KR102200016B1 - Composition comprising Green tea extract for caring damages of skin cells by microdust - Google Patents

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Abstract

본 명세서에는 녹차 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물로서, 미세먼지에 의해 발현량이 영향을 받는 피부 세포 내 유전자인 KRT 1, CLDN 1, CLDN 4, 및 OCLN로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 발현량을 정상 수준으로 조절하는 미세먼지에 의한 피부 손상 케어용 조성물이 개시된다.
본 발명에 의한 조성물을 이용함으로써, 미세먼지에 의해 변화되는 유전자 발현량을 정상 수준으로 되돌려 피부 세포의 손상을 케어할 수 있다.
In the present specification, as a composition comprising green tea extract as an active ingredient, the expression level of one or more selected from the group consisting of KRT 1, CLDN 1, CLDN 4, and OCLN, which are genes in skin cells whose expression level is affected by fine dust, is Disclosed is a composition for skin damage care by fine dust that is controlled to a normal level.
By using the composition according to the present invention, it is possible to take care of damage to skin cells by returning the gene expression level changed by fine dust to a normal level.

Description

녹차 추출물을 포함하는 미세먼지에 의한 피부 세포 손상 케어용 조성물{Composition comprising Green tea extract for caring damages of skin cells by microdust}Composition comprising Green tea extract for caring damages of skin cells by microdust}

본 명세서에는 미세먼지에 의한 피부 세포 손상을 케어하는 조성물이 개시된다. 보다 상세하게, 정상 상태의 피부 세포와 비교하여 미세먼지에 의해 발현 정도가 변화되는 피부 세포 유전자인 바이오마커 등을 유의미하게 변화시켜서 피부 세포 손상을 케어하는, 차나무 추출물을 포함하는 조성물이 개시된다.The present specification discloses a composition for treating skin cell damage caused by fine dust. In more detail, a composition comprising a tea tree extract is disclosed, which significantly changes a biomarker, which is a skin cell gene whose expression level is changed by fine dust compared to normal skin cells, to care for skin cell damage.

최근 환경적인 이슈로 미세먼지에 대한 관심이 높아지고 폴루션 시장이 확대되고 있다. 미세먼지는 일반적인 황사 등에 비하여 더 작은 크기의 입자를 갖기 때문에 인체에 더 잘 침투되며, 중금속, 질산염, 암모늄, 황산염 등의 유해물질을 더 많이 포함하고 있어서 인체에 유해하다. 미세먼지가 우리 몸 속으로 들어오면 인체의 면역을 담당하는 세포가 먼지를 제거하는 작용을 한다. 이 때의 부작용으로 염증을 수반하며, 이에 더하여 세계보건기구에서는 미세먼지를 암과 직접적인 관계가 있는 발암물질 1군으로 분류하고 있는 실정이다.Recently, interest in fine dust has increased due to environmental issues, and the pollutant market is expanding. Fine dust is more harmful to the human body because it has smaller sized particles than general yellow sand, so it penetrates the human body better, and contains more harmful substances such as heavy metals, nitrates, ammonium and sulfates. When fine dust enters our body, cells responsible for the body's immunity act to remove the dust. As a side effect at this time, inflammation is accompanied, and in addition, the World Health Organization classifies fine dust as a group 1 carcinogens that have a direct relationship with cancer.

미세먼지는 호흡기뿐만 아니라 피부나 모낭으로도 침투되어서 피부트러블이나 탈모를 일으키는 것으로 예상되나, 어떻게 피부와 모발에 부정적 영향을 끼치는지에 대한 기전 및 타겟 연구는 미비한 수준에 그치고 있으며, 이에 따라 문제점을 해결하기 위한 안티폴루션 소재에 대한 연구 또한 진행되고 있지 않다.Fine dust penetrates not only the respiratory tract, but also into the skin or hair follicles, which is expected to cause skin troubles or hair loss, but the mechanism and target research on how it negatively affects the skin and hair is only incomplete, and the problem is solved accordingly. There is also no research on anti-pollution materials to do so.

비특허문헌 1은 과립층 장벽인 타이트 정션(tight junction)의 주요 구성성분인 클라우딘 1(CLDN 1)의 발현량이 PM 2.5의 미세먼지 자극으로 인하여 감소하였음을 개시하고 있다.Non-Patent Literature 1 discloses that the expression level of claudin 1 (CLDN 1), which is a major component of a tight junction, which is a granular layer barrier, decreased due to the stimulation of fine dust of PM 2.5.

Kim, H.J., et al, "Transcriptome analysis of airborne PM2.5-induced detrimental effects on human keratinocytes", Toxicology Letters 273, 26-35, 2017. Kim, H.J., et al, "Transcriptome analysis of airborne PM2.5-induced detrimental effects on human keratinocytes", Toxicology Letters 273, 26-35, 2017.

이에 본 발명자는 미세먼지가 피부에 유해한 영향을 미치며, 이러한 영향에 의하여 피부 세포 유전자의 발현에도 영향을 미침으로써 피부 세포 손상 등과 같은 증상이 나타나며, 녹차 추출물이 유전자의 발현을 복구시키는 효과가 있다는 것을 확인 하였다.Accordingly, the present inventors have found that fine dust has a harmful effect on the skin, and by this effect, it affects the expression of skin cell genes, resulting in symptoms such as skin cell damage, and that green tea extract has the effect of restoring gene expression. Confirmed.

따라서, 일 측면에서 본 발명은 녹차 추출물을 포함하는 미세먼지에 의한 피부 세포의 손상 케어용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.Accordingly, in one aspect, an object of the present invention is to provide a composition for treating damage to skin cells by fine dust comprising a green tea extract.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 일 측면에서, 본 발명은 녹차 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물로서, 미세먼지에 의해 발현량이 영향을 받는 피부 세포 내 유전자인 케라틴 1(KRT 1), 클라우딘 1(CLDN 1), 클라우딘 4(CLDN 4), 및 오클루딘(OCLN)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 발현량을 정상 수준으로 조절하는 미세먼지에 의한 피부 손상 케어용 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, in one aspect, the present invention is a composition comprising a green tea extract as an active ingredient, keratin 1 (KRT 1), claudin 1 ( It provides a composition for skin damage care by fine dust that controls the expression level of one or more selected from the group consisting of CLDN 1), claudin 4 (CLDN 4), and occludin (OCLN) to a normal level.

일 측면에서, 본 발명에 의해 제공되는 미세먼지에 의한 피부 손상 케어용 조성물을 이용함으로써, 미세먼지에 의해 변화되는 유전자 발현량을 정상 수준으로 되돌려 피부 세포의 손상을 케어할 수 있다.In one aspect, by using the composition for skin damage care by fine dust provided by the present invention, it is possible to care for damage to skin cells by returning the gene expression level changed by fine dust to a normal level.

도 1는 ERM-CZ120 미세먼지에 의해 자극된 피부 세포 내에서 KRT 1 유전자의 mRNA 발현량이 증가하였고, 녹차 추출물 처리에 의해 정상 수준으로 되돌아감을 나타낸 것이다.
도 2는 ERM-CZ120 미세먼지에 의해 자극된 피부 세포 내에서 CLDN 1 유전자의 mRNA 발현량이 증가하였고, 녹차 추출물 처리에 의해 정상 수준으로 되돌아감을 나타낸 것이다.
도 3는 ERM-CZ120 미세먼지에 의해 자극된 피부 세포 내에서 CLDN 4 유전자의 mRNA 발현량이 증가하였고, 녹차 추출물 처리에 의해 정상 수준으로 되돌아감을 나타낸 것이다.
도 4는 ERM-CZ120 미세먼지에 의해 자극된 피부 세포 내에서 OCLN 유전자의 mRNA 발현량이 증가하였고, 녹차 추출물 처리에 의해 정상 수준으로 되돌아감을 나타낸 것이다.
1 shows that the mRNA expression level of the KRT 1 gene was increased in skin cells stimulated by ERM-CZ120 fine dust, and returned to the normal level by green tea extract treatment.
2 shows an increase in the mRNA expression level of the CLDN 1 gene in skin cells stimulated by ERM-CZ120 fine dust, and returns to a normal level by treatment with green tea extract.
3 shows an increase in the mRNA expression level of the CLDN 4 gene in skin cells stimulated by ERM-CZ120 fine dust, and returns to the normal level by treatment with green tea extract.
4 shows an increase in the mRNA expression level of the OCLN gene in skin cells stimulated by ERM-CZ120 fine dust, and returns to a normal level by treatment with green tea extract.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명의 일 측면에서, 상기 미세먼지에 의한 피부손상 케어용 조성물은 녹차 추출물을 유효성분으로 포함할 수 있다.In one aspect of the present invention, the composition for care of skin damage caused by fine dust may include green tea extract as an active ingredient.

차나무(Camellia sinensis)는 차나무과(theaceae)에 속하는 다년생 상록식물로서 열대, 아열대, 온대지방에 분포되고 차나무의 주요성분으로는 카테킨, 카페인, 아미노산, 비타민 및 무기질 등이 있으며, 이들 화학성분들은 여러 가지 생리활성과 약리효과를 나타내는 것으로 보고되고 있다. 오늘날 건강에 기여하는 생리활성물질로서 활발한 연구가 되고 있으며, 그 중에서도 카테킨류는 충치예방효과, 항산화효과, 항균효과와 항암효과 등의 다양한 기능이 있는 것으로 보고되고 있다. Tea tree ( Camellia sinensis ) is a perennial evergreen plant belonging to theaceae family. It is distributed in tropical, subtropical and temperate regions. The main components of the tea tree include catechins, caffeine, amino acids, vitamins and minerals, and these chemical components are various It is reported to exhibit physiological activity and pharmacological effect. Today, active research is being conducted as a physiologically active substance that contributes to health, and among them, catechins are reported to have various functions such as caries prevention effect, antioxidant effect, antibacterial effect and anticancer effect.

일 측면에서, 상기 녹차 추출물은 녹차 잎 추출물이고, 상기 녹차 잎은 발효되지 않은 것으로서, 내부 효소가 불활성된 것일 수 있다.In one aspect, the green tea extract is a green tea leaf extract, the green tea leaves are not fermented, and internal enzymes may be inactivated.

본 발명의 일 측면에서, 상기 녹차는 특정 추출용매로 추출되어 녹차 추출물을 형성할 수 있다.In one aspect of the present invention, the green tea may be extracted with a specific extraction solvent to form a green tea extract.

본 발명의 일 측면인, 상기 녹차 추출물은 녹차를 물 또는 유기용매로 추출하여 제조될 수 있다. 구체적으로, 녹차를 물, C1 -C6의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 디에틸아세테이트, 디에틸에테르, 벤젠, 클로로포름, 및 헥산으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 추출용매로 추출하여 제조될 수 있다. In one aspect of the present invention, the green tea extract may be prepared by extracting green tea with water or an organic solvent. Specifically, green tea is selected from the group consisting of water, C 1 -C 6 anhydrous or aqueous lower alcohol, acetone, butylene glycol, ethyl acetate, diethyl acetate, diethyl ether, benzene, chloroform, and hexane. It can be prepared by extraction with an extraction solvent.

일 측면에서, 상기 녹차 추출물은 상온 추출된 것일 수 있다.In one aspect, the green tea extract may be extracted at room temperature.

일 측면에서, 상기 녹차 추출물은 상기 추출용매로 추출된 이후에, 증발, 여과, 농축, 분리 또는 건조 과정 중 하나 이상을 추가적으로 거쳐서 얻어진 것일 수 있다. 특히, 상기 녹차 추출물은 1회 이상의 여과 과정을 거친 것일 수 있다.In one aspect, the green tea extract may be obtained by additionally at least one of evaporation, filtration, concentration, separation, or drying after being extracted with the extraction solvent. In particular, the green tea extract may have been subjected to one or more filtration processes.

일 측면에서, 상기 분리 과정은 원심분리 과정을 포함할 수 있다.In one aspect, the separation process may include a centrifugation process.

구체적으로, 상기 추출은 물, C1 - C6의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤 및 부틸렌글리콜을 포함하는 극성 용매 및 에틸아세테이트, 디에틸아세테이트, 디에틸에테르, 벤젠, 클로로포름 및 헥산을 포함하는 저극성 용매 중 어느 하나 이상을 용매로 사용하는 것일 수 있다. 더 구체적으로, 상기 용매는 10 - 90%의 에탄올 수용액일 수 있으며, 10 - 50%, 15 - 45%, 또는 20-40%의 에탄올 수용액일 수 있다. 상기 용매가 20 - 40%의 에탄올 수용액인 경우, 녹차로부터 유효성분을 효과적으로 추출할 수 있다. 일 실시예에서, 상기 용매는 약 30%의 에탄올 수용액이다.Specifically, the extraction includes water, an anhydrous or hydrous lower alcohol of C 1 -C 6 , a polar solvent including acetone and butylene glycol, and ethyl acetate, diethyl acetate, diethyl ether, benzene, chloroform, and hexane. Any one or more of the low polarity solvents may be used as the solvent. More specifically, the solvent may be a 10-90% aqueous ethanol solution, 10-50%, 15-45%, or 20-40% ethanol aqueous solution. When the solvent is a 20-40% ethanol aqueous solution, the active ingredient can be effectively extracted from green tea. In one embodiment, the solvent is about 30% aqueous ethanol solution.

일 측면에서, 상기 추출물은 추출 후 냉각 콘덴서가 달린 증류 장치에서 적정 온도로 감압 농축될 수 있다.In one aspect, the extract may be concentrated under reduced pressure to an appropriate temperature in a distillation apparatus equipped with a cooling condenser after extraction.

다만, 본 발명에 따른 녹차 추출물은 당해 기술 분야의 통상적인 방법으로 추출하여 얻을 수 있으며, 전술한 방법에 의하여 한정되는 것은 아니다.However, the green tea extract according to the present invention can be obtained by extraction by a conventional method in the art, and is not limited by the above-described method.

본 발명의 일 관점인, 조성물에 있어서, 상기 조성물은 녹차 추출물을, 조성물 총 중량을 기준으로 0.000001 내지 30중량%로 포함할 수 있다. 그 함량이 0.000001 내지 30중량%인 경우, 녹차 추출물에 의한 미세먼지에 의한 피부 손상 케어 효과가 우수하였다.In one aspect of the present invention, in the composition, the composition may include green tea extract in an amount of 0.000001 to 30% by weight based on the total weight of the composition. When the content is 0.000001 to 30% by weight, the skin damage care effect due to fine dust by the green tea extract was excellent.

구체적으로, 0.0000001 중량% 이상, 0.0000005 중량% 이상, 0.0000007 중량% 이상, 0.0000009 중량% 이상, 0.000001 중량% 이상, 0.000002 중량% 이상, 0.000004 중량% 이상, 0.000006 중량% 이상, 0.000008 중량% 이상, 0.00001 중량% 이상, 0.00003 중량% 이상, 0.00005 중량% 이상, 0.00007 중량% 이상, 0.00009 중량% 이상, 0.0001 중량% 이상, 0.0003 중량% 이상, 0.0005 중량% 이상, 0.0007 중량% 이상, 0.0009 중량% 이상, 0.001 중량% 이상, 0.01 중량% 이상, 0.1 중량% 이상, 1 중량% 이상, 3 중량% 이상, 5 중량% 이상, 7 중량% 이상, 9 중량% 이상, 10 중량% 이상, 13 중량% 이상, 15 중량% 이상, 17 중량% 이상, 19 중량% 이상, 21 중량% 이상, 23 중량% 이상, 25 중량% 이상, 27 중량% 이상, 29 중량% 이상, 30 중량% 이상, 31 중량% 이상일 수 있고, 32 중량% 이하, 31 중량% 이하, 30 중량% 이하, 29 중량% 이하, 28 중량% 이하, 26 중량% 이하, 24 중량% 이하, 22 중량% 이하, 20 중량% 이하, 18 중량% 이하, 16 중량% 이하, 14 중량% 이하, 12 중량% 이하, 10 중량% 이하, 9 중량% 이하, 8 중량% 이하, 6 중량% 이하, 4 중량% 이하, 2 중량% 이하, 1 중량% 이하, 0.1 중량% 이하, 0.09 중량% 이하, 0.04 중량% 이하, 0.01 중량% 이하, 0.006 중량% 이하, 0.001 중량% 이하, 0.0009 중량% 이하, 0.0007 중량% 이하, 0.00005 중량% 이하, 0.00003 중량% 이하, 0.00001 중량% 이하, 0.000009 중량% 이하, 0.000007 중량% 이하, 0.000005 중량% 이하, 0.000003 중량% 이하, 0.000001 중량% 이하, 0.0000009 중량% 이하, 0.0000007 중량% 이하, 0.0000005 중량% 이하, 0.0000003 중량% 이하, 0.0000002 중량% 이하, 0.0000001 중량% 이하, 0.00000009 중량% 이하일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.Specifically, 0.0000001 wt% or more, 0.0000005 wt% or more, 0.0000007 wt% or more, 0.0000009 wt% or more, 0.000001 wt% or more, 0.000002 wt% or more, 0.000004 wt% or more, 0.000006 wt% or more, 0.000008 wt% or more, 0.00001 weight % Or more, 0.00003% or more, 0.00005% or more, 0.00007% or more, 0.00009% or more, 0.0001% or more, 0.0003% or more, 0.0005% or more, 0.0007% or more, 0.0009% or more, 0.001% or more % Or more, 0.01% or more, 0.1% or more, 1% or more, 3% or more, 5% or more, 7% or more, 9% or more, 10% or more, 13% or more, 15% % Or more, 17 wt% or more, 19 wt% or more, 21 wt% or more, 23 wt% or more, 25 wt% or more, 27 wt% or more, 29 wt% or more, 30 wt% or more, 31 wt% or more, 32% or less, 31% or less, 30% or less, 29% or less, 28% or less, 26% or less, 24% or less, 22% or less, 20% or less, 18% or less, 16% or less, 14% or less, 12% or less, 10% or less, 9% or less, 8% or less, 6% or less, 4% or less, 2% or less, 1% or less, 0.1 wt% or less, 0.09 wt% or less, 0.04 wt% or less, 0.01 wt% or less, 0.006 wt% or less, 0.001 wt% or less, 0.0009 wt% or less, 0.0007 wt% or less, 0.00005 wt% or less, 0.00003 wt% or less, 0.00001 wt% or less, 0.000009 wt% or less, 0.000007 wt% or less, 0.000005 wt% or less, 0.000003 wt% or less, 0.000001 wt% or less Below, 0.0000009 wt% or less, 0.0000007 wt% or less, 0.0000005 wt% or less, 0.0000003 wt% or less, 0.0000002 wt% or less, 0.0000001 wt% or less, 0.00000009 wt% or less, but is not limited thereto.

일 측면에서, 본 발명에 따른 조성물의 유효 성분은 피부 장벽의 타이트 정션(tight junction)에 작용하는 것일 수 있다.In one aspect, the active ingredient of the composition according to the present invention may be one that acts on the tight junction of the skin barrier.

밀착연접은 세포연접의 한 종류로 occluding, claudin, tricellulin, junctional adhesion molecule(JAM), zona occluden(ZO) 등으로 구성되어 있다. 밀착연접은 세포막에 포함된 부분과 세포내 부분으로 나눌 수 있다. Occludin과 claudin은 세포막에 포함된 밀착연접 구성 단백질이다. Occludin은 밀착연접에서 처음으로 발견된 막관통 단백질로 4개의 막관통 영역을 가지고 있다. Occludin은 밀착연접의 구성 성분일 뿐만 아니라 밀착연접의 기능을 조절하는 것으로 알려졌다. Occludin과 함께 밀착연접 구성 단백질인 claudin도 4개의 막관통 영역을 가지고 있다. 밀착연접은 세포 간의 연결고리로 이웃한 세포와 세포 사이의 간격을 메워주고 작은 물질들의 이동을 조절하는 기능을 하며, 세포와 세포 간의 물질투과를 조절하고 세포의 극성을 유지하는 역할도 담당한다. 최근, 연구결과를 통해 밀착연접이 피부 장벽 기능에 있어서 중요한 역할을 담당하고 있다고 보고되었다. 타이트 정션(tight junction)은 세포간 결합양식의 일종이다. 주로 상피세포와 내피세포에서 나타나는 세포간 연접으로서, 끈모양 구조를 갖는 복잡한 네트워크(network)를 형성한다. 타이트 정션은 이러한 구조로부터 크게 두가지 기능을 갖는다. 첫째는 격벽(barrier)기능으로, 상피세포나 내피세포를 구성하는 세포 사이로 물질의 누출을 방지한다. 주로 혈관이나 소화관에서 중요하게 다루어진다. 둘째는 울타리기능으로, 세포막 지질에서 끈모양 울타리를 둘러 세포막을 구획하는 기능이다. 따라서, 본 발명에 따른 조성물의 유효 성분은 피부 장벽의 타이트 정션에 작용하여 피부 세포의 격벽 기능 및 울타리 기능을 강화시켜 미세먼지 자극에 의하여 손상된 피부를 케어할 수 있다.The close junction is a type of cell junction and is composed of occluding, claudin, tricellulin, junctional adhesion molecule (JAM), zona occluden (ZO), and the like. The close junction can be divided into a part contained in the cell membrane and an intracellular part. Occludin and claudin are close-junction proteins contained in cell membranes. Occludin is the first transmembrane protein found in tight junctions and has four transmembrane regions. Occludin is known not only as a constituent of tight junction, but also regulates the function of tight junction. Along with Occludin, claudin, a protein constituting a tight junction, also has four transmembrane regions. Close junction is a link between cells that fills the gaps between neighboring cells and cells, regulates the movement of small substances, regulates material permeation between cells and cells, and maintains the polarity of cells. Recently, it has been reported that close contact is playing an important role in skin barrier function through research results. Tight junction is a type of intercellular binding mode. It is a junction between cells that appears mainly in epithelial cells and endothelial cells, and forms a complex network having a string-like structure. Tight junction has two main functions from this structure. The first is the barrier function, which prevents the leakage of substances between cells constituting epithelial cells or endothelial cells. It is mainly dealt with importantly in the blood vessels or digestive tract. The second is the fencing function, which is the function of enclosing a string-shaped fencing from cell membrane lipids to partition the cell membrane. Therefore, the active ingredient of the composition according to the present invention acts on the tight junction of the skin barrier to enhance the barrier function and barrier function of skin cells, thereby treating the damaged skin by stimulation of fine dust.

본 발명의 다른 측면은, 상기 조성물의 미세먼지에 의한 피부 손상 케어 용도를 포함한다.Another aspect of the present invention includes the use of the composition to care for skin damage caused by fine dust.

본 명세서에서 사용되는 "미세먼지"라 함은, 우리 눈에 보이지 않는 아주 작은 물질로 대기 중에 오랫동안 떠다니거나 흩날리는 입자상의 물질을 의미한다. 구체적으로, 본 발명에서 미세먼지의 입자 크기는 입경 10μm 이하(PM 10), 구체적으로 입경 2.5μm 이하(PM 2.5)일 수 있다. 특히 입경이 2.5μm(PM 2.5) 이하인 입자상의 물질은 "초미세먼지"라 하는데, 본 명세서에서 "미세먼지"는 "초미세먼지"도 포함하는 것으로 의도된다.As used herein, the term "fine dust" refers to a particulate matter that is invisible to our eyes and floats or scatters for a long time in the atmosphere. Specifically, in the present invention, the particle size of the fine dust may be 10 μm or less in particle diameter (PM 10), specifically 2.5 μm or less in particle diameter (PM 2.5). Particularly, particulate matter having a particle diameter of 2.5 μm (PM 2.5) or less is referred to as "ultra-fine dust", and in this specification, "fine dust" is intended to include "ultra-fine dust."

일 측면에서, 본 발명에서 미세먼지는 비소(arsenic), 카드뮴(cardmium), 납(lead), 및 니켈(nikel) 중 하나 이상을 포함할 수 있다. 상기 비소(arsenic), 카드뮴(cardmium), 납(lead), 및 니켈(nikel) 등의 중금속 성분은 미세먼지에 함께 포함되어 피부 세포를 공격해 피부 알러지, 색소 침착, 염증 등을 일으켜 피부노화를 유발시킬 수 있다. 일 실시예에서, 상기 미세먼지는 비소(arsenic), 카드뮴(cardmium), 납(lead), 및 니켈(nikel)을 포함한다.In one aspect, the fine dust in the present invention may include one or more of arsenic, cadmium, lead, and nickel. The heavy metal components such as arsenic, cadmium, lead, and nickel are included together in fine dust and attack skin cells, causing skin allergy, pigmentation, and inflammation to prevent skin aging. Can trigger. In one embodiment, the fine dust includes arsenic, cadmium, lead, and nickel.

본 명세서에서 사용되는 용어"케어"라 함은, 자극으로부터 피부 세포를 효과적으로 보호하고, 상기 자극에 의하여 특정 유전자의 발현량이 변화하는 것을 억제, 방지, 복구(복원)시키는 것을 의미한다. 여기서, "복구"는 자극이 없는 경우의 유전자 발현량을 기준으로 할 때, 발현량을 상기 기준에 가깝게 변화시키는 것 외에도 상기 기준 이상으로 발현량을 향상시키는 것을 또한 포함한다.The term "care" as used herein refers to effectively protecting skin cells from stimulation, and inhibiting, preventing, and restoring (restore) a change in the expression level of a specific gene by the stimulation. Here, "recovery" also includes improving the expression level above the reference in addition to changing the expression level close to the reference when the expression level of the gene in the absence of stimulation is based on the reference.

일 측면에서, 본 발명은 미세먼지에 의해 손상된 피부 세포에서 특정 유전자의 발현량을 정상 수준으로 조절함으로써, 미세먼지에 의한 피부 세포의 손상을 억제하는 조성물을 제공한다.In one aspect, the present invention provides a composition for suppressing damage to skin cells by fine dust by controlling the expression level of a specific gene in skin cells damaged by fine dust to a normal level.

구체적으로, 본 발명에서 미세먼지에 의해 발현량이 영향을 받는 피부 세포 내 유전자로는 케라틴 1(KRT 1), 클라우딘 1(CLDN 1), 클라우딘 4(CLDN 4), 및 오클루딘(OCLN)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 포함할 수 있다. 상기 케라틴 1(KRT 1), 클라우딘 1(CLDN 1), 클라우딘 4(CLDN 4), 및 오클루딘(OCLN)은 미세먼지에 의해 발현량이 감소하는 유전자이므로, 이들 유전자의 발현량을 억제하여 정상 수준으로 조절함으로써 피부 세포의 손상을 억제할 수 있다.Specifically, in the present invention, genes in skin cells whose expression levels are affected by fine dust include keratin 1 (KRT 1), claudin 1 (CLDN 1), claudin 4 (CLDN 4), and occludin (OCLN). It may include one or more selected from the group. The keratin 1 (KRT 1), claudin 1 (CLDN 1), claudin 4 (CLDN 4), and occludin (OCLN) are genes whose expression levels are reduced by fine dust, so they suppress the expression levels of these genes to a normal level. By controlling it, damage to skin cells can be suppressed.

본 발명에서 사용되는, 미세먼지에 의해 발현량이 변화하는 유전자가 아래 [표 1]에 제시되어 있다. [표 1]은 미세먼지에 의해 발현량이 감소되는 유전자를 나타내는 것이며, 이들 표에서 Gene Symbol은 공식 유전자 심볼을 의미하며, Gene title은 각 유전자의 이름을 의미한다. 이러한 내용은 비특허문헌 1에 기재를 통하여 확인할 수 있다.Genes used in the present invention whose expression levels are changed by fine dust are shown in Table 1 below. [Table 1] shows genes whose expression level is reduced by fine dust. In these tables, Gene Symbol means the official gene symbol, and Gene title means the name of each gene. These contents can be confirmed through the description in Non-Patent Document 1.

감소 유전자Reduction gene Gene
Symbol
Gene
Symbol
Gene titleGene title
KRT 1KRT 1 Keratin 1Keratin 1 CLDN 1CLDN 1 Claudin 1Claudin 1 CLDN 4CLDN 4 Claudin 4Claudin 4 OCLNOCLN OccludinOccludin

상기 유전자 또는 단백질의 발현량 분석은 마이크로어레이, PCR, NGS(Nest Generation Sequencing; 차세대 염기서열분석), 웨스턴 블럿, 노던 블럿, ELISA, 방사선 면역 분석, 방사 면역 확산법, 조직면역 염색, 면역침전 분석법 등 당업계에 공지된 다양한 분석 방법을 이용하여 분석될 수 있다.Analysis of the expression level of the gene or protein includes microarray, PCR, NGS (Nest Generation Sequencing; next-generation sequencing), Western blot, Northern blot, ELISA, radioimmunoassay, radioimmuno diffusion method, tissue immunostaining, immunoprecipitation analysis, etc. It can be analyzed using a variety of analysis methods known in the art.

미세먼지에 의해 피부 세포의 손상이 일어나며, 이 때 염증이 유도되어 다시 피부 세포의 손상이 추가로 일어나게 된다. 이렇게 피부 세포 손상의 악순환을 녹차 추출물이 케어함으로써 피부 상태를 개선시킬 수 있게 된다.Skin cells are damaged by fine dust, which induces inflammation and further damages the skin cells. Green tea extract can improve the skin condition by taking care of the vicious cycle of skin cell damage.

본 발명의 일 관점인, 상기 조성물은, 화장료 조성물일 수 있고, 약학적 조성물일 수 있으며, 건강기능식품 조성물일 수 있다. In one aspect of the present invention, the composition may be a cosmetic composition, a pharmaceutical composition, or a health functional food composition.

상기 화장료 조성물은, 예컨대, 각종 크림, 로션 각종 크림, 로션, 스킨 등과 같은 화장품 류와 클렌징, 세안제, 비누, 미용액 등이 있다.The cosmetic composition includes, for example, various creams, lotions, various creams, lotions, and cosmetics such as skins, cleansing, face wash, soap, and beauty liquids.

일 측면에서, 본 발명의 상기 녹차 추출물을 함유하는 조성물이 첨가된 화장료는 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.In one aspect, the cosmetic composition to which the composition containing the green tea extract of the present invention is added may take the shape of a solution, an emulsion, a viscous mixture, or the like.

즉, 일 측면에서 본 발명의 화장료는 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 에센스, 팩, 젤, 파우더, 메이크업 베이스, 파운데이션, 로션, 연고, 패취, 미용액, 클렌징폼, 클렌징크림, 클렌징워터, 바디로션, 바디크림, 바디오일, 바디에센스, 샴푸, 린스, 바디세정제, 비누, 염모제, 분무제 등과 같은 제형을 들 수 있다.That is, in one aspect, the cosmetic composition of the present invention is not particularly limited in its formulation, for example, emulsion, cream, lotion, essence, pack, gel, powder, makeup base, foundation, lotion, ointment, patch, essence, cleansing Formulations such as foam, cleansing cream, cleansing water, body lotion, body cream, body oil, body essence, shampoo, conditioner, body cleaner, soap, hair dye, spray, etc. may be mentioned.

각 제형의 화장료 조성물에 있어서, 상기 녹차 추출물 이외에 다른 성분들은 기타 화장료의 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.In the cosmetic composition of each formulation, other ingredients other than the green tea extract may be appropriately selected and blended by a person skilled in the art without difficulty according to the formulation or purpose of use of other cosmetic materials.

또한, 일 측면에서 본 발명의 화장료는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함할 수 있다.In addition, in one aspect, the cosmetic composition of the present invention may include a composition selected from the group consisting of water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, polymer peptides, polymer polysaccharides, sphingo lipids, and seaweed extract.

일 측면에서, 본 발명의 화장료에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.In one aspect, in the cosmetic composition of the present invention, in addition to the essential ingredients, other ingredients which are usually blended in the cosmetic may be blended as needed.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.Other ingredients that may be added include fats and oils, moisturizers, emollients, surfactants, organic and inorganic pigments, organic powders, ultraviolet absorbers, preservatives, fungicides, antioxidants, plant extracts, pH adjusters, alcohols, pigments, fragrances, Blood circulation accelerators, cold sensation agents, restrictors, and purified water.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하다.In addition, the blending components that may be added are not limited thereto, and any of the above components can be blended within a range that does not impair the object and effect of the present invention.

일 측면에서, 본 발명의 녹차 추출물을 포함하는 약학적 조성물은 약학조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.In one aspect, the pharmaceutical composition comprising the green tea extract of the present invention may further include a suitable carrier, excipient, and diluent commonly used in the preparation of pharmaceutical compositions.

그 제형으로는, 상기 녹차 추출물을 포함하는 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 정제, 캡슐, 산제 또는 시럽 등의 경구제, 또는 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제 등의 외용제 등을 비롯하여 약제학적 제제에 적합한 어떠한 형태로든 제형화하여 사용할 수 있다.As the dosage form, the pharmaceutical composition containing the green tea extract may be formulated according to a conventional method, including oral preparations such as tablets, capsules, powders or syrups, or external preparations such as ointments, gels, creams, patches or sprays, etc. It can be formulated and used in any form suitable for pharmaceutical preparations.

일반적으로 상기 약학적 조성물에 의해 투여되는 유효성분의 실제 투여량은 증상의 중증도, 선택된 투여 경로, 대상의 연령, 성별, 체중 및 건강상태 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되어야 하는 것으로 이해되어야 한다. 일반적으로 유효성분의 투여량은 0.0001mg/kg/일 내지 3000mg/kg/일, 예를 들어 10 mg/kg/일 내지 500mg/kg/일 일 수 있다.In general, it should be understood that the actual dosage of the active ingredient administered by the pharmaceutical composition should be determined in light of various related factors such as the severity of symptoms, the selected route of administration, the age, sex, weight and health status of the subject. In general, the dosage of the active ingredient may be 0.0001 mg/kg/day to 3000 mg/kg/day, for example, 10 mg/kg/day to 500 mg/kg/day.

본 발명의 일 관점인 건강 기능식품 조성물에서, 건강식품은, 일상 식사에서 결핍되기 쉬운 영양소나 인체에 유용한 기능을 가진 원료나 성분(기능성원료)을 사용하여 제조한 것으로, 인체의 정상적인 기능을 유지하거나 생리기능 활성화를 통하여 건강을 유지하고 개선하는 식품을 의미할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 건강식품은 정제, 캡슐, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조, 가공될 수 있으나, 이에 한정되지 않으며 법률에 따라 어떤 형태로든지 제조, 가공될 수 있다.In the health functional food composition as an aspect of the present invention, the health food is manufactured using nutrients that are easily deficient in daily meals or raw materials or ingredients (functional ingredients) having useful functions for the human body, and maintains the normal function of the human body Or it may refer to food that maintains and improves health through activation of physiological functions, but is not limited thereto. The health food may be manufactured and processed in the form of tablets, capsules, powders, granules, liquids, pills, etc., but is not limited thereto and may be manufactured and processed in any form according to laws.

구체적으로, 건강 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드 폴리사카라이드, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 (타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다.Specifically, the health drink composition is not particularly limited to other ingredients other than containing the compound as an essential ingredient in the indicated ratio, and may contain various flavoring agents or natural carbohydrates as an additional ingredient, such as a conventional beverage. Examples of natural carbohydrates are conventional sugars such as monosaccharide polysaccharide, cyclodextrin, and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents other than those described above, natural flavoring agents (taumatin, stevia extract (for example, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.)) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be used.

일반적으로 상기 건강 기능식품 조성물에 의해 투여되는 유효성분의 실제 투여량은 증상의 중증도, 선택된 투여 경로, 대상의 연령, 성별, 체중 및 건강상태 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되어야 하는 것으로 이해되어야 한다. 일반적으로 유효성분의 투여량은 0.0001mg/kg/일 내지 1000mg/kg/일, 예를 들어 0.02 mg/kg/일 내지 6mg/kg/일 일 수 있다.In general, it should be understood that the actual dosage of the active ingredient administered by the health functional food composition should be determined in light of various related factors such as the severity of symptoms, the selected route of administration, the age, sex, weight, and health status of the subject. . In general, the dosage of the active ingredient may be 0.0001 mg/kg/day to 1000 mg/kg/day, for example, 0.02 mg/kg/day to 6 mg/kg/day.

이하, 실시예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 하기 예에 의해 제한되는 것은 아니다.Hereinafter, the configuration and effects of the present invention will be described in more detail with reference to examples. However, these examples are provided for illustrative purposes only to aid understanding of the present invention, and the scope and scope of the present invention are not limited by the following examples.

[실시예 1] 녹차 추출물 제조[Example 1] Preparation of green tea extract

녹차 추출물은 아모레퍼시픽 그룹 ㈜ 장원으로부터 분양 받은 녹차 잎(green tea)을 사용하여 제조하였다. 채취한 녹차 잎은 정제수로 세척하고 여과 및 건조시킨 뒤, 30% 에탄올(EtOH)와 1:8의 7중량 비율로 혼합한 뒤 25 ℃에서 72시간 교반하여 250 메쉬(mesh) 사이즈로 추출하였다.Green tea extract was prepared using green tea obtained from Amorepacific Group, Jangwon. The collected green tea leaves were washed with purified water, filtered and dried, mixed with 30% ethanol (EtOH) in a ratio of 7 weight of 1:8, stirred at 25° C. for 72 hours, and extracted in a size of 250 mesh.

얻어진 추출액은 3차례의 여과과정을 거치는데 각각 3.0 ㎛ 이하 사이즈, 1.0㎛ 이하 사이즈, 및 0.3㎛ 이하 사이즈로 여과하였다. 여과된 추출액을 4 ℃에서 72시간동안 침전시킨 뒤, 다시 0.2 ㎛ 이하 사이즈로 여과시켜 녹차 추출물을 제조하였다.The obtained extract was filtered three times, each with a size of 3.0 μm or less, 1.0 μm or less, and 0.3 μm or less. The filtered extract was precipitated at 4° C. for 72 hours, and then filtered again to a size of 0.2 μm or less to prepare a green tea extract.

[실험예 1] 실시간 qPCR 정량을 통한 유전자 발현량 측정 실험[Experimental Example 1] Gene expression level measurement experiment through real-time qPCR quantification

1. 각질형성세포주의 배양1. Cultivation of keratinocyte line

각질형성세포주(Human normal epidermal keratinocytes)는 론자 社(Lonza, Inc. 미국 메릴랜드주 워커스빌 소재)에서 구입하여 계대배양한 후 CO2 배양기(CO2 incubator)에서 37 ℃, 5% CO2 조건 하에서 배양하였다. 500ml의 KBM-2(KBMTM-2, CC-3103) 배지에 BPE(Bovine pituitary extract), 인간표피 성장인자(human epidermal growth factor, hEGF), 인슐린(Insulin), 하이드로코티손(Hydrocortisone), 젠타마이신 설페이트(Gentamycin Suflate), 에피네프린(Epinephrine), 트랜스페린(Transferrin)을 포함한 배양액을 사용하였다.Keratinocyte cell line (Human normal epidermal keratinocytes) was Lonza社(Lonza, Inc. Walkersville, Maryland material) was purchased and subcultured in a culture under a CO 2 incubator (CO 2 incubator), 37 ℃ from, 5% CO 2 conditions I did. In 500ml of KBM-2 (KBMTM-2, CC-3103) medium, BPE (Bovine pituitary extract), human epidermal growth factor (hEGF), insulin, hydrocortisone, gentamicin sulfate (Gentamycin Suflate), epinephrine (Epinephrine), a culture medium containing transferrin (Transferrin) was used.

배양시 최대 90% 정도의 컨플루언시(confluency)를 유지하였으며, 그 이후에는 계대배양(subcultivation)하였다.Confluency of up to 90% was maintained during cultivation, and subcultivation was performed thereafter.

2. 각질형성세포주에 미세먼지 및 녹차 추출물 처리2. Treated keratinocytes with fine dust and green tea extract

미세먼지는 시그마-알드리치 社(Sigma-Aldrich)에서 시판하는 ERM-CZ120 미세먼지를 사용하였으며, PM 10 수준의 미세먼지와 비소(arsenic), 카드뮴(cardmium), 납(lead), 및 니켈(nikel)을 포함하고 있다.For fine dust, ERM-CZ120 fine dust commercially available from Sigma-Aldrich was used, and fine dust of PM 10 level and arsenic, cadmium, lead, and nickel ).

6-웰 플레이트를 사용하였고 '1. 각질형성세포주의 배양'에서의 세포배양조건으로 3 × 105 세포수/웰(cells/well)인 조건으로 배양한 세포주에 각각 대조군으로 미처리군(대조군 1), 미세먼지를 50 ppm 처리한 군(대조군 2), 및 미세먼지 및 녹차 추출물을 각각 50 ppm 처리한 군(실시예 1)으로 총 3개의 군을 물질 처리를 하여 3 시간 및 6 시간 동안 배양하였다.A 6-well plate was used and '1. Cell lines cultured under the condition of cultivation of keratinocytes' cell lines were cultured under the conditions of 3 × 10 5 cells/well, respectively, as a control group, untreated group (control group 1), and a group treated with 50 ppm of fine dust (Control group 2), and a group treated with 50 ppm of fine dust and green tea extract, respectively (Example 1), a total of three groups were subjected to material treatment and incubated for 3 hours and 6 hours.

실험군Experimental group 미세먼지fine dust
(( ERMERM -CZ120 Fine Dust)-CZ120 Fine Dust)
녹차 추출물Green tea extract
대조군 1
(미세먼지 미처리)
Control 1
(Fine dust not treated)
-- --
대조군 2
(미세먼지 처리)
Control 2
(Fine dust treatment)
50 ppm50 ppm --
실시예 1
(미세먼지+녹차 추출물 처리)
Example 1
(Fine dust + green tea extract treatment)
50 ppm50 ppm 50 ppm50 ppm

3. 실시간 qPCR 정량3. Real-time qPCR quantification

3-1. RNA 추출 과정3-1. RNA extraction process

'2. 각질형성세포주에 미세먼지 및 녹차 추출물 처리'에서 얻은 대조군 1, 대조군 2 및 실시예 1에서 배양액을 제거하고, 2ml의 인산염 완충액(Phosphate Buffered Saline, PBS)으로 세포를 세척한 다음, 트리졸 시약(Trizol reagent, Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)을 사용하여 세포 내의 RNA를 분리하였다.'2. Remove the culture solution from Control 1, Control 2, and Example 1 obtained from'treatment of fine dust and green tea extract on keratinocyte line', and wash the cells with 2 ml of Phosphate Buffered Saline (PBS), and then trizol reagent ( Trizol reagent, Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) was used to isolate intracellular RNA.

3-2. cDNA 합성 과정3-2. cDNA synthesis process

분리된 RNA를 키아젠사의 RNA 키트(QIAGEN RNeasy kt, QIAGEN, Valencia, CA)로 한번 더 정제한 후, 애질런트 社의 바이오어낼라이저 2100 모델 기기(Agilent 2100 BioAnalyzer, Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA)를 사용하여 RNA의 질(quality)을 확인하였다. 인비트로젠사의 역전사키트(Superscript Reverse Transcriptase (RT) kit, Invitrogen, Carlsbad, CA)를 이용하여 RNA로부터 cDNA를 합성하였다.The isolated RNA was purified once more with QIAGEN's RNA kit (QIAGEN RNeasy kt, QIAGEN, Valencia, CA), and then Agilent's Bioanalyzer 2100 model instrument (Agilent 2100 BioAnalyzer, Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA ) Was used to check the quality of RNA. CDNA was synthesized from RNA using Invitrogen's Superscript Reverse Transcriptase (RT) kit, Invitrogen, Carlsbad, CA.

3-3. qPCR 수행3-3. qPCR performance

이를 상기 [표 3]의 프라이머를 이용한 실시간 역전사 중합 효소 연쇄반응(Q-RT-PCR: real time-reverse transcription polymerase chain reaction)을 통해 정량적으로 분석하였다. 유전자의 발현 패턴 변화를 어플라이드바이오시스템사의 택맨 유전자 발현 시스템(TaqMan gene expression assay kit, Applied Biosystems, Foster City, CA)을 이용하여 세포의 유전자 변화를 실시간 PCR로 평가하였으며, 그 결과를 [도 1] 내지 [도 4]에 나타내었다. 이용한 Q-RT-PCR과 실시간 PCR은 모두 라이프테크놀로지에서 배포하는 표준 프로토콜에 따라서 실행하였으며, 구체적으로 95 ℃에서 20초 동안 처리한 후, 95 ℃에서 3초 및 60 ℃에서 30초를 처리하는 공정을 40주기 진행하였다.This was quantitatively analyzed through a real time-reverse transcription polymerase chain reaction (Q-RT-PCR) using the primers of [Table 3]. Gene expression pattern changes were evaluated by real-time PCR using Applied Biosystems' TaqMan gene expression system (TaqMan gene expression assay kit, Applied Biosystems, Foster City, CA), and the results were evaluated by real-time PCR. To [Fig. 4]. Both Q-RT-PCR and real-time PCR used were carried out according to the standard protocol distributed by Life Technology, and specifically, after treatment at 95°C for 20 seconds, the process of treating 3 seconds at 95°C and 30 seconds at 60°C Was performed for 40 cycles.

[도 1] 내지 [도 4]에 나타낸 바와 같이, 미세먼지를 50 ppm 농도로 처리한 대조군 2는 미세먼지를 미처리한 대조군 1에 비하여 케라틴 1(Keratin 1), 클라우딘 1(Claudin 1), 클라우딘 4(Claudin 4), 및 오클루딘(Occludin)의 mRNA의 발현량이 감소한 것을 확인할 수 있었다. 구체적으로, 케라틴 1의 mRNA 발현량은 3시간 처리한 경우 0.19, 6시간 처리한 경우는 0.13으로 mRNA 발현량이 현저히 감소한 것을 확인할 수 있었고, 클라우딘 1는 각각 0.44와 0.24로, 클라우딘 4는 모두 0.52로, 오클루딘은 각각 0.48과 0.39로 감소한 것을 확인하였다. 즉, 미세먼지에 의하여 각질세포 분화마커(즉, 케라틴 1)와 과립층 장벽인 타이트 정션(tight junction) 구성성분(즉, 클라우딘 1, 클라우딘 4, 및 오클루딘)의 발현량이 모두 감소하였다.As shown in [Fig. 1] to [Fig. 4], the control group 2 treated with the fine dust at a concentration of 50 ppm was compared to the control group 1 without treatment with the fine dust keratin 1 (Keratin 1), claudin 1 (Claudin 1), claudin 4 (Claudin 4) and occludin (Occludin) mRNA expression levels were confirmed to decrease. Specifically, the mRNA expression level of keratin 1 was 0.19 when treated for 3 hours, and 0.13 when treated for 6 hours, and it was confirmed that the mRNA expression level was significantly reduced. Claudin 1 was 0.44 and 0.24, respectively, and claudin 4 was both 0.52. , It was confirmed that occludin decreased to 0.48 and 0.39, respectively. That is, the expression levels of the keratinocyte differentiation marker (ie, keratin 1) and the tight junction components (ie, claudin 1, claudin 4, and occludin), which are granular barriers, were all decreased by fine dust.

실시예 1은 미세먼지에 의하여 감소된 마커들의 mRNA 발현량을 본 발명의 녹차 추출물이 케어할 수 있음을 나타낸다. 구체적으로, 도 1은 케라틴 1의 mRNA 발현량은 3시간 처리한 경우 0.79, 6시간 처리한 경우는 0.99로 미세먼지에 의하여 감소된 mRNA 발현량이 복구됨을 나타내며, 도 4는 오클루딘의 mRNA 발현량은 3시간 처리한 경우 0.88, 6시간 처리한 경우는 0.98로 미세먼지에 의하여 감소된 mRNA 발현량이 복구됨을 나타내다. 특히, 클라우딘 1 및 클라우딘 4는 3시간 처리한 경우 각각 1.12와 1.23을, 6시간 처리한 경우에 각각 1.23과 1.45로 대조군 1에 비하여 향상된 mRNA 발현량을 보인다(도 2 및 도 3 참조).Example 1 shows that the green tea extract of the present invention can care for the mRNA expression level of the markers reduced by fine dust. Specifically, FIG. 1 shows that the mRNA expression level of keratin 1 is 0.79 when treated for 3 hours, and 0.99 when treated for 6 hours, indicating that the decreased mRNA expression level by fine dust is restored, and FIG. 4 is the mRNA expression level of occludin Is 0.88 when treated for 3 hours and 0.98 when treated for 6 hours, indicating that the decreased mRNA expression level by fine dust is recovered. In particular, claudin 1 and claudin 4 were 1.12 and 1.23, respectively, when treated for 3 hours, and 1.23 and 1.45, respectively, when treated for 6 hours, respectively, showing improved mRNA expression levels compared to control 1 (see FIGS. 2 and 3).

따라서, 미세먼지에 의해 자극된 피부 세포에서 감소한 케라틴 1, 클라우딘 1, 클라우딘 4, 및 오클루딘의 발현량은 녹차 추출물의 처리에 의하여 그 발현량이 복구될 수 있음을 확인할 수 있다.Therefore, it can be seen that the expression levels of keratin 1, claudin 1, claudin 4, and occludin decreased in skin cells stimulated by fine dust can be recovered by treatment with green tea extract.

이하, 본 발명에 따른 조성물의 제형예를 설명하나, 화장료 조성물, 약학적 조성물 및 건강 기능식품 조성물은 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Hereinafter, examples of the formulation of the composition according to the present invention will be described, but cosmetic compositions, pharmaceutical compositions, and health functional food compositions can be applied in various formulations, which are not intended to limit the present invention, but are intended to be described in detail. .

[제형예 1] 정제 [Formulation Example 1] Tablet

본 발명 실시예에 따른 녹차 추출물 100mg, 락토오스 400mg, 옥수수 전분 400mg 및 스테아린산 마그네슘 2mg을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.After mixing 100 mg of green tea extract, 400 mg of lactose, 400 mg of corn starch and 2 mg of magnesium stearate according to an embodiment of the present invention, tablets were prepared by tableting according to a conventional tablet preparation method.

배합성분Ingredients 함량(mg)Content(mg) 녹차 추출물Green tea extract 100100 락토오스Lactose 400400 옥수수 전분Corn starch 400400 스테아린산 마그네슘Magnesium stearate 22

[제형예 2] 캡슐제[Formulation Example 2] Capsule

본 발명 실시예에 따른 녹차 추출물 100mg, 락토오스 400mg, 옥수수 전분 400mg 및 스테아린산 마그네슘 2mg을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조 방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.After mixing 100 mg of green tea extract, 400 mg of lactose, 400 mg of corn starch, and 2 mg of magnesium stearate according to an exemplary embodiment of the present invention, a capsule was prepared by filling in a gelatin capsule according to a conventional capsule preparation method.

배합성분Ingredients 함량(mg)Content(mg) 녹차 추출물Green tea extract 100100 락토오스Lactose 400400 옥수수 전분Corn starch 400400 스테아린산 마그네슘Magnesium stearate 22

[제형예 3] 과립제[Formulation Example 3] Granules

본 발명 실시예에 따른 녹차 추출물 50mg, 무수결정 포도당 250mg 및 전분 550mg을 혼합하고, 유동층 과립기를 사용하여 과립으로 성형한 후 포에 충진하였다.50 mg of green tea extract, 250 mg of anhydrous crystalline glucose, and 550 mg of starch according to an embodiment of the present invention were mixed, molded into granules using a fluid bed granulator, and then filled into a cloth.

배합성분Ingredients 함량(mg)Content(mg) 녹차 추출물Green tea extract 5050 무수결정 포도당Anhydrous glucose 250250 전분Starch 550550

[제형예 4] 비누 [Formulation Example 4] Soap

배합성분Ingredients 함량(%)content(%) 녹차 추출물Green tea extract 5.005.00 유지maintain 적량Appropriate amount 수산화나트륨Sodium hydroxide 적량Appropriate amount 염화나트륨Sodium chloride 적량Appropriate amount 향료Spices 적량Appropriate amount 정제수Purified water 잔량Balance

[제형예 5] 로션 [Formulation Example 5] Lotion

배합성분Ingredients 함량(%)content(%) 녹차 추출물Green tea extract 5.005.00 L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염L-ascorbic acid-2-phosphate magnesium salt 1.001.00 수용성 콜라겐 (1 % 수용액)Water-soluble collagen (1% aqueous solution) 1.001.00 시트르산나트륨Sodium citrate 0.100.10 시트르산Citric acid 0.050.05 감초 엑기스Licorice extract 0.200.20 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 3.003.00 정제수Purified water 잔량Balance

[제형예 6] 크림[Formulation Example 6] Cream

배합성분Ingredients 함량(%)content(%) 녹차 추출물Green tea extract 3.003.00 폴리에틸렌글리콜모노스테알레이트Polyethylene glycol monostearate 2.002.00 자기유화형모노스테아르산글리세린Self-emulsifying type glycerin monostearate 5.005.00 세틸알코올Cetyl alcohol 4.004.00 스쿠알렌Squalene 6.006.00 트리2-에틸헥산산글리세릴Glyceryl tri2-ethylhexanoate 6.006.00 스핑고당지질Sphingoglycolipid 1.001.00 1.3-부틸렌글리콜1.3-butylene glycol 7.007.00 정제수Purified water 잔량Balance

[제형예 7] 연고[Formulation Example 7] Ointment

배합성분Ingredients 함량(%)content(%) 녹차 추출물Green tea extract 5.005.00 폴리비닐알코올Polyvinyl alcohol 13.0013.00 L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염L-ascorbic acid-2-phosphate magnesium salt 1.001.00 라우로일히드록시프롤린Lauroylhydroxyproline 1.001.00 수용성 콜라겐 (1 % 수용액)Water-soluble collagen (1% aqueous solution) 2.002.00 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 3.003.00 에탄올ethanol 5.005.00 정제수Purified water 잔량Balance

[제형예 8] 미용액 제조[Formulation Example 8] Preparation of essence

배합성분Ingredients 함량(%)content(%) 녹차 추출물Green tea extract 3.003.00 히드록시에틸렌셀룰로오스(2 % 수용액)Hydroxyethylene cellulose (2% aqueous solution) 12.0012.00 크산탄검(2 % 수용액)Xanthan gum (2% aqueous solution) 2.002.00 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 6.006.00 진한 글리세린Dark glycerin 4.004.00 히알루론산나트륨 (1 % 수용액)Sodium hyaluronate (1% aqueous solution) 2.002.00 정제수Purified water 잔량Balance

[제형예 9] 건강식품[Formulation Example 9] Health Food

배합 성분Ingredients 함량content 녹차 추출물Green tea extract 2mg2mg 비타민 A 아세테이트Vitamin A acetate 70μg70μg 비타민 EVitamin E 1.0mg1.0mg 비타민 B1Vitamin B1 0.13mg0.13mg 비타민 B2Vitamin B2 0.15mg0.15mg 비타민 B6Vitamin B6 0.5mg0.5mg 비타민 B12Vitamin B12 0.2μg0.2μg 비타민 CVitamin C 10mg10mg 비오틴Biotin 10μg10μg 니코틴산아미드Nicotinic acid amide 1.7mg1.7mg 엽산Folic acid 50μg50μg 판토텐산 칼슘Calcium pantothenate 0.5mg0.5mg 황산 제1철Ferrous sulfate 1.75mg1.75mg 산화아연Zinc oxide 0.82mg0.82mg 탄산마그네슘Magnesium carbonate 25.3mg25.3mg 제1인산칼륨Potassium Phosphate Monobasic 15mg15mg 제2인산칼슘Dicalcium phosphate 55mg55mg 구연산칼륨Potassium citrate 90mg90mg 탄산칼슘Calcium carbonate 100mg100mg 염화마그네슘Magnesium chloride 24.8mg24.8mg

[제형예 10] 건강음료[Formulation Example 10] Health Drink

배합성분Ingredients 함량content 녹차 추출물Green tea extract 50mg50mg 구연산Citric acid 1000mg1000mg 올리고당oligosaccharide 100 g100 g 타우린Taurine 1g1g 정제수Purified water 잔량Balance

Claims (11)

녹차 추출물을 유효성분으로 포함하며, 케라틴 1(KRT 1), 클라우딘 1(CLDN 1), 클라우딘 4(CLDN 4), 및 오클루딘(OCLN)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 발현을 복구시키는, 미세먼지에 의한 피부 손상 케어용 화장료 조성물.Containing green tea extract as an active ingredient, fine Cosmetic composition for the care of skin damage caused by dust. 녹차 추출물을 유효성분으로 포함하며, 케라틴 1(KRT 1), 클라우딘 1(CLDN 1), 클라우딘 4(CLDN 4), 및 오클루딘(OCLN)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 발현을 복구시키는, 미세먼지에 의한 피부 손상 케어용 건강 기능식품 조성물.Containing green tea extract as an active ingredient, fine Health functional food composition for care of skin damage caused by dust. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
상기 녹차 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.000001 내지 30중량%로 포함된, 조성물.
The method according to claim 1 or 2,
The green tea extract is contained in an amount of 0.000001 to 30% by weight based on the total weight of the composition.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
상기 녹차 추출물은 물, C1 - C6의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 디에틸아세테이트, 디에틸에테르, 벤젠, 클로로포름 및 헥산으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 추출용매로 추출된 것인, 조성물.
The method according to claim 1 or 2,
The green tea extract is water, any one or more extraction solvents selected from the group consisting of water, C 1 -C 6 anhydrous or aqueous lower alcohol, acetone, butylene glycol, ethyl acetate, diethyl acetate, diethyl ether, benzene, chloroform and hexane The composition is extracted with.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
상기 조성물의 유효성분은 피부 장벽의 타이트 정션(tight junction)에 작용하는 것인, 조성물.
The method according to claim 1 or 2,
The active ingredient of the composition is to act on the tight junction of the skin barrier, the composition.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
상기 미세먼지는 비소(arsenic), 카드뮴(cardmium), 납(lead), 및 니켈(nikel) 중 하나 이상을 포함하는, 조성물.
The method according to claim 1 or 2,
The composition, wherein the fine dust comprises one or more of arsenic, cadmium, lead, and nickel.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
상기 미세먼지는 입자크기가 PM 10 이하인, 조성물.
The method according to claim 1 or 2,
The fine dust has a particle size of 10 PM or less, composition.
제 2 항에 있어서,
상기 녹차 추출물은 0.02 내지 6 mg/kg/일의 양으로 섭취되는, 조성물.
The method of claim 2,
The green tea extract is consumed in an amount of 0.02 to 6 mg / kg / day, composition.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20050054532A (en) * 2003-12-05 2005-06-10 염재한 A washing water of green tea
KR100883399B1 (en) * 2007-07-11 2009-02-11 고려대학교 산학협력단 Production methods of green tea extracts for preventing and curing skin diseases such as an acne and atopy
KR101461109B1 (en) * 2007-11-30 2014-11-13 (주)아모레퍼시픽 Composition for hair dyeing using green tea
KR101653755B1 (en) * 2016-01-06 2016-09-02 주식회사 씨앤피코스메틱스 Cosmetic composition for bloclking particulate matter

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