KR101954076B1

KR101954076B1 - 지모 추출물 및 홍해삼 추출물을 포함하는 아토피 피부 외용제 조성물

Info

Publication number: KR101954076B1
Application number: KR1020170117306A
Authority: KR
Inventors: 강세찬; 전혜린; 정용준; 양윤정; 오제임스섭
Original assignee: (주)에이온엘에스
Priority date: 2017-09-13
Filing date: 2017-09-13
Publication date: 2019-03-06

Abstract

본 명세서는 유효성분으로 지모 추출물 및 홍해삼 추출물을 포함하는 피부 알러지, 아토피 피부 또는 피부 염증의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 일 구현예에서 상기 조성물은 하이드로겔 콜로이드 제형으로 제공될 수 있으며, 아토피, 피부 알러지 또는 피부 염증에 효과가 우수하다.

Description

지모 추출물 및 홍해삼 추출물을 포함하는 아토피 피부 외용제 조성물{Skin external composition comprising Anemarrhena asphodeloide extract and Stichopus japonicus extract}

본 명세서는 유효성분으로 지모 추출물 및 홍해삼 추출물을 포함하는 피부 알러지, 아토피 피부 또는 피부 염증의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

아토피 피부염의 정확한 병태생리는 아직 완벽하게 이해된 것은 아니지만, 유전적 소인과 함께 면역학적, 환경학적 요인이 관여하고 있다고 받아들여지고 있으며 특히 면역학적 관점에서 많은 연구가 이루어지고 있다. 특히 아토피 피부염을 앓는 환자들이 집먼지진드기, 동물의 털, 음식, 꽃가루 또는 곰팡이와 같은 외부환경 물질에 대해 알러지 반응을 나타내는 점, 그리고 알러지성 비염, 천식 또는 결막염 등을 동반한다는 점에서 아토피 피부염은 면역 체계 교란에 의해 발생하는 것으로 추정되고 있다. 이렇게 발생의 원인이 추정만 되고 있을 뿐 정확하게 밝혀져 있지 않기 때문에 치료가 힘든 난치성질환으로 알려져 있다.

특히 아토피 피부염 환자들은 특이적 알러지 항원 (allergen)에 노출되는 경우 즉각적으로 과민 반응을 일으키는 IgE 항체를 형성하는 특징을 가지고 있으며 이러한 표현형의 발현에는 여러 유전적 인자가 관여하는 것으로 알려져 있다. 이러한 아토피 민감성 유전자에는 IL-4 수용체 단백질 및 IgG 고친화성 수용체 단백질 등이 포함된다.

아토피 피부염의 증상은 대체로 1세 미만의 유아에서 많이 나타나고 5세 미만아동 85%에서 증상이 나타난다. 보통 아토피 피부염은 어릴 때 잠시 앓는 질환으로 알려져 있으며, 환자 중 50%는 두 돌 내에 그 증상이 없어지지만 25%는 청소년기까지 이어지며 나머지 25%는 성인이 되어도 유지되기도 한다. 최근 성인에서도 아토피 피부염의 발생이 증가하고 있는 추세인데, 심한 경우 취업 및 결혼 등 사회생활에 지장을 초래하기도 하여 심각한 개인적·사회적 문제로 대두되고 있다.

기존에 사용되고 있는 아토피 피부염 치료제는 카시뉴린을 억제하여 사이토카인 (cytokine)의 발현을 줄이는 시클로스포린 (cyclosporin) 및 FK506 등이 개발되어 사용되고 있으나, 이러한 약물들은 장기 사용 시 면역체계를 약화시켜 이차감염증에 대한 저항력이 떨어진다는 문제점이 있다. 또한 피부의 가려움증 및 소양증을 완화시키는 스테로이드 (steroid) 계열의 외용 치료제도 사용되고 있는데, 장기간 사용할 경우 감염증, 피부 위축증, 혈관 확장증 등과 같은 부작용이 발생한다. 이렇게 아토피 피부염 치료를 위한 다양한 방법이 제시되어 환자들에게 적용되고 있으나 아직까지는 효과적인 제품이 출시되지 못한 실정이다.

따라서 이러한 실정과 함께 건강하고 안전한 제품을 사용하고자 하는 소비자의 욕구증가에 따라 식품에서 ‘웰빙 식품으로 유기농 및 무농약 식품이 시장 점유율을 높여가고 있는 것’처럼 전 세계적으로 ‘안전한 천연물 소재로 아토피 개선제를 개발’하려는 움직임이 있다. 국내에서도 식품의약품안전처가 기능성화장품의 범위를 ‘피부에 보습을 주는 등 아토피성 피부로 인한 건조함 등을 개선하는 데 도움을 주는 기능을 가진 화장품’으로 확대하면서 국내외 모두 천연소재로의 아토피 화장품 기술개발에 대한 움직임이 더욱 활발해졌다. 특히 장기적으로 사용하고 그 수요가 높은 소아환자에 사용할 수 있는 안전한 ‘천연물 유래의 다기능성 효능을 지닌 기능성 화장품 소재 및 의약품 개발의 필요성’이 크게 제기되고 있다.

한편, 현재 등록·공개된 등록특허공보 중 상기 발명과 관련이 있는 홍해삼 추출물 관련 특허로는, 홍해삼 추출물을 이용한 항알러지제 조성물 및 항균제 조성물 (등록번호 10-1280431)과 홍해삼 추출물을 이용한 피부 상태 개선제 조성물 (등록번호 10-1315346)이 있다. 이들 발명에는 홍해삼 추출물의 mast cell의 탈과립 억제 활성과 스타필로코커스 아우레우스 및 스타필로코커스 에피더미디스에 대한 항균활성 및 섬유아세포 증식 촉진과 피부보습 개선, 손상된 피부조직의 회복을 위한 조성물에 관한 것으로서, 홍해삼의 70% 에탄올 추출물을 이용한 피부 개선 및 항알러지·항균제 조성물에 대한 내용이 공개되어있다.

또한, 지모 추출물 관련 특허로는, 염증 및 아토피 피부염에 효능이 있는 가미소풍산 조성물 (등록번호 10-1716080)과 지모, 세이지 및 천수국의 혼합추출물을 함유하는 화장료 조성물 (등록번호 10-1738075)이 있다. 앞서 언급한 특허는 방풍, 고삼, 우방자, 지모, 당귀, 선퇴, 창출, 목통, 생지황, 감초, 석고, 백선피, 지부자, 형개, 박하를 혼합 하고 추출하여 제조한 염증 및 아토피 피부염에 효능이 있는 조성물에 대한 내용이 공개되어 있으며, 후에 언급한 특허에는 β-글루코시다아제 효소 처리한 지모, 세이지 및 천수국 혼합추출물을 함유하는 화장료 조성물에 대한 것으로 항산화, 탄력 증진, 주름개선 및 피부 미백 효과에 대한 내용이 공개되어 있다.

현재까지 지모와 홍해삼 추출물에 대한 각각의 특허는 존재하나 이들을 혼합하여 항염증이나 항알러지, 피부상태 개선에 효과적인 조성물에 대한 발명은 존재하지 않으며 여기에 하이드로콜로이드 제형을 결합하여 상승효과까지 부여한 발명 또한 존재하지 않는다.

한국등록특허 10-1280431 한국등록특허 10-1315346 한국등록특허 10-1716080 한국등록특허 10-1738075

본 발명은 상기한 바와 같은 문제점을 해결하고 더 나은 천연 생약 원료를 이용한 아토피 개선, 항알러지 등 피부 염증 관련 질환에 대한 다기능성 효능을 가지는 조성물을 제공하고자 한다. 일 구현예에서, 상기 조성물은 나노복합-하이드로콜로이드 분말로 제공될 수 있다. 현재 환자들에서 사용되고 있는 아토피 증상을 완화·개선하는 용도로 사용되는 제품의 제형은 보통 크림이나 로션, 연고의 경우가 대부분인데 이러한 제형은 입자의 크기가 크기 때문에 유효 성분의 흡수력이 떨어진다는 단점을 가지고 있다. 본 발명의 일구현예에서는 나노입자라는 구조체의 형태를 응용하여 불안정한 저분자형 유효성분의 안정성을 증가시키고 피부 조직 내 침투를 증가시킴으로써 유효성분의 방출 조절성과 높은 저장 안정성을 가지는 제형을 이용하고자 하였다. 따라서 지모와 홍해삼 추출물을 원료로 하여 아토피 질환에 관련 있는 알러지 및 피부염증에 대한 효능 검증과 이를 이용한 나노복합-하이드로콜로이드 제형의 제조 방법에 관한 연구를 하여 본 발명에 이르게 되었다.

본 발명의 일측면은 아토피 피부의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명의 일측면은 피부 알러지의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명의 일측면은 피부 염증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명의 일측면은 지모(Anemarrhena asphodeloide) 추출물 및 홍해삼(Stichopus japonicus) 추출물을 포함하는 아토피 피부 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공한다.

본 발명의 일측면은 지모(Anemarrhena asphodeloide) 추출물 및 홍해삼(Stichopus japonicus) 추출물을 포함하는 피부 알러지 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공한다.

본 발명의 일측면은 지모(Anemarrhena asphodeloide) 추출물 및 홍해삼(Stichopus japonicus) 추출물을 포함하는 피부 염증의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공한다.

본 발명의 일측면에서, 상기 지모(Anemarrhena asphodeloide) 추출물 또는 홍해삼(Stichopus japonicus) 추출물은 물, C₁-C₅ 알코올 또는 C₁-C₅ 알코올 수용액을 이용하여 추출한 추출물일 수 있다.

본 발명의 일측면에서, 상기 C₁-C₅ 알코올은, 메탄올, 에탄올, 이소프로필알코올, n-프로필알코올, n-부탄올 및 이소부탄올로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 이용할 수 있다.

본 발명의 일측면에서, 상기 홍해삼 추출물 100 중량부에 대하여 지모 추출물은 500 내지 1500 중량부일 수 있다.

본 발명의 다른 측면은 상기 지모 추출물 및 홍해삼 추출물을 포함하는 조성물; 및 펙틴;을 포함하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.

본 발명의 다른 측면에서, 상기 지모 추출물 및 홍해삼 추출물을 포함하는 조성물은 상기 피부 외용제 조성물 전체 중량에 대하여 0.5 내지 1.5 중량%로 포함되는, 피부 외용제 조성물일 수 있다.

본 발명의 다른 측면에서, 상기 피부 외용제 조성물은 하이드로겔 콜로이드 형태로 제제화된, 피부 외용제 조성물일 수 있다.

본 발명의 다른 측면에서, 상기 피부 외용제 조성물은 전체 중량에 대하여 상기 지모 추출물 및 홍해삼 추출물을 포함하는 조성물을 0.5 내지 1.5 중량%; 펙틴을 10 내지 20 중량%; 및 카르복시메틸 셀룰로오스를 5 내지 15 중량%;를 포함하는 피부 외용제 조성물일 수 있다.

본 발명의 일 측면에 따른 조성물 또는 본 발명의 다른 측면에 따른 피부 외용제 조성물은 아토피 피부를 예방, 개선 또는 치료하는 효과가 있다.

본 발명의 일 측면에 따른 조성물 또는 본 발명의 다른 측면에 따른 피부 외용제 조성물은 피부 알러지를 예방, 개선 또는 치료하는 효과가 있다.

본 발명의 일 측면에 따른 조성물 또는 본 발명의 다른 측면에 따른 피부 외용제 조성물은 피부 염증을 예방, 개선 또는 치료하는 효과가 있다.

본 발명의 일 측면에 따른 조성물 또는 본 발명의 다른 측면에 따른 피부 외용제 조성물은 급성 알러지 반응에 관여하는 히스타민 분비를 억제하는 효과가 우수하다.

본 발명의 일 측면에 따른 조성물 또는 본 발명의 다른 측면에 따른 피부 외용제 조성물은 아나필락시스 효크의 억제효과가 우수하다.

본 발명의 일 측면에 따른 조성물 또는 본 발명의 다른 측면에 따른 피부 외용제 조성물은 아토피 피부염과 관련된 혈중 IgE의 분비억제 효과가 우수하다.

본 발명의 일 측면에 따른 조성물 또는 본 발명의 다른 측면에 따른 피부 외용제 조성물은 피부병변에 대한 개선효과가 우수하다.

도 1은 지모추출물의 항아토피 또는 항알러지 효능을 나타내는 유효성분의 분리과정을 도식화한 것이다.
도 2는 지모추출물의 치사시간지연 및 히스타민 분비 억제효과 결과를 나타낸것이다.
도 3은 하이드로콜로이드 분말의 항염증 및 항알러지 효력을 나타낸 것이다.
도 4는 아토피 동물실험모델에서 천연물 나노복합-하이드로콜로이드의 IgE 분비 억제효과를 나타낸 것이다.
도 5는 아토피 동물실험모델에서 천연물 나노복합-하이드로콜로이드의 아토피 병변 개선효과를 비교하여 나타낸 것이다.

본 발명은 상기 기존 기술들의 문제점을 해결하고 더 나은 천연 생약 원료를 이용한 아토피 개선, 항알러지 등 피부 염증 관련 질환에 대한 다기능성 효능을 가지는 조성물, 일 구현예에서 상기 조성물은 나노복합-하이드로콜로이드로 제공하고자 한다. 본 발명의 일측면은 아토피, 피부알러지 또는 피부 염증의 예방, 개선 또는 치료에 효능을 가지는 지모추출물과 홍해삼추출물을 적절한 비율로 혼합한 조성물을 이용한다. 일 구현예에서 상기 조성물은 나노복합-하이드로콜로이드 (NHC; nanocomposite hydrocolloid) 분말로 제형화 될 수 있다. 상기 분말은 아토피 피부염 환자들에서 항원 (allergen)에 노출되는 경우 즉각적으로 과민 반응을 일으키는 IgE 항체의 발생을 감소시키고 아토피 병변을 개선시키는 효과를 가진다. 또한 하이드로콜로이드 제형으로 아토피 피부의 습윤 환경을 유지하는 데 도움을 주며 상처를 긁음으로서 발생하는 2차 감염을 예방할 수 있다. 본 발명의 일 구현예는 아토피, 피부 알러지 또는 피부염증의 증상 개선을 위하여 연구개발 된 것으로, 상세하게는 천연 생약 원료인 지모추출물을 주재료, 홍해삼추출물을 부재료로 사용하고 나노복합-하이드로콜로이드의 제형으로 제조한 조성물을 제공하는 것이다.

이하 본 발명에 대하여 상세히 설명한다.

본 명세서 상기 지모 추출물 및 홍해삼 추출물은 조성물의 총 건조 중량을 기준으로 지모추출물 분말, 홍해삼추출물 분말을 포함한다.

본 명세서에서 "추출물"이라 함은, 천연물로부터 그 안의 성분을 뽑아냄으로써 얻어진 물질이라면, 뽑아내는 방법이나 성분의 종류와 무관하게 모두 포함한다. 예컨대, 물이나 유기 용매를 이용하여 천연물로부터 용매에 용해되는 성분을 추출해 낸 것, 천연물의 특정 성분만을 추출하여 얻어진 것 등을 모두 포함하는 광의의 개념이다. 본 발명의 일구현예에서, 상기 유기 용매는, 특별히 제한되는 것은 아니며, 메탄올, 에탄올, 이소프로필알코올, n-프로필 알코올, n-부탄올 및 이소부탄올 등의 C1~C5의 저급 알코올, 글리세롤, 에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸 렌글리콜 등의 다가 알코올, 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 벤젠, n-헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 클로로포름 등의 탄화수소계 용매, 그리고 석유에테르, 메틸아세테이트, 벤젠, 헥산, 클로로포름, 메틸렌클로라이드, 디메틸에테르, 에틸아세테이트 등의 비극성 유기용매 등 일 수 있다.

일 구현예에서, 추출물은 물을 이용하여 추출한 추출액 일 수 있다. 또 다른 일 구현예에서, 추출물은 C₁-C₅ 알코올을 이용하여 추출한 추출액 일 수 있다. 또 다른 일 구현예에서, 추출물은 에탄올을 이용하여 추출한 추출액 일 수 있으나 이에 제한 되는 것은 아니다.

지모 (Anemarrhena asphodeloide)는 백합과 (Liliaceae)에 속하는 다년생 초본으로서 우리나라를 비롯한 온대의 각지에서 재배하며 이들의 근경을 약재로 사용해왔다. 한방에서는 해열, 당뇨, 소염, 진해, 거담 등의 목적으로 사용되고 있으며 보고된 약리학적 작용으로는 해열작용, 강심작용, 이뇨작용, 항균작용, 거담작용, 진정작용, 혈당강하작용, 항암작용 등이 있는 것으로 알려져 있으며, 그 외에도 항산화, 항염증, 미백, 보습 효과 등의 미용관련 효능 또한 보고되어 있다.

홍해삼 (Stichopus japonicus)은 돌기해삼과의 한 종으로서 아시아 일대에서 주로 양식되고 있으며, 홍해삼, 청해삼 및 흑해삼 중 홍해삼은 다른 해삼에 비해 맛과 향이 좋다. 홍해삼은 콘드로이틴, 알칼리성 칼슘, 인, 마그네슘, 요오드, 알긴산 등의 영양성분이 청해삼 보다 2배가량 높아 자양강장 효과, 항암효과, 비만 예방, 고혈압 예방, 피부면역 강화, 미백효과 등에 효과가 있다고 알려져 있다.

일 구현예에서, 상기 지모추출물은 나이아졸(Nyasol)을 추출물 전체 중량에 대하여 0.049 ±0.002%가 포함할 수 있다.

본 발명의 일측면에서, 상기 C₁-C₅ 알코올 수용액의 농도는 40% 내지 90% (v/v)인, 조성물을 제공한다. 일 구현예에서, 상기 C₁-C₅ 알코올 수용액의 농도는 40% 이상, 45% 이상, 50% 이상, 55% 이상, 60% 이상, 65% 이상, 66% 이상, 67% 이상, 68% 이상, 69% 이상, 70% 이상, 71% 이상, 72% 이상, 73% 이상, 74% 이상, 75% 이상 또는 80% 이상일 수 있다. 또한, 상기 C₁-C₅ 알코올 수용액의 농도는 90% 이하, 85% 이하, 80% 이하, 75% 이하, 74% 이하, 73% 이하, 72% 이하, 71% 이하, 70% 이하, 69% 이하, 68% 이하, 67% 이하, 65% 이하 또는 60% 이하일 수 있다.

본 발명의 일측면에서, 상기 홍해삼 추출물 100 중량부에 대하여 지모 추출물은 500 내지 1500 중량부일 수 있다. 일 구현예에서, 상기 홍해삼 추출물 100 중량부에 대하여 지모 추출물은 500 중량부 이상, 600중량부 이상, 700중량부 이상, 800중량부 이상, 850중량부 이상 또는 880중량부 이상일 수 있다. 또한, 상기 홍해삼 추출물 100 중량부에 대하여 지모 추출물은 1500중량부 이하, 1400중량부 이하, 1300중량부 이하, 1200중량부 이하, 1100중량부 이하, 1000중량부 이하, 950중량부 이하 또는 920중량부 이하일 수 있다. 상기와 같은 범위를 만족할 때, 아토피 질환, 피부 알러지 또는 피부 염증에 대한 예방, 개선 또는 치료 효과가 우수하다.

본 발명의 다른 측면은 상기 지모 추출물 및 홍해삼 추출물을 포함하는 조성물; 및 펙틴(pectin);을 포함하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.

본 발명의 다른 측면에서, 상기 지모 추출물 및 홍해삼 추출물을 포함하는 조성물은 상기 피부 외용제 조성물 전체 중량에 대하여 0.5 내지 1.5 중량%로 포함되는, 피부 외용제 조성물일 수 있다. 일 구현예에서, 상기 지모 추출물 및 홍해삼 추출물을 포함하는 조성물은 상기 피부 외용제 조성물 전체 중량에 대하여 0.6중량% 이상, 0.7중량% 이상, 0.8중량% 이상 또는 0.9중량% 이상일 수 있으며, 또한, 1.5중량% 이하, 1.4중량% 이하, 1.3중량% 이하, 1.2중량% 이하 또는 1.1중량% 이하일 수 있다.

상기 펙틴은 피부 외용제 조성물 전체 중량에 대하여 10 중량% 이상, 13중량% 이상 또는 14 중량% 이상일 수 있으며, 또한, 20중량% 이하, 17중량% 이하 또는 16중량% 이하일 수 있다. 상기 카르복시메틸셀룰로오스는 피부 외용제 조성물 전체 중량에 대하여 5 중량% 이상, 8중량% 이상 또는 9 중량% 이상일 수 있으며, 또한, 15중량% 이하, 12중량% 이하 또는 11중량% 이하일 수 있다.

일 구현예에서, 상기 조성물의 제조 방법은 하기와 같을 수 있다. 각 생약의 추출물은 세척 후 잘 건조 된 지모, 홍해삼을 준비하여 원물 대비 5 내지 10배의 중량비율의 에탄올과 혼합하고 상온에서 3회 추출하여 각각의 천연 생약재 에탄올 추출물을 제조하는 단계, 상기 각각의 천연 생약제 추출물을 여과하여 감압농축하는 단계, 상기 추출된 각각의 추출물을 혼합하여 혼합 천연 생약추출물을 제조하는 단계, 상기 혼합 천연 생약추출물을 전체중량 0.5 내지 10.0 중량 %로 하이드로콜로이드와 함께 혼합하여 이루어진 천연 생약추출물 함유 하이드로콜로이드를 제조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 할 수 있다.

일 구현예에서 상기 조성물은 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유할 수 있다. 예를 들어, 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류, 유화제 및 합성 고분자 물질 등의 첨가제를 더 포함할 수 있다. 그 외에도, 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당 및 해초 엑기스 등의 보조 성분을 더 포함할 수도 있다. 상기 성분들은 제형 또는 사용 목적에 따라서 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 그 첨가량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 선택될 수 있다. 예를 들어, 상기 성분들의 첨가량은, 조성물 전체 중량을 기준으로, 0.01-5 중량%, 보다 구체적으로는 0.01-3 중량% 범위일 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

제조예 1. 지모추출물과 홍해삼추출물 및 혼합추출물의 제조

깨끗이 세척하여 세절한 지모 200 g, 홍해삼 200 g을 용기에 넣고 상온에서 1 L의 에탄올을 이용, 교반하는 과정을 3회에 걸쳐 진행한 다음 추출물을 얻었다. 그 다음에 상온에서 필터를 한 후 원심분리 하여 잔가를 제거하였고, 감압 농축기를 이용하여 농축 후 동결건조 하여 동결건조물을 획득하였다.

또한 각각의 추출물을 9:1 (지모추추물 : 홍해삼추출물)로 조성하여 혼합추출물을 제조하였다. 이 때 지모추출물의 지표성분이자 유효성분인 Nyasol은 0.049 ±0.002%가 포함되도록 하였다.

실시예 1. 지모추출물의 분획물 제조 및 유효성분의 분석

제조예 1에서 획득한 지모추출물을 순차적으로 헥산, 디클로로메탄, 에틸아세테이트, 부탄올, 물로 분획한 다음 각각의 분획물을 수득하였다. 이후 각 분획물을 분석하여 유효성분을 분석하는데, 컬럼 크로마토그래피법과 HPLC법을 이용하고 각각의 성분들은 핵자기공명법 (NMR; nuclear magnetic resonance)을 통해 그 구조를 파악하여 그 결과를 도 1에 표기하였다.

실시예 2. 지모추출물의 치사시간 지연 및 히스타민 분비 억제효과 확인

아나필락시스 쇼크를 일으켰을 때 지모추출물의 치사시간 지연 효과를 알아보고자 다음의 시험을 실시하였다. C57BL/6 마우스 (SLC Inc.) (각 군당 10마리, 총 50마리)를 구입하여 실험동물에 복강 내 주사를 통해 아나필락시스 쇼크를 유도하였으며, 유도 1시간 전에 상기 제조예 1에서 제조한 지모추출물을 생리식염수에 희석하여 5, 25, 125 그리고 625 mg/kg (시료/실험동물 체중)이 되도록 제작한 다음 경구 투여 하였다. 그 후 비만세포 탈과립 유도 복합체 48/80를 8 mg/kg (복합체/실험동물 체중)이 되도록 제조하여 복강주사 하여 아나필락시스 쇼크를 유도하고 치사 시간을 측정하였으며 각 동물의 혈액에 방출된 혈중 히스타민은 ELISA assay kit를 이용하여 흡광도를 측정함으로써 확인하였다. 그 결과는 도2에 나타내었다.

실시예 3. 하이드로콜로이드 분말 제조 및 항염 및 항알러지 효력 확인

지모 및 홍해삼추출물의 항아토피 또는 항알러지 효능을 증진시켜줄 수 있는 제형인 하이드로콜로이드 분말을 제조하고자 하기 표 1과 같은 조성으로 하이드로콜로이드를 제작하였다.

조성	CMC	C	Agar	G	Aa	Pectin
1	10				10
2		25
3			25
4				25
5						25
6	10			15
7	10					15
8		10		15
9		10				15
10		10		10		5

C = Cellulose, G = Gelatin, Aa = Algin acid

본 제형의 발명은 친수성/소수성 고분자의 공중합체인 Poly (ethyleneglycol)-b-poly (lactic acid) (PEG-b-PLA)로 만들어진 나노입자와 소수성 그룹이 달려있는 사슬모양 고분자인 셀룰로오스 유도체를 혼합하였다. 이렇게 혼합된 나노입자와 고분자는 각각의 소수성 그룹들 간의 상호 작용에 의하여 약한 2차 결합을 느슨하게 형성하게 되며, 나노입자에 의해 잘 엮여진 고분자 가닥들은 네트워크를 이루어 하이드로겔 형태를 띠게 된다.

아토피 유발 실험동물의 상처 부위에 하이드로콜로이드 10개 종류를 도포한 다음 3-4일에 한번 씩 교체하며 20일 간 유지한 다음 희생하여 혈중 IgE와 히스타민을 측정하여 제형이 가지고 있는 기본적인 항염증과 항알러지 효력을 확인하였다. 도 3의 결과에서 알 수 있듯이 조성 번호 5, 7, 9, 10의 경우 기본적인 항염 및 항알러지 효력이 미약하게 나타났다. 특히, 습윤 환경을 조성하여 상처를 치료하는 목적의 기존 하이드로콜로이드제제와 다르게 본 발명에서는 pectin이 함유되어 기본적으로 항염 및 항알러지 효력을 가지는 조성물을 하이드로콜로이드 제제로 선택하였다.

실시예 4. 천연물추출물 하이드로콜로이드 분말의 제조

조성 번호 5, 7, 9, 10의 하이드로콜로이드 조성에 들어가는 분말 중에서 pectin 함량이 높은 7번과 9번 조성물 중 천연물추출물을 함유시킬 수 있는 CMC가 함유되어 있는 7번을 선택하였다. 하기에 천연추출물 미함유 하이드로콜로이드 조성 비율을 표 2로 작성하였다.

조성	CMC	C	Agar	G	Aa	Pectin	DW
7	10					15	100

10%의 CMC와 15%의 Pectin을 DW 100 mL의 부피에 맞추어 혼합한 다음 혼합물을 감압농축 (981hpa)을 5-6 시간동안 진행한 다음 SD (Spray drying; 분무건조) 하여 분말화 하였다.

조성 7의 조건에 천연물추출물을 다양한 조성비로 함유시켜 하이드로콜로이드를 제작하였다. 총 부피는 100 mL가 되도록 하며 DW에 CMC 10%, pectin 15%, 천연물추출물을 0.5~10%이 되도록 다양한 비율로 혼합하였는데, 물과 CMC, pectin을 물에 먼저 넣고 60°로 가열한 다음 천연추출물을 혼합하였다. 여기서 천연물추출물은 지모추출물 9 : 홍해삼추출물 1의 비율로 혼합한 것을 의미한다. 이는 하기 표 3과 같다.

DW	CMC	Pectin	천연물추출물
100	10	15	10
			5
			2
			1
			0.5

천연물추출물의 함량의 높아질수록 하이드로콜로이드의 물성이 좋지 않아졌으므로 1%의 천연물추출물을 함유하는 조성을 선정하였다. 하이드로콜로이드를 다단계로 감압하였을 때 콜로이드 표면의 전위차 값 차이로 안정성이 부여되며, 입자의 크기가 조정되므로 다단계 감압을 실시하였다 (이 때 물과의 접촉면, 콜로이드 내부의 천연물추출물의 전위차는 다단계 감압으로 조절이 가능하다).

상기 표3의 조성 중 천연물추출물 1%를 함유하는 조성물을 500 hpa로 1시간 동안 감압농축 후, 2시간 동안 750 hpa로 감압농축 한 다음 최종 단계에서 완전히 농축될 때 까지 (2~3시간 동안) 981 hpa로 농축하였다. 이후 이 농축물을 SD 방식으로 분말화하면 천연물추출물이 함유된 하이드로콜로이드 분말을 제조할 수 있다.

실시예 5. 혈중 IgE 분비 감소효능 확인

실험동물은 생후 6 주령 된 체중 20 g 내외의 수컷 NC/Nga 마우스 (라온바이오(주)) 27 (n=5, 9 그룹) / 10 (n=3, 2 그룹) 마리를 구입하여, 22 ±2℃의 온도 조건 및 50 ±5%의 습도 조건에서 명암주기 12 시간 (light/dark cycle)으로 1 주간 적응시킨 후 실험에 적용하였으며, 각 군 별로 나누어 실험을 수행하였다.

상기 실험동물들은 식사와 물은 제한 없이 자유롭게 공급하였다. 상기 제조예 1 에서 제조된 지모추출물, 홍해삼추출물과 실시예 4에서 제작된 지모추출물-하이드로콜로이드, 홍해삼추출물-하이드로콜로이드, 지모-홍해삼추출물-하이드로콜로이드를 준비하여 동물의 피부에 도포 하였다. 양성대조군으로는 Tarco를 사용하여 피부에 도포하였다. 이들 중 IgE 감소 효과를 확인하는 시험 (n=3, 9 그룹)에서는 4주 동안 지모추출물 (AE)과 홍해삼추출물(SE), 하이드로콜로이드 조성7 제형 (HC)과 여기에 각각 지모추출물 (AH), 홍해삼추출물 (SH), 지모-홍해삼추출물 (ASHM)을 혼합한 제형을 준비하여 피부에 도포하였다.

도 4에서 알 수 있는 바와 같이, AH (지모-하이드로콜로이드) 제제와 ASHM (지모-홍해삼-하이드로콜로이드) 제제 모두에서 아토피 진단 마커로 사용되고 있는 혈중 IgE의 농도를 유의성 있게 감소시키는 것을 확인하였다. 지모-하이드로콜로이드 상태에서도 유의적인 IgE 감소 효과를 확인하였으나 여기에 홍해삼이 함께 혼합된 경우 (ASHM) IgE의 감소에 시너지효과가 있음을 보여주었다.

실시예 6. 단순 혼합 천연물추출물과 천연물추출물-하이드로콜로이드 제형의 아토피 병변 개선효과 확인

아토피 병변개선효과를 확인하는 시험 (n=3, 2 그룹)에서는 지모-홍해삼추출물과 지모-홍해삼추출물-하이드로콜로이드를 20일간 도포하였다.

본 발명에서 제안하는 나노복합-하이드로콜로이드 제형기술을 접목했을 경우와, 일반적 천연화장품과 같이 두 천연소재를 단순히 혼합했을 경우, 아토피 병변 개선에 대한 효과를 비교하는 실험을 진행하였다.

도 5에서 나타난 바와 같이 총 20일 동안 두 가지 제형을 각각 도포하였는데, 처음 약 10일 도포일 전까지는 단순 혼합 천연물추출물 제형제제 (ASM)에서 효과가 우수한 듯 보였으나, 도포한지 14일 이후부터는 하이드로콜로이드가 결합된 제형제제 (ASHM)에서 우수한 아토피 피부 병변개선 효과를 보였다. 하이드로콜로이드 형태는 약물(천연물추출물의 유효성분)을 서서히 방출시켜서 효과를 나타내는 특징을 가지고 있기 때문에 ASHM의 경우에도 유효성분의 서방출형 효과가 나타나는 것으로 보여진다.

아토피 피부염은 만성적이고 재발이 쉬운 염증성 피부 질환이고, 치료적 접근이 장기적으로 이루어지고 있기 때문에 본 발명에서 제안하는 제형이 서방출형 제제로 개발되는 것은 매우 바람직하다고 볼 수 있다. 상기의 하이드로콜로이드 제형제제는 아토피 피부염 치료에 매우 유용한 제형이며, 이를 토대로 크림이나 로션 등에 적용할 수 있다. 또한 매트릭스로 제조 할 경우에는 탄성력을 향상시키기 위해 스틸렌-에틸렌-부타디엔-스틸렌공중합체를 이용할 수 있으며, 점착부여제 및 유연성부여를 위한 오일을 추가할 수 있다.

Claims

지모(Anemarrhena asphodeloide) 추출물 및 홍해삼(Stichopus japonicus) 추출물을 포함하는 혼합 추출물 0.5 내지 1.5 중량%;
펙틴 10 내지 20 중량%; 및
카르복시메틸 셀룰로오스 5 내지 15 중량%;를 포함하는 조성물로서,
상기 조성물은 하이드로겔 콜로이드 형태로 제제화된 피부 외용제 조성물인, 아토피 피부 예방, 개선 또는 치료용 조성물.
지모(Anemarrhena asphodeloide) 추출물 및 홍해삼(Stichopus japonicus) 추출물을 포함하는 혼합 추출물 0.5 내지 1.5 중량%;
펙틴 10 내지 20 중량%; 및
카르복시메틸 셀룰로오스 5 내지 15 중량%;를 포함하는 조성물로서,
상기 조성물은 하이드로겔 콜로이드 형태로 제제화된 피부 외용제 조성물인, 피부 알러지 예방, 개선 또는 치료용 조성물.
지모(Anemarrhena asphodeloide) 추출물 및 홍해삼(Stichopus japonicus) 추출물을 포함하는 혼합 추출물 0.5 내지 1.5 중량%;
펙틴 10 내지 20 중량%; 및
카르복시메틸 셀룰로오스 5 내지 15 중량%;를 포함하는 조성물로서,
상기 조성물은 하이드로겔 콜로이드 형태로 제제화된 피부 외용제 조성물인, 피부 염증의 예방, 개선 또는 치료용 조성물.
제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항의 조성물에 있어서,
상기 지모(Anemarrhena asphodeloide) 추출물 또는 홍해삼(Stichopus japonicus) 추출물은 물, C₁-C₅ 알코올 또는 C₁-C₅ 알코올 수용액을 이용하여 추출한 추출물인, 조성물.
제 4항에 있어서,
상기 C₁-C₅ 알코올은, 메탄올, 에탄올, 이소프로필알코올, n-프로필알코올, n-부탄올 및 이소부탄올로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 이용한, 조성물.
제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항의 조성물에 있어서,
상기 홍해삼 추출물 100 중량부에 대하여 지모 추출물은 500 내지 1500 중량부인, 조성물.
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