KR101951812B1 - Cosmetic composition for heavy metal chelation and particulate matter removal comprising dianthus chinensis l. extract as active ingredient - Google Patents
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Abstract
본 발명은 구맥(Dianthus chinensis L.) 추출물을 유효성분으로 함유하는 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 구맥 추출물을 함유한 조성물이 미세먼지에 의한 세포사멸 억제효과, 염증성 사이토카인 발현 억제 효과, 콜라겐 생합성 저해 억제효과, 히아루론산 분해 억제효과 및 피부손상 회복효과를 가짐으로써 트러블 현상을 억제해주는 특징을 가지는 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 의한 화장료 조성물은 구맥 추출물을 함유하여 중금속 및 미세먼지에 의해 발생하는 피부트러블을 방지하는 특징이 있다.The present invention relates to a cosmetic composition for removing heavy metals and fine dusts containing Dianthus chinensis L. extract as an active ingredient. More particularly, the present invention relates to a cosmetic composition for removing microorganisms, A collagen biosynthesis inhibiting effect, a hyaluronic acid decomposition inhibiting effect, and a skin damage recovery effect, thereby suppressing the trouble phenomenon. The cosmetic composition according to the present invention has a feature of preventing the skin trouble caused by heavy metals and fine dusts by containing the extract of Gout.
Description
본 발명은 미세먼지 및 중금속등에 의해 발생하는 피부 노화 및 피부트러블 현상을 억제해주는 특징을 가지고 있는 구맥 추출물을 함유하는 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물에 관한 것이다.TECHNICAL FIELD The present invention relates to a cosmetic composition for removing heavy metals and fine dusts containing an extract of Tofu, which is characterized by inhibiting skin aging and skin troubles caused by fine dust and heavy metals.
미세먼지는 우리 눈에 보이지 않는 아주 작은 물질로 대기 중에 오랫동안 떠다니거나 흩날려 내려오는 직경 10㎛ 이하의 입자상 물질을 의미한다. 구체적으로, 석탄, 석유 등의 화석연료가 연소될 때 또는 제조업ㆍ자동차 매연 등의 배출가스에서 나오며, 기관지를 거쳐 폐에 흡착되어 각종 폐질환을 유발하는 대기오염물질이다.Fine dust is a very small material that is invisible to the naked eye and means a particulate material with a diameter of 10 μm or less that floats or drifts in the air for a long time. Specifically, it is an air pollutant which is generated when fossil fuels such as coal and petroleum are burned, or when they come out from exhaust gas such as manufacturing / automobile exhaust gas, and are adsorbed to the lungs through the bronchi and cause various lung diseases.
먼지는 입자의 크기에 따라 총 먼지(TSP, Total Suspended Particle), 지름이 10㎛ 이하인 미세먼지(PM 10), 지름이 2.5㎛ 이하(PM 2.5)인 초미세먼지로 나뉜다. 미세먼지는 질산염(NO3 -), 암모늄(NH4 +), 황산염(SO4 2-) 등의 이온 성분과 탄소화합물(carbon compounds), 금속(elements) 화합물 등으로 이루어져 있는데 세계보건기구(WHO)는 미세먼지 중 디젤에서 배출되는 BC(black carbon)을 1급 발암물질로 지정한 바 있다. 장기간 미세먼지에 노출될 경우 면역력이 급격히 저하되어 감기, 천식, 기관지염 등의 호흡기 질환은 물론 심혈관 질환, 피부질환, 안구질환 등 각종 질병에 노출될 수 있다. 특히 직경 2.5㎛ 이하의 초미세먼지는 인체 내 기관지 및 폐 깊숙한 곳까지 침투하기 쉬워 기관지, 폐 등에 붙어 각종 질환을 유발한다(PM 2.5).Dust can be classified into total dust (TSP, total suspended particles), fine dusts with a diameter of 10 μm or less (PM 10), and ultrafine dusts with a diameter of 2.5 μm or less (PM 2.5) depending on the particle size. Fine dust is composed of ionic compounds such as nitrate (NO 3 - ), ammonium (NH 4 + ) and sulfate (SO 4 2- ), carbon compounds and elements. ) Has designated BC (black carbon) emitted from diesel in fine dust as a first-level carcinogen. When exposed to fine dust for a long period of time, the immunity is rapidly lowered, and it can be exposed to various diseases such as cardiovascular diseases, skin diseases and eye diseases as well as respiratory diseases such as colds, asthma and bronchitis. Ultrafine dusts with a diameter of less than 2.5 μm are particularly susceptible to penetration into the bronchi and deep lungs of the human body, resulting in various diseases caused by bronchial and lung diseases (PM 2.5).
황사는 중국의 고비사막과 몽골에서 주로 3월 봄철에 날아오는 모래를 말한다. 반면 세계보건기구(WHO)에서 1급 발암물질로 정한 미세먼지는 중국 상하이와 칭다오 지역의 매연과 자동차 배기가스 등이 포함된 고농도의 대기오염물질이다.Dusts are sand in China's Gobi Desert and Mongolia, mainly in spring in March. On the other hand, the fine dust classified as a first-level carcinogen by the World Health Organization (WHO) is a high concentration of air pollutants including soot and automobile exhaust gas in Shanghai and Qingdao, China.
미세먼지는 건선, 아토피성 피부염, 여드름과 같은 염증성 피부질환뿐 아니라 피부노화, 탈모, 피부암에도 영향을 미친다. 미세먼지는 모공의 크기보다 최대 20배 정도 작기 때문에 피부 내로 쉽게 침투할 수 있으며 지속적인 미세먼지의 공격은 피부장벽의 보호 기능을 상실시킴으로써 심각한 질병을 초래할 수 있다. 또한 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인의 증가와 체내 활성산소의 증가가 피부 세포에서 염증 반응, 주름 생성, 색소 침착을 증가시키며 심각하게는 피부암 발병에도 영향을 준다고 알려져 있다. 미세먼지는 단기적으로 조기 노화, 수분 부족, 색소 침착, 잔주름과 주름을 증가시키고, 장기적으로는 되돌릴 수 없는 피부 손상으로 인해 피부가 환경적 요소들로부터 몸을 보호하는 기능을 상실하면서 피부암과 같은 심각한 병을 초래할 수 있다.Fine dust affects not only inflammatory skin diseases such as psoriasis, atopic dermatitis and acne but also skin aging, hair loss and skin cancer. Fine dust can penetrate easily into the skin because it is up to 20 times smaller than the size of the pores, and persistent fine dust attack can lead to serious disease by losing protection of the skin barrier. It is also known that the increase of inflammatory cytokines and the increase of reactive oxygen species by fine dust increase inflammation reaction, wrinkle formation and pigmentation in skin cells, and seriously affect skin cancer outbreak. Fine dust can cause premature aging, moisture loss, pigmentation, wrinkles and wrinkles in the short term, loss of skin protection from environmental factors due to irreversible skin damage in the long term, It can cause illness.
한국등록특허 제10-1629706호는 진귤(Citrus sunki)과피 추출물, 고사리삼(Sceptridium ternatum 또는 Botrychium ternatum) 추출물 및 백기생(Korthalsella japonica) 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 황사 또는 미세먼지로부터 유발되는 피부 염증 완화용 조성물에 관하여 기재되어 있다. 또한, 한국공개특허 제10-2016-0108015호는 구아바, 조릿대, 울금, 백수오 및 섬오가피의 복합 식물 추출물을 유효성분으로 함유하는 중금속에 의한 피부 손상의 예방 또는 치료용 조성물에 관하여 기재되어 있다.Korean Patent No. 10-1629706 discloses a method for producing yellow dust or yellow dust containing at least one extract selected from the group consisting of Citrus sunki crustacean extract, Sceptridium ternatum or Botrychium ternatum extract and Korthalsella japonica extract as an active ingredient, The present invention relates to a composition for relieving skin inflammation caused by fine dusts. Korean Patent Laid-Open No. 10-2016-0108015 discloses a composition for preventing or treating skin damage caused by heavy metals containing as an active ingredient a complex plant extract of Guava, Sasae, Ulgum, Baeksoo, and Ishimaki .
또한, 한국 등록특허 제10-1177547호는 편축, 구맥, 해금사 및 고삼으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 식물 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 질환 예방 및 치료용 조성물에 관하여 기술되어 있고, 일본 공개특허 제2006-137742호는 Dianthus 속 식물의 추출물을 함유하는 항노화제에 대하여 기술되어 있다.Korean Patent No. 10-1177547 discloses a composition for preventing and treating skin diseases containing, as an active ingredient, one or more plant extracts selected from the group consisting of angular axis, 2006-137742 describes an anti-aging agent containing an extract of a plant of the genus Dianthus .
본 발명자들은 이제까지 알려지지 않은 여러 천연물들에 있어서 화장품으로의 응용 가능성을 연구한 결과, 구맥 추출물을 선정하고 이로부터 추출물을 제조하여 중금속 및 미세먼지 흡착효과, 미세먼지에 의한 세포사멸 억제효과, 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인 억제효과, 미세먼지에 의한 콜라겐 합성 저해 억제효과, 미세먼지에 의한 히아루론산 분해 억제효과, 피부손상 회복효과를 측정한 그 효능이 매우 우수하므로 화장품으로서의 효능을 기대할 수 있다는 것을 발견하게 되었다.The inventors of the present invention have studied the applicability of various natural products to cosmetics as far as they are unknown, and found that the extract of the extract is selected and the effect of adsorbing heavy metal and fine dust, the effect of inhibiting cell death by fine dust, , The effect of inhibiting collagen synthesis by fine dusts, the effect of inhibiting the decomposition of hyaluronic acid due to fine dust, and the effect of recovering skin damages are excellent, and thus it is possible to expect the efficacy as a cosmetic product .
본 발명의 목적은 구맥 추출물을 함유하여 중금속 및 미세먼지 흡착효과, 미세먼지에 의한 세포사멸 억제효과, 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인 억제효과, 미세먼지에 의한 콜라겐 합성 저해 억제효과, 미세먼지에 의한 히아루론산 분해 억제효과, 피부손상 회복효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는데 있다.It is an object of the present invention to provide a method for inhibiting the collagen synthesis inhibition by fine dust, a method for inhibiting collagen synthesis by fine dust, A cosmetic composition exhibiting a hyaluronic acid decomposition inhibiting effect and a skin damage recovery effect.
또한, 본 발명의 목적은 구맥 추출물의 효능을 극대화하기 위해 초임계, 초음파, 발효추출물을 제조하고 정제과정을 거쳐 효능 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는데 있다.It is also an object of the present invention to provide a cosmetic composition which exhibits an efficacy by preparing a supercritical, ultrasonic and fermented extract and purifying the extract in order to maximize the effectiveness of the extract.
본 발명은 구맥 추출물을 유효 성분으로 함유하는 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물에 관한 것이다.TECHNICAL FIELD The present invention relates to a cosmetic composition for removing heavy metals and fine dusts containing a gingko extract as an active ingredient.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 미세먼지에 의한 세포사멸 억제효과, 염증성 사이토카인 발현 억제 효과, 콜라겐 생합성 저해 억제효과, 히아루론산 분해 억제효과 또는 피부손상 회복효과를 갖는다.Preferably, the cosmetic composition has an effect of inhibiting cell death by fine dust, an inhibitory effect on inflammatory cytokine expression, an inhibitory effect on inhibition of collagen biosynthesis, an inhibitory effect on hyaluronic acid decomposition, or a skin damage recovery effect.
바람직하게는, 상기 구맥 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 0.0001 내지 30.0 중량% 함유된다.Preferably, the tofu extract is contained in an amount of 0.0001 to 30.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition.
바람직하게는, 상기 구맥 추출물은 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매를 이용한 용매 추출법으로 추출된 것이다.Preferably, the extract is selected from the group consisting of water, an anhydrous or a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, propylene glycol, butylene glycol, glycerin, acetone, ethyl acetate, chloroform, butyl acetate, diethyl ether, dichloromethane, And a solvent extraction method using an extraction solvent selected from the group consisting of a mixture of water and a solvent.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 클렌징, 오일, 분말파운데이션, 유탁액파운데이션, 왁스파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는다.Preferably, the cosmetic composition is a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, cleansing oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, pack, massage cream and spray ≪ / RTI >
본 발명의 구맥 추출물은 중금속 및 미세먼지 흡착효과(실험예 1), 미세먼지에 의한 세포사멸 억제효과(실험예 2), 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제 효과(실험예 3), 미세먼지에 의한 콜라겐 생합성 저해 억제효과(실험예 4), 미세먼지에 의한 히아루론산 분해 억제효과(실험예 5) 및 미세먼지에 의한 피부손상 회복효과(실험예 6)를 갖는다.The extract of the present invention showed the effect of inhibiting the expression of heavy metals and fine dust (Experimental Example 1), the effect of inhibiting cell death by fine dust (Experimental Example 2), the effect of inhibiting the expression of inflammatory cytokines by fine dust (Experimental Example 3) (Experimental Example 4), a hyaluronic acid decomposition inhibitory effect (Experimental Example 5) by micro dust, and a skin damaging effect (Experimental Example 6) by fine dust.
도 1은 본 발명에 따른 제조예 1에 의해 합성된 히알루론산의 양을 나타내는 그래프이다.1 is a graph showing the amount of hyaluronic acid synthesized by Production Example 1 according to the present invention.
본 발명의 화장료 조성물 중 유효 성분으로 사용되는 구맥(Dianthus chinensis L.) 추출물은 중금속 및 미세먼지에 의해 발생할 수 있는 피부 트러블을 억제해주는 기능을 부여하기 위해서 사용된다.Gumaek used as an active ingredient of the cosmetic composition of the present invention (Dianthus chinensis L. ) extracts are used to impart the function of inhibiting skin troubles that may be caused by heavy metals and fine dusts.
본 발명의 구맥(Dianthus chinensis L.)이란 여러 방향으로 무성하게 자라는 모양을 의미하는 구(瞿)와 씨앗의 모양이 보리와 비슷하여 생긴 이름이다. 석죽과의 패랭이꽃(Dianthus chinensis L) 또는 술패랭이꽃(Dianthus superbus L.)의 지상부를 말하며 냄새가 없고 맛을 쓰며 성질은 차다. 구맥은 습열로 인해 소변이 잘 나오지 않고 방광염, 요도염, 급성신우신염 등에 쓰며 어혈로 인한 월경폐색, 생리통, 월경분순 등에도 쓰며 수종, 임질과 기타 치질, 난산, 인후염 등에도 활용한다. Dianthus chinensis L. is a name derived from the shape of a seed and the shape of a seed similar to barley, which means a shape that grows in many directions. It is the top part of Dianthus chinensis L or Dianthus superbus L. It is odorless, flavorful, and natural. It is used for cystitis, urethritis, acute pyelonephritis, etc. It is also used for menstrual occlusion, menstrual cramps, menstrual cramps, and other diseases. It is also used for gingiva, gonorrhea, dysentery, and sore throat.
약리작용으로 이뇨작용, 장관 흥분작용, 심장억제작용, 혈압하강작용, 간디스토마억제작용 등이 보고되었다.Diuretic action, intestinal excitatory action, cardiac inhibitory action, blood pressure lowering action, and inhibition of liver dyspnoea have been reported as pharmacological actions.
생김새는 줄기가 선상이고, 군데군데 약간 융기한 마디에 선상 피침형의 잎이 마주나며 여기에 가지가 분지되어 있다. 바깥면은 황록색이나 엷은 녹색이며 털이 없다. 줄기와 가지 끝에 꽃 또는 삭과가 있다. 꽃받침은 원통형이며 끝은 5갈래로 갈라지고 황록색이며 그 위쪽에 열매가 붙어 있다. 씨는 갈색을 띤다. 다른 이름으로 거구맥(巨句麥), 거맥(麥), 구맥수(瞿麥穗), 남천축초(南天竺草), 대국(大菊), 대란(大蘭), 맥구강(麥句姜), 산구맥(山瞿麥), 석죽(石竹) 등이 있다.Its appearance is stalked, and there are branches with slightly elevated nodes, and the branches of the lanceolate are opposite to each other. Branches are branched here. Outer surface is yellowish green or light green with no hair. There is a flower or a stem at the end of the stem and branch. Calyx is cylindrical and its tip is divided into 5 branches, yellowish green, with its fruit on top. The seeds are brown. Other names include giant mackerel, mackerel, mackerel, southern sheepskins, large chrysanthemums, large orchids, mackerel, , Mountain beetle, and stone bamboo.
본 발명의 구맥 추출물은 패랭이꽃의 지상부(예: 꽃, 줄기, 가지 등)으로부터 얻은 것을 의미하고 바람직하게는 줄기 또는 가지로부터 얻은 것을 의미한다.The gut extract of the present invention is obtained from the ground part (for example, flowers, stems, branches, etc.) of the phlox, and preferably means from stem or branch.
본 발명에 있어서, 중금속 및 미세먼지 차단을 위한 식물의 추출물은 식물의 다양한 기관 또는 부분(예: 잎, 가지, 꽃, 뿌리, 줄기, 열매 등)으로부터 추출하여 얻은 것을 의미하고, 바람직하게는 줄기 또는 가지로부터 얻은 추출물을 의미한다.In the present invention, the extract of a plant for blocking heavy metals and fine dusts is obtained by extracting from various organs or parts (e.g., leaves, branches, flowers, roots, stems, fruits, etc.) of a plant, Or an extract from a branch.
본 발명에 있어서, 구맥 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라서, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건 하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있으나, 바람직하게는 (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 디에틸에테르, 에틸 아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 이용한 용매 추출법을 이용하여 추출한다.In the present invention, the gut extract can be produced by using a conventional solvent according to a conventional method known in the art, that is, under the conditions of ordinary temperature and pressure, but preferably (a) water, Propanol and butanol), propylene glycol, 1,3-butylene glycol, glycerin, acetone, diethyl ether, ethyl acetate, butyl acetate, dichloromethane (such as methanol, ethanol, , Chloroform, hexane, and a mixture thereof.
본 발명에서는 바람직하게는 추출용매를 이용한 용매 추출법을 이용하였다. 바람직하게는 에탄올, 70%(v/v) 에탄올 또는 물을 사용하여 얻어진 것이고, 가장 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올을 사용하여 얻어진 것이다.In the present invention, a solvent extraction method using an extraction solvent is preferably used. Preferably ethanol, 70% (v / v) ethanol or water, and most preferably 70% (v / v) ethanol.
한편, 본 발명의 구맥 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.On the other hand, it is obvious to those skilled in the art that the extract of the extract of the present invention having substantially the same effect can be obtained not only by the above-mentioned extraction solvent but also by using other extraction solvent.
본 발명에 따른 구맥 추출물은 발효과정을 거친 추출물도 포함하는데, 천연식물의 발효추출물은 다음과 같이 제조할 수 있다. 천연식물의 추출물을 100~500메쉬 정도로 미세하게 파쇄한 다음 통상적인 미생물 배양액을 1~50g/L를 첨가하고 효모균주 또는 유산균등의 미생물을 10,000~100,000 cfu/L의 양으로 첨가한다. 배양온도는 30~37℃의 통상적인 미생물 배양조건으로 배양한다. pH는 5~7로 호기적 또는 통상 혐기(anaerobic)적인 조건으로 약 5 내지 10일간 배양한다. 이후 숙성 및 여과를 통해 얻을 수 있다.The tofu extract according to the present invention includes an extract obtained through fermentation, and a fermented extract of a natural plant can be prepared as follows. The natural plant extract is finely crushed to a size of about 100 to 500 mesh, then 1 to 50 g / L of a conventional microorganism culture solution is added, and microorganisms such as yeast strains or lactic acid bacteria are added in an amount of 10,000 to 100,000 cfu / L. The culture temperature is 30 to 37 ° C. The pH is 5 to 7 and aerobic or anaerobic conditions are maintained for about 5 to 10 days. Which can be obtained through aging and filtration.
본 발명에 따르면, 상기 구맥 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.0001 내지 30.0 중량% 함유되며, 더욱 바람직하게는, 상기 구맥 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.01 내지 10 중량% 함유되는 것을 특징으로 한다. 상기 추출물의 함량이 0.0001 중량% 미만인 경우에는 피부 개선 효과가 나타나지 않으며, 30.0 중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 피부 개선 효과 증대 정도가 미미하며, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있으며 경제적이지도 못하다.According to the present invention, the tofu extract is contained in an amount of 0.0001 to 30.0 wt% based on the total weight of the cosmetic composition, and more preferably, the tofu extract is contained in an amount of 0.01 to 10 wt% do. When the content of the extract is less than 0.0001% by weight, the effect of improving the skin is not exhibited. When the content of the extract is more than 30.0% by weight, the degree of improvement of the skin against the increase of the content is insignificant, It is not even.
따라서, 이러한 다양한 기능을 가진 구맥 추출물을 포함하는 본 발명의 화장료 조성물은 중금속 및 미세먼지 제거에 효과적이다. 또한, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 중금속 및 미세먼지로 인해 발생하는 피부 염증 예방하고 피부 손상을 회복시킨다. 구체적으로 상기 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물은 우수한 중금속 및 미세먼지 흡착효과, 세포사멸 억제효과, 항염효과, 피부손상 회복효과를 통해 이루어질 수 있다.Therefore, the cosmetic composition of the present invention comprising the extract of Gouraud having various functions is effective for removing heavy metals and fine dusts. In addition, the cosmetic composition according to the present invention prevents skin inflammation caused by heavy metals and fine dusts and restores skin damage. Specifically, the cosmetic composition for removing heavy metals and fine dusts can be obtained through excellent heavy metal and fine dust adsorption effect, cell death suppression effect, anti-inflammatory effect, and skin damage recovery effect.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood by those skilled in the art that these embodiments are only for describing the present invention in more detail and that the scope of the present invention is not limited by these embodiments in accordance with the gist of the present invention .
제조예 1 : 구맥 추출물의 제조Production Example 1: Preparation of Gingko Extract
건조된 구맥(가지, 줄기 또는 잎) 1kg을 에틸 알코올과 물이 7:3(v/v)으로 혼합된 수용액에 5일 동안 침전시키고, 300메쉬에 여과한 다음, 진공 감압 농축기를 이용하여 80℃에서 농축시켰다. 이렇게 하여 얻어진 구맥 추출물을 다시 제품에 적용하기 용이하게 1,3-부틸렌 글리콜에 용해시켜 구맥 추출물을 얻었다.1 kg of dried limbs (branches, stems or leaves) was precipitated in an aqueous solution of ethyl alcohol and water mixed at 7: 3 (v / v) for 5 days, filtered through 300 mesh, ≪ / RTI > The thus-obtained extract was easily dissolved in 1,3-butylene glycol so that the extract was obtained.
실험예Experimental Example 1: 중금속 및 미세먼지 흡착효과 1: Heavy metal and fine dust adsorption effect
구맥 추출물의 중금속과 미세먼지 흡착효과를 확인하기 위해, 각각 100ppm의 납, 카드뮴, 구리, 비소, 아연 및 미세먼지(PM2.5)를 10,000ppm 농도의 제조예 1을 1시간 동안 반응시킨 뒤 필터하였다. 필터하고 남은 필터액의 잔존 중금속 및 미세먼지 함량을 원자흡수분광법(Atomic absorption spectrometry)을 통해 측정하였다. 대조군으로는 구맥 추출물 대신 정제수를 포함하는 군을 사용하였다. 흡착율은 중금속과 미세먼지 흡착후 시료의 농도를 흡착전 시료의 농도로 나눠 계산하였으며, 흡착율이 높을수록 중금속 및 미세먼지를 효과적으로 흡착하여 제거하는 것을 의미하며, 그 결과를 표 1에 나타내었다.In order to confirm the effect of heavy metal and fine dust adsorption on the extract of goopene, 100 ppm of lead, cadmium, copper, arsenic, zinc and fine dust (PM2.5) were reacted for 1 hour with 10,000 ppm concentration of Preparation Example 1, Respectively. The remaining heavy metal and fine dust content of the filter liquid remaining after filtration was measured by atomic absorption spectrometry. As a control group, a group containing purified water was used instead of the goat extract. The adsorption rate was calculated by dividing the concentration of the sample after the adsorption of the heavy metal and the fine dust by the concentration of the adsorbed sample. The higher the adsorption rate, the more effective adsorption and removal of the heavy metal and the fine dust were, and the results are shown in Table 1.
상기 표 1의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 제조예 1은 중금속 및 미세먼지 흡착효과가 우수함을 확인할 수 있다.As can be seen from the results of Table 1, Production Example 1 of the present invention shows that the effect of adsorbing heavy metals and fine dusts is excellent.
실험예 2: 미세먼지에 의한 세포사멸 억제효과Experimental Example 2: Effect of inhibiting cell death by fine dust particles
실험예 2는 제조예 1에서 수득한 추출물의 미세먼지에 의한 세포사멸을 억제하는 효과를 측정한 것이다.Experimental Example 2 is a measurement of the effect of inhibiting the cell death by the fine dust of the extract obtained in Production Example 1.
인간 피부 각질형성 세포(한국 세포주 은행, 대한민국)를 48-웰 마이크로 플레이트(Nunc, 덴마크)에 각 웰당 1×104 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지(Sigma, 미합중국)에서 37℃의 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 미세먼지(100ppm) 또는 황사와 상기 제조예 1의 추출물을 각각 500ppm을 첨가한 무혈청 DMEM 배지 및 대조군으로 미세먼지만 단독 포함된 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 동안 추가로 배양하였다. 사용된 미세먼지는 황사 또는 대기중에 떠다니는 직경 0.001㎛에 이르는 모든 입자상물질인 TSP(total suspended particle), PM2.5(Particulate matter 2.5), PM10(Particulate matter 10) 및 urban dust(Standard Reference Material® 1649b)이다. 배양 후, MTT 시약을 첨가하고 4시간 동안 배양한 후, 배양액을 제거하고 1N NaOH/이소프로판올 용액을 첨가하여 20분간 교반한 후 흡광 광도계로 565nm에서 흡광도를 측정하고 세포의 생존율을 계산하였으며, 그 결과를 표 2에 나타내었다.Human dermal keratinocytes (Korean Cell Line Bank, Korea) were inoculated into 48-well microplates (Nunc, Denmark) at a density of 1 × 10 4 cells per well and cultured in DMEM medium (Sigma, Lt; / RTI > After the culture, the cells were further cultured for 24 hours in serum-free DMEM medium supplemented with fine dust (100 ppm) or yellow powder and 500 ppm of the extract of Preparation Example 1, respectively, and serum-free DMEM medium containing only fine dust as a control. The particulate matter used is all suspended particulate matter (TSP), particulate matter 2.5,
상기 표 2의 결과에서 알 수 있듯이, 황사, TSP(total suspended particle), PM2.5(Particulate matter 2.5), PM10(Particulate matter 10) 및 urban dust에 의해 피부 각질형성세포의 세포사멸이 유발됨을 확인할 수 있었다. 발명의 제조예 1에 의해 제조된 추출물은 피부 각질형성세포에서 미세먼지에 의해 유발된 세포사멸을 억제시켜 세포생존율을 증가시킬 수 있음을 확인하였다. 본 발명의 구맥 추출물은 황사 및 미세먼지로 일어날 수 있는 피부자극을 감소시킬 수 있다.As can be seen from the results in Table 2, it was confirmed that apoptosis of skin keratinocytes was induced by yellow dust, TSP (total suspended particle), PM2.5 (Particulate matter 2.5), PM10 (Particulate matter 10) I could. It was confirmed that the extract prepared according to Preparation Example 1 of the present invention can inhibit the cell death caused by fine dusts in the keratinocyte, thereby increasing the cell survival rate. The gout extract of the present invention can reduce skin irritation that may occur with yellow sand and fine dust.
실험예 3: 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제효과Experimental Example 3: Inhibitory effect of inflammatory cytokine on fine dust
실험예 3은 제조예 1을 통하여 수득한 추출물의 미세먼지 및 중금속에 의해 발현되는 염증성 사이토카인 발현 억제 효과를 평가하기 위한 것이다. 사람의 표피 조직에서 분리한 섬유아세포(fibroblast)를 24-웰 시험 플레이트에 5×104개씩 넣고 24시간 동안 부착시켰다. 각 웰을 PBS로 1회 세척하고 각 웰에 500μl의 PBS를 넣었다. 이 섬유아세포에 미세먼지(100ppm) 또는 황사와 상기 제조예 1을 각각 500ppm을 첨가한 무혈청 DMEM 배지 및 대조군으로 미세먼지만 단독 포함된 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 상층액을 150μl을 취하여 IL-1α를 정량함으로써 구맥 추출물의 염증성 사이토카인 발현 억제 효과를 판단하였다. IL-1α의 양은 효소 면역 분석법 (Enzyme-linked immunosorbent assay)을 이용하여 정량화하였으며, 염증성 사이토카인(IL-1α)의 발현 억제율(%)은 하기 수학식 1에 의해 계산하였다.Experimental Example 3 was conducted to evaluate the inhibitory effect of the extract obtained through Preparation Example 1 on the expression of inflammatory cytokines expressed by fine dust and heavy metals. Fibroblasts isolated from human epidermal tissue were placed in a 24-well test plate at 5 × 10 4 and adhered for 24 hours. Each well was washed once with PBS and 500 占 퐇 of PBS was added to each well. The fibroblasts were further cultured in serum-free DMEM medium supplemented with fine dust (100 ppm) or yellow dust and 500 ppm of Preparation Example 1, respectively, and serum-free DMEM medium containing only fine dust for 24 hours as a control. 150 [mu] l of the culture supernatant was quantitated to determine the effect of inhibiting the expression of inflammatory cytokines in the extract of goat. The amount of IL-1α was quantitated using an enzyme-linked immunosorbent assay, and the inhibition rate (%) of inflammatory cytokine (IL-1α) was calculated by the following equation.
Bo : 자외선 조사하지 않고 시료 처리하지 않은 웰의 IL-1α 생성량Bo: IL-1? Production in wells without UV irradiation
Bt : 자외선 조사하고 시료 처리하지 않은 웰의 IL-1α 생성량 Bt: IL-1? Production in wells irradiated with ultraviolet light and not treated with sample
St : 자외선 조사하고 시료 처리한 웰의 IL-1α 생성량St: IL-1alpha production amount of well irradiated and treated with UV
표 3에 따르면, 제조예 1의 추출물은 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인인 IL-1α의 생성을 억제하는 것을 알 수 있다. 따라서 본 발명의 1의 추출물은 자외선 조사에 의한 염증 발생을 낮은 농도에서도 효과적으로 방어함을 알 수 있다.According to Table 3, it can be seen that the extract of Preparation Example 1 inhibits the production of IL-1? Which is an inflammatory cytokine caused by fine dusts. Therefore, it can be seen that the extract of the present invention 1 effectively inhibits the inflammation caused by ultraviolet irradiation even at a low concentration.
실험예 4: 미세먼지에 의한 콜라겐 생합성 저해 억제효과Experimental Example 4: Inhibitory effect of collagen biosynthesis inhibited by fine dust particles
실험예 4는 제조예 1에서 수득한 추출물의 미세먼지에 의한 콜라겐생합성 저해를 억제하는 효과를 측정하였다.In Experimental Example 4, the effect of inhibiting collagen biosynthesis inhibition by the fine dust of the extract obtained in Production Example 1 was measured.
인간 정상 상피 세포인 섬유아세포를 48-웰 마이크로 플레이트에 각 웰당 1 x 104 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 미세먼지(100ppm) 또는 황사와 상기 제조예 1의 추출물을 각각 500ppm 첨가한 무혈청 DMEM 배지 및 대조군으로 미세먼지 또는 황사만 단독 포함된 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 콜라겐 키트(Takara, 일본)를 이용하여 프로콜라겐(procollagen) 타입 I C-펩타이드(PICP) 양을 측정하여 ng/㎖ 환산하였으며, 이에 의해 합성된 콜라겐 양을 측정하였다. 콜라겐 생합성 증가율(%)은 하기 수학식 2에 따라 계산하였으며, 그 결과를 표 4에 나타내었다.Human normal epithelial cells, fibroblasts, were inoculated on a 48-well microplate at a density of 1 x 10 4 cells per well and cultured in DMEM medium for 24 hours. After the cultivation, the cells were further cultured for 24 hours in serum-free DMEM medium supplemented with fine dust (100 ppm) or yellow powder and 500 ppm of the extract of Preparation Example 1, respectively, and serum-free DMEM medium containing only dust or sand dust alone as a control. After the incubation, the supernatant of each well was collected, and the amount of procollagen type I C-peptide (PICP) was measured using a collagen kit (Takara, Japan) and converted into ng / Respectively. Collagen biosynthesis increase rate (%) was calculated according to the following formula (2), and the results are shown in Table 4.
표 4에 따르면, 본 발명의 제조예 1에 의해 제조된 추출물이 미세먼지에 의해 저하된 콜라겐 생합성을 다시 회복시키는 것을 확인할 수 있다.According to Table 4, it can be confirmed that the extract prepared according to Production Example 1 of the present invention recovers collagen biosynthesis degraded by fine dust.
실험예 5: 미세먼지에 의한 히아루론산 분해 억제 효과Experimental Example 5: Inhibitory effect of micro dust on decomposition of hyaluronic acid
상기 제조예 1의 추출물이 미세먼지에 의해 히아루론산이 분해되는 것을 억제할 수 있는지 확인하기 위해 실험예 5를 실시하였다. 사람의 섬유아세포를 10% FBS가 포함된 DMEM에 배양하여 24웰 플레이트에 2x104 cells/웰의 농도로 첨가하여 배양하였다. 24시간 후 70-80%로 자란 세포의 배지를 Serum-free DMEM로 교체하고 5시간 배양하였다. 5시간 배양 후 제조예 1의 추출물을 각각 500ppm을 처리하였다. 배양 3일 후 배지내 총 히아루론산의 양을 Hyaluronan Quantikine ELISA Kit(R&D biosystem)을 이용하여 합성된 히아루론산의 양을 측정하고, 그 결과를 도 1에 나타내었다.Experimental Example 5 was conducted to confirm that the extract of Preparation Example 1 can inhibit degradation of hyaluronic acid by fine dust. Human fibroblasts were cultured in DMEM containing 10% FBS at a concentration of 2 × 10 4 cells / well in a 24-well plate. After 24 hours, the cells grown to 70-80% were replaced with serum-free DMEM and cultured for 5 hours. After culturing for 5 hours, the extracts of Preparation Example 1 were each treated with 500 ppm. Three days after the culture, the amount of total hyaluronic acid in the medium was measured by using a Hyaluronan Quantikine ELISA kit (R & D biosystem), and the result was shown in FIG.
도 1에 따르면, 발명의 제조예 1에 의해 제조된 추출물의 미세먼지에 의한 히아루론산 분해를 억제하는 것을 확인할 수 있다. 1, it can be confirmed that the extract prepared by Production Example 1 of the present invention inhibits the decomposition of hyaluronic acid by fine dusts.
제형예 1: 미세먼지 제거용 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조Formulation Example 1: Preparation of cosmetic composition containing extract for fine dust removal
구맥 추출물을 포함하는 화장료는 제조예 1의 추출물을 포함하는 화장료(제형예 1)를 제조하였으며, 효능의 비교를 위해 추출물 대신에 세라마이드를 포함하는 화장료 조성물(비교제형예 1) 및 추출물을 포함하지 않는 화장료 조성물(비교제형예 2)을 하기 표 5와 같은 조성으로 제조하였다.A cosmetic composition containing the extract of Preparation Example 1 (Formulation Example 1) was prepared, and a cosmetic composition (Comparative Formulation Example 1) containing ceramide was used instead of the extract (Comparative Formulation Example 2) were prepared with the compositions shown in Table 5 below.
실험예Experimental Example 6: 피부손상 회복효과 6: Recovery of skin damage
TEWL(Trans-Epidermal Water Loss)은 피부를 통해 증발되는 수분(땀은 제외)을 나타내는 지표로 각질층의 손상 정도와 피부장벽 기능을 평가하는데 이용된다. 높은 수준의 TEWL은 피부장벽이 손상됐다는 것을 나타낸다. TEWL의 측정은 항온(22℃) 및 항습(47%) 상태에서 이루어졌으며 단위는 g/h/m2이다. 측정방법은 다음과 같다: 우선, 테이프-스트립핑 (tape-stripping)을 30회 실시하여 피부장벽의 손상을 유발시켰다. 피부장벽의 손상을 유발한 후 시험 제품을 도포하기 전 TEWL 수치를 Tewameter TM210 (Courage+Khazaka, 독일국)을 사용하여 측정하였다. 손상된 피부에 표 5의 제형예 1과 비교제형예 1, 2를 1일 2회씩 3일 동안 도포한 뒤 TEWL 수치의 변화를 측정하여 수학식 3에 따라 경피수분 손실의 회복도를 측정하였다. 그 결과는 표 6에 나타내었다.TEWL (Trans-Epidermal Water Loss) is an index of moisture (excluding sweat) that evaporates through the skin and is used to assess the extent of damage to the stratum corneum and skin barrier function. A high level of TEWL indicates that the skin barrier is damaged. TEWL was measured at constant temperature (22 ° C) and humidity (47%), and the unit was g / h / m 2 . The method of measurement was as follows: First, 30 times of tape-stripping was performed to cause damage to the skin barrier. TEWL levels were measured using a Tewameter TM210 (Courage + Khazaka, Germany) prior to application of the test product after causing skin barrier damage. Formulation Example 1 and Comparative Formulation Examples 1 and 2 of Table 5 were applied to damaged skin for 2 days twice a day for 3 days, and the change in TEWL value was measured to measure the degree of recovery of transdermal water loss according to Equation (3). The results are shown in Table 6.
표 6과 같이 추출물을 함유하는 제형예 1과 세라마이드를 함유하는 비교제형예 1, 유효성분을 포함하지 않는 비교제형예 2를 피부에 도포한 후 TEWL을 측정하여 피부 손상 회복 효과를 확인한 결과, 제형예 1을 함유하는 화장료 조성물이 피부손상을 빠르게 회복시키는 것을 알 수 있다.As shown in Table 6, when TEWL was measured after applying Formulation Example 1 containing extract, Comparative Formulation Example 1 containing ceramide, and Comparative Formulation Example 2 containing no active ingredient, It can be seen that the cosmetic composition containing Example 1 quickly restores skin damage.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the same is by way of illustration and example only and is not to be construed as limiting the scope of the present invention. It is therefore intended that the scope of the invention be defined by the claims appended hereto and their equivalents.
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