KR102300732B1 - A composition for anti-oxidating, whitening, anti-wrinkle or anti-inflammation comprising egg yolk oil and korean mint stem cell - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to an antioxidant, whitening, anti-wrinkle, or anti-inflammatory cosmetic composition, pharmaceutical composition, or food composition containing egg yolk oil and Korean mint stem cells as active ingredients. The composition comprising egg yolk oil and Korean mint stem cells as active ingredients according to the present invention has an excellent DPPH free radical scavenging activity and has an antioxidant effect. A tyrosinase inhibitory effect thereof enables a whitening effect to be ensured. Also, a collagen activity is enhanced, and thus a wrinkle alleviation effect is ensured. Production of NO and inflammatory cytokines is suppressed, and thus an anti-inflammatory effect is ensured. Moreover, egg yolk oil and Korean mint stem cells of the present invention do not have cytotoxicity and skin side effects, and thus can be safely used for cosmetic, pharmaceutical, and food compositions.

Description

난황유 및 배초향 줄기세포를 함유하는 항산화, 미백, 항주름 또는 항염증용 조성물{A COMPOSITION FOR ANTI-OXIDATING, WHITENING, ANTI-WRINKLE OR ANTI-INFLAMMATION COMPRISING EGG YOLK OIL AND KOREAN MINT STEM CELL}Antioxidant, whitening, anti-wrinkle or anti-inflammatory composition containing egg yolk oil and baecho-hyang stem cells

본 발명은 난황유 및 배초향 줄기세포를 유효성분으로 함유하는 항산화, 미백, 항주름 또는 항염증용 화장료 조성물, 약학적 조성물 또는 식품 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition, a pharmaceutical composition or a food composition for antioxidant, whitening, anti-wrinkle or anti-inflammatory containing egg yolk oil and baecho-hyang stem cells as active ingredients.

최근 생활과 소득 수준이 향상되면서 삶의 질을 향상시키기 위해 많은 관심이 높아지고 있다. 특히 노화와 각종 염증질환, 암의 대처 방안으로 항산화 물질을 비롯한 체내 질병과 대사를 위한 생리활성물질 개발에 대해 관심이 증대되었다 (KB Kim, et al., Journal of Nutrition and Health. 50(5);415-425(2017)). 생체 내에서 필요한 에너지 공급을 위해 생화학적 산화 반응은 끊임없이 일어나며 이 과정 중에 발생하는 유해산소라 불려지는 활성산소 (reactive oxygen species, ROS)는 가장 안정한 형태의 산소인 삼중항산소가 산화, 환원과정에서 생성되는 일중항산소인 수퍼옥사이드 음이온(Superoxide anion), 하이드록실 라디칼(hydroxyl radical), 과산화수소(hydrogen peroxide)과 같은 불안정한 상태의 유리 라디칼(free radical) 및 과산화수소 (H2O2)로 불안정하고 산화력이 높아 생체물질과 쉽게 반응하기 때문에 인체 내에서 제거되지 못하면 산화적 스트레스 (oxidative stress)를 유발하게 된다. 이러한 산화적 스트레스는 염증반응과 연결되어 있으므로 여러 대사과정에서 지질과산화를 유도하고, 단백질, 세포막 및 DNA 등을 손상시켜 세포의 노화와 변형을 유도함으로써 뇌졸중, 암, 동맥경화, 알츠하이머병, 파킨슨병, 동맥경화증 등 다양한 질병을 유발한다 (Valko M, et al., Int J Biochem Cell Biol. 39:44-84(2007); 및 Halliwell B, et al., NY, USA. 968(1999)). 이렇게 생성된 활성탄소를 제거시켜 생체를 보호하는 생리학적 항산화 효소로는 수퍼옥사이드 디스무타제(superoxide dismutase, SOD), 카탈라제(catalase), 글루타치온-퍼옥시다제(glutathione-peroxidase, GSHpx) 및 글루타치온 S-트랜스퍼라제(glutathione S-transferase, GST) 등이 있으며, 저분자의 항산화제 혹은 유리 라디칼 소거역할을 하는 것으로 α-토코페롤, β-카로틴, 아스코브산 및 글루타치온 등이 알려져 있다 (Kim SM, et al., Life Sci. 90(21-22);874-882(2012)).Recently, with the improvement of living and income level, there is a lot of interest in improving the quality of life. In particular, interest in the development of bioactive substances for body diseases and metabolism, including antioxidants, as a countermeasure for aging, various inflammatory diseases, and cancer has increased (KB Kim, et al., Journal of Nutrition and Health. 50(5)) ;415-425 (2017)). In order to supply the energy required in the living body, biochemical oxidation reactions occur constantly, and reactive oxygen species (ROS), called harmful oxygen, generated during this process is the most stable form of oxygen, triplet oxygen, in the oxidation and reduction process. Singlet oxygen produced by superoxide anion, hydroxyl radical, free radical in an unstable state such as hydrogen peroxide and hydrogen peroxide (H2O2). Because it reacts easily with substances, if it is not removed from the body, oxidative stress is caused. Since this oxidative stress is linked to the inflammatory response, it induces lipid peroxidation in various metabolic processes and damages proteins, cell membranes and DNA to induce senescence and transformation of cells, leading to stroke, cancer, arteriosclerosis, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, etc. , atherosclerosis, etc. (Valko M, et al., Int J Biochem Cell Biol. 39:44-84 (2007); and Halliwell B, et al., NY, USA. 968 (1999)). Physiological antioxidant enzymes that protect the living body by removing the generated activated carbon include superoxide dismutase (SOD), catalase, glutathione-peroxidase (GSHpx) and glutathione S -Transferase (glutathione S-transferase, GST), etc., and α-tocopherol, β-carotene, ascorbic acid and glutathione are known as small molecule antioxidants or free radical scavenging agents (Kim SM, et al. ., Life Sci. 90 (21-22); 874-882 (2012)).

사람의 피부색은 피부 내부의 멜라닌(melanin) 농도와 분포에 따라 결정되는데, 유전적인 요인 외에도, 태양 자외선이나 피로, 스트레스 등의 환경적 또는 생리적 조건에 의해서도 영향을 받는다. 멜라닌은 피부 표피층에 있는 멜라노사이트에서 합성되는데, 멜라노사이트 내 소기관인 멜라노좀(melanosome)에서 아미노산의 일종인 티로신(tyrosine)에 티로시나제(tyrosinase)라는 효소가 작용하여 도파(DOPA), 도파퀴논(dopaquinone)으로 바뀐 후 비효소적인 산화반응을 거쳐 만들어진다. 이와 같은 멜라닌의 합성이 피부 내에서 과도하게 일어나면, 피부 톤을 어둡게 하고, 기미, 주근깨 등을 발생시킨다. 따라서, 피부 내의 티로시나제 활성을 저해하여 멜라닌 색소의 합성을 저해시키면, 피부 톤을 밝게 하여 피부 미백을 실현할 수 있을 뿐만 아니라 자외선, 호르몬 및 유전적인 원인에 기인하여 발생하는 기미, 주근깨 등의 피부 과색소 침착증을 개선시킬 수 있다.A person's skin color is determined by the concentration and distribution of melanin inside the skin. Melanin is synthesized in melanocytes in the epidermal layer of the skin. In the melanosome, an organelle in melanocytes, an enzyme called tyrosinase acts on tyrosine, a type of amino acid, to activate DOPA and dopaquinone. ) and then undergoes a non-enzymatic oxidation reaction. When the synthesis of such melanin occurs excessively in the skin, the skin tone is darkened, and spots, freckles, and the like occur. Therefore, by inhibiting the tyrosinase activity in the skin and inhibiting the synthesis of melanin, not only can the skin tone be brightened to realize skin whitening, but also hyperpigmentation of the skin such as spots and freckles caused by UV rays, hormones, and genetic causes It can improve sedation.

한편, 염증반응은 외부 물리적, 화학적 자극이나 세균감염에 대한 생체방어 반응으로 염증매개물질이라 불리는 산화질소(nitric oxide, NO), 종양괴사인자(tumor necrosis factor, TNF)-α, 인터루킨(IL)-1β, 과립구 마크로파지 콜로니 자극인자(Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF), IL-6와 같은 다양한 염증성 사이토카인 (cytokine) 등을 생산 및 분비한다 (YC Yoo, et al., Journal of Life Science. 26(3);338-345(2016)). 또한, 염증 전사 인자인 핵 인자 카파(nuclear factor kappa) B (NF-κB)를 활성화시켜 유도성 산화질소 합성효소 (inducible nitric oxide synthase, iNOS)와 사이클로옥시제나제(cyclooxygenase)-2 (COX-2)를 발현시키고, 프로스타글란딘 (Prostaglandin) E2 (PGE2)를 생성하고 분비된 염증성 사이토카인 (cytokine) 은 다시 NF-κB를 활성화시켜 사이토카인 캐스케이드(cytokine cascade)를 증폭하여 염증상태를 확장시킨다. 특히 NO는 항박테리아, 항종양 등의 효과를 나타낼 수 있지만, 병리적 원인에 의해 과량 생성되어 분비되면 과도한 혈관 확장에 의하여 패혈성 쇼크 및 신경조직의 손상 등의 위험을 초래할 수 있다 (S Han, et al., Immunopharmacol. Immunotoxicol. 35;34-42(2013)). 이러한 염증성 사이토카인 (cytokine)과 염증 매개인자들은 염증과정에서 중요한 역할을 하고, 이들의 비정상적인 생성을 적절하게 조절하는 것이 염증성 질환의 치료법으로 제기되고 있다.On the other hand, the inflammatory reaction is a biological defense reaction against external physical and chemical stimuli or bacterial infection, and nitric oxide (NO), tumor necrosis factor (TNF)-α, interleukin (IL), which are called inflammatory mediators Produces and secretes various inflammatory cytokines such as -1β, granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), and IL-6 (YC Yoo, et al., Journal of Life Science. 26(3);338-345 (2016)). In addition, by activating nuclear factor kappa B (NF-κB), an inflammatory transcription factor, inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-) 2) is expressed, prostaglandin E2 (PGE2) is produced, and the secreted inflammatory cytokine activates NF-κB again to amplify the cytokine cascade and expand the inflammatory state. In particular, NO can exhibit antibacterial and antitumor effects, but when it is produced and secreted in excess due to pathological causes, it can lead to risks such as septic shock and nerve tissue damage due to excessive vasodilation (S Han, et al., Immunopharmacol. Immunotoxicol. 35;34-42 (2013)). These inflammatory cytokines and inflammatory mediators play an important role in the inflammatory process, and proper regulation of their abnormal production has been proposed as a treatment for inflammatory diseases.

따라서, 화장품 분야에서는 항산화, 미백, 항주름 또는 항염증 효과를 가지는 기능성 화장품에 대한 연구 및 개발이 활발하게 진행되고 있으며, 특히 피부에 독성이나 자극을 주지 않기 위하여 천연 물질을 이용한 연구가 계속되고 있다.Therefore, in the cosmetic field, research and development of functional cosmetics having antioxidant, whitening, anti-wrinkle or anti-inflammatory effects are being actively conducted, and in particular, research using natural substances is continued in order not to cause toxicity or irritation to the skin. .

예를 들어, 대한민국 등록특허 제10-1952943호는 아보카도씨 추출물의 항산화 효과를 보고하였으며, 대한민국 등록특허 제10-1950384호는 털마삭줄 추출물, 황련 추출물 및 회화나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백효과 및 주름개선 효과를 가지는 조성물을 기술하였으며, 대한민국 등록특허 제10-1949430호는 번행초 추출물의 항염증 및 항주름 효과를 개시한 바 있다.For example, Korean Patent Registration No. 10-1952943 reports the antioxidant effect of avocado seed extract, and Korean Patent Registration No. 10-1950384 discloses skin whitening containing hair balsam extract, yellow lily extract, and rhododendron extract as active ingredients. A composition having an effect and anti-wrinkle effect has been described, and Korean Patent Registration No. 10-1949430 discloses an anti-inflammatory and anti-wrinkle effect of an extract of ginseng extract.

한편, 난황유는 조류 알의 난황(노른자)에서 추출된 유상의 추출물이며, 난황유, 계란기름, 계란유 등으로 불리운다. 난황유는 지질, 비타민 A, 비타민 E, 리놀산 등을 함유하는 것으로 알려져 있으며, 지질은 중성지질, 인지질, 스테롤 등으로 구성되는 것으로 알려져 있다.On the other hand, egg yolk oil is an oily extract extracted from the yolk (yolk) of a bird egg, and is called egg yolk oil, egg oil, egg oil, and the like. Egg yolk oil is known to contain lipids, vitamin A, vitamin E, linoleic acid, and the like, and lipids are known to consist of neutral lipids, phospholipids, sterols, and the like.

또한, "배초향(排草香, Agastacherugosa)"은 꿀풀과에 속하는 여러해살이풀을 의미하며, 착생 후 군락을 이루고 척박한 산야에서도 생장력이 강한 자생식물이며, 지리적으로는 동북아에 분포하고 있으며 우리나라에서는 주로 남부 지방에 야생하거나 일부 재배되고 있는 토착 식용자원이다. 본 발명에서 상기 배초향은 그 자체로는 살충 효과가 거의 없거나 미약하지만, 제충국과 혼합되어 사용되는 경우 제충국이 보유하고 있는 살충효과를 극대화시켜주는 일종의 효과증진제로서의 역할을 수행하게 된다.In addition, "Baechohyang (排草香, Agastacherugosa)" means a perennial plant belonging to the Lamiaceae family. It is an indigenous food resource that is wild or partially cultivated in the southern regions. In the present invention, the baecho fragrance by itself has little or no insecticidal effect, but when used in combination with pyrethrum, it serves as a kind of effect enhancer that maximizes the insecticidal effect possessed by the pyrethrum.

이에 본 발명자들은 항산화, 미백, 항주름 또는 항염증 효과를 가지면서 인체 부작용이 적은 새로운 천연물질을 개발하기 위해 계속 연구를 진행한 결과, 난황유화 배초향 줄기세포 혼합물이 세포 독성이 없으면서도 항산화, 항염증 및 항주름 효과를 나타낸다는 사실을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the present inventors continued their research to develop a new natural substance that has antioxidant, whitening, anti-wrinkle or anti-inflammatory effects while having fewer side effects on the human body. The present invention was completed by confirming the fact that it exhibits an inflammatory and anti-wrinkle effect.

본 발명에서 해결하고자 하는 기술적 과제는 포함하는 항산화, 미백, 항주름 또는 항염증 효과를 가지면서 인체 안정성이 우수한 조성물을 제공하기 위한 것이다.The technical problem to be solved in the present invention is to provide a composition having excellent human stability while having antioxidant, whitening, anti-wrinkle or anti-inflammatory effects, including.

상기한 기술적 과제를 해결하기 위하여, 본 발명에서는 난황유 및 배초향 줄기세포를 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항산화, 미백, 항주름 또는 항염증용 조성물을 제공한다.In order to solve the above technical problem, the present invention provides an antioxidant, whitening, anti-wrinkle or anti-inflammatory composition comprising egg yolk oil and baecho-hyang stem cells as active ingredients.

바람직하게, 본 발명에서 난황유 및 배초향 줄기세포를 포함하는 조성물은 화장료 조성물, 약학적 조성물 또는 식품 조성물일 수 있다.Preferably, in the present invention, the composition comprising egg yolk oil and baecho-hyang stem cells may be a cosmetic composition, a pharmaceutical composition, or a food composition.

본 발명에 있어서, 상기 난황은 식물성 에스트로겐으로 이소프라본(isoflavone) 및 인체 세포막의 구성 성분인 레시틴(Lecithin)을 함유하고 있어, 상기 난황에서 추출한 오일은 피부에 영양을 공급하고 피부에 보호막을 형성하여 우수한 보습력을 나타냄은 물론 피부 건강을 향상시킨다.In the present invention, the egg yolk contains isoflavone as a plant estrogen and lecithin, a component of human cell membrane, and the oil extracted from the egg yolk supplies nutrients to the skin and forms a protective film on the skin. Thus, it exhibits excellent moisturizing power and improves skin health.

상기 난황유는 조류의 알로부터 추출된 유상물질로, 난황유에는 레시틴, 인지질, 비타민 A, 비타민 E, 및 리놀산 등이 함유되어 있다. 상기 조류는 닭일 수 있다. 예로부터, 난황유는 중풍, 심장질환, 고혈압, 이질, 천식, 무좀, 탈항, 치질, 자양강장 등에 효과가 있는 것으로 알려져 민간요법으로 사용되어 왔다. The egg yolk oil is an oily substance extracted from algae eggs, and the egg yolk oil contains lecithin, phospholipids, vitamin A, vitamin E, and linoleic acid. The bird may be a chicken. Since ancient times, egg yolk oil has been known to be effective in stroke, heart disease, hypertension, dysentery, asthma, athlete's foot, prolapse, hemorrhoids, and nourishing tonic, and has been used as a folk remedy.

상기 난황유는 삶은 계란의 노른자를 태워서 난황유를 추출하는 소초법, 별도의 용매를 사용하여 난황유를 추출하는 용매추출법, 착유방식에 의한 추출법, 초임계 추출법 등에 의해 추출된 것일 수 있다. 예를 들어, 일본 특허 공개공보 평 1-5474호, 대한민국 공개특허 제87-6843호, 공개특허 제92-11388호, 공고특허특1995-14959호 등에 기술된 방법을 이용하여 제조된 것일 수 있다.The egg yolk oil may be extracted by a socho method in which egg yolk oil is extracted by burning the yolk of a boiled egg, a solvent extraction method in which egg yolk oil is extracted using a separate solvent, an extraction method by a milking method, a supercritical extraction method, and the like. For example, it may be manufactured using the method described in Japanese Patent Application Laid-Open No. Hei 1-5474, Korean Patent Application Laid-Open No. 87-6843, Korean Patent Application Laid-Open No. 92-11388, and Korean Patent Publication No. 1995-14959. .

본 발명에서 사용된 용어 '줄기세포'는 조직 및 기관의 특수화된 세포를 형성하도록 비제한적으로 재생할 수 있는 마스터 세포를 지칭한다. 줄기세포는 발달가능한 만능성 또는 다능성 세포이다. 줄기세포는 2개의 딸줄기세포, 또는 하나의 딸줄기세포와 하나의 유래('전이(transit)') 세포로 분열될 수 있으며, 이후에 조직의 성숙하고 완전한 형태의 세포로 증식된다.As used herein, the term 'stem cell' refers to a master cell capable of regenerating without limitation to form specialized cells of tissues and organs. Stem cells are pluripotent or pluripotent cells capable of developing. Stem cells can divide into two daughter stem cells, or one daughter stem cell and one derived ('transit') cell, which then proliferates into mature, complete cells of the tissue.

본 발명에서 사용된 용어 "식물 줄기세포"는 형성층 유래 식물줄기세포이다. 특히, 식물의 물관과 체관의 경계선상에 끼인 형성층에서 물리적으로 전혀 손상받지 않은 상태의 순수 식물줄기세포 (CMC Cambial Meristematic Cell)를 포함한다.As used herein, the term "plant stem cell" is a cambium-derived plant stem cell. In particular, it includes pure plant stem cells (CMC Cambial Meristematic Cell) in a state that is not physically damaged at all in the cambium sandwiched on the boundary between the xylem and the phloem of a plant.

본 발명에서 사용된 용어 "캘러스"(Callus, 혹은 유합조직, 창상조직, 유상조직)는 분화되지 않은 부정형의 세포덩어리로 식물체에 상처가 났을 때 상처 주변에 생기는 분열조직이 형성한 종양조직이 대표적이다. 식물은 크게 세포분열을 하는 분열조직과 그렇지 않은 영구조직으로 구성되어 있는데 처음 분열조직의 세포를 영양 배지에 넣고 키우면 캘러스가 형성된다. 그 후 부정배가 형성되고 식물체로 분화된다. 이 캘러스는 흔히 "식물의 줄기세포"라고도 불린다. 본 발명에 사용되는 캘러스의 종류에는 제한이 없다.As used herein, the term "callus" (or callus, or callus, wound tissue, callus) is an undifferentiated amorphous cell mass, representative of which is a tumor tissue formed by meristems formed around the wound when a plant is wounded. am. Plants are largely composed of meristems that undergo cell division and permanent tissues that do not. When cells of meristems are first put in a nutrient medium and grown, a callus is formed. After that, an embryonic embryo is formed and it differentiates into a plant body. These callus are often referred to as "plant stem cells". There is no limitation on the type of callus used in the present invention.

본 발명에서 사용된 용어 "분화(differentiation)"는 세포가 분열 증식하여 성장하는 동안에 서로 구조나 기능이 특수화하는 현상, 즉 생물의 세포, 조직 등이 각각에게 주어진 일을 수행하기 위하여 형태나 기능이 변해가는 것을 말한다. 일반적으로 비교적 단순한 계(系)가 둘 이상의 질적으로 다른 부분계(部分系)로 분리되는 현상이다. 예를 들면, 개체발생에서 처음에 동질적이었던 알 부분 사이에 머리나 몸통 등의 구별이 생기거나 세포에도 근세포라든가 신경세포 등의 구별이 생기는 것과 같이 처음에 거의 동질이었던 어떤 생물계의 부분 사이에 질적인 차이가 생기는 것, 또는 그 결과로서 질적으로 구별할 수 있는 부역 또는 부분계로 나누어져 있는 상태를 분화라고 한다.As used herein, the term “differentiation” refers to a phenomenon in which the structure or function of cells is specialized to each other during division, proliferation, and growth, that is, cells, tissues, etc. say changing In general, it is a phenomenon in which a relatively simple system is divided into two or more qualitatively different subsystems. Qualitative differences between parts of a biological system that were initially almost homogeneous, for example, in ontogenesis, between parts of an egg that were initially homogeneous, such as a head or trunk, or between cells, such as myocytes and nerve cells. Differentiation occurs, or as a result, the state of being divided into subdivisions or subsystems that can be distinguished qualitatively is called differentiation.

본 발명에서는 식물 줄기세포 또는 다양한 방법으로 유도된 모든 종류의 유도 만능 식물 줄기세포를 배양하고 이로부터 추출물을 제조하는 단계를 포함하는데, 이는 당업계에 공지된 일반적인 방법에 따라 수행할 수 있다. 예를 들면, 식물 줄기세포 또는 다양한 방법으로 유도된 모든 종류의 유도 만능 식물 줄기세포를 배양하고 단백질 분해 효소 처리 후 부유액을 수합하거나 식물 줄기세포를 65℃에서 2 시간동안 반응시켜 필터링함으로써, 각각의 세포로부터 유래하는 단백질을 추출할 수 있다.The present invention includes culturing plant stem cells or all types of induced pluripotent plant stem cells induced by various methods and preparing an extract therefrom, which can be performed according to a general method known in the art. For example, by culturing plant stem cells or all types of induced pluripotent plant stem cells induced by various methods, collecting the suspension after proteolytic enzyme treatment, or filtering the plant stem cells by reacting them at 65° C. for 2 hours, each Proteins derived from cells can be extracted.

본 발명의 하나의 구현예에 따르면, 배초향 줄기세포로 캘러스 파우더를 사용하였다. 본 발명에 사용될 수 있는 캘러스 파우더에는 제한이 없다. According to one embodiment of the present invention, callus powder was used as baechohyang stem cells. There is no limitation on the callus powder that can be used in the present invention.

본 발명의 하나의 구현예에 따르면, 상기 난황유와 배초향 줄기세포는 1:1 내지 2:1의 중량비로 사용되는 것이 바람직하다.According to one embodiment of the present invention, it is preferable that the egg yolk oil and baechohyang stem cells are used in a weight ratio of 1:1 to 2:1.

본 발명에서는 난황유 및 배초향 줄기세포를 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항산화, 미백, 항주름 또는 항염증용 조성물을 제공한다.The present invention provides an antioxidant, whitening, anti-wrinkle or anti-inflammatory composition comprising egg yolk oil and baecho-hyang stem cells as active ingredients.

본 발명에 있어서, 상기 "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.In the present invention, the "active ingredient" refers to a component capable of exhibiting the desired activity alone or in combination with a carrier having no activity by itself.

본 발명의 조성물에는 난황유 및 배초향 줄기세포가 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 0.005 내지 50 중량%, 보다 바람직하게는 0.01 내지 30 중량%, 가장 바람직하게는 0.1 내지 10 중량%로 포함할 수 있다. 이 때 난황유 및 배초향 줄기세포의 함량이 0.005 중량% 미만일 경우 본 발명의 목적효과를 수득할 수 없으며, 50 중량%를 초과할 경우 함량의 증가에 따라 효과가 비례적이지 않아 비효율적일 수 있으며 제형상의 안정성이 확보되지 않는 문제점이 있다.The composition of the present invention may contain egg yolk oil and baecho-hyang stem cells in an amount of 0.005 to 50% by weight, more preferably 0.01 to 30% by weight, and most preferably 0.1 to 10% by weight based on the total weight of the composition. At this time, if the content of egg yolk oil and baecho-hyang stem cells is less than 0.005% by weight, the desired effect of the present invention cannot be obtained, and if it exceeds 50% by weight, the effect is not proportional as the content increases, so it may be inefficient and There is a problem in that the stability of the

본 발명의 난황유 및 배초향 줄기세포를 함유하는 조성물은 항산화 효과, 미백효과, 주름 개선효과 및 항염증 효과를 나타내며, 천연 물질로서 세포독성이 거의 없다.The composition containing egg yolk oil and baecho-hyang stem cells of the present invention exhibits an antioxidant effect, a whitening effect, an anti-wrinkle effect, and an anti-inflammatory effect, and has almost no cytotoxicity as a natural substance.

본 발명의 하나의 실시양태에 따르면, 난황유 및 배초향 줄기세포를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.According to one embodiment of the present invention, there is provided a cosmetic composition comprising egg yolk oil and baecho-hyang stem cells as active ingredients.

본 발명의 화장료 조성물에는 유효성분으로서의 난황유 및 배초향 줄기세포 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 첨가되는 성분, 예컨대 항산화제, 안정화제, 가용화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 및 담체를 추가로 첨가할 수 있다. In the cosmetic composition of the present invention, in addition to egg yolk oil and pear-derived stem cells as active ingredients, components commonly added to cosmetic compositions, such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavoring agents, and carriers are added. can be added.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 영양 크림, 수렴 화장수, 유연 화장수, 로션, 에센스, 영양젤 또는 마사지 크림의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art, for example, solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing , oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, spray, etc., but is not limited thereto. More specifically, it may be prepared in the form of a nourishing cream, an astringent lotion, a softening lotion, a lotion, an essence, a nourishing gel or a massage cream.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트 검, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, gum tracanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, or zinc oxide is used as a carrier component. can be

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, toss, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, and in particular, in the case of a spray, additional chlorofluorohydrocarbon, propane /may contain propellants such as butane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 가용화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizer or emulsifier is used as a carrier component, for example, water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 ,3-butylglycol oil, glycerol fatty esters, fatty acid esters of polyethylene glycol or sorbitan.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 검등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, as a carrier component, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol esters and polyoxyethylene sorbitan esters, microcrystals Adult cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or gum tracanth may be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing agent, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyl taurate, sarcosinate, fatty acid amide as carrier components Ether sulfate, alkylamidobetaine, fatty alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, lanolin derivative or ethoxylated glycerol fatty acid ester and the like can be used.

본 발명의 화장료 조성물은 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 막형성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 그리고, 상기의 성분들은 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention further comprises a fatty substance, an organic solvent, a solubilizer, a thickening agent and a gelling agent, an emollient, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, a surfactant, a film forming agent, water, Ionic or nonionic emulsifiers, fillers, sequestering and chelating agents, preservatives, vitamins, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic actives, lipid vesicles or any conventionally used in cosmetics It may contain adjuvants commonly used in the field of cosmetology or dermatology, such as other ingredients of And, the above ingredients may be introduced in an amount generally used in the field of dermatology.

본 발명의 하나의 구현예에 따르면, 난황유 및 배초향 줄기세포를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.According to one embodiment of the present invention, there is provided a pharmaceutical composition comprising egg yolk oil and baechohyang stem cells as active ingredients.

발명에 따른 약학적 조성물은 난황유 및 배초향 줄기세포 이외에 약학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 본 발명의 약학적 조성물에 포함되는 약학적으로 허용되는 담체는 제제 시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다. The pharmaceutical composition according to the present invention includes a pharmaceutically acceptable carrier in addition to egg yolk oil and baecho-hyang stem cells. Pharmaceutically acceptable carriers included in the pharmaceutical composition of the present invention are commonly used in formulation, and include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, acacia gum, calcium phosphate, alginate, gelatin, calcium silicate, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, cellulose, water, syrup, methyl cellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil, and the like. it's not going to be The pharmaceutical composition of the present invention may further include a lubricant, a wetting agent, a sweetening agent, a flavoring agent, an emulsifying agent, a suspending agent, a preservative, and the like, in addition to the above components. Suitable pharmaceutically acceptable carriers and agents are described in detail in Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995).

본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 바람직하게는 비경구 투여, 보다 바람직하게는 도포에 의한 국부 투여(topical application) 방식으로 적용된다.The pharmaceutical composition of the present invention may be administered orally or parenterally, preferably parenterally, and more preferably applied by topical application.

본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성별, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 성인 기준으로 0.001-100 ㎎/kg 범위 내이다. 또한 외용제인 경우에는 성인 기준으로 1.0 내지 3.0 ml의 양으로 1일 1회 내지 5회 도포하여 1개월 이상 계속 하는 것이 좋다. 다만, 상기 투여량은 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.A suitable dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is variously prescribed depending on factors such as formulation method, administration method, age, weight, sex, pathological condition, food, administration time, administration route, excretion rate and reaction sensitivity of the patient. can be The dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is within the range of 0.001-100 mg/kg for adults. In addition, in the case of an external preparation, it is recommended to apply it once to 5 times a day in an amount of 1.0 to 3.0 ml based on an adult and continue it for at least 1 month. However, the dosage does not limit the scope of the present invention.

본 발명의 약학적 조성물은 당분야의 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이 때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액, 시럽제 또는 유화액 형태이거나 엑시르제, 산제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention is prepared in unit dosage form or multi-dose by formulating using a pharmaceutically acceptable carrier and/or excipient according to a method that can be easily performed by a person of ordinary skill in the art. It can be prepared by introducing into a container. In this case, the formulation may be in the form of a solution, suspension, syrup, or emulsion in oil or aqueous medium, or may be in the form of an extract, powder, powder, granule, tablet or capsule, and may additionally include a dispersant or stabilizer.

본 발명의 하나의 구현예에 따르면, 난황유 및 배초향 줄기세포를 유효성분으로 포함하는 식품 조성물을 제공한다.According to one embodiment of the present invention, there is provided a food composition comprising egg yolk oil and baecho-hyang stem cells as active ingredients.

본 발명에 따른 식품 조성물에는 유효성분으로서 난황유 및 배초향 줄기세포뿐만 아니라 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 추가로 포함할 수 있다.The food composition according to the present invention may further include not only egg yolk oil and pear herb stem cells as active ingredients, but also ingredients commonly added during food production, for example, proteins, carbohydrates, fats, nutrients, seasonings and flavoring agents. have.

상기 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.Examples of the carbohydrate include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; disaccharides such as maltose, sucrose, oligosaccharides and the like; and polysaccharides, for example, conventional sugars such as dextrin, cyclodextrin, and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents, natural flavoring agents [taumatine, stevia extract (eg, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.)) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be used.

예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제로 제조되는 경우에는 본 발명의 난황유 및 배초향 줄기세포 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 두충 추출액, 대추 추출액, 감초 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.For example, when the food composition of the present invention is prepared as a drink, citric acid, liquid fructose, sugar, glucose, acetic acid, malic acid, fruit juice, cephalothorax extract, date extract, licorice extract, etc. can be included

한편, 본 발명의 난황유 및 배초향 줄기세포는 천연물질로서 인체에 무해하며, 독성 및 부작용이 거의 없으므로 장기간 사용시에도 안심하고 사용할 수 있으며, 특히 상기한 바와 같은 화장료, 약학적 및 식품 조성물에 안전하게 적용할 수 있다.On the other hand, the egg yolk oil and baecho-hyang stem cells of the present invention are natural substances, harmless to the human body, and have almost no toxicity and side effects, so they can be safely used even when used for a long period of time. can

이와 같이, 본 발명의 난황유 및 배초향 줄기세포를 유효성분으로 포함하는 조성물은 DPPH 자유 라디칼 소거활성이 우수하여 항산화 효과가 있으며, 티로시나아제 저해효과를 가져 미백효과를 가질 뿐만 아니라 콜라겐 활성을 증대시켜 주름 개선효과를 가지며, NO 생성 및 염증성 사이토카인의 생성을 억제하여 항염증 효과가 있다. 또한, 본 발명의 난황유 및 배초향 줄기세포는 세포 독성 및 피부 부작용이 없어 화장료, 약품 및 식품 조성물에 안전하게 사용할 수 있다.As described above, the composition comprising egg yolk oil and baecho-hyang stem cells of the present invention as an active ingredient has excellent DPPH free radical scavenging activity, which has an antioxidant effect, and has a tyrosinase inhibitory effect to have a whitening effect as well as increase collagen activity. It has a wrinkle-improving effect, and has an anti-inflammatory effect by inhibiting the production of NO and inflammatory cytokines. In addition, egg yolk oil and baecho-hyang stem cells of the present invention do not have cytotoxicity and skin side effects, so they can be safely used in cosmetics, pharmaceuticals and food compositions.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다. Hereinafter, examples and the like will be described in detail to help the understanding of the present invention. However, the embodiments according to the present invention may be modified in various other forms, and the scope of the present invention should not be construed as being limited to the following examples. The embodiments of the present invention are provided to more completely explain the present invention to those of ordinary skill in the art.

<실시예 1> 난황유 및 배초향 줄기세포를 포함하는 조성물의 제조<Example 1> Preparation of a composition comprising egg yolk oil and baechohyang stem cells

계란을 100℃ 끓는 물에서 15분간 삶은 후, 계란의 껍질과 난백은 제거하고 노른자를 준비하였다. 스텐레스 재질 용기에 노른자 1kg을 넣고 으깬 후, 100~300℃의 온도로 5~10분 가열하면 노른자가 부글거리며 검게 타고 재가 되면서 마지막으로 유상으로 된 난황유가 형성되었다. 재 등의 탄화된 성분을 제거하고 유상의 난황유를 별도 용기에 채취하였다. 1kg의 계란 노른자 기준으로 50g의 난황유를 얻었다.Eggs were boiled in boiling water at 100° C. for 15 minutes, the shell and egg white were removed, and the yolk was prepared. After putting 1kg of yolk in a stainless steel container and mashing it, heat it at a temperature of 100~300℃ for 5~10 minutes. Carbonized components such as ash were removed, and oily egg yolk oil was collected in a separate container. 50 g of egg yolk oil was obtained based on 1 kg of egg yolk.

본 실험에서 배초향 줄기세포는 시판하는 캘러스 파우더를 사용하였다. In this experiment, baechohyang stem cells were used commercially available callus powder.

상기 난황유 및 배초향 줄기세포를 2:1의 중량비로 포함하는 조성물을 제조하였다.A composition comprising the egg yolk oil and baechohyang stem cells in a weight ratio of 2: 1 was prepared.

<시험예 1> 항산화 효과 측정<Test Example 1> Measurement of antioxidant effect

(1) DPPH (1-1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl) 라디칼 전자공여능 측정(1) DPPH (1-1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl) radical electron donating ability measurement

상기 실시예 1에서 수득된 조성물을 농도별 용액 100㎕에 DPPH 용액 (5x10-4 M) 100㎕를 넣고 25℃ 인큐베이터에서 30분간 반응시킨 후 마이클로플레이트 계수기를 이용하여 540nm에서 흡광도를 측정하였으며 실험 대조구로는 L-아스코브산과 부틸화 하이드록시아니솔을 사용하였다. 전자공여능은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다.100 μl of DPPH solution (5x10-4 M) was added to 100 μl of the composition obtained in Example 1 for each concentration and reacted in an incubator at 25° C. for 30 minutes, and then absorbance was measured at 540 nm using a microplate counter. As controls, L-ascorbic acid and butylated hydroxyanisole were used. The electron donating ability was expressed as the absorbance decrease rate of the sample solution and the non-additive group.

그 결과, 본 발명에 따른 조성물은 난황유 및 배초향 줄기세포 500㎍/㎖ 농도에서 85.2%의 항산화 효과를 나타내었다.As a result, the composition according to the present invention exhibited an antioxidant effect of 85.2% at a concentration of 500 μg/ml of egg yolk oil and baechohyang stem cells.

(2) ABTS 양이온 라디칼 소거능 (cation radical scavenging activity) 측정(2) Measurement of ABTS cation radical scavenging activity

7mM 2,2-azino-bis(3-ethyl-benthiazoline-6-sulfonic acid)와 2.4mM 과황산칼륨을 혼합하여 실온에서 24시간 동안 방치하여 ABTS+ㅇ를 형성시킨 후 에탄올로 희석하여 ABTS+ㅇ 100㎕에 시료 100㎕를 가하여 1분동안 방치한 후 732nm에서 흡광도를 측정하였으며, 실험 대조구로는 L-아스코브산을 사용하였다. 라디칼 소거능은 1/2로 환원시키는데 필요한 시료의 농도 값으로 나타내었다.7mM 2,2-azino-bis(3-ethyl-benthiazoline-6-sulfonic acid) and 2.4mM potassium persulfate were mixed and left at room temperature for 24 hours to form ABTS+ㅇ, diluted with ethanol and 100 μl of ABTS+ㅇ 100 μl of the sample was added to the flask, left for 1 minute, and absorbance was measured at 732 nm, and L-ascorbic acid was used as an experimental control. The radical scavenging ability was expressed as the concentration value of the sample required for reduction by 1/2.

ABTS+ㅇ 측정 결과, 본 발명에 따른 조성물은 난황유 및 배초향 줄기세포 50㎍/㎖ 농도에서 81.2%의 항산화 효과를 나타내었다.As a result of ABTS + o measurement, the composition according to the present invention exhibited an antioxidant effect of 81.2% at a concentration of 50 μg/ml of egg yolk oil and baechohyang stem cells.

<시험예 2> 미백효과 측정<Test Example 2> Measurement of whitening effect

티로시나제 (Tyrosinase) 저해활성 측정은 Yagi 등의 방법에 따라 측정하였다. 반응구는 1/15M 인산나트륨 완충액(pH 6.8) 0.5mL에 10mM L-DOPA을 녹인 기질액 0.2mL 및 시료용액 0.1mL의 혼합액에 mushroom tyrosinase(110U/mL) 0.2mL 첨가하여 25℃에서 2분간 반응시켜 반응액 중에 생성된 DOPA chrome을 475nm에서 측정하였다. 티로시나제 저해활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다.Tyrosinase (Tyrosinase) inhibitory activity was measured according to the method of Yagi et al. In the reaction section, 0.2 mL of a substrate solution in which 10 mM L-DOPA was dissolved in 0.5 mL of 1/15 M sodium phosphate buffer (pH 6.8) and 0.2 mL of mushroom tyrosinase (110 U/mL) were added to a mixture of 0.1 mL of sample solution and reacted at 25 ° C for 2 minutes. The DOPA chrome generated in the reaction solution was measured at 475 nm. The tyrosinase inhibitory activity was expressed as the absorbance reduction rate of the group with and without the sample solution.

티로시나제 저해활성 측정 결과, 난황유 및 배초향 줄기세포는 5,000㎍/㎖ 농도에서 알부틴 대비 76%의 티로시나제 저해 효과를 나타내었다.As a result of measuring tyrosinase inhibitory activity, egg yolk oil and baechohyang stem cells showed 76% tyrosinase inhibitory effect compared to arbutin at a concentration of 5,000 μg/ml.

<시험예 3> 항염증 활성 측정<Test Example 3> Measurement of anti-inflammatory activity

산화질소(NO) 측정은 세포 상층액에서 산화질소(NO)의 양을 아질산염(nitrite)과 질산염(nitrate)으로서 측정하였다. 아질산염에 대한 질산염으로 환원된 후의 안전한 형태인 griess 시약을 사용하였으며, 6 well plate에 2x106 개의 cell을 confluence가 80%일 때, PBS로 2번 세척한 후에 무혈청 배지를 사용하여 12시간 이상 배양시킨 다음, 지질다당류(LPS) 10 ㎍/㎖을 대조군을 뺀 모든 well에 다 넣어서 자극시켰다. 2시간 후에 시료를 농도별로 처리하였다. NO 생성량은 24시간 후에 상층액를 모아 griess 시약으로 10분간 반응시킨 후에 540 nm에서 흡광도로 측정하였다. LPS만 첨가한 군에서 생성된 NO의 양을 100%로 하여 시료가 첨가된 경우에 측정된 흡광도를 환산하였다. 양성 대조군으로 덱사메타존(Dexamethasone, Dexa)를 사용하였다.Nitric oxide (NO) was measured as nitrite and nitrate in the amount of nitric oxide (NO) in the cell supernatant. Griess reagent, which is a safe form after reduction with nitrate for nitrite, was used, and 2x106 cells in a 6 well plate were washed twice with PBS when the confluence was 80% and then cultured for more than 12 hours using a serum-free medium. Next, 10 μg/ml of lipopolysaccharide (LPS) was added to all wells except for the control group and stimulated. After 2 hours, samples were treated by concentration. The amount of NO production was measured by absorbance at 540 nm after collecting the supernatant after 24 hours and reacting with griess reagent for 10 minutes. The absorbance measured when the sample was added was converted by setting the amount of NO generated in the group to which only LPS was added as 100%. Dexamethasone (Dexa) was used as a positive control.

산화질소(NO) 저해 활성 측정 결과, 난황유 및 배초향 줄기세포는 50㎍/㎖의 농도에서 55%의 우수한 저해능을 보였다.As a result of measuring nitric oxide (NO) inhibitory activity, egg yolk oil and baechohyang stem cells showed an excellent inhibitory ability of 55% at a concentration of 50 μg/ml.

<시험예 4> 주름개선 효과 측정<Test Example 4> Wrinkle improvement effect measurement

(1) 엘라스타제(Elastase) 저해활성 측정(1) Elastase inhibitory activity measurement

엘라스타제 저해활성 측정은 다음과 같이 측정하였다. 난황유 및 배초향 줄기세포를 일정 농도가 되도록 조제하여 0.5 ml씩 시험관에 취하고, 50 mM tris-HCl 완충액 (pH 8.6)에 녹인 porcine pancreas elastase (2.5 Unit/ml)용액 0.5 ml을 가한 후 50 mM tris-HCl 완충액(pH 8.6)에 녹인 기질 N-숙시닐-(L-Ala)3-p-니트로아닐라이드 (0.5mg/ml)을 첨가하여 20분간 반응시켜 기질로부터 생성되는 p-니트로아닐라이드의 생성량을 405 nm에서 측정하였다. 엘라스타제 저해 활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.Elastase inhibitory activity was measured as follows. Prepare egg yolk oil and baecho-hyang stem cells to a certain concentration, take 0.5 ml each in a test tube, add 0.5 ml of porcine pancreas elastase (2.5 Unit/ml) solution dissolved in 50 mM tris-HCl buffer (pH 8.6), and then add 50 mM tris- Substrate N-succinyl-(L-Ala)3-p-nitroanilide (0.5 mg/ml) dissolved in HCl buffer (pH 8.6) was added and reacted for 20 minutes to generate p-nitroanilide from the substrate was measured at 405 nm. The elastase inhibitory activity was expressed as a decrease in absorbance in the group with and without the sample solution.

엘라스타제는 단백질인 엘라스틴을 분해하는 효소로 다른 중요한 기질 단백질인 콜라겐을 분해할 수 있는 비특이적 가수분해 효소이다. 피부의 진피조직 속에는 콜라겐과 피부의 탄력성에 관련된 엘라스틴이 그물망 구조를 형성하고 있는데, 엘라스틴이 엘라스타제에 의해 분해되어 피부의 그물망 구조 결합이 끊어짐으로, 엘라스타제가 주름생성의 주원인 효소로 알려져 있다. 그리고 체내의 엘라스틴을 분해하는 백혈구 과립 효소 중의 하나로 이상조직에서는 효소의 활성이 극히 높아 조직 파괴에 직접적인 원인이 되어 피부의 주름 및 탄력성 소실을 유발한다.Elastase is an enzyme that degrades elastin, a protein, and is a non-specific hydrolase that can degrade collagen, another important matrix protein. In the dermal tissue of the skin, collagen and elastin related to the elasticity of the skin form a network structure, and elastin is decomposed by elastase and the bond of the skin's network structure is broken. . In addition, as one of the leukocyte granulation enzymes that decompose elastin in the body, the activity of the enzyme is extremely high in abnormal tissues, which directly causes tissue destruction, causing wrinkles and loss of elasticity of the skin.

비교를 위해 양성 대조군으로 우르솔산(Ursolic Acid, UA)을 사용하였다. 여기에서 보듯이, 난황유 및 배초향 줄기세포의 농도가 증가할수록 elastase 저해 활성이 증가하였으나, 대조군 Ursolic acid와 비교하였을 때 미비한 활성을 나타내었다.For comparison, ursolic acid (UA) was used as a positive control. As shown here, the elastase inhibitory activity increased as the concentrations of egg yolk oil and baechohyang stem cells increased, but showed insignificant activity compared to the control Ursolic acid.

(2) 콜라게나제(Collagenase) 저해활성 측정(2) Collagenase inhibitory activity measurement

콜라게나제 저해활성 측정은 다음과 같이 측정하였다. 즉, 반응구는 0.1 M tris-HCl 완충액 (pH 7.5)에 4 mM CaCl2를 첨가하여, 4-페닐아조벤질옥시카보닐-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg (0.3 mg/ml)를 녹인 기질액 0.25 ml 및 시료용액 0.1 ml의 혼합액에 콜라게나제 (0.2 mg/ml) 0.15ml를 첨가하여 실온에서 20분간 정치한 후 6% 시트르산 0.5 ml을 넣어 반응을 정지시킨 후, 에틸 아세테이트 1.5 ml을 첨가하여 320 nm에서 흡광도를 측정하였다. 콜라게나제 저해활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다.Collagenase inhibitory activity was measured as follows. That is, the reaction group was prepared by adding 4 mM CaCl 2 to 0.1 M tris-HCl buffer (pH 7.5), 4-phenylazobenzyloxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg (0.3 mg/ml) To a mixture of 0.25 ml of the dissolved substrate solution and 0.1 ml of the sample solution, 0.15 ml of collagenase (0.2 mg/ml) was added, left at room temperature for 20 minutes, and then 0.5 ml of 6% citric acid was added to stop the reaction, followed by ethyl acetate 1.5 ml was added to measure the absorbance at 320 nm. Collagenase inhibitory activity was expressed as a decrease in absorbance of the samples with and without the addition of the sample solution.

콜라겐은 대부분 피부의 진피층에 존재하며, 피부 전체 건조중량의 약 70~80%를 차지하고 있어, 세포외 기질의 대부분을 차지하면서 피부를 지지하는 역할을 한다. 그러나 자연 노화에 따른 세포 활성의 감소와 같은 내적 요인에 의해 콜라겐의 생합성이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산소종의 증가와 같은 외적 요인에 의해 분해가 가속화되어 피부 기질이 파괴되면서 주름이 생성된다. 이러한 콜라겐은 연령 및 자외선 조사에 의한 광노화에 의해 감소하며, 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 연관이 있다고 알려져 있어 난황유 및 배초향 줄기세포의 콜라게나제 저해 활성을 측정하였다. 비교를 위해 양성 대조군으로 우르솔산(Ursolic Acid, UA)을 사용하였다.Collagen is mostly present in the dermal layer of the skin and accounts for about 70-80% of the total dry weight of the skin, and plays a role in supporting the skin while occupying most of the extracellular matrix. However, collagen biosynthesis is reduced by internal factors such as a decrease in cellular activity due to natural aging, and degradation is accelerated by external factors such as an increase in stress caused by various harmful environments and an increase in reactive oxygen species by sunlight. As the skin matrix is destroyed, wrinkles are formed. Collagen is reduced by age and photoaging by UV irradiation, which is known to be closely related to skin wrinkle formation, and thus the collagenase inhibitory activity of egg yolk oil and pear extract was measured. For comparison, ursolic acid (UA) was used as a positive control.

비교를 위해 양성 대조군으로 우르솔산(Ursolic Acid, UA)을 사용하였다. 난황유 및 배초향 줄기세포의 콜라게나제 저해활성을 측정한 결과 500ug/ml의 농도에서 50% 이상의 높은 콜라게나제 저해활성능을 나타내었다.For comparison, ursolic acid (UA) was used as a positive control. As a result of measuring the collagenase inhibitory activity of egg yolk oil and baecho-hyang stem cells, it showed high collagenase inhibitory activity of 50% or more at a concentration of 500 ug/ml.

<제제예 1> 화장료 조성물의 제조<Formulation Example 1> Preparation of cosmetic composition

(1) 하기 성분의 크림을 제조하였다.(1) A cream of the following ingredients was prepared.

성분명Ingredient name 함량(%)content(%) 정제수Purified water 59.4559.45 글리세린glycerin 1414 부틸렌글라이콜Butylene Glycol 44 솔비탄스테아레이트Sorbitan Stearate 33 세틸알코올cetyl alcohol 22 하이드로제네이티드폴리(C6-14올레핀)Hydrogenated Poly (C6-14 Olefin) 22 피이지-32PEG-32 22 세테아릴에틸헥사노에이트Cetearylethylhexanoate 22 나이아신아마이드Niacinamide 22 1,2-헥산다이올1,2-Hexanediol 22 사이클로펜타실록세인cyclopentasiloxane 22 피토스테릴이소스테아릴다이머디리놀리에이트Phytosteryl isostearyl dimer dilinoleate 1One 마카다미아씨오일Macadamia Seed Oil 1One 글리세릴스테아레이트에스이Glyceryl Stearate SE 1One 폴리글리세릴-6다이스테아레이트Polyglyceryl-6 distearate 1One 시어버터shea butter 0.50.5 트로메타민tromethamine 0.350.35 카보머Carbomer 0.30.3 향료Spices 0.20.2 난황류egg yolk 0.10.1 배초향 줄기세포baecho-hyang stem cells 0.10.1

(2) 하기 성분의 토너를 제조하였다.(2) A toner of the following components was prepared.

성분명Ingredient name 함량(%)content(%) 정제수Purified water 85.4755085.47550 부틸렌글라이콜Butylene Glycol 6.000006.00000 프로판디올propanediol 3.000003.00000 펜틸렌글라이콜pentylene glycol 3.000003.00000 1,2-헥산다이올1,2-Hexanediol 2.000002.00000 에틸헥실글리세린Ethylhexylglycerin 0.050000.05000 폴리글리세릴-10라우레이트Polyglyceryl-10 Laurate 0.187500.18750 폴리글리세릴-4라우레이트Polyglyceryl-4 Laurate 0.137500.13750 카프릴릴/카프릴글루코사이드Caprylyl/Caprylyl Glucoside 0.087500.08750 향료Spices 0.060000.06000 난황유egg yolk oil 0.001000.00100 배초향 줄기세포baecho-hyang stem cells 0.001000.00100

(3) 하기 성분의 세럼을 제조하였다.(3) A serum of the following components was prepared.

성분명Ingredient name 함량(%)content(%) 정제수Purified water 81.71879581.718795 프로판다이올propanediol 1010 글리세린glycerin 55 1,2-헥산다이올1,2-Hexanediol 1.21.2 글리세레스-26Glyceres-26 0.70.7 암모늄아크릴로일다이메틸타우레이트/브이피코폴리머Ammonium acryloyldimethyl taurate/vpicopolymer 0.20.2 판테놀panthenol 0.10.1 부틸렌글라이콜Butylene Glycol 0.09750.0975 잔탄검xanthan gum 0.080.08 에틸헥실글리세린Ethylhexylglycerin 0.60.6 폴리글리세릴-10라우레이트Polyglyceryl-10 Laurate 0.03750.0375 폴리글리세릴-4라우레이트Polyglyceryl-4 Laurate 0.02750.0275 카프릴릴/카프릴글루코사이드Caprylyl/Caprylyl Glucoside 0.01750.0175 토코페롤tocopherol 0.000050.00005 향료Spices 0.22 0.22 난황유egg yolk oil 0.0010.001 배초향 줄기세포baecho-hyang stem cells 0.0010.001

상기 조성비는 적합한 성분을 바람직한 제제예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 성분 또는 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.Although the composition ratio is mixed with suitable ingredients as a preferred formulation example, the ingredients or mixing ratios may be arbitrarily modified according to regional and ethnic preferences such as demanding class, demanding country, and use.

상기한 바는 본 발명의 바람직한 실시예일 뿐, 본 발명에 한정되지 않고, 본 기술분야의 통상의 지식을 가진 자라면 본 발명에서 다양한 변경과 변화가 가능할 수 있다. 본 발명의 정신과 원칙내에서 이루어진 어떠한 수정, 균등대체, 개량 등은 모두 본 발명의 보호범위내에 포함된다.The above bar is only a preferred embodiment of the present invention, it is not limited to the present invention, and various modifications and changes may be possible in the present invention by those of ordinary skill in the art. Any modifications, equivalent substitutions, improvements, etc. made within the spirit and principle of the present invention are all included within the protection scope of the present invention.

Claims (6)

난황유 및 배초향 줄기세포를 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.A cosmetic composition comprising egg yolk oil and baecho-hyang stem cells as active ingredients. 제1항에 있어서,
상기 난황유 및 배초향 줄기세포가 1:1 내지 2:1의 중량비로 혼합된 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
According to claim 1,
The cosmetic composition, characterized in that the egg yolk oil and baecho-hyang stem cells are mixed in a weight ratio of 1:1 to 2:1.
제1항에 있어서,
상기 배초향 줄기세포로 캘러스 파우더가 사용되고,
상기 난황유 및 배초향 줄기세포는 조성물의 총 중량을 기준으로 0.005 내지 50 중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
According to claim 1,
Callus powder is used as the baechohyang stem cells,
The cosmetic composition, characterized in that the egg yolk oil and baecho-hyang stem cells are included in an amount of 0.005 to 50% by weight based on the total weight of the composition.
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