KR102003354B1 - 꼬리겨우살이 추출물을 유효성분으로 포함하는 항당뇨용 조성물 - Google Patents

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Abstract

꼬리겨우살이(Loranthus tanakae Franch. & Sav.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항당뇨용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 꼬리겨우살이 추출물은 α-글루코시데이즈를 억제하는 효과가 다른 겨우살이 종에 비하여 뛰어나므로, 항당뇨 활성을 나타내는 약학적 조성물의 유효성분으로 제공할 수 있다.

Description

꼬리겨우살이 추출물을 유효성분으로 포함하는 항당뇨용 조성물{Composition comprising Spike mulberry mistletoe extract for treating diabetes}
꼬리겨우살이(Loranthus tanakae Franch. & Sav.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항당뇨용 조성물에 관한 것이다.
당뇨병은 인슐린의 분비량이 부족하거나 정상적인 기능이 이루어지지 않는 대사질환의 일종으로, 소변에서 포도당을 배출하고, 고혈당으로 인한 여러 합병증을 유발하는 질환이다. 당뇨병의 증상은 다뇨증(소변의 양이 늘어나고, 소변을 자주 보는 증상), 다음증(물을 많이 마시는 증상), 체중감소가 특징적이며 만성적으로 고혈당 상태가 유지되면 발육이 저하되고 감염이 쉽게 발생한다.
당뇨병은 제1형과 제2형으로 구분되는데, 제1형 당뇨병은 췌장 베타세포가 자가 면역반응에 의해 파괴되어 나타나며, 제2형 당뇨병은 인슐린 저항성과 췌장 베타세포 기능저하로 인한 인슐린 분비장애에 의해 발병한다. 여기서 췌장의 베타세포(pancreatic β-cell)는 랑게르한스섬의 세포 가운데 하나로, 인슐린을 분비하여 혈관에 존재하는 포도당이 세포 안으로 유입되도록 촉진하는 역할을 한다.
이 췌장 베타세포의 기능이 저하되면 인슐린의 분비가 감소하고, 혈액 내 포도당이 제대로 처리되지 못해 혈당이 증가하므로, 당뇨병을 유발하게 되는 것이다.또 인슐린 저항성이란 인슐린의 기능이 떨어져 세포가 포도당을 효과적으로 연소하지 못하는 것을 말하는 것으로, 복부 비만, 운동 부족, 열량 과잉 섭취 등으로 인해 인슐린 수용체가 감소하거나, 인슐린에 대한 항체생성, 또는 인슐린 수용체에 대한 항체가 생성되어 발생하는 것으로 추측하고 있다.
당뇨병은 완치가 어려운 만성질환으로, 합병증이 따라올 수 있는데 그 대표적인 것이 망막병증, 신장병증, 신경병증이다. 또한 관상동맥질환, 말초동맥질환, 뇌혈관질환과 같은 심혈관계 질환의 위험성이 높아진다. 당뇨병은 이처럼 신체 중요 부위에 합병증을 유발하고 이로 인한 사망률을 증가시킨다.
당뇨병의 치료는 식이요법, 운동요법과 함께 경구혈당강하제(인슐린 분비 촉진제, 바이구아니드, 알파 글루코시다제 억제, 티아졸리디네디온 등) 투여 또는 인슐린 주입 등이 있다. 인슐린 분비 촉진제는 다시 설폰요소제와 비설폰요소제로 나눌 수 있다. 약물을 복용하는 경우 부작용 및 내성이 끊임없는 문제가 되기 때문에, 당뇨병 치료에 있어 식이가 가능하며 부작용이 적은 천연물을 이용하여 당뇨병을 치료하기 위한 연구가 필요하다.
겨우살이(mistletoe)는 유럽과 동양에서 오랜 세월 동안 고혈압, 당뇨, 류마티즘, 종양 등을 치유하기 위해 민간요법상의 약재로 사용되어 왔으며, 유럽에서는 건강과 축복을 가져다주는 신비의 식물로 추앙 받고 있다. 세계 전역에는 30속 1,500종의 식물이 있는 것으로 알려져 있으며, 유럽지역에 서식하는 겨우살이 중에서 민간 약재로 사용되었던 것은 주로 비스쿰 알붐 로란테시아(Viscum album loranthacea )이며, 한국 지역에서 서식하는 것과 분류학상 구별된다(Khwaja TA 등, 1986, Oncology 43 Suppl 1:42-50; Khawaja T.A. 등, 1980. Experimentia, 36: 599-600).
유럽지역에 서식하는 겨우살이는 체액성 및 세포성 면역체계를 자극하는 면역 증강 효과가 있는 것이 인정되었고, 동물 및 인간에 대한 임상 실험 결과, 종양세포에 대하여 직ㆍ간접적으로 대응하는 대식세포 및 자연 살해 세포의 활성을 증가시킴으로써 종양세포의 성장을 억제하고, 암환자의 생존율을 증진시키는 효과가 있는 것으로 보고되었다.
국내에 자생하는 겨우살이류는 단향과에 속하는 겨우살이(Viscum album var. coloratum), 붉은겨우살이(V. album for. rubroauranticum)와 꼬리겨우살이과에 속하는 참나무겨우살이(Taxillus yadoriki), 꼬리겨우살이(Loranthus tanakae) 및 동백나무겨우살이(Korthalsella japonica) 등 이다. 이들은 자생지가 구별되므로 서로 상이한 종 임은 분명하다. 국내에서 주로 약재로 이용 및 연구되는 겨우살이는 겨우살이(Viscum album var. coloratum )이며, 그 외 종에 대해서는 그 항당뇨를 비롯한 여러 효과에 대한 연구가 미비한 실정이다. 특히, 꼬리겨우살이( Loranthus tanakae Franch . & Sav .) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항당뇨용 조성물에 대하여는 현재까지 연구되거나 보고된 바가 없다.
따라서, 부작용이 적은 당뇨병 치료용 조성물에 대한 필요성이 높아짐에 따라, 본 발명자들은 국내 자생 겨우살이들 중에서 안정적인 항당뇨용 조성물을 추출하기 위해 예의 노력한 결과, 꼬리겨우살이(Loranthus tanakae Franch . & Sav .) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항당뇨용 조성물에 대한 본 발명을 완성하였다.
이에 본 발명자들은, 국내 자생 겨우살이들 중에서 안정적인 항당뇨용 조성물을 추출하기 위해 예의 노력한 결과, 꼬리겨우살이(Loranthus tanakae Franch. & Sav.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항당뇨용 조성물에 대한 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 당뇨의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 또 다른 목적은 당뇨의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 꼬리겨우살이(Loranthus tanakae Franch. & Sav.) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항당뇨 활성을 나타내는 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 실시예에서, 상기 꼬리겨우살이는 신갈나무(Quercus mongolica)를 기주나무로 하여 서식하는 것일 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에서, 상기 꼬리겨우살이 추출물은 물, C1 내지 C2의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출하는 것일 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시예에서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 꼬리겨우살이(Loranthus tanakae Franch. & Sav.) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항당뇨 활성을 나타내는 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 바람직한 실시예에서, 상기 꼬리겨우살이는 신갈나무(Quercus mongolica)를 기주나무로 하여 서식하는 것일 수 있다.
따라서, 본 발명은 본 발명은 꼬리겨우살이(Loranthus tanakae Franch. & Sav.) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항당뇨 활성을 나타내는 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 꼬리겨우살이 추출물은 알파-글루코시데이즈(α-glucosidase) 활성을 저해시키는 효과가 다른 겨우살이 종에 비하여 뛰어나므로, 항당뇨 활성을 나타내는 약학적 조성물로 제공할 수 있다.
도 1은 겨우살이 추출물의 항산화 효과를 확인한 결과이다 :
도 1a는 본 실험에 사용된 겨우살이 시료를 나타내며; 및
도 1b는 각 겨우살이 시료들의 항산화 활성을 나타낸다.
도 2는 꼬리겨우살이 추출물의 농도별 항산화 활성을 확인한 결과이다.
도 3은 각 겨우살이 시료들의 항당뇨 활성을 나타낸다.
도 4는 꼬리겨우살이 추출물의 농도별 항당뇨 활성을 확인한 결과이다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
상술한 바와 같이, 국내에서 주로 약재로 이용 및 연구되는 겨우살이는 겨우살이(Viscum album var. coloratum)이며, 그 외 종에 대해서는 그 항당뇨를 비롯한 여러 효과에 대한 연구가 미비한 실정이다. 특히, 꼬리겨우살이(Loranthus tanakae Franch. & Sav.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항당뇨용 조성물에 대하여는 현재까지 연구되거나 보고된 바가 없다.
본 발명에 따른 꼬리겨우살이 추출물은 알파-글루코시데이즈(α-glucosidase) 활성을 저해시키는 효과가 다른 겨우살이 종에 비하여 뛰어나므로, 항당뇨용 조성물로 효과적이다.
따라서, 본 발명은 꼬리겨우살이( Loranthus tanakae Franch . & Sav .) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항당뇨 활성을 나타내는 약학적 조성물로 제공할 수 있다.
본 발명의 꼬리겨우살이는 평남, 강원도, 충북, 경북, 경남, 제주도 산지의 낙엽활엽수에 기생하며, 전국에 널리 분포하지만 개체수가 적은 희귀수종이다. 또한, 기주나무는 신갈나무(Quercus mongolica)인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 꼬리겨우살이 추출물은 하기의 단계들을 포함하는 제조방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 이에 한정되지 않는다:
1) 꼬리겨우살이에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
2) 단계 1)의 추출물을 여과하는 단계; 및
3) 단계 2)의 여과한 추출물을 감압 농축한 후 건조하는 단계.
상기 방법에 있어서, 단계 1)의 꼬리겨우살이는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다. 상기 꼬리겨우살이는 꼬리겨우살이의 뿌리, 꽃, 줄기, 잎 또는 열매가 모두 이용 가능하며, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 꼬리겨우살이 추출물은 물, C1 내지 C2의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출하는 것이 바람직하며, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
상기 방법에 있어서, 꼬리겨우살이 추출물의 추출 방법으로는 여과법, 열수 추출, 침지 추출, 환류냉각 추출 및 초음파추출 등 당업계의 통상적인 방법을 이용할 수 있다. 상기 추출용매는 건조된 꼬리겨우살이 분량의 2 내지 20 배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하다. 추출온도는 20 내지 80인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 추출시간은 10 내지 100 시간인 것이 바람직하며, 구체적으로 24 내지 96 시간이 더욱 바람직하고, 보다 구체적으로 72 시간이 가장 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 3)의 감압농축은 진공감압농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
본 발명의 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 겨우살이 추출물을 제조하여 그 항산화 활성을 측정하였고 그 결과 꼬리겨우살이의 항산화 효능이 다른 겨우살이 종에 비하여 월등함을 확인하였다(도 1).
또한, 본 발명자들은 꼬리겨우살이 추출물의 농도에 따라 항산화 활성이 증가하는지 여부를 측정한 결과 농도가 증가할수록 꼬리겨우살이 추출물의 항산화 활성이 증가함을 확인하였다(도 2).
본 발명의 또 다른 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 겨우살이 추출물의 항당뇨 활성을 측정하였고 그 결과 꼬리겨우살이의 항당뇨 효능이 다른 겨우살이 종에 비하여 월등함을 확인하였다(도 3).
또한, 본 발명자들은 꼬리겨우살이 추출물의 농도에 따라 항당뇨 활성이 증가하는지 여부를 측정한 결과 농도가 증가할수록 꼬리겨우살이 추출물의 항당뇨 활성이 증가함을 확인하였다(도 4).
따라서, 본 발명의 꼬리겨우살이 추출물은 항당뇨 활성이 있으며, 다른 겨우살이 추출물의 항당뇨 활성보다 월등하므로, 꼬리겨우살이 추출물을 유효성분으로 포함하는 항당뇨 활성을 갖는 약학적 조성물로서 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 상기 조성물을 제형화할 경우에는 하나 이상의 완충제(예를 들어, 식염수 또는 PBS), 항당뇨제, 정균제, 킬레이트화제(예를 들어, EDTA 또는 글루타치온), 충진제, 증량제, 결합제, 아쥬반트(예를 들어, 알루미늄 하이드록사이드), 현탁제, 농후제 습윤제, 붕해제 또는 계면활성제, 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분(옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분, 감자 전분 등 포함), 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose), 덱스트로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨 말티톨, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오즈 및 하이드록시프로필메틸-셀룰로즈 또는 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 예컨대, 활성성분을 고체 부형제와 배합한 다음 이를 분쇄하고 적합한 보조제를 첨가한 후 과립 혼합물로 가공함으로써 정제 또는 당의정제를 수득할 수 있다.
또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 또는 보존제 등이 포함될 수 있다. 또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해제로 첨가할 수 있으며, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제, 동결건조제제 또는 좌제 등이 포함된다. 비수성용제 및 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구로 투여될 수 있으며, 비경구 투여시 피부외용; 복강내, 직장, 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 주사하는 주사제; 경피 투여제; 또는 비강 흡입제의 형태로 당업계에 공지된 방법에 따라 제형화할 수 있다.
상기 주사제의 경우에는 반드시 멸균되어야 하며 박테리아 및 진균과 같은 미생물의 오염으로부터 보호되어야 한다. 주사제의 경우 적합한 담체의 예로는 이에 한정되지는 않으나, 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 이들의 혼합물 및/또는 식물유를 포함하는 용매 또는 분산매질일 수 있다. 보다 바람직하게는, 적합한 담체로는 행크스 용액, 링거 용액, 트리에탄올 아민이 함유된 PBS (phosphate buffered saline) 또는 주사용 멸균수, 10% 에탄올, 40% 프로필렌 글리콜 및 5% 덱스트로즈와 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 상기 주사제를 미생물 오염으로부터 보호하기 위해서는 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르빈산, 티메로살 등과 같은 다양한 항균제 및 항진균제를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 주사제는 대부분의 경우 당 또는 나트륨 클로라이드와 같은 등장화제를 추가로 포함할 수 있다.
경피 투여제의 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태가 포함된다. 상기에서 경피 투여는 약학 조성물을 국소적으로 피부에 투여하여 약학 조성물에 함유된 유효한 양의 활성성분이 피부 내로 전달되는 것을 의미한다.
흡입 투여제의 경우, 본 발명에 따라 사용되는 추출물은 적합한 추진제, 예를 들면, 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 다른 적합한 기체를 사용하여, 가압 팩 또는 연무기로부터 에어로졸 스프레이 형태로 편리하게 전달 할 수 있다. 가압 에어로졸의 경우, 투약 단위는 계량된 양을 전달하는 밸브를 제공하여 결정할 수 있다. 예를 들면, 흡입기 또는 취입기에 사용되는 젤라틴 캡슐 및 카트리지는 화합물, 및 락토즈 또는 전분과 같은 적합한 분말 기제의 분말 혼합물을 함유하도록 제형화할 수 있다. 비경구 투여용 제형은 모든 제약 화학에 일반적으로 공지된 처방서인 문헌(Remington's Pharmaceutical Science, 15th Edition, 1975. Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania 18042, Chapter 87: Blaug, Seymour)에 기재되어 있다.
본 발명의 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 즉, 본 발명의 조성물의 총 유효량은 단일 투여량(single dose)으로 환자에게 투여될 수 있으며, 다중 투여량(multiple dose)으로 장기간 투여되는 분할 치료 방법(fractionated treatment protocol)에 의해 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도에 따라 그 범위가 다양하다. 일일 투여량으로는, 비경구 투여 시 꼬리겨우살이 추출물을 기준으로 하루에 체중 1 kg당 바람직하게 0.01 내지 50 mg, 더 바람직하게는 0.1 내지 30 mg의 양으로 투여되도록, 그리고 경구 투여 시는 본 발명의 꼬리겨우살이 추출물을 기준으로 하루에 체중 1 kg당 바람직하게 0.01 내지 100 mg, 더 바람직하게는 0.01 내지 10 mg의 양으로 투여되도록 1 내지 수회에 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 또한 꼬리겨우살이 추출물을 유효성분으로 포함하는 외용제의 제형으로 제공할 수 있다. 본 발명의 항당뇨용 조성물을 피부외용제로 사용하는 경우, 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항당뇨제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 유화제, 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 활성제, 친유성 활성제 또는 지질 소낭 등 피부 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
본 발명의 항당뇨용 조성물이 피부 외용제로 제공될 경우, 이에 제한되는 것은 아니나, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제 등의 제형일 수 있다.
또한, 본 발명은 꼬리겨우살이( Loranthus tanakae Franch . & Sav .) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 항당뇨 활성을 나타내는 건강기능식품을 제공할 수 있다.
본 발명의 꼬리겨우살이는 신갈나무(Quercus mongolica)를 기주나무로 하여 서식하는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 꼬리겨우살이 추출물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 드링크제, 육류, 소시지, 빵, 비스킷, 떡, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 알코올 음료 및 비타민 복합제, 유제품 및 유가공 제품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함한다.
본 발명의 꼬리겨우살이 추출물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 90 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명의 화합물을 함유하는 것 외에는 다른 성분에 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.
상기 외에 본 발명의 꼬리겨우살이 추출물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 꼬리겨우살이 추출물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 꼬리겨우살이 추출물 100 중량부 당 0.1 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시 예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
겨우살이 추출물 제조
<1-1> 꼬리겨우살이 (Loranthus tanakae Franch. & Sav.) 추출물 제조
본 발명의 꼬리겨우살이 추출물을 제조하기 위하여 에탄올을 추출용매로 사용하여 꼬리겨우살이 에탄올 추출물을 제조하였다.
구체적으로, 본 연구에 사용된 꼬리겨우살이 시료는 신갈나무(Quercus mongolica)를 기주나무로 하여 서식하며 홍천에서 수집하였다. 국립산림과학원 산림약용자원 연구소에서 동정한 파쇄된 시료 10 g에 70% 에탄올 200 ㎖을 각각 첨가하여 상온에서 48 시간 교반한 후 추출하였다. 추출 후 여과지(filter paper;Whatman NO. 2, Maidstone, UK)로 여과하여 40 ℃ 이하의 중탕에서 감압 환류 냉각장치(N-1110S, EYELA, Tokyo, JAPAN)로 농축한 후 동결건조하였다. 모든 시료는 실험 전까지 80 ℃ 냉동 보관하였으며, 디메틸설폭사이드(dimethyl sulfoxide, DMSO)에 용해하여 실험에 사용하였다. 회수율은 15.7% 이다.
<1-2> 겨우살이 추출물 제조
본 발명의 겨우살이 추출물을 제조하기 위하여 에탄올을 추출용매로 사용하여 겨우살이 에탄올 추출물을 제조하였다.
구체적으로, 도 1a에 나타난 바와 같이, 본 연구에 사용된 겨우살이 시료는 제주도, 덕유산, 지리산에서 수집한 붉은겨우살이(Viscum album for rubroaurantiacum ), 겨우살이(Viscum album var. coloratum), 동백나무겨우살이(Korthalsella japonica ( Thunb .) Engl) 및 참나무겨우살이(Taxillus yadoriki ( Siebold ) Danser)이다. 기주나무는 각각 서어나무(Carpinus laxiflora), 졸참나무(Quercus serrata), 녹나무(Cinnamomum camphora), 상수리나무(Quercus acutissima Carruth), 감탕나무(Ilex integra Thunb .), 생달나무(Cinnamomum yabunikkei H. Ohba), 동백나무(Camellia japonica L.), 신갈나무(Quercus mongolica ), 굴참나무(Quercus cariabilis Blume), 사방오리나무(Alnus firma Siebold et Zucc), 삼나무(Cryptomeria japonica), 참식나무(Neolitsea sericea) 및 벗나무(Prunus serrulata)로 하여 서식한다. 상기 실시예<1-1>과 동일한 과정으로 겨우살이 에탄올 추출물을 제조하였다.
겨우살이 추출물의 항산화활성 측정
본 발명의 꼬리겨우살이( Loranthus tanakae Franch . & Sav .) 및 겨우살이 추출물의 항산화활성을 측정하기 위하여 Bondet 방법(Bondet et al., 1997)을 참고하여 DPPH라디칼(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl radical) 소거능 분석법을 실시하였다.
구체적으로, DPPH 용액(solution)은 300 μM DPPH를 515 ㎚에서 측정한 흡광도 값이 1.00이 되도록 에탄올을 이용하여 희석하여 준비하였다. 상기 [실시예 1]에서 제조한 각각의 겨우살이 추출물(50 ㎍/㎖) 40 ㎕에 DPPH 용액 760 ㎕를 첨가한 후 37 ℃에서 20 분간 반응시켜 자외선/가시광선 분광광도계(UV/Visible spectrophotometer;Human Cop., Xma-3000PC, Seoul, Korea)를 이용하여 515 ㎚에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 도 1b에서 나타나는 바와 같이 꼬리겨우살이의 DPPH 라디칼(radical) 소거능이 다른 겨우살이들에 비하여 우수한 것으로 나타났다. 이는 꼬리겨우살이의 항산화활성이 다른 겨우살이들에 비하여 우수함을 의미한다.
꼬리겨우살이의 농도별 DPPH 라디칼 소거능 비교
본 발명의 꼬리겨우살이의 농도에 따라 항산화활성이 증가하는지 여부 측정하기 위하여 농도별로 Bondet 방법(Bondet et al., 1997)을 참고하여 DPPH 라디칼(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl radical) 소거능 분석법을 실시하였다.
구체적으로, [실시예 2]와 동일한 방법으로 DPPH 라디칼 소거능 분석법을 실시하였다. 이때, 꼬리겨우살이의 농도는 각각 0.08, 0.4, 2, 10, 50 ㎕/㎖ 처리하였다.
그 결과, 도 2에서 나타나는 바와 같이 꼬리겨우살이 추출물의 농도가 증가할수록 DPPH 라디칼 소거능이 증가하였다. 꼬리겨우살이 추출물의 농도가 50 ㎕/㎖일 때 DPPH radical 소거능이 약 60 % 임을 확인하였다.
겨우살이 추출물의 항당뇨활성 측정
본 발명의 꼬리겨우살이 및 겨우살이 추출물의 항당뇨활성을 측정하기 위하여 장내에서 탄수화물을 단당류로 분해하는 효소인 알파-글루코시데이즈(α-glucosidase) 억제활성을 측정하였다.
구체적으로, 상기 [실시예 1]에서 제조한 각각의 겨우살이 추출물을 100 ㎍/㎖의 농도로 희석하여 0.75 unit/㎖의 α-글루코시데이즈(α-glucosidase) 효소액 25 ㎕를 50 mM 인산칼륨완충용액(potassium phosphate buffer, pH 6.5) 200 ㎕에 넣고 혼합한 후 2 mM p-니트로페놀-α-D-글루코피라노사이드(p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside)를 가하여 37 ℃에서 30 분간 반응시켰다. 그 후 0.5 M 탄산나트륨(Na2CO3)을 가하여 반응을 정지시킨 후 자외선/가시광선 분광광도계(UV/Visible spectrophotometer, Human Cop., Xma-3000PC, Seoul, Korea)를 이용하여 405 ㎚에서 흡광도를 측정하여 효소 반응으로 생성된 니트로페놀(nitrophenyl)의 함량을 정량하여 각 추출물을 처리하지 않은 대조구와 비교하여 효소활성을 계산하였다.
그 결과, 도 3b에서 나타나는 바와 같이 꼬리겨우살이의 α-글루코시데이즈(α-glucosidase) 억제활성이 다른 겨우살이들에 비하여 우수한 것으로 나타났다. 이는 꼬리겨우살이의 항당뇨활성이 다른 겨우살이들에 비하여 우수함을 의미한다.
꼬리겨우살이의 농도별 α-글루코시데이즈 억제활성 비교
본 발명의 꼬리겨우살이의 농도에 따라 항당뇨활성이 증가하는지 여부 측정하기 위하여 농도별로 α-글루코시데이즈 억제활성을 측정하였다.
구체적으로, [실시예 4]와 동일한 방법으로 α-glucosidase 억제활성을 측정하였다. 이때, 꼬리겨우살이의 농도는 각각 0.32, 1.6, 8, 40, 200 ㎍/㎖로 처리하였다.
그 결과, 도 4에서 나타나는 바와 같이 꼬리겨우살이 추출물의 농도가 증가할수록 α-글루코시데이즈 억제활성이 증가하였다.

Claims (6)

  1. 신갈나무(Quercus mongolica)를 기주나무로 하는 꼬리겨우살이(Loranthus tanakae Franch. & Sav.) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 당뇨 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서, 상기 꼬리겨우살이 추출물은 물, C1 내지 C2의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출하는 것을 특징으로 하는, 당뇨 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  4. 제3항에 있어서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는, 당뇨 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  5. 신갈나무(Quercus mongolica)를 기주나무로 하는 꼬리겨우살이(Loranthus tanakae Franch. & Sav.) 추출물을 유효성분으로 포함하는, 당뇨 예방 또는 개선용 건강기능식품.
  6. 삭제
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