KR102093093B1

KR102093093B1 - Composition for improving skin anti-aging

Info

Publication number: KR102093093B1
Application number: KR1020130112648A
Authority: KR
Inventors: 김상재
Original assignee: 주식회사 젬백스앤카엘; 김상재
Priority date: 2012-12-13
Filing date: 2013-09-23
Publication date: 2020-03-25
Also published as: KR20140089295A

Abstract

본 명세서에는 유효성분으로서 펩티드 또는 그 단편을 포함하는 피부 주름 예방 또는 개선용 조성물이 개시된다. 또한, 본 명세서에는 유효성분으로서 펩티드 또는 그 단편을 포함하는 피부 노화 개선용 조성물이 개시된다.Disclosed herein is a composition for preventing or improving skin wrinkles comprising a peptide or a fragment thereof as an active ingredient. In addition, in the present specification, a composition for improving skin aging comprising a peptide or a fragment thereof as an active ingredient is disclosed.

Description

Composition for improving skin anti-aging}

본 명세서에는 인간 단백질 유래의 펩티드를 유효성분으로 포함한 피부 노화 개선용 조성물에 관한 것이다.The present specification relates to a composition for improving skin aging, comprising a peptide derived from human protein as an active ingredient.

텔로미어(telomere)는 염색체의 말단에 반복적으로 존재하는 유전 물질로서, 해당 염색체의 손상이나 다른 염색체와의 결합을 방지한다고 알려져 있다. 세포가 분열할 때마다 텔로미어의 길이는 조금씩 짧아지는데, 일정한 횟수 이상의 세포 분열이 있게 되면 텔로미어는 매우 짧아지고, 그 세포는 분열을 멈추고 죽게 된다. 반면 텔로미어를 길게 하면 세포의 수명이 연장된다고 알려져 있으며, 그 예로 암세포에서는 텔로머라제(telomerase)라는 효소가 분비되어 텔로미어가 짧아지는 것을 막기 때문에, 암세포가 죽지 않고 계속 증식할 수 있다고 알려져 있다.Telomere is a genetic material that is repeatedly present at the ends of chromosomes and is known to prevent damage to the chromosome or binding to other chromosomes. Each time a cell divides, the length of the telomeres decreases slightly, but if there is a cell division over a certain number of times, the telomeres become very short, and the cells stop dividing and die. On the other hand, it is known that prolonging telomeres prolongs the lifespan of cells, and for example, cancer cells secrete an enzyme called telomerase to prevent telomeres from shortening, so that cancer cells can continue to proliferate without dying.

유럽특허공개 제1362597호European Patent Publication No. 1362597 유럽특허공개 제0841396호European Patent Publication No. 0841396

본 발명의 일측면은 피부에 유용한 펩티드를 제공하고자 한다.One aspect of the present invention is to provide a peptide useful for the skin.

본 발명의 일측면은 인간 단백질 유래의 펩티드를 유효성분으로 포함하는 피부노화 개선용 조성물을 제공하고자 한다.One aspect of the present invention is to provide a composition for improving skin aging comprising a peptide derived from human protein as an active ingredient.

본 발명의 일측면은 콜라겐 합성 증진 및 멜라닌 합성 저해 효능을 갖는 펩티드를 제공하고자 한다.One aspect of the present invention is to provide a peptide having an effect of enhancing collagen synthesis and inhibiting melanin synthesis.

본 발명의 일측면은 피부 탄력 증진 및 피부 주름 예방 또는 개선에 유용한 화장료 조성물을 제공하고자 한다.One aspect of the present invention is to provide a cosmetic composition useful for improving skin elasticity and preventing or improving skin wrinkles.

본 발명의 일측면은 피부 미백 효능을 갖는 화장료 조성물을 제공하고자 한다.One aspect of the present invention is to provide a cosmetic composition having skin whitening efficacy.

본 발명에 일측면에 따르면, 유효성분으로서, 서열번호 1을 포함하는 펩티드, 상기 펩티드 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드, 또는 그것의 단편을 포함하는 피부 노화 개선용 조성물이 제공된다. According to one aspect of the present invention, as an active ingredient, a composition for improving skin aging comprising a peptide comprising SEQ ID NO: 1, a peptide having at least 80% sequence homology to the peptide sequence, or a fragment thereof.

본 발명의 일측면에 따른 피부 노화 개선용 조성물에 있어서, 상기 서열번호 1을 포함하는 펩티드, 상기 펩티드 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드, 및 그것의 단편은 콜라겐 생합성능을 보유한 것일 수 있다. In the composition for improving skin aging according to an aspect of the present invention, the peptide comprising SEQ ID NO: 1, the peptide having a sequence homology of 80% or more with the peptide sequence, and a fragment thereof may have collagen biosynthetic ability have.

본 발명의 일측면에 따른 피부 노화 개선용 조성물에 있어서, 상기 서열번호 1을 포함하는 펩티드, 상기 펩티드 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드, 및 그것의 단편은 멜라닌 생성 저해능을 보유한 것일 수 있다. In the composition for improving skin aging according to an aspect of the present invention, the peptide comprising SEQ ID NO: 1, the peptide having a sequence homology of 80% or more with the peptide sequence, and a fragment thereof may have a melanin production inhibitory ability have.

본 발명의 일측면에 따른 피부 노화 개선용 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 서열번호 1의 펩티드일 수 있다. In the composition for improving skin aging according to an aspect of the present invention, the active ingredient may be a peptide of SEQ ID NO: 1.

본 발명의 일측면에 따른 피부 노화 개선용 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 콜라겐의 생합성을 증진시키는 것일 수 있다. In the composition for improving skin aging according to an aspect of the present invention, the active ingredient may be to enhance the biosynthesis of collagen.

본 발명의 일측면에 따른 피부 노화 개선용 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 멜라닌 생성을 저해시키는 것일 수 있다. In the composition for improving skin aging according to an aspect of the present invention, the active ingredient may be to inhibit melanin production.

본 발명의 일측면에 따른 피부 노화 개선용 조성물에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물일 수 있다. In the composition for improving skin aging according to an aspect of the present invention, the composition may be a cosmetic composition.

본 발명의 일측면에 따른 피부 노화 개선용 조성물에 있어서, 상기 조성물은 건강식품 조성물일 수 있다. In the composition for improving skin aging according to an aspect of the present invention, the composition may be a health food composition.

도 1은 본 발명의 일측면에 따른 서열번호 1의 펩티드의 농도에 따른 콜라겐 합성율(Collagen synthesis, %)을 측정한 결과를 도시한 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일측면에 따른 서열번호 1의 펩티드를 처리한 후 멜라닌 생성이 억제되는 결과를 도시한 그래프 및 사진이다.
도 3은 본 발명의 일측면에 따른 서열번호 1의 펩티드의 농도변화에 대한 자외선 조사에 의한 세포독성 완화효과에 따른 세포 생존율(Cell viability, %)을 측정한 결과를 도시한 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일측면에 따른 서열번호 1의 펩티드의 자외선 조사 후 콜라겐 생합성 증진 효과를 측정한 실험 결과를 도시한 것이다. 1 is a graph showing the results of measuring the collagen synthesis rate (Collagen synthesis,%) according to the concentration of the peptide of SEQ ID NO: 1 according to an aspect of the present invention.
Figure 2 is a graph and a photo showing the results of melanin production is inhibited after treating the peptide of SEQ ID NO: 1 according to an aspect of the present invention.
Figure 3 is a graph showing the results of measuring the cell viability (Cell viability,%) according to the cytotoxic alleviation effect by ultraviolet irradiation for the concentration change of the peptide of SEQ ID NO: 1 according to an aspect of the present invention.
Figure 4 shows the experimental results of measuring the effect of enhancing collagen biosynthesis after ultraviolet irradiation of the peptide of SEQ ID NO: 1 according to an aspect of the present invention.

서열번호 1 에 기재된 펩티드는 아래 표 1과 같다. 서열번호 2는 인간의 텔로머라제 전장 단백질의 서열이다. 서열번호 1은 텔로머라제로부터 유래된 펩티드로서 16개 아미노산으로 구성된 펩티드이다. 아래 표 1의 "이름"은 펩티드를 구별하기 위해 명명한 것이다. 본 발명의 다른 일측면에서, 서열 번호 1의 펩티드는 텔로머라제에 포함된 펩티드 중 해당 위치의 펩티드를 선별해 합성한 "합성 펩티드"를 포함한다.
The peptide described in SEQ ID NO: 1 is shown in Table 1 below. SEQ ID NO: 2 is the sequence of a human telomerase full-length protein. SEQ ID NO: 1 is a peptide derived from telomerase and is a peptide composed of 16 amino acids. The “name” in Table 1 below is used to distinguish peptides. In another aspect of the present invention, the peptide of SEQ ID NO: 1 includes a "synthetic peptide" synthesized by selecting a peptide at a corresponding position among peptides included in telomerase.

본 발명의 일측면은 서열번호 1의 단편들인 펩티드 또는 상기 펩티드 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 상기 폴리뉴클레오티드를 이용하여 서열번호 1의 단편들인 펩티드 또는 상기 펩티드 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드를 대량 생산할 수 있다. 예컨대, 서열번호 1의 단편들인 펩티드 중 하나 이상의 펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터를 숙주 세포에 넣어 배양함으로써, 서열번호 1의 단편들인 펩티드 중 하나 이상의 펩티드를 대량 생산할 수 있다.
One aspect of the present invention provides a polynucleotide encoding a peptide that is a fragment of SEQ ID NO: 1 or a peptide having at least 80% sequence homology to the peptide sequence. The polynucleotide can be used to mass-produce peptides that are fragments of SEQ ID NO: 1 or peptides having 80% or more sequence homology with the peptide sequences. For example, by culturing a vector containing a polynucleotide encoding one or more of the peptides of the fragments of SEQ ID NO: 1 into a host cell, the peptides of one or more of the peptides of the fragments of SEQ ID NO: 1 can be mass produced.

본 명세서에 개시된 펩티드는 서열번호 1의 단편들인 펩티드와, 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상 또는 96% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드를 포함할 수 있다. 또한, 본 명세서에 개시된 펩티드는 서열번호 1의 단편들인 펩티드와, 1개 이상의 아미노산, 2개 이상의 아미노산, 3개 이상의 아미노산, 4개 이상의 아미노산, 5개 이상의 아미노산, 6개 이상의 아미노산 또는 7개 이상의 아미노산이 변화된 펩티드를 포함할 수 있다. The peptides disclosed herein may include peptides that are fragments of SEQ ID NO: 1, and peptides having sequence homology of 80% or more, 85% or more, 90% or more, 95% or more, or 96% or more. In addition, the peptides disclosed herein are peptides that are fragments of SEQ ID NO: 1, 1 or more amino acids, 2 or more amino acids, 3 or more amino acids, 4 or more amino acids, 5 or more amino acids, 6 or more amino acids, or 7 or more amino acids It may include peptides with amino acid changes.

본 발명의 일측면에서, 아미노산 변화는 펩티드의 물리화학적 특성이 변경되도록 하는 성질에 속한다. 예를 들어, 펩티드의 열안정성을 향상시키고, 기질 특이성을 변경시키고, 최적의 pH를 변화시키는 등의 아미노산 변화가 수행될 수 있다.In one aspect of the invention, amino acid changes belong to properties that allow the physicochemical properties of the peptide to be altered. For example, amino acid changes can be performed, such as improving the thermal stability of the peptide, changing the substrate specificity, and changing the optimum pH.

본 명세서에서 “아미노산”이라 함은 자연적으로 펩티드로 통합되는 22개의 표준 아미노산들 뿐만 아니라 D-아이소머 및 변형된 아미노산들을 포함한다. 이에 따라, 본 발명의 일측면에서 펩티드는 D-아미노산을 포함하는 펩티드일 수 있다. 한편, 본 발명의 다른 측면에서 펩티드는 번역 후 변형(post-translational modification)된 비표준 아미노산 등을 포함할 수 있다. 번역 후 변형의 예는 인산화(phosphorylation), 당화(glycosylation), 아실화(acylation) (예컨대, 아세틸화(acetylation), 미리스토일화(myristoylation) 및 팔미토일화(palmitoylation)를 포함), 알킬화(alkylation), 카르복실화(carboxylation), 히드록실화(hydroxylation), 당화반응(glycation), 비오티닐화(biotinylation), 유비퀴티닐화(ubiquitinylation), 화학적 성질의 변화(예컨대, 베타-제거 탈이미드화, 탈아미드화) 및 구조적 변화(예컨대, 이황화물 브릿지의 형성) 를 포함한다. 또한, 펩티드 컨쥬게이트를 형성하기 위한 가교제(crosslinker)들과의 결합과정에서 일어나는 화학 반응들에 의해 생기는 아미노산의 변화, 예컨대 아미노기, 카르복시기 또는 사이드 체인에서의 변화와 같은 아미노산의 변화를 포함한다. As used herein, “amino acid” includes 22 standard amino acids that are naturally incorporated into peptides, as well as D-isomers and modified amino acids. Accordingly, in one aspect of the present invention, the peptide may be a peptide containing D-amino acid. Meanwhile, in another aspect of the present invention, the peptide may include a non-standard amino acid that has been post-translational modification. Examples of post-translational modifications include phosphorylation, glycosylation, acylation (e.g., acetylation, myristoylation and palmitoylation), alkylation ), Carboxylation, hydroxylation, glycation, biotinylation, ubiquitinylation, changes in chemical properties (e.g. beta-eliminated deimide , Deamidation) and structural changes (eg, formation of disulfide bridges). It also includes changes in amino acids, such as changes in amino groups, carboxyl groups or side chains, caused by chemical reactions that occur in the course of binding with crosslinkers to form peptide conjugates.

본 명세서에 개시된 펩티드는 자연 그대로의 공급원으로부터 동정 및 분리된 야생형 펩티드일 수 있다. 한편, 본 명세서에 개시된 펩티드는 서열번호 1의 단편들인 펩티드와 비교하여 하나 이상의 아미노산이 치환, 결실 및/또는 삽입된 아미노산 서열을 포함하는, 인공 변이체일 수 있다. 인공 변이체에서 뿐만 아니라 야생형 폴리펩티드에서의 아미노산 변화는 단백질의 폴딩(folding) 및/또는 활성에 유의한 영향을 미치지 않는 보존성 아미노산 치환을 포함한다. 보존성 치환의 예들은 염기성 아미노산(아르기닌, 리신 및 히스티딘), 산성 아미노산(글루탐산 및 아스파르트산), 극성 아미노산(글루타민 및 아스파라긴), 소수성 아미노산(루신, 이소로이신, 발린 및 메티오닌), 방향족 아미노산(페닐알라닌, 트립토판 및 티로신), 및 작은 아미노산(글리신, 알라닌, 세린 및 트레오닌)의 군의 범위 내에 있다. 일반적으로 특이적 활성을 변경시키지 않는 아미노산 치환이 본 분야에 공지되어 있다. 가장 흔하게 발생하는 교환은 Ala/Ser, Val/Ile, Asp/Glu, Thr/Ser, Ala/Gly, Ala/Thr, Ser/Asn, Ala/Val, Ser/Gly, Tyr/Phe, Ala/Pro, Lys/Arg, Asp/Asn, Leu/Ile, Leu/Val, Ala/Glu, 및 Asp/Gly, 그리고 이들과 반대인 것들이다.
The peptides disclosed herein can be wild-type peptides that have been identified and isolated from intact sources. Meanwhile, the peptide disclosed herein may be an artificial variant comprising an amino acid sequence in which one or more amino acids have been substituted, deleted, and / or inserted compared to a peptide that is a fragment of SEQ ID NO: 1. Amino acid changes in wild-type polypeptides as well as in artificial variants include conservative amino acid substitutions that do not significantly affect the folding and / or activity of the protein. Examples of conservative substitutions are basic amino acids (arginine, lysine and histidine), acidic amino acids (glutamic acid and aspartic acid), polar amino acids (glutamine and asparagine), hydrophobic amino acids (leucine, isoleucine, valine and methionine), aromatic amino acids (phenylalanine, Tryptophan and tyrosine), and small amino acids (glycine, alanine, serine and threonine). In general, amino acid substitutions that do not alter specific activity are known in the art. The most common exchanges are Ala / Ser, Val / Ile, Asp / Glu, Thr / Ser, Ala / Gly, Ala / Thr, Ser / Asn, Ala / Val, Ser / Gly, Tyr / Phe, Ala / Pro, Lys / Arg, Asp / Asn, Leu / Ile, Leu / Val, Ala / Glu, and Asp / Gly, and vice versa.

또한, 본 발명의 다른 일측면은 상기와 같은 인간 단백질 유래의 펩티드 또는 상기 펩티드 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편을 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공한다. In addition, another aspect of the present invention provides a composition comprising a peptide or a fragment thereof having 80% or more sequence homology with a peptide or a peptide derived from the human protein as described above as an active ingredient.

피부는 나이가 들어감에 따라 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질들의 생합성이 줄어들게 된다. 또한, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선 중 지표에 도달하는 자외선의 함량이 증가하고 환경 오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써, 피부의 두께가 감소하고, 주름이 증가하며, 탄력이 감소하는 등 여러 가지 변화를 일으키게 된다. 따라서, 노화가 진행될수록 피부를 구성하는 물질인 콜라겐, 엘라스틴, 히알루론산 및 당단백질의 함유량 및 배열이 변하거나 감소하는 증상들이 나타나게 된다. 즉 자연적으로 진행되는 내인성 노화에 따른 세포 활성의 감소 및 미세염증에 의해 기질물질의 생합성이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산소종의 증가와 같은 외적 요인에 의해 분해 및 변성이 가속화되어 피부 기질이 파괴되고 얇아지면서 피부 노화의 제반 증상들이 나타나게 된다. As the skin ages, the secretion of various hormones that regulate metabolism decreases internally, and the function of immune cells and the activity of cells decreases, thereby reducing the biosynthesis of immune proteins and bio-constitutive proteins necessary for the body. In addition, due to the destruction of the ozone layer, as the content of ultraviolet rays reaching the surface of the sun rays increases and the environmental pollution becomes more severe, free radicals and free radicals, etc. increase, thereby reducing the thickness of the skin and increasing wrinkles. And the elasticity decreases, causing various changes. Accordingly, as aging progresses, symptoms of changes or decreases in the content and arrangement of collagen, elastin, hyaluronic acid, and glycoproteins that constitute the skin appear. In other words, due to the progression of endogenous aging that progresses naturally, the biosynthesis of matrix substances is reduced by micro-inflammation, and external factors such as increased stress by various harmful environments and increased free radicals caused by sunlight. The decomposition and denaturation are accelerated, and the skin matrix is destroyed and thinned, and various symptoms of skin aging appear.

이에 본 발명의 일측면은 인간 단백질 유래의 펩티드로서, 서열번호 1의 단편들인 펩티드 또는 상기 펩티드 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편을 유효성분으로 포함하는 조성물을 제공함으로써, 이를 피부에 도포 또는 투여할 경우 노화에 의해 감소된 피부내 콜라겐의 생합성을 증진시킬 수 있다. 이로써 본 발명에 따른 조성물은 피부의 주름 생성을 예방 또는 개선, 피부 탄력을 유지 또는 개선할 수 있으며, 이에 따라 피부의 노화를 예방 또는 개선할 수 있다.
Accordingly, an aspect of the present invention is a peptide derived from a human protein, by providing a composition comprising a peptide of SEQ ID NO: 1 or a peptide having 80% or more sequence homology with the peptide sequence or a fragment thereof as an active ingredient, When applied or administered to the skin, it is possible to enhance the biosynthesis of collagen in the skin reduced by aging. Thus, the composition according to the present invention can prevent or improve the formation of wrinkles on the skin, maintain or improve the elasticity of the skin, and thus prevent or improve the aging of the skin.

본 발명의 일측면에 따른 조성물은 서열번호 1의 단편들인 펩티드 또는 상기 펩티드 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드를 0.1 ㎍/㎎ 내지 1 ㎎/㎎, 구체적으로 1 ㎍/㎎ 내지 0.5 ㎎/㎎, 더 구체적으로 10 ㎍/㎎ 내지 0.1 ㎎/㎎ 함량으로 포함할 수 있다. 상기 범위로 포함하는 경우 본 발명의 의도한 효과를 나타내기에 적절할 뿐만 아니라, 조성물의 안정성 및 안전성을 모두 만족할 수 있으며, 비용 대비 효과의 측면에서도 상기 범위로 포함하는 것이 적절할 수 있다.The composition according to one aspect of the present invention is a peptide of the fragments of SEQ ID NO: 1 or a peptide having a sequence homology of 80% or more with the peptide sequence is 0.1 μg / mg to 1 mg / mg, specifically 1 μg / mg to 0.5 mg / Mg, more specifically, 10 μg / mg to 0.1 mg / mg. When included in the above range, it is not only suitable to exhibit the intended effect of the present invention, but also satisfies both the stability and safety of the composition, and it may be appropriate to include the above range in terms of cost effectiveness.

본 발명의 일측면에 따른 조성물은 인간, 개, 닭, 돼지, 소, 양, 기니아피그 또는 원숭이를 포함하는 모든 동물에 적용될 수 있다.The composition according to one aspect of the present invention can be applied to all animals including humans, dogs, chickens, pigs, cows, sheep, guinea pigs or monkeys.

본 발명의 일측면에 따른 약학 조성물은 경구, 직장, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 골수 내, 경막 내 또는 피하 등으로 투여될 수 있다.The pharmaceutical composition according to one aspect of the present invention may be administered orally, rectal, transdermal, intravenous, intramuscular, intraperitoneal, intramedullary, intrathecal or subcutaneous.

경구 투여를 위한 제형은 정제, 환제, 연질 또는 경질 캅셀제, 과립제, 산제, 액제 또는 유탁제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 비경구 투여를 위한 제형은 주사제, 점적제, 로션, 연고, 겔, 크림, 현탁제, 유제, 좌제, 패취 또는 분무제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.Formulations for oral administration may be tablets, pills, soft or hard capsules, granules, powders, liquids or emulsions, but are not limited thereto. Formulations for parenteral administration may be, but are not limited to, injections, drops, lotions, ointments, gels, creams, suspensions, emulsions, suppositories, patches or sprays.

본 발명의 일측면에 따른 약학 조성물은 필요에 따라 희석제, 부형제, 활택제, 결합제, 붕해제, 완충제, 분산제, 계면 활성제, 착색제, 향료 또는 감미제 등의 첨가제를 포함할 수 있다. 본 발명의 일측면에 따른 약학 조성물은 당업계의 통상적인 방법에 의해 제조될 수 있다.The pharmaceutical composition according to one aspect of the present invention may include additives such as diluents, excipients, lubricants, binders, disintegrants, buffers, dispersants, surfactants, colorants, flavors or sweeteners, if necessary. Pharmaceutical compositions according to one aspect of the present invention can be prepared by conventional methods in the art.

본 발명의 일측면에 따른 약학 조성물의 유효성분은 투여 받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적용량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.1 ㎍/kg/일 내지 1 g/kg/일, 구체적으로는 1 ㎍/kg/일 내지 10 mg/kg/일, 더 구체적으로는 10 ㎍/kg/일 내지 1 mg/kg/일, 보다 더 구체적으로는 50 ㎍/kg/일 내지 100 ㎍/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 일측면에 따른 약학 조성물은 1일 1회 내지 3회 투여될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
The active ingredient of the pharmaceutical composition according to one aspect of the present invention will vary depending on the age, gender, weight, pathology and severity of the subject to be administered, the route of administration or the judgment of the prescriber. Determination of the application amount based on these factors is within the level of those skilled in the art, the daily dosage of which is, for example, 0.1 μg / kg / day to 1 g / kg / day, specifically 1 μg / kg / day to 10 mg / kg / Day, more specifically 10 μg / kg / day to 1 mg / kg / day, and more specifically 50 μg / kg / day to 100 μg / kg / day, but is not limited thereto. The pharmaceutical composition according to one aspect of the present invention may be administered once to three times a day, but is not limited thereto.

본 발명의 일측면에 따른 화장품 조성물은 국소 적용에 적합한 모든 제형으로 제공될 수 있다. 예를 들면, 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 포말(foam) 또는 에어로졸의 제형으로 제공될 수 있다. 이러한 제형은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.The cosmetic composition according to one aspect of the present invention may be provided in any formulation suitable for topical application. For example, it may be provided in the form of a solution, an emulsion obtained by dispersing an oil phase in an aqueous phase, an emulsion obtained by dispersing an oil phase in an oil phase, suspension, solid, gel, powder, paste, foam or aerosol. Such formulations can be prepared according to conventional methods in the art.

또한, 본 발명의 일측면에 따른 화장품 조성물은 주사액 제형으로 제공될 수 있다. 이 주사액 제형의 화장품 조성물은 1개의 니들을 갖는 주사기, 복수개의 니들을 갖는 주사기, 패치, 마이크로 니들 또는 마이크로젯 방식으로 고속 분사하거나 알루미늄 호일(foil)에 레이저 빔을 가함으로써 유발되는 충격파를 통해 주사액을 분사하는 기구를 예로 들 수 있는 다양한 전달기구를 통하여 피부에 주입될 수 있다. 상기 레이저를 이용하는 방식에 의하면 주사바늘을 사용하지 않으므로, 주사시의 통증 및 주사 바늘 사용으로 인한 상처 등을 방지할 수 있다. 이와 같이 주사액 제형에 의하면 화장품 조성물에 포함된 활성성분을 피부와 같은 표적 부위에 직접적으로 전달할 수 있어 효과를 극대화시킬 수 있다. 또한, 레이저를 이용하는 방식에 의하면 주사바늘을 사용하지 않으므로, 주사시의 통증 및 주사 바늘 사용으로 인한 상처 등을 방지할 수 있다.
In addition, the cosmetic composition according to an aspect of the present invention may be provided as an injection liquid formulation. The cosmetic composition of this injection solution formulation is a syringe with a single needle, a syringe with a plurality of needles, a patch, a micro needle or a microjet method, or a high-speed injection or injection solution through a shock wave caused by applying a laser beam to an aluminum foil. It can be injected into the skin through a variety of delivery mechanisms, such as a mechanism for spraying. According to the method using the laser, since an injection needle is not used, it is possible to prevent pain at the time of injection and wound due to the use of an injection needle. As described above, according to the injection solution formulation, the active ingredient included in the cosmetic composition can be directly delivered to the target site such as the skin, thereby maximizing the effect. In addition, according to the method using a laser, since an injection needle is not used, pain during injection and a wound due to the use of an injection needle can be prevented.

본 발명의 일측면에 따른 화장품 조성물은 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 포함할 수 있다. 또한 본 발명의 일측면에 따른 화장품 조성물은 보습제, 에몰리언트제, 계면 활성제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 또는 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한(制汗)제를 더 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 화장품 조성물 전체 중량을 기준으로 0.01 내지 5 중량%, 구체적으로 0.01 내지 3 중량%일 수 있다.
The cosmetic composition according to an aspect of the present invention may include other ingredients that can give a synergistic effect to the main effect, within a range that does not impair the main effect. In addition, the cosmetic composition according to one aspect of the present invention is a moisturizer, emollient, surfactant, ultraviolet absorber, preservative, disinfectant, antioxidant, pH adjusting agent, organic or inorganic pigment, fragrance, cooling agent, or limiting agent It can contain. The blending amount of the components can be easily selected by those skilled in the art within a range that does not impair the object and effect of the present invention, the blending amount is 0.01 to 5% by weight based on the total weight of the cosmetic composition, specifically 0.01 to 3% by weight You can.

본 발명의 일측면에 따른 식품 조성물의 제형은 특별히 한정되지 않으나, 예를 들어, 정제, 과립제, 분말제, 액제, 고형 제제 등으로 제형화될 수 있다. 각 제형은 유효성분 이외에 해당 분야에서 통상적으로 사용되는 성분들을 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승 효과가 일어날 수 있다.The formulation of the food composition according to one aspect of the present invention is not particularly limited, but may be formulated into, for example, tablets, granules, powders, liquids, solid preparations, and the like. Each formulation can be formulated by appropriately selecting the ingredients commonly used in the field other than the active ingredient according to the formulation or purpose of use without difficulty, and synergistic effects may occur when applied simultaneously with other raw materials.

상기 유효성분의 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 구체적으로는 1 ㎍/kg/일 내지 10 mg/kg/일, 더 구체적으로는 10 ㎍/kg/일 내지 1 mg/kg/일, 보다 더 구체적으로는 50 ㎍/kg/일 내지 100 ㎍/kg/일이 될 수 있으나, 이에 제한되지 않으며, 투여하고자 하는 대상의 연령, 건강 상태, 합병증 등 다양한 요인에 따라 달라질 수 있다.
Determination of the dosage of the active ingredient is within the level of those skilled in the art, the daily dosage of which is, for example, specifically 1 μg / kg / day to 10 mg / kg / day, more specifically 10 μg / kg / day To 1 mg / kg / day, more specifically, 50 µg / kg / day to 100 µg / kg / day, but is not limited thereto, and various factors such as age, health condition, and complications of the subject to be administered May vary.

이하, 실시예 및 실험예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 아래 실시예 및 실험예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 그에 의해 제한되는 것은 아니다.
Hereinafter, the configuration and effects of the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Experimental Examples. However, the following examples and experimental examples are provided for illustrative purposes only to aid understanding of the present invention, and the scope and scope of the present invention are not limited thereto.

실시예Example 1: 펩티드의 합성 1: Synthesis of peptides

본 명세서에 개시된 펩티드들은 종래에 알려진 고상 펩티드 합성법에 따라 제조하였다. 구체적으로, 펩티드들은 ASP48S(Peptron, Inc., 대한민국 대전)를 이용하여 Fmoc 고상 합성법(solid phase peptide synthesis, SPPS)을 통해 C-말단부터 아미노산 하나씩 커플링함으로써 합성하였다. 다음과 같이, 펩티드들의 C-말단의 첫번째 아미노산이 수지에 부착된 것을 사용하였다. 예컨대 다음과 같다:The peptides disclosed herein were prepared according to a conventionally known solid-phase peptide synthesis method. Specifically, peptides were synthesized by coupling amino acids one by one from the C-terminal through Fmoc solid phase peptide synthesis (SPPS) using ASP48S (Peptron, Inc., Daejeon, Korea). As follows, the first amino acid at the C-terminal of the peptides was used. For example:

NH₂-Lys(Boc)-2-chloro-Trityl ResinNH ₂ -Lys (Boc) -2-chloro-Trityl Resin

NH₂-Ala-2-chloro-Trityl ResinNH ₂ -Ala-2-chloro-Trityl Resin

NH₂-Arg(Pbf)-2-chloro-Trityl Resin
NH ₂ -Arg (Pbf) -2-chloro-Trityl Resin

펩타이드 합성에 사용한 모든 아미노산 원료는 N-term이 Fmoc으로 보호(protection)되고, 잔기는 모두 산에서 제거되는 Trt, Boc, t-Bu (t-butylester), Pbf (2,2,4,6,7-pentamethyl dihydro-benzofuran-5-sulfonyl) 등으로 보호된 것을 사용하였다. 예컨대 다음과 같다: All amino acid raw materials used for peptide synthesis are Trt, Boc, t-Bu (t-butylester), Pbf (2,2,4,6, where N-term is protected by Fmoc and all residues are removed from the acid. 7-pentamethyl dihydro-benzofuran-5-sulfonyl). For example:

Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Thr(tBu)-OH, Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Trp(Boc)-OH, Fmoc-Met-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-Ahx-OH, Trt-Mercaptoacetic acid.Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Arg (Pbf) -OH, Fmoc-Glu (OtBu) -OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc- Ser (tBu) -OH, Fmoc-Thr (tBu) -OH, Fmoc-Lys (Boc) -OH, Fmoc-Gln (Trt) -OH, Fmoc-Trp (Boc) -OH, Fmoc-Met-OH, Fmoc -Asn (Trt) -OH, Fmoc-Tyr (tBu) -OH, Fmoc-Ahx-OH, Trt-Mercaptoacetic acid.

커플링 시약(Coupling reagent)으로는 HBTU[2-(1H-Benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tetamethylaminium hexafluorophosphate] / HOBt [N-Hydroxxybenzotriazole] /NMM [4-Methylmorpholine] 를 사용하였다. Fmoc 제거는 20%의 DMF 중 피페리딘(piperidine in DMF)을 이용하였다. 합성된 펩타이드를 Resin에서 분리 및 잔기의 보호기 제거에는 절단 칵테일(Cleavage Cocktail) [TFA (trifluoroacetic acid) /TIS (triisopropylsilane) / EDT (ethanedithiol) / H₂O=92.5/2.5/2.5/2.5] 를 사용하였다.HBTU [2- (1H-Benzotriazole-1-yl) -1,1,3,3-tetamethylaminium hexafluorophosphate] / HOBt [N-Hydroxxybenzotriazole] / NMM [4-Methylmorpholine] is used as a coupling reagent. Did. Fmoc removal was performed using piperidine in DMF in 20% of DMF. Cleavage Cocktail [TFA (trifluoroacetic acid) / TIS (triisopropylsilane) / EDT (ethanedithiol) / H ₂ O = 92.5 / 2.5 / 2.5 / 2.5] is used for separating the synthesized peptide from Resin and removing the protecting group of the residue. Did.

아미노산 보호기가 결합된 출발 아미노산이 고상 지지체에 결합되어 있는 상태를 이용하여 여기에 해당 아미노산들을 각각 반응시키고 용매로 세척한 후 탈보호하는 과정을 반복함으로써 각 펩티드를 합성하였다. 합성된 펩티드를 수지로부터 끊어낸 후 HPLC로 정제하고, 합성 여부를 MS로 확인하고 동결 건조하였다.
Each peptide was synthesized by reacting the corresponding amino acids therein, washing with a solvent, and repeating the deprotection process using a state in which the amino acid protecting group-bound starting amino acid is bound to a solid support. The synthesized peptide was removed from the resin and then purified by HPLC. Synthesis was confirmed by MS and lyophilized.

서열번호 1의 Pep 1을 예로 들어 구체적인 과정을 설명하면 다음과 같다.
The specific process will be described using Pep 1 of SEQ ID NO: 1 as an example.

1) 커플링 1) Coupling

NH₂-Lys(Boc)-2-chloro-Trityl Resin 에 보호된 아미노산(8당량)와 커플링 시약 HBTU(8당량)/HOBt(8당량)/NMM(16당량) 을 DMF에 녹여서 첨가한 후, 상온에서 2시간 동안 반응하고 DMF, MeOH, DMF순으로 세척하였다.NH ₂ -Lys (Boc) -2-chloro-Trityl Resin protected amino acid (8 eq) and coupling reagent HBTU (8 eq) / HOBt (8 eq) / NMM (16 eq) dissolved in DMF and added , Reacted at room temperature for 2 hours, washed with DMF, MeOH, and DMF.

2) Fmoc 탈보호 2) Fmoc deprotection

20%의 DMF 중의 피페리딘(piperidine in DMF) 을 가하고 상온에서 5분간 2회 반응하고 DMF, MeOH, DMF순으로 세척하였다.Piperidine in DMF was added in 20% of DMF, reacted twice at room temperature for 5 minutes, and washed in order of DMF, MeOH, and DMF.

3) 1과 2의 반응을 반복적으로 하여 펩타이드 기본 골격 NH₂-E(OtBu)-A-R(Pbf)-P-A-L-L-T(tBu)-S(tBu)-R(Pbf)L-R(Pbf)-F-I-P-K(Boc)-2-chloro-Trityl Resin)을 만들었다. 3) The reaction of 1 and 2 is repeated to the peptide base skeleton NH ₂ -E (OtBu) -AR (Pbf) -PALLT (tBu) -S (tBu) -R (Pbf) LR (Pbf) -FIPK (Boc) -2-chloro-Trityl Resin).

4) 절단(Cleavagge): 합성이 완료된 펩타이드 Resin에 절단 칵테일(Cleavage Cocktail) 을 가하여 펩타이드를 Resin에서 분리하였다.4) Cleavagge: Cleavage Cocktail was added to the synthesized peptide Resin to separate the peptide from Resin.

5) 얻어진 mixture에 Cooling diethyl ether를 가한 후, 원심 분리하여 얻어진 펩타이드를 침전시킨다.5) After adding cooling diethyl ether to the obtained mixture, the obtained peptide is precipitated by centrifugation.

6) Prep-HPLC로 정제 후, LC/MS로 분자량을 확인하고 동결하여 powder로 제조하였다.
6) After purification by Prep-HPLC, molecular weight was confirmed by LC / MS and frozen to prepare powder.

실시예Example 2: 제형의 조제 2: Formulation preparation

상기 실시예 1에 기재된 방법에 따라 얻어진 동결 건조 파우더 형태의 펩티드를 0.9% 식염수에 용해시켜 사용하였다. 펩티드의 순도에 대한 보정(순도: 97.3 %, 함량: 85.3 %)을 실시하여 투여 직전에 0.9% 식염수를 부형제로 하여 50 mM의 농도로 실험용 투여 용액을 조제하였다.
The lyophilized powder-form peptide obtained according to the method described in Example 1 was dissolved in 0.9% saline and used. Correction of the purity of the peptide (purity: 97.3%, content: 85.3%) was performed to prepare an experimental administration solution at a concentration of 50 mM with 0.9% saline as an excipient immediately before administration.

실시예Example 3: 서열번호 1의 펩티드( 3: Peptide of SEQ ID NO: 1 Pep1Pep1 )의 콜라겐 생합성 증진 효과 실험) Collagen biosynthesis enhancing effect experiment

1)세포배양1) Cell culture

서열번호 1의 펩티드(Pep1)의 콜라겐 생합성 증진 효과를 확인하기 위하여 인간 진피 섬유아세포 (human dermal fibroblast, Gibco Cat. Number: C-013-5C)를 준비하였다. 준비한 인간 진피 섬유아세포를 Medium 106 배지에서 LSGS(Low Serum Growth Supplement)를 첨가하여 37℃, 5% CO₂ 조건하에서 배양하고 트립신처리법(Trypsinization)으로 계대 배양하여 3~5세대 세포를 얻었다.
Human dermal fibroblasts (Gibco Cat. Number: C-013-5C) were prepared to confirm the collagen biosynthesis enhancing effect of the peptide of SEQ ID NO: 1 (Pep1). The prepared human dermal fibroblasts were cultured under Medium 5 medium by adding Low Serum Growth Supplement (LSGS) at 37 ° C. under 5% CO ₂ conditions, and subcultured by trypsinization to obtain 3-5th generation cells.

2)콜라겐 합성 증가 효과2) Increased collagen synthesis effect

상기와 같이 배양한 인간 진피 섬유아세포를 12-well plate에 5 ⅹ 10⁵/well을 넣고 14~16시간 동안 배양하였다. 배양 배지를 제거하고 인산염완충용액(PBS)으로 세척 한 후에 LSGS를 첨가하지 않은 Medium 106 배지에 250 μM과 500 μM 펩티드(Pep1)를 처리하여 5% CO₂, 37℃에서 24시간 배양하였다. 배양액을 수거하여 콜라겐 양을 ELISA (Procollagen type IC-peptide EIA kit) 방법을 이용하여 측정하였다. ELISA 방법을 설명하면 다음과 같다. Antibody-POD conjugated solution 100 ㎕를 96-well에 넣은 다음 37℃에서 3시간 배양하였다. 96-well에서 배양액을 제거하고 washing buffer로 세척 한 후에 발색시약 (TMBZ) 100 ㎕를 넣고 상온에서 15분간 배양한 다음 1N 황산 100 ㎕를 넣었다. 그 후에 450 nm에서 ELISA reader로 측정하였다. 실험 결과는 도 1에 나타내었다. The human dermal fibroblasts cultured as above were placed in a 5 ⅹ 10 ⁵ / well in a 12-well plate and cultured for 14 to 16 hours. After removing the culture medium and washing with a phosphate buffer solution (PBS), 250 μM and 500 μM peptides (Pep1) were treated with Medium 106 medium without LSGS, and cultured at 5% CO ₂ at 37 ° C. for 24 hours. The culture was collected and the amount of collagen was measured using ELISA (Procollagen type IC-peptide EIA kit) method. The ELISA method is as follows. 100 µl of Antibody-POD conjugated solution was added to 96-well, and then cultured at 37 ° C for 3 hours. After removing the culture solution from the 96-well and washing with washing buffer, 100 µl of color development reagent (TMBZ) was added, incubated at room temperature for 15 minutes, and then 100 µl of 1N sulfuric acid was added. Then, it was measured with an ELISA reader at 450 nm. The experimental results are shown in FIG. 1.

도 1에 나타낸 바와 같이 콜라겐 합성율은 본 발명의 일측면에 따른 서열번호 1의 펩티드(Pep1)을 첨가하지 않았을 때(control)를 100%로 할 때, 서열번호 1의 펩티드(Pep1)를 250 μM과 500 μM를 첨가한 경우에서 합성이 약 107%, 120% 이상 증가하는 것으로 나타났다. 이는 본 발명의 일측면에 따른 펩티드는 콜라겐 생합성을 증가시키며, 이를 통해 피부 주름 및 탄력을 개선시킬 수 있음을 의미한다.
As shown in Figure 1, when the collagen synthesis rate is 100% when the peptide (Pep1) of SEQ ID NO: 1 according to one aspect of the present invention is not added (control), the peptide (Pep1) of SEQ ID NO: 1 is 250 μM. And 500 μM was added, the synthesis increased by about 107% and 120% or more. This means that the peptide according to one aspect of the present invention increases collagen biosynthesis, thereby improving skin wrinkles and elasticity.

실시예Example 4: 서열번호 1의 펩티드( 4: Peptide of SEQ ID NO: 1 Pep1Pep1 )의 멜라닌 생성 저해 효과 실험) Melanin production inhibitory effect experiment

1)세포배양1) Cell culture

서열번호 1의 펩티드(Pep1)의 미백효과를 확인하기 위해서 B16F1 세포주를 사용하여 멜라닌 생성억제 정도를 평가하였다. B16F1은 마우스에서 유래한 멜라닌을 분비하는 세포주로 한국세포주은행 (KCLB number: 80007)으로부터 분양 받아 사용하였다. 준비한 B16F1를 DMEM 배지에서 10% FBS(fetal bovine serum)를 첨가하여 37℃, 5% CO₂ 조건하에서 배양하고 트립신처리법(Trypsinization)으로 계대 배양하여 3~5세대 세포를 얻었다.
In order to confirm the whitening effect of the peptide (Pep1) of SEQ ID NO: 1, the degree of melanin inhibition was evaluated using the B16F1 cell line. B16F1 is a cell line that secretes melanin derived from mice, and was used by pre-sale from the Korea Cell Line Bank (KCLB number: 80007). The prepared B16F1 was added to 10% FBS (fetal bovine serum) in DMEM medium, cultured under conditions of 37 ° C and 5% CO ₂ , and subcultured by trypsinization to obtain 3-5th generation cells.

2)멜라닌 생성 저해 시험2) Melanin production inhibition test

B16F1 세포주를 6-well plate에 well 당 1 x 10⁵ 세포수로 분주한 후에 세포를 부착시켜 12~16시간 배양한다. 배양 후 배지를 제거하고 멜라닌 생성을 촉진하기 위해 200 nM α-MSH (α-melanocyte-stimulating hormone)를 첨가한 배지에 250 μM 펩티드(Pep1)를 처리한 후에 5% CO₂, 37℃에서 72시간 배양하였다. 72시간 배양 후에 세포를 인산염완충용액(PBS)으로 세척하고 trypsin-EDTA로 탈착시켜 원심분리하여 세포를 회수한 다음에 hematocytometer를 이용하여 세포수를 측정하였다. 측정한 세포를 다시 원심분리하여 세포 (pellet)를 수거하였다. 수거된 세포 (pellet)를 건조시킨 후에 10% DMSO가 함유된 1N NaOH 100 ㎕를 넣어 60℃ 항온조에서 멜라닌을 용해한 후 microplate reader로 490 nm에서 흡광도를 측정하여 세포일정수 당 멜라닌양을 구하여 대조군으로 보정하였다. After dispensing the B16F1 cell line at a number of 1 x 10 ⁵ cells per well in a 6-well plate, attach the cells and incubate for 12 to 16 hours. After incubation, the medium was added with 200 nM α-MSH (α-melanocyte-stimulating hormone) in order to remove the medium and promote melanin production, followed by treatment with 250 μM peptide (Pep1), 5% CO ₂ , 72 hours at 37 ° C. Cultured. After incubation for 72 hours, the cells were washed with a phosphate buffer solution (PBS), detached with trypsin-EDTA, centrifuged to recover the cells, and then the cell number was measured using a hematocytometer. The measured cells were centrifuged again to collect the cells. After drying the collected cells (pellet), add 100 µl of 1N NaOH containing 10% DMSO, dissolve melanin in a 60 ℃ thermostat, measure the absorbance at 490 nm with a microplate reader, obtain the amount of melanin per cell constant, and use it as a control Corrected.

도 2에 나타낸 바와 같이 서열번호 1의 펩티드(Pep1)가 멜라닌 생성을 현저하게 억제하는 것을 알 수 있다. 즉, 멜라닌생성 억제율은 본 발명의 일측면에 따른 서열번호 1의 펩티드(Pep1)을 첨가하지 않고 α-MSH로 자극할 때(α-MSH)를 100%로 할 때, 서열번호 1의 펩티드(Pep1)를 첨가한 경우에서 약 30% 억제하는 것으로 나타났다. 이는 본 발명의 일측면에 따른 펩티드(Pep1)는 멜라닌 생성을 억제하며, 이를 통해 피부 미백을 개선시킬 수 있음을 의미한다.
As shown in Figure 2, it can be seen that the peptide of SEQ ID NO: 1 (Pep1) significantly inhibits melanin production. That is, when the melanin production inhibition rate is 100% when stimulation with α-MSH (α-MSH) without adding the peptide (Pep1) of SEQ ID NO: 1 according to one aspect of the present invention, the peptide of SEQ ID NO: 1 ( Pep1) was found to inhibit about 30%. This means that the peptide (Pep1) according to one aspect of the present invention suppresses melanin production, thereby improving skin whitening.

실시예Example 5: 펩티드( 5: peptide ( PepPep 1)의 세포 독성 실험 1) Cytotoxicity experiment

서열번호 1의 펩티드(Pep1)의 세포독성을 확인하기 위하여 상기 실시예 3-1)에서 배양한 인간 진피 섬유아세포를 96-well plate에 well 당 1 x 10⁴ 세포수를 넣고 12시간 동안 배양하였다.In order to confirm the cytotoxicity of the peptide of SEQ ID NO: 1 (Pep1), human dermal fibroblasts cultured in Example 3-1) were added to a 96-well plate with 1 x 10 ⁴ cells per well and cultured for 12 hours. .

배양배지를 제거한 후 인산염완충용액(PBS)으로 세척한 후에 LSGS를 첨가하지 않은 Medium 106 배지에 250 μM과 500 μM 펩티드(Pep1)를 처리하여 5% CO₂, 37℃에서 24시간 배양하였다. 24시간이 경과한 후에 MTT 용액 (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphen?yltetrazoliumbromide; 5 mg/ml)를 10 ㎕를 첨가하고 5% CO₂, 37℃에서 2시간 동안 배양하였다. 배지를 제거하고 DMSO (dimethylsulfoxide)를 100 ㎕를 넣고 상온에서 10분간 흔들어준 다음 570 nm에서 microplate reader를 사용하여 흡광도를 측정하였다. 이렇게 측정된 값을 이용하여 세포생존율(%)을 확인하였다.After removing the culture medium, washed with a phosphate buffer solution (PBS), treated with 250 μM and 500 μM peptide (Pep1) in Medium 106 medium without LSGS, and cultured at 5% CO ₂ at 37 ° C. for 24 hours. After 24 hours, 10 μl of MTT solution (3- (4,5-Dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphen? Yltetrazoliumbromide; 5 mg / ml) was added and 5% CO ₂ at 37 ° C. Incubated for 2 hours. The medium was removed, 100 μl of DMSO (dimethylsulfoxide) was added, shaken at room temperature for 10 minutes, and absorbance was measured using a microplate reader at 570 nm. Cell viability (%) was determined using the measured values.

이때 세포의 생존율은 하기 수학식 1에 의하여 계산하였다.
At this time, the survival rate of the cells was calculated by Equation 1 below.

Blank: 세포 배양 배지만을 발색반응한 웰의 570nm 흡광도Blank: Absorbance at 570 nm of wells that developed only the cell culture medium

treated: 시료(Pep1)를 처리한 웰을 발색 반응한 웰의 570nm 흡광도treated : 570nm absorbance of the wells that developed and reacted the wells treated with the sample (Pep1)

untreated: 시료(Pep1)를 처리하지 않은 웰을 발색 반응한 웰의 570nm 흡광도
untreated: 570nm absorbance of the wells that developed and reacted wells not treated with the sample (Pep1)

도 3에 나타낸 바와 같이 서열번호 1의 펩티드(Pep1)은 세포독성을 유발하지 않음을 확인할 수 있다.
As shown in Figure 3, it can be confirmed that the peptide (Pep1) of SEQ ID NO: 1 does not induce cytotoxicity.

실시예Example 6: 서열번호 1의 펩티드( 6: Peptide of SEQ ID NO: 1 Pep1Pep1 )의 자외선 조사 후 콜라겐 생합성 증진 효과 실험) After ultraviolet irradiation, collagen biosynthesis promoting effect experiment

상기 실시예 3-1)에서 배양한 인간 진피 섬유아세포를 12-well plate에 5 ⅹ 10⁵/well을 넣고 16~18시간 동안 배양하였다. 배양 배지를 제거하고 인산염완충용액(PBS)으로 세척한 후에 4.5 J/㎠ UVA를 조사하였다. UVA 조사 후에 LSGS를 첨가하지 않은 Medium 106 배지에 본 발명의 일측면에 따른 서열번호 1의 펩티드(Pep1)를 농도별(10, 100, 500 ㎍/㎖)로 처리하여 6시간 배양하였다. 배양액을 수거하여 콜라겐 양을 상기예 3-2)에서와 같이 ELISA(Procollagen type I peptide EIA kit) 방법을 이용하여 측정하였다. The human dermal fibroblasts cultured in Example 3-1) were placed in a 5 ⅹ 10 ⁵ / well in a 12-well plate and cultured for 16-18 hours. After removing the culture medium and washing with a phosphate buffer solution (PBS), 4.5 J / cm 2 UVA was irradiated. After UVA irradiation, the peptide (Pep1) of SEQ ID NO: 1 according to one aspect of the present invention was treated with medium (10, 100, 500 µg / ml) according to an aspect of the present invention in which LSGS was not added, and cultured for 6 hours. The culture solution was collected and the amount of collagen was measured using the ELISA (Procollagen type I peptide EIA kit) method as in Example 3-2).

도 4에 나타난 바와 같이, 자외선 조사 후 콜라겐 합성율은 자외선을 조사하고, 본 발명의 일측면에 따른 서열번호 1의 펩티드(Pep1)도 첨가하지 않았을 때를 100%로 할 때, 서열번호 1의 펩티드를 10, 100, 500 ㎍/㎖의 농도로 첨가한 모든 경우에서 합성이 약 200% 가까이 증가하는 것으로 나타났다. 그 중에서도 펩티드를 더 많이 첨가할수록 더 높은 콜라겐 합성 효과를 나타내었다. 이는 본 발명의 일측면에 따른 펩티드가 자외선 조사에 의해 발생하는 세포 손상을 콜라겐 생합성을 증가시킴으로써 피부 주름 및 탄력에 대한 피부 재생을 개선시킬 수 있음을 의미한다.As shown in Figure 4, when the collagen synthesis rate after irradiation with ultraviolet light is irradiated with ultraviolet light, and when the peptide of SEQ ID NO: 1 according to an aspect of the present invention is also not added to 100%, the peptide of SEQ ID NO: 1 Was added at a concentration of 10, 100, 500 μg / ml, and the synthesis was found to increase by about 200% in all cases. Among them, the more peptides were added, the higher the collagen synthesis effect. This means that the peptide according to one aspect of the present invention can improve skin regeneration for skin wrinkles and elasticity by increasing collagen biosynthesis of cell damage caused by ultraviolet irradiation.

<110> KAEL-GEMVAX CO.,LTD. KIM, Sangjae <120> Composition for improving skin anti-aging <130> 13P539IND <150> KR 10-2012-0145500 <151> 2012-12-13 <160> 2 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 16 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Glu Ala Arg Pro Ala Leu Leu Thr Ser Arg Leu Arg Phe Ile Pro Lys 1 5 10 15 <210> 2 <211> 1132 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Pro Arg Ala Pro Arg Cys Arg Ala Val Arg Ser Leu Leu Arg Ser 1 5 10 15 His Tyr Arg Glu Val Leu Pro Leu Ala Thr Phe Val Arg Arg Leu Gly 20 25 30 Pro Gln Gly Trp Arg Leu Val Gln Arg Gly Asp Pro Ala Ala Phe Arg 35 40 45 Ala Leu Val Ala Gln Cys Leu Val Cys Val Pro Trp Asp Ala Arg Pro 50 55 60 Pro Pro Ala Ala Pro Ser Phe Arg Gln Val Ser Cys Leu Lys Glu Leu 65 70 75 80 Val Ala Arg Val Leu Gln Arg Leu Cys Glu Arg Gly Ala Lys Asn Val 85 90 95 Leu Ala Phe Gly Phe Ala Leu Leu Asp Gly Ala Arg Gly Gly Pro Pro 100 105 110 Glu Ala Phe Thr Thr Ser Val Arg Ser Tyr Leu Pro Asn Thr Val Thr 115 120 125 Asp Ala Leu Arg Gly Ser Gly Ala Trp Gly Leu Leu Leu Arg Arg Val 130 135 140 Gly Asp Asp Val Leu Val His Leu Leu Ala Arg Cys Ala Leu Phe Val 145 150 155 160 Leu Val Ala Pro Ser Cys Ala Tyr Gln Val Cys Gly Pro Pro Leu Tyr 165 170 175 Gln Leu Gly Ala Ala Thr Gln Ala Arg Pro Pro Pro His Ala Ser Gly 180 185 190 Pro Arg Arg Arg Leu Gly Cys Glu Arg Ala Trp Asn His Ser Val Arg 195 200 205 Glu Ala Gly Val Pro Leu Gly Leu Pro Ala Pro Gly Ala Arg Arg Arg 210 215 220 Gly Gly Ser Ala Ser Arg Ser Leu Pro Leu Pro Lys Arg Pro Arg Arg 225 230 235 240 Gly Ala Ala Pro Glu Pro Glu Arg Thr Pro Val Gly Gln Gly Ser Trp 245 250 255 Ala His Pro Gly Arg Thr Arg Gly Pro Ser Asp Arg Gly Phe Cys Val 260 265 270 Val Ser Pro Ala Arg Pro Ala Glu Glu Ala Thr Ser Leu Glu Gly Ala 275 280 285 Leu Ser Gly Thr Arg His Ser His Pro Ser Val Gly Arg Gln His His 290 295 300 Ala Gly Pro Pro Ser Thr Ser Arg Pro Pro Arg Pro Trp Asp Thr Pro 305 310 315 320 Cys Pro Pro Val Tyr Ala Glu Thr Lys His Phe Leu Tyr Ser Ser Gly 325 330 335 Asp Lys Glu Gln Leu Arg Pro Ser Phe Leu Leu Ser Ser Leu Arg Pro 340 345 350 Ser Leu Thr Gly Ala Arg Arg Leu Val Glu Thr Ile Phe Leu Gly Ser 355 360 365 Arg Pro Trp Met Pro Gly Thr Pro Arg Arg Leu Pro Arg Leu Pro Gln 370 375 380 Arg Tyr Trp Gln Met Arg Pro Leu Phe Leu Glu Leu Leu Gly Asn His 385 390 395 400 Ala Gln Cys Pro Tyr Gly Val Leu Leu Lys Thr His Cys Pro Leu Arg 405 410 415 Ala Ala Val Thr Pro Ala Ala Gly Val Cys Ala Arg Glu Lys Pro Gln 420 425 430 Gly Ser Val Ala Ala Pro Glu Glu Glu Asp Thr Asp Pro Arg Arg Leu 435 440 445 Val Gln Leu Leu Arg Gln His Ser Ser Pro Trp Gln Val Tyr Gly Phe 450 455 460 Val Arg Ala Cys Leu Arg Arg Leu Val Pro Pro Gly Leu Trp Gly Ser 465 470 475 480 Arg His Asn Glu Arg Arg Phe Leu Arg Asn Thr Lys Lys Phe Ile Ser 485 490 495 Leu Gly Lys His Ala Lys Leu Ser Leu Gln Glu Leu Thr Trp Lys Met 500 505 510 Ser Val Arg Asp Cys Ala Trp Leu Arg Arg Ser Pro Gly Val Gly Cys 515 520 525 Val Pro Ala Ala Glu His Arg Leu Arg Glu Glu Ile Leu Ala Lys Phe 530 535 540 Leu His Trp Leu Met Ser Val Tyr Val Val Glu Leu Leu Arg Ser Phe 545 550 555 560 Phe Tyr Val Thr Glu Thr Thr Phe Gln Lys Asn Arg Leu Phe Phe Tyr 565 570 575 Arg Lys Ser Val Trp Ser Lys Leu Gln Ser Ile Gly Ile Arg Gln His 580 585 590 Leu Lys Arg Val Gln Leu Arg Glu Leu Ser Glu Ala Glu Val Arg Gln 595 600 605 His Arg Glu Ala Arg Pro Ala Leu Leu Thr Ser Arg Leu Arg Phe Ile 610 615 620 Pro Lys Pro Asp Gly Leu Arg Pro Ile Val Asn Met Asp Tyr Val Val 625 630 635 640 Gly Ala Arg Thr Phe Arg Arg Glu Lys Arg Ala Glu Arg Leu Thr Ser 645 650 655 Arg Val Lys Ala Leu Phe Ser Val Leu Asn Tyr Glu Arg Ala Arg Arg 660 665 670 Pro Gly Leu Leu Gly Ala Ser Val Leu Gly Leu Asp Asp Ile His Arg 675 680 685 Ala Trp Arg Thr Phe Val Leu Arg Val Arg Ala Gln Asp Pro Pro Pro 690 695 700 Glu Leu Tyr Phe Val Lys Val Asp Val Thr Gly Ala Tyr Asp Thr Ile 705 710 715 720 Pro Gln Asp Arg Leu Thr Glu Val Ile Ala Ser Ile Ile Lys Pro Gln 725 730 735 Asn Thr Tyr Cys Val Arg Arg Tyr Ala Val Val Gln Lys Ala Ala His 740 745 750 Gly His Val Arg Lys Ala Phe Lys Ser His Val Ser Thr Leu Thr Asp 755 760 765 Leu Gln Pro Tyr Met Arg Gln Phe Val Ala His Leu Gln Glu Thr Ser 770 775 780 Pro Leu Arg Asp Ala Val Val Ile Glu Gln Ser Ser Ser Leu Asn Glu 785 790 795 800 Ala Ser Ser Gly Leu Phe Asp Val Phe Leu Arg Phe Met Cys His His 805 810 815 Ala Val Arg Ile Arg Gly Lys Ser Tyr Val Gln Cys Gln Gly Ile Pro 820 825 830 Gln Gly Ser Ile Leu Ser Thr Leu Leu Cys Ser Leu Cys Tyr Gly Asp 835 840 845 Met Glu Asn Lys Leu Phe Ala Gly Ile Arg Arg Asp Gly Leu Leu Leu 850 855 860 Arg Leu Val Asp Asp Phe Leu Leu Val Thr Pro His Leu Thr His Ala 865 870 875 880 Lys Thr Phe Leu Arg Thr Leu Val Arg Gly Val Pro Glu Tyr Gly Cys 885 890 895 Val Val Asn Leu Arg Lys Thr Val Val Asn Phe Pro Val Glu Asp Glu 900 905 910 Ala Leu Gly Gly Thr Ala Phe Val Gln Met Pro Ala His Gly Leu Phe 915 920 925 Pro Trp Cys Gly Leu Leu Leu Asp Thr Arg Thr Leu Glu Val Gln Ser 930 935 940 Asp Tyr Ser Ser Tyr Ala Arg Thr Ser Ile Arg Ala Ser Leu Thr Phe 945 950 955 960 Asn Arg Gly Phe Lys Ala Gly Arg Asn Met Arg Arg Lys Leu Phe Gly 965 970 975 Val Leu Arg Leu Lys Cys His Ser Leu Phe Leu Asp Leu Gln Val Asn 980 985 990 Ser Leu Gln Thr Val Cys Thr Asn Ile Tyr Lys Ile Leu Leu Leu Gln 995 1000 1005 Ala Tyr Arg Phe His Ala Cys Val Leu Gln Leu Pro Phe His Gln Gln 1010 1015 1020 Val Trp Lys Asn Pro Thr Phe Phe Leu Arg Val Ile Ser Asp Thr Ala 1025 1030 1035 1040 Ser Leu Cys Tyr Ser Ile Leu Lys Ala Lys Asn Ala Gly Met Ser Leu 1045 1050 1055 Gly Ala Lys Gly Ala Ala Gly Pro Leu Pro Ser Glu Ala Val Gln Trp 1060 1065 1070 Leu Cys His Gln Ala Phe Leu Leu Lys Leu Thr Arg His Arg Val Thr 1075 1080 1085 Tyr Val Pro Leu Leu Gly Ser Leu Arg Thr Ala Gln Thr Gln Leu Ser 1090 1095 1100 Arg Lys Leu Pro Gly Thr Thr Leu Thr Ala Leu Glu Ala Ala Ala Asn 1105 1110 1115 1120 Pro Ala Leu Pro Ser Asp Phe Lys Thr Ile Leu Asp 1125 1130 <110> KAEL-GEMVAX CO., LTD. KIM, Sangjae <120> Composition for improving skin anti-aging <130> 13P539IND <150> KR 10-2012-0145500 <151> 2012-12-13 <160> 2 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 16 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Glu Ala Arg Pro Ala Leu Leu Thr Ser Arg Leu Arg Phe Ile Pro Lys 1 5 10 15 <210> 2 <211> 1132 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Pro Arg Ala Pro Arg Cys Arg Ala Val Arg Ser Leu Leu Arg Ser 1 5 10 15 His Tyr Arg Glu Val Leu Pro Leu Ala Thr Phe Val Arg Arg Leu Gly 20 25 30 Pro Gln Gly Trp Arg Leu Val Gln Arg Gly Asp Pro Ala Ala Phe Arg 35 40 45 Ala Leu Val Ala Gln Cys Leu Val Cys Val Pro Trp Asp Ala Arg Pro 50 55 60 Pro Pro Ala Ala Pro Ser Phe Arg Gln Val Ser Cys Leu Lys Glu Leu 65 70 75 80 Val Ala Arg Val Leu Gln Arg Leu Cys Glu Arg Gly Ala Lys Asn Val 85 90 95 Leu Ala Phe Gly Phe Ala Leu Leu Asp Gly Ala Arg Gly Gly Pro Pro 100 105 110 Glu Ala Phe Thr Thr Ser Val Arg Ser Tyr Leu Pro Asn Thr Val Thr 115 120 125 Asp Ala Leu Arg Gly Ser Gly Ala Trp Gly Leu Leu Leu Arg Arg Val 130 135 140 Gly Asp Asp Val Leu Val His Leu Leu Ala Arg Cys Ala Leu Phe Val 145 150 155 160 Leu Val Ala Pro Ser Cys Ala Tyr Gln Val Cys Gly Pro Pro Leu Tyr 165 170 175 Gln Leu Gly Ala Ala Thr Gln Ala Arg Pro Pro Pro His Ala Ser Gly 180 185 190 Pro Arg Arg Arg Leu Gly Cys Glu Arg Ala Trp Asn His Ser Val Arg 195 200 205 Glu Ala Gly Val Pro Leu Gly Leu Pro Ala Pro Gly Ala Arg Arg Arg 210 215 220 Gly Gly Ser Ala Ser Arg Ser Leu Pro Leu Pro Lys Arg Pro Arg Arg 225 230 235 240 Gly Ala Ala Pro Glu Pro Glu Arg Thr Pro Val Gly Gln Gly Ser Trp 245 250 255 Ala His Pro Gly Arg Thr Arg Gly Pro Ser Asp Arg Gly Phe Cys Val 260 265 270 Val Ser Pro Ala Arg Pro Ala Glu Glu Ala Thr Ser Leu Glu Gly Ala 275 280 285 Leu Ser Gly Thr Arg His Ser His Pro Ser Val Gly Arg Gln His His 290 295 300 Ala Gly Pro Pro Ser Thr Ser Arg Pro Pro Arg Pro Trp Asp Thr Pro 305 310 315 320 Cys Pro Pro Val Tyr Ala Glu Thr Lys His Phe Leu Tyr Ser Ser Gly 325 330 335 Asp Lys Glu Gln Leu Arg Pro Ser Phe Leu Leu Ser Ser Leu Arg Pro 340 345 350 Ser Leu Thr Gly Ala Arg Arg Leu Val Glu Thr Ile Phe Leu Gly Ser 355 360 365 Arg Pro Trp Met Pro Gly Thr Pro Arg Arg Leu Pro Arg Leu Pro Gln 370 375 380 Arg Tyr Trp Gln Met Arg Pro Leu Phe Leu Glu Leu Leu Gly Asn His 385 390 395 400 Ala Gln Cys Pro Tyr Gly Val Leu Leu Lys Thr His Cys Pro Leu Arg 405 410 415 Ala Ala Val Thr Pro Ala Ala Gly Val Cys Ala Arg Glu Lys Pro Gln 420 425 430 Gly Ser Val Ala Ala Pro Glu Glu Glu Asp Thr Asp Pro Arg Arg Leu 435 440 445 Val Gln Leu Leu Arg Gln His Ser Ser Pro Trp Gln Val Tyr Gly Phe 450 455 460 Val Arg Ala Cys Leu Arg Arg Leu Val Pro Pro Gly Leu Trp Gly Ser 465 470 475 480 Arg His Asn Glu Arg Arg Phe Leu Arg Asn Thr Lys Lys Phe Ile Ser 485 490 495 Leu Gly Lys His Ala Lys Leu Ser Leu Gln Glu Leu Thr Trp Lys Met 500 505 510 Ser Val Arg Asp Cys Ala Trp Leu Arg Arg Ser Pro Gly Val Gly Cys 515 520 525 Val Pro Ala Ala Glu His Arg Leu Arg Glu Glu Ile Leu Ala Lys Phe 530 535 540 Leu His Trp Leu Met Ser Val Tyr Val Val Glu Leu Leu Arg Ser Phe 545 550 555 560 Phe Tyr Val Thr Glu Thr Thr Phe Gln Lys Asn Arg Leu Phe Phe Tyr 565 570 575 Arg Lys Ser Val Trp Ser Lys Leu Gln Ser Ile Gly Ile Arg Gln His 580 585 590 Leu Lys Arg Val Gln Leu Arg Glu Leu Ser Glu Ala Glu Val Arg Gln 595 600 605 His Arg Glu Ala Arg Pro Ala Leu Leu Thr Ser Arg Leu Arg Phe Ile 610 615 620 Pro Lys Pro Asp Gly Leu Arg Pro Ile Val Asn Met Asp Tyr Val Val 625 630 635 640 Gly Ala Arg Thr Phe Arg Arg Glu Lys Arg Ala Glu Arg Leu Thr Ser 645 650 655 Arg Val Lys Ala Leu Phe Ser Val Leu Asn Tyr Glu Arg Ala Arg Arg 660 665 670 Pro Gly Leu Leu Gly Ala Ser Val Leu Gly Leu Asp Asp Ile His Arg 675 680 685 Ala Trp Arg Thr Phe Val Leu Arg Val Arg Ala Gln Asp Pro Pro Pro 690 695 700 Glu Leu Tyr Phe Val Lys Val Asp Val Thr Gly Ala Tyr Asp Thr Ile 705 710 715 720 Pro Gln Asp Arg Leu Thr Glu Val Ile Ala Ser Ile Ile Lys Pro Gln 725 730 735 Asn Thr Tyr Cys Val Arg Arg Tyr Ala Val Val Gln Lys Ala Ala His 740 745 750 Gly His Val Arg Lys Ala Phe Lys Ser His Val Ser Thr Leu Thr Asp 755 760 765 Leu Gln Pro Tyr Met Arg Gln Phe Val Ala His Leu Gln Glu Thr Ser 770 775 780 Pro Leu Arg Asp Ala Val Val Ile Glu Gln Ser Ser Ser Leu Asn Glu 785 790 795 800 Ala Ser Ser Gly Leu Phe Asp Val Phe Leu Arg Phe Met Cys His His 805 810 815 Ala Val Arg Ile Arg Gly Lys Ser Tyr Val Gln Cys Gln Gly Ile Pro 820 825 830 Gln Gly Ser Ile Leu Ser Thr Leu Leu Cys Ser Leu Cys Tyr Gly Asp 835 840 845 Met Glu Asn Lys Leu Phe Ala Gly Ile Arg Arg Asp Gly Leu Leu Leu 850 855 860 Arg Leu Val Asp Asp Phe Leu Leu Val Thr Pro His Leu Thr His Ala 865 870 875 880 Lys Thr Phe Leu Arg Thr Leu Val Arg Gly Val Pro Glu Tyr Gly Cys 885 890 895 Val Val Asn Leu Arg Lys Thr Val Val Asn Phe Pro Val Glu Asp Glu 900 905 910 Ala Leu Gly Gly Thr Ala Phe Val Gln Met Pro Ala His Gly Leu Phe 915 920 925 Pro Trp Cys Gly Leu Leu Leu Asp Thr Arg Thr Leu Glu Val Gln Ser 930 935 940 Asp Tyr Ser Ser Tyr Ala Arg Thr Ser Ile Arg Ala Ser Leu Thr Phe 945 950 955 960 Asn Arg Gly Phe Lys Ala Gly Arg Asn Met Arg Arg Lys Leu Phe Gly 965 970 975 Val Leu Arg Leu Lys Cys His Ser Leu Phe Leu Asp Leu Gln Val Asn 980 985 990 Ser Leu Gln Thr Val Cys Thr Asn Ile Tyr Lys Ile Leu Leu Leu Gln 995 1000 1005 Ala Tyr Arg Phe His Ala Cys Val Leu Gln Leu Pro Phe His Gln Gln 1010 1015 1020 Val Trp Lys Asn Pro Thr Phe Phe Leu Arg Val Ile Ser Asp Thr Ala 1025 1030 1035 1040 Ser Leu Cys Tyr Ser Ile Leu Lys Ala Lys Asn Ala Gly Met Ser Leu 1045 1050 1055 Gly Ala Lys Gly Ala Ala Gly Pro Leu Pro Ser Glu Ala Val Gln Trp 1060 1065 1070 Leu Cys His Gln Ala Phe Leu Leu Lys Leu Thr Arg His Arg Val Thr 1075 1080 1085 Tyr Val Pro Leu Leu Gly Ser Leu Arg Thr Ala Gln Thr Gln Leu Ser 1090 1095 1100 Arg Lys Leu Pro Gly Thr Thr Leu Thr Ala Leu Glu Ala Ala Ala Asn 1105 1110 1115 1120 Pro Ala Leu Pro Ser Asp Phe Lys Thr Ile Leu Asp 1125 1130

Claims

As an active ingredient,
A composition for maintaining or enhancing skin elasticity, comprising a peptide consisting of SEQ ID NO: 1.

As an active ingredient,
A composition for preventing or improving skin wrinkles comprising a peptide consisting of SEQ ID NO: 1.

As an active ingredient,
A cosmetic composition for enhancing collagen biosynthesis comprising a peptide consisting of SEQ ID NO: 1.

As an active ingredient,
A composition for whitening comprising a peptide consisting of SEQ ID NO: 1.

As an active ingredient,
A composition for inhibiting melanin production comprising a peptide consisting of SEQ ID NO: 1.

delete

The method of claim 1, 2, 4, or 5,
The composition is a cosmetic composition.

The method of claim 1, 2, 4, or 5,
The composition is a health food composition.

As an active ingredient,
A health food composition for enhancing collagen biosynthesis, comprising a peptide consisting of SEQ ID NO: 1.