KR102254615B1

KR102254615B1 - 바바킨을 포함하는 신규 백신용 면역보조제 조성물

Info

Publication number: KR102254615B1
Application number: KR1020190151536A
Authority: KR
Inventors: 진영희; 권선오; 김동언; 민정선; 장민성
Original assignee: 한국한의학연구원; 한국화학연구원
Priority date: 2019-11-22
Filing date: 2019-11-22
Publication date: 2021-05-21
Also published as: EP4062932A4; WO2021101187A3; EP4062932A2; WO2021101187A2; US20220409723A1; KR102254615B9

Abstract

본 발명은 항원과 함께 투여될 경우, 항체의 역가를 향상시키고, 세포성 면역과 체액성 면역을 증진시킬 수 있는 바바킨을 유효성분으로 포함하는 백신용 면역보조제 조성물, 상기 바바킨과 항원을 포함하는 백신 제제, 상기 백신용 면역보조제 조성물을 백신조성물과 함께 또는 상기 백신조성물 투여 전후로 개체에 투여하는 단계를 포함하는 면역반응 촉진방법 및 상기 바바킨을 포함하는, 면역반응 촉진용 백신보조제 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 백신용 면역보조제 조성물은, 안전성이 확보된 보골지의 추출물로부터 분리된 바바킨을 포함하여 안전성을 나타내고, 항원에 의해 생성된 항체의 역가를 증진시킬 뿐만 아니라, 체액성 면역반응과 세포성 면역반응을 모두 증진시킬 수 있으므로, 효과적인 백신제제의 개발에 널리 활용될 수 있을 것이다.

Description

바바킨을 포함하는 신규 백신용 면역보조제 조성물{A novel vaccine adjuvant composition comprising bavachin}

본 발명은 바바킨을 유효성분으로 포함하는 백신용 면역보조제 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 본 발명은 항원과 함께 투여될 경우, 항체의 역가를 향상시키고, 세포성 면역과 체액성 면역을 증진시킬 수 있는 바바킨을 유효성분으로 포함하는 백신용 면역보조제 조성물, 상기 바바킨과 항원을 포함하는 백신 제제, 상기 백신용 면역보조제 조성물을 백신조성물과 함께 또는 상기 백신조성물 투여 전후로 개체에 투여하는 단계를 포함하는 면역반응 촉진방법 및 상기 바바킨을 포함하는, 면역반응 촉진용 백신보조제 조성물에 관한 것이다.

백신은 병원균 감염에 대한 방어를 목적으로 항원에 대한 면역반응을 생성하도록 하기 위해 사용되는 의약품으로서 최근 개발되고 있는 백신들은 주로 재조합 단백질(recombinant protein)을 항원으로 사용하고 있다. 재조합 단백질은 사균 백신이나 약독화 생백신에 비하여 부작용이 적고 안전하지만 면역원성이 낮으므로 감염 방어에 충분한 면역력을 생성하기 위해 백신용 면역보조제(vaccine adjuvant)를 함께 사용하고 있다.

백신용 면역보조제는 작용기전에 따라 크게 항원의 전달체, 면역증강제, 면역반응을 자극하는 동시에 항원에 대한 매트릭스로서 작용하는 것 등의 세 가지 종류로 구별된다. 백신용 면역보조제를 효과적으로 사용하면 (1) 재조합 항원의 면역원성을 증가시키고, (2) 항원 투여량을 줄이거나 면역화 횟수를 줄일 수 있으며, (3) 면역력이 약한 유아와 노인에게서 면역원성을 향상시키는 등의 다양한 효과를 얻을 수 있다. 그러나 이러한 백신용 면역보조제의 유용성에도 불구하고 아직까지 사람백신에 사용할 수 있도록 허가를 받은 백신용 면역보조제가 많지 않은데 이는 백신 면역보조제로 선택되기 위해서 고려해야 할 사항들이 많기 때문이다. 이상적인 백신용 면역보조제의 조건은 안전성과 내약성이 우수하고, 제조방법이 간단하며 비용이 저렴해야 한다는 점이다. 또한, 체내 반감기가 길고 생분해가 가능해야 하며 면역보조제 자체에 대해서는 면역반응을 유발하지 않아야 한다. 특히 이 중에서도 백신용 면역보조제의 안전성 문제가 가장 중요시 된다.

현재, 유럽 및 미국에서 승인을 받아 백신에 사용되고 있는 백신용 면역보조제로는 알루미늄염, MF59, AS03, AS04 등이 있다. 알루미늄염은 주로 Al(OH)3 또는 AlPO4 형태로 사용되는데 일반적으로 단백질 항원을 흡착하여 천천히 방출함으로서 면역증강효과를 나타내는 것으로 생각되었다. 그러나, 최근에 알루미늄염이 수지상 세포(dendritic cell)를 활성화시키고 인터류킨(IL)-1β와 IL-18과 같은 사이토카인 분비를 촉진시키는 것으로 알려져 있다. 알루미늄염은 여러 백신에 널리 사용되며 매우 안전한 것으로 생각되고 있지만 알러지 반응을 유발하고 신경독성도 있는 것으로 추정되고 있다. 또한, 항체가 매개된 체액성 면역반응은 강하게 유도하나 세포성 면역반응은 거의 유도하지 못하며, 동결보존이 불가능하다는 단점이 있다.

이러한 배경하에서, 본 발명자들은 보다 효과적인 백신용 면역보조제를 개발하기 위하여 예의 연구 노력한 결과, 바바킨(bavachin)을 백신용 면역보조제의 유효성분으로 사용할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.

한국공개특허 제10-2016-0115379호

본 발명의 주된 목적은 바바킨(bavachin)을 유효성분으로 포함하는 백신용 면역보조제 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 바바킨과 항원을 포함하는 백신 제제를 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 백신용 면역보조제 조성물을 백신조성물과 함께 또는 상기 백신조성물 투여 전후로 개체에 투여하는 단계를 포함하는 면역반응 촉진방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 바바킨을 포함하는, 면역반응 촉진용 백신보조제 조성물.

상술한 목적을 달성하기 위한 본 발명의 일 실시양태는 바바킨(bavachin)을 포함하는 백신용 면역보조제 조성물을 제공한다.

본 발명의 용어 "바바킨(bavachin)"이란, 보골지 추출물에 포함된 화합물의 일종으로서, 하기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물을 의미한다.

[화학식 1]

본 발명의 용어 "백신용 면역보조제(vaccine adjuvant)"는 백신의 면역반응을 향상시킬 목적으로 투여되는 약학적 또는 면역학적 제제를 의미한다.

본 발명에서 제공하는 백신용 면역보조제 조성물은 항원과 함께 투여될 경우, 항체의 역가를 향상시키고, 세포성 면역과 체액성 면역을 동시에 증진시킬 수 있다.

특히, 상기 백신용 면역보조제는 안전성이 확보된 보골지의 추출물로부터 유래된 바바킨을 유효성분으로 포함하기 때문에, 생체내에서 안전하게 사용될 수 있다.

상기 백신용 면역보조제 조성물은 상기 담체 외에 약학적으로 허용가능한 보조제, 부형제 또는 희석제를 추가적으로 포함할 수 있다.

본 발명의 용어 "약학적으로 허용가능한"이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장 장애, 현기증과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 조성물을 말한다. 상기 담체, 부형제 및 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 또한, 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.

상기 백신 조성물은 상기 백신 면역보조제 외에 통상적으로 사용되는 백신용 면역보조제를 추가로 포함할 수 있는데 이러한 백신용 면역보조제로는 알루미늄 하이드록사이드, 알루미늄 포스페이트, 알룸(포타슘 알루미늄 설페이트), MF59, virosome, AS04[알루미늄 하이드록사이드 및 모노포스포릴 리피드 A(MPL)의 혼합물], AS03(DL-α-tocopherol, squalene 및 유화제인 polysorbate 80의 혼합물), CpG, Flagellin, Poly I:C, AS01,AS02, ISCOMs 및 ISCOMMATRIX 등이 사용될 수 있다.

또한, 상기 백신용 면역보조제 조성물은 포유동물에 투여시, 활성 성분의 신속한 방출, 또는 지속 또는 지연된 방출이 가능하도록 당업계에 공지된 방법을 사용하여 제형화될 수 있다. 제형은 분말, 과립, 정제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸, 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀, 멸균 주사용액, 멸균 분말 형태를 포함한다.

본 발명의 백신용 면역보조제 조성물은 다양한 경로로 투여될 수 있으며, 예를 들면, 경구, 비경구, 예를 들면 좌제, 경피, 정맥, 복강, 근육내, 병변내, 비강, 척추관내 투여로 투여될 수 있으며, 또한 서방형 또는 연속적 또는 반복적 방출을 위한 이식장치를 사용하여 투여될 수 있다. 투여횟수는 원하는 범위 내에서 하루에 1회, 또는 수회로 나누어 투여할 수 있으며, 투여 기간도 특별히 한정되지 않는다.

본 발명의 백신용 면역보조제 조성물은 일반적인 전신성 투여 또는 국소성 투여, 예컨대, 근육내 주사 또는 정맥 주사 방식으로 투여될 수 있는데, 일 예로서, 전기천공기(electroporator)를 이용하여 주입될 수 있다. 상기 전기천공기는 시판 중인 DNA 약물 체내 주입용 전기천공기, 예컨대, 이탈리아의 IGEA 사의 Glinporator, 한국의 JCBIO사의 CUY21EDIT, 스위스의 Supertech사의 SP-4a, 한국의 SLVAXiGEN사의 OrbiJector® 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 본 발명의 백신용 면역보조제 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 이와 같은 투여경로는 비경구 투여, 예를 들어, 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 활막강 내 투여될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명의 백신용 면역보조제 조성물은 일반적으로 사용되는 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 적합한 형태로 제형화될 수 있다. 약학적으로 허용되는 담체로는 예를 들면, 물, 적합한 오일, 식염수, 수성 글루코스 및 글리콜 등과 같은 비경구 투여용 담체 등이 있으며 안정화제 및 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 안정화제로는 아황산수소나트륨, 아황산나트륨 또는 아스코르브산과 같은 항산화제가 있다. 적합한 보존제로는 벤즈알코늄 클로라이드, 메틸- 또는 프로필-파라벤 및 클로로부탄올이 있다.

본 발명의 백신용 면역보조제 조성물은 그 투여방법이나 제형에 따라 필요한 경우, 현탁제, 용해보조제, 안정화제, 등장화제, 보존제, 흡착방지제, 계면활성화제, 희석제, 부형제, pH 조정제, 무통화제, 완충제, 산화방지제 등을 적절히 포함할 수 있다. 상기에 예시된 것들을 비롯하여 본 발명에 적합한 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 최신판]에 상세히 기재되어 있다.

본 발명의 백신용 면역보조제 조성물을 개체에 투여할 경우, 투여되는 개체의 신장, 체표면적, 연령, 투여되는 특정 화합물, 성별, 투여 시간 및 경로, 일반적인 건강, 및 동시에 투여되는 다른 약물들을 포함하는 많은 요소들에 따라 투여량을 변화시킬 수 있다. 일 예로서, 100 ng/체중(kg) - 10 ㎎/체중(㎏)의 양으로 투여될 수 있고, 다른 예로서, 1 내지 500 ㎍/kg(체중)으로 투여될 수 있으며, 또 다른 예로서, 5 내지 50 ㎍/kg(체중)으로 투여될 수 있다.

본 발명의 백신 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여된다.

본 발명의 용어 "약학적으로 유효한 양"이란, 의학적 치료에 적용가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 백신용 면역보조제 조성물은 일 예로서, 0.1 mg/kg 내지 1 g/kg의 용량으로 투여될 수 있고, 다른 예로서, 1mg/kg 내지 500 mg/kg의 투여량으로 투여될 수 있는데, 상기 투여량은 환자의 나이, 성별 및 상태에 따라 적절히 조절될 수 있다.

본 발명의 다른 실시양태는 상기 바바킨과 항원을 포함하는 백신 제제를 제공한다.

상기 항원은 생체내에서 면역반응을 유도할 수 있는 한 특별히 이에 제한되지 않으나, 일 예로서, 바이러스 항원, 암항원 또는 이들의 조합이 될 수 있고, 다른 예로서, EBV(Epstein-Barr virus), HAV(hepatitis A virus), HBV(hepatitis B virus), HCV(hepatitis C virus), HDV(hepatitis Dvirus), HEV(hepatitis E virus), 한탄바이러스(Hantaan virus), CMV(cytomegalovirus), HIV(human immunodeficiency virus), 독감 바이러스(influenza virus), HPV(human papilloma virus), 소아마비 바이러스(poliovirus), 에볼라 바이러스(ebola virus), 로타바이러스(rotavirus), 댕기열바이러스(dengue virus), 웨스트나일 바이러스(West Nile virus), 황열바이러스(yellow fever virus), 아데노바이러스(adenovirus), 일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus), BK 바이러스(BK virus), 천연두 바이러스(smallpox virus), 지카 바이러스(Zika virus), 중증열성혈소판감소증후근 바이러스 (SFTS virus), HSV(herpes simplex virus) 등의 다양한 바이러스로부터 유래된 바이러스 항원이 될 수 있으며, 또 다른 예로서, 인유두종바이러스(HPV) 유래 항원, 태아성 암항원(carcinoembryonic antigen), 전립선 특이적 항원(PSA), 전립선 특이적 막항원(PSMA), Her2/neu, MUC-1, BCR/ABL, 알파-페토프로테인(AFP), 엡스타인 바 바이러스(EBV) 유래 항원, 인간간염바이러스 B(HBV) 유래 항원, 인간간염바이러스 C(HCV) 유래 항원, 암항원-125(CA-125), 암항원-72-4(CA-72-4), 암항원-15-3(CA-15-3), 암항원-19-9(CA-19-9) 등의 암 항원이 될 수 있다.

본 발명의 또 다른 실시양태는 상기 백신용 면역보조제 조성물과 항원을, 상기 항원에 대한 면역활성이 필요한 개체에 투여하는 단계를 포함하는 면역반응 촉진방법을 제공한다.

상기 방법에 있어서, 상기 백신용 면역보조제 조성물은 면역반응을 유발하는 항원 또는 상기 항원을 포함하는 백신조성물과 함께 투여될 수도 있고, 상기 백신조성물을 투여하기 이전 또는 이후에 개체에 투여될 수도 있다.

본 발명의 또 다른 실시양태는 상기 바바킨을 포함하는, 면역반응 촉진용 백신보조제 조성물을 제공한다.

상술한 바와 같이, 상기 바바킨은 항원과 함께 투여될 경우, 항체의 역가를 향상시키고, 세포성 면역과 체액성 면역을 동시에 증진시킬 수 있으므로, 상기 바바킨을 포함하는 조성물은 면역반응 촉진용 백신보조제로서 사용될 수 있다.

본 발명의 백신용 면역보조제 조성물은, 안전성이 확보된 보골지의 추출물로부터 분리된 바바킨을 포함하여 안전성을 나타내고, 항원에 의해 생성된 항체의 역가를 증진시킬 뿐만 아니라, 체액성 면역반응과 세포성 면역반응을 모두 증진시킬 수 있으므로, 효과적인 백신제제의 개발에 널리 활용될 수 있을 것이다.

도 1은 바바킨의 사용여부에 따른 OVA 항체 역가를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 2는 바바킨의 사용여부에 따른 혈청내 면역글로불린의 이소타입(isotype)을 분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 3은 바바킨의 사용여부에 따른 비장세포와 림프절세포의 세포증식능을 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 바바킨의 사용여부에 따른 비장세포와 림프절세포에서 분비되는 사이토카인(IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10 및 TNF)의 수준을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 5는 바바킨의 사용여부에 따른 비장 세포와 림프절 세포의 세포수를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 6은 바바킨의 사용여부에 따른 비장 세포 내 CD4 세포와 CD8 세포의 비율을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 7은 바바킨의 사용여부에 따른 림프절 세포 내 effector T 세포의 비율을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.

이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1: 바바킨을 포함하는 백신용 면역보조제 조성물의 제조

0.5% CMC에 bavachin 100㎍을 용해시켜서 백신용 면역보조제 조성물을 제작하였다.

실시예 2: 마우스 면역화

OVA (10㎍)와 바바킨(10㎍)의 혼합물 또는 OVA (10㎍)와 바바킨(100㎍)의 혼합물을 C57/BL6 마우스에 1, 3, 4주째에 1회씩 피하주사하여 면역화시켰다. 이때, 대조군으로는 OVA (10㎍)를 단독으로 주사한 것을 사용하였다.

실시예 3: 마우스 혈중 항체역가 분석

상기 실시예 2에서 첫 번째 면역 후 28일 및 42일이 경과된 시점에서, 마우스 혈청을 채취하여 혈청 중의 항원특이적 IgG 항체 역가를 ELISA법으로 측정하였다(도 1). 이때, ELISA 법은 OVA가 코팅된 플레이트를 블록킹한 후, 대조군과 실험군의 혈청을 다양한 일련의 희석율로 배양하였다. 그 후 Horseradish Peroxidase가 부착된 마우스-IgG와 IgG1 항체를 첨가하고 기질을 첨가하여 반응시킨 후, ELISA 판독기로 측정하였다.

도 1은 바바킨의 사용여부에 따른 OVA 항체 역가를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.

도 1에서 보듯이, 바바킨을 OVA와 함께 주사한 마우스에서의 OVA에 대한 항체 역가는 OVA를 단독으로 주사한 마우스에서의 OVA 항원에 대한 항체 역가 보다 현저하게 증가됨을 확인하였다.

실시예 4: 혈청 내 Immunoglobulin isotyping 조사로 면역유도성 분석

상기 실시예 3에서 채취한 마우스 혈청 중 항체의 서브클래스(subclass)를 CBA(Cytometric Bead Array) isotyping kit로 염색하여 FACS로 분석하였다(도 2).

도 2는 바바킨의 사용여부에 따른 혈청내 면역글로불린의 이소타입(isotype)을 분석한 결과를 나타내는 그래프이다.

도 2에서 보듯이, 바바킨을 OVA와 함께 주사한 마우스의 혈청에는, OVA를 단독으로 주사한 마우스의 혈청 보다도, 면역글로불린 중 Th2 타입의 면역성을 나타내는 IgG1과 IgA가 상대적으로 높은 수준으로 포함되어 있음을 확인하였다.

따라서, 상기 바바킨을 함께 주사하면 Th2 타입의 면역성을 나타내는 IgG1과 IgA 항체의 서브클래스가 증가됨을 알 수 있었다.

실시예 5: 항원특이적 세포성 면역반응 분석

상기 실시예 4의 결과에서 보듯이, 본 발명의 바바킨이 체액성 면역성을 향상시킴을 확인하였으므로, 세포성 면역에도 영향을 미치는지 확인하고자 하였다.

이를 위하여, 마우스 림프절과 비장을 대상으로, 상기 바바킨이 항원특이적 T세포의 증식과 사이토카인 프로파일에 미치는 영향을 조사하였다.

대략적으로, 첫 번째 면역 후 28일이 경과된 시점에서, 처리한 마우스 그룹(0.5% CMC (CON), OVA, Bavachin 100㎍, OVA+Bavachin) 당 5마리씩 림프절과 비장을 적출하고 갈아서 조직 피막으로부터 세포를 분리하였다. 비장의 경우, RBC lysis buffer를 처리하고 적혈구를 용혈시켜 비장세포를 분리하였다.

분리된 비장세포와 림프절세포를 96웰 플레이트에 1 x 10^6 세포수/웰로 분주하고, OVA를 48시간 동안 처리하였다. 그 후, 세포의 증식을 MTS로 측정하고(도 3), 세포에서 분비된 사이토카인(IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10 및 TNF)을 CBA로 측정하였다(도 4).

도 3은 바바킨의 사용여부에 따른 비장세포와 림프절세포의 세포증식능을 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.

도 3에서 보듯이, 바바킨을 OVA와 함께 주사한 마우스의 비장세포와 림프절세포는, OVA를 단독으로 주사한 마우스의 비장세포와 림프절세포 보다도, 상대적으로 우수한 세포증식능을 나타냄을 확인하였다.

도 4는 바바킨의 사용여부에 따른 비장세포와 림프절세포에서 분비되는 사이토카인(IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10 및 TNF)의 수준을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.

도 4에서 보듯이, 바바킨을 OVA와 함께 주사한 마우스의 비장세포와 림프절세포에서 분비되는 사이토카인은, OVA를 단독으로 주사한 마우스의 비장세포와 림프절세포에서 분비되는 사이토카인 보다도, 사이토카인의 종류에 상관없이, 모두 상대적으로 높은 수준을 나타냄을 확인하였다.

상기 도 3 및 도 4의 결과로부터, 바바킨을 함께 주사하면, 항원특이적 T 세포의 세포증식과 사이토카인의 분비가 증가되어, Th1과 Th2 타입의 세포성 면역이 모두 향상됨을 알 수 있었다.

실시예 6: 면역세포와 effector T 세포에 미치는 효과 분석

상기 실시예 5에서 수득한, 각각의 비장 세포와 림프절 세포를 대상으로, 이들 세포의 전체 세포수를 계수하였다(도 5).

도 5는 바바킨의 사용여부에 따른 비장 세포와 림프절 세포의 세포수를 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.

도 5에서 보듯이, 바바킨을 OVA와 함께 주사한 마우스의 림프절 세포수는, OVA를 단독으로 주사한 마우스의 림프절 세포수 보다도, 상대적으로 높은 수준을 나타냄을 확인하였다.

이에 반하여, 바바킨을 OVA와 함께 주사한 마우스의 비장 세포수는, OVA를 단독으로 주사한 마우스의 비장 세포수와 유의한 차이를 나타내지 않음을 확인하였다.

이에, 상기 비장 세포를 대상으로 FACS 분석을 수행하여, CD4 세포와 CD8 세포의 비율을 비교하였다(도 6).

도 6은 바바킨의 사용여부에 따른 비장 세포 내 CD4 세포와 CD8 세포의 비율을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.

도 6에서 보듯이, 바바킨을 OVA와 함께 주사한 마우스의 비장 세포 내 CD4 세포와 CD8 세포의 비율은, OVA를 단독으로 주사한 마우스의 비장 세포 내 CD4 세포와 CD8 세포의 비율 보다도, 상대적으로 높은 수준을 나타냄을 확인하였다.

또한, 상기 림프절 세포를 FACS 분석을 수행하여, effector T 세포인 CD44⁺CD62L^-CD4 세포와 CD44⁺CD62L^-CD8 세포의 비율을 비교하였다(도 7).

도 7은 바바킨의 사용여부에 따른 림프절 세포 내 effector T 세포의 비율을 비교한 결과를 나타내는 그래프이다.

도 7에서 보듯이, 바바킨을 OVA와 함께 주사한 마우스의 림프절 세포 내 effect T 세포의 비율은, OVA를 단독으로 주사한 마우스의 림프절 세포 내 effect T 세포의 비율 보다도, 상대적으로 높은 수준을 나타냄을 확인하였다.

상기 도 5 내지 도 7의 결과로부터, 바바킨을 함께 주사하면, 세포성 면역이 향상됨을 다시 한번 확인하였다.

상기 실시예 3 내지 6의 결과를 종합하면, 본 발명에서 제공하는 바바킨은 항원과 함께 생체내에 주사될 경우, 생성되는 항체의 역가를 증가시켜 체액성 면역을 증가시키고, Th1 타입과 Th2 타입의 세포성 면역을 함께 증가시키므로, 효과적인 백신 보조제로 사용할 수 있음을 알 수 있었다.

이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims

바바킨(bavachin)을 포함하는, 백신용 면역보조제 조성물.
제1항에 있어서,
상기 바바킨은 세포성 면역과 체액성 면역을 동시에 증가시키는 것인, 백신용 면역보조제 조성물.
항원과 바바킨(bavachin)을 포함하는, 백신 제제.
제3항에 있어서,
상기 항원은 바이러스 항원, 암항원 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 항원인 것인, 백신 제제.
제4항에 있어서,
상기 바이러스 항원은 EBV(Epstein-Barr virus), HAV(hepatitis A virus), HBV(hepatitis B virus), HCV(hepatitis C virus), HDV(hepatitis Dvirus), HEV(hepatitis E virus), 한탄바이러스(Hantaan virus), CMV(cytomegalovirus), HIV(human immunodeficiency virus), 독감 바이러스(influenza virus), HPV(human papilloma virus), 소아마비 바이러스(poliovirus), 에볼라 바이러스(ebola virus), 로타바이러스(rotavirus), 댕기열바이러스(dengue virus), 웨스트나일 바이러스(West Nile virus), 황열바이러스(yellow fever virus), 아데노바이러스(adenovirus), 일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus), BK 바이러스(BK virus), 천연두 바이러스(smallpox virus), 지카 바이러스(Zika virus), 중증열성혈소판감소증후근 바이러스 (SFTS virus) 및 HSV(herpes simplex virus)로 구성된 군으로부터 선택되는 바이러스로부터 유래된 것인, 백신 제제.
제4항에 있어서,
상기 암항원은 인유두종바이러스(HPV) 유래 항원, 태아성 암항원(carcinoembryonic antigen), 전립선 특이적 항원(PSA), 전립선 특이적 막항원(PSMA), Her2/neu, MUC-1, BCR/ABL, 알파-페토프로테인(AFP), 엡스타인 바 바이러스(EBV) 유래 항원, 인간간염바이러스 B(HBV) 유래 항원, 인간간염바이러스 C(HCV) 유래 항원, 암항원-125(CA-125), 암항원-72-4(CA-72-4), 암항원-15-3(CA-15-3), 암항원-19-9(CA-19-9) 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 항원인 것인, 백신 제제.
항원과 바바킨(bavachin)을, 상기 항원에 대한 면역활성이 필요한 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 면역반응 촉진 방법.
바바킨(bavachin)을 포함하는, 면역반응 촉진용 백신보조제 조성물.