KR101981678B1 - 모발 성장 촉진 및 두피 및 모발 개선용 복합 항산화 추출물 및 화장료 조성물 - Google Patents

모발 성장 촉진 및 두피 및 모발 개선용 복합 항산화 추출물 및 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 천연 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발성장 촉진 및 탈모방지용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 유효성분으로서 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯 혼합 추출물을 포함하여 모발성장 촉진 및 탈모방지 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯 혼합 추출물은 우수한 항산화 활성, 항염 활성 및 모발 생장 촉진 활성을 갖는바, 이를 유효성분을 포함하는 조성물은 발모를 촉진하고 탈모를 방지하기 위한 화장료 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다. 특히, 상기 6종 소재에 낙지다리(Penthorum chinense Pursh)를 더 첨가한 혼합 추출물의 경우 두드러지게 우수한 Wnt/β-catenin signal pathway 활성화 효과, 모유두세포 증식 효과 및 5-알파 리덕타아제 활성 억제 효과를 갖는다. 한편, 상기와 같은 천연 소재로부터 유래한 추출물을 포함하는 본 발명의 화장료 조성물은 장기간 사용에도 안전한 이점을 가진다.

Description

모발 성장 촉진 및 두피 및 모발 개선용 복합 항산화 추출물 및 화장료 조성물{Complex antioxidant extract and cosmetic composition for promoting hair growth and improving scalp and hair}
본 발명은 천연 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발성장 촉진 및 탈모방지용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 유효성분으로서 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯 혼합 추출물을 포함하여 모발성장 촉진 및 탈모방지 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.
인체의 모발은 태양광선, 추위 및 외부충격으로부터 머리를 보호하며 미용적인 측면에서도 중요하다. 외형을 중요시하는 현대사회에서 탈모는 외적 표현에 가장 큰 장애요소이며 질병의 한 분야로 인식되어 다방면의 연구, 개발이 이루어지고 있는 현실이다. 스트레스가 증가하고 서구화된 식생활과 내·외적 원인에 의해 남성의 경우 40-50대의 30% 이상에서 탈모 증세가 나타나고 여성의 탈모 유병율도 5% 이상으로 추정되고 있다. 또한 탈모 연령이 20-30대 까지 낮아지고 있다.
남성형 탈모증은 테스토스테론(Testosterone)이라는 남성호르몬에 의해 나타나는 현상으로 이 테스토스테론이 5알파-리덕타아제(5α-reductase)라는 효소에 의해 더 강력한 호르몬인 디히드로테스토스테론(Dihydrotestosterone, DHT)으로 바뀌게 되면, 이 호르몬이 모낭에 작용하여 모낭을 성장기 단계에서 퇴화기 단계로 유도하여 탈모가 일어나게 한다. 따라서, 남성형 탈모증을 치료하기 위하여 5 알파-리덕타아제에 의한 DHT의 생성을 억제하는 방법이 주로 사용된다.
여성형 탈모증은 주로 폐경기 이후 에스트로겐 양의 감소에 의해 발생한다. 원형 탈모증은 자가면역질환이나 정신적 스트레스, 유전적 소인에 의해 발생한다. 이러한 원형 탈모증은 안드로겐성 탈모증과는 근본적으로 원인이 다르며, 치료법 또한 달라서 부신피질 호르몬제를 처리하는 방법을 사용하거나, 인위적으로 환부에 자극을 유발하는 방법을 사용한다.
탈모증 환자들은 탈모로 인한 이미지의 변화로 사회적, 정신적, 심리적으로 상당한 고통을 받고 있으며, 경제향상과 더불어 미용에 대한 관심이 증가함에 따라 탈모로부터 회복하고자하는 욕구가 증가하고 있다. 국내의료시장의 경구용 탈모치료제와 경피 도포용 탈모치료제의 매출규모는 수백억원에 달하는 것으로 파악되고 있으며 모발을 성장시키는 발모제품은 의약품과 의약외품, 화장품, 건강식품 등 다양한 종류의 제품으로 개발되어 출시되면서 시장쟁탈전이 가열화되고 있다.
약물요법에 널리 사용되고 있는 미녹시딜(Minoxidil)은 원래 고혈압치료제로 이용되었으나, 부작용으로 발모현상이 보고되면서 이에 착안하여 바르는 발모 촉진제로 이용되기 시작하였다. 미녹시딜은 남성 호르몬성 탈모증에 적용되어 두정부 탈모증에는 그 효과가 인증되나, 측두부 탈모증에는 효과가 미미하다. 또한 항고혈압 작용에 의한 허탈감, 저혈압, 빈맥, 심혈관계 합병증과 같은 부작용을 유발할 가능성이 있어 장기 사용에는 부적합하다. 남성호르몬인 안드로겐의 생성, 결합 및 대사를 억제하는 피나스테라이드는 남성의 여성화를 초래할 수 있으며, 가임기 여성에게는 기형아 출산의 우려가 크다는 문제가 있다. 이와 같이 화학물질을 사용하는 약물요법은 체내 항상성의 불균형을 초래하여 예기치 않은 각종 부작용이 발생하기 때문에 그 대안으로 부작용이 없는 천연소재를 이용한 발모 및 발모제에 대한 연구가 활발하게 진행되고 있다.
최근에는 인삼을 비롯한 여러 가지 생약의 혼합 추출물을 원료로 하는 발모용 조성물을 함유하는 한방샴푸나 발모제가 많은 주목을 받고 있다. 그러나 이들 조성물들은 모근과 모낭에 영양분을 공급하고 혈류를 개선하여 탈모를 방지하고 발모를 촉진하는 것으로 유효성분에 대한 체계적인 검증이 이루어지지는 못한 실정이다.
이에, 본 발명자는 다양한 천연 식물를 바탕으로 모발생장을 촉진하고 탈모를 방지할 수 있는 소재를 찾고자 연구하였으며, 그 결과 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯 혼합물을 저온에서 진공 건조하고 여기에 에탄올 용매를 가한 후 초음파 처리를 통해 추출한 추출물이 항산화 및 항염 활성과 더불어 우수한 모발 생장 촉진 효과를 가짐을 확인하였으며, 특히 상기 6종 소재에 낙지다리(Penthorum chinense Pursh)를 더 첨가한 혼합 추출물의 경우 두드러지게 우수한 모발 생장 촉진 활성 및 탈모 방지 효과를 가짐을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
한국등록특허 제10-0878596호 한국등록특허 제10-1797526호
따라서 본 발명의 목적은 천연 식물 소재를 이용하여 장기간 사용에도 인체에 안정하면서 모발성장 촉진 및 탈모방지 활성이 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서,
본 발명은 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발성장 촉진 및 탈모방지용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 추출물은 (a) 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯으로 이루어진 혼합물을 10~40℃ 온도 조건에서 진공상태로 건조하는 단계; 및 (b) 건조된 혼합물에 에탄올 용매를 첨가한 후 50~60 kHz의 초음파를 조사하여 추출하는 단계;를 포함하는 공정을 통해 제조될 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 추출물은 와송, 꽈리열매, 낙지다리(Penthorum chinense Pursh) 및 회화나무열매로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 더 혼합한 추출물일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초, 꽃송이버섯 및 낙지다리(Penthorum chinense Pursh) 혼합 추출물을 유효성분으로 포함할 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 헤어 컨디셔너, 헤어 토닉, 헤어 크림, 헤어 로션, 헤어 오일, 헤어 스프레이, 샴푸 또는 린스의 제형을 가질 수 있다.
본 발명에 따른 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯 혼합 추출물은 우수한 항산화 활성, 항염 활성 및 모발 생장 촉진 활성을 갖는바, 이를 유효성분을 포함하는 조성물은 발모를 촉진하고 탈모를 방지하기 위한 화장료 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다. 특히, 상기 6종 소재에 낙지다리(Penthorum chinense Pursh)를 더 첨가한 혼합 추출물의 경우 두드러지게 우수한 Wnt/β-catenin signal pathway 활성화 효과, 모유두세포 증식 효과 및 5-알파 리덕타아제 활성 억제 효과를 갖는다. 한편, 상기와 같은 천연 소재로부터 유래한 추출물을 포함하는 본 발명의 화장료 조성물은 장기간 사용에도 안전한 이점을 가진다.
도 1은 본 발명의 천연 복합 추출물의 농도별 DPPH 라디칼 소거 활성을 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 천연 복합 추출물의 농도별 슈퍼옥사이드 라디칼 소거 활성을 나타낸 것이다.
본 발명은 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발성장 촉진 및 탈모방지용 화장료 조성물을 제공함에 그 특징이 있다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 혼합 추출물은 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯 이외에 와송, 꽈리열매, 낙지다리(Penthorum chinense Pursh), 회화나무열매로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 더 혼합하여 추출한 추출물일 수 있다.
본 명세서에서 언급하는 ‘알로에 (Aloe Barbadensis)’는 종류마다 다소 차이는 있으나, 대개 창과 같이 길고 끝이 뾰족한 잎의 양쪽 가장자리에 톱니 모양의 가시가 돋고, 황색 또는 주황색의 꽃이 핀다. 알로에는 고대 이집트 왕조 시대부터 이용되었으며, 마케도니아의 알렉산더 대왕은 원정시에 병사들의 질병을 막기 위해 알로에를 사용하였다고 전해지고 있다. 의학의 아버지라고 불리는 그리스 의사 히포크라테스도 알로에를 임상치료제로 사용하였다. 알로에의 약효가 널리 일반인에게 인정된 것은 12세기 독일『약전(藥典)』에 수록되면서부터이다. 주요성분으로는 아세만난, 베타-카로텐, 베타-시토스테롤, 캄페스테롤, 육계산, 쿠마린, 리그닌, 파라쿠마르산, 사포닌, 아미노산, 칼슘, 엽산, 철, 마그네슘, 인, 칼륨, 아연, 비타민 A, B1, B2, B3, C, E 등이 알려져 있다. 또한, 피부에 수분을 공급하는 식물로 널리 알려져 있으며, 특히 피부 보습효과가 우수하여 수분 보호막을 형성시키는 것으로 알려져 있다. 또한, 항염 효과를 나타내어 상처 치유에도 우수한 효과를 나타내며, 세포 재생에도 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
본 명세서에서 언급하는 ‘백년초 (Opuntia Coccinellifera)’는 선인장과 중에 오푼티아 (Opuntia) 속에 속하는 식물이다. 제주도의 자생식물로 비교적 척박한 토양에서 잘 자람으로써 개간이 어려운 곳에 널리 재배된다. 백년초 열매는 식이섬유가 매우 풍부한 반면, 열량은 매우 낮으며, 수분 85%, 탄수화물 10-15%, 글루코즈 및 프락토즈 6-8%, 비타민 등이 주성분이다. 또한 백년초는 예로부터 해열진정, 기관지 천식, 소화불량, 위경련 증상, 변비, 혈액순환 불량 등에 사용되어 왔으며 많은 양의 비타민 C를 함유하고 있으며, 근래에는 폴리페놀 성분이 다량으로 들어 있어 고혈압 억제, 암 발생 억제, 노화 억제 효과 등이 있는 것으로 알려져 있다.
본 명세서에서 언급하는 ‘오미자 (Schizandra Chinensis)’는 신맛이 강한 열매로 약으로 쓰거나 술과 차의 재료로 이용한다. 이 열매는 달고, 시고, 쓰고, 맵고, 짠 다섯 가지의 맛을 고루 갖추고 있다고 하여 오미자라 하는데, 그 가운데에서도 신맛이 가장 강하다. 신맛의 성분으로서는 말산/타르타르산 등이 알려지고 있다. 한방에서는 약재로 이용되고 있다. 동물실험에서는 대뇌신경을 흥분시키고 강장작용이 나타났으며 호흡중독에도 직접 작용하고 있다. 또한, 심장활동을 도와서 혈압을 조절하고 간장에 들어가서는 간장의 대사를 촉진시키는 효과가 인정되었다. 약성은 완만하고 맛이 시며 독성은 없다. 효능은 당뇨 환자가 입이 자주 마르고 갈증을 느낄 때에 복용하면 갈증이 제거되고, 여름에 땀을 많이 흘리고 난 뒤에 복용하여도 더위를 견디고 갈증을 적게 느끼게 된다. 오래도록 잘 치유되지 않는 해소에 사용하면 기침을 멈추게 하는 효과가 있다. 최근의 임상보고에 의하면 급성 황달형 전염성간염에도 좋은 효과가 있음이 밝혀졌다.
본 명세서에서 언급하는 ‘아로니아 (Aronia Arbutifolia)’는 다량의 당류(20%)와 안토시아닌(1%), 비타민 B1, B2, 판토텐산, 플라보노이드(flavonoid) 등을 함유하고 있다. 아로니아에 들어있는 안토시아닌의 총 함유량과 안토시아닌 성분은 TLC, HPLC, UV/VIS 방법에 의해 결정되어진다. 에탄올 추출법(알코올 70%와 염화수소 1%)과 정제를 최적화하여 실험한 결과, 아로니아에는 건조중량 100g당 650-850mg에 이르는 안토시아닌이 함유되어 있음이 발견되었다. 이러한 아로니아는 중세 유럽의 왕족들이 각종 질병의 치유 또는 예방의 목적으로 추구했고, 아로니아 자체를 “만병통치약”으로 애용했을 만큼 매우 귀한 약용열매였다. 아로니아 열매는 심혈관 질환, 각종 암, 치매, 당뇨질환, 간질환, 위장질환, 신경질환, 시력장애, 비만, 불임증, 류머티즘, 성기능, 비뇨기질환, 바이러스성질환 등에 탁월한 효능이 밝혀졌다.
본 명세서에서 언급하는 ‘동충하초 (Cordyceps Miltaris)’는 균성 곤충기생균으로 코디셉스(Cordyceps) 속에 속하며 현재 300여 종이 전 세계에 분포하는 것으로 알려졌다. 동충하초는 곤충의 유충, 번데기, 성충 등에 침입하여 곤충을 죽게 한 후 그것을 기주(host)로 하여 자실체와 포자과(fruit)를 형성한다. 동충하초는 예로부터 중국에서 불로장생의 비약으로 알려져 왔으며 천식을 포함한 호흡기 질환, 황달을 포함한 간장 질환 등의 치료를 위한 한방약재로 널리 사용되고 있다. 근간에는 동충하초의 면역력 증강효과에 대한 연구가 광범위하게 진행되고 있다. 박쥐나방 동충하초(C. sinensis) 추출물, 번데기 동충하초(C. militaris)의 추출물 또는 동충하초의 주성분인 코디세핀(cordycepin)이 면역 조절물질로 작용할 뿐만 아니라 항염 물질로도 작용한다는 보고들이 있다.
본 명세서에서 언급하는 ‘꽃송이버섯 (Sparassis Crispa)’은 우리나라, 일본, 중국, 북아메리카, 유럽, 오스트레일리아 등에 분포하고 있으며 식용버섯으로서 씹는 맛이 좋고 송이버섯과 같은 향이 나므로, 꽃모양을 하고 있는 송이버섯과 같다고 하여 '꽃송이버섯'이라고 부른다. 특히 꽃송이버섯은 일본 동경 약학대학의 연구 그룹에서 발표하여 건강보조식품으로 판매되고 있으며 꽃송이버섯 자실체 생산에 대한 인공재배는 1998년 봄, 일본 사이타마현 쿠마가야 농업고등학교의 후쿠시마 선생이 연구하여 성공하여 인공재배가 가능해졌다. 최근의 연구에서 면역력을 높이고 암을 방지하는 성분은 베타(1→3)D 글루칸이라고 해명되었는데 꽃송이버섯의 성분을 조사하는 과정에서 상상도 못할 만큼 베타글루칸이 많이 함유되어 있는데, 브라질산 아가리쿠스버섯보다 약 3배 이상이나 함유하고 있다는 사실이 밝혀졌다. 꽃송이버섯(Sparassis crispa)의 다당류의 NMR 구조는 4.78 ppm에서 6-분지형 β-(1->3)-D-글루칸임이 밝혀졌고, β-(1->6)-D-글루칸은 4.55 ppm에 있는 것으로 밝혀졌다. 꽃송이버섯(Sparassis crispa)는 우수한 식이섬유로서 작용하는 β-글루칸을 수용해성 내용물중에 나타내는 것으로 보고되었다. 면역조정 다당류를 갖는 버섯이 다양한 지역에서 식품뿐만 아니라 건강증진 식품 보조제(기능 식품) 및 약물로서 이용될 수 있다.
본 명세서에서 언급하는 ‘와송(瓦松)’은 바위솔(Orostachys japonicus A. Berger)이라하며 일명 암송(岩松), 옥송(屋松), 작엽하초(昨葉何草) 등으로 불리는 돌나물과(Crassulaceae)의 다년생 초본 식물로서 한방에서 해열, 소종, 지혈, 이습 등에 사용되며[金在佶,1984, 原色天然藥物大事典(上卷), 南山堂, 서울, p.447], 민간요법으로 암치료에도 많이 이용되고 있다[배성식, 1990, 한방과 건강, 1, 26]. 이 식물은 바위 곁에 붙어서 자라는 육질의 다년생 초본이지만 꽃이 피고 열매를 맺으면 고사하는 특징이 있다. 근생엽은 로제트형으로 퍼지며 끝이 굳어져서 가시처럼 되고 원줄기에 잎이 달리며 엽병이 없고 여름철에 나오는 근생엽과 더불어 끝이 굳어지지 않고 다만 뾰족해질 뿐이며 피침형으로서 녹색이지만 자주색 또는 분을 칠한 듯한 백색인 것도 있다. 꽃은 9월에 피고 백색이며 총상화서는 길이 6-15 cm로서 화병이 없는 꽃이 밀착하고 포는 피침형이며 끝이 뾰족하다. 꽃받침은 5개로서 피침형이고 녹색이며 꽃잎도 5개로서 피침형 예두이고 길이가 6 mm 정도이다. 수술은 10개이며 꽃잎보다 길고 자방은 5개이며 화분은 적색이지만 점차 흑색으로 된다[이창복, 1979, 大韓植物圖鑑, 鄕文社서울, p.402]. 와송은 여름부터 가을에 걸쳐 채취하며 뿌리를 제거한 전초(全草)를 햇볕에 말려 약용으로 한다[金在佶, 1984, 原色天然藥物大事典(上卷), 南山堂, 서울, p.447].
본 명세서에서 언급하는 ‘꽈리(Physalis alkekengi var. francheti (Masters) Hort)’는 우리나라 각지에 재배하는 다년생 초본으로 해발 600m 이하의 숲 가장자리에 자라는 다년초로서 높이 60~90 cm 정도이다. 지하에는 옆으로 기는 긴 근경이 있다. 잎은 호생하며 광난형으로 끝이 날카롭고 치아식의 거치가 있으며 절마다 2매씩 난다. 꽃은 엽액에서 나오며 흰색으로 1개씩 달리며 소화경은 길이 3~4cm이고, 꽃받침은 짧은 통형이며, 끝이 얕게 5개로 갈라지고 가장자리에 털이 있다. 과실은 구형의 액과로 적색으로 익는다. 생약으로는 전초를 사용하며 산장 (Physalis Herba), 등룡이라고도 한다. 성분으로는 전초에 피살린 A, B, C (physalin A, B, C) (Jacobo-Herrera et al, J. Nat. Prod., 69, pp328-331, 2006), 사포닌 (saponin), 플라보노이드 (flavonoid), 알칼로이드 (alkaloid)가 있으며 열매에는 0.12% 카로티노이드 (carotenoid)인 붉은 색소, 아스코르빈산, 수지, 펙틴, 탄닌, 쓴맛물질, 카로틴, 알칼로이드, 퀘르쎄틴 (quercetin), 카페인산, 시나민산, 페룰라산 등이 있고 뿌리에는 3-알파-티글로옥시트로판, 피살린, 제아크산틴이 함유되어있고 씨에는 리놀레인을 주성분으로 하는 기름이 함유되어 있다 (Weller P et al., J. Agric. FoodChem., 51, pp7044-7049, 2003). 약리작용으로는 뿌리에는 자궁 수축작용이 있고 열매에는 이뇨작용이 있다.
본 명세서에서 언급하는 ‘낙지다리(Penthorum chinense Pursh)는 돌나무과의 다년초로서 못이나 도랑과 같은 습지에서 자라는 다육질이며 잎은 어긋나고 좁은 바소꼴이고 가장자리에 가는 톱니가 있으며 끝이 예리하게 뾰족한 것이 특징이며, 꽃은 7~8월에 황백색으로 줄기 끝에 낙지 다리처럼 가지가 사방으로 갈려져 총상꽃차례를 이루며 위쪽으로 치우쳐서 달린다. 낙지다리는 낙지다리풀이라고도 불리며 한국, 중국, 일본, 몽골, 러시아 등지에 분포한다. 낙지다리는 전계에 단 2종만 있으며, 그중 1종이 우리나라에 있는 희귀식물로써, 전초에 플라보노이드, 시토스테롤, 퀘르세틴, 당 등의 성분이 함유된 것으로 알려져 있다.
본 명세서에서 언급하는 ‘회화나무’는 콩과의 낙엽교목으로 꽃봉오리를 괴화, 열매를 괴실이라고 부른다. 꽃봉오리는 동맥경화 및 고혈압에 효과가 있는 것으로 알려져 있으며, 열매, 가지, 나무껍질은 치질에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
본 발명자는 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯 6종을 주된 구성으로 하는 혼합물을 저온에서 진공 건조하고 여기에 에탄올 용매를 가한 후 초음파 처리를 통해 추출한 추출물이 항산화 및 항염 활성과 더불어 우수한 모발 생장 촉진 효과를 가짐을 확인하였다.
그러므로 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 본 발명의 화장료 조성물은 모발성장 촉진 및 탈모방지 소재로서 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 추출물은 당업계에 공지된 추출 및 분리하는 방법을 사용하여 천연으로부터 추출 및 분리하여 수득한 것을 사용할 수 있으며, 본 발명에서 정의된‘추출물’은 적절한 용매를 이용하여 대상 식물(알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯)로부터 추출한 것이며, 예를 들어, 상기 식물의 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다.
상기 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯으로부터 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 약학적으로 허용되는 유기용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어, 정제수(물), 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있다. 바람직하게는 에탄올을 사용하는 것이 좋다.
추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다. 본 발명의 하기 실시예에서는 건조된 혼합물에 에탄올 용매를 첨가한 후 50~60 kHz의 초음파를 조사하여 추출한 추출물이 열수추출법을 이용하여 추출한 열수추출물 대비 더욱 우수한 항산화 및 항염 효과를 보여주었다. 따라서, 본 발명의 경우 바람직하게는 초음파추출법이 좋다.
한편, 본 발명의 조성물에 포함되는 추출물은 상기한 열수 추출, 용매 추출, 초음파 추출법으로 추출된 1차 추출물을, 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조할 수 있다. 또한 상기 1차 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography), 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 등과 같은 다양한 크로마토그래피를 이용하여 추가로 정제된 분획을 얻을 수도 있다.
따라서 본 발명에 있어서 추출물은 추출, 분획 또는 정제의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획 및 정제물, 그들의 희석액, 농축액 또는 건조물을 모두 포함하는 개념이다.
본 발명의 일실시예에 따른 추출물을 제조하는 방법을 조금 더 구체적으로 살펴보면 다음과 같다.
본 발명의 추출물은 (a) 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초 및 꽃송이버섯으로 이루어진 혼합물 /또는 상기 6종의 소재에 와송, 꽈리열매, 낙지다리(Penthorum chinense Pursh), 회화나무열매로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 소재를 더 혼합하여 이루어진 혼합물을 10~40℃ 온도 조건에서 진공상태로 건조하는 단계; 및 (b) 건조된 혼합물에 에탄올 용매를 첨가한 후 50~60 kHz의 초음파를 조사하여 추출하는 단계;를 포함하는 공정을 통해 제조할 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 (b) 단계에서 혼합물은 알로에, 백년초, 오미자 및 아로니아를 1 : 1 : 1 : 0.5-1의 중량비로 혼합할 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 혼합 추출물은 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초, 꽃송이버섯 및 낙지다리(Penthorum chinense Pursh) 혼합 추출물일 수 있다.
본 명세서에서 언급하는 ‘낙지다리’는 학명이 Penthorum chinense Pursh이며, 돌나무과의 다년초로서 한방에서 수택란(水澤蘭)이라 하여 활혈, 행수, 자궁출혈, 월경폐지, 수종, 대하, 타박상 등에 약재로 사용하고 있으나, 현재까지 모발성장 촉진 및 탈모방지 효과에 대한 연구에 대해서는 보고된 바 없다.
본 발명자들은 상기와 같은 특징을 갖는 낙지다리(Penthorum chinense Pursh)를 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초, 꽃송이버섯과 함께 혼합하여 추출물로 제조하는 경우, 두드러지게 우수한 Wnt/β-catenin signal pathway 활성화 효과, 모유두세포 증식 효과 및 5-알파 리덕타아제 활성 억제 효과를 가진다는 사실을 최초로 규명하였다.
본 발명의 혼합 추출물은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 0.00001 내지 20.0중량%로 포함될 수 있으며, 화장료 조성물에 1μg/ml 내지 100000μg/ml의 농도로 포함될 수 있다.
상기 혼합 추출물의 함량이 0.00001 중량% 미만인 경우에는 본래 목적하는 탈모방지 및 발모를 충분하게 달성할 수 없어 바람직하지 못하며, 함량이 20 중량%를 초과하는 경우에는 화장료의 안정성에 문제가 발생할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 혼합 추출물 이외에 본 발명의 효과를 해치지 않는 범위 내에서 보습제, 증점제, 계면활성제, 유상기제, 방부제, 산화방지제, 알코올, 향료, pH 조절제, 천연추출물 등은 물론 두피 및 모발 개선효과를 배가시키기 위한 화학적 성분의 두피 및 모발개선 성분을 적당한 양으로 배합할 수 있다.
한편, 상기 혼합 추출물을 함유하여 제조된 화장료 조성물은 화장수류, 에센스류, 스킨류, 로션류, 크림류, 삼푸류와 같은 다양한 제형으로 제조될 수 있으며, 구체적으로는 헤어 컨디셔너, 헤어 토닉, 헤어 크림, 헤어 로션, 헤어 오일, 헤어 스프레이, 샴푸 또는 린스의 제형으로 제조될 수 있으며, 통상적인 화장료 제조법을 이용하여 제조할 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 1>
천연물 소재 준비
본 발명에서는 복합 추출물 제조에 사용되는 소재로서 알로에(거제알로에팜, http://www.aloefarm.co.kr/), 백년초(쇼핑제주, http://shoppingjeju.com), 오미자(청정산들해㈜, http://sandlehae.co.kr/), 아로니아(청정산들해㈜, http://sandlehae.co.kr/), 와송(토종 영천와송농장, http://www.ycwasong.com/), 회화나무열매(두손애약초, http://kimyaksamall.com), 꽈리열매(총명식품, http://www.chongm.com/), 동충하초(백아산꽃송이버섯영농조합법인, http://www.baegasan.co.kr/shop/) 및 꽃송이버섯(농부네곳간, http://www.showfood.co.kr/shop/main/index.php)을 일반 열풍 건조 또는 저온 진공 건조하여 사용하였다. 한편, 낙지다리(Penthorum chinense Pursh)는 전초를 강원도 정선에서 직접 채취하여 사용하였다. 일반 열풍 건조의 경우 60~65℃ 온도를 유지하여 건조를 진행하였으며, 저온 진공 건조의 경우 -98 kPa 이상의 진공 상태에서 40℃ 이하의 온도를 유지하여 건조를 진행하였다.
< 실시예 2>
천연 복합 추출물 제조
상기 실시예 1을 통해 준비된 건조가 완료된 각각의 건조물은 하기 표 1에서 개시하는 조성비로 혼합한 후 혼합물의 10배수의 60% 에탄올 용매를 가하여 일반 용매 추출 또는 초음파 추출하였다. 일반 용매 추출의 경우 60℃의 온도에서 4시간 동안, 총 2회 반복 추출을 진행하였으며, 초음파 추출의 경우 60 kHz의 초음파를 조사하여 40℃의 온도에서 4시간 동안, 총 2회 반복 추출을 진행하였다. 얻어진 각각의 추출물을 감압 여과한 후 감압농축기를 이용하여 감압농축하고 다시 농축액을 동결 건조하여 파우더 (powder) 형태로 제조하였다.
복합 추출물의 구성성분 및 조성(중량%)
구성성분 실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 실시예 5 실시예 6
알로에 24 24 24 24 24 24
백년초 24 24 24 24 24 24
오미자 24 24 24 24 24 24
아로니아 24 24 12 12 12 12
와송 - - 12 - - -
꽈리열매 - - - 12 - -
낙지다리 - - - - 12 -
회화나무열매 - - - - - 12
동충하초 2 2 2 2 2 2
꽃송이 버섯 2 2 2 2 2 2
총 합계 100 100 100 100 100 100
복합 추출물의 공정
구성성분 실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 실시예 5 실시예 6
건조 공정 열풍 저온 진공 저온 진공 저온 진공 저온 진공 저온 진공
추출 공정 열수 초음파 초음파 초음파 초음파 초음파
< 실험예 1>
본 발명의 천연 복합 추출물의 항산화 효과
상기 실시예 2를 통해 제조된 본 발명의 천연 복합 추출물의 항산화 활성을 조사하기 위하여 DPPH 라디칼에 대한 전자공여능 및 슈퍼옥사이드 소거 활성을 측정하였다. 전자공여능은 페놀산, 플라보노이드 및 기타 페놀성 물질에 대한 항산화작용의 지표로서 이러한 물질은 환원력이 큰 것일수록 전자공여능이 높다.
<1-1> DPPH 라디칼에 대한 전자공여능 측정에 따른 항산화 효과
1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) 라디칼 소거활성은 Blois법을 변형하여 측정하였다. 각 시료 0.5 mL에 60 μM DPPH(Sigma, USA) 3 mL를 넣고 vortex한 후 15분 동안 방치한 다음 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 모든 결과 값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차 (SD)로 나타내었다.
그 결과 도 1에서 나타낸 바와 같이, 라디칼 소거활성은 복합 추출물의 농도에 의존적으로 증가하는 경향을 나타내었으며, 일반 열풍 건조 및 용매 추출 공정을 적용한 실시예 1 보다 저온 진공 건조 및 초음파 추출 공정을 적용한 실시예 2 내지 6에서 더욱 우수한 효과를 나타내었다.
<1-2> 슈퍼옥사이드 소거 활성 측정에 따른 항산화 효과
슈퍼옥사이드 소거 활성 방법은 xanthine/xanthine oxidase system에 의해 발생되는 초과산화물 음이온기(superoxide anion radical)를 항산화제가 제거시키는 정도를 확인하는 실험으로 nitro blue tetrazolium(NBT)의 감소 정도를 통하여 본 발명의 천연 복합 추출물의 항산화 효과를 측정하였다.
측정방법으로는 96-웰 플레이트에 시료를 농도별로 제조하여 50㎕씩 넣어준 후 Reagent I (200mM Sodium phosphate (pH7.5), 1mM Xanthine, 1mM EDTA, 0.1mM NBT)를 50㎕씩, Reagent II (Xanthine oxidase 50mU/mL)를 20㎕씩 넣고 37℃ (실온)에서 30분 동안 반응한 다음 550nm에서 흡광도를 측정하였다. 모든 결과 값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차 (SD)로 나타내었다.
그 결과 도 2에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 천연 복합 추출물 처리 농도 의존적으로 슈퍼옥사이드 소거 활성이 증가하는 경향을 나타내었으며, 일반 열풍 건조 및 용매 추출 공정을 적용한 실시예 1 보다 저온 진공 건조 및 초음파 추출 공정을 적용한 실시예 2 내지 6에서 더욱 우수한 효과를 나타내었다. 모든 실시예는 100 μg/ml 이상의 농도에서 대조군으로 처리한 아스코르브산과 유사한 슈퍼옥사이드 소거 활성을 나타내는 것을 확인하였다.
< 실험예 2>
본 발명의 천연 복합 추출물의 세포독성평가
실험에 이용된 세포주로는 인간각질형성세포인 RAW 264.7 cell를 사용하였으며, 세포배양에 필요한 배지로 Dulbeco's Modified Eagle's Medium (DMEM)을 사용하였고 그 밖의 세포배양에 필요한 시약으로 FBS(inactivated fetal bovine serum), 1% 페니실린-스트렙토마이신, 트립신-EDTA를 사용하였다. 실험에 사용한 배지는 DMEM 배지에 FBS 10% 첨가하여 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 실험과정의 모든 세포는 80-90% 정도의 밀도로 자랐을 때 계대 배양하였다.
시료의 세포독성을 평가하기 위해 3-(4,5-dimethythiazo-2-ly)-2,5-diphenyl-tetra- zoliumbromide (MTT)를 사용하여 세포생존율을 측정하였다. RAW 264.7 cell 1×104 cells/well 를 96 웰 프레이트에 접종하고 20시간 배양 후, 10 μg/ml의 LPS와 샘플을 농도별로 첨가하여 37℃, 5% CO2 인큐베이터(New Brunswick, Hamburg, Germany)에서 24시간 배양하였다. 배양 후 2 mg/ml 농도의 MTT 시약을 첨가하여 2시간 재 배양하고 상층액을 제거한 다음 각 well에 DMSO를 첨가하고 이를 마이크로플레이트 리더기 (Multi skan, Thermo, Rockford, Illinois)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정한다. 세포 생존율은 다음 식에 의해 계산하였다. 모든 결과 값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차 (SD)로 나타내었다.
Proliferation Index (%) = sample 흡광도/ control 흡광도 × 100
그 결과 하기 표 3에서 나타낸 바와 같이, 모든 농도에서 세포 독성이 나타나지는 않았으며, 독성이 있어도 미약함을 확인하였다. 그 중 일반 열풍 건조 및 용매 추출 공정을 적용한 실시예 1 보다 저온 진공 건조 및 초음파 추출 공정을 적용한 실시예에서 세포 독성이 더 낮게 확인되었다.
본 발명의 천연 복합 추출물의 세포독성 평가
　시료 시료 농도 (μg/ml) 세포 생존율 (%)
무처리 - 100
실시예 1 1 96.21
5 92.34
10 88.33
25 86.82
50 81.46
100 75.92
실시예 2 1 98.22
5 94.30
10 90.04
25 88.60
50 87.31
100 85.04
실시예 3 1 95.81
5 94.25
10 94.88
25 91.60
50 89.42
100 87.02
실시예 4 1 95.24
5 94.12
10 91.02
25 90.44
50 90.02
100 88.08
실시예 5 1 98.02
5 95.25
10 92.08
25 90.89
50 90.02
100 89.60
실시예 6 1 95.81
5 94.25
10 94.88
25 91.60
50 85.42
100 82.02
< 실험예 2>
본 발명의 천연 복합 추출물의 항염증 효과
본 실험에서는 상기 실시예 2를 통해 제조된 본 발명의 천연 복합 추출물의 항염 활성을 조사하기 위하여 NO 생성 저해 활성을 측정하였다. NO 생성 저해에 따른 항염증 효과를 확인하기 위하여, RAW264.7 세포주 (ATCC number: CRL-2278)를 이용한 GRIESS 법으로 Nitric oxide(NO) 형성억제력 실험을 실시하였다. 구체적으로, 생쥐의 대식세포인 RAW264.7 세포를 수차례 계대배양하고, 웰 하나에 1.0×105 cells/well로 48 웰 플에이트에 넣은 후, 18 시간 동안 배양시켰다. 이어서, 농도별로 제조한 시료를 함유한 새로운 배지로 교체하였다, 이 때, NO-생성 억제 물질인 L-NMMA (L-NG-Monomethylarginine)을 양성 대조군으로 함께 처리하여 30분 동안 배양하였고, 자극원으로 LPS (Lipopolysaccharide)를 1 μg씩 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 상층액을 100 μl씩 취해 96 웰 플에이트에 옮기고, GRIESS 용액을 100 μl씩 가해 상온에서 10분간 반응시키고, 540 nm에서의 흡광도를 측정함으로써 NO 억제 효과를 판단하고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다. 모든 결과값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차 (SD)로 나타내었다.
그 결과 하기 표 4에 나타낸 바와 같이, LPS에 의해 증가되었던 사이토카인의 발현량이 본 발명의 천연 복합 추출물에 의해 감소되는 것을 확인하였다. 그 중 저온 진공 건조 및 초음파 추출 공정을 적용한 실시예에서 NO 생성 저해 효과가 더 높게 나타났으며, 이는 두피 진정에 있어 항염 효과가 보조적인 역할로 작용하여 상승효과를 기대할 수 있다.
본 발명의 천연 복합 추출물의 NO 생성 저해 효과
　시료 시료 농도 (μg/ml) NO 생성율 (%)
LPS(-) (대조군) 1 10.79
LPS (+) 1 100.00
2-Amino-4-methylpyridine
(양성대조군)		 10 μM 15.09
실시예 1 1 82.24
5 74.18
10 67.32
25 53.16
50 44.21
100 38.11
실시예 2 1 74.02
5 66.76
10 60.59
25 47.84
50 39.79
100 34.30
실시예 3 1 75.05
5 62.82
10 60.43
25 45.32
50 40.12
100 34.58
실시예 4 1 77.06
5 72.42
10 62.03
25 48.12
50 38.02
100 35.10
실시예 5 1 74.80
5 64.33
10 59.42
25 45.88
50 38.10
100 32.12
실시예 6 1 80.02
5 62.76
10 54.35
25 44.50
50 34.02
100 25.28
< 실험예 3>
본 발명의 천연 복합 추출물의 처리에 따른 Wnt /β- catenin signal pathway 활성 측정
Wnt/β-catenin signal pathway 활성화는 모발성장을 촉진하므로 본 발명의 천연 복합 추출물의 모발성장 촉진을 알아보기 위해 Wnt/β-catenin signal pathway 활성화에 미치는 영향을 TOP flash reporter를 이용하여 조사하였다. 인간 모유두세포 HFDPCs(PromoCell社, Heidelberg, Germany)를 24 웰 플에이트에 2×105 cells/well로 접종하고 24시간 동안 배양한 다음 시료들을 처리한 후 15시간 동안 추가 배양하여 듀얼 루시퍼레이즈 어세이 키트(Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit, 고마바이오텍(주))를 사용하여 파이어플라이 루시퍼레이즈 (firefly luciferase) 활성을 측정하였다. 모든 결과 값은 3회 이상의 독립적인 실험을 거쳐 평균±표준편차 (SD)로 나타내었다.
루시퍼레이즈 활성을 정확하게 측정하기 위하여 각각의 시료에 대하여 3회 실시하였으며 대조군에 대한 상대적인 활성을 증가율 (%)로 계산하고 하기 표 5에 나타내었다. 대조군은 무처리군이다. 양성대조군으로는 Wnt 신호전달 체계에서 GSK-3를 억제하는 것으로 알려져 있는 물질인 6-bromoindirubin-3'-oxime (BIO)를 사용하였다.
그 결과 하기 표 5에서 나타낸 바와 같이, 각 시료는 농도 의존적으로 TOP flash reporter 활성을 증가시켜 Wnt/β-catenin 신호전달에 대하여 선택적이며 우수한 활성능이 있음을 확인하였고, 다른 실시예 대비 실시예 5에서 두드러지게 우수한 활성을 나타내었다.
Wnt/β-catenin signal pathway 활성
시료　 시료 농도 (μg/ml) 증가율 (%)
무처리 (대조군) - 100.0
6-bromoindirubin-3'-oxime
(양성대조군)		 1 μM 152.1
실시예 1 10 128.1
20 151.4
실시예 2 10 142.3
20 168.2
실시예 3 10 138.8
20 152.2
실시예 4 10 140.1
20 154.4
실시예 5 10 172.8
20 213.2
실시예 6 10 128.1
20 150.4
< 실험예 4>
본 발명의 천연 복합 추출물의 모유두세포 증식 측정
먼저 모유두세포 HFDPCs(PromoCell社, Heidelberg, Germany)를 5×103 cells/well로 분주한 후, 1일차에는 배지를 교체한 후, 24시간 동안 배양시켰다. 2일차에는 시료 처리 전 CCK-8의 측정 (초기 값 평균: 0.591) 및 시료 처리를 하였다. 이때, 시료는 100 ppm 으로 처리하였다. 5일차에는 CCK-8의 측정을 하였다. Control 값의 평균이 0.554으로 세포가 죽지 않고 수가 초기 값을 유지하는 것으로 확인하였다. 실험에 사용한 배지는 DMEM (10% FBS, 1% P/S), depletion media : 5% charcoal stripped FBS containing phenol-red free DMEM media, SF (serum free) media - DMEM (1% P/S)을 이용하였다.
그 결과 하기 표 6에서 나타낸 바와 같이, 본 발명의 천연 복합 추출물을 처리에 따른 모유두세포가 증식되는 것을 확인할 수 있었으며, 저온 진공 건조 및 초음파 추출 공정을 적용한 실시예 2-6에서 더 높은 증식 효과를 확인할 수 있었다. 특히, 다른 실시예 대비 실시예 5에서 두드러지게 우수한 모유두세포 증식 활성을 갖는 것을 확인할 수 있었다.
모유두세포 증식 활성
　시료 Average (ratio) Stdev
무처리
(대조군)		 1.00 0.03
SF (serum free) 0.63 0.04
실시예 1 1.18 0.05
실시예 2 1.34 0.03
실시예 3 1.32 0.02
실시예 4 1.33 0.01
실시예 5 1.88 0.04
실시예 6 1.29 0.02
< 실험예 5>
본 발명의 천연 복합 추출물의 5알파 리덕타아제 활성 억제 효과
본 실험에서는 상기 실시예 2를 통해 제조된 본 발명의 천연 복합 추출물의 탈모 개선 효과를 조사하기 위하여 탈모를 유발하는 활성 남성호르몬인 디하이드로테스토스테론의 생성을 촉진하는 5알파-리덕타아제 활성 억제력을 측정하였다.
Rat prostate 5알파-리덕타아제를 이용하여 첨가한 [3H]테스토스테론(T)이 [3H]디하이드로테스토스테론으로 전환되는 양을 가지고 평가하였다. 7-8주령 된 SD 수컷을 에틸에테르로 마취시킨 후 경추도살 하여 전립선을 적출하고, 곧바로 액체질소에 넣어서 보관하였다. 실험마다 필요한 양의 전립선을 꺼내어 사용하였다. 전립선을 4℃의 homogenizer buffer (20 mM 포타슘 포스페이트 (pH 6.6), 0.32 M 수크로스, 1 mM DTT(Dithiothreitol), 0.2 mM 페닐메틸설포닐플루오라이드(phenylmethylsulfonylfluoride))를 넣은 glass homogenizer에 넣고 뿌옇게 될 때까지 분쇄하였다. 원심분리(1500 g, 20분, 4℃) 후 펠렛을 얻은 후에 두 번 세척하고, 펠렛에 homogenizer buffer를 넣어서 현탁하여 crude enzyme 으로 사용하였다. 마이크로튜브에 crude enzyme과 시료 및 반응버퍼(40 mM 포타슘 포스페이트(pH 6.6), 200 μM NADPH, 1 mM DTT, 120 nCi[1,2,6,7-3H]T)를 넣어 최종 반응액을 500 μL로 맞춘 후, 37℃에서 60분간 반응시켰다. 1 mL의 에틸아세테이트를 넣고 볼텍싱한 후, 원심분리(1000 g, 5분)하여 상층액을 취해서 새로운 마이크로튜브로 옮긴 후, heating plate (60℃)를 이용하여 완전히 건조하였다. 마이크로튜브에 50 μL의 에틸 아세테이트를 넣고, TLC 플레이트에 스포팅(spotting)하고 전개용매(50% 사이클로헥산, 50% 에틸아세테이트) 하에서 3회 전개하였다. UV 스펙트로미터로 254 nm 에서 테스토스테론(testosterone)을 확인하고 10% 황산을 뿌려서 디하이드로테스토스테론을 확인하였다. 테스토스테론과 디하이드로테스토스테론 부위를 가위로 오려내서 각각의 scintillation vial에 넣고 cocktail 10 mL을 넣어 β-counter로 측정하여 전환율을 계산하고, 그 결과를 대조군(추출물을 첨가하지 않았을 때의 전환율)과 비교하여 하기 수학식을 이용하여 5알파-리덕타아제 저해율을 계산하였다.
5알파-리덕타아제 저해율(%)=(A-B)/A ×100
A = 테스토스테론에서 디하이드로테스토스테론으로의 전환율(본 발명의 천연 복합 추출물 미첨가시)
B = 테스토스테론에서 디하이드로테스토스테론으로의 전환율(본 발명의 천연 복합 추출물 첨가시)
5알파-리덕타아제 저해율
시료 저해율(%)
10 μg/ml 100 μg/ml
실시예 1 22.32±1.12 68.42±3.20
실시예 2 38.20±5.20 85.52±12.56
실시예 3 34.80±4.15 82.97±11.02
실시예 4 32.72±4.69 88.40±8.25
실시예 5 64.50±6.72 148.89±6.45
실시예 6 28.59±4.12 72.91±5.75
그 결과 상기 표 7에서 나타낸 바와 같이, 일반 열풍 건조 및 용매 추출 공정을 적용한 실시예 1 보다 저온 진공 건조 및 초음파 추출 공정을 적용한 실시예 2-6에서 더욱 우수한 5알파-리덕타아제 억제 활성을 보여주었으며, 특히, 실시예 5의 경우 다른 실시예 대비 두드러지게 우수한 5알파-리덕타아제 억제 활성을 나타내었다.
결론적으로 천연 복합 추출물의 공정으로 일반 열풍 건조 및 용매 추출 공정 대비 저온 진공 건종 및 초음파 추출 공정이 유용성분을 추출하는데 더욱 효과적인 공정임을 확인할 수 있었으며, 실시예 5의 경우 항산화 및 항염활성과 더불어 모발 생장 효과가 다른 실시예 대비 가장 우수한 효과를 이끌어 낼 수 있는바, 탈모개선 및 모발성장 촉진을 위한 소재로서 유용하게 사용될 수 있을 것으로 판단된다.
< 제조예 1>
본 발명의 기능성 화장료 조성물 제조
상기 실시예 2를 통해 제조된 본 발명의 천연 복합 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장품으로 헤어로션, 헤어토닉, 헤어삼퓨를 제조하였다.
<1-1> 헤어로션
본 발명의 천연 복합 추출물을 함유한 헤어로션을 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.
본 발명의 헤어로션 제형예
성분 중량 %(w/w)
본 발명의 천연 복합 추출물 1.0~10.0
세토스테아릴알코올 2.0
염화스테아릴트리에틸암모늄 2.0
히드록시에틸셀룰로오즈 0.5
피록톤올아민 0.1
향료, 색소 0.5
정제수 잔량
계 100.0
<1-2> 헤어토닉
본 발명의 천연 복합 추출물을 함유한 헤어토닉을 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.
본 발명의 헤어토닉 제형예
성분 중량 %(w/w)
본 발명의 천연 복합 추출물 1.0~10.0
에탄올 55.0
피마자유 5.0
글리세린 3.0
피록톤아민 0.1
향료,색소 0.01
정제수 잔량
계 100.0
<1-3> 샴푸
본 발명의 천연 복합 추출물을 함유한 샴푸를 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.
본 발명의 샴푸 제형예
성분 중량 %(w/w)
본 발명의 천연 복합 추출물 1.0~10.0
암모늄라우릴설페이트/
암모늄라우레스셀페이트		 16.0
트리하이드록시스테아린 0.1
세틸알코올 0.5
코카마이드에이에이 0.5
구아하이드록시트리모늄클로라이드 0.3
향료 1.0
방부제 0.5
젖산 0.05
정제수 잔량
계 100.0
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (5)

  1. 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초, 꽃송이버섯 및 낙지다리(Penthorum chinense Pursh) 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 모발성장 촉진 및 탈모방지용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 (a) 알로에, 백년초, 오미자, 아로니아, 동충하초, 꽃송이버섯 및 낙지다리(Penthorum chinense Pursh)로 이루어진 혼합물을 10~40℃ 온도 조건에서 진공상태로 건조하는 단계; 및 (b) 건조된 혼합물에 에탄올 용매를 첨가한 후 50~60 kHz의 초음파를 조사하여 추출하는 단계;를 포함하는 공정을 통해 제조되는 것을 특징으로 하는 모발성장 촉진 및 탈모방지용 화장료 조성물.
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    상기 조성물은 헤어 컨디셔너, 헤어 토닉, 헤어 크림, 헤어 로션, 헤어 오일, 헤어 스프레이, 샴푸 또는 린스의 제형을 가지는 것임을 특징으로하는 모발성장 촉진 및 탈모방지용 화장료 조성물.
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