KR102073944B1

KR102073944B1 - 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체 추출물을 함유하는 피부 외용제 또는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102073944B1
Application number: KR1020120150542A
Authority: KR
Inventors: 박상훈; 박성민; 박지영
Original assignee: 주식회사 코씨드바이오팜
Priority date: 2012-12-21
Filing date: 2012-12-21
Publication date: 2020-02-06
Also published as: KR20140081983A

Abstract

본 발명은 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로는 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액을 0.001~90.0중량%를 함유하는 것을 특징으로 하는 미백효과, 아토피 개선 효과 및 피부 자극완화효과가 우수한 기능성 피부 외용제 또는 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체 추출물을 함유하는 피부 외용제 또는 화장료 조성물 {A skin-care agent or cosmetics containig Pisolithus tinctorius fruit body extract or Pisolithus tinctorius mycelium extract}

본 발명은 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체 추출물을 함유하는 피부 외용제 또는 화장료 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는 모래밭버섯 자실체 추출물로부터 수득한 여과액 또는 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액을 함유하는 피부 외용제 또는 화장료 조성물에 관한 것이다.

멜라닌은 색소 세포 내에 존재하는 티로시나제의 작용에 의해 타이로신으로부터 도파(dopa), 도파퀴논(dopaquinone)으로 변환되어 도파크롬(dopachrome) 등을 거처 생성된다. 멜라닌은 피부에 존재하여 자외선 등으로부터 신체를 보호하고 체내 호르몬 분비 조절에 중요한 기능을 나타낸다. 그러나, 멜라닌이 과잉생산되면 기미, 주근깨 등을 형성하고 피부노화를 촉진하며 피부암 유발에 중요한 작용을 하는 것으로 알려져 멜라닌 과잉생산을 예방하기 위한 연구개발이 활발히 진행되고 있다. 이미 아스코르빈산(일본특개평 4-9320), 하이드로퀴논(일본특개평 6-192062), 코직산(일본특개소 56-7710), 알부틴(일본특개평 4-93150) 및 식물 추출물 등이 티로시나제 저해 활성을 나타내어 미백 화장료로 이용되고 있으나 화장품 제형 중에서의 안정성이 나빠, 분해되어 착색되거나, 이취가 발생하거나, 생체 수준에서의 효능, 효과가 불분명하거나 또는 안전성이 문제가 되어 그 사용이 제한되고 있는 실정이다.

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한편, 아토피 피부염(atopic dermatitis)은 아토피 알러지를 가진 사람에게서 나타나는 대표적인 질환으로, 아직까지 아토피 피부염의 원인은 명확히 밝혀지지 않았지만 아토피 피부염 환자의 70%에서 아토피의 병력이 있었으며, 알레르기성 체질인 사람에서 호발하고, 특히 다른 알러지 질환인 알러지성 비염, 천식 등을 동반하기 때문에 유전적 요인에 의한 질병이나 면역 질환 중의 하나로 이해되고 있다. 아토피성 피부염의 치료에는, 높은 약리효과를 기대할 수 있는 부신피질 호르몬 등의 약재가 사용되고 있으나 부신피질 호르몬제의 부작용이 문제가 되고 있고, 부신피질 호르몬제의 사용 중지에 의하여 리바운드(약물의 사용정지 후에 일어나는 극적인 환부의 병세악화)가 생기는 것도 잘 알려져 있다. 이와 같이 부작용의 대책으로서, 부신피질 호르몬 등의 호르몬을 포함하지 않는 비스테로이드성 항염증제 또는 항히스타민제 등이 사용되고 있으나 완치가 어려운 상태이기 때문에 부작용이 없는 아토피 피부염의 개선제 또는 치료제 개발이 매우 절실한 실정이다.

최근 여러 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연 추출물로부터 얻어진 항산화, 주름완화, 미백, 가려움 완화 등의 기능을 가진 기능성 화장료(Functional cosmetics)에 많은 관심이 집중되고 있다. 예를 들어, 미국 특허공보 US 5,972,341은 코미포라 무쿨(Commiphora mukul) 추출물의 주름개선 효과에 관하여, 일본특허공개 평9-672662는 히아루로니디아제(Hyaluronidase) 억제 효능을 가지는 해조류 추출물에 관하여, 일본특허공개 평10-85905는 와카메(Wakame)로부터 추출된 푸코이단(Fucoidan)의 피부감촉 개선효과에 관하여, 일본특허공개 평2-245087은 사르가숨(Sargassum) 속 추출물의 항산화 효과에 관하여, 대한민국 특허 제0431076호는 백급, 자소, 에키나시아 및 발효대두 추출물을 포함하는 아토피 피부의 치유 개선용 화장료 조성물을, 대한민국 특허 제0511494호는 하수오, 시엽, 일라이트를 포함하는 아토피 피부염 치료를 위한 추출물 및 조성물에 관해 개시하고 있다.

이러한 피부의 문제점을 해결하기 위하여, 최근 여러 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물 또는 약용과 식용버섯 추출물을 사용한 화장품이 많이 개발되고 있다. 지금까지 알려진 버섯의 추출물을 이용한 화장료 조성물로서는 눈꽃동충하초(한국특허 제0340185호), 상황버섯, 치마버섯(한국특허 제0681703호, 제0295623호), 잎새버섯(한국특허 제0438009호), 표고버섯 등이 있으며 이들 추출물의 피부 노화방지 효과에 관한 연구가 계속되어 왔다.

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약용과 식용으로 사용되고 있는 버섯류들은 그 예와 종류가 무수히 많지만, 화장료 조성물로서 이용되고 연구되고 있는 버섯류들은 아직은 일부분으로 알려져 있다.
한편, 모래밭버섯(Pisolithus tinctorius)은 어리알버섯목 모래밭버섯과에 속하는 버섯으로, 봄부터 가을에 걸쳐 소나무 숲, 잡목림 내 맨땅 위에 발생하고, 고등 식물과 공생하는 외생균근성균이며, 전세계에 분포한다. 자실체는 3~7×2~4 cm로 유구형이고, 표피는 얇으며 처음에는 황갈색이나 나중에 흑색으로 변하며, 아래쪽은 대 모양이고 균사속이 있다. 내부는 검은색이고 백색~황갈색 지름 0.1~0.3 cm의 난형의 젤리상 소립괴가 있고, 이 속에 포자가 있다. 포자는 갈색을 거쳐 자흑색으로 성숙하며, 지름 7~12 ㎛로 구형이며 황갈색이다. 또한 표면에 여러 개의 침상 돌기가 있다.
이러한 모래밭버섯에 대하여 아직까지 피부 외용제로서 미백효과, 아토피 개선효과 및 피부 자극완화효과를 나타내는지는 규명된 바가 전혀 없다.

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대한민국 등록특허 제10-0438009호(잎새버섯 균사체의 추출물을 함유하는 화장료 조성물)에는 항산화 효과와 피부 세포의 증식 및 콜라겐의 생성촉진 효과와 피부 멜라닌생성 억제 효과가 있는 잎새버섯의 균사체 또는 그의 배양액으로부터 얻은 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 대해 기재되었으나, 이에는 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체 배양액을 이용하는 점에 대해서는 기재된 바 없다. 대한민국 등록특허 제10-0340185호(눈꽃동충하초 추출물을 함유하는 주름 방지용 화장료 조성물)에는 눈꽃동충하초의 추출물을 함유시킴으로써 주름방지에 우수한 화장료 조성물에 대해 기재되었으나, 이에는 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체 배양액을 이용하는 점에 대해서는 기재된 바 없다.

본 발명은 천연추출물을 이용하여 미백, 아토피 개선 효과 및 피부 자극완화효과를 가지는 피부 외용제 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.

또한, 본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하고자 고등균류인 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체의 배양액으로부터 얻은 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 외용제 또는 화장료 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.

또한, 본 발명은 미백, 아토피 개선 효과 및 피부 자극완화효과를 복합적으로 가지는 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체 추출물을 효율 좋게 수득하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기의 목적을 달성하기 위해 본 발명은 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 외용제 또는 화장료 조성물을 제공한다.

이하 본 발명의 과제 해결 수단에 대해 상세히 설명하고자 한다.

본 발명의 외용제 또는 화장료 조성물은 미백효과, 아토피성 피부염 개선·예방 또는 치료 효과 및 피부 자극완화효과가 우수한 피부 외용제 또는 화장료 조성물을 제공하기 위해, 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 모래밭버섯 자실체 추출물은 모래밭버섯 자실체를 추출하여 얻을 수 있는데, 여기서 모래밭버섯 자실체의 종류에는 특정의 종류에 한정되는 것은 아니며 자연채취된 것 또는 인공배양된 것 모두 사용할 수 있다.

또한, 본 발명의 모래밭버섯 자실체 추출물의 추출방법은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상 사용하는 방법을 이용할 수 있다. 예를 들면, 모래밭버섯 자실체를 동결건조하고 분쇄하여 수득한 자실체 분말에 약 2배 내지 20배, 바람직하게는 약 2배 내지 5배의 물, 메탄올 또는 에탄올 등의 저급(C1-C4)알코올의 극성용매 또는 이들의 혼합용매로 10℃ 내지 30℃ 추출온도에서 냉침 추출, 환류 냉각 추출, 열수 추출, 초음파 추출, 초고압 추출 등의 추출방법을 이용할 수 있다.

또한, 바람직하게는 이와 같이 수득한 추출액을 여과, 감압농축 또는 동결건조하여 극성용매에 가용할 수 있다. 예를 들면, 수득된 추출액을 여과시킨 후 농축조로 이송하여 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결 건조하고, 이렇게 얻어진 감압농축물 및 동결건조물이 0.001 ~ 70.0중량% 함유되게 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 추출물을 제조할 수 있다.

또한, 본 발명의 모래밭버섯 자실체 추출물은 이와 같이 얻어진 추출물에 유효성분으로 함유된 다당체 자체를 의미할 수도 있다.

한편, 본 발명의 모래밭버섯 균사체 추출물은 모래밭버섯 균사체를 추출하여 얻은 것으로, 그 추출방법은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상 사용하는 방법을 이용할 수 있다. 예를 들면, 모래밭버섯 균사체를 동결건조하고 분쇄하여 수득한 균사체 분말의 열수추출물, 또는 메탄올, 에탄올, 부탄올 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 추출한 유기용매 추출물일 수 있다.

한편, 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액은 그대로 사용하거나, 건조(또는 동결건조)하여 분말 형태로 사용할 수 있다. 바람직하게는 배양액을 여과하여 사용할 수도 있다. 구체적으로 모래밭버섯 균사체를 액체 배양한 후, 균사체를 원심분리를 통해 제거한 후, 배양 여액을 종이필터로 여과하여 수득된 여과액을 사용할 수 있는 것이다. 이때, 배양은 '발효'를 포함하는 의미이다.

또한, 본 발명의 모래밭버섯 균사체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액은 상기 열수추출물, 상기 유기용매 추출물 또는 상기 여과액에서 추출된 다당체일 수도 있다.

또한, 본 발명의 모래밭버섯 균사체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액은 1종 이상의 동물 또는 식물 또는 생약재를 기질로 사용한 모래밭버섯 균사체의 추출물인 것이 바람직하다. 여기서, 상기 동물 또는 식물 또는 생약재는 특별히 한정되는 것은 아니며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상 사용되는 동물 또는 식물 또는 생약재를 기질로 사용할 수 있다.

이와 같이 수득된 본 발명의 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액은 미백효과, 아토피 피부염에 대한 항염증효과 및 피부 자극완화효과가 매우 우수하여 다기능성 피부 외용제 또는 화장료 조성물에 이용될 수 있다.

한편, 본 발명의 피부 외용제 또는 화장료 조성물은 조성물 전체에 대해 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액을 0.001 ~ 90.0 중량% 함유하는 것이 좋은데, 0.001 중량% 미만으로 포함되는 경우에는 피부개선효과 등이 미미하고, 90.0 중량%를 초과하는 경우에는 재료 투입량 대비 효율성이 떨어져 경제적이지 못하기 때문이다.

한편, 본 발명에서 "유효성분으로 포함된다"는 의미는 본 발명의 피부 외용제 또는 화장료 조성물로부터 피부질환의 예방 및 억제의 효과를 나타낼 수 있는 정도로, 피부 외용제 또는 화장료 조성물에 모래밭버섯 자실체 추출물 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액이 첨가되는 것을 의미하고, 약물전달 및 안정화 등을 위하여 다양한 성분을 부성분으로 첨가하여 다양한 형태로 포뮬레이션(formulation) 되는 것을 포함하는 의미이다.

한편, 본 발명의 피부 외용제 조성물은 바람직하게 약학 조성물인 것이 좋은데, 약학 조성물의 제형으로는 일예로 경고제(PLASTERS), 로션제(LOTIONS), 리니멘트제(LINIMENTS), 액제(LIQUIDS AND SOLUTIONS), 에어로솔제(AEROSOLS), 엑스제(EXTRACTS), 연고제(OINTMENTS), 유동엑스제(FLUIDEXTRACTS), 유제(EMULSIONS), 현탁제(SUSPESIONS), 캅셀제(CAPSULES), 크림제(CREAMS), 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀, 첩부제, 서방화제제가 있다.

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한편, 본 발명의 약학적 조성물은 약리학적으로 허용되는 기제; 운반제; 부형제; 전분, 트래거캔스 고무, 젤라틴, 당밀, 폴리비닐 알콜, 폴리비닐 에테르, 폴리비닐 피롤리돈, 히드록시프로필 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스 및 카르복시메틸 셀룰로오스를 포함하는 결합제; 한천, 전분, 젤라틴 가루, 카르복시메틸 셀룰로오스 나트륨, 카르복시메틸 셀룰로오스 칼슘, 결정 셀룰로오스, 탄산칼슘, 탄산수소나트륨 및 알긴산 나트륨을 포함하는 분쇄제; 스테아린산 마그네슘, 활석 및 수첨 식물유를 포함하는 윤활제; 및 착색제 등을 포함할 수 있고, 상기 운반제 및 부형제로는 젖당, 글루코오스, 수크로오스, 만니톨, 감자녹말, 옥수수녹말, 탄산칼슘, 인산칼슘 및 셀룰로오스 등이 있다. 상기 외에도 안정화제, 용해보조제, 경피흡수 촉진제 등의 보조제 방향제, 방부제 등의 첨가제가 더 첨가될 수 있다.

한편, 많은 환자에게 본 발명인 피부 외용제 조성물에 대한 표준 투여량은 환자의 개별적 특성에 의해 그 양이 변화될 수 있으며, 실질적으로 숙련된 임상 의사는 환자를 위해 본 발명의 피부 외용제 조성물에 대한 이상적인 투여량 및 투여 계획, 예를 들어 특정 필요 및 환자의 전체적인 조건의 관점에서 가장 적절한 치료 전략을 정할 수 있다. 본 발명의 피부 외용제 조성물에 대하여, 적절한 투여량을 결정하는 데는 수많은 참조 문헌을 참조할 수 있다.

또한, 본 발명의 피부 외용제 조성물의 적절한 투여량은 시험관 내 또는 동물 모델에서 일반적으로 결정될 수도 있다. 예를 들어 시험관 내에서 표적 세포에 대해 여러 농도의 본 발명 피부 외용제 조성물을 첨가하여 그 적절한 투여량을 결정할 수도 있다.

한편, 약학 조성물은 바람직하게 아토피 예방 또는 치료용인 것이 좋다.
한편, 본 발명의 피부 화장료 조성물은 바람직하게 피부 미백용, 아토피 피부 개선용 및 피부 자극완화용 화장료 조성물인 것이 좋은데, 화장료 조성물의 제형으로는 일예로 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W)형 및 유중수(W/O)형으로 이루어진 기초화장료 제형; 수중유형 또는 유중수형의 메이크업베이스, 파운데이션, 스킨커버, 립스틱, 립그로스, 페이스파우더, 투웨이케익, 아이새도, 치크칼라 및 아이브로우펜슬류로 이루어진 색조화장료 제형; 이 있다.

본 발명에 의하면, 미백, 아토피 개선 효과 및 피부 자극완화효과를 복합적으로 발휘하는 모래밭버섯 자실체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체 배양액을 수율 좋게 수득할 수 있고, 이를 이용하여 다기능성 피부 외용제 또는 화장료 조성물을 제조할 수 있다.

이하, 본 발명의 내용을 하기 실시예에서 더욱 상세히 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.

실시예 1: 모래밭버섯 자실체 추출물의 제조

모래밭버섯(Pisolithus tinctorius) 자실체를 동결건조하고 분쇄하여 수득한 자실체 분말을 에탄올이 70%(v/v) 함유된 수용액으로 5시간씩 3회 환류추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #5 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결건조시킨 후, 수득된 동결 건조물을 15중량% 함유되도록 정제수, 에탄올, 부틸렌글리콜 및 프로필렌글리콜의 혼합용매에 용해시킴으로써 추출물(이하, '모래밭버섯 자실체 추출물'이라 칭함)을 제조하였다.

실시예 2: 모래밭버섯 균사체 추출물의 제조

모래밭버섯(Pisolithus tinctorius) 균주는 신선한 자실체로부터 직접 분리하였으며, 모래밭버섯 균사체를 효모-맥아즙 한천배지(효모 추출물 3 g, 맥아즙 3 g, 포도당 10 g, 펩톤 5 g, 한천 20 g, 증류수 1 ℓ)가 든 시험관에 사면배양하여 4℃에 보관하고 1개월마다 계대배양하여 사용하였다. 상기 사면배지에서 자란 균사체를 무균적으로 균질화하고, 이를 포도당 3%, 효모 추출물 1.0%를 함유한 단순 복합 배지로 하며 pH 5.5로 조정한 액체배지에 5%(v/v)되게 접종한 후, 발효조 내에서 온도 27℃, 회전수 150 rpm, 통기량 1.5 vvm의 조건으로 10일간 배양하였다.

배양완료 후, 균사체를 원심분리를 통해 회수한 후, 상기 실시예 1에 기재된 방법으로 추출하여 균사체 추출물(이하, '모래밭버섯 균사체 추출물'이라 칭함)을 제조하였다.

실시예 3: 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액의 제조

실험에 사용된 모래밭버섯(Pisolithus tinctorius) 균주는 신선한 자실체로부터 직접 분리하였으며, 모래밭버섯 균사체를 효모-맥아즙 한천배지(효모 추출물 3 g, 맥아즙 3 g, 포도당 10 g, 펩톤 5 g, 한천 20 g, 증류수 1 ℓ)가 든 시험관에 사면배양하여 4℃에 보관하고 1개월마다 계대배양하여 사용하였다. 상기 사면배지에서 자란 균사체를 무균적으로 균질화하고, 이를 포도당 3%, 효모 추출물 1.0%를 함유한 단순 복합 배지로 하며 pH 5.5로 조정한 액체배지에 5%(v/v)되게 접종한 후, 발효조 내에서 온도 27℃, 회전수 150 rpm, 통기량 1.5 vvm의 조건으로 10일간 배양하였다.

배양완료 후, 균사체를 원심분리를 통해 제거한 배양여액을 종이필터 (watman no.4)로 여과하여 여과액을(이하, '모래밭버섯 균사체 배양액'이라 칭함) 수득하였다.

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실험예 1: 티로시나제 활성 억제효과 측정

본 실험예 1에서는 상기 실시예 3에서 수득된 모래밭버섯 균사체 배양액의 티로시나제 활성 저해효과를 확인하기 위해 미백제로 잘 알려진 알부틴을 비교샘플로 사용하였다.

티로시나제는 생체 내에서 티로신(tyrosine)이라는 물질의 산화과정을 촉진하여 멜라닌이 생성되도록 하는 효소이다.

티로시나제는 버섯에서 분리 및 정제된 것으로 Sigma 사에서 구입하여 사용하였다. 기질인 L-티로신은 0.05 M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 용해하여 0.1 ㎎/㎖ 용액으로 만들고, 모래밭버섯 자실체 추출물과 모래밭버섯 균사체 배양액은 각각 0.05 M 인산나트륨 완충용액(pH 6.8)에 적당한 농도로 조절하여 용해한 후 사용하였다. L-티로신 용액 0.5 ㎖를 시험관에 넣고 여기에 모래밭버섯 자실체 추출물과 모래밭버섯 균사체 배양액 시료액 0.5 ㎖를 각각 가하고 37℃ 항온기에서 10분간 방치하였다. 그 후, 200 unit/㎖ 티로시나제 0.5 ㎖를 첨가하고 37℃에서 10분간 반응시켰다. 이 반응액이 든 시험관을 얼음 위에 놓아 급냉시켜 반응을 중지시킨 후, 분광광도계를 파장 475 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 모래밭버섯 자실체 추출물과 모래밭버섯 균사체 배양액 대신 완충용액 0.5 ㎖를 넣은 것을 사용하였다.

상기 각 시료의 티로시나아제 활성 저해율은 수학식 1에 따라 계산하였다.

[수학식 1]

티로시나제 활성 저해율(%) = 100 - [(비교군흡광도/대조군흡광도)] × 100

시료명	티로시나제 저해율(%)
대조군	0
모래밭버섯 균사체 배양액 0.02중량%	51
모래밭버섯 균사체 배양액 0.01중량%	41
모래밭버섯 균사체 배양액 0.005중량%	35
알부틴 0.2중량%	54

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티로시나제의 활성 저해효과를 측정한 결과(표 1), 모래밭버섯 균사체 배양액 모두 알부틴과 유사한 티로시나제 활성 저해율을 나타내었다.

상기의 결과로부터 모래밭버섯 균사체 배양액의 우수한 티로시나제 활성 저해효과를 확인할 수 있었고, 이를 바탕으로 본 발명의 피부 외용제 또는 화장료 조성물의 우수한 미백효과를 알 수 있었다.

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실시예 4 및 비교예 1 : 모래밭버섯 자실체 추출물을 함유하는 화장료 제조

본 실시예 4에서는 상기 실시예 1에서 수득된 모래밭버섯 자실체 추출물을 함유하는 화장료를 제조하였다.

제조된 화장료는 크림형태이고, 그 조성은 하기 표 2에 나타낸 바와 같다.

우선 하기 표 2에 기록되어 있는 나)상을 가열하여 70℃에 보존하였고, 나)상에 가)상을 가하여 예비 유화 후 호모믹서로 균일하게 유화하고 서서히 냉각하여 크림(실시예 3, 비교예 1)을 제조하였다.

원료		실시예 4(중량%)	비교예 1(중량%)
가	스테아릴 알콜	8	8
	스테아린산	2	2
	스테아린산 콜레스테롤	2	2
	스쿠알란	4	4
	2-옥틸도데실알콜	6	6
	폴리옥시에틸렌(25몰부가)알콜에스테르	3	3
	글리세릴모노스테아린산 아스테르	2	2
나	모래밭버섯 자실체 추출물	1	-
	프로필렌글리콜	5	5
	정제수	100이 될 때까지	100이 될 때까지

실시예 5 및 비교예 2 : 모래밭버섯 균사체 배양액을 함유하는 화장료 제조

본 실시예 5에서는 상기 실시예 3에서 수득된 모래밭버섯 균사체 배양액을 함유하는 화장료를 제조하였다.

제조된 화장료는 크림형태이고, 그 조성은 하기 표 3에 나타낸 바와 같다.

우선 하기 표 3에 기록되어 있는 나)상을 가열하여 70℃에 보존하였고, 나)상에 가)상을 가하여 예비 유화 후 호모믹서로 균일하게 유화하고 서서히 냉각하여 크림(실시예 4, 비교예 2)을 제조하였다.

원료		실시예 5(중량%)	비교예 2(중량%)
가	스테아릴 알콜	8	8
	스테아린산	2	2
	스테아린산 콜레스테롤	2	2
	스쿠알란	4	4
	2-옥틸도데실알콜	6	6
	폴리옥시에틸렌(25몰부가)알콜에스테르	3	3
	글리세릴모노스테아린산 아스테르	2	2
나	모래밭버섯 균사체 배양액	1	-
	프로필렌글리콜	5	5
	정제수	100이 될 때까지	100이 될 때까지

실험예 2: 화장료의 아토피성 피부염에 대한 개선효과 측정

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본 실험예 2에서는 상기 실시예 4 내지 5와 비교예 1 내지 2에서 제조된 화장료의 아토피성 피부염에 대한 개선효과를 비교측정하기 위해 다음과 같이 임상실험을 실시하였다.

5~30세의 아토피 환자로서, 2년 이상 아토피성 피부염을 앓고 있는 환자 30명에 대하여 아토피성 피부염 개선효과를 조사하였다. 동일인에게 왼쪽 손에는 실시예 4 또는 실시예 5를, 오른쪽 손에는 비교예 1 또는 비교예 2를 매일 저녁 세정 후, 피부에 1일 1회 60일간 도포하고 아토피성 피부염 상태 개선 정도를 측정하였다. 측정은 설문조사에 의한 관능평가로 실시하였다. 그 결과는 하기 표 4, 표 5에 나타내었다.

	매우 좋다	좋다	그저 그렇다
실시예 4	80% (24명)	20% (6명)	0%
비교예 1	10% (3명)	20% (6명)	70% (21명)

	매우 좋다	좋다	그저 그렇다
실시예 5	70% (21명)	30% (9명)	0%
비교예 2	10% (3명)	20% (6명)	70% (21명)

화장료 아토피성 피부염에 대한 개선효과를 측정한 결과(표 4, 표 5), 모래밭버섯 자실체 추출물이 함유된 실시예 3과 모래밭버섯 균사체 배양액이 함유된 실시예 4가 비교예 1 내지 2 보다 아토피성 피부개선효과가 우수하다는 사실을 확인할 수 있었다.

상기의 결과로부터 본 발명의 피부 외용제 또는 화장료 조성물의 우수한 아토피성 피부염 개선효과를 확인할 수 있었다.
실험예 3: SLS에 의한 피부 자극 완화효과 측정
본 실험예에서는 상기 실시예 4 내지 5에서 제조된 화장료의 자극 완화 효과를 인체 첩포 실험으로 평가하였다.
일반적 화장품 처방(크림, 로션, 스킨, 에센스)에 자극을 일으키는 SLS(sodium lauryl sulfate) 1%와 실시예 4 또는 실시예 5의 화장료를 혼용하여 24시간, 48시간, 72시간 동안 첩포한 후, 자극 유발지수를 바탕으로 자극완화 효과를 평가한 것이다.
20~50세의 건강한 남녀 50명의 팔 상박 부위에 FINN CHAMBER(FINLAND)를 이용하여 제품을 0.3 mg씩 첩포하고, 24시간 후 급성 자극 지수를 평가하였다. 평가 후 재차 동일한 부위에 동량의 제품을 첩포하고 48시간 및 72시간 후의 지연성 자극 지수를 평가하였다.
SLS에 의한 피부 자극 완화효과를 측정한 결과, SLS를 단독으로 첩포한 부분은 24시간 후부터 피부에 붉게 자극이 나타났으나, 모래밭버섯 자실체 추출물을 함유하는 실시예 4와 모래밭버섯 균사체 배양액을 함유하는 실시예 5는 첩포하고 24시간, 48시간, 72시간 경과 후에도 아무런 피부 발작을 일으키지 않았다.
상기의 결과로부터 모래밭버섯 자실체 추출물과 모래밭버섯 균사체 배양액이 화장료에 혼용되었을 때 자극을 유발시키는 기재(계면 활성제, 향, 알콜)에 의한 피부 자극을 감소시킬 수 있다는 사실을 확인할 수 있었다.

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실시예 6: 모래밭버섯 자실체 추출물을 함유하는 화장수 제조

95% 에탄올 8 g에 폴리피로리돈 0.05 g, 올레일알콜 0.1 g, 폴리옥시에틸렌모노올레이트 0.2 g, 향료 0.2 g, 파라옥시안식향산메틸에스테르 0.1 g, 소량의 산화방지제, 소량의 색소를 혼합 용해하였다. 상기 실시예 1에서 수득된 모래밭버섯 자실체 추출물 0.05 g, 글리세린 5 g을 정제수 85.33 g에 용해한 것에 상기 혼합액을 첨가한 후 교반하여 모래밭버섯 자실체 추출물을 함유하는 화장수를 제조하였다.

실시예 7: 모래밭버섯 균사체 배양액을 함유하는 화장수 제조

95% 에탄올 8 g에 폴리피로리돈 0.05 g, 올레일알콜 0.1 g, 폴리옥시에틸렌모노올레이트 0.2 g, 향료 0.2 g, 파라옥시안식향산메틸에스테르 0.1 g, 소량의 산화방지제, 소량의 색소를 혼합 용해하였다. 상기 실시예 3에서 수득된 모래밭버섯 균사체 배양액 0.05 g, 글리세린 5 g을 정제수 85.33 g에 용해한 것에 상기 혼합액을 첨가한 후 교반하여 모래밭버섯 균사체 배양액을 함유하는 화장수를 제조하였다.

실시예 8: 모래밭버섯 자실체 추출물을 함유하는 유액 제조

세틸알콜 1.2 g, 스쿠알란 10 g, 바세린 2 g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.2 g, 글리세린모노에스테아레이드 1 g, 폴리옥시에틸렌(20몰부가)모노올레이트 1 g 및 향료 0.1 g을 70℃에서 가열 혼합 용해하고, 상기 실시예 1에서 수득된 모래밭버섯 자실체 추출물 0.5 g, 디프로필렌글리콜 5 g, 폴리에틸렌글리콜-1500 2 g, 트리에탄올아민 0.2 g, 정제수 76.2 g을 75℃로 가열해서 용해시켰다. 양자를 혼합하여 유화시킨 후 냉각하여 수중유(O/W)형의 유액을 제조하였다.

실시예 9: 모래밭버섯 균사체 배양액을 함유하는 유액 제조

세틸알콜 1.2 g, 스쿠알란 10 g, 바세린 2 g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.2 g, 글리세린모노에스테아레이드 1 g, 폴리옥시에틸렌(20몰부가)모노올레이트 1 g 및 향료 0.1 g을 70℃에서 가열 혼합 용해하고, 상기 실시예 3에서 수득된 모래밭버섯 균사체 배양액 0.5 g, 디프로필렌글리콜 5 g, 폴리에틸렌글리콜-1500 2 g, 트리에탄올아민 0.2 g, 정제수 76.2 g을 75℃로 가열해서 용해시켰다. 양자를 혼합하여 유화시킨 후 냉각하여 수중유(O/W)형의 유액을 제조하였다.

실시예 10: 모래밭버섯 자실체 추출물을 함유하는 미용액 제조

95% 에틸알콜 5 g에 폴리옥시에틸렌솔비탄모노올레이트 1.2 g, 키툴로오즈 0.3 g, 히야론산나트륨 0.2 g, 비타민 E-아세테이트 0.2 g, 감초산 나트륨 0.2 g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.1 g, 상기 실시예 1에서 수득된 모래밭버섯 자실체 추출물 1 g 및 적량의 색소를 혼합하여 미용액을 제조하였다.

실시예 11: 모래밭버섯 균사체 배양액을 함유하는 미용액 제조

95% 에틸알콜 5 g에 폴리옥시에틸렌솔비탄모노올레이트 1.2 g, 키툴로오즈 0.3 g, 히야론산나트륨 0.2 g, 비타민 E-아세테이트 0.2 g, 감초산 나트륨 0.2 g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.1 g, 상기 실시예 3에서 수득된 모래밭버섯 균사체 배양액 1 g 및 적량의 색소를 혼합하여 미용액을 제조하였다.

Claims

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모래밭버섯 자실체 추출물, 모래밭버섯 균사체 추출물 또는 모래밭버섯 균사체의 배양으로부터 얻은 배양액 중 어느 하나를 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 피부 화장료 조성물.
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