KR102293562B1 - 흰물싸리꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 흰물싸리꽃 에탄올 추출물은 염증억제 효과가 우수하여 다양한 염증성 질환의 개선, 예방, 또는 치료제로서 폭넓게 사용될 수 있다.

Description

흰물싸리꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물{Pharmaceutical composition comprising extract of Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz. for preventing or treating inflammatory disease as active ingredient}

본 발명은 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

염증(inflammation)이란 외부 감염원(박테리아, 곰팡이, 바이러스, 다양한 종류의 알레르기 유발물질)의 침입에 의하여 형성되는 농양의 병리적 상태를 뜻한다. 구체적으로, 외부 세균이 특정 조직에 침입하여 증식을 하게 되면 생체의 백혈구가 이를 인지하여 증식된 외부 세균을 활발히 공격하게 되는데, 이 과정 중 발생되는 백혈구의 사해가 균에 의하여 침입받은 조직에 축적됨과 동시에 백혈구에 의하여 사멸된 침입균의 세포 파괴물이 침입 받은 조직 내로 융해되어 농양이 형성된다. 염증에 의한 농양의 치료는 소염작용을 통하여 촉진될 수 있는데, 소염작용이란 항균제를 이용하여 침입균의 증식을 억제하거나 농양중에 축적된 이물질들을 탐식하는 대식세포(macrophage)를 활성화하여 상기 이물질들을 소화 및 배설하는 대식세포의 기능을 항진시키는 등의 염증치료 촉진작용이다.

일반적으로 염증반응은 생체의 세포나 조직에 기질적 변화를 가져오는 침습으로 인한 손상을 수복 및 재생하기 위한 생체방어 반응과정이고, 이 반응과정에는 국소의 혈관, 체액의 각종 조직세포 및 면역세포 등이 작용한다. 정상적으로 외부 침입균에 의하여 유도되는 염증반응은 생체를 보호하기 위한 방어 시스템인 반면, 비정상적으로 과도한 염증반응이 유도되면 다양한 질환들이 나타나게 되는데, 이러한 질환들을 염증 질환이라 칭한다. 상기 염증 질환은 외부자극에 의하여 활성화된 표적세포로부터 분비되는 다양한 염증 매개물질이 염증을 증폭 및 지속시켜 인체의 생명을 위협하는 질환으로서 상기 염증성 질환은 급성 기관지염, 만성 기관지염, 급성 세기관지염, 만성 세기관지염, 패혈증, 패혈성 쇼크, 급성 호흡곤란 증후군, 다발성 장기부전 및 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease)등을 포함한다.

많은 염증관련 질환의 발병에는 대식세포의 활성화와 이에 따른 염증관련 인자들의 과도한 생성이 연관되어 있는데, 대표적인 염증관련 인자들로는 IL-1β, TNF-α 등이 있다. 또한, 염증반응의 유도물질들 중에서 LPS(lipopolysaccharide)는 그람음성세균의 세포 표면을 구성하는 물질로서 백혈구와 같은 면역세포와 상호 작용을 하며, 염증관련 사이토카인의 조절에 관여한다.

한편, 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.)이 위염을 포함하는 염증성 질환의 치료에 효과적인지는 알려진 바 없다.

한국등록특허 10-1705460(2017.02.03)

이에 본 발명자들은 염증 억제 효과가 있는 새로운 천연물 소재를 개발하고자 연구를 수행한 결과, 본 발명의 흰물싸리꽃 추출물이 염증반응을 억제하고, 독성이 없으며, 위염과 같은 염증성 질환의 치료효과가 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

이에, 본 발명은 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

그러나, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 일구현예로서, 상기 흰물싸리꽃 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6개의 알코올(alcohol), 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane), 시클로헥산(cyclohexane), 석유에테르(petroleum ether), 아임계 유체, 및 초임계 유체로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 용매로 추출될 수 있다.

본 발명의 다른 구현예로서, 상기 흰물싸리꽃 추출물은 에탄올 추출물일 수 있다.

본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 조성물은 일산화 질소(nitric oxide, NO) 생성을 억제할 수 있다.

본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 염증성 질환은 위염, 위궤양, 십이지장궤양, 염증성 피부질환, 알레르기성 질환, 크론씨 질환(Crohn's desease), 과민성 대장 증후군, 궤양성 대장염, 염증성 장 질환, 복막염, 골수염, 봉소염, 뇌막염, 뇌염, 췌장염, 외상 유발 쇼크, 기관지 천식, 낭포성 섬유증, 뇌졸중, 급성 기관지염, 만성 기관지염, 급성 세기관지염, 만성 세기관지염, 골관절염, 통풍, 척추관절병증, 강직성 척추염, 라이터 증후군, 건선성 관절병증, 장질환 척추염, 연소자성 관절병증, 연소자성 강직성 척추염, 반응성 관절병증, 감염성 관절염, 후-감염성 관절염, 임균성 관절염, 결핵성 관절염, 바이러스성 관절염, 진균성 관절염, 매독성 관절염, 라임병, '혈관염 증후군'과 관련된 관절염, 결절성 다발동맥염, 과민성 혈관염, 루게릭 육아종증, 류마티스성 다발성근육통, 관절 세포 동맥염, 칼슘 결정 침착 관절병증, 가성 통풍, 비-관절 류마티즘, 점액낭염, 건초염, 상과염(테니스 엘보), 신경병증성 관절 질환(charco and joint), 출혈성 관절증(hemarthrosic), 헤노흐-쉔라인 자반병, 비후성 골관절병증, 다중심성 세망조직구종, 수르코일로시스(surcoilosis), 혈색소증, 겸상 적혈구증 및 기타 혈색소병증, 고지단백혈증, 저감마글로불린혈증, 가족성 지중해열, 베하트 병, 전신성 홍반성 루푸스, 재귀열, 건선, 다발성 경화증, 패혈증, 패혈성 쇼크, 다장기 기능장애 증후군, 급성 호흡곤란 증후군, 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease), 급성 폐손상(acute lung injury) 및 기관지 폐 형성장애(broncho-pulmonary dysplasia)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.

본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 염증성 질환은 위염 또는 위궤양일 수 있다.

본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 조성물은 NF-κB(nuclear factor kappa B) 활성을 억제 할 수 있다.

또한, 본 발명은 흰물싸리꽃 추출물(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.)을 유효성분으로 포함하는 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 염증성 질환의 치료방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 흰물싸리꽃 추출물(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.)을 유효성분으로 포함하는 조성물의 염증성 질환 예방, 개선 또는 치료 용도를 제공한다.

또한, 본 발명은 흰물싸리꽃 추출물(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.)의 염증성 질환 예방, 개선 또는 치료에 이용되는 약제를 생산하기 위한 용도를 제공한다.

본 발명에 따른 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물은 염증반응으로 생성되는 사이토카인과 그에 따른 반응물의 생성을 효과적으로 감소시킬 뿐만 아니라, 면역활성에 관여하는 신호전달 단백질의 발현을 억제시키는 효과가 있다. 또한, 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물의 염증억제 효과는 위염 동물 모델에서도 우수하며, 천연물로서 세포독성이 없기 때문에, 다양한 염증성 질환의 개선, 예방, 또는 치료제로서 폭넓게 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

도 1a는 대식세포주 RAW264.7 세포에서 Potentilla 속에 속하는 4종(Potentilla glabra, Potentilla pardoxa, Potentilla centigrana, Potentilla ancistrifolia)의 추출물의 세포 독성을 비교한 결과를 나타낸 것이다.
도 1b는 대식세포주 RAW264.7 세포에서 Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz. 에탄올 추출물(이하 Pg-EE)의 세포 독성을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 1c는 HEK293T 세포에서 Pg-EE의 세포 독성을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 2a는 대식세포주 RAW264.7 세포에서 Potentilla 속에 속하는 4종(Potentilla glabra, Potentilla pardoxa, Potentilla centigrana, Potentilla ancistrifolia)의 추출물의 염증반응 유도 자극제인 LPS(Lipopolysaccharide)에 의한 NO(Nitric oxide) 생성 억제 효과의 비교 결과를 나타낸 것이다.
도 2b는 대식세포주 RAW264.7 세포에서 Pg-EE의 LPS에 의한 NO 생성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도3은 대식세포주 RAW264.7 세포에서 Pg-EE의 LPS에 의한 염증관련 사이토카인(cytokine) iNOS, COX-2, TNF-α, IL-1β및 IL-6의 mRNA 발현 감소 효과를 나타낸 것이다.
도 4는 대식세포주 RAW264.7 세포에서 Pg-EE의 LPS에 의한 세포 내 NF-κB 신호전달 단백질 IκBα, p50, p65의 인산화 형태 감소 효과를 나타낸 것이다.
도 5a는 초기시간에서 대식세포주 RAW264.7 세포에서 Pg-EE의 LPS에 의한 세포 내 NF-κB 신호전달 단백질 Src, p85, AKT의 인산화 형태 감소 효과를 나타낸 것이다.
도 6은 Src 과발현 조건에서 Pg-EE에 의한 Src 인산화 형태 감소 효과를 나타낸 것이다.
도 7a는 급성위염 동물모델에서 Pg-EE에 의한 위 염증 감소 효과를 위 조직으로 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 7b는 도 7a의 위 조직에서 위염의 유발 정도를 정량화한 결과를 나타낸 것이다.
도 8은 염증 신호 전달 체계에서 Pg-EE가 염증 억제 효과를 나타내는 기작을 나타낸 것이다.

본 발명은 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 흰물싸리(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.))는 백두산 등지의 고산지대에 서식하는 Potentilla 속에 속하는 식물이다. 흰물싸리는 낙엽활엽관목 식물로, 백두산 등지의 고산지대에서 자라며, 성질이 강건하여 재배가 용이한 것으로 알려져 있다. 흰물싸리의 꽃은 6-8월에 백색으로 피며 지름 3cm정도로서 새가지 끝에 달리거나 2-3개가 액생하고 꽃받침열편은 난상 삼각형으로서 겉에 견모가 있으며 황록색이고 부악편은 선형 또는 피침형이며 첨두로서 연모가 있는 것으로 알려져 있다(국가생물종 지식정보시스템).

본 발명의 흰물싸리는 바람직하게는 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 흰물싸리는 주로 중국에서 채집하므로, 중국에서 구입하여 사용 할 수 있어 수급에도 용이한 장점이 있다.

본 발명의 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.)은 그 원형을 훼손하지 않고 그대로 사용하거나, 당업자가 의도하는 공정 속도 및 공정(제조) 효율을 고려하여 전처리 과정을 수행한 후 사용할 수 있으며, 상기 전처리 과정으로는 예를 들어 통상적인 선별, 수세, 절단, 분말화, 건조 등의 단계를 거칠 수 있다.

본 발명에서 "추출물"은, 상기 흰물싸리꽃의 추출처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.

본 발명의 상기 흰물싸리꽃 추출물에 있어서, 상기 흰물싸리꽃을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.

일 예로, 본 발명의 흰물싸리꽃 추출물은 95% (v/v) 에탄올로 환류추출법을 통해 40-45℃에서 추출 할 수 있으며, 생성물을 여과하고 40-45℃에서 회전식 증발기로 농축시킨 뒤, 45℃의 증기열 건조를 통해 수득 할 수 있다.

본 발명에서 흰물싸리꽃을 추출하는 데에 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 천연물로부터 추출물을 추출하는 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도, 압력의 조건 하에서 통상적인 용매를 사용하여 추출할 수 있다. 예컨대, 본 발명에서 흰물싸리꽃 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6개의 유기용매 및 아임계 또는 초임계 유체로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 용매로 추출될 수 있다. 상기 탄소수 1 내지 6개의 유기용매는 탄소수 1 내지 6개의 알코올(alcohol), 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane), 시클로헥산(cyclohexane) 및 석유에테르(petroleum ether)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 흰물싸리꽃 추출물은 바람직하게는 에탄올로 추출될 수 있다.

상기 제조된 추출물은 이후 여과하거나 농축 또는 건조과정을 수행하여 용매를 제거할 수 있으며, 여과, 농축 및 건조를 모두 수행할 수 있다. 예컨대, 여과는 여과지를 이용하거나 감압여과기를 이용할 수 있으며, 농축은 감압 농축기, 건조는 동결건조법 등을 수행할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 일 실험예에서는 Potentilla 속 추출물 중 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 에탄올 추출물(Pg-EE)의 세포독성이 가장 낮은 것을 확인하였다(실험예 1 참조).

본 발명의 다른 실험예에서는 염증반응 유도 자극제인 LPS(Lipopolysaccharide)로 유도된 대식세포주에서 Potentilla 속 추출물 중 Pg-EE의 세포독성물질 NO(Nitric oxide)의 생성 억제효과가 가장 높은 것을 확인하였다(실험예 2 참조).

본 발명의 또 다른 실험예에서는 LPS로 유도된 대식세포주에서 Pg-EE처리에 의한 염증성 사이토카인 iNOS, COX-2, TNF-α, IL-6 및 IL-1β의 발현을 전사수준에서 억제하는 것을 확인하였다(실험예 3 참조).

본 발명의 또 다른 실험예에서는 LPS로 유도된 대식세포주에서 Pg-EE 처리에 의한 염증과 관련된 NF-κB pathway 관련 신호전달 단백질 IκBα, Src, p85, AKT 및 NF-κB subunit인 p65와 p50의 인산화를 감소 시킬 뿐만 아니라, 결정적으로 NF-κB 신호전달 단백질 중 상위인자로 알려진 Src의 단백질의 활성을 억제시켰으며 Src을 과발현 시킨 조건에서 그 억제효과를 뚜렷하게 확인하였다(실험예 4 및 5 참조).

본 발명의 또 다른 실험예에서는 급성 위염 동물 모델에서, Pg-EE가 우수한 위염 예방 및 치료 효과를 나타냄을 확인하였다(실험예 6 참조).

따라서, 본 발명에 있어서, 상기 조성물은 일산화 질소(nitric oxide, NO) 생성을 억제하여 염증성 질환을 예방 또는 치료할 수 있다.

또한, 본 발명에 있어서, 상기 조성물은 NF-κB(nuclear factor kappa B) 활성을 억제하는 기전을 통하여 염증성 질환을 예방 또는 치료할 수 있다.

이에, 흰물싸리꽃 추출물은 다양한 염증성 질환의 예방, 개선 또는 치료에 적용될 수 있을 것으로 기대된다. 상기 염증성 질환은 위염, 위궤양, 십이지장궤양, 염증성 피부질환, 알레르기성 질환, 크론씨 질환(Crohn's desease), 과민성 대장 증후군, 궤양성 대장염, 염증성 장 질환, 복막염, 골수염, 봉소염, 뇌막염, 뇌염, 췌장염, 외상 유발 쇼크, 기관지 천식, 낭포성 섬유증, 뇌졸중, 급성 기관지염, 만성 기관지염, 급성 세기관지염, 만성 세기관지염, 골관절염, 통풍, 척추관절병증, 강직성 척추염, 라이터 증후군, 건선성 관절병증, 장질환 척추염, 연소자성 관절병증, 연소자성 강직성 척추염, 반응성 관절병증, 감염성 관절염, 후-감염성 관절염, 임균성 관절염, 결핵성 관절염, 바이러스성 관절염, 진균성 관절염, 매독성 관절염, 라임병, '혈관염 증후군'과 관련된 관절염, 결절성 다발동맥염, 과민성 혈관염, 루게릭 육아종증, 류마티스성 다발성근육통, 관절 세포 동맥염, 칼슘 결정 침착 관절병증, 가성 통풍, 비-관절 류마티즘, 점액낭염, 건초염, 상과염(테니스 엘보), 신경병증성 관절 질환(charco and joint), 출혈성 관절증(hemarthrosic), 헤노흐-쉔라인 자반병, 비후성 골관절병증, 다중심성 세망조직구종, 수르코일로시스(surcoilosis), 혈색소증, 겸상 적혈구증 및 기타 혈색소병증, 고지단백혈증, 저감마글로불린혈증, 가족성 지중해열, 베하트 병, 전신성 홍반성 루푸스, 재귀열, 건선, 다발성 경화증, 패혈증, 패혈성 쇼크, 다장기 기능장애 증후군, 급성 호흡곤란 증후군, 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease), 급성 폐손상(acute lung injury) 및 기관지 폐 형성장애(broncho-pulmonary dysplasia)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 명세서에서, 상기 염증성 질환은 위염, 위궤양, 위궤양 장염, 십이지장궤양, 위암, 장폐색증, 급성 위장관 출혈, 크론씨병, 궤양성 대장염 및 기능성 소화불량으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 포함하는 위장질환일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에서 "예방"이란 목적하는 질환의 발병을 억제하거나 지연시키는 모든 행위를 의미하고, "치료"란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 목적하는 질환과 그에 따른 대사 이상 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미하며, “개선"이란 본 발명에 따른 조성물의 투여에 의해 목적하는 질환과 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 감소시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 상기 부형제는 예를 들어, 희석제, 결합제, 붕해제, 활택제, 흡착제, 보습제, 필름-코팅 물질, 및 제어방출첨가제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 서방형 과립제, 장용과립제, 액제, 점안제, 엘실릭제, 유제, 현탁액제, 주정제, 트로키제, 방향수제, 리모나아데제, 정제, 서방형정제, 장용정제, 설하정, 경질캅셀제, 연질캅셀제, 서방캅셀제, 장용캅셀제, 환제, 틴크제, 연조엑스제, 건조엑스제, 유동엑스제, 주사제, 캡슐제, 관류액, 경고제, 로션제, 파스타제, 분무제, 흡입제, 패취제, 멸균주사용액, 또는에어로졸 등의 외용제 등의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 상기 외용제는 크림, 젤, 패치, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제 등의 제형을 가질 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.

제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.

본 발명에 따른 정제, 산제, 과립제, 캡슐제, 환제, 트로키제의 첨가제로 옥수수전분, 감자전분, 밀전분, 유당, 백당, 포도당, 과당, 디-만니톨, 침강탄산칼슘, 합성규산알루미늄, 인산일수소칼슘, 황산칼슘, 염화나트륨, 탄산수소나트륨, 정제 라놀린, 미결정셀룰로오스, 덱스트린, 알긴산나트륨, 메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 카올린, 요소, 콜로이드성실리카겔, 히드록시프로필스타치, 히드록시프로필메칠셀룰로오스, 1928, 2208, 2906, 2910, 프로필렌글리콜, 카제인, 젖산칼슘, 프리모젤 등 부형제; 젤라틴, 아라비아고무, 에탄올, 한천가루, 초산프탈산셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스칼슘, 포도당, 정제수, 카제인나트륨, 글리세린, 스테아린산, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 메칠셀룰로오스나트륨, 메칠셀룰로오스, 미결정셀룰로오스, 덱스트린, 히드록시셀룰로오스, 히드록시프로필스타치, 히드록시메칠셀룰로오스, 정제쉘락, 전분호, 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필메칠셀룰로오스, 폴리비닐알코올, 폴리비닐피롤리돈 등의 결합제가 사용될 수 있으며, 히드록시프로필메칠셀룰로오스, 옥수수전분, 한천가루, 메칠셀룰로오스, 벤토나이트, 히드록시프로필스타치, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 알긴산나트륨, 카르복시메칠셀룰로오스칼슘, 구연산칼슘, 라우릴황산나트륨, 무수규산, 1-히드록시프로필셀룰로오스, 덱스트란, 이온교환수지, 초산폴리비닐, 포름알데히드처리 카제인 및 젤라틴, 알긴산, 아밀로오스, 구아르고무(Guar gum), 중조, 폴리비닐피롤리돈, 인산칼슘, 겔화전분, 아라비아고무, 아밀로펙틴, 펙틴, 폴리인산나트륨, 에칠셀룰로오스, 백당, 규산마그네슘알루미늄, 디-소르비톨액, 경질무수규산 등 붕해제; 스테아린산칼슘, 스테아린산마그네슘, 스테아린산, 수소화식물유(Hydrogenated vegetable oil), 탈크, 석송자, 카올린, 바셀린, 스테아린산나트륨, 카카오지, 살리실산나트륨, 살리실산마그네슘, 폴리에칠렌글리콜 4000,6000, 유동파라핀, 수소첨가대두유(Lubri wax), 스테아린산알루미늄, 스테아린산아연, 라우릴황산나트륨, 산화마그네슘, 마크로골(Macrogol), 합성규산알루미늄, 무수규산, 고급지방산, 고급알코올, 실리콘유, 파라핀유, 폴리에칠렌글리콜지방산에테르, 전분, 염화나트륨, 초산나트륨, 올레인산나트륨, dl-로이신, 경질무수규산 등의 활택제;가 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 액제의 첨가제로는 물, 묽은 염산, 묽은 황산, 구연산나트륨, 모노스테아린산슈크로스류, 폴리옥시에칠렌소르비톨지방산에스텔류(트윈에스텔), 폴리옥시에칠렌모노알킬에텔류, 라놀린에텔류, 라놀린에스텔류, 초산, 염산, 암모니아수, 탄산암모늄, 수산화칼륨, 수산화나트륨, 프롤아민, 폴리비닐피롤리돈, 에칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 시럽제에는 백당의 용액, 다른 당류 혹은 감미제 등이 사용될 수 있으며, 필요에 따라 방향제, 착색제, 보존제, 안정제, 현탁화제, 유화제, 점조제 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 유제에는 정제수가 사용될 수 있으며, 필요에 따라 유화제, 보존제, 안정제, 방향제 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 현탁제에는 아카시아, 트라가칸타, 메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스나트륨, 미결정셀룰로오스, 알긴산나트륨, 히드록시프로필메칠셀룰로오스, 1828, 2906, 2910 등 현탁화제가 사용될 수 있으며, 필요에 따라 계면활성제, 보존제, 안정제, 착색제, 방향제가 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 주사제에는 주사용 증류수, 0.9%염화나트륨주사액, 링겔주사액, 덱스트로스주사액, 덱스트로스+염화나트륨주사액, 피이지(PEG), 락테이티드 링겔주사액, 에탄올, 프로필렌글리콜, 비휘발성유-참기름, 면실유, 낙화생유, 콩기름, 옥수수기름, 올레인산에칠, 미리스트산 이소프로필, 안식향산벤젠과 같은 용제; 안식향산나트륨, 살리실산나트륨, 초산나트륨, 요소, 우레탄, 모노에칠아세트아마이드, 부타졸리딘, 프로필렌글리콜, 트윈류, 니정틴산아미드, 헥사민, 디메칠아세트아마이드와 같은 용해보조제; 약산 및 그 염(초산과 초산나트륨), 약염기 및 그 염(암모니아 및 초산암모니움), 유기화합물, 단백질, 알부민, 펩 톤, 검류와 같은 완충제; 염화나트륨과 같은 등장화제; 중아황산나트륨(NaHSO₃) 이산화탄소가스, 메타중아황산나트륨(Na₂S₂O₃), 아황산나트륨(Na₂SO₃), 질소가스(N₂), 에칠렌디아민테트라초산과 같은 안정제; 소디움비설파이드 0.1%, 소디움포름알데히드 설폭실레이트, 치오우레아, 에칠렌디아민테트라초산디나트륨, 아세톤소디움비설파이트와 같은 황산화제; 벤질알코올, 클로로부탄올, 염산프로카인, 포도당, 글루콘산칼슘과 같은 무통화제; 시엠시나트륨, 알긴산나트륨, 트윈 80, 모노스테아린산알루미늄과 같은 현탁화제를 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 좌제에는 카카오지, 라놀린, 위텝솔, 폴리에틸렌글리콜, 글리세로젤라틴, 메칠셀룰로오스, 카르복시메칠셀룰로오스, 스테아린산과 올레인산의 혼합물, 수바날(Subanal), 면실유, 낙화생유, 야자유, 카카오버터+콜레스테롤, 레시틴, 라네트왁스, 모노스테아린산글리세롤, 트윈 또는 스판, 임하우젠(Imhausen), 모놀렌(모노스테아린산프로필렌글리콜), 글리세린, 아뎁스솔리두스(Adeps solidus), 부티룸 태고-G(Buytyrum Tego-G), 세베스파마 16 (Cebes Pharma 16), 헥사라이드베이스 95, 코토마(Cotomar), 히드록코테 SP, S-70-XXA, S-70-XX75(S-70-XX95), 히드록코테(Hydrokote) 25, 히드록코테 711, 이드로포스탈 (Idropostal), 마사에스트라리움(Massa estrarium, A, AS, B, C, D, E, I, T), 마사-MF, 마수폴, 마수폴-15, 네오수포스탈-엔, 파라마운드-B, 수포시로(OSI, OSIX, A, B, C, D, H, L), 좌제기제 IV 타입 (AB, B, A, BC, BBG, E, BGF, C, D, 299), 수포스탈 (N, Es), 웨코비 (W, R, S, M ,Fs), 테제스터 트리글리세라이드 기제 (TG-95, MA, 57)와 같은 기제가 사용될 수 있다.

경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다.

경구 투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 본 발명이 속하는 기술분야에 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 개체에게 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구 복용, 피하 주사, 복강 투여, 정맥 주사, 근육 주사, 척수 주위 공간(경막내) 주사, 설하 투여, 볼점막 투여, 직장 내 삽입, 질 내 삽입, 안구 투여, 귀 투여, 비강 투여, 흡입, 입 또는 코를 통한 분무, 피부 투여, 경피 투여 등에 따라 투여될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 치료할 질환, 투여 경로, 환자의 연령, 성별, 체중 및 질환의 중등도 등의 여러 관련 인자와 함께 활성성분인 약물의 종류에 따라 결정된다.

아울러, 본 발명은 흰물싸리꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물을 제공한다.

또한, 흰물싸리꽃 추출물은 염증성 질환의 개선을 목적으로 식품에 첨가될 수 있다.

본 발명에 있어서 식품은 기능성 식품 및 건강기능성 식품을 포함한다.

본 발명의 흰물싸리꽃 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 흰물싸리꽃 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시 본 발명의 흰물싸리꽃 추출물은 원료에 대하여 15 중량% 이하, 또는 10 중량% 이하의 양으로 첨가될 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.

본 발명에 따른 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당 및 과당과 같은 모노사카라이드, 말토오스 및 수크로오스와 같은 디사카라이드, 덱스트린 및 시클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 및 자일리톨, 소르비톨 및 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL당 일반적으로 약 0.01-0.20g, 또는 약 0.04-0.10g 이다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01-0.20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

본 발명은 흰물싸리꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 화장료 조성물의 제형은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 미스트, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 핸드로션, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 클렌징오일, 클렌징밤, 바디로션 또는 바디클렌저의 형태일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 및 스핑고 지질로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 더 포함할 수 있다.

수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 예를 들어 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염 (티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체 (아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.

유용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 예를 들어 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E (d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체 (팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산dl-알파 토코페롤, 니코틴산dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. 유용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 취득할 수 있다.

고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 예를 들어 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.

고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 예를 들어 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 (나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유 동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.

스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 예를 들어 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장품에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.

에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.

탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.

실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산ㆍ메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산ㆍ메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.

불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.

동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.

보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.

수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.

지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.

수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다.

지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈ㆍ에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈ㆍ헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다.

에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.

계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEㆍPOP (폴리옥시에틸렌ㆍ폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEㆍPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.

음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인산염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다.

양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다.

양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.

유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염 ; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염 ; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드 ; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산 ; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다.

자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.

살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301 호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있다.

산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다.

pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.

알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 0.01-5% 중량 백분율 또는 0.01-3% 중량 백분율로 배합될 수 있다.

본 발명의 제형이 로션, 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

또한, 본 발명은 흰물싸리꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 염증성 질환의 치료방법을 제공한다.

본 발명에서 "개체"란 질병의 치료를 필요로 하는 대상을 의미하고, 보다 구체적으로는 인간 또는 비-인간인 영장류, 생쥐 (mouse), 쥐 (rat), 개, 고양이, 말, 및 소 등의 포유류를 의미한다.

본 발명에서 “투여”란 임의의 적절한 방법으로 개체에게 소정의 본 발명의 조성물을 제공하는 것을 의미한다.

또한, 본 발명은 흰물싸리꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물의 염증성 질환 예방, 개선 또는 치료 용도를 제공한다.

또한, 본 발명은 흰물싸리꽃 추출물의 염증성 질환 예방, 개선 또는 치료에 이용되는 약제를 생산하기 위한 용도를 제공한다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예 및 실험예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예 및 실험예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예 및 실험예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 실험 준비

흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 에탄올 추출물(Pg-EE) (FBM108-016), Potentilla paradoxa(FBM167-035), Potentilla centigrana(FBM234-037), Potentilla ancistrifolia(FBM237-055)는 한국생명공학연구원 해외생물소재센터 (www.ibmrc.re.kr, 대전, 대한민국) 에서 구입하였다.

실시예 2. 세포배양법

Murine 유래 대식세포주인 RAW264.7 세포를 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 10%의 FBS를 함유하는 RPMI 1640 배지를 이용하여 100 mm cell culture dish에 70-80%의 밀도로 배양하였다.

Human 세포주인 HEK293T 세포는 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 5%의 FBS를 함유하는 DMEM 배지를 이용하여 100 mm cell culture dish에 70-80%의 밀도로 배양하였다.

실험예 1. 세포 생존율(cell viability) 확인

Potentilla 속 추출물의 세포 독성을 확인하기 위하여, MTT(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphinyltetrazolium bromide) assay법을 이용하여 세포 생존율을 확인하였다.

96-well plate에 실시예2의 방법으로 배양된 RAW264.7 및 HEK293 세포를 1 × 10⁶ cell/ml의 농도로 plating하고 37℃에서 24시간 동안 지시된 용량(최종농도 50, 100, 150 μg/ml)의 샘플(Potentilla 속 추출물)로 처리하고, CO₂ incubator에서 배양하였다. 이후 10 ㎕ MTT 용액 (stock concentration : 5 mg/ml)을 첨가하고 3시간 동안 추가반응을 유도하였다. 반응 종료 및 formazan crystal 용해를 위해 각 well에 100 ㎕ MTT stopping solution (10% Sodium dodecyl sulfate in 0.01M HCl)을 추가적으로 첨가하였다. 세포 생존율은 MTT가 formazan으로 환원된 양을 570 nm에서 흡광도를 측정하여 얻어진 OD 값을 통해 산출하였다.

그 결과, 도 1a에 나타난 바와 같이, RAW264.7 세포에서 Potentilla 속에 속하는 4종(Potentilla glabra, Potentilla pardoxa, Potentilla centigrana, Potentilla ancistrifolia)의 추출물의 세포 독성을 비교한 결과, Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz. 에탄올 추출물(Pg-EE)의 세포 독성이 가장 낮은 것으로 확인되었다.

또한, 도 1b 및 1c에 나타난 바와 같이, Pg-EE의 RAW264.7 및 HEK293T 세포에 대한 세포 독성 효과가 유의하지 않음을 입증하였다.

실험예 2. LPS로 유도된 대식세포주에서 세포독성물질 NO(Nitric oxide) 의 생성능 확인

염증반응 유도 자극제인 LPS(Lipopolysaccharide)로 유도된 대식세포주에서 Potentilla 속 추출물의NO생성 억제효과를 확인하기 위하여, Griess 용액으로 NO 생성능을 측정하였다.

실시예 2의 방법으로 배양한 대식세포주 RAW264.7를 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 10%의 FBS를 함유하는 RPMI 1640 배지를 이용해서 1×10⁶ cell/ml의 농도로 조절한 후, 96 well plate에 접종하고, 5% CO₂ 및 37℃에서 18시간 동안 전 배양하였다. 이후 배지를 제거하고 4배 농도로 조제된 Potentilla 속 추출물 50μl (최종농도 50, 100, 150 μg/ml), 50μl의 LPS (최종농도 1 μg/ml) 함유 배지를 동시에 처리하여 배양하였다. 24시간 후 상층액을 100μl씩 또 다른 96 well plate에 옮기고 NO 정량은 Griess 용액 (0.5% naphthylethylenediamine dihydrochloride, 5% sulfanilamide, 25% H₃PO₄)을 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하여 실시하였다. 표준물질로 sodium nitrite (0 에서 100 μM) 를 사용하여 검량선을 작성하였다.

그 결과, 도 2a에 나타난 바와 같이, LPS로 유도된 RAW264.7 세포에서 Potentilla 속에 속하는 4종(Potentilla glabra, Potentilla pardoxa, Potentilla centigrana, Potentilla ancistrifolia)의 추출물의 NO 생성 억제효과를 비교한 결과, Pg-EE의 NO 생성 억제효과가 가장 뛰어난 것을 확인하였다.

또한, 도 2b에 나타난 바와 같이, LPS로 유도된 RAW264.7 세포에서 Pg-EE가 농도 의존적으로 NO 생성을 억제하는 것을 확인하였다.

따라서, 실험예 1 및 실험예 2의 결과에 따라, Potentilla 속 추출물 중 가장 독성이 작고 NO 생성 억제효과가 뛰어난 Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz. 에탄올 추출물(Pg-EE)을 본 발명에 사용하게 되었다.

실험예 3. LPS로 유도된 대식세포주에서 Pg-EE처리에 의한 염증성 사이토카인(cytokine) 발현 감소 효과 확인

LPS로 유도된 대식세포주에서 Pg-EE의 염증성 사이토카인의 발현 감소 효과를 전사수준에서 확인하기 위하여, RT-PCR을 통해 mRNA 발현 변화를 확인하였다.

실시예2의 방법으로 배양된 RAW264.7 세포를 1 × 10⁶ cell/ml의 농도로 plating하고 37℃에서 지시된 용량(최종농도 50, 100, 150 μg/ml)의 Pg-EE를 처리하여 30분 간 incubator에서 배양한 후 LPS (최종농도 1 μg/ml)를 처리하고, CO₂ incubator에서 배양하였다. 6시간 후, Trizol reagent를 사용하여 total RNA를 추출하였다. 추출한 total RNA를 First strand cDNA synthesis kit (Thermo scientific)를 사용하여 cDNA를 제조한 다음, 동량의 cDNA를 PCR로 증폭하였다. 이때 사용한 표적단백질의 sense 및 antisense primer 염기서열은 기존문헌을 참조하여 제조하고, 대조군 유전자로는 GAPDH을 사용하였다(표 1). PCR amplication은 Hipi PCR kit (Elpis biotech)을 사용하여 각 실험군 cDNA와 표적단백질들의 sense 및 antisense primers, 대조군 GAPDH primers를 dNTP 250 uM, Tris-HCL(pH 8.3) 10 mM, KCl 50 mM, NgCl₂ 1.5 mM를 포함한 Hipi PCR kit 20ul에서 시행하였다. PCR은 95 ℃에서 45초 간 denaturing, 55 ℃에서 45초 간 annealing 그리고 72 ℃에서 1분간 extension 하는 조건으로 시행하며, 총 30 cycles을 수행하였다. PCR로 증폭된 DNA는 1.5 % agarose gel에서 전기영동 하였고 분획된 DNA band의 intensity를 측정하였다.

Gene	Sequence(5'to 3')	서열번호
iNOS Forward	cccttccgaa gtttctggca gcag	1
iNOS Reverse	ggctgtcaga gcctcgtggc tttgg	2
COX-2 Forward	cactacatcc tgacccactt	3
COX-2 Reverse	atgctcctgc ttgagtatgt	4
TNF-α Forward	ttgacctcag cgctgagttg	5
TNF-α Reverse	cctgtagccc acgtcgtagc	6
IL-1β Forward	caggatgagg acatgagcac c	7
IL-1β Reverse	ctctgcagac tcaaactcca c	8
IL-6 Forward	ggaaatcgtg gaaatgag	9
IL-6 Reverse	gcttaggcat aacgcact	10
GAPDH Forward	cactcacggc aaattcaacg gcac	11
GAPDH Reverse	gactccacga catactcagc ac	12

그 결과, 도 3에서 나타난 바와 같이, LPS로 유도된 RAW264.7 세포에서 Pg-EE가 염증관련 사이토카인 iNOS(Nitric Oxide Synthase), COX-2(Cyclooxygenase-2), TNF-α(tumor necrosis factor-α), IL-6(Interleukin-6) 및 IL-1β(Interleukin-1β)의 발현을 전사수준에서 억제하는 것을 확인하였다.

실험예 4. LPS로 유도된 대식세포주에서 Pg-EE 처리에 의한 염증 관련 표적단백질 발현 변화 및 신호전달 과정 확인

LPS로 유도된 대식세포주에서 Pg-EE 처리에 의한 염증 관련 표적단백질 발현 변화 및 신호전달 과정을 확인하기 위하여, 웨스턴 블롯(western blot)을 수행하였다.

실시예 2의 방법으로 배양한 대식 세포주인 RAW264.7 세포를 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 10%의 FBS를 함유하는 RPMI 1640 배지를 이용해서 배양한 세포를 1X10⁶ cell/ml 농도로 30mm의 dish에서 전 배양시켰다. 이후 150 μg/ml 의 Pg-EE를 처리하고 30분간 incubator에서 배양한 후, LPS(최종농도 1 μg/ml)로 자극하고 약물에 따른 일정시간 (2분, 3분, 5분, 15분, 30분, 60분) 후 cell 들을 모아서 lysis buffer를 사용해 세포를 깨어 western 표본을 얻었다. 그리고 각 표본의 단백질 농도를 BSA를 표준으로 잡고 측정한다. 이렇게 얻어진 값을 기준으로 단백질 농도가 되는 각 표본량을 가지고 SDS-PAGE를 실행하고, western blotting 방법을 사용해 PVDF membrane으로 단백질을 blotting시킨 후 membrane을 3 % BSA를 사용해 blocking시키고, 1차 항체로 표적 단백질 항체 및 신호전달 단백질 항체 (β-actin, p65, p-p65, p50, p-p50, IκBα, p-IκBα, Src, p-Src, AKT, p-AKT, p85, p-p85 (Cell Signaling Technology)) 용액을 사용해 1차 처리하고, 다시 washing 단계 후 2차 항체(anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 또는 anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody (Cell Signaling Technology)) 용액을 처리하고 washing하였다. 그리고 암실에서 membrane에 ECL 용액 (Amersham, England)을 골고루 분주하여 X-ray film으로 감광하였다.

그 결과, 도 4에서 나타난 바와 같이, LPS로 유도된 RAW264.7 세포에서 Pg-EE에 의하여 NF-κB pathway 관련 신호전달 단백질 IκBα, NF-κB subunit인 p65와 p50의 활성화 형태인 인산화 형태가 감소하는 것을 확인하였다.

도 5에서 나타난 바와 같이, LPS로 유도된 RAW264.7 세포에서 Pg-EE에 의하여 초기시간에서 NF-κB pathway 관련 신호전달 단백질 Src, p85, AKT의 활성화 형태인 인산화 형태가 감소하는 것을 확인하였다.

실험예 5. Human 세포주 HEK293T 세포에서 과발현된 Src 단백질의 Pg-EE 처리에 의한 인산화 형태 감소 효과 확인

Src 단백질을 과발현 시키기 위하여, 실시예2와 같은 방법으로 배양한 HEK293T cells를 3cm plate에 penicillin (100 IU/ml) 및 streptomycin (100 μg/ml)과 5%의 FBS를 함유하는 DMEM 배지를 이용해서 plating하고 incubator에서 배양시켰다. 최소 10시간 이후 한 그룹에는 공벡터를, 나머지 두 그룹에는 Src 단백질을 과발현 시켰다. 공벡터를 넣은 그룹과Src 단백질을 과발현 시킨 그룹 중 한 그룹에는 추출물을 녹인 용매를, 나머지 Src 단백질 과발현 그룹에는 150 μg/ml 의 Pg-EE를 처리해주었다. 24시간동안 incubator에서 배양 후, 세포를 다시 회수한 후 상기 실험예 4와 동일한 방법으로 western blotting을 진행하였다.

그 결과, 도 6에서 나타난 바와 같이, NF-κB 신호전달 과정 중 상위 단백질인 Src를 과발현 시킨 조건에서 Pg-EE에 의해 Src의 인산화 형태가 감소하는 것을 확인 할 수 있었다.

이를 통해, Pg-EE가 Src의 활성화 과정에 의한 인산화를 억제시킴으로써 NF-κB 염증 과정을 방해하여 항염증 효과를 가진다는 사실을 확인할 수 있다(도 8 참조).

실험예 6. 급성 위염 (acute gastritis) 모델에서 Pg-EE에 의한 염증 억제 효과 확인

5주령의 ICR mouse 25마리를 다섯 마리씩 다섯 군으로 분류한 뒤, 그 중 두 군은 Pg-EE를 150mg/kg, 100mg/kg으로, 한 군은 positive control compound인 Ranitidine을, 나머지는 Pg-EE의 vehicle인 CMC 0.5%를 이틀간, 총 세 번 100ul 씩 주입하였다. 마지막 약물 주입 후 8시간 뒤 한 군은 염증반응을 유도하지 않았고 나머지 네 군은 에탄올(Ethanol)과 염산(HCl)으로 위염을 유도하였다. 위염 유도 1시간 후 해부를 하여 위벽의 상태를 측정, 위염 유발 정도를 정량화하였다.

그 결과, 도 7a 및 도 7b에 나타난 바와 같이, Pg-EE를 주입하지 않고 위염만 유도한 대조군과 Pg-EE를 주입한 후 위염을 유도한 마우스의 위벽을 비교한 결과, 대조군에 비해 Pg-EE를 150mg/kg 또는 100mg/kg의 농도로 주입해 준 경우 위염 유발 정도가 더 억제되었음을 확인할 수 있었다. 또한 Pg-EE를 150mg/kg의 농도로 주입해준 경우, 실제 항염증 효과를 내는 약물 Ranitidine을 주입한 마우스의 경우와 비슷한 정도의 위염을 완화 효과를 가지는 것으로 보아 Pg-EE가 효과적인 의약품 및 의약부외품 소재로의 가능성을 나타냄을 확인하였다.

이상의 실시예를 종합하여, 본 발명자들은 Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz. 에탄올 추출물(Pg-EE)이 염증반응으로 생성되는 사이토카인과 그에 따른 반응물의 생성을 효과적으로 감소시켰으며, 면역활성에 관여하는 신호전달 단백질의 발현을 억제시킴을 확인하였다. 뿐만 아니라, Pg-EE의 염증억제 효과는 위염을 유발한 동물실험에서도 확인되었기 때문에 Pg-EE를 염증성 질환의 예방, 치료, 또는 개선을 위한 약제 및 건강기능식품과 이들의 개발을 위한 물질에 이용될 수 있음을 알 수 있다.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예 및 실험예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야 한다.

<110> Research & Business Foundation SUNGKYUNKWAN UNIVERSITY <120> Pharmaceutical composition comprising extract of Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz. for preventing or treating inflammatory disease as active ingredient <130> MP19-341 <160> 12 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> iNOS Forward <400> 1 cccttccgaa gtttctggca gcag 24 <210> 2 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> iNOS Reverse <400> 2 ggctgtcaga gcctcgtggc tttgg 25 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> COX-2 Forward <400> 3 cactacatcc tgacccactt 20 <210> 4 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> COX-2 Reverse <400> 4 atgctcctgc ttgagtatgt 20 <210> 5 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> TNF-alpha Forward <400> 5 ttgacctcag cgctgagttg 20 <210> 6 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> TNF-alpha Reverse <400> 6 cctgtagccc acgtcgtagc 20 <210> 7 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> IL-1beta Forward <400> 7 caggatgagg acatgagcac c 21 <210> 8 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> IL-1beta Reverse <400> 8 ctctgcagac tcaaactcca c 21 <210> 9 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> IL-6 Forward <400> 9 ggaaatcgtg gaaatgag 18 <210> 10 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> IL-6 Reverse <400> 10 gcttaggcat aacgcact 18 <210> 11 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> GAPDH Forward <400> 11 cactcacggc aaattcaacg gcac 24 <210> 12 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> GAPDH Reverse <400> 12 gactccacga catactcagc ac 22

Claims (12)

1. 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 위염 또는 위궤양의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로서,
   상기 흰물싸리꽃 추출물은 에탄올로 추출되는 것을 특징으로 하는, 위염 또는 위궤양의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
   
2. 삭제
3. 삭제
4. 삭제
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6. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 일산화 질소(nitric oxide, NO) 생성을 억제하는 것을 특징으로 하는, 위염 또는 위궤양의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
   
7. 제1항에 있어서,
   상기 조성물은 NF-κB(nuclear factor kappa B) 활성을 억제하는 것을 특징으로 하는, 위염 또는 위궤양의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
   
8. 흰물싸리꽃(Potentilla glabra var. mandshurica (Maxim.) Hand.-Mazz.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 위염 또는 위궤양의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물로서,
   상기 흰물싸리꽃 추출물은 에탄올로 추출되는 것을 특징으로 하는, 위염 또는 위궤양의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
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