KR102069712B1 - 천연추출물을 유효성분으로 함유하는 탈모완화 및 발모촉진용 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 호밀(Secale cereale) 추출물, 비쑥(Artemisia Scoparia) 추출물 및 골든실(Hydrastis Canadensis) 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모완화 및 발모촉진용 조성물에 관한 것으로, 모유두세포의 증식, 모발성장인자 발현 촉진 효과 전반에 대해 우수한 효과를 가진 조성물을 제공한다.

Description

천연추출물을 유효성분으로 함유하는 탈모완화 및 발모촉진용 화장료 조성물{Cosmetic Composition for Preventing Alopecia and Promoting Hair Growth Containing Natural Extract}
본 발명은 호밀 추출물, 비쑥 추출물 및 골든실 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 하는 탈모완화 및 발모촉진용 화장료 조성물에 관한 것이다. 구체적으로는, 본 발명에 따른 조성물은 모유두세포의 성장과 분화 조절을 통해 탈모를 완화하고 발모를 촉진하는데 효과적이다.
모발은 머리보호, 외향에 대한 영향, 머리의 온도유지 등 인체에서 다양한 역할을 담당하고 있으며, 생명유지에 중요한 기관은 아니지만, 건강상태의 척도이자 외모를 결정짓는 신체의 중요한 일부분이다
인체의 모발은 10만 ∼ 15만개 정도로, 각각의 모발은 서로 다른 주기를 가지며 정상모발의 90%를 차지하는 성장기(anagen, growing phase), 생장정지와 모근이 위축되는 퇴행기(catagen, transitional phase), 모구가 건조되고 곤봉모가 되는 휴지기(telogen, resting phase) 등의 모주기(hair cycle)를 거치면서 모발은 성장과 탈모를 거듭한다. 이러한 주기는 3 ∼ 6년에 걸쳐 반복되는데 그 결과 정상적으로 하루 평균 50 ∼ 100개의 모발이 탈락하게 된다.
탈모(alopecia)는 모발의 성장 주기에서 성장기의 모발 비율이 짧아지고 퇴행기 또는 휴지기의 모발이 많아져 비정상적으로 모발의 탈락이 증가하고, 정상적으로 자라던 모발이 어떤 원인에 의해 빠지게 되는 현상을 일컫는다. 스트레스나 질병으로 인한 탈모가 아닌 대부분의 탈모는 모발이 영양을 잃어가며 자연스럽게 굵기가 가늘어지고 약해져서 빠지게 되고, 이런 주기가 빨라지면서 모발이 재생되지 않는 탈모가 되는 것이다. 탈모는 불균형한 식생활, 과다한 음주와 흡연, 약물복용, 수면부족, 스트레스, 출산, 환경오염, 유전, 잦은 파마와 염색, 호르몬의 불균형 등에 기인하여 발생하는 것으로 알려져 있다.
탈모의 치료방법으로는 국소도포제, 경구복용제, 건강보조식품, 모발 이식수술 등이 있으나 이러한 방법들은 사용범위가 한정되어 있고, 지속적인 탈모완화가 이루어지지 않는다. 또한, 약물치료의 효과도 일시적이며, 두피 혹은 피지의 생성을 오히려 가속화시키기도 한다.
탈모를 치료하기 위해서 성장기(Anagen)의 모낭세포를 증가시키고, 퇴행기(Catagen)와 휴지기(Telogen)의 세포를 감소시키는 방향으로 접근하고 있다. 탈모진행과정에서 감소하는 Wnt/β-catenin을 활성화시키고, 모발성장인자인 IGF-1, VEGF를 증가시킴으로써 모발 형성에 관여하는 세포를 분화시킨다.
현재 가장 많이 알려져있는 모발성장 촉진제제로서 미녹시딜(minoxidil, 경피도포제) 및 피나스테라이드(finasteride, 경구복용제) 등이 FDA 승인을 얻어 임상적으로 상용되고 있다. 특히 미녹시딜은 1970년 초에 혈관확장제로 최초로 소개되어 약물효과 이외의 부작용이 발모임이 밝혀져 현재 발모촉진제로 사용되고 있으며, 피나스테리드제제는 전립선 비대증 치료제 개발로부터 유래된 5α-reductase 억제효과를 가진 탈모 억제제로 사용되고 있다. 그러나 현재 주로 사용되는 발모제의 약물 이상반응이 보고되고 있어 적극적 치료에 상당한 제한성을 가지고 있다.
한편, 대한민국 공개특허 제10-2012-0122108호에서는 호밀 새싹을 포함하는 새싹추출물의 모발 화장료 조성물을 개시하고 있으나, 모발 광택성 및 컨디셔닝 효과, 모발을 보호하는 항오염 효과의 조성물로 한정하고 있다.
대한민국 등록특허 제10-1810410호에서는 청호밀 태좌를 버섯 균사체와 혼합 배양한 추출물의 화장료 조성물에 대해 개시하고 있으나, 항노화, 피부보습, 피부 주름 및 탄력개선, 피부 세포 재생활성에 대한 조성물로 한정하고 있다.
대한민국 등록특허 제10-1851972호에서는 황해쑥(Artemisia argyi), 쑥(A. Pronceps. var. orientlis), 산쑥(A. montana)의 잎 및 어린줄기를 말린 약재인 애엽과 사철쑥(Artemisia capillaris)의 지상부를 말린 약재인 인진호를 포함하는 한약 추출물의 탈모개선 및 탈모방지용 조성물에 대해 개시하고 있으나, 본 특허 소재인 비쑥과는 구별된다.
이러한 문제점을 고려하여, 소비자가 믿고 사용할 수 있는 안전하며 탈모완화 및 발모촉진 효능이 우수한 천연 원료 개발이 필요하다.
본 발명은 쉽고 간단하게 제조할 수 있고, 장기간 인체에 사용하는 경우에도 안전하며 탈모완화 및 발모촉진 효과가 우수한 천연추출물을 유효성분으로 하는 조성물을 제공하고자 한다. 본 발명에 다른 천연추출물은 화장료 및 의약품 분야에서 적용될 수 있다.
상기 기술적 과제는 호밀(Secale cereale) 추출물, 비쑥(Artemisia Scoparia) 추출물 및 골든실(Hydrastis Canadensis) 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모완화 및 발모촉진용 조성물에 의해 달성된다.
또한 바람직하게는, 상기 조성물은 호밀 추출물, 비쑥 추출물 및 골든실 추출물을 1~3:1~3:1~3의 중량비로 혼합하여 포함할 수 있다.
또한 바람직하게는, 상기 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 40.0 중량% 포함될 수 있다.
또한 바람직하게는, 상기 추출물은 용매 추출법, 초임계 추출법 및 초음파 추출법으로 이루어진 군에서 선택된 추출법으로 추출될 수 있다.
또한 바람직하게는, 상기 용매 추출법은 물, 탄소수 1-4의 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트 및 부틸아세테이트, 클로로포름, 디에틸에테르, 메틸렌클로라이드, 디클로로메탄, 및 헥산으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출용매를 이용하여 추출될 수 있다.
또한 바람직하게는, 상기 조성물은, 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 바람직하게 샴푸, 린스, 트리트먼트, 헤어팩, 헤어젤, 앰플, 헤어토닉, 에센스, 헤어크림, 미스트, 비누 등으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형일 수 있다. 또한, 이는 선택적으로 에어로졸 형태로 적용될 수도 있고, 고체 형태일 수도 있다.
본 발명은 호밀 추출물, 비쑥 추출물 및 골든실 추출물 중 1종 이상을 유효성분으로 포함하는 탈모완화 및 발모촉진용 조성물로서, 인간유래 모유두세포의 성장과 분화를 조절하고 Wnt/β-catenin 신호전달을 활성화하여 탈모완화와 발모촉진 효과가 우수한 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 호밀, 비쑥 및 골든실 복합추출물은 화장료, 의약품 등의 분야에서 탈모의 예방과 치료에 이용될 수 있다.
도 1은 호밀 추출물, 비쑥 추출물, 골든실 추출물, 및 이들의 복합추출물의 모유두세포(Human dermal papilla cell)의 증식률을 측정한 결과이다.
도 2는 호밀 추출물, 비쑥 추출물, 골든실 추출물, 및 이들의 복합추출물의 모발성장인자인 IGF-1(Insulin-like growth factor)의 발현량을 확인한 결과이다.
도 3은 호밀 추출물, 비쑥 추출물, 골든실 추출물, 및 이들의 복합추출물의 모발성장인자인 VEGF(Vascular endothelial growth factor)의 발현량을 확인한 결과이다.
도 4는 호밀 추출물, 비쑥 추출물, 골든실 추출물, 및 이들의 복합추출물의 Wnt/β-catenin 발현율을 확인한 결과이다.
본 발명은 호밀(Secale cereale) 추출물, 비쑥(Artemisia Scoparia) 추출물 및 골든실(Hydrastis Canadensis) 추출물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 함유하는 탈모완화 및 발모촉진용 조성물에 관한 것이다.
호밀(Secale cereale)은 벼과에 속하는 1년생 초본식물로서, 호맥(胡麥) 또는 흑맥(黑麥)이라고도 한다. 원줄기는 총생(叢生:뭉쳐나기)하며 밑부분이 약간 굽었다가 곧추 자라고 높이가 2m에 달하며 흰빛이 도는 녹색이고 화서(花序:꽃차례) 밑부분에 털이 다소 있다. 잎은 길이 30㎝, 너비 6∼15㎜로서 표면이 거칠며 뒷면이 밋밋하고 엽신(葉身) 밑에 귀같이 튀어나온 부분이 있다. 꽃은 5월에 피며 수상화서(穗狀花序:이삭처럼 피는 꽃차례)를 이룬다. 낟알이 밀과 비슷하나 밀보다는 가늘고 긴 편이며 종자의 표면에 주름이 많고 종피는 청회색 또는 암갈색이다. 타가수정(他家受精)을 하기 때문에 자연집단은 유전적 변이가 심하다. 원산지는 서남아시아이며 원산지로부터 터키, 유럽, 미국, 일본 등으로 전파된 것으로 추측된다. 호밀은 주로 빵, 비스킷, 호밀전분용으로 사용되며, 사료용으로도 재배된다.
비쑥(Artemisia Scoparia)은 국화과의 여러해살이풀로서 제주도를 비롯한 우리나라 중남부지방의 바닷가 모래밭이나 돌틈에 많이 자란다. 뿌리는 양 끝이 뾰족한 원기둥 모양으로 굵고 뿌리 윗부분은 자주빚을 띤다. 높이는 60~90cm으로 자라며, 줄기에서 나온 잎은 1~2회 갈라지고 바늘 모양이다. 사철쑥과 닮았으나 냄새가 다르고, 사철쑥은 줄기가 나무처럼 되어있어 겨울철에도 죽지 않지만, 비쑥은 겨울철에 줄기가 완전히 말라죽는 것이 특징이다.
골든실(Hydrastis Canadensis)은 미나리아재비과 식물로 히드라스티스라고 불리며 미국에서 많이 사용되는 약초로, 우거진 숲속에서 잘 자라며 잎은 녹색이고 꽃은 녹색을 띈 흰색으로 작게 핀다. 한의학적으로 혈액순환을 좋게 하며, 어혈을 풀고 부은 것을 내리고, 진통작용과 새살을 돋게 한다고 알려져 있다.
본 발명에서 호밀은 잎, 줄기, 열매, 뿌리 등 모든 부위를 사용하여 추출할 수 있으며, 바람직하게는 호밀의 열매를 이용하여 추출할 수 있다. 비쑥은 잎, 줄기, 뿌리 등 모든 부위를 사용하여 추출할 수 있으며, 바람직하게는 비쑥의 뿌리를 이용하여 추출할 수 있다. 골든실은 잎, 줄기, 열매, 뿌리 등 모든 부위를 사용하여 추출할 수 있으며, 바람직하게는 골든실의 뿌리를 이용하여 추출할 수 있다.
본 발명에 따른 추출물은 용매 추출법, 초임계 추출법 및 초음파 추출법 등의 통상적인 추출방법을 사용할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 용매 추출법을 사용하여 추출될 수 있다.
상기 용매 추출법은 물, 탄소수 1-4의 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트 및 부틸아세테이트, 클로로포름, 디에틸에테르, 메틸렌클로라이드, 디클로로메탄, 헥산으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 추출용매를 사용하여 추출될 수 있다.
또한, 상기 용매에서 사용되는 알코올로는 메탄올, 에탄올, 부탄올 등의 저급 1가 알코올, 프로필렌글라이콜, 1,3-부틸렌글라이콜, 펜탄디올, 헥산디올, 옥탄디올 등의 2가 알코올, 글리세린 등의 3가 알코올 등이 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 40.0 중량% 포함되는 것이 바람직하다.
본 발명의 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 바람직하게 샴푸, 린스, 트리트먼트, 헤어팩, 헤어젤, 앰플, 헤어토닉, 에센스, 헤어크림, 미스트, 비누 등으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형일 수 있다. 또한, 이는 선택적으로 에어로졸 형태로 적용될 수도 있고, 고체 형태일 수도 있다.
본 발명의 일 실시형태에 따르면, 본 발명이 추출물은 호밀 추출물, 비쑥 추출물 및 골든실 추출물에서 선택된 2종 또는 3종을 포함하는 복합추출물일 수 있다.
상기 복합추출물은, 에탄올을 용매로 하여 호밀, 비쑥 및 골든실 중 2종 이상의 에탄올 추출물을 추출하는 단계; 추출된 에탄올 추출물을 농축시키는 단계; 및 수득된 에탄올 추출물을 용매에 용해시키는 단계;에 의하여 수득된 복합추출물인 것이 바람직하다.
본 발명의 조성물은, 호밀 추출물, 비쑥 추출물 및 골든실 추출물의 단일 추출물뿐만 아니라 2종 또는 3종의 복합추출물을 포함하는 조성물이 모유두세포(Human dermal papilla cell)의 증식효과와 모발 성장인자의 발현 촉진을 확인함으로써 탈모완화 및 발모촉진에 우수한 효과가 있음을 확인하였다. 보다 바람직하게는, 호밀 추출물, 비쑥 추출물 및 골든실 추출물를 1~3:1~3:1~3의 비율로 혼합하여 포함한 복합추출물일 수 있다.
이하 본 발명의 구성을 하기 실시예 및 시험예를 통해 구체적으로 설명하고자 한다. 다만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예 및 실험예에만 한정되는 것은 아니고, 그와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다.
[ 실시예 1 : 호밀 추출물의 제조]
호밀 열매 300g을 건조 및 분쇄하여 분쇄물을 제조하였다. 상기 분쇄물에 70% 에탄올 3000g을 첨가한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서, 80℃ 온도로 3시간 동안 가열하여 추출하였다. 상기 추출물을 400메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후, 와트만 2번 여과지로 다시 한 번 여과하였다. 그 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치로 55℃ 온도에서 감압 농축하였으며, 잔사에 대하여 동일한 조건으로 2회 더 반복 실시하였다. 상기 감압농축 및 동결건조물이 3 중량% 함유되게 정제수, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 분산 및 용해하여 추출물을 제조하여 아래 실험예 1 내지 3에 사용하였다.
[ 실시예 2 : 비쑥 추출물의 제조]
비쑥 전초 300g을 건조 및 분쇄하여 분쇄물을 제조하였다. 상기 분쇄물에 70% 에탄올 3000g을 첨가한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서, 80℃ 온도로 3시간 동안 가열하여 추출하였다. 상기 추출물을 400메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후, 와트만 2번 여과지로 다시 한 번 여과하였다. 그 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치로 55℃ 온도에서 감압 농축하였으며, 잔사에 대하여 동일한 조건으로 2회 더 반복 실시하였다. 상기 감압농축 및 감압농축 및 동결건조물이 3 중량% 함유되게 정제수, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 분산 및 용해하여 추출물을 제조하여 아래 실험예 1 내지 3에 사용하였다.
[ 실시예 3 : 골든실 추출물의 제조]
골든실 뿌리 300g을 건조 및 분쇄하여 분쇄물을 제조하였다. 상기 분쇄물에 70% 에탄올 3000g을 첨가한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서, 80℃ 온도로 3시간 동안 가열하여 추출하였다. 상기 추출물을 400메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후, 와트만 2번 여과지로 다시 한 번 여과하였다. 그 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치로 55℃ 온도에서 감압 농축하였으며, 잔사에 대하여 동일한 조건으로 2회 더 반복 실시하였다. 상기 감압농축 및 동결건조물이 3 중량% 함유되게 정제수, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 분산 및 용해하여 아래 실험예 1 내지 3에 사용하였다.
[ 실시예 4 : 호밀, 비쑥 복합추출물의 제조]
호밀 열매과 비쑥 전초 각각을 150g씩 준비하고 이들을 건조 및 분쇄하여 분쇄물을 제조하였다. 상기 분쇄물에 70% 에탄올 3000 g을 첨가한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서, 80℃ 온도로 3시간 동안 가열하여 추출하였다. 상기 추출물을 400메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후, 와트만 2번 여과지로 다시 한 번 여과하였다. 그 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치로 55℃ 온도에서 감압 농축하였으며, 잔사에 대하여 동일한 조건으로 2회 더 반복 실시하였다. 상기 감압농축 및 동결건조물이 3 중량% 함유되게 정제수, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 분산 및 용해하여 아래 실험예 1 내지 3에 사용하였다.
[ 실시예 5 : 비쑥 , 골든실 복합추출물의 제조]
비쑥 전초와 골든실 뿌리 각각을 150g씩 준비하고 이들을 건조 및 분쇄하여 분쇄물을 제조하였다. 상기 분쇄물에 70% 에탄올 3000 g을 첨가한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서, 80℃ 온도로 3시간 동안 가열하여 추출하였다. 상기 추출물을 400메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후, 와트만 2번 여과지로 다시 한 번 여과하였다. 그 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치로 55℃ 온도에서 감압 농축하였으며, 잔사에 대하여 동일한 조건으로 2회 더 반복 실시하였다. 상기 감압농축 및 동결건조물이 3 중량% 함유되게 정제수, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 분산 및 용해하여 아래 실험예 1 내지 3에 사용하였다.
[ 실시예 6 : 호밀, 골든실 복합추출물의 제조]
호밀 열매와 골든실 뿌리 각각을 150g씩 준비하고 이들을 건조 및 분쇄하여 분쇄물을 제조하였다. 상기 분쇄물에 70% 에탄올 3000 g을 첨가한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서, 80℃ 온도로 3시간 동안 가열하여 추출하였다. 상기 추출물을 400메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후, 와트만 2번 여과지로 다시 한 번 여과하였다. 그 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치로 55℃ 온도에서 감압 농축하였으며, 잔사에 대하여 동일한 조건으로 2회 더 반복 실시하였다. 상기 감압농축 및 동결건조물이 3 중량% 함유되게 정제수, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 분산 및 용해하여 아래 실험예 1 내지 3에 사용하였다.
[ 실시예 7 : 호밀, 비쑥 , 골든실 복합추출물의 제조]
호밀 열매, 비쑥 전초, 골든실 뿌리 각각을 100g씩 준비하고 이들을 건조 및 분쇄하여 분쇄물을 제조하였다. 상기 분쇄물에 70% 에탄올 3000 g을 첨가한 후, 냉각콘덴서가 부착된 추출기에서, 80℃ 온도로 3시간 동안 가열하여 추출하였다. 상기 추출물을 400메쉬(mesh) 여과포로 여과한 후, 와트만 2번 여과지로 다시 한 번 여과하였다. 그 후, 냉각콘덴서가 달린 증류장치로 55℃ 온도에서 감압 농축하였으며, 잔사에 대하여 동일한 조건으로 2회 더 반복 실시하였다. 상기 감압농축 및 동결건조물이 3 중량% 함유되게 정제수, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 분산 및 용해하여 아래 실험예 1 내지 3에 사용하였다.
[ 실험예 1: 세포 증식 효과 측정]
세포 생존율 측정을 위해 인간 유래 모유두세포(Human Follicle Dermal Papilla Cell, HFDPC)를 배양하여 세포 증식 실험을 진행하였다. 세포를 1 X 104 cells/well 농도로 96 well에 200ul씩 분주하고 37℃, CO2 incubator에서 세포를 24 시간 안정화시켰다. 1% FBS(지방세포일 경우-BCS) 함유한 DMEM(섬유아 세포일 경우 F12/DMEM) 배지로 교환하고 실시예 1 ~ 7을 3 중량% 처리하고 세포 배양기에서 48 시간 동안 반응시킨 후 5 mg/ml 농도의 MTT 시약을 각 well에 20 ul씩 첨가하고 세포 배양기에서 1-2 시간 동안 반응시켰다. 상층액을 모두 제거하고 DMSO 100 ul를 각 well에 첨가하여 세포를 완전히 용해시킨 후 550 nm에서 흡광도를 측정하였다. 미처리 세포 대비하여 백분율로 계산하여 세포 증식율을 계산하였다.
세포 생존율(%)은 다음의 수학식 1로 산출하였다.
[수학식 1]
세포 생존율(%) = 100 X ASample / AControl
ASample: 시료를 처리한 군의 흡광도
AControl: 시료를 처리하지 않은 군은 흡광도
모유두세포의 생존율을 측정한 결과(도 1), 실시예 4의 호밀, 비쑥의 복합추출물에서을 3% 처리한 군에서 약 22% 증가하였고, 실시예 7의 호밀, 비쑥, 골든실의 복합추출물을 3% 처리한 군에서 약 35% 증가하는 것을 확인하였다. 실시예 1~3의 단일 추출물 보다 실시예 7의 복합추출물에서 더 높은 세포증식율을 나타내었다.
[ 실험예 2: 모발 성장인자 발현 촉진 효과]
모유두세포를 1 X 105 cells/ml 농도로 96 well에 분주하고 37℃, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 하루 동안 배양한 후 실시예 1 ~ 7을 3 중량%로 처리하여 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 24 시간 반응시켰다. 세포의 배양액을 이용하여 효소면역측정법(ELISA; enzyme-linked immunosorbent assay)을 통해 측정하였다.
세포 배양액에서 IGF-1 (Insulin-like growth factor), VEGF (Vascular endothelial growth factor)의 발현을 ELISA kit를 이용하여 분석하였고, 450 nm에서 흡광도를 찍어 각각 생성량을 그래프로 나타내었다(도 2, 도 3).
도 2와 도 3에 도시되는 바와 같이, 실시예 7의 호밀, 비쑥, 골든실 복합추출물을을 3% 처리한 군에서 IGF-1 생성양은 약 44% 증가하였고, VEGF 생성량은 약 40% 증가하였다. 실시예 1~3의 단일 추출물보다 실시예 4~7의 복합추출물이 효과가 더 우수하였고, 그 중 실시예 7의 3가지 복합추출물이 가장 우수한 성장인자 증가를 보였다.
[ 실험예 3: Wnt /β- catenin 발현율 확인]
모유두세포를 2 X 105 cells/well 농도로 6 well에 분주하고 37℃, 5% CO2 인큐베이터(incubator)에서 하루 동안 배양한 후, 실시예 1 ~ 7을 3 중량%로 처리하여 24 시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 수거하여 용해시키고 BCA assay를 이용하여 단백질을 정량하였다. 정량한 단백질은 10% SDS-PAGE gel에서 전기영동 시킨 후 PVDF 멤브레인에 전이시켰다. 1차 항체(β-catenin, santa cruz, USA)를 4℃에서 오버나이트로 세이킹(shaking) 처리한 후, HRP가 결합된 2차 항체를 실온에서 2 시간 반응시켰다. 그 후, 1 x TBST로 3 번 세척하고 ECL 반응 kit를 이용하여 밴드를 확인하였다.
각 밴드의 강도(intensity)는 β-actin의 발현을 기준으로 정량하여 β-catenin 발현율을 계산하였다.
도 4에 도시되는 바와 같이, 실시예 7인 호밀, 비쑥, 골든실의 복합추출물을 3% 처리한 군에서 β-catenin이 약 101% 증가하였다. 실시예 1~3의 단일 추출물보다 실시예 4~7의 복합추출물에서 더 높은 발현율을 나타내었으며, 그 중 실시예 7의 복합추출물이 가장 우수한 β-catenin 발현율을 나타냈었다.
[ 제형예 1 : 천연복합추출물을 포함하는 샴푸 조성물의 제조]
본 발명에 따른 조성물의 제형예를 상기 실시예 7이 5 중량% 포함된 탈모완화 및 발모촉진용 조성물은 하기 표의 조성으로 설명하나, 여러 가지 제형으로 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 한다. 본 제형예의 샴푸 조성물은 아래 표 1의 함량에 따른 샴푸(shampoo)를 제조하였다.
성분 제형예 1 (중량%)
실시예 7 3.0
다이소듐이디티에이 0.03
폴리쿼터늄-10 0.1
암모늄라우릴설페이트 40.5
암모늄라우레스설페이트 15.5
코카미도프로필베타인 6.0
프로필렌글라이콜 2.0
소듐크실렌설포네이트 2.0
글라이콜다이스테아레이트 3.0
코카마이드이에이 1.0
라우라마이드이에이 1.0
살리실산 0.13
시메티콘 3.0
방부제 적량
적량
정제수 잔량
100.0
[ 제형예 2 : 천연복합추출물을 포함하는 린스 조성물]
아래 표 2의 함량에 따라 천연복합추출물(실시예 7)을 포함하는 린스 조성물을 제조하였다.
성분 제형예 2 (중량%)
실시예 7 3.0
다이소듐이디티에이 0.02
하이드록시에틸셀룰로오스 0.2
판테놀 0.05
프로필렌글라이콜 1.5
글리세린 2.0
세틸알코올 3.5
스테아릴알코올 1.5
글리세릴스테아레이트에스이 0.5
디메치콘 1.5
방부제 적량
적량
정제수 잔량
100.0
[ 제형예 3 : 천연복합추출물을 포함하는 헤어젤 조성물]
아래 표 3의 함량에 따라 천연복합추출물(실시예 7)을 포함하는 헤어젤 조성물을 제조하였다.
성분 제형예 3 (중량%)
실시예 7 3.0
다이소듐이디티에이 0.05
판테놀 0.1
글리세린 5.0
카보머 0.6
하이드록시에칠셀룰로오스 0.3
에탄올 7.0
폴리옥시에칠렌경화피마자유 1.0
트리에탄올아민 0.6
폴리비닐피롤리돈 5.0
방부제 적량
적량
정제수 잔량
100.0
[ 제형예 4 : 천연복합추출물을 포함하는 헤어토닉 조성물]
아래 표 4의 함량에 따라 천연복합추출물(실시예 7)을 포함하는 헤어토닉 조성물을 제조하였다.
성분 제형예 4 (중량%)
실시예 7 3.0
다이소듐이디티에이 0.02
판테놀 0.5
부틸렌글라이콜 10.0
에탄올 18.0
멘톨 0.03
폴리솔베이트 80 1.0
이미다졸리디닐우레아 0.2
바이오틴 0.1
적량
정제수 잔량
100.0

Claims (6)

  1. 호밀(Secale cereale) 추출물, 비쑥(Artemisia Scoparia) 추출물 및 골든실(Hydrastis Canadensis) 추출물의 혼합추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모완화 및 발모촉진용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 호밀 추출물, 비쑥 추출물 및 골든실 추출물을 1~3:1~3:1~3의 중량비로 혼합하여 포함하는 것을 특징으로 하는 탈모완화 및 발모촉진용 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 혼합추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01 중량% 내지 40.0 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 탈모완화 및 발모촉진용 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 혼합추출물은 용매 추출법, 초임계 추출법 및 초음파 추출법으로 이루어진 군에서 선택된 추출법으로 추출된 것을 특징으로 하는 탈모완화 및 발모촉진용 화장료 조성물.
  5. 제4항에 있어서, 상기 용매 추출법은 물, 탄소수 1-4의 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트 및 부틸아세테이트, 클로로포름, 디에틸에테르, 메틸렌클로라이드, 디클로로메탄 및 헥산으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출용매를 이용하여 추출된 것을 특징으로 하는 탈모완화 및 발모촉진용 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 샴푸, 린스, 트리트먼트, 헤어팩, 헤어젤, 앰플, 헤어토닉, 에센스, 헤어크림, 미스트 및 비누로 이루어진 군에서 선택된 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 탈모완화 및 발모촉진용 화장료 조성물.
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