KR102137320B1 - 신규 호열성 메탄 생성 미생물 - Google Patents

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한양대학교 산학협력단
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Abstract

본 명세서는 신규 호열성 메탄 생성 미생물에 관한 것이다. 본 명세서에 의해 개시되는 내용에 따른 신규 호열성 메탄 생성 미생물은 메타노터모박터(Methanothermobacter) KCTC 13651BP 이다.

Description

신규 호열성 메탄 생성 미생물 {New Methanothermobacter}
본 명세서에 의해 개시되는 내용은 신규 호열성 메탄 생성 미생물에 관한 것으로, 보다 구체적으로, 메타노터모박터(Methanothermobacter) KCTC 13651BP에 관한 것이다.
메탄균(Methanogen)과는 혐기성 조건으로 메탄을 합성하는 세균의 총칭이다. 메탄균은 지극히 광범위한 환경에 생육하는 것으로 알려져 있다. 메탄균은 동물의 소화기관이나 늪 지대, 해저 퇴적물, 지각 내에 넓게 존재하며, 지구상에서 방출되는 메탄의 대부분을 합성하고 있다. 특히, 소의 장내(루멘)나, 사람의 결장 등에도 존재해, 비교적 친밀한 장소에 생식 하는 생물로서 인지되고 있다. 또, 진흙이나 수질 정화에 있어서의 응용 등도 시도되고 있다.
일반적으로, 메탄균의 생육 기질은 이산화탄소인 것으로 알려져 있다. 그러나, 이 그 밖에도 다양한 탄소원을 메탄으로 변환할 수 있는 메탄균도 존재한다. 예를 들면, Methanosarcinacea strain의 메탄균은, 일산화탄소, 초산, 메탄올, 메탄티올, 메틸아민 등을 이용할 수 있고, 유정으로부터 분리된 Methanolobus siciliae 등은 디메틸술피드를 자화 할 수 있다. 또, Methanogenium organophilum은 제1급 알코올인 에탄올이나 1-프로파놀을 이용할 수 있다. 또 제2급 알코올(ISO 프로파놀, 시크로펜타노르, 2-부탄올등)을 전자 공여체로서 이용하는 것도 있다.
본 출원에 의해 개시되는 내용은 신규 호열성 메탄 생성 미생물, 예를 들어, 메타노터모박터(Methanothermobacter) KCTC 13651BP을 제공한다.
본 출원에 의해 개시되는 기술의 양태에 따르면, 신규 호열성 메탄 생성 미생물, 예를 들어, 메타노터모박터(Methanothermobacter) KCTC 13651BP 균주가 제공된다. 상기 균주는 이산화탄소 및 수소 기질로부터 메탄 및 물을 생성하는 것을 특징으로 한다.
본 명세서에 의해 개시되는 기술에 따르면, 다음과 같은 효과가 발생한다.
신규 호열성 메탄 생성 미생물, 예를 들어 메타노터모박터(Methanothermobacter) KCTC 13651BP을 제공할 수 있다. 나아가, 메탄 생성 효율이 더욱 증대된 신규 호열성 메탄 생성 미생물을 제공할 수 있다.
도 1은 일 실시예에 개시된 단일 균주 검증 결과를 나타낸다. 2번 레인의 단일 마크(노란색 원)를 통하여, 분리한 균주가 단일 균주인 것을 확인하였다. 1번 레인은 증류수에 동일 고세균 전용 Specific프라이머를 넣어 PCR 증폭한 대조군이며, 3번 레인은 마커를 나타낸다.
도 2는 일 실시예에 개시된 16S rRNA 서열 분석으로부터 획득한 계통수를 나타낸다.
도 3 내지 도 7은 일 실시예에 개시된 온도에 따른 메탄의 생성과 기질의 감소 측정 결과를 나타낸다.
도 8은 일 실시예에 개시된 온도에 따른 VVD(volumes of gas per volume of reactor per day) 측정 결과를 나타낸다.
도 9는 일 실시예에 개시된 온도에 따른 Optical density 측정 결과를 나타낸다.
도 10은 일 실시예에 개시된 온도에 따른 pH 측정 결과를 나타낸다.
도 11은 일 실시예에 개시된 온도에 따른 VVD 측정 결과를 나타낸다.
도 12는 일 실시예에 개시된 온도에 따른 Optical density 측정 결과를 나타낸다.
도 13은 일 실시예에 개시된 온도에 따른 pH측정 결과를 나타낸다.
도 14는 일 실시예에 개시된 온도에 따른 VVD 측정 결과를 나타낸다.
도 15는 일 실시예에 개시된 온도에 따른 Optical density 측정 결과를 나타낸다.
도 16은 일 실시예에 개시된 온도에 따른 pH측정 결과를 나타낸다.
도 17은 일 실시예에 개시된 온도에 따른 메탄 가스 축적량 측정 결과를 나타낸다.
도 18은 일 실시예에 개시된 온도에 따른 세포단위당 메탄생성율(VVD/Optical density) 측정 결과를 나타낸다.
도 19는 일 실시예에 개시된 균주에 따른 VVD 측정 결과를 나타낸다.
도 20은 일 실시예에 개시된 균주에 따른 Optical density 측정 결과를 나타낸다.
본 명세서에서 사용되는 대표적인 용어에 대한 정의는 이하와 같다.
용어 "균주(strain)"는 단일 개체나 순수 분리 배양된 생명체의 개체군(population)을 지칭한다. 보다 구체적으로, 미생물이나 세포 등을 분리해서 특정한 배지를 사용하여 순수 배양하고, 계속 심어서 계대배양할 때, 그 계통을 균주라 지칭할 수 있다. 상기 균주는 같은 종에 있는 최종계의 단계의 구분단위일 수 있다.
용어 "균주 동정(strain identification)"은 상기 균주를 계통 분류상의 체제에 따라 검색하여 종명을 밝히는 것을 지칭한다. 상기 균주 동정은 당업계에 공지된 방법을 이용할 수 있으며, 예를 들어, 16S rRNA 유사성에 의한 균주 동정, DNA-DNA 혼성화 정도(DDH)에 의한 균주 동정 등이 있으나, 이로 제한되는 것이 아니다.
본 명세서에 개시된 일 실시예에 의하면, 16S rRNA 유사성에 의한 균주 동정을 위하여 고세균 특이적 16S rRNA 프라이머가 사용될 수 있다. 상기 고세균 특이적 16S rRNA 프라이머는 제1 프라이머(GAT TAA GCC ATG CAA GTC GAA CGA; 서열 번호 2)가 포워드 프라이머로 이용되고, 제2 프라이머(CTC CTC AAA GAA CCC AGA TTC GAC; 서열 번호 3)가 리버스 프라이머로 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
용어 “배양(cultivation)은 미생물 및 발생 중인 동식물의 배 등의 생물체나 기관·조직·세포 등의 생물체 일부를 인공적으로 조절한 환경조건에서 생육 시키는 것을 의미한다. 상기 배양 시 배양하는 생물체의 종류에 따라 각종 영양물질이나 삼투압·pH·온도 등 이 결정될 수 있다.
용어 “계대 배양(subculture)"은 세포 증식을 위해 새로운 배양 접시에 옮겨 세포의 대(代)를 계속 이어서 배양하는 것을 의미한다. 상기 배양 또는 계대 배양은 당업계에 공지된 방법을 이용할 수 있다.
용어 "약"이라는 것은 참조 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이에 대해 30, 25, 20, 25, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1% 정도로 변하는 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이를 의미한다.
이러한 용어들에 더하여, 필요한 경우 기타 용어들이 명세서 내의 다른 곳에서 정의된다. 본원에서 달리 명확하게 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 업계 용어들은 업계에서 인식하는 의미를 가질 것이다.
이하, 본 명세서에 의해 개시되는 내용을 상세히 설명한다.
본 명세서에 의해 개시되는 일 양태에 따르면, 신규 메탄 생성 균주가 제공될 수 있다.
본 발명에 따른 균주는 고온 혐기소화소의 슬러지에서 분리하였다. 구체적으로, 상기 슬러지를 Basic anaerobic Medium에 배양하고 메탄 생성을 분석함으로써 메탄생성능이 있는 균주만을 선별하였다. 이어서 동일한 배지를 계대 배양하여 균주를 분리하였으며, 선별된 균주를 동정함으로써 선별된 균주가 메타노터모박터(Methanothermobacter) 속 균주임을 확인하였다. 미생물 기탁기관인 한국생명공학연구원 생물자원센터에 2018년 10월 2일자로 기탁하였으며, 기탁번호 KCTC 13651BP를 부여받았다.
상기 신규 메탄 생성 균주는 이산화탄소 및 수소 기질로부터 메탄 및 물을 생성할 수 있다.
상기 메탄 및 물의 생성비는 1:1.5 내지 1:2.5 일 수 있다. 바람직하게는, 상기 메탄 및 물의 생성비는 1:2 일 수 있다.
상기 이산화탄소 및 수소 기질의 반응비는 1:3.5 내지 1:4.5 일 수 있다. 바람직하게는, 상기 이산화탄소 및 수소 기질의 반응비는 1:4 일 수 있다.
상기 반응을 요약하면, 다음과 같은 반응 공식이 될 수 있다.
CO2 + 4H2 → CH4 +2H2O
상기 신규 메탄 생성 균주는 바이오에너지 생산 미생물일 수 있다.
상기 바이오에너지는 바이오메탄일 수 있다. 상기 바이오메탄은 바이오 가스 에너지로 활용될 수 있다. 상기 바이오메탄은 전기 생산 또는 열 생산에 이용될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에 의해 개시되는 신규 메탄 생성 균주는 다양한 환경에서 생장할 수 있다. 또한, 본 명세서에 의해 개시되는 신규 메탄 생성 균주는 다양한 환경에서 메탄 생성능을 보유할 수 있다.
상기 다양한 환경은 다양한 온도 범위일 수 있다.
일 구현예에 의하면, 본 명세서에 의해 개시되는 신규 메탄 생성 균주는 다양한 온도 범위에서 생장할 수 있다. 예를 들어, 30℃ 내지 80℃ 온도에서 생장할 수 있다. 바람직하게는, 45℃ 내지 65℃ 온도에서 생장할 수 있다. 상기 신규 메탄 생성 균주는 호열성 균일 수 있다.
다른 구현예에 의하면, 본 명세서에 의해 개시되는 신규 메탄 생성 균주는 다양한 온도 범위에서 메탄 생성능을 보유할 수 있다. 예를 들어, 40℃ 내지 75℃ 온도에서 메탄 생성능을 보유할 수 있다. 바람직하게는, 50℃ 내지 60℃ 온도에서 메탄 생성능을 보유할 수 있다.
상기 다양한 환경은 다양한 pH 범위일 수 있다. 예를 들어, 상기 pH는 산성, 약산성, 중성, 약염기성, 염기성 환경일 수 있다.
일 구현예에 의하면, 본 명세서에 의해 개시되는 신규 메탄 생성 균주는 다양한 pH 범위에서 배양할 수 있다. 예를 들어, 중성의 pH에서 배양할 수 있다. 바람직하게는, pH 7 내지 pH 8 의 중성 pH에서 배양할 수 있다.
상기 다양한 환경은 다양한 염 종류일 수 있다. 예를 들어, 상기 염은 Na+, K+, Ca2+, Mg2+, NH4 +, Cl-, SO4 2-, NO3 2-, CO3 2- 등일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 다양한 환경은 다양한 미량원소일 수 있다. 예를 들어, 상기 미량 원소는 trace solution 및 vitamin solution 중 어느 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 trace solution은 NTA, MgSO4, MnSO4, NaCl, FeSO4, CaCl2, CoCl2, ZnCl2, CuSO4, AlK(SO4)2, H3BO3, Na2MoO4, NiCl2 및 Na2WO4 중 어느 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 vitamin solution은 Biotin, Folic acid, Pyridoxine, Riboflavin, thiamin, nicotinic acid, pantothenic acid, B-12, P-aminobenzoic acid 및 Thioctic acid 중 어느 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
이하, 실시예를 통하여 본 명세서을 더욱 상세히 설명하고자 한다.
아래 설명하는 실시예들에는 다양한 변경이 가해질 수 있다. 아래 설명하는 실시예들은 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 이들에 대한 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
실시예를 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 실시예의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.
[실시예 1] 단일 균주 분리 방법
고온 혐기소화소의 슬러지에서 균주의 분리를 위해 슬러지를 Basic anaerobic Medium을 넣은 120mL 세럼 버틀에 enrichment (7일 이상, 60℃ 배양) 시킨다.
Basic anaerobic Medium 조성
Buffer(g/L) K2HPO4 3H2O 0.4 g
Nutrient (g/L) NH4Cl 1 g
NaCl 0.1 g
MgCl-6H2O 0.1 g
CaCl2-2H2O 0.05 g
Na2S-9H2O 0.5 g
NaHCO3 4 g
Vitamin solution (g/L) Biotin 2.0 mg
Folic acid 2.0 mg
Pyridoxine HCl 10.0 mg
Riboflavin 5.0 mg
thiamin 5.0 mg
nicotinic acid 5.0 mg
pantothenic acid 5.0 mg
B-12 0.1 mg
P-aminobenzoic acid 5.0 mg
Thioctic acid 5.0 mg
Trace solution (g/L) FeCl24H2O 2 g
H3BO3 0.05 g
ZnCl2 0.05 g
CuCl2 2H2O 0.038 g
MnCl2 4H2O 0.05 g
(NH4)6Mo7O24 4H2O 0.05 g
AlCl3 0.05 g
CoCl2 6H2O 0.05 g
NiCl2 6H2O 0.092 g
EDTA 0.5 g
Na2SeO3 5H2O 0.1 g
pH 7
메탄 생성을 분석을 통해서 가장 높은 메탄 생성율을 보일 때 만들어놓은 고체 배지에 streaking 하였다. 균을 streaking한 plate를 15일 이상, 60℃ 정치 배양기에 배양하였다. 다른 모양의 Colony는 다른 균이라는 가정하에 다른 모양의 colony을 loop으로 picking하여 액체 배양을 하였다. Colony을 transfer해준 액체배양액을 분석하여 메탄이 생성이 되거나 optical density가 증가하는 것이 보이면 메탄 생성균 specific 프라이머 (서열 번호 2 및 3)를 사용해서 PCR을 진행하고, 전기 영동을 통해 단일 균주 여부를 확인하였다(도 1).
[실시예 2] 균주 동정
분리한 균주가 단일 균주로 확인이 되어, Methanothermobacter sp. BS-16으로 명명하고, 고세균 전용 Specific프라이머를 이용하여 16S rRNA 서열 분석을 진행하였다(표 2).
고세균 전용 Specific프라이머
No. 종류 5'-3' sequence 서열 번호
1 Forward 프라이머 GAT TAA GCC ATG CAA GTC GAA CGA 2
2 Reverse 프라이머 CTC CTC AAA GAA CCC AGA TTC GAC 3
그 결과, 16S rRNA 서열 (서열 번호 1)을 확보하였다.
상기 획득한 서열 번호 1의 16S rRNA 서열을 NCBI database를 통해 BLAST 한 결과, 가장 비슷한 종래 메탄생성균(Methanothermobacter marburgensis)와 Methanothermobacter sp. BS-16의 16s rRNA sequence 3군데가 다른 것을 확인하고, Methanothermobacter 속 신종 균주로 동정하였다(도 2).
[실시예 3] 균주의 균학적 성질
Methanothermobacter sp. BS-16 균주는 이산화탄소 및 수소를 기질로 사용하여 메탄 및 물을 생성하는 것을 확인하였다.
4H2 + CO2 → CH4 +2H2O
[실시예 4] 배양 조건에 따른 균주 생장능 및 메탄 생성능
본 실시예를 통해 획득한 Methanothermobacter sp. BS-16 균주의 배양조건을 탐색하기 위하여, 전술한 표 1의 Basic anaerobic Medium을 이용하여 균주를 배양하였다.
실시예 4-1: 온도 및 pH 조건 탐색 (1)
온도 범위 각 37℃, 50℃, 60℃, 70℃, 80℃ 에서 균주의 메탄 생성능 및 균주 생장능을 확인하였다. 균주의 기질인 이산화탄소+수소 (1+4)의 혼합가스를 초기 1회 주입하고 배양하였다 (Duplicate로 진행).
온도에 따른 메탄의 생성과 기질의 감소를 확인하기 위해서 GC-TCD으로 메탄, 수소, 이산화탄소를 24시간 마다 측정하였다(도 3 내지 도 7).
온도에 따른 메탄의 생성능을 확인하기 위하여, VVD(volumes of gas per volume of reactor per day)를 측정하였다 (도 8).
온도에 따른 균주의 생장능을 확인하기 위하여, 각 온도 조건에서 Optical density을 측정하였다(도 9).
온도에 따른 pH 변화를 확인하기 위하여, 각 온도 조건에서 pH를 측정하였다(도 10).
실시예 4-2: 온도 및 pH 조건 탐색 (2)
온도범위를 구체화시키기 위하여, 온도 범위 각 50℃, 55℃, 60℃, 65℃, 70℃에서 균주의 메탄 생성능 및 균주 생장능을 확인하였다. 균주의 기질인 이산화탄소+수소 (1+4) 의 혼합가스를 1일 1회 Gas Change하고 배양하였다 (Duplicate로 진행).
온도에 따른 메탄의 생성과 기질의 감소를 확인하기 위해서 GC-TCD으로 메탄, 수소, 이산화탄소를 24시간 마다 측정하였다.
온도에 따른 메탄의 생성능을 확인하기 위하여, VVD(volumes of gas per volume of reactor per day)를 측정하였다 (도 11)
온도에 따른 균주의 생장능을 확인하기 위하여, 각 온도 조건에서 Optical density을 측정하였다(도 12).
온도에 따른 pH 변화를 확인하기 위하여, 각 온도 조건에서 pH를 측정하였다(도 13).
실시예 4-3: 온도 및 pH 조건 탐색 (3)
배양 온도를 결정하기 위하여, 온도 범위 각 50℃, 55℃, 60℃에서 균주의 메탄 생성능 및 균주 생장능을 확인하였다. 균주의 기질인 이산화탄소+수소(1+4)의 혼합가스를 1일 2회, 12시간 간격으로 Gas Change하고 배양하였다 (Duplicate로 진행).
온도에 따른 메탄의 생성과 기질의 감소를 확인하기 위해서 GC-TCD으로 메탄, 수소, 이산화탄소를 12시간 마다 측정하였다.
온도에 따른 메탄의 생성능을 확인하기 위하여, VVD(volumes of gas per volume of reactor per day)를 측정하였다 (도 14)
온도에 따른 균주의 생장능을 확인하기 위하여, 각 온도 조건에서 Optical density을 측정하였다(도 15).
온도에 따른 pH 변화를 확인하기 위하여, 각 온도 조건에서 pH를 측정하였다(도 16).
실시예 4-4: 온도 및 pH 조건 탐색 (4)
최적 배양 온도를 결정하기 위하여, 온도 범위 각 55℃, 60℃에서 균주의 메탄 생성능 및 균주 생장능을 확인하였다. 균주의 기질인 이산화탄소+수소(1+4)의 혼합가스를 1일 2회, 12시간 간격으로 Gas Change하고 배양하였다 (Duplicate로 진행).
온도에 따른 메탄의 생성능을 확인하기 위하여, 메탄 가스 축적량을 측정하였다(도 17).
온도에 따른 메탄의 생성과 기질의 감소를 확인하기 위해서 GC-TCD으로 메탄, 수소, 이산화탄소를 12시간 마다 측정하였다.
온도에 따른 균주의 활성을 비교하기 위해서 세포 단위당 메탄 생성율(VVD/Optical density)을 측정하였다(도 18).
그 결과, 60℃에서 메탄 가스 축적량이 더 많은 것을 확인하였다.
또한, 60℃에서 VVD/OD의 활성 속도가 더 빠름을 확인하였다.
[실시예 5] 균주의 메탄 생성능 비교
종래 메탄생성균으로 알려진 Methanothermobactor marburgensis (DSM 2133), Methanothermobacter thermautotrophicus (DSM 3590) 및 본 실시예를 통해 획득한 Methanothermobacter sp. BS-16 균주의 생장능 및 메탄 생성능을 비교하였다.
전술한 표 1의 Basic anaerobic Medium을 이용하여 균주를 배양하였다.
상기 배양은 온도 60℃에서 균주의 기질인 이산화탄소+수소 (1+4)의 혼합가스를 초기 1회 주입 조건으로 배양하였다.
균주에 따른 메탄의 생성과 기질의 감소를 확인하기 위해서 GC-TCD으로 메탄, 수소, 이산화탄소를 24시간 마다 측정하였다.
균주에 따른 메탄의 생성능을 확인하기 위하여, VVD(volumes of gas per volume of reactor per day)를 측정하였다 (도 19)
균주에 따른 세포 생장능을 확인하기 위하여, Optical density을 측정하였다(도 20)
그 결과, 본 실시예를 통해 획득한 Methanothermobacter sp. BS-16 균주의 메탄 생성능이 가장 우수한 것을 확인하였다.
또한, 본 실시예를 통해 획득한 Methanothermobacter sp. BS-16 균주의 생장능이 가장 우수한 것을 확인하였다.
이들 실시예는 오로지 본 명세서에 의해 개시되는 내용을 예시하기 위한 것으로서, 본 명세서에 의해 개시되는 내용의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
한국생명공학연구원 KCTC13651BP 20181002
<110> INDUSTRY-UNIVERSITY COOPERATION FOUNDATION HANYANG UNIVERSITY <120> New Thermophilic Methanogen <130> CP18-176 <160> 3 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 1097 <212> DNA <213> Methanobacterium sp. <400> 1 tgggaccggg ataaccccgg gaaactgggg ataaacctgg ataggtgatg cggcctggaa 60 tggtgcttca ccgaaacacc cttcggggtg cccaaggatg ggtctgcggc cgattaggta 120 gttggtaggg taacggccta ccaagcccat catcggtacg ggttgtgaga gcaagagccc 180 ggagatggaa cctgagacaa ggttccaggc cctacggggc gcagcaggcg cgaaacctcc 240 gcaatgcacg caagtgcgac gggggaaccc caagtgccac tcttaacggg gtggcttttc 300 agaagtgtaa aaagcttctg gaataagggc tgggcaagac cggtgccagc cgccgcggta 360 acaccggcag ctcaagtggt agccgctttt attgggccta aagcgtccgt agccggtctg 420 ataagtctct ggtgaaatcc cacagcttaa ctgtgggaat tgctggagat actatcatga 480 ctcgaggtcg ggagaggctg gaggtactcc cagggtaggg gtgaaatcct gtaatcctgg 540 gaggaccacc tgtggcgaag gcgtccagct ggaacgaacc tgacggtgag ggacgaaagc 600 caggggcgcg aaccggatta gatacccggg tagtcctggc cgtaaacgat gtggacttgg 660 tgttgggatg gcttcgagct gccccagtgc cgaagggaag ctgttaagtc caccgcctgg 720 gaagtacggc cgcaaggctg aaacttaaag gaattggcgg gggagcacca caacgcgtgg 780 agcctgcggt ttaattggat tcaacgccgg acatctcacc aggggcgaca gcagtatgat 840 ggccaggttg atgaccttgc ctgacgagct gagaggaggt gcatggccgc cgtcagctcg 900 taccgtgagg cgtcctgtta agtcaggcaa cgagcgagac ccacgccctt agttaccagc 960 gggacccttt ggggttgccg ggcacactaa ggggaccgcc agtgataaac tggaggaagg 1020 agtggacgac ggtaggtccg tatgccccga atcccctggg caacacgcgg gctacaatgg 1080 cctggacaat gggttcc 1097 <210> 2 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 2 gattaagcca tgcaagtcga acga 24 <210> 3 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 3 ctcctcaaag aacccagatt cgac 24

Claims (7)

  1. 메탄 생성능을 갖는 균주인
    메타노터모박터(Methanothermobacter) KCTC 13651BP.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 균주는 이산화탄소 및 수소 기질로부터 메탄 및 물을 생성하는 것을 특징으로 하는
    메타노터모박터(Methanothermobacter) KCTC 13651BP.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 메탄 및 물의 생성비는 1:1.5 내지 1:2.5 인 것을 특징으로 하는
    메타노터모박터(Methanothermobacter) KCTC 13651BP.
  4. 제2항에 있어서,
    상기 이산화탄소 및 수소 기질의 반응비는 1:3.5 내지 1:4.5 인 것을 특징으로 하는
    메타노터모박터(Methanothermobacter) KCTC 13651BP.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 균주는 50℃ 내지 70℃에서 메탄 생성(Methanation) 하는 것을 특징으로 하는
    메타노터모박터(Methanothermobacter) KCTC 13651BP.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 균주는 하기 표 1의 조성을 갖는 Basic anaerobic medium에서 생장 (Cell growth) 하는 것을 특징으로 하는
    메타노터모박터(Methanothermobacter) KCTC 13651BP
    Figure 112019129977043-pat00021
    .
  7. 제1항에 있어서,
    상기 균주는 서열번호 1의 16S rRNA 서열을 가지는 것을 특징으로 하는
    메타노터모박터(Methanothermobacter) KCTC 13651BP.
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Title
Anaerobe. 2010, 16, pp. 54-59.*
APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY. 2007, 73(3), pp. 740-749.*
Archaea. 2011: 973848, pp. 1-23.
International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology. 2000, 50(1), pp. 43-53.

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