KR102036357B1 - 비수리 추출물을 포함하는 스트레스성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents
비수리 추출물을 포함하는 스트레스성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 비수리(Lespedeza cuneata) 추출물을 포함하는 스트레스성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 및 스트레스성 질환의 개선을 위한 식품 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 비수리 추출물을 포함하는, 스트레스성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 스트레스성 질환의 개선을 위한 식품 조성물에 관한 것이다.
현대 산업 사회는 구조적으로나 기능적으로 빠르고 복잡하게 변화하고 있다. 뿐만 아니라 개인이 소화하기 어려울 정도의 엄청난 양의 정보가 매일 쏟아지고 있다.
새로운 기술, 새로운 환경에 계속 적응해 나가야 하는 현대인들의 대부분은 많은 신체적· 심리적 부담감을 느끼게 된다. 이런 부담감을 일명 스트레스(stress)라 한다.
신체가 허용할 수 있는 수준의 스트레스는 우리 몸의 적절한 자극제로 작용을 하게 되지만, 허용 범위를 벗어난 강하고도 지속적으로 가해지는 심리적 육체적 스트레스는 당질코르티코이드를 장시간 동안 과량 분비하게 유도한다.
장기간 과량 분비되는 당질코르티코이드는 몸의 면역력을 저하시키므로, 외부 감염에 의한 저항성을 감소시키고, 우리 몸에 다양한 질병을 유발하게 된다. 면역력 감퇴뿐만 아니라 특히 뇌세포 손상 및 재생을 억제하여 불면증, 무기력증, 기억력 감퇴, 우울증 유발은 물론 자살 충동까지 일으킨다.
우울증을 치료하기 위한 치료제로서 1960년대 개발된 삼환계 약물을 필두로 하여 현재는 세로토닌 재흡수 억제제로 알려진 프로작, 졸로푸트, 세로자트, 이팩사, 레메론 등 다양한 종류의 항우울증 치료제가 개발되어 왔다. 또한, 항 우울증 치료제와 더불어 스트레스 반응의 1차 물질인 CRH가 결합하는 CRH 수용체 억제제 개발 연구 또한 많이 이루어지고 있다.
그러나 아직까지 스트레스에 의한 우울증, 신경질환을 완치시킬 수 있는 치료제 개발은 미미한 상태이며, 기존의 항우울제에 잘 반응하지 않거나, 재발률이 높으며, 심한 부작용에 의해 약물복용이 불가능한 환자들도 많은 실정이다.
삼환계 항우울제(tricyclic antidepressants: TCA)인 이미프라민(imipramine), 데시프라민(desipramine)등은 저혈압, 심장기능장애 등의 부작용이 심하게 나타나며, 가장 널리 쓰이는 플루아크서틴(fluoxetine)이나 서트랄린(sertraline) 등의 선택적 세로토닌 재흡수 억제제는 구역, 위장관 출혈 또는 성기능 장애 등을 유발할 수 있다.
또한, 항우울제는 대체로 장기 복용으로 이어지는데, 화학 요법제는 장기 복용에 의한 부작용 및 독성을 나타내는 경우가 매우 빈번하여 인체에 무해하면서도 질병을 효과적으로 치료할 수 있는 새로운 치료제를 천연물로부터 탐색하려는 연구에 관심이 집중되고 있다.
그러나, 천연 소재로서 부작용이 없고 안전성이 인정되면서 우울증에 대한 개선 또는 치료효과가 우수한 치료제의 제시는 아직도 미흡한 실정이며, 이에 따라 천연 추출물을 이용한 치료제에 대한 지속적인 요구를 충족시키기 위한 새로운 기술의 개발이 요구되고 있다.
본 발명의 목적은 비수리(Lespedeza cuneata) 추출물을 포함하는 스트레스성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 비수리 추출물을 포함하는 스트레스성 질환의 개선을 위한 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 일 측면에 따르면, 비수리(Lespedeza cuneata) 추출물을 유효성분으로 포함하는 스트레스성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물이 제공된다.
일 실시예에 있어서, 상기 스트레스성 질환은 우울증(depressive disorder), 수면장애(sleep disturbance), 및 불안장애(anxiety disorder)로 이루어진 군으로부터 하나 이상 선택될 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올, 또는 이들의 혼합 용매로 추출될 수 있다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 비수리(Lespedeza cuneata) 추출물을 유효성분으로 포함하는 스트레스성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품이 제공된다.
상기 건강기능식품은 정제, 과립, 분말, 캅셀, 액상의 용액 및 환으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화될 수 있다.
본 발명의 비수리 추출물은 우수한 항스트레스 및 항우울 효과를 나타냄과 동시에 운동 기능에는 영향을 미치지 않아 안전성이 우수하므로 스트레스성 질환에 대한 치료제 및 개선을 위한 식품으로 활용될 수 있다.
본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
도 1은 보행 활동량을 평가한 일반 운동 활성 검사 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 강제수영 검사(FST)에서 약물 투여에 따른 항우울 활성을 평가한 것이다.
도 3은 꼬리 매달기 검사(TST)에서 약물 투여에 따른 항우울 활성을 평가한 것이다.
도 2는 강제수영 검사(FST)에서 약물 투여에 따른 항우울 활성을 평가한 것이다.
도 3은 꼬리 매달기 검사(TST)에서 약물 투여에 따른 항우울 활성을 평가한 것이다.
본 명세서에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다. 또한, 특정한 경우는 출원인이 임의로 선정한 용어도 있으며, 이 경우 해당되는 발명의 설명 부분에서 상세히 그 의미를 기재할 것이다. 따라서 본 발명에서 사용되는 용어는 단순한 용어의 명칭이 아닌, 그 용어가 가지는 의미와 본 발명의 전반에 걸친 내용을 토대로 정의되어야 한다.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
수치 범위는 상기 범위에 정의된 수치를 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최대의 수치 제한은 낮은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 낮은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최소의 수치 제한은 더 높은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 높은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 수치 제한은 더 좁은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼, 더 넓은 수치 범위 내의 더 좋은 모든 수치 범위를 포함할 것이다.
이하, 본 발명의 실시예를 상세히 기술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 한정되지 아니함은 자명하다.
본 발명의 일 측면은 비수리(Lespedeza cuneata) 추출물을 유효성분으로 포함하는 스트레스성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 “스트레스성 질환(stress disease)”은 스트레스로 통용되는 내외부 자극에 의해 자율신경계와 신경내분비계의 기능에 변화가 발생하고, 이러한 변화의 정도가 허용치를 초과하거나 장기간 지속되는 경우 발병할 수 있는 질환을 의미한다.
상기 “스트레스성 질환”은 스트레스에 기인한 정신 질환, 예를 들어, 무기력증, 우울, 불안 장애, 권태뿐만 아니라 신체적 증상, 예를 들어 피로감, 소화 불량, 호흡 곤란 등을 모두 포함할 수 있으며, 예컨대 우울증(depressive disorder), 수면장애(sleep disturbance), 또는 불안장애(anxiety disorder)일 수 있다.
최근 연구결과에 따르면, 스트레스성 질환도 뇌신경 세포 손상에 의해 발병할 수 있으며, 상기 조성물은 우수한 뇌신경 세포 보호 및 재생 효과로 인해 스트레스성 질환에 대한 예방 또는 치료 효과가 우수하다.
상기 “예방”은 동물의 병리학적 세포의 발생 또는 세포의 손상, 소실의 정도의 감소를 의미한다. 예방은 완전할 수 있으며 또는 부분적일 수도 있다. 이 경우에는 개체 내의 병리학적 세포의 발생 또는 신경세포의 사멸이나 손실 등에 의한 스트레스성 질환의 발병 가능성이 감소하는 현상을 의미할 수 있다.
상기 “치료”는 스트레스성 질환의 하나 이상의 증상을 개선하거나, 증상의 진행을 저지하는 것을 의미하며, 통상적으로 사용되는 치료의 의미를 포괄할 수 있다.
상기 “비수리(Lespedeza cuneata)”는 콩과에 딸린 여러 해살이 식물로서 삼엽초, 사퇴초라고도 불리운다. 상기 비수리는 여러 가지 남성 및 여성의 기능성 질병, 즉 양기부족, 조루, 유정, 음위증 등의 치료에 뛰어난 효력이 있다고 전해지며, 특히 신장이 허약한 노인들의 양기 부족에 탁월한 효과가 있다고 알려져 있다.
상기 비수리의 잎, 뿌리, 줄기에는 플라보노이드, 피니톨, 페놀, 탄닌, 시토스테롤 등이 들어 있는데, 이들 성분은 염증을 없애고 가래를 삭이며 황색포도상구균, 폐렴상구균, 연쇄상구균, 카타르구균 등을 사멸시키거나 억제하는 것으로 알려져 있다(김태정, 한국의 자원식물, 서울대학교 출판부, 1996; 최진규, 약이 되는 우리 풀, 꽃, 나무, 한문화, 2001).
상기 추출물 공정에 있어서 용매의 종류는 특별히 한정되지 않으며, 필요에 따라 용매를 달리할 수 있다. 또한, 상기 추출은 상기 용매를 사용하여 냉침, 온침, 가열 등 당해 기술 분야의 통상적인 방법이 사용될 수 있다.
상기 추출용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, C1 내지 C4의 무수 또는 저급 알코올, 상기 물과 저급 알코올의 혼합 용매, 아세톤, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 이상일 수 있다.
상기 추출물 용매로 에탄올을 사용하는 경우, 안정성을 높일 수 있을 뿐만 아니라, 인체에 무해하기 때문에 식품이나 의약품의 조성물로 사용하기에 우수한 적합성을 나타낼 수 있으며, 안정성 확보를 위한 엄격한 공정 관리와 같은 비용 증가가 발생하지 않으므로 경제적 효과 역시 향상될 수 있다.
상기 추출물은 상기 비수리 잎 뿐만 아니라 뿌리, 줄기 등 모든 부위를 사용하여 수득할 수 있다. 또한, 상기 추출물은 상기 각각의 해당 식물의 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 추출될 수 있고, 식물 조직 배양물로부터 수득할 수도 있다.
상기 추출 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행하거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행할 수 있다.
상기 추출물은 부유하는 고체 입자를 제거하기 위해 여과, 예를 들어 나일론 등을 이용해 입자를 걸러내거나 냉동여과법 등을 이용해 여과한 후, 그대로 사용하거나 이를 동결건조, 열풍건조, 분무건조 등을 이용해 건조시켜 사용할 수 있다.
상기 약학적 조성물은 사용형태에 따라 과립제, 산제, 시럽제, 액제, 현탁제, 전제, 침제, 정제, 좌제, 주사제, 주정제, 캅셀제, 환제, 연질 또는 경질 젤라틴 캅셀 등일 수 있다. 상기 약학적 조성물은 당해 기술 분야의 공지된 적절한 방법을 사용하여 또는 레밍턴의 문헌(Remington's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 제형화 될 수 있다.
상기 약학적 조성물의 제조에 있어서, 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
상기 약학적 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸 히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출액에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다.
경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당될 수 있으며, 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 약학적 조성물의 투여량은 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 적절히 선택 또는 변형될 수 있다. 바람직하게는 상기 약학적 조성물은 비수리 추출물의 양을 기준으로 1일 0.0001 내지 1000mg/kg으로, 보다 효과적이기 위해서는 0.01 내지 100mg/kg으로 투여될 수 있다. 투여횟수는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있으나, 상기 투여량과 투여횟수로 인해 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 다른 측면에 따르면, 상기 조성물을 유효성분으로 포함하는 스트레스성 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품이 제공된다. 구체적으로, 상기 비수리 추출물은 항스트레스 및 항우울 효과를 나타내며, 특히 뇌신경 세포 손상에 의해 유발되는 스트레스를 효과적으로 완화할 수 있다.
상기 식품은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미한다. 상기 식품은 육류, 스낵류, 낙농제품, 음료수 등을 예시할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니며, 통상적인 건강기능식품을 모두 포함하는 개념으로 이해될 수 있다.
상기 식품은 추가로 특수영양식품(조제유류, 영유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(스넥류), 유가공품(발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(과실, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(라면스프 등)을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
상기 건강기능식품은 건강기능식품에 관한 법률에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, 상기 기능성은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미할 수 있다.
상기 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 상기 식품 첨가물은 다른 규정이 없는 한 식품의약품안전처에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 적합성 여부를 판단할 수 있다.
상기 식품 첨가물 공전에 기재된 품목은 예컨대 케톤류, 글리신, 구연산칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물, 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류를 들 수 있다.
상기 건강기능식품은 스트레스성 질환 개선을 위한 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있으며, 예컨대, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성 보조 식품, 식품 첨가제 등에 사용될 수 있다.
상기 건강기능식품은 스트레스성 질환 개선을 목적으로 전체 중량 대비 1.0 내지 30.0 중량%의 비수리 추출물을 포함할 수 있다. 상기 비수리 추출물의 함량이 1.0 중량% 미만이면 스트레스성 질환 개선 효과가 충분히 구현되지 않을 수 있고 30.0 중량% 초과이면 제품 본연의 품질이 구현되지 않거나 비용 효율이 저하될 수 있다.
또한, 상기 건강기능식품은 스트레스성 질환 개선을 목적으로 정제, 과립, 분말, 캅셀, 액상의 용액 및 환으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조 및 가공될 수 있다.
구체적으로 상기 정제 형태의 건강기능식품은 상기 비수리 추출물, 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와의 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축 성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형하여 제조할 수 있다. 또한, 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수 있으며, 필요에 따라 적당한 제피제로 제피할 수도 있다.
상기 캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질캅셀제는 통상의 경질캅셀에 상기 비수리 추출물 및 부형제 등의 첨가제와의 혼합물 또는 그의 입상물 또는 제피한 입상물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질캅셀제는 상기 비수리 추출물, 및 부형제 등의 첨가제와의 혼합물을 젤라틴 등 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 솔비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.
상기 환 형태의 건강기능식품은 상기 비수리 추출물, 부형제, 결합제, 붕해제 등의 혼합물을 적당한 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 적당한 제피제로 제피를, 또는 전분, 탈크 또는 적당한 물질로 환의를 입힐 수도 있다.
상기 과립형태의 건강기능식품은 상기 비수리 추출물, 부형제, 결합제, 붕해제 등의 혼합물을 적당한 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.
또한, 상기 부형제, 결합제, 붕해제, 활택제, 교미제, 착향제 등에 대한 용어 정의는 당업계에 공지된 문헌에 기재된 것으로 그 기능 등이 동일 내지 유사한 것들을 포함할 수 있다.
이하, 첨부된 도면을 참고하여 본 발명의 실시예에 관하여 상세히 서술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 제한되지 아니함은 자명하다.
제조예 : 비수리 추출물의 제조
물-알코올 혼합용매를 이용한 열수 추출법
경북 영천에서 생산된 비수리 450g을 건조 및 분쇄 후 7리터의 30% 에틸 알코올을 가해 교반하고, 80 내지 90℃를 유지하는 추출온도에서 3시간 동안 환류 추출하였다. 여액을 분리하고 55~65℃에서 추출물을 감압 농축한 후, 동결 건조시켜 분말 엑기스 23.4g를 수득하였다.
실험예 1 : 실험 동물의 준비
7 주령의 C57BL/6 수컷 마우스를 오리엔트바이오 주식회사(경기도 성남시 중원구 상대원동 143-1번지)에서 공급받아 동물 사육실(경희의료원)에서 1 주일 이상 사육하고 적응시켰다. 물과 사료는 자유롭게 섭취할 수 있게 하였고, 온도(23 ± 2 ℃), 습도(55 ± 10 %) 및 명암 주기는 12시간 간격으로 자동조절하였다. 각 실험에 1 군당 10마리의 마우스를 사용하였다.
실험예 2 : L-AAA 유도 우울증 동물모델 제작
별아교세포(astrocyte)에 특이적 독성 물질인 L-AAA를 마우스 뇌의 변연전 피질(prelimbic cortex)에 주입하면 지역 특이적으로 별아교세포를 없앰으로써 우울증이 유발된다는 보고에 따라 우울증 마우스 모델을 제작하였다(Banasr M, Duman RS. Glial loss in the prefrontal cortex is sufficient to induce depressive-like behaviors. Biol Psychiatry 2008 Nov 15; 64 (10): 863 -870).
L-AAA를 주입하기 전에 가이드 캐뉼라(guide cannula)를 삽입 고정한 후, L-AAA를 대뇌 반구 양쪽에 총 2회 투입하여 우울증 모델을 제작하였다.
설치 후 1주일의 회복시간 뒤에, 음성 대조군(Negative control), 실험군 실험군에 0.1μL/min의 속도로 6분간 하루 1번씩 2일간 L-AAA(100 μg/μl; Sigma)를 주입하였다.
실험군에 비수리 추출물 300mg/kg(Exp 1), 600mg/kg(Exp 2)을 각각 투여하였으며, 모의 대조군(Sham control) 군에는 같은 용량의 PBS(phosphate-buffered saline)를 주입하였다.
실험예 3 : 일반 운동 활성 검사(Open field test)
마우스의 기본적인 운동성 및 움직임을 평가하기 위하여 모의 대조군(Sham control), 음성 대조군(Negative control), 양성 대조군(Positive control), 실험군 각각에 마우스 10마리씩 배정하고 일반 운동 활성 검사를 수행하였다.
마우스를 50 × 50 × 50 ㎝의 흰색 아크릴 박스에 넣고 영상추적시스템(video tracking system, smart v.2.5.21)을 이용하여 10분 동안 행동을 측정하였으며, Open field를 9등분하여 가운데 영역을 central zone으로 설정하였다. 이후 각 군의 자발 운동량을 이용한 보행 활동량을 측정하였다(도 1)
도 1을 참조하면, 모의 대조군, 음성 대조군, 양성 대조군, 실험군 모두에서 유의미한 차이가 나타나지 않았다. 상기 결과는 약물 투여로 인한 보행 활동량에는 변화가 없음을 의미하는 것으로, 약물 투여로 인해 운동 기능에 문제가 발생하지 않았으며, 특히 비수리 추출물이 보행 활동량에 영향을 미치지 않았다. 이를 통해 후속 실험 결과에 대한 신뢰도를 확보하였다.
실험예 4 : 강제수영 검사(Forced swim test; FST)
마우스 강제수영 검사를 통해 비수리 추출물의 항우울 활성을 확인하였다.
지름 20 cm, 깊이 35 cm의 실린더에 24 ± 1℃의 물을 20cm 채워서 마우스의 꼬리가 실린더 바닥에 닿지 않게 하였다. 마우스에 제조예의 시료 또는 대조군을 각각 투여하고 1시간 후 마우스를 실린더에 넣은 후, 6분 동안 디지털카메라를 사용하여 녹화하였다.
강제수영을 하는 마우스는 활동과 부동자세(Immobility time)를 교대로 보이는데, 항우울제는 용량 의존적으로 부동자세를 보이는 시간(부동시간)을 감소시키므로, 부동시간을 측정함으로써 항우울 활성을 확인하였다.
기록된 동영상에서 초기 2분을 제외한 나머지 4분 동안 마우스가 머리만 수면 위로 내어 놓고 움직임 없이 가만히 있는 시간을 측정하였다(도 2).
도 2를 참조하면, 4분 동안 마우스가 움직이지 않는 시간(Immobility time)은 모의 대조군 70.8±14.6, 음성 대조군 154.1±23.4, 실험군(Exp 1) 52.7±13.7, 실험군(Exp 2) 54.8±26.6 이었으며, 제조예의 시료를 투여한 경우 부동시간이 현저히 감소하였다.
실험예 5 : 꼬리 매달기 검사(Tail suspension Test; TST)
비수리 추출물의 항우울 효과를 확인하기 위하여 마우스를 대상으로 꼬리 매달기 검사를 수행하였다.
구체적으로, 높이 45 cm의 모서리에 접착력이 강한 테이프를 마우스의 꼬리 끝 1 내지 2 cm에 붙여서 마우스를 매달아 마우스의 움직이는 시간 측정을 통해 항우울 활성을 평가하였다.
디지털카메라를 사용하여 6분 동안 마우스의 움직임을 촬영하였으며, 6분 동안 마우스가 움직인 시간을 측정하였다(도 3)
도 3을 참조하면, 4분 동안 마우스가 움직이지 않는 시간(Immobility time)은 모의 대조군 133.2±13.0, 음성 대조군 192.4±1.6, 실험군(Exp 1) 132.0±17.6, 실험군(Exp 2) 134.3±3.8이었으며, 제조예의 시료를 투여한 경우 부동시간이 현저히 감소하였다.
상기 결과는 상기 비수리 추출물이 항스트레스 및 항우울 효과를 나타냄으로써 스트레스성 질환, 특히 우울증 및 불안 장애에 대해 치료 및 개선 효과를 나타낼 수 있음을 시사한다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.
본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
Claims (6)
- 비수리(Lespedeza cuneata) 추출물을 유효성분으로 포함하는 우울증(depressive disorder)의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 삭제
- 제1항에 있어서,
상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올, 또는 이들의 혼합 용매로 추출된 약학적 조성물. - 비수리(Lespedeza cuneata) 추출물을 유효성분으로 포함하는 우울증(depressive disorder)의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
- 삭제
- 제4항에 있어서,
정제, 과립, 분말, 캅셀, 액상의 용액 및 환으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화된 건강기능식품.
Priority Applications (1)
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---|---|---|---|
KR1020170181804A KR102036357B1 (ko) | 2017-12-28 | 2017-12-28 | 비수리 추출물을 포함하는 스트레스성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
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KR1020170181804A KR102036357B1 (ko) | 2017-12-28 | 2017-12-28 | 비수리 추출물을 포함하는 스트레스성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
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KR20190079816A KR20190079816A (ko) | 2019-07-08 |
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WO2018225882A1 (ko) | 2017-06-05 | 2018-12-13 | 주식회사 두한바이오 | 야관문과 호로파 추출물을 포함하는 남성갱년기 증상 중 발기능 개선 및 전립선 비대증 예방 및 치료용 약학 조성물 |
-
2017
- 2017-12-28 KR KR1020170181804A patent/KR102036357B1/ko active IP Right Grant
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WO2018225882A1 (ko) | 2017-06-05 | 2018-12-13 | 주식회사 두한바이오 | 야관문과 호로파 추출물을 포함하는 남성갱년기 증상 중 발기능 개선 및 전립선 비대증 예방 및 치료용 약학 조성물 |
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