KR102097992B1 - 신규한 중증열성혈소판감소증후군 바이러스 - Google Patents

신규한 중증열성혈소판감소증후군 바이러스 Download PDF

Info

Publication number
KR102097992B1
KR102097992B1 KR1020180078507A KR20180078507A KR102097992B1 KR 102097992 B1 KR102097992 B1 KR 102097992B1 KR 1020180078507 A KR1020180078507 A KR 1020180078507A KR 20180078507 A KR20180078507 A KR 20180078507A KR 102097992 B1 KR102097992 B1 KR 102097992B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
leu
ser
gly
glu
val
Prior art date
Application number
KR1020180078507A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20200005165A (ko
Inventor
최여정
박수진
김영일
유민아
Original Assignee
아이디바이오 주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 아이디바이오 주식회사 filed Critical 아이디바이오 주식회사
Priority to KR1020180078507A priority Critical patent/KR102097992B1/ko
Publication of KR20200005165A publication Critical patent/KR20200005165A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102097992B1 publication Critical patent/KR102097992B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56983—Viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/12011—Bunyaviridae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/12011—Bunyaviridae
    • C12N2760/12034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
    • G01N2333/08—RNA viruses
    • G01N2333/175—Bunyaviridae, e.g. California encephalitis virus, Rift valley fever virus, Hantaan virus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

본 발명은 신규한 유전형의 중증열성혈소판감소증후군 바이러스 및 이의 면역원성 조성물로서의 용도에 관한 것으로, 본 발명의 바이러스들은 중증열성 혈소판 감소증 바이러스들은 각각 계통학적으로 A형 및 F형에 속하나, 종래의 유전자형의 혈소판 감소증 바이러스들과 유전적으로 상이한 신규한 바이러스들이므로, 어느 특정 유전형의 바이러스만으로는 제한된 방어능을 보이는 백신의 특성상, 본 발명의 신규한 바이러스들을 SFTSV에 대한 교차 면역원성이 우수한 백신으로서 유용하게 이용할 수 있다.

Description

신규한 중증열성혈소판감소증후군 바이러스{NOBLE SEVERE FEVER WITH THROMBOCYTOPENIA SYNDROME VIRUSES}
본 발명은 신규한 중증열성혈소판감소증후군 바이러스 및 이의 면역원성 조성물로서의 용도에 관한 것이다.
중증열성혈소판감소증후군 (Severe fever with thrombocytopenia syndrome, SFTS)는 고열, 구토, 설사, 혈소판감소, 백혈구감소 및 다발성 장기부전과 같은 증상을 동반하며, 치사율이 6-30%에 이르는 심각한 질환이다 (Yu XJ et al., N. Engl. J. Med. 2011; 364:1523-32; Ding F et al Clin Infect Dis 2013; 56: 1682-3).
SFTS의 원인병원체는 SFTSV (severe fever thrombocytopenia syndrome virus, 중증열성 혈소판 감소증 바이러스) (HB29 스트레인)이며, 버냐바이러스과(Bunyaviridae)에 속한다. 버냐바이러스과는 세개의 분절을 포함한 음성가닥(negative-strand) RNA 바이러스인데, 오르토버냐바이러스(Orthobunyavirus), 한타바이러스(Hantavirus), 나이로바이러스(Nairovirus), 플레보바이러스(Phlebovirus), 토스포바이러스(Tospovirus)를 포함하는 다섯개의 속(genus)로 이루어져 있다. SFTSV는 플레보바이러스 속(Phlebovirus genus)에 속하며, 여기에 리프트밸리열바이러스(Rift valley fever virus) 등이 속해있다. SFTSV는 2011년에 중국에서 최초로 보고되었고 (Yu XJ et al. ibid), 중국 뿐 아니라 한국 그리고 일본에서도 지속적으로 발병하고 있는 신 변종 바이러스이다. SFTSV는 지름이 80-100 nm인 공 모양의 바이러스이다. 이 바이러스는 single-stranded negative sense RNA segment인 큰 분절(large (L) segment), 중간 분절(medium (M) segment) 및 작은 분절(small (S) segment) 이렇게 3개의 유전자를 지니고 있다.
SFTS 바이러스는 작은소참진드기(Haemaphysalis longicornis)를 매개체로 하는 것으로, 상기 진드기는 한국에도 널리 퍼져 있는 것으로 알려져 있다 (Chae JS et al. J Vet Sci 2008; 9: 285-93; Kim CM et al. Appl Environ Microbiol 2006; 72: 5766-76). SFTS 바이러스의 혈청전환 및 바이러스혈증이 염소, 양, 소, 돼지 및 개와 같은 사육동물에서 발견되었으며, 이러한 동물도 SFTS 바이러스가 퍼진 지역에서 중간 매개체로 작용하는 것으로 여겨지고 있다 (Zhao L et al. Emerg Infect Dis 2013; 18: 963-5; Niu G et al. Emerg Infect Dis 2013; 19: 756-63). 환자의 혈액에는 SFTSV가 검출되며 특히 중증 환자의 혈액에는 SFTSV 농도가 매우 높으므로 혈액을 통해 사람-사람 간 전파가 가능하다 (Tang X, Wu W, Wang H, et al. J Infect Dis 2013;207:736-739.).
SFTSV에 대한 항바이러스제는 아직 개발되지 않아, SFTS 치료는 수혈, 신대체요법 등 장기부전에 대한 보존요법이 근간을 이룬다. 중국에서는 2012년부터 리바비린 정주를 치료지침에 도입하고 있으나 최근 발표된 치료 결과에서는 리바비린 투여군과 비투여군 간 사망률에 차이는 없었다. 따라서, SFTSV에 대한 백신이 필요하나, 아직 백신이 개발되지 않은 실정이다.
본 발명은 신규한 중증열성 혈소판 감소증 바이러스 및 이를 이용한 면역원성 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 신규한 중증열성 혈소판 감소증 바이러스를 제공한다.
또한, 본 발명은 중증열성 혈소판 감소증의 예방 또는 치료용 면역원성 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 중증열성 혈소판 감소증 바이러스 또는 이의 항원에 대한 항체를 제공한다.
또한, 본 발명은 중증열성 혈소판 감소증 바이러스의 진단 키트를 제공한다.
또한, 본 발명은 중증열성 혈소판 감소증 바이러스 항체를 검출하는 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 중증열성 혈소판 감소증 바이러스에 대한 항혈청을 생산하는 방법을 제공한다.
아울러, 본 발명은 중증열성 혈소판 감소증 진단에 관한 정보를 제공하는 방법을 제공한다.
본 발명의 중증열성 혈소판 감소증 바이러스는 계통학적으로 A형 및 F형에 속하면서, 종래의 혈소판 감소증 바이러스와 유전적으로 상이한 신규한 바이러스이므로, 본 발명의 신규한 바이러스들을 SFTSV에 대한 교차 면역원성이 우수한 백신으로서 유용하게 이용할 수 있다.
도 1은 본 발명의 신규한 SFTSV 2종과 중국, 일본, 한국에서 분리된 SFTSV들의 L 유전자 계통도를 나타낸 도이다.
도 2는 본 발명의 신규한 SFTSV 2종과 중국, 일본, 한국에서 분리된 SFTSV들의 M 유전자 계통도를 나타낸 도이다.
도 3은 본 발명의 신규한 SFTSV 2종과 중국, 일본, 한국에서 분리된 SFTSV들의 S(NP)유전자 계통도를 나타낸 도이다.
도 4는 본 발명의 신규한 SFTSV 2종과 중국, 일본, 한국에서 분리된 SFTSV들의 S(NS) 유전자 계통도를 나타낸 도이다.
도 5는 본 발명의 A형 및 F형 유전형에 속하는 신규한 바이러스 2종의 L 유전자, M 유전자 및 S 유전자에서의 아미노산 변이 부위를 나타낸 도이다:
concensus: 모든 type의 SFTSV를 기준으로 만든 서열; 및
붉은색 박스: Consensus와 다르게 특정 Genotype에서 나타나는 변이.
도 6은 본 발명에서 분리한 새로운 세부 유전형 A (CB11)및 F (CB10)의 바이러스들을 불활화한 백신의 효과를 생존율, 체중 변화 및 체온 변화를 통해 확인한 도이다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 구현예로 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. 다만, 하기 구현예는 본 발명에 대한 예시로 제시되는 것으로, 당업자에게 주지 저명한 기술 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략할 수 있고, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않는다. 본 발명은 후술하는 특허청구범위의 기재 및 그로부터 해석되는 균등 범주 내에서 다양한 변형 및 응용이 가능하다.
또한, 본 명세서에서 사용되는 용어(terminology)들은 본 발명의 바람직한 실시예를 적절히 표현하기 위해 사용된 용어들로서, 이는 사용자, 운용자의 의도 또는 본 발명이 속하는 분야의 관례 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 본 용어들에 대한 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
일 측면에서, 본 발명은 L 유전자의 ORF (6255bp)에서 발현된 단백질 (서열번호 9)의 1061번 아미노산이 글루타메이트이고, M 유전자의 ORF (3222bp)에서 발현된 단백질 (서열번호 10)의 18번째 아미노산이 글리신, 562번째 아미노산이 글리신, 960번째 아미노산이 세린, 988번째 아미노산이 아르기닌 혹은 1053번째 아미노산이 류신이며, S 유전자의 ORF (1674bp)에서 발현된 단백질 NS(294aa) (서열번호 12)의 145번째 아미노산이 라이신 또는 171번째 아미노산이 글루타메이트인, 중증열성 혈소판 감소증 바이러스(severe fever thrombocytopenia syndrome virus, SFTSV)에 관한 것이다.
일 구현예에서, 상기 중증열성 혈소판 감소증 바이러스는 유전형 A에 속하며, 기존의 유전형 A로 분류되던 표준 바이러스의 M 유전자의 ORF (3222bp)에서 발현된 단백질의 18번째 아미노산인 세린이 글리신으로 치환된, 또는 960번째 아미노산인 트레오닌이 세린으로 치환된 바이러스일 수 있다.
일 구현예에서, 상기 중증열성 혈소판 감소증 바이러스는 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 L 유전자, 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 M 유전자, 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 S(NP) 유전자 및 서열번호 4의 염기서열을 포함하는 S(NS) 유전자를 포함할 수 있다.
일 측면에서, 본 발명은 L 유전자의 ORF (6255bp)에서 발현된 단백질 (서열번호 13)의 1061번 아미노산이 아스파르트산이고, M 유전자의 ORF (3222bp)에서 발현된 단백질 (서열번호 14)의 18번째 아미노산이 세린, 562번째 아미노산이 세린, 960번째 아미노산이 트레오닌, 988번째 아미노산이 라이신 혹은 1053번째 아미노산이 메티오닌이며, S 유전자의 ORF (1674bp)에서 발현된 단백질 NS(294aa) (서열번호 16)의 145번째 아미노산이 아르기닌 또는 171번째 아미노산이 아스파르트산인, 중증열성 혈소판 감소증 바이러스에 관한 것이다.
일 구현예에서, 상기 중증열성 혈소판 감소증 바이러스는 유전형 F에 속하며, 기존의 유전형 F로 분류되던 바이러스의 L 유전자의 ORF (6255bp)에서 발현된 단백질의 1061번 아미노산인 글루타메이트가 아스파르트산으로 치환되거나, M 유전자의 ORF (3222bp)에서 발현된 단백질 의 562번째 아미노산인 글리신이 세린으로 치환된 또는 1053번째 아미노산인 류신이 메티오닌으로 치환되거나, 또는 S 유전자의 ORF (1674bp)에서 발현된 단백질 NS(294aa)의 145번째 아미노산인 리신이 아르기닌으로 치환된 또는 171번째 아미노산인 글루타메이트가 아스파르트산으로 치환된 바이러스일 수 있다.
일 구현예에서, 상기 중증열성 혈소판 감소증 바이러스는 서열번호 5의 염기서열을 포함하는 L 유전자, 서열번호 6의 염기서열을 포함하는 M 유전자, 서열번호 7의 염기서열을 포함하는 S(NP) 유전자 및 서열번호 8의 염기서열을 포함하는 S(NS) 유전자를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서는 분리한 중증열성 혈소판 감소증 바이러스를 유전자 분석하고 계통학적으로 분류한 결과, 각각 A형 및 F형에 속하는 것으로 나타났으며, 이들의 유전자/아미노산 서열이 기존 유전형의 중증열성 혈소판 감소증 바이러스와 상이한 바이러스임을 밝혔다.
본 발명에서 사용되는 용어 "치환"은 각각 다른 아미노산 또는 뉴클레오티드에 의해 하나 이상의 아미노산 또는 뉴클레오티드의 교체를 의미한다.
본 발명의 중증열성 혈소판 감소증 바이러스는 마이너스 단일가닥 RNA 바이러스로 Bunyaviridae과, phlebovirus 속에 속한다. 직경 80~100nm의 구형 바이러스로 작은소참진드기를 매개체로 하며, 유전체는 large(L). Medium(M). small(S) 세그먼트로 구성되어 있으며, RNA dependent RNA polymerase(RdRp), glycoprotein precursor(M), glycoprotein N(Gn), glycoprotein C(Gc), nucleocapsid protein(NP) 및 non-structural protein(NSs)의 6개의 단백질을 코딩한다. 마이너스 또는 안티센스 가닥 (바이러스 단백질을 코딩하는 센스 또는 플러스 가닥에 대한 안티센스)은 단백질 또는 유전자가 안티센스로서 코딩되며, 유전자의 단백질로의 발현을 위해 센스 또는 플러스 가닥 RNA 생성 후, 이로부터 번역을 수행하여 단백질이 생성된다.
일 측면에서, 본 발명은 중증열성 혈소판 감소증 바이러스 또는 이의 항원을 유효성분으로 포함하는, 중증열성 혈소판 감소증의 예방 또는 치료용 면역원성 조성물에 관한 것이다.
일 구현예에서, 본 발명의 면역원성 조성물은 불활화한 중증열성 혈소판 감소증 바이러스와 약제학적으로 수용가능한 담체 (carrier) 또는 아쥬반트(adjuvant)를 포함할 수 있다.
일 구현예에서, 상기 면역원성 조성물은 백신 조성물일 수 있으며, 이의 형태는 생독 백신, 사독 백신, 약독화된 중증열성 혈소판 감소증 바이러스의 유전자를 사용하여 생산한 서브유니트 백신, 벡터 백신, 키메라 백신, DNA 및 RNA 백신으로 구성된 군으로부터 선택될 수 있다.
일 구현예에서, 상기 면역원성 조성물은 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 L 유전자, 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 M 유전자, 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 S(NP) 유전자 및 서열번호 4의 염기서열을 포함하는 S(NS) 유전자를 포함하는 중증열성 혈소판 감소증 바이러스; 및 서열번호 5의 염기서열을 포함하는 L 유전자, 서열번호 6의 염기서열을 포함하는 M 유전자, 서열번호 7의 염기서열을 포함하는 S(NP) 유전자 및 서열번호 8의 염기서열을 포함하는 S(NS) 유전자를 포함하는 중증열성 혈소판 감소증 바이러스들 또는 이들의 항원을 유효성분으로 포함할 수 있다.
본 발명의 면역원성 조성물 (즉, 백신)의 제조를 위해, 본 발명에 따른 바이러스 또는 이의 항원은 생리학적으로 허용가능한 형태로 변환된다. 이는 인플루엔자에 대한 백신접종에 사용된 백신의 제조 경험을 토대로 하여 실시될 수 있다 (Stickl, H. 등에 의해 개시됨. [1974] Dtsch. med. Wschr. 99, 2386-2392). 백신 주사의 제조를 위해 예를 들면, 바이러스 입자는 앰플 내, 바람직하게는 유리 앰플에서 1% 사람 알부민 및 2% 펩톤 존재하의 100ml의 인산-완충 식염수(PBS)에서 동결건조된다. 다르게는, 백신 주사는 제제에서 바이러스의 순차적 동결-건조에 의해 생성될 수 있다. 이 제제는 만니톨, 덱스트란, 당, 글리신, 락토오스 또는 폴리비닐피롤리돈과 같은 추가 첨가제 또는 산화 방지제 또는 비활성 가스, 안정화제 또는 생체내 투여에 적합한 재조합 단백질(예를 들면, 사람 혈청 알부민)과 같은 다른 보조제를 함유할 수 있다. 이어 유리 앰플을 밀봉하고 4℃ 및 실온 사이에서 몇 개월동안 저장할 수 있다. 그러나, 다른 요구사항이 없는 한, 상기 앰플은 바람직하게는 -20℃ 미만에서 저장될 수 있다.
예방접종 또는 치료를 위해, 동결건조물은 0.1 내지 0.5 ml의 수용액, 바람직하게는 생리 식염수 또는 트리스 완충액에 용해되며 전신적으로 또는 국소적으로, 즉 비경구, 피하, 근육내 또는 당업자에게 공지된 임의의 다른 투여경로에 의해 투여될 수 있다. 투여 형태, 복용량 및 투여횟수는 공지된 방식으로 당업자에 의해 최적화될 수 있다. 그러나 가장 일반적으로, 환자는 첫 번째 백신접종 약 한 달 내지 6주 후에 두 번째 백신접종을 받는다.
본 발명에서, 용어 "예방"이란 본 발명에 따른 면역원성 조성물의 투여에 의해 중증열성 혈소판 감소증의 발생, 확산 및 재발을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용된 용어 "치료"란 본 발명에 따른 면역원성 조성물의 투여로 중증열성 혈소판 감소증 및 이로 인한 합병증의 증세를 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다. 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면, 대한의학협회 등에서 제시된 자료를 참조하여 본원의 조성물이 효과가 있는 질환의 정확한 기준을 알고, 개선, 향상 및 치료된 정도를 판단할 수 있을 것이다.
본 발명에서 유효성분과 결합하여 사용된 "치료학적으로 유효한 양"이란 용어는 이식 거부반응에 의해 발생한 질환을 예방 또는 치료하는데 유효한 양을 의미하며, 본 발명의 조성물의 치료적으로 유효한 양은 여러 요소, 예를 들면 투여방법, 목적부위, 환자의 상태 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 인체에 사용 시 투여량은 안전성 및 효율성을 함께 고려하여 적정량으로 결정되어야 한다. 동물실험을 통해 결정한 유효량으로부터 인간에 사용되는 양을 추정하는 것도 가능하다. 유효한 양의 결정시 고려할 이러한 사항은, 예를 들면 Hardman and Limbird, eds., Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th ed.(2001), Pergamon Press; 및 E.W. Martin ed., Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed.(1990), Mack PublishingCo.에 기술되어있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 건강상태, 이식의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여, 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 생물학적 제제에 통상적으로 사용되는 담체, 희석제, 부형제 또는 둘 이상의 이들의 조합을 포함할 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 허용가능한"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다. 상기 담체는 조성물을 생체 내 전달에 적합한 것이면 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면, Merck Index, 13th ed., Merck & Co. Inc. 에 기재된 화합물, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로스 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 이용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주이용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(Mack PublishingCompany, Easton PA, 18th, 1990)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
일 구현예에서, 상기 약학적 조성물은 경구형 제형, 외용제, 좌제, 멸균 주사용액 및 분무제를 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 제형일 수 있으며, 경구형 또는 주사 제형이 더욱 바람직하다.
본 발명에서 사용되는 용어, "투여"란, 임의의 적절한 방법으로 개체 또는 환자에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며, 목적하는 방법에 따라 비 경구 투여(예를 들어 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 주사 제형으로 적용)하거나 경구 투여할 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 본 발명의 조성물의 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 통상적으로 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 다양한 부형제, 예컨대 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 함께 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제 등이 포함된다. 본 발명의 약학적 조성물은 활성 물질이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수도 있다. 바람직한 투여방식 및 제제는 정맥 주사제, 피하 주사제, 피내주사제, 근육 주사제, 점적 주사제 등이다. 주사제는 생리식염액, 링겔액 등의 수성 용제, 식물유, 고급 지방산 에스테르(예, 올레인산에칠 등), 알코올 류(예, 에탄올, 벤질알코올, 프로필렌글리콜, 글리세린 등) 등의 비수성 용제 등을 이용하여 제조할 수 있고, 변질 방지를 위한 안정화제(예, 아스코르빈산, 아황산수소나트륨, 피로아황산나트륨, BHA, 토코페롤, EDTA 등), 유화제, pH 조절을 위한 완충제, 미생물 발육을 저지하기 위한 보존제 (예, 질산페닐수은, 치메로살, 염화벤잘코늄, 페놀, 크레솔, 벤질알코올 등) 등의 약학적 담체를 포함할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개체"란, 상기 암이 발병하였거나 발병할 수 있는 인간을 포함한 원숭이, 소, 말, 양, 돼지, 닭, 칠면조, 메추라기, 고양이, 개, 마우스, 쥐, 토끼 또는 기니아 피그를 포함한 모든 동물을 의미하고, "검체"란 이로부터 분리한 전혈, 혈장, 혈청, 뇨 또는 타액일 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제를 더 포함할 수 있으며, 이때 약제학적으로 허용 가능한 첨가제로는 전분, 젤라틴화 전분, 미결정셀룰로오스, 유당, 포비돈, 콜로이달실리콘디옥사이드, 인산수소칼슘, 락토스, 만니톨, 엿, 아라비아고무, 전호화전분, 옥수수전분, 분말셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 오파드라이, 전분글리콜산나트륨, 카르나우바 납, 합성규산알루미늄, 스테아린산, 스테아린산마그네슘, 스테아린산알루미늄, 스테아린산칼슘, 백당, 덱스트로스, 소르비톨 및 탈크 등이 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0.1 중량부 내지 90 중량부 포함되는 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 바이러스 또는 이의 항원을 가지고 면역화에 반응하여 생산된 항체에 관한 것이다.
상기 항체는 전체(whole) 항체 형태일 뿐 아니라 항체 분자의 기능적인 단편을 포함한다. 전체 항체는 2개의 전체 길이의 경쇄(light chain) 및 2개의 전체 길이의 중쇄(heavy chain)를 가지는 구조이며 각각의 경쇄는 중쇄와 다이설파이드 결합(disulfide bond)으로 연결되어 있다. 항체 분자의 기능적인 단편이란 항원 결합 기능을 보유하고 있는 단편을 뜻하며, 항체 단편의 예는 (i) 경쇄의 가변영역(VL) 및 중쇄의 가변영역(VH)과 경쇄의 불변영역(CL) 및 중쇄의 첫번째 불변 영역(CH1)으로 이루어진 Fab 단편; (ii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (iii) 단일 항체의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편; (iv) VH 도메인으로 이루어진 dAb 단편(Ward ES et al., Nature 341:544-546 (1989)]; (v) 분리된 CDR 영역; (vi) 2개의 연결된 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')2 단편; (vii) VH 도메인 및 VL 도메인이 항원 결합 부위를 형성하도록 결합시키는 펩타이드 링커에 의해 결합된 단일쇄 Fv 분자(scFv); (viii) 이특이적인 단일쇄 Fv 이량체(PCT/US92/09965) 및 (ix) 유전자 융합에 의해 제작된 다가 또는 다특이적인 단편인 디아바디(diabody) WO94/13804) 등을 포함한다.
일 측면에서, 본 발명은 중증열성 혈소판 감소증 바이러스 또는 이의 항원, 또는 이에 대한 항체를 포함하는 중증열성 혈소판 감소증 바이러스의 진단 키트에 관한 것이다.
일 구현예에서, 상기 키트는 본 발명에에 따른 바이러스를 포함하는 바이러스 시료 및 상기 항원-항체 복합체 검출용 시약을 포함할 수 있다. 상기 항원-항체 복합체 검출용 시약은 방사상면역분석, ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay) 또는 면역형광분석용 시약을 포함한다.
일 구현예에서는 항원-항체 복합체 검출은 항원 항체 결합을 통해 항체 및/또는 항원을 간단하게 검출할 수 있는 Ouchterlony 플레이트, 웨스턴블랏, Crossed IE, Rocket IE, Fused Rocket IE, Affinity IE와 같은 면역 전기영동 (Immuno Electrophoresis)로 달성될 수 있다. 이러한 방법에 사용되는 시약 또는 물질은 공지된 것으로서, 예를 들면 항원-항체반응, 항원에 특이적으로 결합하는 기질, 핵산 또는 펩타이드 앱타머, 복합체와 상호작용하는 수용체 또는 리간드 또는 보조인자와의 반응을 통해 검출될 수 있거나, 또는 질량분석기를 이용할 수 있다. 상기 본원의 항원-항체 복합체와 특이적으로 상호작용 또는 결합하는 시약 또는 물질은 칩 방식 또는 나노입자(nanoparticle)와 함께 사용될 수 있다. 상기 면역분석 또는 면역염색의 방법은 Enzyme Immunoassay, E. T. Maggio, ed., CRC Press, Boca Raton, Florida, 1980; Gaastra, W.,Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA), in Methods in Molecular Biology, Vol. 1, Walker, J.M. ed.,Humana Press, NJ, 1984 등에 기재되어 있다. 상술한 면역분석 과정에 의한 최종적인 시그널의 세기를 분석하여 즉, 정상 시료와의 시그널 대조를 수행함으로써, 감염 여부를 진단할 수 있다
일 측면에서, 본 발명은 중증열성 혈소판 감소증 바이러스 또는 이의 항원, 또는 이에 대한 항체를 포함하는 진단 조성물에 관한 것이다.
진단 조성물에 사용되는 본 발명의 상기 화합물들은 검출 가능하게 표식되는 것이 바람직하다. 생분자들을 표식시키는데 사용 가능한 다양한 방법들이 당업자에게 잘 알려져 있고, 본 발명의 범주 내에서 고려된다. 상기 방법들은 Tijssen, 'Practice and theory of enzyme immuno assays', Burden,RHand von Knippenburg (Eds), Volume 15 (1985), 'Basic methods in molecular biology'; Davis LG, Dibmer MD; Battey Elsevier (1990), Mayer et al., (Eds) 'Immunochemical methods in cell and molecular biology' Academic Press, London (1987), or in the series 'Methods in Enzymology', Academic Press, Inc에 기술되어 있다.
통상의 기술자에게 공지되어 있는 표식 방법과 많은 다른 표식들이 있다. 본 발명에서 사용될 수 있는 표식 종류의 예로는 효소, 방사성 동위원소, 콜로이드 금속, 형광 화합물, 화학발광 화합물 및 생발광 화합물이 있다.
통상적으로 사용되는 표식들은 형광물질 (가령, 플루레신, 로다민, 텍사스 레드 등), 효소 (가령, 고추냉이 퍼옥시다아제, β-갈락토시다아제, 알칼리 포스파타아제), 방사성 동위원소 (가령, 32P 또는 125I), 바이오틴, 디곡시게닌, 콜로이드 금속, 화학발광 또는 생발광 화합물 (가령, 디옥세탄, 루미놀 또는 아크리디늄)을 포함한다. 효소 또는 바이오티닐기의 공유 결합법, 요오드화법, 인산화법, 바이오틴화법 등과 같은 표식 방법들이 당 분야에 잘 알려져 있다.
검출 방법들로는 오토라디오그래피, 형광 현미경, 직접 및 간접 효소반응 등이 있으며, 이에 제한되지는 않는다. 통상적으로 사용되는 검출 분석법으로는 방사성 동위원소 또는 비-방사성 동위원소 방법이 있다. 이들은 그중에서도 웨스턴블롯팅, 오버레이-분석법, RIA(Radioimmuno Assay) 및 IRMA(Immune Radioimmunometric Assay), EIA(Enzyme Immuno Assay), ELISA(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay), FIA(Fluorescent Immuno Assay) 및 CLIA(Chemioluminescent Immune Assay)이 있다.
일 측면에서, 본 발명은 항원/항체 복합체가 형성될 수 있는 조건하에서 검체로부터 분리된 시료를 본 발명의 바이러스 또는 이의 항원과 접촉시키는 단계; 및 항원/항체 복합체 형성을 검출하는 단계를 포함하는, 중증열성 혈소판 감소증 바이러스 항체를 검출하는 방법에 관한 것이다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 바이러스 또는 이의 항원을 면역반응을 유도하기에 유효한 양으로 사람이 아닌 동물에게 투여하는 단계; 및 상기 중증열성 혈소판 감소증 바이러스에 대한 항체를 함유하는 항혈청 또는 혈장을 수집하는 단계를 포함하는, 사람이 아닌 동물에서 중증열성 혈소판 감소증 바이러스에 대한 항혈청을 생산하는 방법에 관한 것이다.
일 측면에서, 본 발명은 검체로부터 분리된 시료를 본 발명의 바이러스 또는 이의 항원과 접촉시켜 항원-항체 복합체를 형성시키는 단계; 및 상기 복합체의 형성을 검출하는 단계를 포함하는, 중증열성 혈소판 감소증 진단에 관한 정보를 제공하는 방법에 관한 것이다.
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐 이에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 바이러스 분리
대학병원 내원 환자 중 중증열성혈소판 감소증 증상이 의심 되는 환자의 혈액, 동물 (염소 및 유기견)의 혈액 및 야생 진드기 균질물을 이용하여 real time PCR, PCR 및 ELISA 분석으로 SFTSV (severe fever thrombocytopenia syndrome virus, 중증열성 혈소판 감소증 바이러스)의 양/음성을 확인하였다. 구체적으로, 바이러스 감염 전날, VeroE6 세포를 12웰 플레이트에 분주한 뒤, 세포 밀도가 60%가 넘도록 배양한 뒤, 세포를 PBS로 세척하고, 감염 의심 환자의 혈청 300㎕ (전체 혈액을 3000rpm으로 20분간 원심분리하여 얻은 혈청)를 1시간 동안 처리하여 감염시켰다. 감염 후에 혈청을 제거하고 PBS로 세포를 세척한 뒤, 1% FBS DMEM 배지로 교환하여 2주 동안 배양하였다. 2주 후, RT-PCR (reverse transcription 후 real time PCR로 확인) 및 면역형광 분석법(immuno fluoresence assay) (실험실에서 생산한 mouse SFTSV NP 항체를 1차 항체 및 FITC가 counjugation 된 항체를 2차 항체로 사용)으로 바이러스 분리 유무를 확인하였으며, 바이러스가 분리되지 않을 경우에는 처음 감염시켰던 상등액을 또 다른 VeroE6 세포에 감염시키는 방식으로 바이러스를 분리하였다. 분리한 바이러스는 CB11/2017 및 CB10/2017로 명명하였다.
실시예 2. 분리된 바이러스의 유전자 분석
Vero E6세포를 이용하여 분리된 바이러스 CB11/2017 및 CB10/2017를 각각 역전사(Reverse-transcription), PCR 및 NGS(Next generation sequencing)하여 각각의 L, M, S(NP, NS) 유전자 전장 서열을 확인하였다. 구체적으로, 각각의 바이러스에서 RNA를 추출하여 역전사(Reverse-transcription) PCR을 통해 cDNA를 제작하였다. 이후 각각의 SFTS 바이러스의 L, M, S 의 유전자를 PCR을 진행하여 각각의 전장 유전자를 획득하였다. 유전자 서열 분석을 위해 NGS 방법을 사용하였고, 각 바이러스의 L, M, S 유전자를 illumina nextera XT kit를 사용하여 tagmentation 및 index PCR을 illumina에서 제공하는 프로토콜에 따라 진행하였다. 이후 최종 샘플을 illimina miniseq 장비를 이용하여 Fasta Q 파일을 생성하였고, 생성된 파일의 유전자 서열을 CLC main workbench program를 이용하여 각각의 전장 유전자서열을 분석하였다. 확인된 유전자 서열을 한국, 중국 및 일본에서 분리된 종래의 바이러스들의 유전자와 통합하여 유전자 분석한 결과, 본 발명에서 분리한 SFTSV들 CB11, CB10는 현재 중국 혹은 우리나라에서 분리된 바이러스 (YuXJ et al.,N. Engl. J. Med. 2011) 및 우리나라에서 처음 분리된 Gangwon/2012 바이러스의 유전자와는 유전적으로 상이한 새로운 유전형(genotype)의 SFTSV임을 확인하였다. 아울러, MEGA 7.0 프로그램을 사용하여 본 발명의 바이러스들과 한국, 중국, 일본에서 분리되는 바이러스들을 L, M, S(NP, NS) 유전자에 대해 계통학적 유전자 분석을 진행한 결과, 본 발명의 바이러스들은 A 및 F group에 속하는 바이러스임을 확인하였다. (도 1 내지 4). 이에, 본 발명에서 분리한 두 유전형의 SFTSV들은 CB11/2017 및 CB10/2017로 명명 하였다.
실시예 3. 바이러스별 L, M 및 S 유전자 아미노산 서열 차이 확인
3-1. L 유전자 아미노산 서열 차이
본 발명에서 분리한 새로운 세부 유전형 A 및 F의 바이러스들 CB11 및 CB10의 L, M 및 S 유전자의 아미노산 서열을 분석한 결과, L, M 및 S 유전자에서 차이를 나타냈다. 구체적으로, A/F 유전형 중 L 유전자의 ORF(6255bp)는 RdRp를 암호화하고 있으며, 본 발명의 유전형 A에 속하는 CB11 바이러스는 RdRp의 1061번 아미노산이 글루타메이트로 나타났고 (서열번호 9), 유전형 F에 속하는 CB10 바이러스는 RdRp의 1061번 아미노산이 아스파르트산으로 나타났다 (서열번호 13) (도 5A 및 표 1).
Figure 112018066546831-pat00001
3-2. M 유전자 아미노산 서열 차이
본 발명에서 분리한 새로운 세부 유전형 A 및 F의 바이러스들 CB11 및 CB10의 L, M 및 S 유전자의 아미노산 서열을 분석한 결과, A/F 유전형 중 M 유전자의 ORF(3222bp)는 Gn 및 Gc 단백질을 암호화하고 있으며, 본 발명의 유전형 A에 속하는 CB11 바이러스는 M 유전자 ORF의 18번째 아미노산이 글리신, 562번째 아미노산이 글리신, 960번째 아미노산이 세린, 988번째 아미노산이 아르기닌 혹은 1053번째 아미노산이 류신으로 나타났고 (서열번호 10), 유전형 F에 속하는 CB10 바이러스는 M 유전자 ORF의 18번째 아미노산이 세린, 562번째 아미노산이 세린, 960번째 아미노산이 트레오닌, 988번째 아미노산이 라이신 혹은 1053번째 아미노산이 메티오닌으로 나타났다 (서열번호 14) (도 5B 및 표 1).
3-3. S 유전자 아미노산 서열 차이
본 발명에서 분리한 새로운 세부 유전형 A 및 F의 바이러스들 CB11 및 CB10의 L, M 및 S 유전자의 아미노산 서열을 분석한 결과, A/F 유전형 중 S 유전자의 ORF(1674bp)는 NS(882bp,294aa) 및 NP(738bp, 246aa) 단백질을 암호화하고 있으며, 본 발명의 유전형 A에 속하는 CB11 바이러스는 S 유전자가 암호화하는 NS 단백질의 145번째 아미노산이 라이신 또는 171번째 아미노산이 글루타메이트로 나타났고 (서열번호 12), 유전형 F 바이러스는 S 유전자가 암호화하는 NS 단백질의 145번째 아미노산이 아르기닌 또는 171번째 아미노산이 아스파르트산으로 나타났다 (서열번호 16) (도 5C 및 표 1).
실시예 4. 유전형별 유전자 상동성 비교
현재 한국에서 분리되는 SFTSV들을 본 발명의 세부 유전형 A 및 F의 바이러스들 CB11 및 CB10를 포함하여 유전자 분석을 수행하고, 각 유전형별 L, M 및 S 유전자의 상동성을 비교 분석하였다. 그 결과, 같은 유전형에 속하는 바이러스들 사이에는 약 96-100%의 유전자 상동성 (nucleotide level)을 보이는 반면, 서로 다른 유전형 바이러스들 간에는 93-100%의 비교적 낮은 유전자 상동성이 나타났다 (표 2 내지 5).
Figure 112018066546831-pat00002
L 유전자의 상동성 비교
Figure 112018066546831-pat00003
M 유전자의 상동성 비교
Figure 112018066546831-pat00004
S(NP) 유전자의 상동성 비교
Figure 112018066546831-pat00005
S(NS) 유전자의 상동성 비교
실시예 5. 유전형별 교차 면역원성 분석
각 genotype별 교차 면역원성을 비교 분석하기 위해, FRNT50(fifty percent of Focus reduction neutralization test)를 수행하였다. 구체적으로, 본 발명에서 분리한 새로운 세부 유전형 A 및 F의 바이러스들을 대량으로 증식시킨 후, 각각 포르말린 (0.05%)을 첨가하여 불활화한 뒤, 불화화 여부를 3번의 바이러스 분리(isolation)를 통해 확인하였다. 불활화한 상기 백신들 (inactivated whole vaccine)을 20%의 수크로스(sucrose)를 활용하며 초원심분리를 통해 단백질을 생산한 뒤, 이를 페럿에 면역화하였다. 2주 후 페럿에 추가 면역을 수행한 뒤 (2번의 면역 2주 간격), 피를 뽑아 혈청을 분리하였다. 분리한 혈청을 30분 동안 56℃에서 불활성화시킨 뒤, 1/10으로 희석 후, 2배 씩 계단 희석하였다. 200 FFU/ml로 희석한 바이러스를 계단 희석한 바이러스와 1:1로 37℃에서 반응시켰다. 6웰 플레이트에 분주한 VeroE6 세포를 세척한 후 상기 반응시킨 바이러스로 감염시키고, 1시간 후 세척한 뒤, 1% FBS가 함유된 0.8% DMEM 아가로즈 겔을 세포에 부어주었다. 감염 5일 후 포르말린을 활용하여 고정하고 3시간 후, 3번의 세척을 수행한 뒤, 10% triton x-100을 5분씩 실온에서 처리하였다. 그 후, 3번 세척하고 5% BSA로 블로킹을 수행하였다. 생산한 polyclonal NP antibody를 1차 항체로 사용하여 인큐베이션한 뒤 3번 세척하고 2차 항체로 HRP conjugated 항체를 1시간 동안 반응시켜 세척한 뒤, DAB으로 발색하여 결과를 확인하였다 (표 6). 바이러스만 감염시킨 웰의 foucus forming 보다 50% 감소된 값까지를 유효하다고 해석하였다.
serum
virus A F
A 640 320
F 160 1280
이상의 결과를 요약하면, SFTSV에는 다양한 유전자를 가진 다양한 유전형의 바이러스들이 존재하며, 같은 유전형에 속하는 바이러스들 간에는 비교적 높은 유전자 상동성과 높은 교차면역반응을 나타내나, 다른 유전형의 바이러스들과는 비교적 낮은 유전자 상동성 및 낮은 교차면역원성을 나타냈으므로, 다양한 유전형에 대한 교차면역원성을 나타내기 위해서는 어느 특정 유전형의 바이러스만으로는 제한된 방어능을 보일 것을 유추할 수 있다.
5-2. 백신 효과 확인
본 발명에서 분리한 새로운 세부 유전형 A 및 F의 바이러스들을 대량으로 증식시킨 후, 각각 포르말린 (0.05%)을 첨가하여 불활화한 뒤, 불활화 여부를 3번의 바이러스 분리(isolation)를 통해 확인하였다. 불활화한 상기 백신들 (inactivated whole vaccine)을 2주 간격으로 2회 각 바이러스에 대해 페럿 5마리씩에 면역화한 뒤, 각 바이러스에 대해 1x107.6/ml로 공격 접종 하였다.
공격 접종 결과, 대조군 동물은 10일 이내에 모든 공격 바이러스 감염시 폐사하였으나, 백신한 그룹의 모든 페럿은 생존하였으며, 체온 증가, 체중 감소를 감염 2-8일 이후 확인할 수 있었으나, 이후에는 회복하는 것을 확인할 수 있었다 (도 6).
이상의 결과를 요약하면, SFTSV에는 다양한 유전자를 가진 다양한 유전형의 바이러스들이 존재하며, 같은 유전형에 속하는 바이러스들 간에는 비교적 높은 유전자 상동성과 높은 교차면역반응을 나타내나, 다른 유전형의 바이러스들과는 비교적 낮은 유전자 상동성 및 낮은 교차면역원성을 나타냈으므로, 다양한 유전형에 대한 교차면역원성을 나타내기 위해서는 어느 특정 유전형의 바이러스만으로는 제한된 방어능을 보일 것을 유추할 수 있다.
따라서, 본 발명의 세부 유전형 A 및 F에 속하는 본 발명의 새로운 바이러스 CB11 및 CB10은 SFTSV에 대한 교차 면역원성이 우수한 백신으로서 유용하게 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
<110> I.D.Bio. <120> NOBLE SEVERE FEVER WITH THROMBOCYTOPENIA SYNDROME VIRUSES <130> PN1708-279 <160> 16 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 6255 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus A type L gene <400> 1 atggacttgg aagtgctttg tggtaggata aacgtggaga atgggctgtc tcttggagaa 60 ccaggcctgt acgaccaaat ctacgacagg cctgggctac cagacctaga tgtgactgtc 120 gatgccacag gtgtaacagt ggacatagga gctgtgccag actcagcatc acaactgggt 180 tcatcaatca atgctgggtt gatcacaatc cagctctctg aagcatataa gatcaatcat 240 gacttcacgt tctctggcct gtcaaagaca acagatcgac gcctctcaga ggtgttcccc 300 attacccatg atggttctga tgggatgacc cctgatgtga ttcacaccag attggatggg 360 accattgtgg tggttgaatt ttcaaccact aggagccata acattggggg cctggaggca 420 gcatatagga caaagataga aaaatatagg gacccaatct caaggcgtgt tgatatcatg 480 gagaacccga gggtcttctt tggcgctatt gtagtctcgt caggaggggt tctgtccaac 540 atgcccctga ctcaggatga ggcagaggag ctcatgtaca ggttttgcat tgccaatgag 600 atctacacca aggctagatc tatggatgca gacattgagc tacagaagag tgaggaagag 660 cttgaggcta ttagcagggc actatcattc ttcagtttgt ttgagcctaa cattgaaaga 720 gtagaaggaa cattccctaa ttcagaaatc gaaatgctgg aacagtttct ctcaactcca 780 gctgatgttg acttcatcac caagaccctc aaagcaaaag aggtagaggc ctatgctgat 840 ctttgtgaca gccactacct aaagcctgaa aaaaccattc aggagcgact agagatcaat 900 agatgtgagg ctattgacaa aactcaggac ctcctagctg gtctacatgc aaggagcaac 960 aagcaaacat cattgaatcg agggacagtc aaactcccgc cctggctacc aaagccgtca 1020 agtgagtcaa tagacatcaa gaccgactca ggctttggtt ccttaatgga tcatggcgca 1080 tatggtgagc tgtgggcaaa gtgccttcta gatgtctcgc tgggcaatgt ggagggggta 1140 gtcagcgacc ctgcaaaaga acttgacatt gccatctctg atgatcctga aaaagatacc 1200 cccaaagagg caaagataac ctataggcga ttcaaacctg ccttaagttc aagtgcccgt 1260 caagaatttt ctctccaagg agtggagggg aagaagtgga agagaatggc agcaaaccag 1320 aagaaagaga aggagtccca tgaggcattg agccctttct tggatgttga agacattggg 1380 gatttcctaa cattcaacaa tcttcttgca gattcgaggt atggagatga gtccgtccag 1440 agagcagtgt caatcttgtt ggaaaaggca tctgccatgc aagacacaga gctcactcat 1500 gccctcaacg attcattcaa gaggaaccta agcagtaatg tggttcagtg gtccctttgg 1560 gtctcttgtt tagcacagga gctagctagt gctctgaagc agcactgcag ggctggtgag 1620 ttcatcatca agaagctgaa attctggcct atctatgtca ttatcaagcc gaccaaatca 1680 tcatcccata tcttctacag cttagggatt cgcaaggctg acgtgacaag gaggctcact 1740 ggcagagtct tctctgatac cattgatgct ggggaatggg agctaacaga gttcaaaagc 1800 ctgaagacat gcaagcttac aaaccttgtc aacttgccat gcaccatgct gaactcaata 1860 gctttctgga gagagaagct gggcgtggct ccatggctgg ttcgaaaacc ttgttcagag 1920 ctcagggagc aggtgggcct gaccttcctg atcagtctgg aggacaagtc taagactgag 1980 gagatcatca ccttgacaag gtacacccag atggagggct ttgtctctcc ccccatgctg 2040 cctaagcccc aaaaaatgct agggaaactg gatggacctc tgagaactaa gctacaggtg 2100 tacctcctca ggaagcatct ggattgcatg gtgcgaattg cttctcagcc attcagccta 2160 atccctagag aggggagggt agaatggggg ggaacattcc atgccatctc aggccggtcc 2220 acaaaccttg agaatatggt gaacagctgg tacattgggt actacaagaa caaagaggag 2280 tcaacagagc taaatgccct tggagaaatg tataagaaga tcgtggagat ggaagaggac 2340 aagcccagca gccctgagtt tctagggtgg ggggacactg attcccctaa gaagcatgaa 2400 ttctcacgga gcttcctcag agctgcttgc tcatctctgg agagagaaat tgctcagcga 2460 catggaagac aatggaagca gaaccttgag gagcgtgtcc tgagagagat tgggaccaag 2520 aacattctgg accttgcatc catgaaggcc acaagcaact tttccaaaga ctgggagctc 2580 tactcagaag tccagaccaa agagtaccat aggtctaaac tgttggagaa gatggccaca 2640 ttgattgaga aaggggtcat gtggtacatt gatgctgtag gtcaggcatg gaaggcagtt 2700 ctagatgatg ggtgcatgcg aatctgtctc ttcaagaaga atcagcatgg tggcctcaga 2760 gagatctacg ttatggatgc gaatgcccga cttgtgcagt ttggggtcga gacaatggct 2820 aggtgtgtct gtgaactgag cccacatgag actgttgcca accctaggct caagaattcc 2880 atcatagaga accatgggct gaagtcagcc cgtagtcttg gccctggctc cataaacata 2940 aactcatcca atgacgccaa gaagtggaat caggggcact acacaacaaa gctagctcta 3000 gttctttgtt ggttcatgcc agccaaattc cacagattca tttgggctgc catttccatg 3060 tttcggagaa aaaagatgat ggtggaccta aggtttctag ctcacctcag ttctaaatct 3120 gagtctaggt catctgatcc gtttagggaa gcaatgacag atgccttcca tggtaatagg 3180 gaagtctcat ggatggacaa agggcgaact tacataaaga cagagacagg gatgatgcag 3240 ggcatactgc actttacatc cagtctccta cactcttgtg ttcagagctt ttacaagtct 3300 tatttcgtct cgaagctcaa agagggctac atgggggaaa gcatcagtgg ggtggtggac 3360 gtcatagaag gttctgacga ctctgcgatc atgatcagca tacgccctaa gtcagacatg 3420 gatgaagtcc gatcaaggtt ctttgttgct aacttgctcc actctgtcaa gttcttaaac 3480 cctttgtttg ggatttattc atcagagaaa tcaacagtga acacagtgta ttgtgtcgag 3540 tataactctg aattccattt ccacaggcac ttggttagac ccacactgag atggatagca 3600 gcgtctcacc aaatctcaga gactgaagcc cttgcaagca ggcaagagga ttactctaac 3660 cttctgaccc agtgcttgga agggggggcc tcattctctc ttacctacct catacagtgc 3720 gctcagctcc tacaccacta catgcttcta ggactatgct tacatccctt gtttggaacc 3780 ttcatgggga tgctgatatc agacccagat ccagccctag ggttctttct catggacaac 3840 cctgcattcg cagggggagc gggatttaga ttcaatctgt ggagagcctg caagacaaca 3900 gacctagggc ggaagtatgc atattatttc aatgagatac agggtaaaac aaagggagat 3960 gaggactaca gggctctgga cgccacatcg ggaggaactc tcagccactc tgttatggtg 4020 tactgggggg acaggaagaa gtatcaggcc ttattgagca ggatgggcct tcctgaagac 4080 tgggtggagc agatagatga gaatcctgga gtcctttaca ggagagcagc caacaagaag 4140 gaactactct taaagctggc agagaaggtt cattcacctg gtgtgactag cagcctgagt 4200 aaagggcatg tggtgcctcg ggtggtggca gcaggagtat acctcctctc acgccactgc 4260 tttcgcttta gctcaagcat ccatggcagg ggctcaacac agaaggctag ccttataaaa 4320 ctgttgatga tgtcttctat ttctgccatg aagcacgggg gctcactaaa ccctaatcag 4380 gagcgaatgc tcttccctca ggctcaggag tatgacaggg tgtgcacatt gcttgaggaa 4440 gttgaacacc taacagggaa atttgttgtt agggagagga acattgtcag gagccgcata 4500 gacctgttcc aagagccagt tgacttgcgg tgcaaggcag aagacctggt gtctgaggtg 4560 tggtttggcc tgaaaaggac taagcttggg ccccgtctcc tcaaggaaga gtgggacaaa 4620 cttagggcct catttgcatg gttgagcaca gacccatctg aaacattgag ggatggtcct 4680 tttcttagcc atgtgcagtt tagaaacttc atagcccacg ttgatgccaa atcaagatca 4740 gtcaggctcc taggtgcccc cgtgaagaaa tcaggcgggg tcaccactat aagccaagta 4800 gtcagaatga acttcttccc tggttttagc ctagaagctg agaagagctt agacaatcag 4860 gaaaggcttg agagcatctc catcctcaag catgtcttgt tcatggtctt gaatggccca 4920 tacactgagg agtacaagct ggaaatgatc atagaggcct tctctactct tgtgatacca 4980 cagccatcag aggtcatcag gaaatcaagg accatgactt tatgcctttt atcgaattac 5040 ttgtctagta ggggtgggtc cattctagac cagattgaga gggcacagtc aggcactcta 5100 ggaggattca gcaagcccca gaagacattc attaggccag gaggtggtgt tggctacaag 5160 ggaaaaggtg tgtggactgg agtgatggag gacacccatg tccaaattct gatagatgga 5220 gatgggacta gtaactggct tgaggagatc aggctcagta gtgatgccag gctttatgat 5280 gtcattgaat ccatccgaag gttatgtgat gaccttggga tcaacaacag ggtagcatct 5340 gcatatagag gtcattgcat ggttaggctg agtggattca agatcaagcc agcatcaagg 5400 actgacggct gtccagtcag gattatggaa aggggcttca ggattaggga actccaaaac 5460 ccagatgagg tcaagatgag agtgaggggc gacatcctta acctctctgt cactatacaa 5520 gaaggaaggg tcatgaacat cctaagctac aggccgagag acactgacat atcagagtca 5580 gccgcagcat acctctggag caatcgagac ctcttctcct ttgggaagaa ggagccatcc 5640 tgcagctgga tctgcttgaa aactcttgac aattgggcct ggtcacatgc ctcagttctc 5700 ctggcaaatg ataggaagac ccaaggcatt gacaatagag ctatggggaa catcttcagg 5760 gactgtctcg agggttctct aagaaagcaa gggctgatga ggtcaaaact cacagagatg 5820 gttgagaaga atgtagttcc tttaacaact caagagcttg tcgacatact ggaggaggac 5880 attgactttt cagatgtcat agctgtagag ctctcagagg gttcgcttga cattgaatcc 5940 atctttgatg gagcacctat cttgtggtct gctgaggtgg aagagtttgg agaaggagtg 6000 gtggctgtga gctattccag taagtactat catctaaccc tgatggacca agctgccatc 6060 acaatgtgtg caatcatggg caaggaagga tgtagagggc tccttactga gaagagatgc 6120 atggcagcca tacgagagca ggtacggcca ttcctcatat tcctacaaat tcctgaggac 6180 agcatttctt gggtatctga tcagttctgc gactccaggg gtcttgatga agagagcacc 6240 attatgtggg gttaa 6255 <210> 2 <211> 3222 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus A type M gene <400> 2 atgatgaaag tcatctggtt ctcctctctg atctgcttag tcattcaatg cggtggggat 60 acaggcccaa tcatctgcgc aggacccatc cactcaaaca agagtgctga cataccccac 120 ctgcttggct actctgagaa gatttgtcag atagatcggc tgatacatgt ttcgtcatgg 180 cttagaaacc actcacaatt tcagggctac gtagggcagc gaggtggacg atctcaggtg 240 agctactacc cagctgaaaa ttcttactca aggtggagtg gacttctaag cccctgtgat 300 gctgattggc ttgggatgct tgtcgtgaag aaggccaagg ggtctgatat gatagttcca 360 gggccttcat acaaggggaa agtctttttt gaacggccaa cttttgatgg atacgtaggc 420 tggggctgtg gtagtgggaa gtctaggact gagtcaggtg agctctgcag ttcagactcc 480 gggactagtt ctggtcttct gccctcagat agggttctct ggataggtga tgttgcttgt 540 cagcctatga cacccatccc tgaggagaca tttctggagc tgaagagctt tagccaaagt 600 gaattcccag acatatgcaa aattgatggc attgtgttca accagtgtga gggtgagagt 660 ctacctcagc cctttgatgt tgcatggatg gatgttggcc actctcataa aatcatcatg 720 agggagcaca agaccaaatg ggtacaagag agctcatcca aggattttgt gtgctacaag 780 gaagggactg ggccttgttc tgaatcagaa gaaaagactt gcaagaccag tggatcatgc 840 aggggggaca tgcagttttg caaggtggca ggttgtgaac atggggaaga ggcatctgaa 900 gccaagtgca gatgctcact tgtgcacaag cccggggaag tcgttgtgtc atatggaggg 960 atgcgtgtca gaccaaagtg ctatggtttc tccagaatga tggcaacact ggaggtgaac 1020 gaaccagagc agaggaatgg tcaatgcact ggctgccatc tagaatgcat aaatgggggt 1080 gtgaggctaa tcactctaac cagtgagctc aagtcagcta ctgtctgcgc ttctcacttc 1140 tgcagttctg ccacaagtgg taagaaaagc acggagattc aattccactc aggatcattg 1200 gttgggaaaa cagcaatcca cgttaaaggg gcattggtag atggaactga attcacattt 1260 gagggtagtt gcatgttccc agatggttgt gatgcagtgg actgcacatt ctgtcgtgag 1320 tttctaaaaa atccccagtg ctaccctgca aagaagtggc tgttcatcat tattgtcatc 1380 ctccttggat atgcaggcct catgctactc accaatgttc ttaaggcaat tggggtttgg 1440 gggtcatggg tcatagctcc agtgaagcta gtgtttgcca tcataaagaa actaatgaga 1500 gctgtgagct gcctgatggg gaaattgatg gatagaggaa ggcaagtgat ccatgaggaa 1560 ataggggaga atagagaggg caaccaagat gatgttagga ttgagatggc cagacccagg 1620 agggtaaggc attggatgta ctcgcctgtc atcctgacta ttctagcaat ggggcttgct 1680 gagggctgtg atgagatggt ccatgctgat tctaaacttg tttcgtgcag gcaagggagc 1740 ggaaatatga aggaatgtgt cacaactggg agggcgcttc ttcctgcagt gaacccaggg 1800 caagaggcgt gtctgcactt cacggcacct ggaagtccgg actcaaaatg tctcaaaatt 1860 aaggttaaga ggatcaacct aaaatgtaaa aagtcatcat catattttgt tcctgatgcc 1920 cggtccaggt gtacatcagt gaggagatgt cgttgggcag gggactgcca gtctgggtgc 1980 ccccctcatt tcacatccaa ctccttttct gatgattggg caggtaagat ggacagggct 2040 ggtctaggat tcagtggctg ctctgatgga tgtggaggag cagcctgtgg ttgctttaat 2100 gcggcccctt cttgcatttt ctggaggaaa tgggtagaga atccacatgg gatcatctgg 2160 aaagtatctc catgtgccgc atgggtccca tcagcggtta tagagctaac aatgccctca 2220 ggggaggtga ggacattcca ccccatgagc ggaatcccca cacaagtctt caagggtgtg 2280 agtgtaactt acttgggctc agatatggag gtgtcaggct tgactgacct gtgtgagata 2340 gaagagctca agtcaaagaa gcttgcatta gctccctgca accaggctgg tatgggggtt 2400 gtaggcaagg ttggagagat acagtgcagt agcgaggaaa gtgcccgtac cataaaaaaa 2460 gatgggtgca tatggaatgc tgacctcgtg ggtatagagc tacgggtgga tgacgctgtg 2520 tgctactcta agatcactag tgtggaggca gttgcaaact actccgccat acccaccact 2580 attggggggc tgaggtttga gagaagccat gacagccagg gcaaaatatc tggtagcccc 2640 ctggacatca cagctataag aggatctttt tctatcaatt atagaggcct tcgactgagc 2700 ctctcagaaa ttactgctac ttgcacaggg gaagtgacaa atgtgagtgg gtgttattct 2760 tgcatgacag gcgccaaagt ctccatcaag ttgcatagca gcaaaaatag cactgcccat 2820 gtaagatgca aaggggatga gactgccttc agtgtcttgg agggagtcca tagctactct 2880 gtcagtctca gttttgatca tgcagtagtt gatgagcagt gccaactgaa ctgtggggga 2940 catgagagtc aagtgactct gagaggcaac ctcatcttcc tggatgtccc gaaatttgtg 3000 gatggcagct acatgcagac atatcatagc actgtgccca caggggcaaa tatcccaagc 3060 cctacagatt ggctaaatgc cttgtttggc aatgggctga gtaggtggat cctgggggtg 3120 ataggggtcc tactgggggg attggctctc tttttcttga tcatgtcttt gttcaagctg 3180 ggaacaaaac aggtatttcg atcgaggacg aagctggctt aa 3222 <210> 3 <211> 738 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus A type NP gene <400> 3 atgtcagagt ggtccaggat tgcagtggag tttggtgagc agcagctcaa tttgactgag 60 cttgaggatt tcgcgagaga gctggcctat gaaggccttg atcctgcttt gatcatcaag 120 aagctgaagg agacaggtgg agatgattgg gtgaaggata cgaagttcat cattgtcttt 180 gccctgactc gaggcaataa gatcgtcaag gcatcaggga aaatgtctaa ctcagggtct 240 aagaggttga tggcactcca agagaaatat ggactggttg agagggcaga aaccaggctc 300 tcaatcactc ctgtgagggt agcgcagagc cttcccacct ggacatgtgc agcagcagca 360 gccttaaagg agtatctccc agtggggcca gccgtcatga acctgaaggt tgagaattat 420 ccacctgaga tgatgtgcat ggcctttggg tccctgattc caactgcagg agtatctgaa 480 gccacaacca agacccttat ggaggcctac tctctgtggc aagatgcctt caccaagact 540 atcaatgtga agatgcgtgg agccagcaag acagaagttt acaactcctt cagggaccct 600 ctccatgctg ctgtgaactc tgtcttcttt cccaatgatg ttcgggtgaa gtggctgaag 660 gccaagggaa tccttggccc agatggggtt cccagcagag ctgctgaggt tgctgctgct 720 gcttacagaa acctgtaa 738 <210> 4 <211> 882 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus A type NS gene <400> 4 atgtcgctga gcaaatgctc caacgttgac ctcaaatctg tagcaatgaa tgctaacact 60 gttaggcttg agccttccct gggagagtac cccactctta ggagagacct cgtcgaatgc 120 tcttgtagtg tgttgacttt gtcaatggtc aagaggatgg gtaagatgac caacacagta 180 tggttgtttg gcaaccctaa aaatcctctt catcagcttg agcctggact tgagcagctg 240 ttagacatgt actacaagga catgaggtgc tactcccaga gagaactgag tgctcttagg 300 tggcctagtg ggaagccatc tgtatggttc ctacaggcag ctcatatgtt cttctccatc 360 aagaacagct gggcaatgga aaccggaaga gagaattggc ggggcctctt ccacaggata 420 acaaaaggcc aaaagtatct ttttgaaggg gacatgatat tggattctct tgaagccata 480 gagaagcgaa gacttagact tgggttgcct gagattctga taactggtct atccccaatt 540 ctggatgtgg ctctcctcca gatagagtca cttgcaaggc taagaggcat gagcttgaac 600 caccacttgt tcacttcttc ctcattgcgt aagcctctgt tagactgttg ggatttcttc 660 attcctatcc gcaaaaagaa gacagatggc tcatacagtg tcttggatga ggatgatgag 720 cctggggtcc tccagggtta cccatatctg atggcacact atttaaatag gtgcccattc 780 cacaacctca tcaggtttga tgaagaactg agaactgcag ccctgaacac catttgggga 840 agagattggc cagccattgg tgacctcccg aaggaggtct aa 882 <210> 5 <211> 6255 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus F type L gene <400> 5 atggacttgg aagtgctttg tggtaggata aacgtggaga atgggctgtc tcttggagaa 60 ccaggcctgt acgaccaaat ctacgacagg ccagggctcc cagacctaga tgtgactgtc 120 gatgccacag gtgtgacagt ggacataggg gctgtgccag actcagcatc acaactgggt 180 tcatcaatca atgctgggtt gatcacaatc cagctctctg aagcatataa gatcaatcat 240 gacttcacgt tttctggtct gtcaaagaca acagaccgac gcctctcaga ggtattcccc 300 attacccatg atggttctga tgggatgacc cctgatgtga tccacaccag attggatgga 360 accatagtgg tggttgaatt ttcaaccact aggagccata acattggggg cctggaggca 420 gcatatagga caaagataga aaaatatagg gacccaatct caaggcgtgt tgatatcatg 480 gagaacccga gggtcttctt cggcgtaatt gtagtctcgt caggaggggt cctgtccaac 540 atgcccttga ctcaggatga ggcagaggag ctcatgtata ggttctgcat agccaatgag 600 atctacacta aggctagatc tatggatgca gacattgagc tacagaaaag tgaagaagag 660 cttgaggcta ttagcagggc actatcattc ttcagtttgt ttgagcctaa cattgaaaga 720 gtggaaggaa cattccctaa ttcagaaatc gagatgctgg agcagttcct ctcaacgcca 780 gctgatgttg acttcatcac caagaccctc aaagcaaaag aagtagaagc ctatgctgat 840 ctttgtgaca gccactacct aaagcctgag aaaaccatac aggagcggct agagatcaat 900 agatgtgagg ctattgacaa aactcaagac ctcctagctg gcctgcatgc aaggagcaac 960 aagcaaacat cattgaatcg agggacagtc aaactcccgc cctggctacc aaagccatca 1020 agtgagtcaa tagacatcaa gaccgactca ggctttggtt ccttaatgga tcatggcgca 1080 tatggtgagc tgtgggcaaa gtgccttcta gatgtctcgc taggcaatgt ggagggggta 1140 gtcagtgacc ctgcaaaaga acttgacatt gccatctctg atgatccaga aaaagacacc 1200 cccaaagagg caaagataac ctataggcga ttcaagcctg ccttaagttc gagtgcccgt 1260 caggaattct ctctccaagg agtggagggg aagaagtgga agagaatggc agcaaatcag 1320 aagaaagaga aggagtccca tgagacattg agcccgttct tggatgttga tgacatagga 1380 gatttcctaa cattcaacaa tcttcttgca gattcgaggt atggagacga gtccatccag 1440 agagctgtgt caatattgct ggaaaaggca tctgccatgc aagacacaga gctcactcat 1500 gccctcaacg attcatttaa gaggaatcta agcagcaatg tggttcagtg gtctctttgg 1560 gtctcctgtt tagcacagga gctagctagt gccctgaagc agcactgcag ggccggtgag 1620 ttcatcatca agaagctgaa gttctggcct atctatgtca ttatcaagcc gaccaaatca 1680 tcatcccata tcttctacag cttagggatc cgcaaggctg acgtgacaag gaggctaact 1740 ggtagagtct tctctgacac cattgatgct ggggaatggg aactaacaga gttcaaaagc 1800 ctgaagacat gcaagctcac gaatcttgtc aacttgccat gcaccatgct gaactcaata 1860 gctttctgga gagagaagct gggcgtggct ccatggctgg ttagaaagcc ctgttcagag 1920 ctcagggagc aggtgggcct gaccttcctg gtcagtctgg aggacaagtc taagactgag 1980 gagatcatca ccttgacaag gtacacccag atggagggct ttgtctctcc tcccatgctg 2040 cctaagcccc aaaagatgct agggaaactg gaagggcctt tgagaactaa gctacaggta 2100 tacctcctca ggaagcacct ggattgcatg gtgcgaattg cgtctcagcc tttcagccta 2160 atccctagag aggggagggt agagtgggga ggaacattcc atgccatctc aggccggtcc 2220 acaaaccttg agaacatggt gaacagctgg tacattgggt actacaagaa caaagaggag 2280 tcaacagagc taaatgccct cggagaaatg tataagaaga ttgtggagat ggaagaggac 2340 aagcccagca gtcctgagtt tctagggtgg ggggacacag attcccccaa gaagcatgaa 2400 ttctcacgga gcttcctcag agctgcttgc tcatctctag agagagaaat tgctcagcga 2460 catgggaggc aatggaagca gaaccttgag gagcgtgtcc tgagagagat tggggccaag 2520 aacatcctgg accttgcatc catgaaggct acaagcaact tttccaaaga ctgggagctc 2580 tactcagaag tccagaccaa agagtaccat aggtccaaac tactggagaa gatggccaca 2640 ttgattgaga agggggttat gtggtacatt gatgctgtgg gccaggcatg gaaggcagtt 2700 ctggatgacg ggtgcatgcg aatctgtctc ttcaaaaaga atcagcatgg tggccttaga 2760 gagatctacg ttatggatgc gaatgcccgg ctcgtgcagt ttggggttga gaccatggct 2820 aggtgtgtct gtgagctgag ccctcatgag actgttgcta accctcggct caagaattcc 2880 atcatagaga accatggact gaagtcagcc cgtagtcttg gccctggctc tataaacata 2940 aactcatcca atgatgccaa gaagtggaat caggggcact acacaacaaa gctagcttta 3000 gttctttgtt ggttcatgcc agctaaattc cacagattca tttgggctgc catttccatg 3060 tttcggagaa aaaagatgat ggtggaccta aggtttttag ctcacctcag ttctaaatct 3120 gagtctaggt catctgatcc gtttagggaa gcaatgacag atgccttcca tggtaatagg 3180 gatgtctcat ggatggacaa agggcgaact tacattaaga cagagacagg aatgatgcag 3240 ggcatactgc acttcacatc cagtctcctc cactcttgtg ttcagagctt ctacaagtct 3300 tatttcgtct cgaagctcaa ggagggctac atgggggaaa gcatcagtgg ggtggtggat 3360 gtcatagaag gctctgacga ctcagcgatc atgattagca tacgccctaa gtcagacatg 3420 gatgaagttc gatccaggtt ctttgttgct aacttgctcc actctgttaa gttcttgaat 3480 ccattgtttg ggatttattc atcagagaaa tcaacagtga acacagtgta ttgtgtcgaa 3540 tataactctg aattccattt ccacaggcac ttggttagac ccacactgag atggatagca 3600 gcgtctcatc aaatctcaga gactgaagcc cttgcaagca ggcaagagga ttactccaac 3660 cttctaaccc agtgcttgga aggaggggcc tcattctctc ttacctacct catacagtgc 3720 gctcagctcc tgcaccacta catgcttcta ggactttgct tacatcccct gtttggaacc 3780 ttcatgggga tgctgatatc agacccagat ccagccctag ggttcttcct catggacaac 3840 cctgcattcg cagggggagc aggatttaga ttcaatctgt ggagagcctg caagactaca 3900 gaccttgggc ggaagtatgc atattatttt aatgagatac agggtaagac aaagggagat 3960 gaggactaca gagctctgga cgccacatcg ggaggaactc tcagccactc tgttatggtg 4020 tactgggggg acaggaagaa gtatcaagcc ttattgaaca ggatgggcct tcctgaagac 4080 tgggtggagc agatagatga gaatcctgga gtcctctaca ggagagctgc caacaagaaa 4140 gaactgctct taaagctggc agagaaggtt cattcacctg gtgtgactag cagcctgagt 4200 aaagggcatg tagtgcctcg ggtggtggca gcaggagtgt acctcctctc acgtcattgc 4260 tttcgcttta gttcaagcat ccatggcagg ggctcaacgc agaaggctag ccttataaaa 4320 ttgctgatga tgtcttctat ttctgccatg aagcatgggg gctcactgaa ccctaaccag 4380 gagcgaatgc tcttccctca ggctcaagag tatgacagag tatgcacatt gcttgaggaa 4440 gttgaacacc taacagggaa atttgttgtt agggagagaa acattgtcag gagccgcata 4500 gatttgttcc aagagccagt ggacttgcgg tgcaaggcag aagatctggt gtcagaggtg 4560 tggtttggcc tgaaaaggac taaacttgga ccccgtctcc tcaaggaaga gtgggataaa 4620 cttagggcct catttgcatg gctgagcaca gacccatctg aaacattgag ggatggtcct 4680 tttcttagcc atgtgcagtt taggaacttc atagcccacg ttgatgccaa atcaagatca 4740 gtcaggctcc taggtgcccc cgtgaagaag tcaggtgggg tcaccaccat aagccaagtg 4800 gtcagaatga acttcttccc tggttttagc ctagaagctg agaagagctt agacaatcag 4860 gaaagacttg agagtatctc catcctcaag catgtcttgt tcatggtctt gaatggccca 4920 tacactgagg agtacaagct ggagatgatc atagaggcct tctctactct tgtgatacca 4980 cagccatcag aggtcatcag gaaatcaagg accatgactt tatgcctctt atcgaattac 5040 ttgtccagta ggggtgggtc cattctagac caaattgaga gggcacagtc aggcactcta 5100 ggaggcttca gcaagcccca gaagacattt attaggccag gaggtggtgt tggctacaag 5160 ggaaaaggtg tgtggactgg agtgatggag gacacccatg ttcaaattct gatagatgga 5220 gatggtacaa gtaactggct cgaggagatc aggctcagta gtgatgctag gctttatgat 5280 gtcattgaat ccatccgaag gttatgtgat gaccttggga tcaacaacag ggtggcatct 5340 gcatatagag gccattgtat ggttaggctg agtggattca agatcaagcc agcatcaagg 5400 actgacggct gtccagtcag gattatggaa aggggcttca gaattaggga acttcaaaac 5460 ccagatgagg tcaaaatgag agtgaggggc gacatcctca acctctctgt cactatacaa 5520 gaaggaaggg tcatgaacat cctaagctac aggccgagag acactgatat atcagagtca 5580 gccgcagcat acctctggag caatcgagac ctcttctcct ttgggaagaa ggagccgtcc 5640 tgcagctgga tctgcttgaa aactctagat aattgggcct ggtcacatgc ctcagttctc 5700 ctggcaaatg ataggaagac ccaaggtatt gacaatagag ctatggggaa cattttcagg 5760 gactgtctcg agggttctct tagaaagcaa gggttgatga ggtcaaagct cacagagatg 5820 gtggagaaga atgtagttcc tttaacaact caagagcttg tcgacatcct ggaggaggac 5880 attgactttt cagatgtcat agctgtagag ctctcagagg gatcacttga cattgaatcc 5940 atctttgatg gggcacctat cttgtggtct gctgaggtgg aagagtttgg agaaggagtg 6000 gtggctgtga gctattcaag caagtactat catctgaccc tgatggacca agctgccatc 6060 acaatgtgtg caatcatggg taaggaaggc tgcagagggc tccttactga gaagagatgc 6120 atggcagcca tacgagagca ggtgcggcca ttcctcatat tcctgcaaat tcctgaggac 6180 agcatttctt gggtgtctga tcagttctgc gactccaggg gtcttgatga agagagcacc 6240 attatgtggg gttaa 6255 <210> 6 <211> 3222 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus F type M gene <400> 6 atgatgaaag tcatctggtt ctcctctctg atctgctttg tcattcaatg cagtggggac 60 tcaggcccaa tcatctgcgc aggacccatc cactcaaaca agagtgctga catacctcac 120 ctgctgggtt actctgagaa gatatgtcag atagatcggc tgatacatgt ttcgtcatgg 180 ctcaggaacc actcacaatt tcagggctac gtaggccagc gaggtggacg ctctcaggtg 240 agctactacc cagctgaaaa ttcttactca aggtggagtg ggcttctaag cccctgtgat 300 gctgattggc ttgggatgct tgtcgtgaag aaggccaagg ggtctgatat gatagttcct 360 gggccttcat acaagggaaa agtctttttt gagcggccaa cttttgatgg atatgtaggc 420 tggggctgtg gcagtgggaa gtctaggaca gagtcaggag agctctgcag ttcagactcg 480 gggactagct ctggtcttct gccctcagat agggttctct ggataggtga tgttgcttgt 540 cagcctatga cacccatccc tgaagagaca tttctggagc tgaagagttt tagccaaagt 600 gaattcccag acatatgcaa aattgatggc attgtattca accagtgtga gggtgagagc 660 ctacctcagc cctttgatgt tgcatggatg gatgttggcc actctcataa aatcatcatg 720 agggagcaca agaccaaatg ggtgcaagag agctcatcca aggattttgt gtgctacaag 780 gaagggactg ggccttgttc tgaatcagaa gaaaagactt gcaagaccag tggatcatgc 840 aggggggaca tgcagttctg caaggtagca ggttgtgaac atggggaaga ggcatctgaa 900 gccaagtgta gatgctcact tgtgcacaag cccggagaag tcgttgtgtc atatggaggg 960 atgcgtgtca gaccaaagtg ctatggtttc tccagaatga tggcaacact ggaggtgaac 1020 caaccagagc aaaggattgg tcaatgcact ggctgccatc tggaatgcat aaatgggggt 1080 gtgaggctaa taactctaac cagtgagctc aagtcagcta ctgtctgtgc ttctcacttt 1140 tgtagttctg ccacaagtgg caagaaaagc acggagattc aattccactc aggatcattg 1200 gttgggaaaa cagcaataca cgtcaaaggg gcattggtag atggaactga attcacattt 1260 gagggtagtt gcatgttccc agatggttgt gatgcggtgg actgcacttt ctgtcgtgag 1320 tttctaaaaa atccccagtg ctaccctgca aagaagtggc tgttcatcat tattgtcatc 1380 ctccttgggt atgcaggcct catgctactc accaatgtcc tcaaggcaat tgggatttgg 1440 ggatcatggg tcatagctcc agtgaagcta atatttgcca tcataaagaa actaatgaga 1500 actgtgagct gcttgatggg gaaattgatg gataggggaa ggcaagtgat ccatgaggag 1560 ataggggaga atagagaggg caaccaagat gatgttagga ttgagatggc aagacccaga 1620 agggtaaggc attggatgta ctcacctgtc atcctgacta ttttagcaat agggcttgct 1680 gagagctgtg atgagatggt ccatgctgat tctaagcttg tttcatgcag gcaagggagc 1740 ggaaatatga aggaatgtgt cacaactggg agggcgcttc ttcctgcggt gaacccaggt 1800 caagaggcat gtctgcactt cacggcacct gggagtccgg actcaaaatg tctcaaaatt 1860 aaggttaaga ggatcaacct aaaatgtaag aagtcatcat catattttgt tcctgatgcc 1920 cggtccagat gtacatcagt gaggagatgt cgttgggctg gagactgcca gtctgggtgc 1980 ccccctcatt tcacatccaa ctccttttct gatgattggg caggtaagat ggacagggct 2040 ggtctagggt tcagtggctg ctctgatgga tgtggaggag cagcctgcgg ctgctttaat 2100 gcagcccctt cttgcatctt ctggaggaaa tgggtagaga acccacatgg gatcatctgg 2160 aaagtgtctc cttgtgccgc atgggtccca tcggcagtca tagagctaac aatgccctca 2220 ggggaggtga ggacattcca ccccatgagt ggcatcccca cacaagtctt caagggtgtg 2280 agtgtgactt acttgggctc agatatggag gtgtctggct tgactgacct atgtgagata 2340 gaggagctca agtccaagaa gctggcatta gctccctgca accaggctgg catgggggtt 2400 gtaggcaagg ttggagagat acagtgcagt agcgaggaaa gtgcccgtac cataaaaaaa 2460 gatgggtgca tatggaatgc agaccttgtg ggcatagagc tacgagtgga tgacgctgtg 2520 tgctactcta agatcactag tgtggaagca gttgcaaact actctgccat acccaccact 2580 attggggggc tgaggtttga gagaagccat gacagccagg gtaaaatatc tggtagcccc 2640 ctggacatca cagctataag aggatctttt tctgttaatt atagaggcct tcgactgagc 2700 ctctcagaaa ttactgctac ctgcacaggg gaggtgacaa atgtgagtgg atgttattct 2760 tgcatgacag gcgccaaagt ctctatcaaa ctacatagca gcaaaaatag cactgcccat 2820 gtaagatgca aaggggatga gactgcattc agtgtcttgg agggggtcca tagttacact 2880 gtcaatctca gttttgacca tgcagtggtc gatgagcagt gccaactgaa ctgtggggga 2940 catgagagtc aagtgactct aaaaggcaac cttatcttcc tggatgtccc aaaatttgtg 3000 gatggcagct acatgcagac atatcatagc actgtgccca caggggcaaa tatcccaagc 3060 ccaacagact ggctgaatgc cttgtttggc aatgggctga gtaggtggat cctgggggtg 3120 ataggggttc tacttggggg gttggctctc tttttcatga ttatgtcttt gttcaagctg 3180 ggaacaaaac aggtatttcg atcaaggacg aagctggctt ag 3222 <210> 7 <211> 738 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus F type NP gene <400> 7 atgtcagagt ggtccaggat tgcagtggag tttggtgagc agcagctcaa tttgactgag 60 cttgaggatt tcgcgagaga gctagcctat gaaggccttg atcctgcttt gatcatcaag 120 aagctgaagg agacaggtgg agatgactgg gtgaaggata ctaagttcat cattgtcttt 180 gccctgactc gaggcaataa gatcgtcaag gcatcaggga agatgtcaaa ctcagggtca 240 aagaggttga tggcactcca ggagaaatat gggctggttg agagggcaga gaccaggctc 300 tcaatcaccc ctgtaagggt agcgcagagc ctccccactt ggacatgtgc tgcagcagca 360 gccttaaagg agtatctccc agtggggcca gccgtcatga acctgaaggt tgagaattat 420 cccccagaga tgatgtgcat ggccttcggg tccctgattc caactgcagg ggtatctgaa 480 gccacgacca agaccctgat ggaggcttac tctttatggc aagatgcctt caccaagact 540 atcaatgtga agatgcgcgg agccagcaag acagaagttt acaactcctt cagggatcct 600 ctccatgctg ctgtgaactc tgtcttcttc cccaatgatg ttcgggtgaa gtggctgaag 660 gccaagggaa tccttggccc agatggggtc cccagcagag ctgctgaggt tgctgctgct 720 gcttacagga acctgtaa 738 <210> 8 <211> 882 <212> DNA <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus F type NS gene <400> 8 atgtcgctga gcaaatgctc caacgttgat ctcaaatctg ttgcaatgaa tgccaacaca 60 gtcaggcttg agccatctct aggagagtac cccactctta ggagggacct cgttgaatgc 120 tcttgcagtg tgttgactct gtcgatggtc aagaggatgg gtaagatgac caacacagta 180 tggttgtttg gcaaccccaa aaatcctctt caccagcttg agcctggact tgagcagcta 240 ttggacatgt actacaagga catgaggtgc tactcccaga gagagctgag tgctcttagg 300 tggcctagtg ggaagccatc tgtatggttc ttgcaggcag ctcatatgtt cttctccatc 360 aagaacagct gggcaatgga aactgggaga gagaactggc ggggcctctt ccacaggata 420 acaaaaggcc gaaggtatct ttttgaaggg gacatgatat tggattctct agaagccata 480 gagaagcgaa ggcttagact tgggttacct gatatcctaa taactggact gtccccaatt 540 ctggatgtgg ccctccttca gatagagtca cttgcaaggc taagaggcat gagcttgaac 600 caccacttgt tcacttcttc ctcattgcgt aagcctctgt tggactgttg ggacttcttt 660 atccctatcc gcaaaaagaa gacagatggc tcatacagtg tcttggatga ggatgatgag 720 cctggggtcc ttcaaggtta cccatatctg atggcacact atttaaacag gtgcccattc 780 cacaacctca tcaggtttga tgaggagctg agaactgcag ccctgaacac catctgggga 840 agagattggc cagccattgg tgaccccccg aaggaggtct aa 882 <210> 9 <211> 2085 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus A type L <400> 9 Met Asp Leu Glu Val Leu Cys Gly Arg Ile Asn Val Glu Asn Gly Leu 1 5 10 15 Ser Leu Gly Glu Pro Gly Leu Tyr Asp Gln Ile Tyr Asp Arg Pro Gly 20 25 30 Leu Pro Asp Leu Asp Val Thr Val Asp Ala Thr Gly Val Thr Val Asp 35 40 45 Ile Gly Ala Val Pro Asp Ser Ala Ser Gln Leu Gly Ser Ser Ile Asn 50 55 60 Ala Gly Leu Ile Thr Ile Gln Leu Ser Glu Ala Tyr Lys Ile Asn His 65 70 75 80 Asp Phe Thr Phe Ser Gly Leu Ser Lys Thr Thr Asp Arg Arg Leu Ser 85 90 95 Glu Val Phe Pro Ile Thr His Asp Gly Ser Asp Gly Met Thr Pro Asp 100 105 110 Val Ile His Thr Arg Leu Asp Gly Thr Ile Val Val Val Glu Phe Ser 115 120 125 Thr Thr Arg Ser His Asn Ile Gly Gly Leu Glu Ala Ala Tyr Arg Thr 130 135 140 Lys Ile Glu Lys Tyr Arg Asp Pro Ile Ser Arg Arg Val Asp Ile Met 145 150 155 160 Glu Asn Pro Arg Val Phe Phe Gly Ala Ile Val Val Ser Ser Gly Gly 165 170 175 Val Leu Ser Asn Met Pro Leu Thr Gln Asp Glu Ala Glu Glu Leu Met 180 185 190 Tyr Arg Phe Cys Ile Ala Asn Glu Ile Tyr Thr Lys Ala Arg Ser Met 195 200 205 Asp Ala Asp Ile Glu Leu Gln Lys Ser Glu Glu Glu Leu Glu Ala Ile 210 215 220 Ser Arg Ala Leu Ser Phe Phe Ser Leu Phe Glu Pro Asn Ile Glu Arg 225 230 235 240 Val Glu Gly Thr Phe Pro Asn Ser Glu Ile Glu Met Leu Glu Gln Phe 245 250 255 Leu Ser Thr Pro Ala Asp Val Asp Phe Ile Thr Lys Thr Leu Lys Ala 260 265 270 Lys Glu Val Glu Ala Tyr Ala Asp Leu Cys Asp Ser His Tyr Leu Lys 275 280 285 Pro Glu Lys Thr Ile Gln Glu Arg Leu Glu Ile Asn Arg Cys Glu Ala 290 295 300 Ile Asp Lys Thr Gln Asp Leu Leu Ala Gly Leu His Ala Arg Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gln Thr Ser Leu Asn Arg Gly Thr Val Lys Leu Pro Pro Trp Leu 325 330 335 Pro Lys Pro Ser Ser Glu Ser Ile Asp Ile Lys Thr Asp Ser Gly Phe 340 345 350 Gly Ser Leu Met Asp His Gly Ala Tyr Gly Glu Leu Trp Ala Lys Cys 355 360 365 Leu Leu Asp Val Ser Leu Gly Asn Val Glu Gly Val Val Ser Asp Pro 370 375 380 Ala Lys Glu Leu Asp Ile Ala Ile Ser Asp Asp Pro Glu Lys Asp Thr 385 390 395 400 Pro Lys Glu Ala Lys Ile Thr Tyr Arg Arg Phe Lys Pro Ala Leu Ser 405 410 415 Ser Ser Ala Arg Gln Glu Phe Ser Leu Gln Gly Val Glu Gly Lys Lys 420 425 430 Trp Lys Arg Met Ala Ala Asn Gln Lys Lys Glu Lys Glu Ser His Glu 435 440 445 Ala Leu Ser Pro Phe Leu Asp Val Glu Asp Ile Gly Asp Phe Leu Thr 450 455 460 Phe Asn Asn Leu Leu Ala Asp Ser Arg Tyr Gly Asp Glu Ser Val Gln 465 470 475 480 Arg Ala Val Ser Ile Leu Leu Glu Lys Ala Ser Ala Met Gln Asp Thr 485 490 495 Glu Leu Thr His Ala Leu Asn Asp Ser Phe Lys Arg Asn Leu Ser Ser 500 505 510 Asn Val Val Gln Trp Ser Leu Trp Val Ser Cys Leu Ala Gln Glu Leu 515 520 525 Ala Ser Ala Leu Lys Gln His Cys Arg Ala Gly Glu Phe Ile Ile Lys 530 535 540 Lys Leu Lys Phe Trp Pro Ile Tyr Val Ile Ile Lys Pro Thr Lys Ser 545 550 555 560 Ser Ser His Ile Phe Tyr Ser Leu Gly Ile Arg Lys Ala Asp Val Thr 565 570 575 Arg Arg Leu Thr Gly Arg Val Phe Ser Asp Thr Ile Asp Ala Gly Glu 580 585 590 Trp Glu Leu Thr Glu Phe Lys Ser Leu Lys Thr Cys Lys Leu Thr Asn 595 600 605 Leu Val Asn Leu Pro Cys Thr Met Leu Asn Ser Ile Ala Phe Trp Arg 610 615 620 Glu Lys Leu Gly Val Ala Pro Trp Leu Val Arg Lys Pro Cys Ser Glu 625 630 635 640 Leu Arg Glu Gln Val Gly Leu Thr Phe Leu Ile Ser Leu Glu Asp Lys 645 650 655 Ser Lys Thr Glu Glu Ile Ile Thr Leu Thr Arg Tyr Thr Gln Met Glu 660 665 670 Gly Phe Val Ser Pro Pro Met Leu Pro Lys Pro Gln Lys Met Leu Gly 675 680 685 Lys Leu Asp Gly Pro Leu Arg Thr Lys Leu Gln Val Tyr Leu Leu Arg 690 695 700 Lys His Leu Asp Cys Met Val Arg Ile Ala Ser Gln Pro Phe Ser Leu 705 710 715 720 Ile Pro Arg Glu Gly Arg Val Glu Trp Gly Gly Thr Phe His Ala Ile 725 730 735 Ser Gly Arg Ser Thr Asn Leu Glu Asn Met Val Asn Ser Trp Tyr Ile 740 745 750 Gly Tyr Tyr Lys Asn Lys Glu Glu Ser Thr Glu Leu Asn Ala Leu Gly 755 760 765 Glu Met Tyr Lys Lys Ile Val Glu Met Glu Glu Asp Lys Pro Ser Ser 770 775 780 Pro Glu Phe Leu Gly Trp Gly Asp Thr Asp Ser Pro Lys Lys His Glu 785 790 795 800 Phe Ser Arg Ser Phe Leu Arg Ala Ala Cys Ser Ser Leu Glu Arg Glu 805 810 815 Ile Ala Gln Arg His Gly Arg Gln Trp Lys Gln Asn Leu Glu Glu Arg 820 825 830 Val Leu Arg Glu Ile Gly Thr Lys Asn Ile Leu Asp Leu Ala Ser Met 835 840 845 Lys Ala Thr Ser Asn Phe Ser Lys Asp Trp Glu Leu Tyr Ser Glu Val 850 855 860 Gln Thr Lys Glu Tyr His Arg Ser Lys Leu Leu Glu Lys Met Ala Thr 865 870 875 880 Leu Ile Glu Lys Gly Val Met Trp Tyr Ile Asp Ala Val Gly Gln Ala 885 890 895 Trp Lys Ala Val Leu Asp Asp Gly Cys Met Arg Ile Cys Leu Phe Lys 900 905 910 Lys Asn Gln His Gly Gly Leu Arg Glu Ile Tyr Val Met Asp Ala Asn 915 920 925 Ala Arg Leu Val Gln Phe Gly Val Glu Thr Met Ala Arg Cys Val Cys 930 935 940 Glu Leu Ser Pro His Glu Thr Val Ala Asn Pro Arg Leu Lys Asn Ser 945 950 955 960 Ile Ile Glu Asn His Gly Leu Lys Ser Ala Arg Ser Leu Gly Pro Gly 965 970 975 Ser Ile Asn Ile Asn Ser Ser Asn Asp Ala Lys Lys Trp Asn Gln Gly 980 985 990 His Tyr Thr Thr Lys Leu Ala Leu Val Leu Cys Trp Phe Met Pro Ala 995 1000 1005 Lys Phe His Arg Phe Ile Trp Ala Ala Ile Ser Met Phe Arg Arg Lys 1010 1015 1020 Lys Met Met Val Asp Leu Arg Phe Leu Ala His Leu Ser Ser Lys Ser 1025 1030 1035 1040 Glu Ser Arg Ser Ser Asp Pro Phe Arg Glu Ala Met Thr Asp Ala Phe 1045 1050 1055 His Gly Asn Arg Glu Val Ser Trp Met Asp Lys Gly Arg Thr Tyr Ile 1060 1065 1070 Lys Thr Glu Thr Gly Met Met Gln Gly Ile Leu His Phe Thr Ser Ser 1075 1080 1085 Leu Leu His Ser Cys Val Gln Ser Phe Tyr Lys Ser Tyr Phe Val Ser 1090 1095 1100 Lys Leu Lys Glu Gly Tyr Met Gly Glu Ser Ile Ser Gly Val Val Asp 1105 1110 1115 1120 Val Ile Glu Gly Ser Asp Asp Ser Ala Ile Met Ile Ser Ile Arg Pro 1125 1130 1135 Lys Ser Asp Met Asp Glu Val Arg Ser Arg Phe Phe Val Ala Asn Leu 1140 1145 1150 Leu His Ser Val Lys Phe Leu Asn Pro Leu Phe Gly Ile Tyr Ser Ser 1155 1160 1165 Glu Lys Ser Thr Val Asn Thr Val Tyr Cys Val Glu Tyr Asn Ser Glu 1170 1175 1180 Phe His Phe His Arg His Leu Val Arg Pro Thr Leu Arg Trp Ile Ala 1185 1190 1195 1200 Ala Ser His Gln Ile Ser Glu Thr Glu Ala Leu Ala Ser Arg Gln Glu 1205 1210 1215 Asp Tyr Ser Asn Leu Leu Thr Gln Cys Leu Glu Gly Gly Ala Ser Phe 1220 1225 1230 Ser Leu Thr Tyr Leu Ile Gln Cys Ala Gln Leu Leu His His Tyr Met 1235 1240 1245 Leu Leu Gly Leu Cys Leu His Pro Leu Phe Gly Thr Phe Met Gly Met 1250 1255 1260 Leu Ile Ser Asp Pro Asp Pro Ala Leu Gly Phe Phe Leu Met Asp Asn 1265 1270 1275 1280 Pro Ala Phe Ala Gly Gly Ala Gly Phe Arg Phe Asn Leu Trp Arg Ala 1285 1290 1295 Cys Lys Thr Thr Asp Leu Gly Arg Lys Tyr Ala Tyr Tyr Phe Asn Glu 1300 1305 1310 Ile Gln Gly Lys Thr Lys Gly Asp Glu Asp Tyr Arg Ala Leu Asp Ala 1315 1320 1325 Thr Ser Gly Gly Thr Leu Ser His Ser Val Met Val Tyr Trp Gly Asp 1330 1335 1340 Arg Lys Lys Tyr Gln Ala Leu Leu Ser Arg Met Gly Leu Pro Glu Asp 1345 1350 1355 1360 Trp Val Glu Gln Ile Asp Glu Asn Pro Gly Val Leu Tyr Arg Arg Ala 1365 1370 1375 Ala Asn Lys Lys Glu Leu Leu Leu Lys Leu Ala Glu Lys Val His Ser 1380 1385 1390 Pro Gly Val Thr Ser Ser Leu Ser Lys Gly His Val Val Pro Arg Val 1395 1400 1405 Val Ala Ala Gly Val Tyr Leu Leu Ser Arg His Cys Phe Arg Phe Ser 1410 1415 1420 Ser Ser Ile His Gly Arg Gly Ser Thr Gln Lys Ala Ser Leu Ile Lys 1425 1430 1435 1440 Leu Leu Met Met Ser Ser Ile Ser Ala Met Lys His Gly Gly Ser Leu 1445 1450 1455 Asn Pro Asn Gln Glu Arg Met Leu Phe Pro Gln Ala Gln Glu Tyr Asp 1460 1465 1470 Arg Val Cys Thr Leu Leu Glu Glu Val Glu His Leu Thr Gly Lys Phe 1475 1480 1485 Val Val Arg Glu Arg Asn Ile Val Arg Ser Arg Ile Asp Leu Phe Gln 1490 1495 1500 Glu Pro Val Asp Leu Arg Cys Lys Ala Glu Asp Leu Val Ser Glu Val 1505 1510 1515 1520 Trp Phe Gly Leu Lys Arg Thr Lys Leu Gly Pro Arg Leu Leu Lys Glu 1525 1530 1535 Glu Trp Asp Lys Leu Arg Ala Ser Phe Ala Trp Leu Ser Thr Asp Pro 1540 1545 1550 Ser Glu Thr Leu Arg Asp Gly Pro Phe Leu Ser His Val Gln Phe Arg 1555 1560 1565 Asn Phe Ile Ala His Val Asp Ala Lys Ser Arg Ser Val Arg Leu Leu 1570 1575 1580 Gly Ala Pro Val Lys Lys Ser Gly Gly Val Thr Thr Ile Ser Gln Val 1585 1590 1595 1600 Val Arg Met Asn Phe Phe Pro Gly Phe Ser Leu Glu Ala Glu Lys Ser 1605 1610 1615 Leu Asp Asn Gln Glu Arg Leu Glu Ser Ile Ser Ile Leu Lys His Val 1620 1625 1630 Leu Phe Met Val Leu Asn Gly Pro Tyr Thr Glu Glu Tyr Lys Leu Glu 1635 1640 1645 Met Ile Ile Glu Ala Phe Ser Thr Leu Val Ile Pro Gln Pro Ser Glu 1650 1655 1660 Val Ile Arg Lys Ser Arg Thr Met Thr Leu Cys Leu Leu Ser Asn Tyr 1665 1670 1675 1680 Leu Ser Ser Arg Gly Gly Ser Ile Leu Asp Gln Ile Glu Arg Ala Gln 1685 1690 1695 Ser Gly Thr Leu Gly Gly Phe Ser Lys Pro Gln Lys Thr Phe Ile Arg 1700 1705 1710 Pro Gly Gly Gly Val Gly Tyr Lys Gly Lys Gly Val Trp Thr Gly Val 1715 1720 1725 Met Glu Asp Thr His Val Gln Ile Leu Ile Asp Gly Asp Gly Thr Ser 1730 1735 1740 Asn Trp Leu Glu Glu Ile Arg Leu Ser Ser Asp Ala Arg Leu Tyr Asp 1745 1750 1755 1760 Val Ile Glu Ser Ile Arg Arg Leu Cys Asp Asp Leu Gly Ile Asn Asn 1765 1770 1775 Arg Val Ala Ser Ala Tyr Arg Gly His Cys Met Val Arg Leu Ser Gly 1780 1785 1790 Phe Lys Ile Lys Pro Ala Ser Arg Thr Asp Gly Cys Pro Val Arg Ile 1795 1800 1805 Met Glu Arg Gly Phe Arg Ile Arg Glu Leu Gln Asn Pro Asp Glu Val 1810 1815 1820 Lys Met Arg Val Arg Gly Asp Ile Leu Asn Leu Ser Val Thr Ile Gln 1825 1830 1835 1840 Glu Gly Arg Val Met Asn Ile Leu Ser Tyr Arg Pro Arg Asp Thr Asp 1845 1850 1855 Ile Ser Glu Ser Ala Ala Ala Tyr Leu Trp Ser Asn Arg Asp Leu Phe 1860 1865 1870 Ser Phe Gly Lys Lys Glu Pro Ser Cys Ser Trp Ile Cys Leu Lys Thr 1875 1880 1885 Leu Asp Asn Trp Ala Trp Ser His Ala Ser Val Leu Leu Ala Asn Asp 1890 1895 1900 Arg Lys Thr Gln Gly Ile Asp Asn Arg Ala Met Gly Asn Ile Phe Arg 1905 1910 1915 1920 Asp Cys Leu Glu Gly Ser Leu Arg Lys Gln Gly Leu Met Arg Ser Lys 1925 1930 1935 Leu Thr Glu Met Val Glu Lys Asn Val Val Pro Leu Thr Thr Gln Glu 1940 1945 1950 Leu Val Asp Ile Leu Glu Glu Asp Ile Asp Phe Ser Asp Val Ile Ala 1955 1960 1965 Val Glu Leu Ser Glu Gly Ser Leu Asp Ile Glu Ser Ile Phe Asp Gly 1970 1975 1980 Ala Pro Ile Leu Trp Ser Ala Glu Val Glu Glu Phe Gly Glu Gly Val 1985 1990 1995 2000 Val Ala Val Ser Tyr Ser Ser Lys Tyr Tyr His Leu Thr Leu Met Asp 2005 2010 2015 Gln Ala Ala Ile Thr Met Cys Ala Ile Met Gly Lys Glu Gly Cys Arg 2020 2025 2030 Gly Leu Leu Thr Glu Lys Arg Cys Met Ala Ala Ile Arg Glu Gln Val 2035 2040 2045 Arg Pro Phe Leu Ile Phe Leu Gln Ile Pro Glu Asp Ser Ile Ser Trp 2050 2055 2060 Val Ser Asp Gln Phe Cys Asp Ser Arg Gly Leu Asp Glu Glu Ser Thr 2065 2070 2075 2080 Ile Met Trp Gly *** 2085 <210> 10 <211> 1074 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus A type M <400> 10 Met Met Lys Val Ile Trp Phe Ser Ser Leu Ile Cys Leu Val Ile Gln 1 5 10 15 Cys Gly Gly Asp Thr Gly Pro Ile Ile Cys Ala Gly Pro Ile His Ser 20 25 30 Asn Lys Ser Ala Asp Ile Pro His Leu Leu Gly Tyr Ser Glu Lys Ile 35 40 45 Cys Gln Ile Asp Arg Leu Ile His Val Ser Ser Trp Leu Arg Asn His 50 55 60 Ser Gln Phe Gln Gly Tyr Val Gly Gln Arg Gly Gly Arg Ser Gln Val 65 70 75 80 Ser Tyr Tyr Pro Ala Glu Asn Ser Tyr Ser Arg Trp Ser Gly Leu Leu 85 90 95 Ser Pro Cys Asp Ala Asp Trp Leu Gly Met Leu Val Val Lys Lys Ala 100 105 110 Lys Gly Ser Asp Met Ile Val Pro Gly Pro Ser Tyr Lys Gly Lys Val 115 120 125 Phe Phe Glu Arg Pro Thr Phe Asp Gly Tyr Val Gly Trp Gly Cys Gly 130 135 140 Ser Gly Lys Ser Arg Thr Glu Ser Gly Glu Leu Cys Ser Ser Asp Ser 145 150 155 160 Gly Thr Ser Ser Gly Leu Leu Pro Ser Asp Arg Val Leu Trp Ile Gly 165 170 175 Asp Val Ala Cys Gln Pro Met Thr Pro Ile Pro Glu Glu Thr Phe Leu 180 185 190 Glu Leu Lys Ser Phe Ser Gln Ser Glu Phe Pro Asp Ile Cys Lys Ile 195 200 205 Asp Gly Ile Val Phe Asn Gln Cys Glu Gly Glu Ser Leu Pro Gln Pro 210 215 220 Phe Asp Val Ala Trp Met Asp Val Gly His Ser His Lys Ile Ile Met 225 230 235 240 Arg Glu His Lys Thr Lys Trp Val Gln Glu Ser Ser Ser Lys Asp Phe 245 250 255 Val Cys Tyr Lys Glu Gly Thr Gly Pro Cys Ser Glu Ser Glu Glu Lys 260 265 270 Thr Cys Lys Thr Ser Gly Ser Cys Arg Gly Asp Met Gln Phe Cys Lys 275 280 285 Val Ala Gly Cys Glu His Gly Glu Glu Ala Ser Glu Ala Lys Cys Arg 290 295 300 Cys Ser Leu Val His Lys Pro Gly Glu Val Val Val Ser Tyr Gly Gly 305 310 315 320 Met Arg Val Arg Pro Lys Cys Tyr Gly Phe Ser Arg Met Met Ala Thr 325 330 335 Leu Glu Val Asn Glu Pro Glu Gln Arg Asn Gly Gln Cys Thr Gly Cys 340 345 350 His Leu Glu Cys Ile Asn Gly Gly Val Arg Leu Ile Thr Leu Thr Ser 355 360 365 Glu Leu Lys Ser Ala Thr Val Cys Ala Ser His Phe Cys Ser Ser Ala 370 375 380 Thr Ser Gly Lys Lys Ser Thr Glu Ile Gln Phe His Ser Gly Ser Leu 385 390 395 400 Val Gly Lys Thr Ala Ile His Val Lys Gly Ala Leu Val Asp Gly Thr 405 410 415 Glu Phe Thr Phe Glu Gly Ser Cys Met Phe Pro Asp Gly Cys Asp Ala 420 425 430 Val Asp Cys Thr Phe Cys Arg Glu Phe Leu Lys Asn Pro Gln Cys Tyr 435 440 445 Pro Ala Lys Lys Trp Leu Phe Ile Ile Ile Val Ile Leu Leu Gly Tyr 450 455 460 Ala Gly Leu Met Leu Leu Thr Asn Val Leu Lys Ala Ile Gly Val Trp 465 470 475 480 Gly Ser Trp Val Ile Ala Pro Val Lys Leu Val Phe Ala Ile Ile Lys 485 490 495 Lys Leu Met Arg Ala Val Ser Cys Leu Met Gly Lys Leu Met Asp Arg 500 505 510 Gly Arg Gln Val Ile His Glu Glu Ile Gly Glu Asn Arg Glu Gly Asn 515 520 525 Gln Asp Asp Val Arg Ile Glu Met Ala Arg Pro Arg Arg Val Arg His 530 535 540 Trp Met Tyr Ser Pro Val Ile Leu Thr Ile Leu Ala Met Gly Leu Ala 545 550 555 560 Glu Gly Cys Asp Glu Met Val His Ala Asp Ser Lys Leu Val Ser Cys 565 570 575 Arg Gln Gly Ser Gly Asn Met Lys Glu Cys Val Thr Thr Gly Arg Ala 580 585 590 Leu Leu Pro Ala Val Asn Pro Gly Gln Glu Ala Cys Leu His Phe Thr 595 600 605 Ala Pro Gly Ser Pro Asp Ser Lys Cys Leu Lys Ile Lys Val Lys Arg 610 615 620 Ile Asn Leu Lys Cys Lys Lys Ser Ser Ser Tyr Phe Val Pro Asp Ala 625 630 635 640 Arg Ser Arg Cys Thr Ser Val Arg Arg Cys Arg Trp Ala Gly Asp Cys 645 650 655 Gln Ser Gly Cys Pro Pro His Phe Thr Ser Asn Ser Phe Ser Asp Asp 660 665 670 Trp Ala Gly Lys Met Asp Arg Ala Gly Leu Gly Phe Ser Gly Cys Ser 675 680 685 Asp Gly Cys Gly Gly Ala Ala Cys Gly Cys Phe Asn Ala Ala Pro Ser 690 695 700 Cys Ile Phe Trp Arg Lys Trp Val Glu Asn Pro His Gly Ile Ile Trp 705 710 715 720 Lys Val Ser Pro Cys Ala Ala Trp Val Pro Ser Ala Val Ile Glu Leu 725 730 735 Thr Met Pro Ser Gly Glu Val Arg Thr Phe His Pro Met Ser Gly Ile 740 745 750 Pro Thr Gln Val Phe Lys Gly Val Ser Val Thr Tyr Leu Gly Ser Asp 755 760 765 Met Glu Val Ser Gly Leu Thr Asp Leu Cys Glu Ile Glu Glu Leu Lys 770 775 780 Ser Lys Lys Leu Ala Leu Ala Pro Cys Asn Gln Ala Gly Met Gly Val 785 790 795 800 Val Gly Lys Val Gly Glu Ile Gln Cys Ser Ser Glu Glu Ser Ala Arg 805 810 815 Thr Ile Lys Lys Asp Gly Cys Ile Trp Asn Ala Asp Leu Val Gly Ile 820 825 830 Glu Leu Arg Val Asp Asp Ala Val Cys Tyr Ser Lys Ile Thr Ser Val 835 840 845 Glu Ala Val Ala Asn Tyr Ser Ala Ile Pro Thr Thr Ile Gly Gly Leu 850 855 860 Arg Phe Glu Arg Ser His Asp Ser Gln Gly Lys Ile Ser Gly Ser Pro 865 870 875 880 Leu Asp Ile Thr Ala Ile Arg Gly Ser Phe Ser Ile Asn Tyr Arg Gly 885 890 895 Leu Arg Leu Ser Leu Ser Glu Ile Thr Ala Thr Cys Thr Gly Glu Val 900 905 910 Thr Asn Val Ser Gly Cys Tyr Ser Cys Met Thr Gly Ala Lys Val Ser 915 920 925 Ile Lys Leu His Ser Ser Lys Asn Ser Thr Ala His Val Arg Cys Lys 930 935 940 Gly Asp Glu Thr Ala Phe Ser Val Leu Glu Gly Val His Ser Tyr Ser 945 950 955 960 Val Ser Leu Ser Phe Asp His Ala Val Val Asp Glu Gln Cys Gln Leu 965 970 975 Asn Cys Gly Gly His Glu Ser Gln Val Thr Leu Arg Gly Asn Leu Ile 980 985 990 Phe Leu Asp Val Pro Lys Phe Val Asp Gly Ser Tyr Met Gln Thr Tyr 995 1000 1005 His Ser Thr Val Pro Thr Gly Ala Asn Ile Pro Ser Pro Thr Asp Trp 1010 1015 1020 Leu Asn Ala Leu Phe Gly Asn Gly Leu Ser Arg Trp Ile Leu Gly Val 1025 1030 1035 1040 Ile Gly Val Leu Leu Gly Gly Leu Ala Leu Phe Phe Leu Ile Met Ser 1045 1050 1055 Leu Phe Lys Leu Gly Thr Lys Gln Val Phe Arg Ser Arg Thr Lys Leu 1060 1065 1070 Ala *** <210> 11 <211> 246 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus A type NP <400> 11 Met Ser Glu Trp Ser Arg Ile Ala Val Glu Phe Gly Glu Gln Gln Leu 1 5 10 15 Asn Leu Thr Glu Leu Glu Asp Phe Ala Arg Glu Leu Ala Tyr Glu Gly 20 25 30 Leu Asp Pro Ala Leu Ile Ile Lys Lys Leu Lys Glu Thr Gly Gly Asp 35 40 45 Asp Trp Val Lys Asp Thr Lys Phe Ile Ile Val Phe Ala Leu Thr Arg 50 55 60 Gly Asn Lys Ile Val Lys Ala Ser Gly Lys Met Ser Asn Ser Gly Ser 65 70 75 80 Lys Arg Leu Met Ala Leu Gln Glu Lys Tyr Gly Leu Val Glu Arg Ala 85 90 95 Glu Thr Arg Leu Ser Ile Thr Pro Val Arg Val Ala Gln Ser Leu Pro 100 105 110 Thr Trp Thr Cys Ala Ala Ala Ala Ala Leu Lys Glu Tyr Leu Pro Val 115 120 125 Gly Pro Ala Val Met Asn Leu Lys Val Glu Asn Tyr Pro Pro Glu Met 130 135 140 Met Cys Met Ala Phe Gly Ser Leu Ile Pro Thr Ala Gly Val Ser Glu 145 150 155 160 Ala Thr Thr Lys Thr Leu Met Glu Ala Tyr Ser Leu Trp Gln Asp Ala 165 170 175 Phe Thr Lys Thr Ile Asn Val Lys Met Arg Gly Ala Ser Lys Thr Glu 180 185 190 Val Tyr Asn Ser Phe Arg Asp Pro Leu His Ala Ala Val Asn Ser Val 195 200 205 Phe Phe Pro Asn Asp Val Arg Val Lys Trp Leu Lys Ala Lys Gly Ile 210 215 220 Leu Gly Pro Asp Gly Val Pro Ser Arg Ala Ala Glu Val Ala Ala Ala 225 230 235 240 Ala Tyr Arg Asn Leu *** 245 <210> 12 <211> 294 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus A type NS <400> 12 Met Ser Leu Ser Lys Cys Ser Asn Val Asp Leu Lys Ser Val Ala Met 1 5 10 15 Asn Ala Asn Thr Val Arg Leu Glu Pro Ser Leu Gly Glu Tyr Pro Thr 20 25 30 Leu Arg Arg Asp Leu Val Glu Cys Ser Cys Ser Val Leu Thr Leu Ser 35 40 45 Met Val Lys Arg Met Gly Lys Met Thr Asn Thr Val Trp Leu Phe Gly 50 55 60 Asn Pro Lys Asn Pro Leu His Gln Leu Glu Pro Gly Leu Glu Gln Leu 65 70 75 80 Leu Asp Met Tyr Tyr Lys Asp Met Arg Cys Tyr Ser Gln Arg Glu Leu 85 90 95 Ser Ala Leu Arg Trp Pro Ser Gly Lys Pro Ser Val Trp Phe Leu Gln 100 105 110 Ala Ala His Met Phe Phe Ser Ile Lys Asn Ser Trp Ala Met Glu Thr 115 120 125 Gly Arg Glu Asn Trp Arg Gly Leu Phe His Arg Ile Thr Lys Gly Gln 130 135 140 Lys Tyr Leu Phe Glu Gly Asp Met Ile Leu Asp Ser Leu Glu Ala Ile 145 150 155 160 Glu Lys Arg Arg Leu Arg Leu Gly Leu Pro Glu Ile Leu Ile Thr Gly 165 170 175 Leu Ser Pro Ile Leu Asp Val Ala Leu Leu Gln Ile Glu Ser Leu Ala 180 185 190 Arg Leu Arg Gly Met Ser Leu Asn His His Leu Phe Thr Ser Ser Ser 195 200 205 Leu Arg Lys Pro Leu Leu Asp Cys Trp Asp Phe Phe Ile Pro Ile Arg 210 215 220 Lys Lys Lys Thr Asp Gly Ser Tyr Ser Val Leu Asp Glu Asp Asp Glu 225 230 235 240 Pro Gly Val Leu Gln Gly Tyr Pro Tyr Leu Met Ala His Tyr Leu Asn 245 250 255 Arg Cys Pro Phe His Asn Leu Ile Arg Phe Asp Glu Glu Leu Arg Thr 260 265 270 Ala Ala Leu Asn Thr Ile Trp Gly Arg Asp Trp Pro Ala Ile Gly Asp 275 280 285 Leu Pro Lys Glu Val *** 290 <210> 13 <211> 2085 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus F type L <400> 13 Met Asp Leu Glu Val Leu Cys Gly Arg Ile Asn Val Glu Asn Gly Leu 1 5 10 15 Ser Leu Gly Glu Pro Gly Leu Tyr Asp Gln Ile Tyr Asp Arg Pro Gly 20 25 30 Leu Pro Asp Leu Asp Val Thr Val Asp Ala Thr Gly Val Thr Val Asp 35 40 45 Ile Gly Ala Val Pro Asp Ser Ala Ser Gln Leu Gly Ser Ser Ile Asn 50 55 60 Ala Gly Leu Ile Thr Ile Gln Leu Ser Glu Ala Tyr Lys Ile Asn His 65 70 75 80 Asp Phe Thr Phe Ser Gly Leu Ser Lys Thr Thr Asp Arg Arg Leu Ser 85 90 95 Glu Val Phe Pro Ile Thr His Asp Gly Ser Asp Gly Met Thr Pro Asp 100 105 110 Val Ile His Thr Arg Leu Asp Gly Thr Ile Val Val Val Glu Phe Ser 115 120 125 Thr Thr Arg Ser His Asn Ile Gly Gly Leu Glu Ala Ala Tyr Arg Thr 130 135 140 Lys Ile Glu Lys Tyr Arg Asp Pro Ile Ser Arg Arg Val Asp Ile Met 145 150 155 160 Glu Asn Pro Arg Val Phe Phe Gly Val Ile Val Val Ser Ser Gly Gly 165 170 175 Val Leu Ser Asn Met Pro Leu Thr Gln Asp Glu Ala Glu Glu Leu Met 180 185 190 Tyr Arg Phe Cys Ile Ala Asn Glu Ile Tyr Thr Lys Ala Arg Ser Met 195 200 205 Asp Ala Asp Ile Glu Leu Gln Lys Ser Glu Glu Glu Leu Glu Ala Ile 210 215 220 Ser Arg Ala Leu Ser Phe Phe Ser Leu Phe Glu Pro Asn Ile Glu Arg 225 230 235 240 Val Glu Gly Thr Phe Pro Asn Ser Glu Ile Glu Met Leu Glu Gln Phe 245 250 255 Leu Ser Thr Pro Ala Asp Val Asp Phe Ile Thr Lys Thr Leu Lys Ala 260 265 270 Lys Glu Val Glu Ala Tyr Ala Asp Leu Cys Asp Ser His Tyr Leu Lys 275 280 285 Pro Glu Lys Thr Ile Gln Glu Arg Leu Glu Ile Asn Arg Cys Glu Ala 290 295 300 Ile Asp Lys Thr Gln Asp Leu Leu Ala Gly Leu His Ala Arg Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gln Thr Ser Leu Asn Arg Gly Thr Val Lys Leu Pro Pro Trp Leu 325 330 335 Pro Lys Pro Ser Ser Glu Ser Ile Asp Ile Lys Thr Asp Ser Gly Phe 340 345 350 Gly Ser Leu Met Asp His Gly Ala Tyr Gly Glu Leu Trp Ala Lys Cys 355 360 365 Leu Leu Asp Val Ser Leu Gly Asn Val Glu Gly Val Val Ser Asp Pro 370 375 380 Ala Lys Glu Leu Asp Ile Ala Ile Ser Asp Asp Pro Glu Lys Asp Thr 385 390 395 400 Pro Lys Glu Ala Lys Ile Thr Tyr Arg Arg Phe Lys Pro Ala Leu Ser 405 410 415 Ser Ser Ala Arg Gln Glu Phe Ser Leu Gln Gly Val Glu Gly Lys Lys 420 425 430 Trp Lys Arg Met Ala Ala Asn Gln Lys Lys Glu Lys Glu Ser His Glu 435 440 445 Thr Leu Ser Pro Phe Leu Asp Val Asp Asp Ile Gly Asp Phe Leu Thr 450 455 460 Phe Asn Asn Leu Leu Ala Asp Ser Arg Tyr Gly Asp Glu Ser Ile Gln 465 470 475 480 Arg Ala Val Ser Ile Leu Leu Glu Lys Ala Ser Ala Met Gln Asp Thr 485 490 495 Glu Leu Thr His Ala Leu Asn Asp Ser Phe Lys Arg Asn Leu Ser Ser 500 505 510 Asn Val Val Gln Trp Ser Leu Trp Val Ser Cys Leu Ala Gln Glu Leu 515 520 525 Ala Ser Ala Leu Lys Gln His Cys Arg Ala Gly Glu Phe Ile Ile Lys 530 535 540 Lys Leu Lys Phe Trp Pro Ile Tyr Val Ile Ile Lys Pro Thr Lys Ser 545 550 555 560 Ser Ser His Ile Phe Tyr Ser Leu Gly Ile Arg Lys Ala Asp Val Thr 565 570 575 Arg Arg Leu Thr Gly Arg Val Phe Ser Asp Thr Ile Asp Ala Gly Glu 580 585 590 Trp Glu Leu Thr Glu Phe Lys Ser Leu Lys Thr Cys Lys Leu Thr Asn 595 600 605 Leu Val Asn Leu Pro Cys Thr Met Leu Asn Ser Ile Ala Phe Trp Arg 610 615 620 Glu Lys Leu Gly Val Ala Pro Trp Leu Val Arg Lys Pro Cys Ser Glu 625 630 635 640 Leu Arg Glu Gln Val Gly Leu Thr Phe Leu Val Ser Leu Glu Asp Lys 645 650 655 Ser Lys Thr Glu Glu Ile Ile Thr Leu Thr Arg Tyr Thr Gln Met Glu 660 665 670 Gly Phe Val Ser Pro Pro Met Leu Pro Lys Pro Gln Lys Met Leu Gly 675 680 685 Lys Leu Glu Gly Pro Leu Arg Thr Lys Leu Gln Val Tyr Leu Leu Arg 690 695 700 Lys His Leu Asp Cys Met Val Arg Ile Ala Ser Gln Pro Phe Ser Leu 705 710 715 720 Ile Pro Arg Glu Gly Arg Val Glu Trp Gly Gly Thr Phe His Ala Ile 725 730 735 Ser Gly Arg Ser Thr Asn Leu Glu Asn Met Val Asn Ser Trp Tyr Ile 740 745 750 Gly Tyr Tyr Lys Asn Lys Glu Glu Ser Thr Glu Leu Asn Ala Leu Gly 755 760 765 Glu Met Tyr Lys Lys Ile Val Glu Met Glu Glu Asp Lys Pro Ser Ser 770 775 780 Pro Glu Phe Leu Gly Trp Gly Asp Thr Asp Ser Pro Lys Lys His Glu 785 790 795 800 Phe Ser Arg Ser Phe Leu Arg Ala Ala Cys Ser Ser Leu Glu Arg Glu 805 810 815 Ile Ala Gln Arg His Gly Arg Gln Trp Lys Gln Asn Leu Glu Glu Arg 820 825 830 Val Leu Arg Glu Ile Gly Ala Lys Asn Ile Leu Asp Leu Ala Ser Met 835 840 845 Lys Ala Thr Ser Asn Phe Ser Lys Asp Trp Glu Leu Tyr Ser Glu Val 850 855 860 Gln Thr Lys Glu Tyr His Arg Ser Lys Leu Leu Glu Lys Met Ala Thr 865 870 875 880 Leu Ile Glu Lys Gly Val Met Trp Tyr Ile Asp Ala Val Gly Gln Ala 885 890 895 Trp Lys Ala Val Leu Asp Asp Gly Cys Met Arg Ile Cys Leu Phe Lys 900 905 910 Lys Asn Gln His Gly Gly Leu Arg Glu Ile Tyr Val Met Asp Ala Asn 915 920 925 Ala Arg Leu Val Gln Phe Gly Val Glu Thr Met Ala Arg Cys Val Cys 930 935 940 Glu Leu Ser Pro His Glu Thr Val Ala Asn Pro Arg Leu Lys Asn Ser 945 950 955 960 Ile Ile Glu Asn His Gly Leu Lys Ser Ala Arg Ser Leu Gly Pro Gly 965 970 975 Ser Ile Asn Ile Asn Ser Ser Asn Asp Ala Lys Lys Trp Asn Gln Gly 980 985 990 His Tyr Thr Thr Lys Leu Ala Leu Val Leu Cys Trp Phe Met Pro Ala 995 1000 1005 Lys Phe His Arg Phe Ile Trp Ala Ala Ile Ser Met Phe Arg Arg Lys 1010 1015 1020 Lys Met Met Val Asp Leu Arg Phe Leu Ala His Leu Ser Ser Lys Ser 1025 1030 1035 1040 Glu Ser Arg Ser Ser Asp Pro Phe Arg Glu Ala Met Thr Asp Ala Phe 1045 1050 1055 His Gly Asn Arg Asp Val Ser Trp Met Asp Lys Gly Arg Thr Tyr Ile 1060 1065 1070 Lys Thr Glu Thr Gly Met Met Gln Gly Ile Leu His Phe Thr Ser Ser 1075 1080 1085 Leu Leu His Ser Cys Val Gln Ser Phe Tyr Lys Ser Tyr Phe Val Ser 1090 1095 1100 Lys Leu Lys Glu Gly Tyr Met Gly Glu Ser Ile Ser Gly Val Val Asp 1105 1110 1115 1120 Val Ile Glu Gly Ser Asp Asp Ser Ala Ile Met Ile Ser Ile Arg Pro 1125 1130 1135 Lys Ser Asp Met Asp Glu Val Arg Ser Arg Phe Phe Val Ala Asn Leu 1140 1145 1150 Leu His Ser Val Lys Phe Leu Asn Pro Leu Phe Gly Ile Tyr Ser Ser 1155 1160 1165 Glu Lys Ser Thr Val Asn Thr Val Tyr Cys Val Glu Tyr Asn Ser Glu 1170 1175 1180 Phe His Phe His Arg His Leu Val Arg Pro Thr Leu Arg Trp Ile Ala 1185 1190 1195 1200 Ala Ser His Gln Ile Ser Glu Thr Glu Ala Leu Ala Ser Arg Gln Glu 1205 1210 1215 Asp Tyr Ser Asn Leu Leu Thr Gln Cys Leu Glu Gly Gly Ala Ser Phe 1220 1225 1230 Ser Leu Thr Tyr Leu Ile Gln Cys Ala Gln Leu Leu His His Tyr Met 1235 1240 1245 Leu Leu Gly Leu Cys Leu His Pro Leu Phe Gly Thr Phe Met Gly Met 1250 1255 1260 Leu Ile Ser Asp Pro Asp Pro Ala Leu Gly Phe Phe Leu Met Asp Asn 1265 1270 1275 1280 Pro Ala Phe Ala Gly Gly Ala Gly Phe Arg Phe Asn Leu Trp Arg Ala 1285 1290 1295 Cys Lys Thr Thr Asp Leu Gly Arg Lys Tyr Ala Tyr Tyr Phe Asn Glu 1300 1305 1310 Ile Gln Gly Lys Thr Lys Gly Asp Glu Asp Tyr Arg Ala Leu Asp Ala 1315 1320 1325 Thr Ser Gly Gly Thr Leu Ser His Ser Val Met Val Tyr Trp Gly Asp 1330 1335 1340 Arg Lys Lys Tyr Gln Ala Leu Leu Asn Arg Met Gly Leu Pro Glu Asp 1345 1350 1355 1360 Trp Val Glu Gln Ile Asp Glu Asn Pro Gly Val Leu Tyr Arg Arg Ala 1365 1370 1375 Ala Asn Lys Lys Glu Leu Leu Leu Lys Leu Ala Glu Lys Val His Ser 1380 1385 1390 Pro Gly Val Thr Ser Ser Leu Ser Lys Gly His Val Val Pro Arg Val 1395 1400 1405 Val Ala Ala Gly Val Tyr Leu Leu Ser Arg His Cys Phe Arg Phe Ser 1410 1415 1420 Ser Ser Ile His Gly Arg Gly Ser Thr Gln Lys Ala Ser Leu Ile Lys 1425 1430 1435 1440 Leu Leu Met Met Ser Ser Ile Ser Ala Met Lys His Gly Gly Ser Leu 1445 1450 1455 Asn Pro Asn Gln Glu Arg Met Leu Phe Pro Gln Ala Gln Glu Tyr Asp 1460 1465 1470 Arg Val Cys Thr Leu Leu Glu Glu Val Glu His Leu Thr Gly Lys Phe 1475 1480 1485 Val Val Arg Glu Arg Asn Ile Val Arg Ser Arg Ile Asp Leu Phe Gln 1490 1495 1500 Glu Pro Val Asp Leu Arg Cys Lys Ala Glu Asp Leu Val Ser Glu Val 1505 1510 1515 1520 Trp Phe Gly Leu Lys Arg Thr Lys Leu Gly Pro Arg Leu Leu Lys Glu 1525 1530 1535 Glu Trp Asp Lys Leu Arg Ala Ser Phe Ala Trp Leu Ser Thr Asp Pro 1540 1545 1550 Ser Glu Thr Leu Arg Asp Gly Pro Phe Leu Ser His Val Gln Phe Arg 1555 1560 1565 Asn Phe Ile Ala His Val Asp Ala Lys Ser Arg Ser Val Arg Leu Leu 1570 1575 1580 Gly Ala Pro Val Lys Lys Ser Gly Gly Val Thr Thr Ile Ser Gln Val 1585 1590 1595 1600 Val Arg Met Asn Phe Phe Pro Gly Phe Ser Leu Glu Ala Glu Lys Ser 1605 1610 1615 Leu Asp Asn Gln Glu Arg Leu Glu Ser Ile Ser Ile Leu Lys His Val 1620 1625 1630 Leu Phe Met Val Leu Asn Gly Pro Tyr Thr Glu Glu Tyr Lys Leu Glu 1635 1640 1645 Met Ile Ile Glu Ala Phe Ser Thr Leu Val Ile Pro Gln Pro Ser Glu 1650 1655 1660 Val Ile Arg Lys Ser Arg Thr Met Thr Leu Cys Leu Leu Ser Asn Tyr 1665 1670 1675 1680 Leu Ser Ser Arg Gly Gly Ser Ile Leu Asp Gln Ile Glu Arg Ala Gln 1685 1690 1695 Ser Gly Thr Leu Gly Gly Phe Ser Lys Pro Gln Lys Thr Phe Ile Arg 1700 1705 1710 Pro Gly Gly Gly Val Gly Tyr Lys Gly Lys Gly Val Trp Thr Gly Val 1715 1720 1725 Met Glu Asp Thr His Val Gln Ile Leu Ile Asp Gly Asp Gly Thr Ser 1730 1735 1740 Asn Trp Leu Glu Glu Ile Arg Leu Ser Ser Asp Ala Arg Leu Tyr Asp 1745 1750 1755 1760 Val Ile Glu Ser Ile Arg Arg Leu Cys Asp Asp Leu Gly Ile Asn Asn 1765 1770 1775 Arg Val Ala Ser Ala Tyr Arg Gly His Cys Met Val Arg Leu Ser Gly 1780 1785 1790 Phe Lys Ile Lys Pro Ala Ser Arg Thr Asp Gly Cys Pro Val Arg Ile 1795 1800 1805 Met Glu Arg Gly Phe Arg Ile Arg Glu Leu Gln Asn Pro Asp Glu Val 1810 1815 1820 Lys Met Arg Val Arg Gly Asp Ile Leu Asn Leu Ser Val Thr Ile Gln 1825 1830 1835 1840 Glu Gly Arg Val Met Asn Ile Leu Ser Tyr Arg Pro Arg Asp Thr Asp 1845 1850 1855 Ile Ser Glu Ser Ala Ala Ala Tyr Leu Trp Ser Asn Arg Asp Leu Phe 1860 1865 1870 Ser Phe Gly Lys Lys Glu Pro Ser Cys Ser Trp Ile Cys Leu Lys Thr 1875 1880 1885 Leu Asp Asn Trp Ala Trp Ser His Ala Ser Val Leu Leu Ala Asn Asp 1890 1895 1900 Arg Lys Thr Gln Gly Ile Asp Asn Arg Ala Met Gly Asn Ile Phe Arg 1905 1910 1915 1920 Asp Cys Leu Glu Gly Ser Leu Arg Lys Gln Gly Leu Met Arg Ser Lys 1925 1930 1935 Leu Thr Glu Met Val Glu Lys Asn Val Val Pro Leu Thr Thr Gln Glu 1940 1945 1950 Leu Val Asp Ile Leu Glu Glu Asp Ile Asp Phe Ser Asp Val Ile Ala 1955 1960 1965 Val Glu Leu Ser Glu Gly Ser Leu Asp Ile Glu Ser Ile Phe Asp Gly 1970 1975 1980 Ala Pro Ile Leu Trp Ser Ala Glu Val Glu Glu Phe Gly Glu Gly Val 1985 1990 1995 2000 Val Ala Val Ser Tyr Ser Ser Lys Tyr Tyr His Leu Thr Leu Met Asp 2005 2010 2015 Gln Ala Ala Ile Thr Met Cys Ala Ile Met Gly Lys Glu Gly Cys Arg 2020 2025 2030 Gly Leu Leu Thr Glu Lys Arg Cys Met Ala Ala Ile Arg Glu Gln Val 2035 2040 2045 Arg Pro Phe Leu Ile Phe Leu Gln Ile Pro Glu Asp Ser Ile Ser Trp 2050 2055 2060 Val Ser Asp Gln Phe Cys Asp Ser Arg Gly Leu Asp Glu Glu Ser Thr 2065 2070 2075 2080 Ile Met Trp Gly *** 2085 <210> 14 <211> 1074 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus F type M <400> 14 Met Met Lys Val Ile Trp Phe Ser Ser Leu Ile Cys Phe Val Ile Gln 1 5 10 15 Cys Ser Gly Asp Ser Gly Pro Ile Ile Cys Ala Gly Pro Ile His Ser 20 25 30 Asn Lys Ser Ala Asp Ile Pro His Leu Leu Gly Tyr Ser Glu Lys Ile 35 40 45 Cys Gln Ile Asp Arg Leu Ile His Val Ser Ser Trp Leu Arg Asn His 50 55 60 Ser Gln Phe Gln Gly Tyr Val Gly Gln Arg Gly Gly Arg Ser Gln Val 65 70 75 80 Ser Tyr Tyr Pro Ala Glu Asn Ser Tyr Ser Arg Trp Ser Gly Leu Leu 85 90 95 Ser Pro Cys Asp Ala Asp Trp Leu Gly Met Leu Val Val Lys Lys Ala 100 105 110 Lys Gly Ser Asp Met Ile Val Pro Gly Pro Ser Tyr Lys Gly Lys Val 115 120 125 Phe Phe Glu Arg Pro Thr Phe Asp Gly Tyr Val Gly Trp Gly Cys Gly 130 135 140 Ser Gly Lys Ser Arg Thr Glu Ser Gly Glu Leu Cys Ser Ser Asp Ser 145 150 155 160 Gly Thr Ser Ser Gly Leu Leu Pro Ser Asp Arg Val Leu Trp Ile Gly 165 170 175 Asp Val Ala Cys Gln Pro Met Thr Pro Ile Pro Glu Glu Thr Phe Leu 180 185 190 Glu Leu Lys Ser Phe Ser Gln Ser Glu Phe Pro Asp Ile Cys Lys Ile 195 200 205 Asp Gly Ile Val Phe Asn Gln Cys Glu Gly Glu Ser Leu Pro Gln Pro 210 215 220 Phe Asp Val Ala Trp Met Asp Val Gly His Ser His Lys Ile Ile Met 225 230 235 240 Arg Glu His Lys Thr Lys Trp Val Gln Glu Ser Ser Ser Lys Asp Phe 245 250 255 Val Cys Tyr Lys Glu Gly Thr Gly Pro Cys Ser Glu Ser Glu Glu Lys 260 265 270 Thr Cys Lys Thr Ser Gly Ser Cys Arg Gly Asp Met Gln Phe Cys Lys 275 280 285 Val Ala Gly Cys Glu His Gly Glu Glu Ala Ser Glu Ala Lys Cys Arg 290 295 300 Cys Ser Leu Val His Lys Pro Gly Glu Val Val Val Ser Tyr Gly Gly 305 310 315 320 Met Arg Val Arg Pro Lys Cys Tyr Gly Phe Ser Arg Met Met Ala Thr 325 330 335 Leu Glu Val Asn Gln Pro Glu Gln Arg Ile Gly Gln Cys Thr Gly Cys 340 345 350 His Leu Glu Cys Ile Asn Gly Gly Val Arg Leu Ile Thr Leu Thr Ser 355 360 365 Glu Leu Lys Ser Ala Thr Val Cys Ala Ser His Phe Cys Ser Ser Ala 370 375 380 Thr Ser Gly Lys Lys Ser Thr Glu Ile Gln Phe His Ser Gly Ser Leu 385 390 395 400 Val Gly Lys Thr Ala Ile His Val Lys Gly Ala Leu Val Asp Gly Thr 405 410 415 Glu Phe Thr Phe Glu Gly Ser Cys Met Phe Pro Asp Gly Cys Asp Ala 420 425 430 Val Asp Cys Thr Phe Cys Arg Glu Phe Leu Lys Asn Pro Gln Cys Tyr 435 440 445 Pro Ala Lys Lys Trp Leu Phe Ile Ile Ile Val Ile Leu Leu Gly Tyr 450 455 460 Ala Gly Leu Met Leu Leu Thr Asn Val Leu Lys Ala Ile Gly Ile Trp 465 470 475 480 Gly Ser Trp Val Ile Ala Pro Val Lys Leu Ile Phe Ala Ile Ile Lys 485 490 495 Lys Leu Met Arg Thr Val Ser Cys Leu Met Gly Lys Leu Met Asp Arg 500 505 510 Gly Arg Gln Val Ile His Glu Glu Ile Gly Glu Asn Arg Glu Gly Asn 515 520 525 Gln Asp Asp Val Arg Ile Glu Met Ala Arg Pro Arg Arg Val Arg His 530 535 540 Trp Met Tyr Ser Pro Val Ile Leu Thr Ile Leu Ala Ile Gly Leu Ala 545 550 555 560 Glu Ser Cys Asp Glu Met Val His Ala Asp Ser Lys Leu Val Ser Cys 565 570 575 Arg Gln Gly Ser Gly Asn Met Lys Glu Cys Val Thr Thr Gly Arg Ala 580 585 590 Leu Leu Pro Ala Val Asn Pro Gly Gln Glu Ala Cys Leu His Phe Thr 595 600 605 Ala Pro Gly Ser Pro Asp Ser Lys Cys Leu Lys Ile Lys Val Lys Arg 610 615 620 Ile Asn Leu Lys Cys Lys Lys Ser Ser Ser Tyr Phe Val Pro Asp Ala 625 630 635 640 Arg Ser Arg Cys Thr Ser Val Arg Arg Cys Arg Trp Ala Gly Asp Cys 645 650 655 Gln Ser Gly Cys Pro Pro His Phe Thr Ser Asn Ser Phe Ser Asp Asp 660 665 670 Trp Ala Gly Lys Met Asp Arg Ala Gly Leu Gly Phe Ser Gly Cys Ser 675 680 685 Asp Gly Cys Gly Gly Ala Ala Cys Gly Cys Phe Asn Ala Ala Pro Ser 690 695 700 Cys Ile Phe Trp Arg Lys Trp Val Glu Asn Pro His Gly Ile Ile Trp 705 710 715 720 Lys Val Ser Pro Cys Ala Ala Trp Val Pro Ser Ala Val Ile Glu Leu 725 730 735 Thr Met Pro Ser Gly Glu Val Arg Thr Phe His Pro Met Ser Gly Ile 740 745 750 Pro Thr Gln Val Phe Lys Gly Val Ser Val Thr Tyr Leu Gly Ser Asp 755 760 765 Met Glu Val Ser Gly Leu Thr Asp Leu Cys Glu Ile Glu Glu Leu Lys 770 775 780 Ser Lys Lys Leu Ala Leu Ala Pro Cys Asn Gln Ala Gly Met Gly Val 785 790 795 800 Val Gly Lys Val Gly Glu Ile Gln Cys Ser Ser Glu Glu Ser Ala Arg 805 810 815 Thr Ile Lys Lys Asp Gly Cys Ile Trp Asn Ala Asp Leu Val Gly Ile 820 825 830 Glu Leu Arg Val Asp Asp Ala Val Cys Tyr Ser Lys Ile Thr Ser Val 835 840 845 Glu Ala Val Ala Asn Tyr Ser Ala Ile Pro Thr Thr Ile Gly Gly Leu 850 855 860 Arg Phe Glu Arg Ser His Asp Ser Gln Gly Lys Ile Ser Gly Ser Pro 865 870 875 880 Leu Asp Ile Thr Ala Ile Arg Gly Ser Phe Ser Val Asn Tyr Arg Gly 885 890 895 Leu Arg Leu Ser Leu Ser Glu Ile Thr Ala Thr Cys Thr Gly Glu Val 900 905 910 Thr Asn Val Ser Gly Cys Tyr Ser Cys Met Thr Gly Ala Lys Val Ser 915 920 925 Ile Lys Leu His Ser Ser Lys Asn Ser Thr Ala His Val Arg Cys Lys 930 935 940 Gly Asp Glu Thr Ala Phe Ser Val Leu Glu Gly Val His Ser Tyr Thr 945 950 955 960 Val Asn Leu Ser Phe Asp His Ala Val Val Asp Glu Gln Cys Gln Leu 965 970 975 Asn Cys Gly Gly His Glu Ser Gln Val Thr Leu Lys Gly Asn Leu Ile 980 985 990 Phe Leu Asp Val Pro Lys Phe Val Asp Gly Ser Tyr Met Gln Thr Tyr 995 1000 1005 His Ser Thr Val Pro Thr Gly Ala Asn Ile Pro Ser Pro Thr Asp Trp 1010 1015 1020 Leu Asn Ala Leu Phe Gly Asn Gly Leu Ser Arg Trp Ile Leu Gly Val 1025 1030 1035 1040 Ile Gly Val Leu Leu Gly Gly Leu Ala Leu Phe Phe Met Ile Met Ser 1045 1050 1055 Leu Phe Lys Leu Gly Thr Lys Gln Val Phe Arg Ser Arg Thr Lys Leu 1060 1065 1070 Ala *** <210> 15 <211> 246 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus F type NP <400> 15 Met Ser Glu Trp Ser Arg Ile Ala Val Glu Phe Gly Glu Gln Gln Leu 1 5 10 15 Asn Leu Thr Glu Leu Glu Asp Phe Ala Arg Glu Leu Ala Tyr Glu Gly 20 25 30 Leu Asp Pro Ala Leu Ile Ile Lys Lys Leu Lys Glu Thr Gly Gly Asp 35 40 45 Asp Trp Val Lys Asp Thr Lys Phe Ile Ile Val Phe Ala Leu Thr Arg 50 55 60 Gly Asn Lys Ile Val Lys Ala Ser Gly Lys Met Ser Asn Ser Gly Ser 65 70 75 80 Lys Arg Leu Met Ala Leu Gln Glu Lys Tyr Gly Leu Val Glu Arg Ala 85 90 95 Glu Thr Arg Leu Ser Ile Thr Pro Val Arg Val Ala Gln Ser Leu Pro 100 105 110 Thr Trp Thr Cys Ala Ala Ala Ala Ala Leu Lys Glu Tyr Leu Pro Val 115 120 125 Gly Pro Ala Val Met Asn Leu Lys Val Glu Asn Tyr Pro Pro Glu Met 130 135 140 Met Cys Met Ala Phe Gly Ser Leu Ile Pro Thr Ala Gly Val Ser Glu 145 150 155 160 Ala Thr Thr Lys Thr Leu Met Glu Ala Tyr Ser Leu Trp Gln Asp Ala 165 170 175 Phe Thr Lys Thr Ile Asn Val Lys Met Arg Gly Ala Ser Lys Thr Glu 180 185 190 Val Tyr Asn Ser Phe Arg Asp Pro Leu His Ala Ala Val Asn Ser Val 195 200 205 Phe Phe Pro Asn Asp Val Arg Val Lys Trp Leu Lys Ala Lys Gly Ile 210 215 220 Leu Gly Pro Asp Gly Val Pro Ser Arg Ala Ala Glu Val Ala Ala Ala 225 230 235 240 Ala Tyr Arg Asn Leu *** 245 <210> 16 <211> 294 <212> PRT <213> Unknown <220> <223> severe fever thrombocytopenia syndrome virus F type NS <400> 16 Met Ser Leu Ser Lys Cys Ser Asn Val Asp Leu Lys Ser Val Ala Met 1 5 10 15 Asn Ala Asn Thr Val Arg Leu Glu Pro Ser Leu Gly Glu Tyr Pro Thr 20 25 30 Leu Arg Arg Asp Leu Val Glu Cys Ser Cys Ser Val Leu Thr Leu Ser 35 40 45 Met Val Lys Arg Met Gly Lys Met Thr Asn Thr Val Trp Leu Phe Gly 50 55 60 Asn Pro Lys Asn Pro Leu His Gln Leu Glu Pro Gly Leu Glu Gln Leu 65 70 75 80 Leu Asp Met Tyr Tyr Lys Asp Met Arg Cys Tyr Ser Gln Arg Glu Leu 85 90 95 Ser Ala Leu Arg Trp Pro Ser Gly Lys Pro Ser Val Trp Phe Leu Gln 100 105 110 Ala Ala His Met Phe Phe Ser Ile Lys Asn Ser Trp Ala Met Glu Thr 115 120 125 Gly Arg Glu Asn Trp Arg Gly Leu Phe His Arg Ile Thr Lys Gly Arg 130 135 140 Arg Tyr Leu Phe Glu Gly Asp Met Ile Leu Asp Ser Leu Glu Ala Ile 145 150 155 160 Glu Lys Arg Arg Leu Arg Leu Gly Leu Pro Asp Ile Leu Ile Thr Gly 165 170 175 Leu Ser Pro Ile Leu Asp Val Ala Leu Leu Gln Ile Glu Ser Leu Ala 180 185 190 Arg Leu Arg Gly Met Ser Leu Asn His His Leu Phe Thr Ser Ser Ser 195 200 205 Leu Arg Lys Pro Leu Leu Asp Cys Trp Asp Phe Phe Ile Pro Ile Arg 210 215 220 Lys Lys Lys Thr Asp Gly Ser Tyr Ser Val Leu Asp Glu Asp Asp Glu 225 230 235 240 Pro Gly Val Leu Gln Gly Tyr Pro Tyr Leu Met Ala His Tyr Leu Asn 245 250 255 Arg Cys Pro Phe His Asn Leu Ile Arg Phe Asp Glu Glu Leu Arg Thr 260 265 270 Ala Ala Leu Asn Thr Ile Trp Gly Arg Asp Trp Pro Ala Ile Gly Asp 275 280 285 Pro Pro Lys Glu Val *** 290

Claims (13)

  1. L 유전자의 ORF (6255bp)에서 발현된 단백질의 1061번 아미노산이 아스파르트산이고, M 유전자의 ORF (3222bp)에서 발현된 단백질의 18번째 아미노산이 세린, 562번째 아미노산이 세린, 960번째 아미노산이 트레오닌, 988번째 아미노산이 라이신 및 1053번째 아미노산이 메티오닌이며, S 유전자의 ORF (1674bp)에서 발현된 단백질 NS(294aa)의 145번째 아미노산이 아르기닌 및 171번째 아미노산이 아스파르트산이고; 상기에서, L 유전자의 ORF (6255bp)에서 발현된 단백질이 서열번호 13의 아미노산 서열로 이루어지고, M 유전자의 ORF (3222bp)에서 발현된 단백질이 서열번호 14의 아미노산 서열로 이루어지며, S 유전자의 ORF (1674bp)에서 발현된 단백질 NS(294aa)가 서열번호 16의 아미노산 서열로 이루어진, 중증열성 혈소판 감소증 바이러스(severe fever thrombocytopenia syndrome virus, SFTSV).
  2. 제 1항에 있어서, 서열번호 5의 염기서열로 이루어진 L 유전자, 서열번호 6의 염기서열로 이루어진 M 유전자, 서열번호 7의 염기서열로 이루어진 S(NP) 유전자 및 서열번호 8의 염기서열로 이루어진 S(NS) 유전자를 포함하는, 중증열성 혈소판 감소증 바이러스.
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 제 1항의 중증열성 혈소판 감소증 바이러스를 유효성분으로 포함하는, 중증열성 혈소판 감소증의 예방 또는 치료용 면역원성 조성물.
  6. 제 5항에 있어서, 불활화한 중증열성 혈소판 감소증 바이러스와 약제학적으로 수용가능한 담체 (carrier) 또는 아쥬반트(adjuvant)를 포함하는, 중증열성 혈소판 감소증의 예방 또는 치료용 면역원성 조성물.
  7. 제 5항에 있어서, 상기 면역원성 조성물의 형태는 생독 백신, 사독 백신, 약독화된 중증열성 혈소판 감소증 바이러스의 유전자를 사용하여 생산한 서브유니트 백신, 벡터 백신, 키메라 백신, DNA 및 RNA 백신으로 구성된 군으로부터 선택되는, 중증열성 혈소판 감소증의 예방 또는 치료용 면역원성 조성물.
  8. 제 5항에 있어서, 서열번호 1의 염기서열로 이루어진 L 유전자, 서열번호 2의 염기서열로 이루어진 M 유전자, 서열번호 3의 염기서열로 이루어진 S(NP) 유전자 및 서열번호 4의 염기서열로 이루어진 S(NS) 유전자를 포함하는 중증열성 혈소판 감소증 바이러스; 및 서열번호 5의 염기서열로 이루어진 L 유전자, 서열번호 6의 염기서열로 이루어진 M 유전자, 서열번호 7의 염기서열로 이루어진 S(NP) 유전자 및 서열번호 8의 염기서열로 이루어진 S(NS) 유전자를 포함하는 중증열성 혈소판 감소증 바이러스들을 유효성분으로 포함하는, 중증열성 혈소판 감소증의 예방 또는 치료용 면역원성 조성물.
  9. 제 1항의 바이러스를 가지고 면역화에 반응하여 생산된 항체.
  10. 제 1항의 바이러스를 포함하는 중증열성 혈소판 감소증 바이러스의 진단 키트.
  11. (a) 항원-항체 복합체가 형성될 수 있는 조건하에서 검체로부터 분리된 시료를 제 1항의 바이러스와 접촉시키는 단계; 및
    (b) 항원-항체 복합체 형성을 검출하는 단계를 포함하는, 중증열성 혈소판 감소증 바이러스 항체를 검출하는 방법.
  12. (a) 제 1항의 바이러스를 면역반응을 유도하기에 유효한 양으로 사람이 아닌 동물에게 투여하는 단계; 및
    (b) 상기 중증열성 혈소판 감소증 바이러스에 대한 항체를 함유하는 항혈청 또는 혈장을 수집하는 단계를 포함하는, 사람이 아닌 동물에서 중증열성 혈소판 감소증 바이러스에 대한 항혈청을 생산하는 방법.
  13. (a) 검체로부터 분리된 시료를 제 1항의 바이러스와 접촉시켜 항원-항체 복합체를 형성시키는 단계; 및
    (b) 상기 복합체의 형성을 검출하는 단계를 포함하는, 중증열성 혈소판 감소증 진단에 관한 정보를 제공하는 방법.
KR1020180078507A 2018-07-06 2018-07-06 신규한 중증열성혈소판감소증후군 바이러스 KR102097992B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180078507A KR102097992B1 (ko) 2018-07-06 2018-07-06 신규한 중증열성혈소판감소증후군 바이러스

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180078507A KR102097992B1 (ko) 2018-07-06 2018-07-06 신규한 중증열성혈소판감소증후군 바이러스

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020190133621A Division KR102097989B1 (ko) 2019-10-25 2019-10-25 신규한 중증열성혈소판감소증후군 바이러스

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20200005165A KR20200005165A (ko) 2020-01-15
KR102097992B1 true KR102097992B1 (ko) 2020-04-07

Family

ID=69156871

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020180078507A KR102097992B1 (ko) 2018-07-06 2018-07-06 신규한 중증열성혈소판감소증후군 바이러스

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102097992B1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20230133437A (ko) 2022-03-11 2023-09-19 김현숙 중증 열성 혈소판 감소 증후군 바이러스 질환의 예방용 백신 조성물의 제조방법

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101630499B1 (ko) * 2013-10-11 2016-06-15 서울대학교산학협력단 중증열성혈소판감소증후군 바이러스 및 이를 이용한 sfts 진단 방법 및 키트
KR101785290B1 (ko) * 2014-11-05 2017-10-18 대한민국 중증 열성 혈소판 감소 증후군 바이러스 감염 진단용 단클론항체, 이를 생산하는 하이브리도마 및 이 단클론항체를 사용하는 중증 열성 혈소판 감소 증후군 바이러스 감염 진단방법

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FTLS virus isolate 2012YSH37 glycoprotein gene, complete cds, GenBank: KF711936.1, 2014.03.21.
Huaiyangshan virus strain L-WJ segment L, complete sequence, GenBank: HQ171186.1, 2011.04.02.

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20230133437A (ko) 2022-03-11 2023-09-19 김현숙 중증 열성 혈소판 감소 증후군 바이러스 질환의 예방용 백신 조성물의 제조방법

Also Published As

Publication number Publication date
KR20200005165A (ko) 2020-01-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20230346909A1 (en) Novel severe fever with thrombocytopenia syndrome virus
KR102097992B1 (ko) 신규한 중증열성혈소판감소증후군 바이러스
KR101051986B1 (ko) 인간로타바이러스 및 이를 이용한 백신 조성물
US10041132B2 (en) Pestivirus species
KR20210128252A (ko) 코로나-19 바이러스 표적 인간 항체
KR102097989B1 (ko) 신규한 중증열성혈소판감소증후군 바이러스
US20040259225A1 (en) Virulent systemic feline calicivirus
US5853980A (en) Black creek canal hantavirus and related methods
CA2513458C (en) Virulent systemic feline calicivirus
JP6704567B2 (ja) 赤血球封入体症候群ウイルス遺伝子及びその用途
US5916754A (en) Bayou hantavirus and related methods
EP1776481A2 (en) Diagnosis and treatment of kawasaki disease and coronavirus infection
KR20150030223A (ko) 국내 유행 유전자형 소바이러스성 설사병 바이러스 균주를 포함하는 소바이러스성 설사병 예방 또는 치료용 백신 조성물
US20160375125A1 (en) Therapies, vaccines, and predictive methods for infectious salmon anemia virus
EP4319801A1 (en) Sars-cov-2 polypeptides and uses thereof
AU2004221444B2 (en) Virulent systemic feline calicivirus
EP2000476A2 (en) Immunogenic domains of SARS Coronavirus
KR20140034342A (ko) 국내 유행 유전자형 소바이러스성 설사병 바이러스 균주를 포함하는 소바이러스성 설사병 예방 또는 치료용 백신 조성물
WO1999048348A1 (en) Helicobacter pylori derived factor which inhibits ena-78 secretion
AU2013200106A1 (en) Pestivirus Species

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
A107 Divisional application of patent
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant