KR102091819B1 - 프로카스파제-3의 활성화제로서 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물 - Google Patents

프로카스파제-3의 활성화제로서 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR102091819B1
KR102091819B1 KR1020180059458A KR20180059458A KR102091819B1 KR 102091819 B1 KR102091819 B1 KR 102091819B1 KR 1020180059458 A KR1020180059458 A KR 1020180059458A KR 20180059458 A KR20180059458 A KR 20180059458A KR 102091819 B1 KR102091819 B1 KR 102091819B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
cancer
acetohydrazide
oxoquinazoline
nmr
dmso
Prior art date
Application number
KR1020180059458A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20190134169A (ko
Inventor
한상배
김영수
홍진태
하이 남 옹우옌
푸옹 타오 트란
티 투안 옹우옌
Original Assignee
충북대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 충북대학교 산학협력단 filed Critical 충북대학교 산학협력단
Priority to KR1020180059458A priority Critical patent/KR102091819B1/ko
Publication of KR20190134169A publication Critical patent/KR20190134169A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102091819B1 publication Critical patent/KR102091819B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C07D239/86—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines with hetero atoms directly attached in position 4
    • C07D239/88—Oxygen atoms

Abstract

본 발명은 프로카스파제-3(procaspase-3)의 활성화제로서 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드(acetohydrazide) 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명에 따른 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 유도체는 프로카스파제-3를 활성화하여 카스파제-3으로의 전환을 촉진하므로, 다양한 암세포에 대한 증식억제제로 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 화합물은 강력한 항암제의 활성성분으로서 개발될 수 있을 것으로 기대된다.

Description

프로카스파제-3의 활성화제로서 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물{A NOVEL QUINAZOLINE-BASED ACETOHYDRAZIDE AS A PROCASPASE-3 ACTIVATOR AND AN ANTICANCER COMPOSITION COMPRISING THE SAME AS AN ACTIVE INGREDIENT}
본 발명은 프로카스파제-3(procaspase-3)의 활성화제로서 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드(acetohydrazide) 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물에 관한 것이다.
암은 전세계적으로 주된 사망원인 두 가지 중 하나이다. 암 발생과 전이의 주된 원인은 세포사멸의 조절장애에 있다. p53단백질과 XIAP 또는 Bcl-2 억제자와 같은 화합물은 세포사멸 과정에서 단백질에 직접적으로 작용하여 세포사멸을 유도하고 암세포를 죽음으로 이끈다. 카스파제(caspase)는 세포사멸의 조절을 통하여 항상성을 유지하기 위해 중요한 시스테인 단백질 가수분해 효소 계열이다. 많은 연구는 작은 분자들에 의한 프로카스파제-3의 직접적인 활성화가 세포사멸을 유도하는 화합물 이상의 장점을 가지고 있을 수 있다는 것을 설명하고 있는데, 왜냐하면 프로카스파제-3는 결장암, 폐암, 흑색종, 간암, 유방암, 림프종, 신경아세포종 등을 포함한 다양한 종양에서 과다발현되는 것이 발견되었기 때문이다.
암 병리학에서 카스파제의 중요한 역할에 불구하고, 카스파제 특이적 활성화제는 지금까지 거의 개발되지 않았다. PAC-1은 인비보에서 항종양 활성을 보여주는 것으로 보고된 첫번째 프로카스파제 활성화 화합물이다(화학식1, 도1).
[화학식 1]
Figure 112018051298244-pat00001
PAC-1 및 다른 관련된 화합물들의 구조와 활성에 관한 상관관계에 관한 연구들은 아실히드라존(acylhydrazone) 부분(도 1의 B-영역)이 활성에 있어 매우 중요한 역할을 한다는 것을 밝혀냈고, 이는 아실히드라존과 아연을 가지고 있는 기능기 사이의 콤플렉스 형성으로부터 결과를 얻었다.
선행문헌
(비특허문헌 1) Storey S. Targeting apoptosis: selected anticancer strategies. Nat. Rev. Drug Discov., 2008, 7, 971-972.
(비특허문헌 2) Lain S., Hollick J.J., Campbell J., Staples O.D., Higgins M., Aoubala M., McCarthy A., Appleyard V., Murray K.E., Baker L. Discovery, in vivo activity, and mechanism of action of a small-molecule p53 activator. Cancer Cell, 2008, 13, 454-463.
(비특허문헌 3) Flygare J.A., Beresini M., Budha N., Chan H., Chan I.T., Cheeti S., Cohen F., Deshayes K., Doerner K., Eckhardt S.G. Discovery of a potent small-molecule antagonist of inhibitor of apoptosis (IAP) proteins and clinical candidate for the treatment of cancer (GDC-0152). J. Med. Chem., 2012, 55, 4101-4113.
(비특허문헌 4) Souers A.J., Leverson J.D., Boghaert E.R., Ackler S.L., Catron N.D., Chen J., Dayton B.D., Ding H., Enschede S.H., Fairbrother W.J. ABT-199, A potent and selective BCL-2 inhibitor, achieves antitumor activity while sparing platelets. Nat. Med., 2013, 19, 202-208
(비특허문헌 5) Putt K.S., Chen G.W., Pearson J.M., Sandhorst J.S., Hoagland M.S., Kwon J.T., Hwang S.K., Jin H., Churchwell M.I., Cho M.H. Small-molecule activation of procaspase-3 to caspase-3 as a personalized anticancer strategy. Nat. Chem.Biol. 2006, 2, 543-550.
(비특허문헌 6) Prochazka J., Liu X., Fiala P., Kinkor Z. Increased expression of Apaf-1 and procaspase-3 and the functionality of intrinsic apoptosis apparatus in nonsmall cell lung carcinoma. Biol. Chem. 2004, 385, 153-168.
(비특허문헌 7) Fink D., Schlagbauer-Wadl H., Selzer E., Lucas T., Wolff K., Pehamberger H., Eichler H.G., Jansen B. Elevated procaspase levels in human melanoma. Melanoma Res. 2001, 11, 385-393.
(비특허문헌 8) Persad P., Liu C., Wu L.L., Houlihan, P.S., Hamilton, S.R., Diehl, A.M., Rashid, A. Overexpression of caspase-3 in hepatocellular carcinomas. Mod. Pathol. 2004, 17, 861-867.
(비특허문헌 9) O'Donovan N., Crown J., Stunell H., Hill A.D., McDermott E., O'Higgins N., Duffy M.J. Caspase-3 in breast cancer. Clin. Cancer Res. 2003, 9, 738-742.
(비특허문헌 10) Izban K.F., Wrone-Smith T., His E.D., Schnitzer B., Quevedo M.E., Alkan S. Characterization of the interleukin-1β-converting enzyme/Ced-3-family protease, caspase-3/CPP32, in Hodgkin's disease: lack of Caspase-3 expression in nodular lymphocyte predominance Hodgkin's diseas., Am. J. Pathol. 1999, 155, 1439-1447.
(비특허문헌 11) Nakagawara A., Nakamura Y., Ikeda H., Hiwasa T., Kuida K., Su M.S., Zhao H., Cnaan A., Sakiyama S., High levels of expression and nuclear localization of interleukin-1β converting enzyme (ICE) and CPP32 in favorable human neuroblastomas. Cancer Res. 1997, 57, 4578-4584.
(비특허문헌 12) Svingen, P.A. et al. Components of the cell death machine and drug sensitivity of the National Cancer Institute Cell Line Panel. Clin. Cancer Res. 2004, 10, 6807-6820.
(비특허문헌 13) Howard S. Roth, Paul J. Hergenrother, Derivatives of metals Procaspase-Activating Compound 1 (PAC-1) and anticancer activities, Curr. Med. Chem. 2016, 23, 201-241.
(비특허문헌 14) Putt K.S., Chen G.W., Pearson J.M., Sandhorst J.S., Hoagland M.S., Kwon J.T., Hwang S.K., Jin H., Churchwell M.I., Cho M.H., Doerge D.R., Helferich W.G., Hergenrother P.J. Small-molecule activation of procaspase-3 to caspase-3 as a personalized anticancer strategy l. Nature Chemical Biology. 2006, 2, 543-550.
(비특허문헌 15) Peng X., Tang X., Qin W., Dou W., Guo Y., Zheng J., Liu W., Wang D. Aroylhydrazone derivative as fluorescent sensor for highly selective recognition of Zn2+ ions: syntheses, characterization, crystal structures and spectroscopic properties. Dalton Trans. 2011, 40, 5271-5277.
(비특허문헌 16) Asif M. Chemical characteristics, synthesis methods, and biological potential of quinazoline and quinazolinone derivatives. Int. J. Med. Chem. 2014, 1-27.
(비특허문헌 17) Skehan, P.; Storeng, R.; Scudiero, D.; Monk, A.; MacMahon, J.; Vistica, D.; Warren, J.T.; Bokesch, H.; Kenney, S.; Boyd. M.R. New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer drug screening. J. Natl. Cancer Inst., 1990, 82, 1107-1112.
(비특허문헌 18) Ye, G., Nam, N.H., Kumar, A., Saleh, A., Shenoy, D.B., Amiji, M.M., Lin, X., Sun, G., Parang, K. Synthesis and Evaluation of Tripodal Peptide Analogues for Cellular Delivery of Phosphopeptides. J. Med. Chem. 2007, 50, 3604-3617.
(비특허문헌 19) You, Y.J., Kim, Y., Nam, N.H., Ahn, B.Z. Antitumor activity of unsaturated fatty acid esters of 4′-demethyldeoxypodophyllotoxin. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2003, 13, 2629-2632.
(비특허문헌 20) Nam, N.H., Lee, C.W., Hong, D.H., Kim, H.M., Bae, K.H., Ahn, B.Z. Antiinvasive, antiangiogenic and antitumour activity of Ephedra sinica extract. Phytother. Res. 2003, 17, 70-76.
(비특허문헌 21) Wu, L.; Smythe, A.M.; Stinson, S.F.; Mullendore, L.A.; Monks, A.; Scudiero, D.A.; Paull, K.D.; Koutsoukos, A.D.; Rubinstein, L.V.; Boyd, M.R.; Shoemaker, R.H. Multidrug-resistant phenotype of disease-oriented panels of human tumor cell lines used for anticancer drug screening. Cancer Res., 1992, 52, 3029-3034.
(비특허문헌 22) Spulak M., Novak Z., Palat K., Kunes J., Pourova J., Pour M. The unambiguous synthesis and NMR assignment of 4-alkoxy and 3-alkylquinazolines. Tetrahedron, 2013, 69, 1705-1711.
(비특허문헌 23) Palla, G.; Pelizzi, C.; Predieri, G.; Vignali, C. Conformational study on N-acylhydrazones of aromatic aldehydes by NMR spectroscopy. Gazz. Chim. Ital. 1982, 112, 339-341.
본 발명자들은 프로카스파제-3(procaspase-3)의 카스파제-3으로의 전환 또는 활성화를 가능하게 하는 신규한 화합물을 개발하기 위해 예의 노력한 결과, 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드(acetohydrazide) 화합물들을 합성하고, 이들의 카스파제-3 유도 활성 및 암세포에 대한 증식억제 활성을 실험적으로 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
이에 본 발명은 프로카스파제-3(procaspase-3)의 활성화제로서 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드(acetohydrazide) 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 또한 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
제1구현예에 따르면,
본 발명은
프로카스파제-3(procaspase-3)의 활성화제로서 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드(acetohydrazide) 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하고자 한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "약제학적으로 허용가능한 염"은 상기 화합물의 생물학적 효능 및 특성을 보유하며, 적절한 무독성 유기산 또는 무기산, 또는 무독성 유기염기 또는 무기염기로부터 형성되는 통상의 산부가염 또는 염기 부가염을 의미한다. 산부가염의 예는 염산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산, 술팜산, 인산 및 질산과 같은 무기산으로부터 유래된 산부가염, p-톨루엔술폰산, 살리실산, 메탄술폰산, 옥살산, 숙신산, 시트르산, 말산, 락트산, 푸마르산 등과 같은 유기산으로부터 유래된 산부가염이 포함된다. 염기 부가염의 예는 암모늄, 칼륨, 나트륨, 및 4차 수산화암모늄 예컨대, 수산화테트라메틸암모늄으로부터 유래된 염기부가염이 포함된다. 화합물의 개선된 물리적 및 화학적 안정성, 흡습성, 유동성 및 가용성을 얻기 위해, 약학적 화합물(즉, 약물)을 염으로 화학적으로 변형시키는 것은 약학 화학자에게 잘 공지되어 있는 기술이며, 이러한 내용은 문헌 [H. Ansel et. al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (6th Ed. 1995) at pp. 196 and 1456-1457]에 기재되어 있고, 이 문헌은 본 명세서에 참조로써 포함된다.
본 명세서에서 사용된 용어 "약제학적으로 허용가능한"은 예를 들면, 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제 등이 특정한 화합물이 투여되는 환자에게 약리학적으로 허용될 수 있으며 실질적으로 무독성을 나타낸다는 것을 의미한다.
본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염에 있어서, 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 하기의 화학식 1, 2 또는 3으로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 혀용가능한 염인 것을 특징으로 한다:
[화학식 1]
Figure 112018051298244-pat00002
[화학식 2]
Figure 112018051298244-pat00003
[화학식 3]
Figure 112018051298244-pat00004
(상기 화학식 1 내지 3에 있어서, 상기 R은 수소, 할로겐 또는 CH3이고, 상기 R'는 수소, 할로겐, OH, OCH3, NO2 또는 NCH3이며, 상기 화학식 2에 있어서 Ar은
Figure 112018051298244-pat00005
,
Figure 112018051298244-pat00006
,
Figure 112018051298244-pat00007
,
Figure 112018051298244-pat00008
,
Figure 112018051298244-pat00009
,
Figure 112018051298244-pat00010
또는
Figure 112018051298244-pat00011
이다.)
본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염에 있어서, 상기 할로겐은 플루오르(F), 염소(Cl), 브롬(Br) 또는 요오드(I)인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염에 있어서, 상기 화합물은 하기의 화합물 중 어느 하나인 것을 특징으로 한다:
(E)-N'-(2-클로로벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드;
(E)-N'-(2,4-디히드록시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드;
(E)-N'-(2-히드록시-4-메톡시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드;
(E)-2-(6-클로로-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-N'-(4-메톡시벤질리덴)아세토히드라지드;
(E)-N'-벤질리덴-2-(6-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드;
(E)-N'-(4-메톡시벤질리덴)-2-(6-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드;
(E)-N'-(4-(디메틸아미노)벤질리덴)-2-(6-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드;
(E)-2-(6-요오도-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-N'-(2-옥소인돌린-3-일리덴)아세토히드라지드.
제2구현예에 따르면,
본 발명은 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물을 제공하고자 한다.
본 명세서에서 사용된 용어 "암(cancer)"은 세포가 정상적인 성장 한계를 무시하고 분열 및 성장하는 공격적(aggressive) 특성, 주위 조직에 침투하는 침윤적(invasive) 특성, 및 체내의 다른 부위로 퍼지는 전이적(metastatic) 특성을 갖는 세포에 의한 질병을 총칭하는 의미이다.
본 발명에 따른 항암제 조성물에 있어서, 상기 암은 유방암, 폐암, 위암, 간암, 혈액암, 뼈암, 췌장암, 피부암, 두경부암, 피부 또는 안구 흑색종, 자궁육종, 난소암, 직장암, 항문암, 대장암, 난관암, 자궁내막암, 자궁경부암, 소장암, 내분비암, 갑상선암, 부갑상선암, 신장암, 연조직종양, 요도암, 전립선암, 기관지암, 또는 골수암인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 항암제 조성물에 있어서, 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 프로카스파제-3의 활성화를 통해 카스파제-3으로의 전환을 유도 하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 항암제 조성물에 있어서, 상기 항암제 조성물은 (i) 상기 화학식 1, 2 또는 3으로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 약제학적 유효량; 및 (ⅱ) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물의 형태로 제공되는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 항암제 조성물에 포함될 수 있는 담체는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 항암제 조성물은 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제 또는 보존제를 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.
본 발명에 따른 항암제 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 따라 다양한 방법으로 처방될 수 있다.
본 발명에 따른 항암제 조성물의 투여량은 바람직하게는 1일 당 0.001-1000 mg/kg(체중) 일 수 있다.
본 발명에 따른 항암제 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구로 투여되는 경우, 정맥내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있다.
본 발명에 따른 항암제 조성물에 포함되는 유효 성분의 농도는 치료 목적, 환자의 상태, 필요 기간, 질환의 위중도 등을 고려하여 결정되며 특정 범위의 농도로 한정되지 않는다.
본 발명에 따른 항암제 조성물은 당해 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제형화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 유도체는 프로카스파제-3를 활성화하여 카스파제-3으로의 전환을 촉진시킬 수 있으며, 다양한 암세포에 대해 증식억제 활성을 나타낸다. 따라서, 본 발명에 따른 화합물을 강력한 항암제의 활성 성분으로 개발될 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 PAC-1으로부터 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 유도체를 디자인하는 일실시예를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 유도체를 합성하는 경로를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 유도체의 SW620에 대한 CGP를 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 유도체의 카스파제 활성 효과를 나타낸 것이다.
퀴나졸린-4(3H)-온은 다양한 생물학적 화합물에서 발견되는 일반적인 스캐폴드이다(예를들어, luotonin A, rutaecarpine, tryptanthrin, chloroqualone, alloqualone등). 특히, 퀴나졸린 헤테로사이클릭계는 많은 수의 타이로신 키나아제 저해제(tyrosine kinase inhibitor, TKI) 및 항암제(예를들어, 게피티니브(gelfitinib), 엘로티닙(erlotinib))에서 핵심 구조로 존재한다. PAC-1 및 관련된 아실히드라존 프로카스파제 활성화제의 약물분자구조와 퀴나졸린-4(3H)-온 스캐폴드의 생물학적 중요성에 근거하여, 본 발명에서는 3개의 새로운 아실히드라존 시리즈를 디자인하였다(도 1). PAC-1의 4-벤질피페라진-1-일 (4-benzylpiperazin-1-yl, A-영역) 부분은 퀴나졸린-4(3H)-온 헤테로사이클릭계로 치환하였고, PAC-1의 페닐기(C-영역)는 다른 치환된 페닐기, 헤테로아릴기 또는 이사틴(isatin)으로 대체되었다. A-영역과 C-영역 사이의 링커로써 역할하는 아실히드라존 부분(B-영역)은 변화시키지 않고 유지하였다.
이하, 발명의 이해를 돕기 위해 다양한 실시예를 제시한다. 하기 실시예는 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐 발명의 보호범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실험 재료 및 방법>
화학물질
Whatman® 250μm Silica Gel GF Uniplates 상에서 박막 크로마토그래피를 행하고, 254 nm에서의 UV 광으로 시각화하여 반응 진행과 화합물 동종성의 예비 평가를 확인하였다. 녹는점은 Gallenkamp Melting Point Apparatus(LabMerchant, London, United Kingdom)를 사용하여 측정하였고, 보정되지 않았다. 크로마토그래피를 사용한 정제는 Merck silica gel 60 (240 - 400 mesh)를 사용하여 오픈 플래쉬 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 통해 행하였다. 핵자기공명스펙트럼(1H NMR)은 다르게 지정하지 않으면 테트라메틸실란을 내부표준물질로 사용하고 디메틸설폭사이드-d6(DMSO-d6)를 용매로 사용하여 Bruker 500 MHz 분광기상에서 측정하였다. 화학적 이동(chemical shift)은 내부표준물질인 테트라메틸실란으로부터의 다운필드로 ppm(parts per million)으로 기록하였다. 전자이온화(electron ionization, EI), 전기분무 이온화(electrospray ionization, ESI) 및 고해상도 질량스펙트럼은 각각 PE Biosystems API 200 (Perkin Elmer, Palo Alto, CA, USA) 및 Mariner®(Azco Biotech, Inc. Oceanside, CA, USA) 질량 분광기를 사용하여 측정하였다. 원소(C, H, N) 분석은 Perkin Elmer model 2400 원소 분석기를 이용하여 수행하였다. 시약 및 용매는 다르게 지정하지 않는 한 Aldrich 또는 Fluka Chemical Corp. (Milwaukee, WI, USA) 또는 머크(Merck)사로부터 구입하여 사용하였다.
<실시예>
퀴나졸린-4(3H)-온이 결합되어 있는 아세토히드라지드(5, 6, 7)의 합성은 도 2에 설명된 방법에 따라 수행하였다. 구체적인 방법은 아래와 같다.
1. 화합물 5, 6, 7의 합성
안트라닐산(anthranilic acid, 1a) 또는 5-치환된-2-아미노벤조산(1b-d)(1mmol) 및 포름아마이드(3mmol)을 3시간 동안 120℃에서 교반하였다. 교반 완료 후, 생성 혼합물을 냉각시키고, 얼음 냉수에 부어, 밝은 갈색 고체가 형성되면, 이를 필터링한 후, 물로 씻고(3번), 건조하여 퀴나졸린-4(3H)-온 유도체(2a-d)를 얻었고, 이는 추가적인 정제없이 다음 단계에서 사용하였다.
퀴나졸린-4(3H)-온 유도체(2a-d)(1mmol)가 각각 있는 아세톤(10㎖) 용액에 K2CO3 (206.9mg, 1.5mmol)를 첨가하였다. 생성 혼합물을 80℃에서 30분 동안 교반하고, KI (16.6mg, 0.1mmol)를 첨가하였다. 15분 동안 더 교반한 후, 혼합물에 에틸클로로아세테이트(1.2mmol) 0.13㎖를 천천히 떨어뜨렸다. 생성 혼합물을 60℃에서 3시간 동안 다시 교반하였다. 반응이 완결된 후 생성 혼합물을 냉각시키고, 얼음 냉수에 부었다. 갈색 고체가 형성되었고, 필터링한 후 건조시켜 에틸 2-(4-옥소퀴나졸린-3-(4H)-일)아세테이트 유도체(3a-d)를 얻었다.
3a-d (0.5mmol) 화합물이 각각 있는 에탄올(10㎖) 용액에 히드라진 모노하이드레이트(2.5mmol) 0.12㎖를 천천히 첨가해 주었다. 출발물질이 모두 소진될 때까지 상온에서 혼합물을 교반해 주었다. 흰색 침전물이 형성되었고, 필터링한 후, 차가운 에탄올로 3번 세척하고 황백색 생성물 4a-d를 모아 진공상태에서 건조하였으며, 추가적인 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
아세토히드라지드 4a-d (0.5 mmol)가 용해되어 있는 에탄올(20㎖)에 진한 아세트산 2방울을 떨어뜨리고, 이어서 벤즈알데히드 또는 이사틴 유도체 (1.0 mmol)를 첨가해주었다. 혼합물은 반응이 완료될 때까지 환류되었다. 침전물이 형성되면 필터링하여 에탄올로 3번 세척하고 황백색 고체 생성물을 수집하여 진공에서 건조한 후, 에탄올이나 컬럼크로마토그래피(MeOH:DCM)에서 재결정화하여 목적 화합물 5a-z, 6a-g, 7a-b를 수득하였다.
(E)-N'-벤질리덴-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5a)
백색 고체; 수율: 60% mp: 179.7-181.5℃. Rf = 0.53 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3506 (NH); 3236 (N=C-H aromatic); 3060, 2990 (CH, aren); 2830 (CH2); 1719, 1680, 1531 (C=O, C=N); 1608 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.90, 11.84 (~26%, 74%) (s, 1H, CONH); 8.39 (s, 1H, H2); 8.24, 8.07 (~22%, 78%) (s, 1H, N=CH); 8.17 (d, J = 7.5 Hz, 1H, H5); 7.87 (t, J = 7.5 Hz, 1H, H7); 7.76-7.71 (m, 3H, H2′, H6′, H8); 7.58 (t, J = 7.5 Hz, 1H, H6); 7.48-7.45 (m, 3H, H3′, H4′, H5′); 5.24, 4.80 (~23%, 77%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.3 (CONH), 160.3 (C=O), 148.6 (C8=C-N=C2), 148.1 (C2), 144.3 (N=CH), 134.5 (C7), 133.9 (C1′), 130.1 (C4′), 128.9 (C2′, C6′), 127.2 (C6), 127.1 (C8), 126.9 (C3′, C5′), 126.1 (C5), 121.5 (C5=C-C=O), 47.0 (NCH2CO). MS (ESI) m/z 307.9 [M+H]+. Anal. Calcd. For C17H14N4O2 (306.1117): C, 66.66; H, 4.61; N, 18.29. Found: C, 66.63; H, 4.64; N, 18.32.
(E)-N'-(2-클로로벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5b)
백색 고체; 수율: 44%. mp: 180.0-182.0℃. Rf = 0.55 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3506 (NH); 3240 (N=C-H aromatic); 3059, 2987 (CH, aren); 1707, 1685, 1558 (C=O, C=N); 1608 (C=C); 777 (C-Cl). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 12.09, 11.97 (~22%, 78%) (s, 1H, CONH); 8.63, 8.45 (~22%, 78%) (s, 1H, N=CH); 8.38, 8.37 (s, 1H, H2); 8.16 (dd, J = 8.0 Hz, 1.5 Hz, 1H, H5); 8.04, 7.94 (~77%, 23%) (dd, J = 7.0 Hz, 2.0 Hz, 1H, H6′), 7.85 (td, J = 8.0 Hz, 1.5 Hz, 1H, H7); 7.72 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H8); 7.56 (t, J = 7.5 Hz, 1H, H6); 7.53, 7.52 (dd, J = 7.0 Hz, 1.5 Hz, 1H, H3′); 7.47-7.42 (m, 2H, H4′, H5′); 5.24, 4.81 (~80%, 20%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.4 (CONH), 160.2 (C=O), 148.5 (C8=C-N=C2), 148.0 (C2), 140.3 (N=CH), 134.4 (C7), 133.0 (C1′), 131.4 (C2′), 131.1 (C4′), 128.9 (C3′), 127.6 (C6′), 127.2 (C6), 127.0 (C8), 126.8 (C5′), 125.9 (C5), 121.4 (C5=C-C=O), 46.9 (NCH2CO). MS (ESI) m/z 340.9 [M+H]+. Anal. Calcd. For C17H13ClN4O2 (340.0727): C, 59.92; H, 3.85; N, 16.44. Found: C, 59.90; H, 3.87; N, 16.46.
(E)-N'-(2-니트로벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5c)
백색 고체; 수율: 56%. mp: 182.1-183.3℃. Rf = 0.60 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.93 (s, 1H, CONH); 8.65, 8.46 (~23%, 77%) (s, 1H, N=CH); 8.38, 8.37 (s, 1H, H2); 8.16 (dd, J = 7.5 Hz, 1.0 Hz, 1H, H5); 8.13, 8.10 (dd, J = 8.0 Hz, 1.5 Hz, 1H, H6′); 8.08, 8.03 (~78%, 22%) (dd, J = 8.5 Hz, 1.5 Hz, 1H, H3′); 7.87 (td, J = 8.5 Hz, 1.5 Hz, 1H, H5′); 7.82 (t, J = 7.5 Hz, 1H, H7); 7.72 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H8); 7.69 (td, J = 7.5 Hz, 1.5 Hz, 1H, H6); 7.58 (td, J = 8.0 Hz, 1.0 Hz, 1H, H4′); 5.23, 4.81 (~78%, 22%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.5 (CONH), 160.2 (C=O), 148.5 (C8=C-N=C2), 148.0 (C2), 143.0 (C2′), 139.9 (N=CH), 134.5 (C7), 133.6 (C5′), 130.7 (C4′), 128.2 (C6′), 128.0 (C1′), 127.2 (C6), 127.1 (C8), 126.0 (C5), 124.6 (C3′), 121.4 (C5=C-C=O), 46.9 (NCH2CO). Anal. Calcd. For C17H13N5O4 (351.0968): C, 58.12; H, 3.73; N, 19.93. Found: C, 58.16; H, 3.70; N, 19.96.
(E)-N'-(3-클로로벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5d)
백색 고체; 수율: 58%. mp: 184.0-185.0℃. Rf = 0.55 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.91 (s, 1H, CONH); 8.37 (s, 1H, H2); 8.16-8-15 (m, 1H, H5); 8.05 (s, 1H, N=CH); 7.85-7.82 (m, 2H, H7, H2′); 7.71-7.69 (m, 2H, H6′, H8); 7,57-7.49 (m, 3H, H4′, H6, H5′); 5.25, 4.80 (~80%, 20%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.4 (CONH), 160.3 (C=O), 148.5 (C8=C-N=C2), 148.0 (C2), 145.7 (N=CH), 142.7 (C1′), 136.1 (C3′), 134.5 (C7), 133.7 (C4′), 130.7 (C5′), 129.7 (C6′), 127.2 (C6), 127.1 (C8), 126.0 (C5), 125.8 (C2′), 121.4 (C5=C-C=O), 47.1 (NCH2CO). Anal. Calcd. For C17H13ClN4O2 (340.0727): C, 59.92; H, 3.85; N, 16.44. Found: C, 59.95; H, 3.83; N, 16.41.
(E)-N'-(4-클로로벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5e)
백색 고체; 수율: 31%. mp: 184.2-185.4℃. Rf = 0.56 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.96, 11.89 (~26%, 74%) (s, 1H, CONH); 8.34 (s, 1H, H2); 8.24, 8.07 (~22%, 78%) (s, 1H, N=CH); 8.17 (d, J = 7.5 Hz, 1H, H5); 7.86-7.92 (m, 3H, H2′, H6′, H7); 7.78 (d, J =8.5 Hz, 1H, H8); 7.59 (t, J =7.5 Hz, 1H, H6); 7.53 (d, J = 8.5 Hz, 2H, H3', H4');5.24, 4.81 (~23%, 77%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.8 (CONH), 161.1 (C=O), 149.0 (C8=C-N=C2), 148.6 (C2), 144.3 (N=CH), 136.5 (C4'), 135.0 (C7), 133.5 (C1′), 130.0 (C2′, C6′), 129.5 (C3′, C5′), 127.7 (C6), 127.6 (C8), 129.0 (C3′, C5′), 126.5 (C5), 121.9 (C5=C-C=O), 47.4 (NCH2CO). MS (ESI) m/z 339.1 [M-H]-. Anal. Calcd. For C17H13ClN4O2 (340.0727): C, 59.92; H, 3.85; N, 16.44. Found: C, 59.89; H, 3.88; N, 16.47.
(E)-N'-(4-플로로벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5f)
백색 고체; 수율: 49%. mp: 181.0-182.0℃. Rf = 0.59 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.89, 11.83 (~22%, 78%) (s, 1H, CONH); 8.38, 8,25 (~18%, 82%) (s, 1H, H2); 8.17, 7.97 (~81%, 19%) (dd, J = 9.0 Hz, 1.0 Hz, 1H, H5); 8.73, 8.25 (~13%, 87%) (s, 1H, N=CH); 7.86 (td, J = 8.5 Hz, 1.5 Hz, 2H, H7); 7.84, 7.80 (~78%, 22%) (dd, J = 3.5 Hz, 3.0 Hz, 2H, H2′, H6′); 7.74 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H8); 7.58 (td, J = 8.0 Hz, 1.0 Hz, 1H, H6); 7.38, 7.31 (~11%, 81%) (t, J = 9.0 Hz, 2H, H3′, H5′); 5.24, 4.80 (~79%, 21%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.7 (CONH), 162.6 (C4′), 160.8 (C=O), 149.1 (C2), 148.6 (C8=C-N=C2), 143.6 (N=CH), 135.0 (C7), 131.1 (C1′), 129.64 (C2′), 129.57 (C6′), 127.7 (C6), 127.6 (C8), 126.5 (C5), 121.9 (C5=C-C=O), 116.6 (C3′), 116.5 (C5′), 47.5 (NCH2CO). MS (ESI) m/z 323.2 [M-H]-. Anal. Calcd. For C17H13FN4O2 (324.1023): C, 62.96; H, 4.04; N, 17.28. Found: C, 62.93; H, 4.07; N, 17.31.
(E)-N'-(4-브로모벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5g)
백색 고체; 수율: 33%. mp: 181.2-182.4℃. Rf = 0.57 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.93, 11.85 (~22%, 78%) (mestnova) (s, 1H, CONH); 8.36 (s, 1H, H2); 8.22, 8.05 (~24%, 76%) (s, 1H, N=CH); 8.16 (dd, J = 7.5 Hz, 1.0 Hz, 1H, H5); 7.86 (td, J = 7.0 Hz, 1.0 Hz, H7); 7.82, 7.66 (~14%, 86%) (d, J = 7.5 Hz, 2H, H4′, H6′); 7.72 (d, J = 8.5 Hz, 1H, H8). 7.70 (d, J = 7.0 Hz, 2H, H3′, H5′); 7.57 (t, J = 7.5 Hz, 1H, H6); 5.23, 4.79 (~78%, 22%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.3 (CONH), 160.2 (C=O), 148.5 (C8=C-N=C2), 148.0 (C2), 143.1 (N=CH), 134.5 (C7), 133.2 (C1′), 132.0 (C3′), 131.8 (C5′), 130.2 (C4′), 128.8 (C6′), 127.2 (C6), 127.1 (C8), 126.0 (C5), 123.3 (C4′), 121.4 (C5=C-C=O), 46.9 (NCH2CO). Anal. Calcd. For C17H13BrN4O2 (384.0222): C, 53.00; H, 3.40; N, 14.54. Found: C, 52.97; H, 3.43; N, 14.57.
(E)-N'-(2-히드록시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드(5h)
백색 고체; 수율: 37%. mp: 176.0-177.2℃. Rf = 0.54 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3460 (NH); 3066 (OH); 3021 (CH, aren); 2912 (CH, CH2); 1697 (C=O); 1608, 1570 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 12.09, 11.75 (~34%, 66%) (s, 1H, CONH); 10.94, 10.10 (~37%, 63%) (s, 1H, 2′-OH); 8.47, 8.39 (s, 1H, N=CH); 8.38 (s, 1H, H2); 8.18 (d, J = 8 Hz, 1H, H5); 7.89 (t, J = 7 Hz, 1H, H7); 7.78 (d, J = 7.5 Hz, 1H, H8); 7.50 - 7.72 (m, 1H, H6′); 7.60 - 7.57 (m, 2H, H6′, H6); 7.32 - 7.26 (m, 1H, H4′); 6.94 - 6.88 (m, 2H, H3′, H5′); 5.22, 4.81 (~65%, 35%) (s, 2H, NCH2CO). 13C-NMR (125MHz, DMSO), δ 168.3 (CONH); 160.7 (C=O); 156.9 (C2′); 149.1 (N=CH); 148.6 (C8=C-N=C2); 142.0 (C2); 134.9 (C4'); 131.8 (C6′); 129.6 (C7); 127.8 (C5); 127.6 (C6); 126.5 (C8); 121.9 (C5=C-C=O); 120.5 (C5′); 119.9 (C1′); 116.8 (C3′); 47.4 (NCH2CO). Anal. Calcd. For C17H14N4O3 (322.1066): C, 63.35; H, 4.38; N, 17.38. Found: C, 63.38; H, 4.35; N, 17.41.
(E)-N'-(4-히드록시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드(5i)
백색 고체; 수율: 43%. mp: 178.2-179.3℃. Rf = 0.55 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.64, 11.58 (s, 1H, CONH); 9.90 (s, 1H, OH); 8.37, 8.36 (s, 1H, H2); 8.16 (dd, J = 8.0, 1.0 Hz, 1H, H5); 8.13, 7.97 (s, 1H, N=CH); 7.86 (td, J = 7.5 Hz, 1.0 Hz, 1H, H7); 7.72 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H8); 7.59-7.53 (m, 3H, H6, H2′, H6′); 6.84, 6.82 (d, J = 8.5 Hz, 2H, H3′, H5′); 5.20, 4.76 (~78%, 22%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 167.8 (CONH), 160.2 (C=O), 159.4 (C-OH), 148.6 (C8=C-N=C2), 148.1 (C2), 144.5 (N=CH), 134.4 (C7), 128.6 (C2′, C6′), 127.2 (C6), 127.0 (C8), 126.0 (C5), 124.9 (C1′), 121.4 (C5=C-C=O), 115.7 (C3′, C5′), 46.9 (NCH2CO). MS (ESI) m/z 323.2 [M+H]+. Anal. Calcd. For C17H14N4O3 (322.1066): C, 63.35; H, 4.38; N, 17.38. Found: C, 63.33; H, 4.40; N, 17.35.
(E)-N'-(4-메톡시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5j)
백색 고체; 수율: 41%. mp: 185.0-186.0℃. Rf = 0.56 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.97, 11.73 (~23%, 77%) (s, 1H, CONH); 8.57, 8.56 (s, 1H, H2); 8.23, 8.04 (~23%, 77%) (s, 1H, N=CH); 8.18, 8.17 (dd, J = 8.0 Hz, 1.0 Hz, H5); 7.90 (td, J = 8.0 Hz, 1.0 Hz, 1H, H7); 7.76 (d, J = 8.5 Hz, 1H, H8); 7.69, 7.65 (d, J = 8.0 Hz, 2H, H2′, H6′); 7.61 (t, J = 8.0 Hz, 1H, H6); 7.02, 7.01 (d, J = 8.5 Hz, 2H, H3′, H5′); 5.24, 4.82 (~78%, 22%) (s, 2H, NCH2CO); 3.81, 3.80 (s, 3H, OCH3). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 167.7 (CONH), 160.9 (C=O), 159.9 (C4′-OCH3), 149.0 (C8=C-N=C2), 147.2 (C2), 144.3 (N=CH), 134.7 (C7), 128.7 (C6), 128.5 (C2′, C6′), 127.4 (C8), 126.4 (C1′), 126.2 (C5), 121.2 (C5=C-C=O), 114.3 (C3′, C5′), 55.3 (OCH3), 47.1 (NCH2CO). MS (ESI) m/z 337.1 [M+H]+.
(E)-N'-(2,3-디히드록시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5k)
백색 고체; 수율: 36%. mp: 172.1-173.6℃. Rf = 0.57 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3564 (NH); 3452 (OH); 3259 (CH, aren); 2890 (CH, CH2); 1710 (C=O); 1614, 1566 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 12.20, 10.08 (~50%, 50%) (s, 1H, 2'-OH); 10.80, 11.70 (~26%, 74%) (s, 1H, CONH); 9.30, 9.50 (~40%, 60%) (s, 1H, 3'-OH); 8.39 (d, 1H, J = 7.5 Hz, H4'); 8.37 (s, 1H, H2); 8.38 (s, 1H, N=CH); 8.17 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H5); 7.87 (m, 1H, H7); 7.73 (m, 1H, H8); 7.26-7.31 (m, 1H, H4'); 7.00 (m, 1H, H6'); 6.72 (m, 1H, H5'); 5.20, 4.82 (~22%, 78%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 167.9 (CONH); 161.1 (C2′); 160.7 (C=O); 158.6 (C4′); 149.1 (N=CH); 148.6 (C8=C-N=C2); 143.0 (C2); 134.9 (C7); 131.5 (C6); 127.7 (C5); 127.6 (C6); 126.5 (C8); 121.9 (C5=C-C=O); 112.0 (C1′); 108.4 (C5′); 102.9 (C3′); 47.3 (NCH2CO)MS (ESI) m/z 338.9 [M+H]+.
(E)-N'-(2,4-디히드록시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5l)
백색 고체; 수율: 42%. mp: 175.1-176.8℃. Rf = 0.64 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3450 (NH); 3182 (OH); 3057 (CH, aren); 2978 (CH, CH2); 1732 (C=O); 1631, 1539 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.89, 11.54 (~26%, 74%) (s, 1H, CONH); 11.09 (s, 1H, 2'-OH); 9.83 (s, 1H, 4'-OH); 8.39 (d, 1H, J = 7.5 Hz, H4'); 8.37 (s, 1H, H2); 8.24 (s, 1H, N=CH); 8.16 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H5); 7.86 (t, 1H, J = 8.0 Hz, H7); 7.73 (t, 1H, J = 8.0 Hz, H8); 7,55-7,59 (m, 3H, H6, H3', H5'); 6.33 (m, 1H, H5'); 5.16, 4.77 (~22%, 78%) (s, 2H, NCH2CO). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.3 (CONH), 163.3 (C2'), 161.0 (C4'), 160.7 (C=O), 148.9 (C8=C-N=C2), 148.5 (C2), 142.9 (N=CH), 134.9 (C7), 131.6 (C6'), 127.7 (C6), 127.5 (C8), 126.5 (C5), 121.9 (C5=C-C=O), 112.0 (C1′), 108.3 (C5′), 103.0 (C3′), 47.3 (NCH2CO). MS (ESI) m/z 338.9 [M+H]+. Anal. Calcd. For C17H14N4O4 (338.1015): C, 60.35; H, 4.17; N, 16.56. Found: C, 60.32; H, 4.14; N, 16.58.
(E)-N'-(2,5-디히드록시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5m)
백색 고체; 수율: 38%. mp: 173.2-174.6 Rf = 0.56 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.92, 11.78 (~26%, 74%) (s, 1H, CONH); 11.78 (s, 1H, 2'-OH); 9.34 (s, 1H, 5'-OH); 8.38 (s, 1H, H2); 8.31, 8.39 (~22%, 78%) (s, 1H, N=CH); 8.16 (d, J = 7.5 Hz, 1H, H5); 7.88 (t, 1H, J = 7.5 Hz, H7); 7.73 (t, 1H, J = 8.0 Hz, H8); 7.59 (t, 1H, J = 7.5 Hz, H6); 7.18 (s, 1H, H6'); 6.71-6.76 (m, 2H, H3', H4'); 6.33 (m, 1H, H5'); 5.20, 4.79 (~22%, 78%) (s, 2H, NCH2CO). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.3 (CONH), 160.7 (C=O), 150.5 (C2'), 150.3 (C2'), 148.9 (C8=C-N=C2), 148.5 (C2), 142.0 (N=CH), 135.0 (C7), 127.6 (C6), 127.5 (C8), 127.4 (C5), 119.6 (C1′), 119.4 (C4′), 117.5 (C6′), 120.7 (C3′), 121.9 (C5=C-C=O), 47.2 (NCH2CO).
(E)-N'-(2-히드록시-4-메톡시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5n)
백색 고체; 수율: 30%. mp: 177.1-178.3℃. Rf = 0.63 (DCM : MeOH = 9 : 1). IR (KBr, cm-1): 3466 (NH); 3226 (OH); 3057 (CH, aren); 2964 (CH, CH2); 1745 (C=O); 1612, 1562 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.90, 11.62 (~26%, 74%) (s, 1H, CONH); 10.27 (s, 1H, 2'-OH); 8.38 (s, 1H, N=CH); 8.37 (s, 1H, H2); 8.16 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H5); 7.89 (t, 1H, J = 8.0 Hz, H7); 7.73 (t, 1H, J = 8.0 Hz, H8);7.55 (t, 1H, J = 8.0 Hz, H6); 7.45 (d, 1H, J = 9.0 Hz, H6'); 6.47-6.52 (m, 2H, H3', H5'); 5.20, 4.79 (~22%, 78%) (s, 2H, NCH2CO); 3.77 (s, 3H, 4'-OCH3). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm):δ 168.0 (CONH); 162.5 (C4′); 160.7 (C=O); 158.5 (C2′); 149.1 (N=CH); 148.6 (C8=C-N=C2); 142.5 (C2); 135.0 (C7); 131.4 (C6′); 127.7 (C5); 127.6 (C6); 126.5 (C8); 121.9 (C5=C-C=O); 113.5 (C1′); 107.0 (C5′); 101.4 (C3′); 55.7 (4′-OCH3); 47.3 (NCH2CO). MS (ESI) m/z 353. 90 [M-+H]+. Anal. Calcd. For C18H16N4O4 (352.1172): C, 61.36; H, 4.58; N, 15.90. Found: C, 61.32; H, 4.61; N, 15.93.
(E)-N'-(3-히드록시-4-메톡시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5o)
백색 고체; 수율: 31%. mp: 175.2-176.5℃. Rf = 0.58 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.91, 11.62 (~26%, 74%) (s, 1H, CONH); 9.26 (s, 1H, 3'-OH);8.36 (s, 1H, H2); 8.15 (d, J = 7.5 Hz, 1H, H5); 8.06, 7.91 (~25%, 75%) (s, 1H, N=CH); 7.85 (t, 1H, J = 7.5 Hz, H7); 7.71 (t, 1H, J = 7.5 Hz, H8);7.56 (t, 1H, J = 7.5 Hz, H6); 7.22 (s, 1H, H2'); 7.05 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H6'); 6.90 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H5'); 5.19, 4.79 (~22%, 78%) (s, 2H, NCH2CO); 3.80 (s, 3H, 4'-OCH3); 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.5 (CONH), 160.2 (C=O), 149.7 (C4′), 148.7 (C3′), 148.6 (C8=C-N=C2), 148.1 (C2), 144.4 (N=CH), 134.5 (C7), 127.2 (C6), 127.0 (C8), 126.0 (C1′), 121.7 (C6′), 121.4 (C5=C-C=O), 112.2 (C2′), 111.9 (C6′), 126.1 (C5), 55.5 (4'-OCH3), 47.8 (NCH2CO).
(E)-N'-(2,3,4-트리메톡시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5p)
백색 고체; 수율: 42%. mp: 183.5-184.6℃. Rf = 0.60 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.77, 11.48 (s, 1H, CONH); 8.40, 8.25 (~25%, 75%) (s, 1H, N=CH); 8.36 (s, 1H, H2); 8.16 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H5); 7.86 (t, J = 7.5 Hz, 1H, H7); 7.72 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H8); 7.61, 7.54 (d, J = 8.5 Hz, 1H, H6′), 7.56 (t, J = 8.0 Hz, 1H, H6); 6.93, 6.91 (d, J = 8.5 Hz, 1H, H2′); 5.20, 4.76 (~77%, 23%) (s, 2H, NCH2CO); 3.85 (s, 3H, OCH3); 3.85, 3.84 (s, 3H, OCH3); 3.79, 3.78 (s, 3H, OCH3). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 167.8 (CONH), 160.2 (C=O), 155.1 (C4′-OCH3), 152.5 (C2′-OCH3), 148.6 (C8=C-N=C2), 148.1 (C2), 141.6 (N=CH), 140.2 (C3′-OCH3), 134.5 (C7), 127.2 (C6), 127.1 (C8), 126.0 (C5), 121.4 (C5=C-C=O), 120.5 (C6′), 120.0 (C1′), 108.7 (C5′), 61.7 (C2′-OCH3), 60.5 (C3′-OCH3), 56.0 (C4′-OCH3), 46.9 (NCH2CO).
(E)-N'-(3,4,5-트리메톡시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5q)
백색 고체; 수율: 48%. mp: 182.3-183.7℃. Rf = 0.61 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.79 (s, 1H, CONH); 8.65, 8.38 (s, 1H, H2); 8.16 (dd, J = 6.8, 1.0 Hz, 1H, H5); 8.36, 7.97 (s, 1H, N=CH); 7.86 (td, J = 7.5, 2.0 Hz, 1H, H7); 7.72 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H8), 7.57 (td, J = 8.0 Hz, 2.0 Hz, 1H, H6); 7.22, 7.05 (~24%, 76%) (s, 1H, H2′); 7.05, 7.02 (~77%, 23%) (s, H, H6′); 5.24, 4.90 (~79%, 21%) (s, 2H, NCH2CO); 3.84, 3.81 (~88%, 12%) (s, 6H, C3′OCH3, C5′OCH3); 3.73, 3.71 (s, 3H, C4′OCH3). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.2 (CONH), 160.2 (C=O), 153.2 (C3′-OCH3), 153.1 (C5′-OCH3), 148.6 (C8=C-N=C2), 148.1 (C2), 144.1 (N=CH), 139.2 (C4′), 134.5 (C7), 129.4 (C1′), 127.2 (C6), 127.1 (C8), 126.0 (C5), 121.4 (C5=C-C=O), 104.4 (C6′), 104.2 (C2′), 60.2 (C5′-OCH3), 60.1 (C3′-OCH3), 55.9 (C4′-OCH3), 47.1 (NCH2CO).
(E)-N'-(3,4,5-트리메톡시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5r)
백색 고체; 수율: 32%. mp: 184.0-185.0℃. Rf = 0.55 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3506 (NH); 3163 (OH); 3059 (CH, aren); 2980 (CH, CH2); 1710 (C=O); 1608, 1558 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.85 (s, 1H, CONH); 8.40 (s, 1H, H2); 8.01 (s, 1H, N=CH); 7.77 (s, 1H, H5); 7.92 (d, 1H, J = 7.0 Hz, H7); 7.72-7.74 (m, 3H, H8, H2', H6'); 7.45-7.48 (m, 2H, H4', H5'); 5.25, 4.79 (~22%, 78%) (s, 2H, NCH2CO). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.5 (CONH), 159.7 (C=O), 149.5 (C8=C-N=C2), 147.3 (C2), 144.8 (N=CH), 135.1 (C6), 134.3 (C1′), 131.9 (C7), 130.7 (C4'), 130.0 (C5), 129.3 (C2', C6'), 127.3 (C3', C5'), 125.4 (C8), 123.1 (C5=C-C=O), 47.6 (NCH2CO). MS (ESI) m/z 340.9 [M+H]+.
(E)-2-(6-클로로-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-N'-(4-플로로벤질리덴)아세토히드라지드 (5s)
백색 고체; 수율: 38%. mp: 185.0-186.0℃. Rf = 0.67 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.89, 11.83 (~26%, 74%) (s, 1H, CONH); 8.40 (s, 1H, H2); 8.05 (s, 1H, H5); 8.01 (s, 1H, N=CH); 7.89 (d, 1H, J = 7.0 Hz, H7); 7.80 (d, 2H, J = 8.0 Hz, H2', H6'); 7.57 (d, 1H, J = 7.0 Hz, H8); 7.28 (d, 2H, J = 8.0 Hz, H3', H5'); 5.25 (s, 2H, NCH2CO). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 167.9 (CONH), 164.0 (C4′), 159.3 (C=O), 149.0 (C8=C-N=C2), 146.8 (N=CH), 143.2 (C2), 134.6 (C6), 131.4 (C7), 130.4 (C1′), 129.5 (C5), 129.1 (C2′), 129.0 (C6′), 124.9 (C8), 122.6 (C5=C-C=O), 116.0 (C3'), 115.9 (C5′), 47.1 (NCH2CO). MS (ESI) m/z 357.1 [M-H]-.
(E)-2-(6-클로로-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-N'-(4-메톡시벤질리덴)아세토히드라지드 (5t)
백색 고체; 수율: 40%. mp: 187.0-188.1℃. Rf = 0.60 (DCM : MeOH = 14 : 1). IR (KBr, cm-1): 3211 (N=C=H aromatic); 3159 (N=C-H hydrazon); 3061, 2993 (CH, aren); 2904, 2829 (CH, CH2); 1710, 1672, 1660, ,1610, 1519 (C=C, C=N, C=O); 1242 (C-OCH3). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.73, 11.70 (~26%, 74%) (s, 1H, CONH); 8.40 (s, 1H, H2); 8.16 (s, 1H, N=CH); 8.09 (s, 1H, H5); 7.88 (d, 1H, J = 8.5 Hz, H7); 7.75 (d, 1H, J = 8.5 Hz, H8); 7.66 (d, 2H, J = 9.0 Hz, H2', H6'); 7.01 (d, 1H, J = 9.0 Hz, H3'); 5.21, 4.77 (~77%, 23%) (s, 2H, NCH2CO); 3.84 (s, 3H, 4'-OCH3); 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.5 (CONH), 160.8 (C=O), 159.2 (C4'), 149.0 (C8=C-N=C2), 146.2 (N=CH), 144.2 (C2), 134.6 (C6), 131.4 (C7), 129.5 (C5), 128.4 (C2′, C6′), 126.4 (C1′), 124.9 (C8), 122.6 (C5=C-C=O), 114.3 (C3′, C5′), 55.3 (4'-OCH3), 47.1 ((NCH2CO). MS (ESI) m/z 370.9 [M+H]+. Anal. Calcd. For C18H15ClN4O3 (370.0833): C, 58.31; H, 4.08; N, 15.11. Found: C, 58.34; H, 4.11; N, 15.08.
(E)-N'-벤질리덴-2-(6-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5u)
백색 고체; 수율: 34%. mp: 180.0-181.0℃. Rf = 0.68 (DCM : MeOH = 9 : 1). IR (KBr, cm-1): 3450 (NH); 3223 (OH); 3080 (CH, aren); 2956 (CH, CH2); 1732 (C=O); 1608, 1570 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.88, 11.80 (~26%, 74%) (s, 1H, CONH); 8.31 (s, 1H, H2); 8.24, 8.08 (~22%, 78%) (s, 1H, N=CH); 7.96 (s, 1H, H5); 7.69 (d, 1H, J = 8.5 Hz, H7); 7.75 (d, 2H, J = 8.0 Hz, H2', H6'); 7.62 (d, 1H, J = 8.5 Hz, H8); 7.43-7.49 (m, 3H, H3', H4', H5'); 5.23, 4.79 (~78%, 22%) (s, 2H, NCH2CO); 2.47 (s, 3H, 6-CH3). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.3 (CONH), 160.2 (C=O), 147.8 (C8=C-N=C2), 146.1 (C2), 144.3 (N=CH), 138.9 (C6), 135.7 (C7), 133.9 (C1′), 130.1 (C4′), 128.9 (C2′, C6′), 127.1 (C5), 126.9 (C3′, C5′), 125.3 (C8), 121.2 (C5=C-C=O), 47.0 (NCH2CO), 20.8 (6-CH3). MS (ESI) m/z 321.0 [M+H]+. Anal. Calcd. For C16H18N4O2 (320.1273): C, 67.49; H, 5.03; N, 17.49. Found: C, 58.34; H, 4.11; N, 15.08.
(E)-2-(6-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-N'-(2-니트로벤질리덴)아세토히드라지드 (5v)
백색 고체; 수율: 37%. mp: 182.2-183.4℃. Rf = 0.72 (DCM : MeOH = 9 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 12.12, 12.06 (~26%, 74%) (s, 1H, CONH); 8.63, 8.44 (~23%, 77%) (s, 1H, N=CH); 8.30 (s, 1H, H2); 7.94 (s, 1H, H5); 8.12 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H6'); 8.08 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H3'); 7.80 (m, 1H, H5'); 7.69 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H7); 7.67 (m, 1H, H4'); 7.62 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H8); 5.20, 4.79 (~77%, 23%) (s, 2H, NCH2CO); 2.50 (s, 3H, 6-CH3). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.6 (CONH), 160.1 (C=O), 148.1 (C8=C-N=C2), 147.6 (C2'), 146.0 (C2), 143.0 (N=CH), 136.6 (C6), 135.7 (C7), 133.6 (C5′), 130.7 (C4′), 128.3 (C6′), 128.0 (C1′), 127.1 (C5), 125.3 (C8), 124.6 (C3'), 121.2 (C5=C-C=O), 46.8 (NCH2CO), 20.8 (6-CH3).
(E)-N'-(4-플로로벤질리덴)-2-(6-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5w)
백색 고체; 수율: 42%. mp: 183.2-184.5℃. Rf = 0.66 (DCM : MeOH = 14 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.87, 11.80 (~25%, 75%) (s, 1H, CONH); 8.31 (s, 1H, H2); 8.24, 8.07 (~22%, 78%) (s, 1H, N=CH); 7.95 (s, 1H, H5); 7.77-7.82 (m, 2H, H2', H6'); 7.68 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H7); 7.62 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H8); 7.29 (t, J = 8.0 Hz, 2H, H3', H5'); 5.22, 4.78 (~78%, 22%) (s, 2H, NCH2CO); 2.46 (s, 3H, 6-CH3). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.2 (CONH), 164.1 (C4′), 160.2 (C=O), 147.7 (C8=C-N=C2), 146.1 (C2), 143.1 (N=CH), 136.8 (C6), 135.7 (C7), 130.5 (C1′), 129.1 (C2′, C6′), 127.1 (C5), 125.3 (C8), 121.2 (C5=C-C=O), 116.0 (C3′, C5′), 46.9 (NCH2CO), 20.8 (6-CH3). MS (ESI) m/z 337.1 [M-H]-.
(E)-N'-(4-브로모벤질리덴)-2-(6-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5y)
백색 고체; 수율: 28%. mp: 182.6-183.5℃. Rf = 0.70 (DCM : MeOH = 9 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.92, 11.85 (~22%, 78%) (s, 1H, CONH); 8.29 (s, 1H, H2); 8.20, 8.03 (~23%, 77%) (s, 1H, N=CH); 7.94 (s, 1H, H5); 7.69 (d, 1H, J = 8.5 Hz, H7); 7.65 (d, J = 8.5Hz, 4H, H3', H5', H2', H6'); 7.60 (d, 1H, J = 8.5 Hz, H8); 5.20, 4.76 (~77%, 23%) (s, 2H, NCH2CO); 2.45(s, 3H, 6-CH3). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.3 (CONH), 160.1 (C=O), 147.7 (C8=C-N=C2), 146.1 (C2), 143.0 (N=CH), 136.8 (C6), 135.7 (C7), 133.2 (C1′), 131.8 (C3′, C5′), 128.8 (C2′, C6′), 127.1 (C5), 125.3 (C8), 123.3 (C4′), 121.2 (C5=C-C=O), 46.9 (NCH2CO), 20.8 (6-CH3).
(E)-N'-(4-메톡시벤질리덴)-2-(6-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5x)
백색 고체; 수율: 40%. mp: 186.5-187.5℃. Rf = 0.70 (DCM : MeOH = 9 : 1). IR (KBr, cm-1): 3460 (NH); 3188 (OH); 3093 (CH, aren); 2839 (CH, CH2); 1772 (C=O); 1608, 1519 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.74, 11.67 (~22%, 78%) (s, 1H, CONH); 8.31 (s, 1H, H2); 8.18, 8.01 (~22%, 78%) (s, 1H, N=CH); 7.96 (s, 1H, H5); 7.01 (d, J = 8.5Hz, 2H, H3', H5'); 7.69 (d, 1H, J = 8.5 Hz, H7); 7.67 (d, J = 8.5Hz, 2H, H2', H6');7.62 (d, 1H, J = 8.5 Hz, H8); 5.20, 4.77 (~77%, 23%) (s, 2H, NCH2CO); 3.81 (s, 3H, 4'-OCH3); 2.51 (s, 3H, 6-CH3). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.0 (CONH), 160.8 (C4′), 160.2 (C=O), 147.8 (C8=C-N=C2), 146.1 (C2), 144.1 (N=CH), 136.8 (C6), 135.7 (C7), 128.5 (C2′, C6′), 127.1 (C5), 126.5 (C1′), 125.3 (C8), 121.2 (C5=C-C=O), 114.3 (C3′, C5′), 55.3 (4'-OCH3), 46.9 (NCH2CO), 20.8 (6-CH3). MS (ESI) m/z 351.0 [M+H]+. Anal. Calcd. For C19H18N4O2 (350.1379): C, 65.13; H, 5.18; N, 15.99. Found: C, 65.15; H, 5.15; N, 15.62.
(E)-N'-(4-(디메틸아미노)벤질리덴)-2-(6-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (5z)
연한 갈색 고체; 수율: 26%. mp: 186.0-187.0℃. Rf = 0.68 (DCM : MeOH = 9 : 1). IR (KBr, cm-1): 3439 (NH); 3348 (OH); 3122 (CH, aren); 2791 (CH, CH2); 1735 (C=O); 1610, 1537 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.54, 11.49 (~27%, 73%) (s, 1H, CONH); 8.29 (s, 1H, H2); 8.07, 7.91 (~23%, 77%) (s, 1H, N=CH); 7.94 (s, 1H, H5); 7.67 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H7); 7.61 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H8); 7.53 (d, 2H, J = 8.5 Hz, H2, H6'); 6.74 (d, 2H, J = 8.5 Hz, H3, H5'); 5.16, 4.72 (~77%, 23%) (s, 2H, NCH2CO);3.97 (s, 6H, 4'-N(CH3)2); 2.42 (s, 3H, 6-CH3). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 167.6 (CONH), 160.2 (C=O), 151.4 (C4′), 148.8 (C8=C-N=C2), 146.1 (C2), 145.0 (N=CH), 136.8 (C6), 135.7 (C7), 128.5 (C1′), 128.2 (C2′, C6′), 127.0 (C5), 125.3 (C8), 121.3 (C5=C-C=O), 111.8 (C3′, C5′), 46.8 (NCH2CO). 20.8 (6-CH3, 4'-N(CH3)2). MS (ESI) m/z 364.0 [M+H]+. Anal. Calcd. For C20H21N5O2 (363.1695): C, 66.10; H, 5.82; N, 19.27. Found: C, 66.14; H, 5.80; N, 19.30.
(E)-N'-(퓨란-2-일메틸렌)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (6a)
연한 갈색 고체; 수율: 44%. mp: 181.0-182.3℃. Rf = 0.68 (DCM : MeOH = 9 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.77 (s, 1H, CONH); 8.37, 8.36 (s, 1H, H2); 8.17 (dd, J = 8.0 Hz, 1.0 Hz, 1H, H5); 8.14, 7.96 (s, 1H, N=CH), 8.0 (dd, J = 13.5 Hz, 1.5 Hz, 1H, H5′); 7.87 (td, J = 8.5 Hz, 1.5 Hz, 1H, H7); 7.74 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H8), 7.58 (td, J = 8.0 Hz, 1.0 Hz, 1H, H6); 6.96, 6.96 (d, J = 3.5 Hz, 1H, H3′); 6.65 (dd, J = 3.5 Hz, 1.5 Hz, 1H, H4′); 5.16, 4.79 (~77%, 23%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.1 (CONH), 160.3 (C=O), 148.9 (C1′), 148.6 (C8=C-N=C2), 148.1 (C2), 145.2 (C5′), 134.5 (C7), 134.4, 127.2 (C6), 127.1 (C8), 126.0 (C5), 121.4 (C5=C-C=O), 113.9 (C3′), 112.2 (C4′), 46.9 (NCH2CO). Anal. Calcd. For C15H12N4O3 (296.0909): C, 60.81; H, 4.08; N, 18.91. Found: C, 60.85; H, 4.11; N, 18.94.
(E)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-N'-(시오펜-2-일메틸렌)아세토히드라지드 (6b)
백색 고체; 수율: 26%. mp: 182.1-183.6℃. Rf = 0.72 (DCM : MeOH = 9 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.84, 11.81 (s, 1H, CONH); 8.45, 8.26 (~25%, 75%) (s, 1H, N=CH); 8.37 (s, 1H, H2); 8.17 (dd, J = 8.0 Hz, 1.5 Hz, 1H, H5); 7.89 (td, J = 8.0 Hz, 1.5 Hz, 1H, H7); 7.74 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H8); 7.69 (d, J = 5.5 Hz, 1H, H5′); 7.60 (td, J = 8.0 Hz, 1.0 Hz, 1H, H6'); 7.50 (dd, J = 8.5 Hz, 1.0 Hz, 1H, H3′); 7.17 (dd, J = 5.0 Hz, 3.5 Hz, 1H, H4′); 5.15, 4.78 (~75%, 25%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 167.9 (CONH); 160.3 (C=O); 148.6 (C8=C-N=C2); 148.1 (C2); 139.5 (N=CH); 138.5 (C2′); 134.5 (C7); 130.9 (C3′); 128.8 (C5′); 128.0 (C4′); 127.2 (C6); 127.1 (C8); 126.0 (C5); 121.5 (C5=C-C=O); 46.8 (NCH2CO). Anal. Calcd. For C15H12N4O2S (312.0681): C, 57.68; H, 3.87; N, 17.94. Found: C, 57.64; H, 3.91; N, 17.97.
(E)-N'-((1-메틸-1H-피롤-2-일)메틸렌)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (6c)
백색 고체; 수율: 58%. mp: 184.5-185.2℃. Rf = 0.70 (DCM : MeOH = 9 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.54, 11.48 (~18%, 82%) (s, 1H, CONH); 8.36 (s, 1H, H2); 8.17 (dd, J = 8.0 Hz, 1.0 Hz, 1H, H5); 7.97 (s, 1H, N=CH); 7.88 (td, J = 8.0 Hz, 1.5 Hz, 1H, H7); 7.73 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H8); 7.58 (td, J = 8.0 Hz, 1.0 Hz, 1H, H6'); 7.00 (s, 1H, H5′); 6.51 (dd, J = 3.5 Hz, 1.5 Hz, 1H, H3′), 6.11 (dt, J = 3.5 Hz, 2.5 Hz, 1H, H4′); 5.15, 4.76 (~88%, 12%) (s, 2H, NCH2CO); 3.89, 3.82 (~82%, 18%) (s, 3H, CH3). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.0 (CONH); 160.8 (C=O); 149.1 (C8=C-N=C2); 148.6 (C2); 138.1 (N=CH); 134.9 (C7); 128.8 (C2′); 127.7 (C5′); 127.6 (C6); 127.2 (C8); 126.5 (C5); 121.9 (C5=C-C=O); 115.8 (C3′); 108.6 (C4′); 47.4 (NCH2CO); 37.0 (CH3). Anal. Calcd. For C16H15N5O2 (309.1226): C, 62.13; H, 4.89; N, 22.64. Found: C, 62.09; H, 4.92; N, 22.67.
(E)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-N'-(피리딘-2-일메틸렌)아세토히드라지드 (6d)
백색고체; 수율: 36%. mp: 183.0-184.0℃. Rf = 0.34 (DCM : MeOH = 9 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 12.11, 12.03 (~20%, 80%) (s, 1H, CONH); 8.64 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H6′); 8.40 (s, 1H, H2); 8.18 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H5); 8.26, 8.12 (~20%, 80%) (s, 1H, N=CH); 8.03 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H3′); 7.93-7.86 (m, 2H, H7, H4′); 7.74 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H8); 7.60 (td, J = 7.5 Hz, 2.0 Hz, 1H, H6); 7.46 (td, J = 5.0 Hz, 1.0 Hz, 1H, H5′), 5.28, 4.83 (~81%, 19%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 169.0 (CONH); 160.8 (C=O); 153.2 (C2′); 150.1 (C6′); 149.0 (C8=C-N=C2); 148.6 (C2); 145.2 (N=CH); 137.4 (C4′); 135.1 (C7); 127.7 (C6); 127.6 (C8); 126.5 (C5); 125.0 (C5′); 121.9 (C5=C-C=O); 120.3 (C3′); 47.4 (NCH2CO). Anal. Calcd. For C16H13N5O2 (307.1069): C, 62.53; H, 4.26; N, 22.79. Found: C, 62.57; H, 4.23; N, 22.82.
(E)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-N'-(피리딘-3-일메틸렌)아세토히드라지드 (6e)
백색 고체; 수율: 39%. mp: 182.5-183.6℃. Rf = 0.36 (DCM : MeOH = 9 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 12.00 (s, 1H, CONH); 8.91, 8.86 (~80%, 20%) (d, J = 2.0 Hz, 1H, H2′); 8.63, 8.61 (~88%, 12%) (dd, J = 5.0 Hz, 1.5 Hz, 1H, H6′); 8.39, 8.31 (~83%, 17%) (s, 1H, H2); 8.18 (dd, J = 8.0 Hz, 1.5 Hz, 2H, H5, H4′); 8.12 (s, 1H, N=CH); 7.89 (td, J = 8.0 Hz, 1.5 Hz, 1H, H7); 7.74 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H8); 7.60 (td, J = 8.0 Hz, 2.0 Hz, 1H, H6); 7.51 (dd, J = 8.0 Hz, 4.5 Hz, 1H, H5′), 5.27, 4.82 (~79%, 21%) (s, 2H, NCH2CO). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.9 (CONH); 160.7 (C=O); 151.1 (C4′); 149.3 (C2′, C8=C-N=C2); 148.6 (C2); 142.0 (N=CH); 135.0 (C6'); 133.9 C7); 130.3 (C1'); 127.7(C6); 127.6 (C8); 126.5 (C5); 124.4 (C5′); 121.9 (C5=C-C=O); 47.5 (NCH2CO). Anal. Calcd. For C16H13N5O2 (307.1069): C, 62.53; H, 4.26; N, 22.79. Found: C, 62.50; H, 4.27; N, 22.74.
(E)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-N'-(피리딘-4-일메틸렌)아세토히드라지드 (6f)
백색 고체; 수율: 27%. mp: 181.2-182.5℃. Rf = 0.40 (DCM : MeOH = 9 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 12.14, 12.08 (~25%, 75%) (s, 1H, CONH); 8.64 (d, 2H, J = 5.0 Hz, H2', H6'); 8.30 (s, 1H, H2); 8.15 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H5); 8.05 (s, 1H, N=CH); 7.87 (t, 1H, J = 8.0 Hz, H7); 7.72 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H8); 7.69 (d, 2H, J = 5.0 Hz, H2', H6'); 7.57 (t, 1H, J = 8.0 Hz, H6); 5.26, 4.81 (~75%, 25%) (s, 2H, NCH2CO). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.6 (CONH), 160.2 (C=O), 150.2 (C3′, C5′), 148.5 (C8=C-N=C2), 148.4 (C2), 144.4 (N=CH), 141.9 (C1'), 134.5 (C7), 127.2 (C6), 127.1 (C8), 126.0 (C5), 121.4 (C5=C-C=O), 120.8 (C2′, C6′), 46.9 (NCH2CO). Anal. Calcd. For C16H13N5O2 (307.1069): C, 62.53; H, 4.26; N, 22.79. Found: C, 62.51; H, 4.28; N, 22.76.
(E)-N'-((5-메틸퓨란-2-일)메틸렌)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (6g)
백색 고체; 수율: 39%. mp: 180.9-181.7℃. Rf = 0.70 (DCM : MeOH = 9 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.72, 11.66 (~25%, 75%) (s, 1H, CONH); 8.35 (s, 1H, H2); 8.15 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H5); 8.01, 7.86 (~22%, 78%) (s, 1H, N=CH); 7.86 (t, 1H, J = 8.0 Hz, H7); 7.72 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H8); 7.54 (t, 1H, J = 8.0 Hz, H6); 6.83 (d, 1H, J = 3.5 Hz, H4'); 6.27 (d, 1H, J = 3.5 Hz, H3'); 5.14, 4.76 (~75%, 25%) (s, 2H, NCH2CO); 2.36 (s, 3H, 2'-CH3). 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 167.9 (CONH), 160.2 (C=O), 154.7 (C3′), 148.6 (C8=C-N=C2), 148.1 (C2), 147.5 (C1′), 136.9 (N=CH), 134.5 (C7), 127.2 (C6), 127.1 (C8), 126.0 (C5), 121.4 (C5=C-C=O), 115.7 (C5′), 108.6 (C4′), 46.8 (NCH2CO), 13.5 (3′-CH3). Anal. Calcd. For C16H14N4O3 (310.1066): C, 61.93; H, 4.55; N, 18.06. Found: C, 61.97; H, 4.59; N, 18.09.
(E)-N'-(2-옥소인돌린-3-일리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 (7a)
연한 노란색 고체; 수율: 44%. mp: 183.3-184.0℃. Rf = 0.72 (DCM : MeOH = 9 : 1). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 12.71 (s, 1H, NH-isatin); 11.30 (s, 1H, CONH); 8.40 (s, 1H, H2); 8.16 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H5); 7.87 (t, 1H, J = 8.0 Hz, H7); 7.73 (d, 1H, J = 8.0 Hz, H8); 7.59 (d, 1H, J = 7.5 Hz, H7'); 7.57 (t, 1H, J = 8.0 Hz, H6); 7.41 (t, 1H, J = 7.5 Hz, H5'); 7.12 (t, 1H, J = 7.0 Hz, H6'); 6.97 (d, 1H, J = 7.5 Hz, H4'); 5.37 (s, 2H, NCH2CO); 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 168.9 (CONH), 162.4 (C2'=O),160.3 (C4=O), 148.3 (C8=C-N=C2), 148.0 (C2), 142.7 (C7'-C-NH), 135.4 (N=CH), 134.6 (C7, C2'), 131.9 (C4'), 127.3 (C6, C6'), 126.0 (C5, C8), 122.6 (C5'), 121.3 (C5=C-C=O), 120.8 (C3'-C-C4'), 111.2 (C7'), 46.5 (NCH2CO). Anal. Calcd. For C18H13IN5O3 (347.1018): C, 62.24; H, 3.77; N, 20.16. Found: C, 62.29; H, 3.81; N, 20.19.
(E)-2-(6-요오도-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-N'-(2-옥소인돌린-3-일리덴)아세토히드라지드(7b)
연한 노란색 고체; 수율: 57%. mp: 183.7-184.5℃. Rf = 0.73 (DCM : MeOH = 9 : 1). IR (KBr, cm-1): 3450 (NH); 3184 (OH); 3049 (CH, aren); 2902 (CH2); 1724 (C=O); 1685, 1523 (C=C). 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 11.71 (s, 1H, NH-isatin); 10.87 (s, 1H, CONH); 8.43 (s, 2H, H2, H5); 8.17 (d, 2H, J = 8.25 Hz, H7, H8); 7.53 (d, 1H, J = 8.5 Hz, H7'); 7.40 (d, 1H, J = 6.85 Hz, H5'); 7.04 (br, 1H, H6'); 6.92 (d, 1H, J = 7.95 Hz, H4'); 5.30 (s, 2H, NCH2CO); 13C-NMR (125 MHz, DMSO-d6, ppm): δ 170.8 (CONH), 164.3 (C2'=O),158.9 (C4=O), 149.1 (C8=C-N=C2), 147.3 (C2), 144.0 (C7), 143.0 (C7'-C-NH); 134.3 (N=CH, C5), 132.9 (C6'), 129.5 (C4', C8), 126.2 (C5), 123.1 (C5'), 121.8 (C5=C-C=O), 115.1 (C3'-C-C4'), 110.7 (C7'), 92.3 (C6), 47.5 (NCH2CO). Anal. Calcd. For C16H12IN5O3 (363.1695): C, 66.10; H, 5.82; N, 19.27. Found: C, 66.14; H, 5.80; N, 19.30.
<실험예>
1. 세포독성 분석
합성된 화합물의 독성은 SW620(대장암), PC3(전립선암) 및 NCI-H23(폐암)를 이용하여 평가하였다. 상기 세포주는 한국생명공학연구소(Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology, KRIBB)에 있는 암세포 은행으로부터 구입하였다. 세포 배양에 사용된 배지, 혈청 및 다른 시약들은 GIBCO Co. Ltd. (Grand Island, New York, USA)로부터 구입하였다. 상기 세포들을 DMEM에서 배양하였다. 그 다음, 상기 세포들을 트립신처리 후 3 × 104 cells/mL의 농도로 현탁시켰다. 0일 째에, 96-웰 플레이트의 각각의 웰에 180 μL의 세포 현탁액을 시딩하였다. 그 다음, 상기 플레이트를 5% CO2를 함유하는 인큐베이터에서 24시간 동안 37℃에서 배양하였다. 화합물을 처음 디메틸 설폭사이드(DMSO)에 용해시키고 희석하여 사용하였다. 상기 실시예에서 제조된 각각의 화합물 샘플 20 μL을 세포 현탁액이 시딩된 96-웰 플레이트의 각 웰에 첨가하고 농도를 달리하여 24시간 동안 배양하였다. 상기 플레이트를 48시간 동안 추가 배양하였다. 상기 화합물의 세포독성은 공지된 문헌[17]에 기재된 내용에 약간의 변형을 가한 방법[18-20]을 통해 측정하였다. IC50 값은 Probits 방법[21]에 따라 산출하였다. 각 화합물에 대해 측정한 값은 3회의 독립적 측정결과의 평균값으로 나타내었다(SD≤10%). 상기 각 화합물 30㎍/mL 존재하에서 SW620 암 세포의 cell growth percentages(CGP)를 측정하고, 5-플루오로우라실을 양성 대조군으로 사용하여 그 결과를 하기 표 1 및 도 3에 나타내었다.
Cpd R R’/Ar CGP (%)1 Cpd R R’/Ar CGP (%)1
5a -H H 41.70 ± 4.89 5r 6-Cl -H 78.58 ± 0.81
5b -H 2-Cl 3.88 ± 6.23 5s 6-Cl 4-F 86.71 ± 5.86
5c -H 2-NO2 79.18 ± 3.46 5t 6-Cl 4-OCH3 -4.75 ± 1.51
5d -H 3-Cl 83.23 ± 4.86 5u 6-CH3 -H 9.91 ± 2.26
5e -H 4-Cl 39.09 ± 4.17 5v 6-CH3 2-NO2 33.21 ± 7.89
5f -H 4-F 65.77 ± 7.72 5w 6-CH3 4-F 85.41 ± 2.89
5g -H 4-Br 54.46 ± 3.97 5y 6-CH3 4-Br 51.05 ± 7.38
5h -H 2-OH 35.50 ± 5.15 5x 6-CH3 4-OCH3 -13.24 ± 3.12
5i -H 4-OH 67.09 ± 8.29 5z 6-CH3 4-(NCH3)2 -12.43 ± 4.66
5j -H 4-OCH3 91.40 ± 9.78 6a -H 83.73 ± 7.37
5k -H 2,3-(OH)2 33.40±4.15 6b -H 84.82 ± 7.72
5l -H 2,4-(OH)2 10.38±2.44 6c -H 69.25 ± 4.17
5m -H 2,5-(OH)2 74.70±6.61 6d -H 82.31 ± 4.31
5n -H 2-OH-4-OCH3 2.81±3.61 6e -H 84.00 ± 6.92
5o -H 3-OH-4-OCH3 78.68 ± 8.05 6f -H 77.79 ± 7.49
5p -H 2,3,4-(OCH3)3 55.67 ± 6.37 6g -H 88.32 ± 5.28
5q -H 3,4,5-(OCH3)3 37.76 ± 7.16 7a -H -H 85.58 ± 6.17
5-FU 2 17.35 ± 9.01 7b 6-I -H -1.99 ± 5.14
상기 표 1로부터 알 수 있듯이, 상기 실시예에서 합성된 본 발명에 따른 화합물들 중 5b, 5l, 5n, 5t, 5u, 5x, 5z, 7b에서 SW620에 대한 세포독성에서 우수한 항암활성을 나타내었다. 이에, 상기 8개 화합물을 SW620, PC-3 및 NCI-H23에 대한 IC50값을 측정하여 하기 표 2에 나타내었다.
Cpd code
R
R’/Ar
MW
LogP 1 		Cytotoxicity (IC50, 2 mM)/Cell lines 3
SW620 PC3 NCI-H23
5b -H 2-Cl 340.76 1.52 3.14±0.56 3.99±0.15 4.49±0.24
5l -H 2,4-(OH)2 338.32 0.63 9.43±0.27 16.52±0.24 18.97±3.43
5n -H 2-OH-4-OCH3 352.34 1.19 6.10±0.68 8.46±1.28 9.85±1.28
5t 6-Cl 4-OCH3 370.79 1.60 2.45±0.03 3.10±0.32 3.34±0.32
5u 6-CH3 -H 320.35 1.42 3.52±0.03 5.78±0.06 9.77±0.31
5x 6-CH3 4-OCH3 350.37 1.50 4.99±0.37 4.22±0.63 4.05±0.31
5z 6-CH3 4-(NCH3)2 363.41 1.60 4.68±0.30 4.60±0.33 3.58±0.11
7b 6-I -H 473.22 1.21 3.97±0.32 3.25±0.15 2.81±0.17
5-FU 4 130.08 -0.81 8.84±1.92 13.61±0.46 13.45±3.92
상기 표 2에서 나타낸 바와 같이 5b, 5l, 5n, 5t, 5u, 5x, 5z, 7b 화합물은 모두 5-FU보다 우월한 항암활성을 가지는 것을 알 수 있고, 특히, 5t의 경우 5-FU에 비해 3배에서 5배 정도 낮은 IC50값을 가지는 것을 알 수 있다.
2. 카스파제-3 활성화 분석
U937 세포 (5 × 105 cells/well)을 6-웰 플레이트에 플레이팅하고 하룻밤 동안 안정화시켰다. 세포를 PAC-1 또는 본 발명에 따른 화합물 중에서 7b 및 5n (0.1% 디메틸 설폭사이드 내 50 μM)로 처리하였다. 인큐베이션에서 24시간 후, 세포를 모아 PBS로 2회 세척하였다. 상기 세포를 4℃에서 10분 동안 급랭 세포 용해 버퍼 50 μL로 용해시켰다. 세포 용해물 (200 μg/100 μL/웰)을 Ac-DEVD-pNA (200 μM)를 이용하여 혼합하였다. OD는 405 nm에서 12 시간 동안 매 30분 마다 측정하였다.
그 결과, 본 발명에 따른 화합물 7b 및 5n의 경우 PAC-1에 비해 현저히 우수한 카스파제 활성을 나타내는 것으로 확인되었다 (도 4).
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (7)

  1. 하기의 화학식 1, 2 또는 3으로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염으로,
    [화학식 1]
    Figure 112019125161763-pat00026

    [화학식 2]
    Figure 112019125161763-pat00027

    [화학식 3]
    Figure 112019125161763-pat00028

    (상기 화학식 1 내지 3에 있어서, 상기 R은 수소, 할로겐 또는 CH3이고, 상기 R'는 수소, 할로겐, OH, OCH3, NO2 또는 NCH3이며, 상기 화학식 2에 있어서 Ar은
    Figure 112019125161763-pat00029
    ,
    Figure 112019125161763-pat00030
    ,
    Figure 112019125161763-pat00031
    ,
    Figure 112019125161763-pat00032
    ,
    Figure 112019125161763-pat00033
    ,
    Figure 112019125161763-pat00034
    또는
    Figure 112019125161763-pat00035
    이다.)
    상기 화학식 1은 (E)-N'-(2-클로로벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드
    (E)-N'-(2,4-디히드록시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드
    (E)-N'-(2-히드록시-4-메톡시벤질리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드
    (E)-2-(6-클로로-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-N'-(4-메톡시벤질리덴)아세토히드라지드
    (E)-N'-벤질리덴-2-(6-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드
    (E)-N'-(4-메톡시벤질리덴)-2-(6-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드 또는
    (E)-N'-(4-(디메틸아미노)벤질리덴)-2-(6-메틸-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)아세토히드라지드
    인 것을 특징으로 하는 것인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 할로겐은 플루오르(F), 염소(Cl), 브롬(Br), 요오드(I)인 것을 특징으로 하는 것인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 화학식 3은
    (E)-2-(6-요오도-4-옥소퀴나졸린-3(4H)-일)-N'-(2-옥소인돌린-3-일리덴)아세토히드라지드
    인 것을 특징으로 하는 것인, 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 것인, 항암제 조성물.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 암은 유방암, 폐암, 위암, 간암, 혈액암, 뼈암, 췌장암, 피부암, 두경부암, 피부 또는 안구 흑색종, 자궁육종, 난소암, 직장암, 항문암, 대장암, 난관암, 자궁내막암, 자궁경부암, 소장암, 내분비암, 갑상선암, 부갑상선암, 신장암, 연조직종양, 요도암, 전립선암, 기관지암, 또는 골수암인 것을 특징으로 하는 것인, 항암제 조성물.
  6. 제4항에 있어서,
    상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염은 프로카스파제-3의 활성화를 통해 카스파제-3으로의 전환을 유도 하는 것을 특징으로 하는 것인, 항암제 조성물.
  7. 제4항에 있어서,
    상기 항암제 조성물은 (i) 상기 화학식 1, 2 또는 3으로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 약제학적 유효량; 및 (ⅱ) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물의 형태로 제공되는 것을 특징으로 하는 것인, 항암제 조성물.

KR1020180059458A 2018-05-25 2018-05-25 프로카스파제-3의 활성화제로서 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물 KR102091819B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180059458A KR102091819B1 (ko) 2018-05-25 2018-05-25 프로카스파제-3의 활성화제로서 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020180059458A KR102091819B1 (ko) 2018-05-25 2018-05-25 프로카스파제-3의 활성화제로서 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20190134169A KR20190134169A (ko) 2019-12-04
KR102091819B1 true KR102091819B1 (ko) 2020-03-23

Family

ID=69004540

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020180059458A KR102091819B1 (ko) 2018-05-25 2018-05-25 프로카스파제-3의 활성화제로서 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102091819B1 (ko)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20200124357A (ko) * 2019-04-23 2020-11-03 충북대학교 산학협력단 3,4-디히드로-4-옥소퀴나졸린계 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR20210052646A (ko) * 2019-10-29 2021-05-11 충북대학교 산학협력단 신규한 (z)-n'-(2-옥소인돌린-3-일리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4h)-일)아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102428024B1 (ko) * 2020-06-11 2022-08-03 충북대학교 산학협력단 프로카스파제-3의 활성화제로서 신규한 (e)-n-아릴리덴-1-(4-클로로벤질)-1h-인돌-3-카보하이드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR102617885B1 (ko) * 2021-05-07 2023-12-27 충북대학교 산학협력단 신규한 (e)-n'-((1-(4-클로로벤질)-1h-인돌-3-일)메틸렌)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4h)-일)아세토히드라지드 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR102552698B1 (ko) * 2021-05-07 2023-07-06 충북대학교 산학협력단 신규한 (e)-n'-(3-알릴-2-히드록시)벤질리덴-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4h)-일)아세토히드라지드 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR20230023501A (ko) 2021-08-10 2023-02-17 충북대학교 산학협력단 신규한 옥소인돌린 기반 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
- N. M. Boshta et al., Monatshefte für Chemie - Chemical Monthly, 2016, 147(11), pp.2031-2042 (2016.11.)*
J. R. Mali et al., Tetrahedron Letters, 2009, 50(35), pp.5025-5027 (2009.06.21.)*

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20200124357A (ko) * 2019-04-23 2020-11-03 충북대학교 산학협력단 3,4-디히드로-4-옥소퀴나졸린계 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR102233956B1 (ko) * 2019-04-23 2021-03-31 충북대학교 산학협력단 3,4-디히드로-4-옥소퀴나졸린계 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR20210052646A (ko) * 2019-10-29 2021-05-11 충북대학교 산학협력단 신규한 (z)-n'-(2-옥소인돌린-3-일리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4h)-일)아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR102415890B1 (ko) * 2019-10-29 2022-07-01 충북대학교 산학협력단 신규한 (z)-n'-(2-옥소인돌린-3-일리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4h)-일)아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
KR20190134169A (ko) 2019-12-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102091819B1 (ko) 프로카스파제-3의 활성화제로서 신규한 퀴나졸린 기반 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
JP6141568B1 (ja) 新規なピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン化合物又はその塩
FI86543C (fi) Foerfarande foer framstaellning av farmaceutiskt aktiva distamycin a-analoger.
JP6830438B2 (ja) デングウィルス複製阻害剤としてのインドール誘導体
KR101335746B1 (ko) 이치환된 프탈라진 헷지호그 경로 길항제
TW201619130A (zh) 作為登革熱病毒複製抑制劑之單－或二－取代吲哚
JP2001504109A (ja) ベンゾ複素環ジスタマイシン誘導体、それらを製造する方法および抗腫瘍および抗ウイルス剤としてのそれらの用途
Ho et al. A highly HDAC6-selective inhibitor acts as a fluorescent probe
TW200829556A (en) Substituted pyrazoles, compositions containing same, manufacturing process therefor and use thereof
Song et al. Discovery of bazedoxifene analogues targeting glycoprotein 130
Sztanke et al. Synthesis, structure elucidation and in vitro anticancer activities of novel derivatives of diethyl (2E)-2-[(2E)-(1-arylimidazolidin-2-ylidene) hydrazono] succinate and ethyl (4-oxo-8-aryl-4, 6, 7, 8-tetrahydroimidazo [2, 1-c][1, 2, 4] triazin-3-yl) acetate
JP5802872B2 (ja) 縮合ジイミダゾジアゼピン化合物並びにその使用及び製造方法
KR102233956B1 (ko) 3,4-디히드로-4-옥소퀴나졸린계 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR102063286B1 (ko) Hdac 억제제로서 신규한 퀴나졸린-4(3h)-원 기반 하이드록삼산 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
US9944641B2 (en) Isoquinolinone derivatives useful in the treatment of cancer
CN108069942A (zh) 苯酞吡唑酮类偶联物、其制备方法和用途
KR20210134306A (ko) 아크릴-함유 핵 수출 조절제들 및 이들의 용도들
KR102086565B1 (ko) (E)-N&#39;-아릴리덴-2-(3-옥소-2,3-디히드로-4H-벤조[b][1,4]옥사진-4-일)아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR102415890B1 (ko) 신규한 (z)-n&#39;-(2-옥소인돌린-3-일리덴)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4h)-일)아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR102428024B1 (ko) 프로카스파제-3의 활성화제로서 신규한 (e)-n-아릴리덴-1-(4-클로로벤질)-1h-인돌-3-카보하이드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
Venkatesan et al. Microwave-assisted synthesis and evaluation of antibacterial activity of 2, 2'-(naph-thalene-2, 7-diylbis (oxy)) bis (N'-substituted acetohydrazide) derivatives
KR102617885B1 (ko) 신규한 (e)-n&#39;-((1-(4-클로로벤질)-1h-인돌-3-일)메틸렌)-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4h)-일)아세토히드라지드 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR102552698B1 (ko) 신규한 (e)-n&#39;-(3-알릴-2-히드록시)벤질리덴-2-(4-옥소퀴나졸린-3(4h)-일)아세토히드라지드 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
KR20230023501A (ko) 신규한 옥소인돌린 기반 아세토히드라지드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물
WO2018159613A1 (ja) ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン化合物を用いた抗腫瘍効果増強剤

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant