 노화가 진행됨에 따라 각질층의 수분이 감소하여 피부가 건조해지고 윤기를 잃어 칙칙해 보이는 등의 현상이 발생한다. 피부의 수분이 감소하는 경우 피부는 건조하게 되며 탄력이 떨어지고 주름 생성이 이루어지게 된다. 이와 더불어 피부 톤도 어두워지며 피부 보호막 기능이 저하되어 외부의 자극에도 더욱 민감한 상태가 되어 각종 트러블이 증가할 수 있다. 이처럼 각질층의 보습 상태는 피부의 외형(피부의 유연성 및 거친 정도)과 직접적으로 연관되어 있으며, 각질층의 피부 수분 함량은 피부의 컨디션 및 투과성과 관련되는 피부 막 항상성에 영향을 미치므로, 화장품 또는 바르는 의약품의 흡습도가 달라질 수 있어 피부 보습이 중요한 요소로 작용하고 있다. 따라서 피부가 보습 및 탄력을 잃지 않도록 피부의 보습력을 유지해주고, 그 효과를 지속시키는 화장료 조성물에 대한 요구가 증가하는 추세이다.
이와 같이, 다양한 분야에서 주름개선, 미백, 보습 효능을 가지는 연구 및 개발이 활발하게 진행되고 있으며, 특히 피부에 독성이나 자극을 주지 않기 위하여 천연 물질을 이용한 연구가 계속되고 있다.
황기 추출물을 이용하는 화장료 조성물 기술로는, 국내의 경우 대한민국 등록특허공보 제10-0844516호「황기 추출물을 함유하는 화장료 조성물」, 대한민국 등록특허공보 제10-1679480호「천연 추출물을 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물」, 대한민국 공개특허공보 제10-2014-0002577호「황기 추출물을 포함하는 피부 자극 또는 피부 염증 완화용 조성물」, 대한민국 등록특허공보 제10-1853338호「지황, 황기, 당귀 및 황금 추출물을 유효성분으로 포함하는 보습용 화장료 조성물」등이 개시되어 있다.
이에, 본 발명자들은 황기 추출물을 오디 발효물로 발효시켜 수득된 황기(Astragalus membranaceus) 발효물이 우수한 콜라겐 생성, 멜라닌 생성 저해 효능 및 히알루론산 생성 효능을 나타내어, 주름개선, 미백 및 보습 효과를 동시에 부여할 수 있다는 사실을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.
대한민국 등록특허공보 제10-0844516호 대한민국 등록특허공보 제10-1679480호 대한민국 공개특허공보 제10-2014-0002577호 대한민국 등록특허공보 제10-1853338호
본 발명의 목적은 천연물 유래의 항노화 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 천연물 유래의 항노화 화장료 조성물의 제조방법을 제공하는 데 있다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 황기 추출물을 오디 발효물로 발효시켜 수득된 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 항노화 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 있어서, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 글리세린 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매로 추출되는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 오디 발효물은 오디와 설탕을 항아리에 넣고 발효시켜 수득된 발효오디청 및 발효오디박인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 황기 발효물은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 20 중량% 포함되는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 황기 발효물은 콜라겐 생성, 멜라닌 생성 저해 효능 및 히알루론산 생성 효능을 갖는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명은 오디 및 설탕을 항아리에 넣고 혼합하여 1차 발효시키는 단계; 상기 1차 발효된 오디 발효물을 여과하여 발효오디청 및 발효오디박을 각각 분리하는 단계; 상기 발효오디청 및 황기 추출물을 항아리에 넣고 혼합한 다음 정제수를 첨가하는 단계; 및 상기 발효오디박 및 정제수를 항아리에 넣어 혼합한 다음, 천으로 항아리를 씌운 후 2차 발효시키는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 항노화 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다.
본 발명에 있어서, 상기 1차 발효는 오디 및 설탕을 1:1~2의 비율로 항아리에 넣고 12 내지 36 시간 후, 하루에 한번씩 저어주면서 15 내지 25℃에서 7 내지 42일 동안 발효 및 숙성시키는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 황기 추출물은 황기를 용매에 혼합한 다음, 50 내지 60℃에서 1 내지 6시간 동안 추출하여 수득된 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 2차 발효는 황기 추출물 100 중량부에 대하여 발효오디청 1000 내지 3000 중량부를 항아리에 넣고 혼합한 다음 정제수 2000 내지 4000 중량부를 첨가한 후, 발효오디박 1000 내지 3000 중량부 및 정제수 2000 내지 4000 중량부를 항아리에 넣어 혼합한 다음, 천으로 항아리를 씌운 후 10 내지 25℃에서 7 내지 42일 동안 발효 및 숙성시키는 것을 특징으로 한다.
본 발명으로부터 제공되는 발효물은 콜라겐 생성, 멜라닌 생성 저해 효능 및 히알루론산 생성 효능이 우수하기 때문에, 주름개선, 미백 및 보습용 화장료 조성물로 활용 가능하다.
다른 식으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 숙련된 전문가에 의해서 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 일반적으로, 본 명세서에서 사용된 명명법 은 본 기술분야에서 잘 알려져 있고 통상적으로 사용되는 것이다.
본원 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성 요소를 "포함" 한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성 요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명은 황기 추출물을 오디 발효물로 발효시켜 수득된 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 항노화 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 추출물은 본 발명이 속한 분야에 공지된 다양한 추출방법을 통해 얻어질 수 있고, 구체적으로는 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 글리세린 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매로 추출되는 것일 수 있다.
구체적으로, 추출용매의 함량은 황기 고형분 중량의 2 내지 100배, 더욱 바람직하게는 5 내지 50배, 가장 바람직하게는 10 내지 20배인 것일 수 있다.
또한, 상기 추출물은 추출물의 유효 성분이 파괴되지 않거나 파괴가 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다. 추출 방법은 특별히 제한되지 않고 추출물의 종류와 추출하는 방법에 따라 초음파 추출, 냉침 추출, 초임계 추출, 초고압 추출, 환류 냉각 추출, 상온 추출, 열수 추출 등을 이용할 수 있다.
여과는 추출액으로부터 부유하는 고체 입자를 제거하는 과정으로 면, 나일론, 종이 등을 이용하여 입자를 걸러 내거나 한외여과법, 냉동여과법, 원심분리법 등을 이용할 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
여액을 농축한 다음 건조하는 단계는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조, 감압건조, 포말건조, 고주파건조, 적외선건조 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 경우에 따라 최종 건조된 추출물을 분쇄하는 공정을 추가할 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 추출물은 발효액, 상기 추출액을 건조시킨 분말, 상기 추출액을 농축여과한 농축물 등 다양한 형태로 가공되어 이용될 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 황기(Astragalus membranaceus) 발효물은 황기 추출물을 오디 발효물로 발효시켜 수득된 것이며, 이때, 오디 발효물은 오디와 설탕을 항아리에 넣고 발효시켜 수득된 발효오디청 및 발효오디박인 것일 수 있다.
이때, 발효오디청은 여과하여 걸러진 액을 의미하고, 발효오디박은 여과하고 남은 부산물을 의미한다. 상기 발효오디청 및 발효오디박은 천연 미생물과 발효 효소가 포함된 오디 발효물로서 황기 추출물을 발효시키는 목적으로 사용된다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기와 같은 방법으로부터 수득된 황기(Astragalus membranaceus) 발효물은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 20 중량% 포함될 수 있고, 더욱 바람직하게는 0.1 내지 1 중량% 포함될 수 있다. 상기 발효물이 조성물의 총 중량에 대하여 0.001 중량% 미만일 경우에는 주름개선, 미백 및 보습 효과를 충분히 얻을 수 없기 때문에 조성물로서의 기능이 떨어지고, 20 중량%를 초과하는 경우에는 그 이상을 함유하지 않아도 충분한 효능을 나타낼 수 있기 때문에 비경제적일 뿐만 아니라, 제형의 안정성 및 발림성 등이 저하되어 화장품으로 사용에 어려움이 있기 때문에 바람직하지 않다.
상기 황기 발효물은 콜라겐 생성, 멜라닌 생성 저해 효능 및 히알루론산 생성 효능을 갖는 것을 특징으로 한다. 즉, 주름개선, 미백 및 보습 효과를 동시에 부여할 수 있기 때문에 단순히 피부 미용 뿐만 아니라, 근본적인 피부 건강 개선을 구현할 수 있는 효과가 있다.
전술된 바와 같이, 황기 발효물은 주름개선, 미백 및 보습 효능이 우수하기 때문에, 항노화 화장료 조성물로 사용될 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 화장료 조성물로 사용할 경우, 피부외용연고, 크림, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 스프레이, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 아이크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 클렌징워터, 파우더, 바디로션 및 바디 클렌저로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형의 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성 기름, 식물성 기름, 왁스, 파라핀, 전분, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연, 산화 티타늄 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 바디젤인 경우에 전술한 유효성분들 이외에 일반적으로 바디젤 제조 시에 사용되는 성분인, 카보머, 트리에탄올아민, 멘톨, 에탄올, 글리세린, 디소디움이디티에이, 메틸파라벤, 향 등이 이용될 수 있다. 여기서, 카보머, 트리에탈올아민은 점증제로 작용하고, 멘톨은 향 성분으로 작용하며, 에탄올은 청량감을 부여하는 기능을 하고, 글리세린은 보습제로서의 역할을 하며, 디소디움이디티에이는 금속성분 킬레이트로 기능하고, 메틸파라벤은 방부제로의 기능을 위해 첨가된다. 또한, 상기 향은 멘톨향 이외에도 허브향 등과 같은 다양한 향이 첨가될 수 있다.
전술한 구체적인 성분 이외에도, 상기에서 설명한 점증제, 청량감 부여, 향 성분, 보습제 등의 기능을 달성하기 위해 본 기술 분야에서 널리 사용되고 있는 공지의 물질들을 적용하여 조성물을 제조하는 것 또한 본 발명의 범위에 포함될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이(분무제)인 경우에 담체 성분으로서 락토스, 탤크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 첨가될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 첨가되는데, 이의 예로는 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 항노화 화장료 조성물은 통상의 첨가제를 부가하여 지방 분해 촉진을 위한 바디젤, 바디 로션, 바디 크림, 바디 오일 등의 조성물로 제조될 수 있으며, 에어졸 타입으로도 제조될 수 있다. 이 경우에 화장료 조성물은 피부에 직접 도포하거나 살포하는 경피 투여의 방법으로 사용되는 것이 바람직하다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 항노화 화장료 조성물의 사용량은 연령, 피부 지방의 상태 정도 등의 개인차나 제형, 형태에 따라 적절하게 조절될 수 있으며, 주름개선, 미백 및 보습 효과를 위한 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
상기와 같은 방법으로부터 수득된 조성물은 콜라겐 생성, 멜라닌 생성 저해 효능 및 히알루론산 생성 효능을 나타내어 우수한 주름개선, 미백 및 보습용 화장품을 제공할 수 있다.
또한, 본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명은 오디 및 설탕을 항아리에 넣고 혼합하여 1차 발효시키는 단계; 상기 1차 발효된 오디 발효물을 여과하여 발효오디청 및 발효오디박을 각각 분리하는 단계; 상기 발효오디청 및 황기 추출물을 항아리에 넣고 혼합한 다음 정제수를 첨가하는 단계; 및 상기 발효오디박 및 정제수를 항아리에 넣어 혼합한 다음, 천으로 항아리를 씌운 후 2차 발효시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 항노화 화장료 조성물의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 일 구현예에 따르면, 상기 1차 발효는 오디 및 설탕을 1:1 내지 2의 비율로 항아리에 넣고 12 내지 36 시간 후, 하루에 한번씩 저어주면서 15 내지 25℃에서 7 내지 42일 동안 발효 및 숙성시키는 것일 수 있다.
이때, 오디 및 설탕의 비율이 상기 범위를 벗어날 경우에는 발효 효율이 낮아지거나 과량의 당이 잔존할 수 있기 때문에 바람직하지 않다.
또한, 1차 발효 및 숙성 시간 및 온도가 상기 범위를 벗어날 경우에는 발효 효율이 낮아지거나 유익균 외의 미생물이 증식할 우려가 있기 때문에 바람직하지 않다.
상기와 같이 오디를 1차 발효시켜 숙성된 오디 발효물은 여과하여 발효오디청 및 발효오디박으로 각각 분리시킬 수 있다. 이때, 발효오디청은 여과하여 걸러진 액을 의미하고, 발효오디박은 여과하고 남은 부산물을 의미한다.
상기 1차 발효 후 숙성된 오디 발효물을 발효오디청 및 발효오디박으로 각각 분리시킨 후 2차 발효를 수행하게 된다.
2차 발효는 황기 추출물 100 중량부에 대하여 발효오디청 1000 내지 3000 중량부를 항아리에 넣고 혼합한 다음 정제수 2000 내지 4000 중량부를 첨가한 후, 발효오디박 1000 내지 3000 중량부 및 정제수 2000 내지 4000 중량부를 항아리에 넣어 혼합한 다음, 천으로 항아리를 씌운 후 10 내지 25℃에서 7 내지 42일 동안 발효 및 숙성시키는 것일 수 있다.
이때, 상기 황기 추출물은 황기를 용매에 혼합한 다음, 50 내지 60℃에서 1 내지 6시간 동안 추출하여 수득된 것이 콜라겐 생성, 멜라닌 생성 저해 효능 및 히알루론산 생성 효능이 현저하게 증가한다는 측면에서 바람직하다. 만일, 추출 조건이 상기 범위를 벗어날 경우에는 충분한 주름개선, 미백 및 보습 효과를 나타낼 수 없기 때문에 바람직하지 않다.
또한, 황기 추출물 대비 발효오디청, 발효오디박 및 정제수의 비율이 상기 범위를 벗어날 경우에는 황기 추출물의 발효 효율이 낮아질 수 있기 때문에 바람직하지 않다.
또한, 2차 발효 및 숙성 시간 및 온도가 상기 범위를 벗어날 경우에는 발효효율이 낮아지거나 유익균 외의 미생물이 증식할 우려가 있기 때문에 바람직하지 않다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명 하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
<실시예 1> 황기 발효물 제조
황기(지유본초) 100g에 75%(v/v) 에탄올 수용액을 1L 첨가하여 60℃에서 3 시간 동안 가온 추출하였다. 추출한 다음, 여과지로 여과하고 상기 추출 공정을 2회 반복하여 실시한 후 감압 농축하여 분말화된 황기 추출물을 제조하였다.
오디와 설탕을 1:1로 항아리에 번갈아 넣고 2일 후 하루 한 번씩 저어주면서 2주간 상온(20~25℃)에서 발효 및 숙성시켰다. 숙성된 오디를 여과하여 발효오디청 및 발효오디박을 각각 분리하여 1차 발효시켰다.
발효오디청 2kg에 상기 분말화된 황기 추출물 100g을 서서히 넣으면서 섞어준 다음, 항아리에 부은 후 정제수 4kg을 첨가하였다. 발효오디박 2kg 및 정제수 2kg을 순차적으로 첨가하여 혼합하고 천으로 항아리를 씌운 후, 하루 한 번씩 저어주면서 20℃ 항온에서 4주간 2차 발효시켰다. 상기 발효물을 No.2 여과지를 이용하여 여과하여 최종 황기 발효물을 제조하였다.
<실시예 2> 황기 발효물의 EA 분획물 제조
상기 실시예 1에서 수득된 황기 발효물 10g에 증류수를 500mL 첨가한 다음, 에틸아세테이트를 500mL 가한 후 분획 농축하여 최종 황기 발효물의 EA 분획물을 제조하였다.
<비교예 1> 황기 추출물 제조
황기(지유본초) 100g에 75%(v/v) 에탄올 수용액을 1L 첨가하여 60℃에서 3시간 동안 가온 추출하였다. 추출한 다음, 여과지로 여과하고 상기 추출 공정을 2회 반복하여 실시한 후 감압 농축하여 분말화된 황기 추출물을 제조하였다.
<실험예 1> 주름개선 효능 시험 : 콜라겐 생성 효과 측정
실시예 1~2 및 비교예 1을 이용하여 주름개선 효과를 알아보기 위하여 섬유아세포를 이용한 콜라겐 생성 효과를 측정하였다.
먼저, 배양된 섬유아세포(HS68 cells) 세포를 24-웰 플레이트(24-well plate)에 웰당 1x105 cells/mL로 분주한 후, 24시간 배양하였다. 배양 후, 각각 실시예 1~2 및 비교예 1이 농도별로 희석된 시럼이 함유되지 않은 DMEM 배지로 교체하여 24시간 동안 배양하였다. 콜라겐 합성량은 콜라겐 측정 키트(Procollagen Type I C peptide EIA kit, Takara, Japan)를 이용하여 프로콜라겐(procollagen) 타입 I C-펩타이드(Type I C-peptide, PICP)의 양을 측정하였다. 시료를 처리하지 않은 세포 배양액의 흡광도를 대조군 100%로 하였으며, 실험은 각각 3회씩 수행하여 평균값 ± 표준편차로 나타내었다.
구분 PIP (%)
0 μg/mL 10 μg/mL 50 μg/mL 100 μg/mL
실시예 1 100 113.5 ± 0.1 132.1 ± 1.2 147.3 ± 2.2
실시예 2 100 137.3 ± 0.8 139.2 ± 8.8 128.8 ± 8.2
비교예 1 100 99.6 ± 3.9 108.1 ± 2.5 118.6 ± 3.8
그 결과, 표 1에서 확인할 수 있듯이 비교예 1 대비 실시예 1~2가 콜라겐 생성 효과가 우수하여 주름개선 효과가 현저하게 높은 것을 확인하였다.
<실험예 2> 미백 효능 시험 : 멜라닌 생성 억제 측정
실시예 1~2 및 비교예 1을 이용하여 미백 효과를 알아보기 위하여 멜라닌 형성 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제 효능을 평가하였다.
먼저, 배양된 Murine B16F10 melanoma 세포를 6-웰 플레이트(6-well plate)에 웰당 5X104 cells/mL로 분주한 후, 24시간 배양하였다. D-phosphate buffered saline(D-PBS)으로 세척한 다음 2μM α-MSH를 포함하는 배지로 교환 후, 각각 실시예 1~2 및 비교예 1을 농도별로 첨가하여 3일간 배양하였다. 3일 동안 배양 후 배지를 제거하고 D-PBS buffer로 세척한 후, 트립신으로 처리하여 세포를 회수하였다. 회수된 세포는 1M NaOH 0.3 mL을 참가 후, 55℃에서 1시간 방치하여 세포 내의 멜라닌을 얻었다. 이를 96-웰 플레이트(96-well plate)로 옮긴 후 ELISA reader를 이용하여 490nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료를 처리하지 않은 세포 배양액의 흡광도를 대조군 100%로 하였으며, 실험은 각각 3회씩 수행하여 평균값 ± 표준편차로 나타내었다.
구분 Melanin (%)
0 μg/mL 10 μg/mL 50 μg/mL 100 μg/mL
실시예 1 100 101.8 ± 7.2 88.8 ± 4.2 85.8 ± 1.0
실시예 2 100 100.8 ± 2.1 95.4 ± 3.1 90.5 ± 1.9
비교예 1 100 105.0 ± 2.0 99.8 ± 3.1 92.2 ± 1.6
그 결과, 표 2에서 확인할 수 있듯이 비교예 1 대비 실시예 1~2가 멜라닌 생성 저해 효과가 우수하여 미백 효과가 현저하게 높은 것을 확인하였다.
<실험예 3> 보습 효능 시험 : 히알루론산 생성 효과 측정
실시예 1~2 및 비교예 1을 이용하여 보습 효과를 알아보기 위하여 히알루론산(hyaluronic acid) 생성 효과를 측정하였다.
먼저, 배양된 HaCaT 세포를 24-웰 플레이트(24-well plate)에 웰당 1x105 cells/mL로 분주한 후, 24시간 배양하였다. 배양 후, 각각 실시예 1~2 및 비교예 1이 농도별로 희석된 시럼이 함유되지 않은 DMEM 배지로 교체하여 24시간 동안 배양하였다. 히알루론산 생성량은 히알루론산 측정 키트(Hyaluronan ELISA Kit, echelon, USA)를 이용하여 히알루론산의 양을 측정하였다. 시료를 처리하지 않은 세포 배양액의 흡광도를 대조군 100%로 하였으며, 실험은 각각 3회씩 수행하여 평균값 ± 표준편차로 나타내었다.
구분 Hyaluronic acid (%)
0 μg/mL 10 μg/mL 20 μg/mL 50 μg/mL
실시예 1 100 115.3 ± 3.6 122.1 ± 8.5 130.3 ± 5.2
실시예 2 100 113.4 ± 2.4 121.8 ± 7.6 124.3 ± 5.4
비교예 1 100 101.3 ± 1.1 109.1 ± 2.4 115.9 ± 4.9
그 결과, 표 3에서 확인할 수 있듯이 실시예 1~2 및 비교예 1에서 히알루론산 생성 효과가 나타났으며, 비교예 1 대비 실시예 1~2가 보다 우수한 히알루론산 생성 저해 효과가 나타나 보습 효과가 현저하게 높은 것을 확인하였다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시 양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (9)

  1. 황기를 용매에 혼합한 다음, 50 내지 60℃에서 1 내지 6시간 동안 추출하여 수득된 황기 추출물을 오디 발효물로 발효시켜 수득된 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 주름개선, 미백 및 보습용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 글리세린 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매로 추출되는 것을 특징으로 하는 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 주름개선, 미백 및 보습용 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 오디 발효물는 오디와 설탕을 항아리에 넣고 발효시켜 수득된 발효오디청 및 발효오디박인 것을 특징으로 하는 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 주름개선, 미백 및 보습용 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 황기 발효물은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 내지 20중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 주름개선, 미백 및 보습용 화장료 조성물.

  5. 제1항에 있어서, 상기 황기 발효물은 콜라겐 생성, 멜라닌 생성 저해 효능 및 히알루론산 생성 효능을 갖는 것을 특징으로 하는 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 주름개선, 미백 및 보습용 화장료 조성물.
  6. (a) 황기를 용매에 혼합한 다음, 50 내지 60℃에서 1 내지 6시간 동안 추출하여 황기 추출물을 수득하는 단계;
    (b) 오디 및 설탕을 항아리에 넣고 혼합하여 1차 발효시키는 단계;
    (c) 상기 1차 발효된 오디 발효물을 여과하여 발효오디청 및 발효오디박을 각각 분리하는 단계;
    (d) 상기 발효오디청 및 황기 추출물을 항아리에 넣고 혼합한 다음 정제수를 첨가하는 단계; 및
    (e) 상기 발효오디박 및 정제수를 항아리에 넣어 혼합한 다음, 천으로 항아리를 씌운 후 2차 발효시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 주름개선, 미백 및 보습용 화장료 조성물의 제조방법.
  7. 제6항에 있어서, 상기 1차 발효는 오디 및 설탕을 1:1~2의 비율로 항아리에 넣고 12 내지 36 시간 후, 하루에 한번씩 저어주면서 15 내지 25℃에서 7 내지 42일 동안 발효 및 숙성시키는 것을 특징으로 하는 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 주름개선, 미백 및 보습용 화장료 조성물의 제조방법.


  8. 삭제
  9. 제6항에 있어서, 상기 2차 발효는 황기 추출물 100 중량부에 대하여 발효오디청 1000 내지 3000 중량부를 항아리에 넣고 혼합한 다음 정제수 2000 내지 4000 중량부를 첨가한 후, 발효오디박 1000 내지 3000 중량부 및 정제수 2000 내지 4000 중량부를 항아리에 넣어 혼합한 다음, 천으로 항아리를 씌운 후 15 내지 25℃에서 7 내지 42일 동안 발효 및 숙성시키는 것을 특징으로 하는 황기(Astragalus membranaceus) 발효물을 유효성분으로 포함하는 주름개선, 미백 및 보습용 화장료 조성물의 제조방법.
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